---
title: "\"ОФС.1.7.2.0027.15. Общая фармакопейная статья. Определение общего азота с реактивом Несслера в биологических лекарственных препаратах\""
number: "ОФС.1.7.2.0027.15"
issuer: "Министерство здравоохранения Российской Федерации"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-7-2-0027-15"
---

## "ОФС.1.7.2.0027.15. Общая фармакопейная статья. Определение общего азота с реактивом Несслера в биологических лекарственных препаратах"

# "ОФС.1.7.2.0027.15. Общая фармакопейная статья. Определение общего азота с реактивом Несслера в биологических лекарственных препаратах"

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)

("Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том II")

> [!IMPORTANT]
> В соответствии с Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749 данный документ введен в действие с 01.12.2018.
> Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте http://femb.ru/femb/pharmacopea.php по состоянию на 01.06.2021 и разделен в Информационном банке на отдельные фармакопейные статьи.


<div align="center">

<a id="p100001"></a>**МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ**

</div>


<a id="p100002"></a>ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ


| <a id="p100003"></a>Определение общего азота с реактивом Несслера в биологических лекарственных препаратах | <a id="p100004"></a>ОФС.1.7.2.0027.15 |
| --- | --- |


<a id="p100005"></a>Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения общего азота в биологических лекарственных препаратах (БЛП). Метод основан на свойстве реактива Несслера давать цветную реакцию с ионами аммония, образующимися после минерализации белковых продуктов. Для количественного определения содержания общего азота с реактивом Несслера используется колориметрический метод.

<a id="p100006"></a>Колориметрический метод

<a id="p100007"></a>В центрифужную пробирку вносят 0,5 мл испытуемого образца (A), с содержанием общего азота от 0,05 до 0,4 мг [(табл.)](#p100009), прибавляют 0,1 мл серной кислоты концентрированной и перемешивают. Пробирку закрывают стеклянным колпачком и минерализуют на песочной бане при температуре 190 - 210 °C. Одновременно в аналогичных условиях минерализуют контрольную пробу, содержащую 0,1 мл серной кислоты концентрированной. Минерализацию продолжают не менее 10 ч до обесцвечивания содержимого пробирки. Затем к минерализату прибавляют 9,9 мл воды очищенной и перемешивают.

<div align="center">

<a id="p100008"></a>Таблица

<a id="p100009"></a>Соотношение содержания общего азота в испытуемом образце<br>
и объема минерализата для колориметрирования

</div>



| <a id="p100010"></a>Содержание общего азота в испытуемом образце (A), мг/0,5 мл | <a id="p100011"></a>Объем разведенного минерализата для колориметрирования (B), мл |
| --- | --- |
| <a id="p100012"></a>0,050 - 0,200 | <a id="p100013"></a>1,0 |
| <a id="p100014"></a>0,200 - 0,400 | <a id="p100015"></a>0,5 |


<a id="p100016"></a>В химическую пробирку вносят 0,5 или 1,0 мл разведенного минерализата (B) [(табл.)](#p100009), доводят объем раствора водой до 9,5 мл, перемешивают, прибавляют 0,5 мл реактива Несслера и вновь перемешивают. Измеряют оптическую плотность испытуемого и калибровочных растворов при 400 нм в кюветах с толщиной слоя 10 мм по сравнению с контрольным раствором, приготовленным аналогичным образом из контрольной пробы.
<a id="p100017"></a>Построение калибровочного графика. В химические пробирки вносят 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5 мл стандартного раствора N 2 (содержание азота 5; 10; 15; 20; 25 мкг), доводят объем растворов водой до 9,5 мл, перемешивают и далее анализ проводят, как указано выше. Строят калибровочный график, откладывая по оси абсцисс количество мкг общего азота, а по оси ординат - среднее значение оптической плотности.
<a id="p100018"></a>Калибровочный график воспроизводится при каждом анализе.
<a id="p100019"></a>Содержание общего азота (X) в мг/мл вычисляют по формуле:

<a id="p100020"></a> $X = \frac{a \cdot 10}{A \cdot B \cdot 1000} = \frac{a}{A \cdot B \cdot 100}$ ,

<a id="p100021"></a>где: a - количество азота, рассчитанное по калибровочному графику, мкг;
<a id="p100022"></a>A - объем анализируемого образца, мл;
<a id="p100023"></a>B - объем минерализата, мл;
<a id="p100024"></a>1000 - перевод мкг в мг;
<a id="p100025"></a>10 - разведение минерализата.
<a id="p100026"></a>Содержание общего азота должно составлять от 0,1 до 0,8 мг/мл, если в фармакопейной статье или нормативной документации нет иных указаний.

<div align="center">

<a id="p100027"></a>Примечания<br>
1. <a id="p100028"></a>Основной стандартный раствор аммония сульфата 0,1 мг/мл (раствор N 1). В воде очищенной в мерной колбе вместимостью 500 мл растворяют 0,2357 г аммония сульфата, доведенного до постоянной массы в эксикаторе над безводным кальция хлоридом, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Раствор хранят при температуре 4 - 8 °C в колбе с притертой пробкой в течение 1 года.<br>
2. <a id="p100029"></a>Стандартный раствор аммония сульфата 0,05 мг/мл (раствор N 2). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мл раствора N 1, доводят объем раствора водой очищенной до метки и перемешивают. Раствор хранят при температуре 4 - 8 °C в колбе с притертой пробкой в течение 3 мес.

</div>




<a id="p100030"></a>

---