ОФС.1.7.2.0018.15. Общая фармакопейная статья. Определение нуклеиновых кислот по методу Спирина в биологических лекарственных препаратах
Актуально на 02.11.2026.
Как цитировать: "ОФС.1.7.2.0018.15. Общая фармакопейная статья. Определение нуклеиновых кислот по методу Спирина в биологических лекарственных препаратах". ОФС.1.7.2.0018.15. https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-7-2-0018-15
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том II»)
Примечание
В соответствии с Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749 данный документ введен в действие с 01.12.2018. Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте http://femb.ru/femb/pharmacopea.php по состоянию на 01.06.2021 и разделен в Информационном банке на отдельные фармакопейные статьи.
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
| Определение нуклеиновых кислот по методу Спирина в биологических лекарственных препаратах | ОФС.1.7.2.0018.15 |
|---|
Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения суммарного количества нуклеиновых кислот в биологических лекарственных препаратах (БЛП). Определение количества нуклеиновых кислот проводится спектрофотометрическим методом после проведения кислотного гидролиза.
Метод основан на измерении разности показателей оптической плотности гидролизатов БЛП в ультрафиолетовой области спектра, характеризующей содержание фосфора нуклеиновых кислот. По результатам измерения оптической плотности растворов при 270 нм (максимум поглощения нуклеиновых кислот) и 290 нм (максимум поглощения примесей) определяется содержание нуклеиновых кислот.
К 1 мл испытуемого образца прибавляют 5 мл 0,5 М раствора хлорной кислоты и перемешивают. Смесь нагревают на кипящей водяной бане в течение 20 мин. После охлаждения гидролизат центрифугируют в течение 20 мин при 2000 об/мин, отделяют осадок от надосадочной жидкости и измеряют оптическую плотность надосадочной жидкости в кювете с толщиной слоя 10 мм при 270 и 290 нм по сравнению с контрольным раствором, содержащим 1 мл воды очищенной и 5 мл 0,5 М раствора хлорной кислоты.
Содержание нуклеиновых кислот (X) в мкг/мл вычисляют по формуле:
X = \frac{A_{270} - A_{290}}{0,19} \cdot 10,3 \cdot 6 ,
где: A270 и A290 — значения оптической плотности, при соответствующих длинах волн;
0,19 — коэффициент удельной экстинкции нуклеиновых кислот (среднее значение разницы показаний оптической плотности (D270 — D290), соответствующее содержанию 1 мкг фосфора нуклеиновых кислот в 1 мл испытуемого раствора);
10,3 — коэффициент пересчета количества фосфора на нуклеиновые кислоты, мкг/мл;
6 — разведение испытуемого образца.
Метод применим при выполнении условия: показания оптической плотности при A270 и A290 не должны отличаться более чем на 15%.
Содержание нуклеиновых кислот в БЛП должно составлять от 15 до 35 мкг/мл.
Испытуемый раствор. 1 мл испытуемого образца или приготовленного, как указано в фармакопейной статье и нормативной документации.
0,5 М раствор хлорной кислоты. Раствор готовят с учетом удельного веса и процентной концентрации исходного раствора хлорной кислоты.
Приготовление 0,5 М раствора хлорной кислоты из 70% раствора. В мерную колбу вместимостью 1000 мл вносят 42,07 мл 70% раствора хлорной кислоты с удельным весом 1,664, доводят объем раствора водой очищенной до метки и перемешивают. Раствор хранят в склянке с притертой пробкой при температуре от 18 до 25 °C в течение 12 мес.