---
title: "\"ОФС.1.7.2.0005.15. Общая фармакопейная статья. Иммуногенность коклюшной суспензии и цельноклеточного коклюшного компонента комбинированных вакцин\""
number: "ОФС.1.7.2.0005.15"
issuer: "Министерство здравоохранения Российской Федерации"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-7-2-0005-15"
---

## "ОФС.1.7.2.0005.15. Общая фармакопейная статья. Иммуногенность коклюшной суспензии и цельноклеточного коклюшного компонента комбинированных вакцин"

# "ОФС.1.7.2.0005.15. Общая фармакопейная статья. Иммуногенность коклюшной суспензии и цельноклеточного коклюшного компонента комбинированных вакцин"

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)

("Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том II")

> [!IMPORTANT]
> В соответствии с Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749 данный документ введен в действие с 01.12.2018.
> Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте http://femb.ru/femb/pharmacopea.php по состоянию на 13.05.2021 и разделен в Информационном банке на отдельные фармакопейные статьи.


<a id="p100001"></a>**МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ**

<a id="p100002"></a>**ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ**


| <a id="p100003"></a>Иммуногенность коклюшной суспензии и цельноклеточного коклюшного компонента комбинированных вакцин | <a id="p100004"></a>ОФС.1.7.2.0005.15 |
| --- | --- |


<a id="p100005"></a>Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения иммуногенности коклюшной суспензии и цельноклеточного коклюшного компонента комбинированных вакцин путем сравнения с иммуногенностью референс-препарата коклюшной вакцины, откалиброванного в международных единицах (МЕ) по соответствующему международному стандартному образцу. Определение проводят на модели экспериментального менингоэнцефалита при внутримозговом введении иммунизированным мышам заражающей дозы тест-штамма Bordetella pertussis 18323 по методу Kendrick.

## <a id="p100006"></a>Материалы

<a id="p100007"></a>Животные. Здоровые мыши с массой тела (11 +/- 1) г чувствительной линии или аутбредные мыши, способные давать адекватный иммунный ответ. Используют мышей одного пола или самцов и самок, равномерно распределенных по группам. В 1 опыте различия массы тела отдельных животных не должны превышать 2 г. Перед проведением испытания за животными проводят наблюдение в течение 3 сут. При гибели более 10% мышей данную партию не используют.
<a id="p100008"></a>Референс-препараты:
- <a id="p100009"></a>стандартный образец иммуногенности коклюшной вакцины, калиброванный в МЕ по соответствующему международному стандартному образцу;
- <a id="p100010"></a>стандартный образец мутности 10 МЕ, калиброванный в международных оптических единицах (МЕ).
<a id="p100011"></a>Тест-штамм. B. pertussis 18323, хранят в лиофилизированном состоянии. Продолжительность хранения высушенного штамма не должна превышать 10 лет; биологические свойства лиофилизированного тест-штамма проверяют ежегодно.
<a id="p100012"></a>Среды. Используют среды Борде-Жангу, казеиново-угольный агар (КУА), их модификации или другие среды, адаптированные к коклюшному микробу.
<a id="p100013"></a>Среда Борде-Жангу
<a id="p100014"></a>В 1500 мл воды очищенной последовательно растворяют ингредиенты:
- <a id="p100015"></a>калий фосфорнокислый двузамещенный - 2,25 г,
- <a id="p100016"></a>калий фосфорнокислый однозамещенный - 0,75 г,
- <a id="p100017"></a>калий хлористый - 1,5 г,
- <a id="p100018"></a>магний сернокислый - 0,075 г,
- <a id="p100019"></a>натрий хлористый - 7,5 г.
<a id="p100020"></a>Полученный солевой раствор до внесения следующих ингредиентов должен иметь pH 7,4 - 7,5.
<a id="p100021"></a>Затем в солевой раствор вносят:
- <a id="p100022"></a>фильтрат картофельного отвара - 500 мл,
- <a id="p100023"></a>агар зарубежных фирм "Дифко" (США) или "Мерк" (Германия) - 60 г.
<a id="p100024"></a>Среду кипятят до полного растворения агара, устанавливают pH 7,1 - 7,2, разливают по (200 +/- 5) мл в стерильные флаконы вместимостью 500 мл и стерилизуют при температуре 110 °C в течение 30 мин. Среду Борде-Жангу хранят при температуре от 2 до 8 °C не более 3 мес.
<a id="p100025"></a>Фильтрат картофельного отвара
<a id="p100026"></a>В 1 л воды очищенной вносят 0,5 кг очищенного мелко нарезанного картофеля и нагревают до кипения. В момент закипания добавляют 40 мл глицерина и кипятят в закрытой посуде до полного разваривания картофеля в течение 1,0 - 1,5 ч. Доводят объем водой очищенной до первоначального уровня и процеживают через двухслойную марлевую салфетку. Картофельный отвар используют свежеприготовленным.
<a id="p100027"></a>Для получения среды Борде-Жангу с 30% крови содержимое флакона нагревают до температуры 50 - 55 °C, вносят 60 мл дефибринированной крови человека, перемешивают и разливают в чашки Петри. Срок хранения среды с кровью - 10 сут при температуре от 2 до 8 °C.
<a id="p100028"></a>Примечание
<a id="p100029"></a>Дефибринированную кровь получают на участках заготовки крови, где ее контролируют на отсутствие возбудителей инфекций, которые передаются при гемотрансфузиях, в соответствии с утвержденными уполномоченными органами РФ "[Инструкцией](https://bukva.ai/docs/instruktsiya-po-zagotovke-i-konservirovaniyu) по заготовке и консервированию донорской крови" и "[Инструкцией](https://bukva.ai/docs/instruktsiya-295#p100012) по проведению донорского прерывистого плазмафереза". Срок хранения крови не более 2 сут.

<a id="p100030"></a>Среда КУА (казеиново-угольный агар)
<a id="p100031"></a>На 1 л среды добавляют:
- <a id="p100032"></a>гидролизат казеина - (170 +/- 5) мл (берется из расчета, чтобы в готовой среде содержание аминного азота составляло от 150 до 160 мг%),
- <a id="p100033"></a>дрожжевой диализат - (90 +/- 10) мл,
- <a id="p100034"></a>калий фосфорнокислый однозамещенный - 0,5 г,
- <a id="p100035"></a>магний хлористый 6-водный - 0,4 г,
- <a id="p100036"></a>крахмал растворимый - 1,5 г,
- <a id="p100037"></a>кальций хлористый - 0,01 г или 1% раствор - 1 мл,
- <a id="p100038"></a>железо сернокислое 7-водное - 0,01 г или 0,5% раствор - 2 мл,
- <a id="p100039"></a>медь сернокислая 5-водная - 0,005 г или 0,2% раствор - 2 мл,
- <a id="p100040"></a>цистеин - 0,03 г или 1,5% раствор - 2 мл,
- <a id="p100041"></a>агар микробиологический - 30,0 г,
- <a id="p100042"></a>уголь активированный - 2 г.
<a id="p100043"></a>Содержание хлоридов в среде должно составлять (0,75 +/- 0,15)%, аминного азота (155 +/- 10 мг%); pH среды доводят до 7,0 - 7,1 с помощью 20% раствора натрия гидроксида.
<a id="p100044"></a>Среду разливают в матрацы по (250 +/- 10) мл, пробирки по (11 +/- 1) мл и флаконы вместимостью 500 мл по (200 +/- 5) мл, стерилизуют 30 мин при температуре 110 °C и хранят при температуре от 2 до 8 °C не более 1 мес. Для получения среды с 10% крови содержимое флакона растапливают, охлаждают до температуры 50 - 55 °C, вносят 20 мл дефибринированной крови человека и перемешивают. Срок хранения среды с кровью 10 сут при температуре от 2 до 8 °C.
<a id="p100045"></a>Гидролизат казеина:
- <a id="p100046"></a>казеин (сухой) - 2000 г,
- <a id="p100047"></a>хлористоводородная кислота концентрированная - 1000 мл,
- <a id="p100048"></a>вода очищенная - 500 мл.
<a id="p100049"></a>Степень расщепления белка - не менее 93%. Аминный азот 850 - 1000 мг%, общий азот 910 - 1080 мг%, натрия хлорид 4 - 6%. Среду стерилизуют 30 мин при температуре 110 °C. Среду используют свежеприготовленной (при добавлении 0,5% хлороформа срок хранения 1 год при температуре от 2 до 8 °C).
<a id="p100050"></a>Дрожжевой диализат:
- <a id="p100051"></a>дрожжи хлебопекарные - 1000 г,
- <a id="p100052"></a>вода очищенная - 1000 мл,
- <a id="p100053"></a>хлороформ - 4 мл.
- <a id="p100054"></a>Аминный азот - не менее 0,54 мг/мл. Срок хранения 3 мес при температуре от 2 до 8 °C.
<a id="p100055"></a>1% раствор гидролизата казеина
<a id="p100056"></a>Гидролизат казеина - 10 мл (аминный азот 8,5 - 10,0 мг/мл), натрий хлористый - 6,0 г (до концентрации хлоридов 0,6%), вода очищенная - до 1000 мл. С помощью 20% раствора натрия гидроксида pH доводят до (7,1 +/- 0,2), Среду стерилизуют 15 мин при температуре 121 °C. Срок хранения 6 мес. Каждую серию гидролизата казеина проверяют на безвредность путем внутримозгового введения 5 мышам по 0,03 мл. Животные должны оставаться живыми и здоровыми в течение 3 сут.

## <a id="p100057"></a>Метод исследования иммуногенной активности коклюшной вакцины

<a id="p100058"></a>Мышей распределяют в группы по 18 - 20 животных в каждой: по 3 группы для испытуемого и референс-препаратов. Одновременно для контроля вирулентности заражающего штамма B. pertussis 18323 (определение LD50 культуры) из этой же партии животных формируют 4 группы по 10 мышей в каждой.
<a id="p100059"></a>Необходимо соблюдать принцип случайного распределения животных по группам, случайными должны быть и расположение клеток на полках, и порядок введения разрешающей дозы.

### <a id="p100060"></a>Иммунизация мышей

<a id="p100061"></a>Готовят по 3 пятикратных разведения испытуемого и референс-препаратов. В качестве растворителя используют 0,9% раствор натрия хлорида, pH (7,1 +/- 0,2). В интервале используемых разведений каждого образца должна содержаться средняя эффективная доза ED50.
<a id="p100062"></a>В ампулу с референс-препаратом вносят стерильный растворитель из такого расчета, чтобы в 1 мл содержалась 1 МЕ (разведение I). Из разведения I делают 2 последующих пятикратных разведения по схеме [(табл. 1)](#p100064).

<a id="p100063"></a>Таблица 1

<a id="p100064"></a>*Пример* разведения референс-препарата


<table>
<colgroup><col width="13%"><col width="17%"><col width="17%"><col width="17%"><col width="17%"><col width="20%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100065"></a>Разведение</td><td rowspan="2"><a id="p100066"></a>Объем вносимого разведения I референс-препарата, мл</td><td rowspan="2"><a id="p100067"></a>Объем вносимого растворителя, мл</td><td rowspan="2"><a id="p100068"></a>Разведения референс-препарата (в 0,5 мл)</td><td colspan="2"><a id="p100069"></a>Иммунизирующая доза - 0,5 мл</td></tr>
<tr><td><a id="p100070"></a>Количество исходного референс-препарата, мл</td><td><a id="p100071"></a>Количество МЕ</td></tr>
<tr><td><a id="p100072"></a>I</td><td><a id="p100073"></a>15</td><td><a id="p100074"></a>0</td><td><a id="p100075"></a>1:60</td><td><a id="p100076"></a>0,0167</td><td><a id="p100077"></a>0,5</td></tr>
<tr><td><a id="p100078"></a>II</td><td><a id="p100079"></a>2,5</td><td><a id="p100080"></a>10,0</td><td><a id="p100081"></a>1:300</td><td><a id="p100082"></a>0,0033</td><td><a id="p100083"></a>0,1</td></tr>
<tr><td><a id="p100084"></a>III</td><td><a id="p100085"></a>0,5</td><td><a id="p100086"></a>12,0</td><td><a id="p100087"></a>1:1500</td><td><a id="p100088"></a>0,00066</td><td><a id="p100089"></a>0,02</td></tr>
</table>


<a id="p100090"></a>Образец испытуемой вакцины разводят в 14 раз (разведение I). Из разведения I делают 2 последующих пятикратных разведения по схеме [(табл. 2)](#p100092). Если полученное в опыте значение ED50 испытуемой вакцины будет больше значений использованных доз, необходимо изменить разведение I (например, 1:10). Последующие 2 разведения делают по вышеприведенной схеме.

<a id="p100091"></a>Таблица 2

<a id="p100092"></a>*Пример* разведения испытуемой вакцины


<table>
<colgroup><col width="13%"><col width="17%"><col width="17%"><col width="17%"><col width="17%"><col width="20%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100093"></a>Разведение</td><td rowspan="2"><a id="p100094"></a>Объем вносимого I разведения вакцины, мл</td><td rowspan="2"><a id="p100095"></a>Объем вносимого растворителя, мл</td><td rowspan="2"><a id="p100096"></a>Кратность разведений исходной вакцины (в 0,5 мл)</td><td colspan="2"><a id="p100097"></a>Иммунизирующая доза в объеме 0,5 мл</td></tr>
<tr><td><a id="p100098"></a>Количество исходной вакцины, мл</td><td><a id="p100099"></a>Количество МЕ (предполагаемое содержание)</td></tr>
<tr><td><a id="p100100"></a>I</td><td><a id="p100101"></a>14</td><td><a id="p100102"></a>0</td><td><a id="p100103"></a>1:28</td><td><a id="p100104"></a>0,0357</td><td><a id="p100105"></a>0,5</td></tr>
<tr><td><a id="p100106"></a>II</td><td><a id="p100107"></a>2,5</td><td><a id="p100108"></a>10,0</td><td><a id="p100109"></a>1:140</td><td><a id="p100110"></a>0,0071</td><td><a id="p100111"></a>0,1</td></tr>
<tr><td><a id="p100112"></a>III</td><td><a id="p100113"></a>0,5</td><td><a id="p100114"></a>12,0</td><td><a id="p100115"></a>1:700</td><td><a id="p100116"></a>0,00142</td><td><a id="p100117"></a>0,02</td></tr>
</table>


<a id="p100118"></a>Приготовленные разведения вакцины и референс-препарата хранят при температуре от 2 до 8 °C и используют в течение не более 4 ч.
<a id="p100119"></a>Каждой мыши в каждой группе внутрибрюшинно вводят по 0,5 мл одного из разведений испытуемой вакцины или референс-препарата. К моменту введения заражающей дозы не менее 94% иммунизированных мышей должно остаться в живых и без признаков заболевания. Если гибель животных превышает указанную величину, то опыт не подлежит учету.

### <a id="p100120"></a>Приготовление заражающей суспензии тест-штамма B. pertussis 18323

<a id="p100121"></a>Бактериальную суспензию B. pertussis 18323, используемую для заражения, готовят из 20 - 24-часовой культуры второго - третьего пассажа, выращенной на среде Борде-Жангу, с кровью человека или КУА с кровью человека или на других, адаптированных к коклюшному микробу средах.
<a id="p100122"></a>Выросшую культуру контролируют путем микроскопии мазков, окрашенных по Граму. Микробные клетки B. pertussis 18323 должны быть морфологически однородны. Посторонняя микрофлора должна отсутствовать.
<a id="p100123"></a>Готовят бактериальную суспензию микробных клеток с концентрацией, соответствующей 10 МЕ по стандартному образцу мутности (разведение 1А). Все дальнейшие разведения микробной суспензии делают в 1% растворе гидролизата казеина, содержащего 0,6% раствор натрия хлорида, pH (7,1 +/- 0,2).
<a id="p100124"></a>Полученную суспензию разводят последовательно так, чтобы получить заражающую дозу, содержащую 100000 микробных клеток (рабочая суспензия) в объеме 0,03 мл (100 - 1000 LD50). Из рабочей суспензии готовят разведения 1/10, 1/50, 1/250 и 1/1250 для определения LD50 тест-штамма и проверки жизнеспособности микробов в суспензии [(табл. 3)](#p100126).

<a id="p100125"></a>Таблица 3

<a id="p100126"></a>*Пример* разведения тест-штамма B. pertussis 18323


<table>
<colgroup><col width="16%"><col width="15%"><col width="18%"><col width="17%"><col width="17%"><col width="18%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100127"></a>Номер пробирки</td><td><a id="p100128"></a>Кратность разведения</td><td><a id="p100129"></a>Объем переносимой суспензии из предыдущей пробирки в последующую, мл</td><td><a id="p100130"></a>Объем внесенного растворителя, мл</td><td><a id="p100131"></a>Полученная суспензия содержит в 0,03 мл (эквивалентно)</td><td><a id="p100132"></a>Назначение</td></tr>
<tr><td><a id="p100133"></a>1</td><td><a id="p100134"></a>1А:3</td><td><a id="p100135"></a>1</td><td><a id="p100136"></a>2</td><td><a id="p100137"></a>100 млн</td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100138"></a>2</td><td><a id="p100139"></a>11:10</td><td><a id="p100140"></a>0,5</td><td><a id="p100141"></a>4,5</td><td><a id="p100142"></a>10 млн</td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100143"></a>3</td><td><a id="p100144"></a>12:10</td><td><a id="p100145"></a>0,5</td><td><a id="p100146"></a>4,5</td><td><a id="p100147"></a>1 млн</td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100148"></a>4</td><td><a id="p100149"></a>13:10</td><td><a id="p100150"></a>2</td><td><a id="p100151"></a>18</td><td><a id="p100152"></a>100000</td><td><a id="p100153"></a>Разливают в 3 пробирки для заражения - рабочая суспензия</td></tr>
<tr><td><a id="p100154"></a>5</td><td><a id="p100155"></a>14:10</td><td><a id="p100156"></a>0,5</td><td><a id="p100157"></a>4,5</td><td><a id="p100158"></a>10000</td><td rowspan="4"><a id="p100159"></a>Для определения LD50 штамма</td></tr>
<tr><td><a id="p100160"></a>6</td><td><a id="p100161"></a>15:5</td><td><a id="p100162"></a>1,0</td><td><a id="p100163"></a>4,0</td><td><a id="p100164"></a>2000</td></tr>
<tr><td><a id="p100165"></a>7</td><td><a id="p100166"></a>16:5</td><td><a id="p100167"></a>1,0</td><td><a id="p100168"></a>4,0</td><td><a id="p100169"></a>400</td></tr>
<tr><td><a id="p100170"></a>8</td><td><a id="p100171"></a>17:5</td><td><a id="p100172"></a>1,0</td><td><a id="p100173"></a>4,0</td><td><a id="p100174"></a>80</td></tr>
</table>


<a id="p100175"></a>Из пробирки 8 сразу после приготовления разведения делают посев по 0,1 мл на 3 чашки Петри со средой Борде-Жангу или КУА с кровью с целью подсчета количества содержащихся в ней живых клеток, выраженного в колониеобразующих единицах (КОЕ). Культуру помещают в термостат с температурой (36 +/- 0,5) °C на 3 - 4 сут. Для определения количества КОЕ в 30 мкл проводят подсчет выросших колоний на 3 чашках и полученное значение делят на 10. В 0,03 мл разведения из пробирки 8 должно быть не более 50 КОЕ.
<a id="p100176"></a>При разведении и в процессе заражения суспензию хранят в холодной водяной бане (вода со льдом). Продолжительность работы с микробной суспензией не должна превышать 2,5 ч с момента приготовления смыва культуры.
<a id="p100177"></a>Если в испытании используют высокочувствительную к коклюшным антигенам линию мышей, то заражающую дозу тест-штамма 18323 следует уменьшить до содержания 100 - 1000 LD50 в объеме 0,03 мл.

### <a id="p100178"></a>Заражение иммунизированных животных

<a id="p100179"></a>Мышам, иммунизированным испытуемой вакциной и референс-препаратом, через 14 - 17 сут интрацеребрально вводят по 0,03 мл рабочей суспензии живой культуры тест-штамма B. pertussis 18323 (пробирка 4) путем прокола лобной кости в точке, расположенной в 2 мм от средней линии и на 2 мм выше глаза. Для заражения используют туберкулиновые шприцы с ценой деления 0,01 мл, используя иглу N 27, имеющую короткий срез и муфту; длина свободного конца иглы от края муфты до среза должна составлять от 3 до 4 мм. Для определения величины LD50 разведения заражающей дозы (пробирки 5, 6, 7, 8) вводят контрольным мышам соответствующих групп интрацеребрально по 0,03 мл.
<a id="p100180"></a>Мышей, погибших в течение 3 сут после заражения, исключают из опыта (неспецифическая гибель); в каждой клетке оставляют по 16 мышей.
<a id="p100181"></a>За зараженными животными наблюдают 14 сут с ежедневной регистрацией их гибели. В день учета результатов (14-е сут) в число погибших включают также всех парализованных мышей.
<a id="p100182"></a>Вычисление величины LD50 [(табл. 4)](#p100189) культуры тест-штамма производят по формуле Кербера:

<a id="p100183"></a> $lgLD_{50} = lgD_{N} - \delta(\sum Li - 0,5)$ ,

<a id="p100184"></a>где: DN - максимальная из испытуемых доз;
<a id="p100185"></a> $\delta$ - логарифм кратности разведения (отношение большей дозы к следующей за ней меньшей дозе);
<a id="p100186"></a>Li - отношение числа животных, погибших при введении данной дозы культуры, к общему числу животных, которым эта доза была введена;
<a id="p100187"></a> $\sum Li$ - сумма значений Li, найденных для всех испытанных доз.

<a id="p100188"></a>Таблица 4

<a id="p100189"></a>*Пример* расчета величины LD50 культуры
тест-штамма B. pertussis 18323


<table>
<colgroup><col width="20%"><col width="14%"><col width="24%"><col width="16%"><col width="9%"><col width="17%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100190"></a>Доза культуры (число микробных клеток) 0,03 мл</td><td><a id="p100191"></a>Число зараженных животных</td><td><a id="p100192"></a>Число погибших (парализованных) из общего числа зараженных животных</td><td><a id="p100193"></a>Значения Li</td><td><a id="p100194"></a>LD50</td><td><a id="p100195"></a>Кол-во колоний в заражающей дозе 80 клеток</td></tr>
<tr><td><a id="p100196"></a>104</td><td><a id="p100197"></a>10</td><td><a id="p100198"></a>9/10</td><td><a id="p100199"></a>0,9</td><td rowspan="4"><a id="p100200"></a>648</td><td rowspan="4"><a id="p100201"></a>23</td></tr>
<tr><td><a id="p100202"></a>2·103</td><td><a id="p100203"></a>10</td><td><a id="p100204"></a>7/10</td><td><a id="p100205"></a>0,7</td></tr>
<tr><td><a id="p100206"></a>4·102</td><td><a id="p100207"></a>10</td><td><a id="p100208"></a>4/10</td><td><a id="p100209"></a>0,4</td></tr>
<tr><td><a id="p100210"></a>80</td><td><a id="p100211"></a>10</td><td><a id="p100212"></a>2/10</td><td><a id="p100213"></a>0,2</td></tr>
<tr><td colspan="3"></td><td><a id="p100214"></a>$\sum Li = 2,2$</td><td colspan="2"></td></tr>
</table>


<a id="p100215"></a>lg LD50 = lg 104 - lg 5·(2,2 - 0,5) = 4,0 - 0,699·1,7 = 2,8117
<a id="p100216"></a>LD50 = 648 микробных клеток.
<a id="p100217"></a>В заражающей дозе (105 микробных клеток) содержится 648 = 154 LD50

## <a id="p100218"></a>Оценка иммуногенной активности испытуемой вакцины

<a id="p100219"></a>Расчет иммуногенной активности испытуемого препарата проводят по методу Вильсона и Вустера с использованием таблиц Национального института здоровья США (для n = 16) или статистическим методом с помощью программы Probit-analysis. Для проведения расчета в таблице Вильсона-Вустера [(табл. 5)](#p100221) по вертикальной оси отмечают величину, равную сумме выживших мышей от всех 3 доз препарата (A), по горизонтальной оси - разницу между числом мышей, выживших от наибольшей и наименьшей доз, взятых в опыт (B). В месте пересечения прямых, проведенных от соответствующих величин A и B, находят ED50 (верхняя цифра) и ее стандартные отклонения, выраженные в процентах (нижние цифры). Найденное значение соответствует ED50 для средней иммунизирующей дозы, равной 100 мл. Для определения величины ED50 в опыте, найденную в [таблице](#p100221) величину ED50 делят на 100 и умножают на значение средней иммунизирующей дозы в данном опыте. Результаты опыта считают достоверными, если стандартное отклонение средней иммунизирующей дозы не ниже 64% и не выше 157% от найденного значения ED50.

<a id="p100220"></a>Таблица 5

<a id="p100221"></a>Таблица Вильсона-Вустера

<a id="p100222"></a>Приложение

<a id="p100223"></a>Таблица Вильсона-Вустера


<table>
<colgroup><col width="7%"><col width="4%"><col width="7%"><col width="7%"><col width="7%"><col width="7%"><col width="7%"><col width="7%"><col width="7%"><col width="7%"><col width="7%"><col width="7%"><col width="7%"><col width="7%"></colgroup>
<tr><td rowspan="14"><a id="p100224"></a>Общее число мышей, выживших на все 3 дозы</td><td><a id="p100225"></a>41</td><td><a id="p100226"></a><a id="p100227"></a>10,1<br>48 - 208</td><td><a id="p100228"></a><a id="p100229"></a>14,5<br>66 - 154</td><td colspan="10"></td></tr>
<tr><td><a id="p100230"></a>40</td><td><a id="p100231"></a><a id="p100232"></a>9,4<br>42 - 236</td><td><a id="p100233"></a><a id="p100234"></a>13,6<br>58 - 172</td><td><a id="p100235"></a><a id="p100236"></a>17,2<br>71 - 140</td><td colspan="9"></td></tr>
<tr><td><a id="p100237"></a>39</td><td><a id="p100238"></a><a id="p100239"></a>9,4<br>38 - 260</td><td><a id="p100240"></a><a id="p100241"></a>13,4<br>53 - 187</td><td><a id="p100242"></a><a id="p100243"></a>17,0<br>66 - 153</td><td><a id="p100244"></a><a id="p100245"></a>20,3<br>76 - 133</td><td colspan="8"></td></tr>
<tr><td><a id="p100246"></a>38</td><td><a id="p100247"></a><a id="p100248"></a>9,5<br>36 - 276</td><td><a id="p100249"></a><a id="p100250"></a>13,75<br>50 - 199</td><td><a id="p100251"></a><a id="p100252"></a>17,6<br>62 - 163</td><td><a id="p100253"></a><a id="p100254"></a>20,75<br>71 - 142</td><td><a id="p100255"></a><a id="p100256"></a>23,1<br>78 - 128</td><td colspan="7"></td></tr>
<tr><td><a id="p100257"></a>37</td><td><a id="p100258"></a><a id="p100259"></a>10,2<br>35 - 288</td><td><a id="p100260"></a><a id="p100261"></a>14,5<br>48 - 208</td><td><a id="p100262"></a><a id="p100263"></a>18,5<br>59 - 170</td><td><a id="p100264"></a><a id="p100265"></a>21,7<br>67 - 148</td><td><a id="p100266"></a><a id="p100267"></a>24,3<br>74 - 134</td><td><a id="p100268"></a><a id="p100269"></a>25,9<br>80 - 125</td><td colspan="6"></td></tr>
<tr><td><a id="p100270"></a>36</td><td><a id="p100271"></a><a id="p100272"></a>11,3<br>34 - 295</td><td><a id="p100273"></a><a id="p100274"></a>15,5<br>47 - 213</td><td><a id="p100275"></a><a id="p100276"></a>19,7<br>57 - 175</td><td><a id="p100277"></a><a id="p100278"></a>23,1<br>65 - 154</td><td><a id="p100279"></a><a id="p100280"></a>25,9<br>71 - 140</td><td><a id="p100281"></a><a id="p100282"></a>28,0<br>76 - 131</td><td><a id="p100283"></a><a id="p100284"></a>29,0<br>81 - 124</td><td colspan="5"></td></tr>
<tr><td><a id="p100285"></a>35</td><td><a id="p100286"></a><a id="p100287"></a>12,3<br>34 - 296</td><td><a id="p100288"></a><a id="p100289"></a>17,0<br>46 - 217</td><td><a id="p100290"></a><a id="p100291"></a>21,3<br>56 - 178</td><td><a id="p100292"></a><a id="p100293"></a>25,1<br>64 - 157</td><td><a id="p100294"></a><a id="p100295"></a>28,0<br>70 - 144</td><td><a id="p100296"></a><a id="p100297"></a>29,9<br>74 - 135</td><td><a id="p100298"></a><a id="p100299"></a>31,4<br>78 - 128</td><td><a id="p100300"></a><a id="p100301"></a>32,9<br>81 - 124</td><td colspan="4"></td></tr>
<tr><td><a id="p100302"></a>34</td><td><a id="p100303"></a><a id="p100304"></a>14,0<br>34 - 294</td><td><a id="p100305"></a><a id="p100306"></a>19,0<br>46 - 218</td><td><a id="p100307"></a><a id="p100308"></a>23,5<br>55 - 181</td><td><a id="p100309"></a><a id="p100310"></a>27,25<br>63 - 160</td><td><a id="p100311"></a><a id="p100312"></a>30,4<br>68 - 147</td><td><a id="p100313"></a><a id="p100314"></a>32,9<br>73 - 137</td><td><a id="p100315"></a><a id="p100316"></a>34,6<br>76 - 131</td><td><a id="p100317"></a><a id="p100318"></a>35,7<br>49 - 126</td><td><a id="p100319"></a><a id="p100320"></a>39,9<br>81 - 124</td><td colspan="3"></td></tr>
<tr><td><a id="p100321"></a>33</td><td><a id="p100322"></a><a id="p100323"></a>16,5<br>35 - 288</td><td><a id="p100324"></a><a id="p100325"></a>21,7<br>46 - 217</td><td><a id="p100326"></a><a id="p100327"></a>26,3<br>55 - 181</td><td><a id="p100328"></a><a id="p100329"></a>29,9<br>62 - 161</td><td><a id="p100330"></a><a id="p100331"></a>33,5<br>67 - 149</td><td><a id="p100332"></a><a id="p100333"></a>35,7<br>72 - 140</td><td><a id="p100334"></a><a id="p100335"></a>38,1<br>75 - 133</td><td><a id="p100336"></a><a id="p100337"></a>39,3<br>78 - 129</td><td><a id="p100338"></a><a id="p100339"></a>40,6<br>80 - 125</td><td colspan="3"></td></tr>
<tr><td><a id="p100340"></a>32</td><td><a id="p100341"></a><a id="p100342"></a>19,4<br>36 - 279</td><td><a id="p100343"></a><a id="p100344"></a>25,1<br>47 - 214</td><td><a id="p100345"></a><a id="p100346"></a>29,4<br>55 - 181</td><td><a id="p100347"></a><a id="p100348"></a>33,5<br>62 - 162</td><td><a id="p100349"></a><a id="p100350"></a>36,8<br>67 - 150</td><td><a id="p100351"></a><a id="p100352"></a>39,3<br>71, 141</td><td><a id="p100353"></a><a id="p100354"></a>41,9<br>74 - 134</td><td><a id="p100355"></a><a id="p100356"></a>43,25<br>77 - 131</td><td><a id="p100357"></a><a id="p100358"></a>44,0<br>79 - 127</td><td><a id="p100359"></a><a id="p100360"></a>47,7<br>81 - 124</td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td><a id="p100361"></a>31</td><td><a id="p100362"></a><a id="p100363"></a>23,1<br>37 - 268</td><td><a id="p100364"></a><a id="p100365"></a>29,0<br>48 - 210</td><td><a id="p100366"></a><a id="p100367"></a>34,0<br>56 - 180</td><td><a id="p100368"></a><a id="p100369"></a>38,1<br>62, 162</td><td><a id="p100370"></a><a id="p100371"></a>41,3<br>67 - 150</td><td><a id="p100372"></a><a id="p100373"></a>44,0<br>70 - 143</td><td><a id="p100374"></a><a id="p100375"></a>46,2<br>73 - 136</td><td><a id="p100376"></a><a id="p100377"></a>47,75<br>76 - 132</td><td><a id="p100378"></a><a id="p100379"></a>48,5<br>78 - 128</td><td><a id="p100380"></a><a id="p100381"></a>50,0<br>80 - 125</td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td><a id="p100382"></a>30</td><td><a id="p100383"></a><a id="p100384"></a>28,0<br>39 - 258</td><td><a id="p100385"></a><a id="p100386"></a>34,0<br>49 - 205</td><td><a id="p100387"></a><a id="p100388"></a>38,7<br>56 - 178</td><td><a id="p100389"></a><a id="p100390"></a>43,3<br>62 - 162</td><td><a id="p100391"></a><a id="p100392"></a>46,2<br>66 - 151</td><td><a id="p100393"></a><a id="p100394"></a>49,25<br>70 - 143</td><td><a id="p100395"></a><a id="p100396"></a>50,9<br>73 - 136</td><td><a id="p100397"></a><a id="p100398"></a>52,5<br>75 - 134</td><td><a id="p100399"></a><a id="p100400"></a>53,5<br>77 - 130</td><td><a id="p100401"></a><a id="p100402"></a>55,1<br>79 - 126</td><td><a id="p100403"></a><a id="p100404"></a>59,7<br>81 - 123</td><td><a id="p100405"></a><a id="p100406"></a>61,7<br>82 - 121</td></tr>
<tr><td><a id="p100407"></a>29</td><td><a id="p100408"></a><a id="p100409"></a>34,0<br>41 - 244</td><td><a id="p100410"></a><a id="p100411"></a>39,9<br>50 - 201</td><td><a id="p100412"></a><a id="p100413"></a>44,7<br>57 - 176</td><td><a id="p100414"></a><a id="p100415"></a>49,25<br>62, 161</td><td><a id="p100416"></a><a id="p100417"></a>52,5<br>66 - 151</td><td><a id="p100418"></a><a id="p100419"></a>55,1<br>70 - 144</td><td><a id="p100420"></a><a id="p100421"></a>56,9<br>72 - 139</td><td><a id="p100422"></a><a id="p100423"></a>57,8<br>75 - 134</td><td><a id="p100424"></a><a id="p100425"></a>59,7<br>77 - 130</td><td><a id="p100426"></a><a id="p100427"></a>60,7<br>79 - 126</td><td><a id="p100428"></a><a id="p100429"></a>62,75<br>81 - 123</td><td><a id="p100430"></a><a id="p100431"></a>64,8<br>82 - 121</td></tr>
<tr><td><a id="p100432"></a>28</td><td><a id="p100433"></a><a id="p100434"></a>41,9<br>43 - 233</td><td><a id="p100435"></a><a id="p100436"></a>47,7<br>50 - 196</td><td><a id="p100437"></a><a id="p100438"></a>52,5<br>57 - 174</td><td><a id="p100439"></a><a id="p100440"></a>56,0<br>62 - 161</td><td><a id="p100441"></a><a id="p100442"></a>58,8<br>66 - 151</td><td><a id="p100443"></a><a id="p100444"></a>61,7<br>70 - 144</td><td><a id="p100445"></a><a id="p100446"></a>63,7<br>72 - 139</td><td><a id="p100447"></a><a id="p100448"></a>64,8<br>75 - 134</td><td><a id="p100449"></a><a id="p100450"></a>65,8<br>77 - 131</td><td><a id="p100451"></a><a id="p100452"></a>66,9<br>79 - 137</td><td><a id="p100453"></a><a id="p100454"></a>69,1<br>81 - 123</td><td><a id="p100455"></a><a id="p100456"></a>71,3<br>82 - 121</td></tr>
<tr><td rowspan="13"></td><td><a id="p100457"></a>27</td><td><a id="p100458"></a><a id="p100459"></a>51,7<br>43 - 224</td><td><a id="p100460"></a><a id="p100461"></a>56,9<br>52 - 192</td><td><a id="p100462"></a><a id="p100463"></a>61,7<br>58 - 173</td><td><a id="p100464"></a><a id="p100465"></a>64,6<br>63 - 160</td><td><a id="p100466"></a><a id="p100467"></a>66,9<br>66 - 151</td><td><a id="p100468"></a><a id="p100469"></a>69,1<br>70 - 144</td><td><a id="p100470"></a><a id="p100471"></a>71,3<br>72 - 139</td><td><a id="p100472"></a><a id="p100473"></a>72,5<br>74 - 135</td><td><a id="p100474"></a><a id="p100475"></a>72,5<br>76 - 131</td><td><a id="p100476"></a><a id="p100477"></a>73,6<br>79 - 128</td><td><a id="p100478"></a><a id="p100479"></a>74,8<br>81 - 123</td><td><a id="p100480"></a><a id="p100481"></a>76,41<br>82 - 121</td></tr>
<tr><td><a id="p100482"></a>26</td><td><a id="p100483"></a><a id="p100484"></a>64,8<br>44 - 217</td><td><a id="p100485"></a><a id="p100486"></a>69,1<br>53 - 188</td><td><a id="p100487"></a><a id="p100488"></a>72,5<br>58 - 171</td><td><a id="p100489"></a><a id="p100490"></a>74,8<br>63 - 160</td><td><a id="p100491"></a><a id="p100492"></a>76,1<br>67 - 150</td><td><a id="p100493"></a><a id="p100494"></a>78,6<br>70 - 144</td><td><a id="p100495"></a><a id="p100496"></a>79,8<br>72 - 139</td><td><a id="p100497"></a><a id="p100498"></a>79,8<br>74 - 134</td><td><a id="p100499"></a><a id="p100500"></a>84,4<br>76 - 131</td><td><a id="p100501"></a><a id="p100502"></a>84,4<br>78 - 128</td><td><a id="p100503"></a><a id="p100504"></a>82,4<br>81 - 123</td><td><a id="p100505"></a><a id="p100506"></a>82,4<br>82 - 121</td></tr>
<tr><td><a id="p100507"></a>25</td><td><a id="p100508"></a><a id="p100509"></a>79,8<br>47 - 211</td><td><a id="p100510"></a><a id="p100511"></a>82,4<br>54 - 187</td><td><a id="p100512"></a><a id="p100513"></a>85,1<br>59 - 170</td><td><a id="p100514"></a><a id="p100515"></a>86,5<br>63 - 159</td><td><a id="p100516"></a><a id="p100517"></a>87,9<br>67 - 150</td><td><a id="p100518"></a><a id="p100519"></a>87,9<br>70 - 144</td><td><a id="p100520"></a><a id="p100521"></a>89,25<br>72 - 139</td><td><a id="p100522"></a><a id="p100523"></a>89,25<br>74 - 134</td><td><a id="p100524"></a><a id="p100525"></a>89,25<br>76 - 131</td><td><a id="p100526"></a><a id="p100527"></a>90,8<br>78 - 128</td><td><a id="p100528"></a><a id="p100529"></a>90,8<br>81 - 123</td><td><a id="p100530"></a><a id="p100531"></a>90,8<br>82 - 121</td></tr>
<tr><td><a id="p100532"></a>24</td><td><a id="p100533"></a><a id="p100534"></a>100<br>48 - 211</td><td><a id="p100535"></a><a id="p100536"></a>100<br>54 - 186</td><td><a id="p100537"></a><a id="p100538"></a>100<br>59 - 170</td><td><a id="p100539"></a><a id="p100540"></a>100<br>63 - 159</td><td><a id="p100541"></a><a id="p100542"></a>100<br>67 - 150</td><td><a id="p100543"></a><a id="p100544"></a>100<br>70 - 144</td><td><a id="p100545"></a><a id="p100546"></a>100<br>72 - 139</td><td><a id="p100547"></a><a id="p100548"></a>100<br>74 - 134</td><td><a id="p100549"></a><a id="p100550"></a>100<br>77 - 131</td><td><a id="p100551"></a><a id="p100552"></a>100<br>79 - 127</td><td><a id="p100553"></a><a id="p100554"></a>100<br>81 - 123</td><td><a id="p100555"></a><a id="p100556"></a>100<br>83 - 120</td></tr>
<tr><td><a id="p100557"></a>23</td><td><a id="p100558"></a><a id="p100559"></a>125,3<br>47 - 211</td><td><a id="p100560"></a><a id="p100561"></a>121,3<br>54 - 187</td><td><a id="p100562"></a><a id="p100563"></a>117,5<br>59 - 170</td><td><a id="p100564"></a><a id="p100565"></a>115,6<br>63 - 159</td><td><a id="p100566"></a><a id="p100567"></a>113,7<br>67 - 150</td><td><a id="p100568"></a><a id="p100569"></a>113,7<br>70 - 144</td><td><a id="p100570"></a><a id="p100571"></a>111,75<br>72 - 139</td><td><a id="p100572"></a><a id="p100573"></a>111,75<br>74 - 134</td><td><a id="p100574"></a><a id="p100575"></a>111,75<br>76 - 131</td><td><a id="p100576"></a><a id="p100577"></a>110,25<br>78 - 128</td><td><a id="p100578"></a><a id="p100579"></a>110,25<br>81 - 123</td><td><a id="p100580"></a><a id="p100581"></a>110,25<br>82 - 121</td></tr>
<tr><td><a id="p100582"></a>22</td><td><a id="p100583"></a><a id="p100584"></a>154,4<br>46 - 217</td><td><a id="p100585"></a><a id="p100586"></a>144,8<br>53 - 188</td><td><a id="p100587"></a><a id="p100588"></a>138,0<br>58 - 172</td><td><a id="p100589"></a><a id="p100590"></a>133,6<br>63 - 160</td><td><a id="p100591"></a><a id="p100592"></a>131,5<br>67 - 150</td><td><a id="p100593"></a><a id="p100594"></a>127,3<br>70 - 144</td><td><a id="p100595"></a><a id="p100596"></a>125,3<br>72 - 139</td><td><a id="p100597"></a><a id="p100598"></a>125,3<br>74 - 134</td><td><a id="p100599"></a><a id="p100600"></a>123,3<br>76 - 131</td><td><a id="p100601"></a><a id="p100602"></a>123,3<br>78 - 128</td><td><a id="p100603"></a><a id="p100604"></a>121,3<br>81 - 123</td><td><a id="p100605"></a><a id="p100606"></a>121,3<br>82 - 121</td></tr>
<tr><td><a id="p100607"></a>21</td><td><a id="p100608"></a><a id="p100609"></a>193,3<br>45, 224</td><td><a id="p100610"></a><a id="p100611"></a>175,7<br>52 - 192</td><td><a id="p100612"></a><a id="p100613"></a>162,2<br>58 - 173</td><td><a id="p100614"></a><a id="p100615"></a>154,4<br>63 - 160</td><td><a id="p100616"></a><a id="p100617"></a>149,5<br>66 - 151</td><td><a id="p100618"></a><a id="p100619"></a>144,75<br>70 - 144</td><td><a id="p100620"></a><a id="p100621"></a>140,2<br>72 - 139</td><td><a id="p100622"></a><a id="p100623"></a>138,0<br>74 - 135</td><td><a id="p100624"></a><a id="p100625"></a>138,0<br>76 - 131</td><td><a id="p100626"></a><a id="p100627"></a>135,3<br>79 - 128</td><td><a id="p100628"></a><a id="p100629"></a>133,6<br>81 - 123</td><td><a id="p100630"></a><a id="p100631"></a>131,5<br>82 - 121</td></tr>
<tr><td><a id="p100632"></a>20</td><td><a id="p100633"></a><a id="p100634"></a>238,5<br>43 - 233</td><td><a id="p100635"></a><a id="p100636"></a>209,7<br>50 - 196</td><td><a id="p100637"></a><a id="p100638"></a>190,3<br>57 - 174</td><td><a id="p100639"></a><a id="p100640"></a>178,5<br>62 - 161</td><td><a id="p100641"></a><a id="p100642"></a>170,1<br>66 - 151</td><td><a id="p100643"></a><a id="p100644"></a>162,2<br>70 - 144</td><td><a id="p100645"></a><a id="p100646"></a>157,0<br>72 - 139</td><td><a id="p100647"></a><a id="p100648"></a>154,4<br>75 - 134</td><td><a id="p100649"></a><a id="p100650"></a>152,0<br>77 - 131</td><td><a id="p100651"></a><a id="p100652"></a>149,5<br>79 - 127</td><td><a id="p100653"></a><a id="p100654"></a>144,3<br>81 - 123</td><td><a id="p100655"></a><a id="p100656"></a>140,2<br>82 - 121</td></tr>
<tr><td><a id="p100657"></a>19</td><td><a id="p100658"></a><a id="p100659"></a>294,0<br>41 - 244</td><td><a id="p100660"></a><a id="p100661"></a>250,3<br>50 - 201</td><td><a id="p100662"></a><a id="p100663"></a>223,6<br>57 - 176</td><td><a id="p100664"></a><a id="p100665"></a>203,0<br>62 - 161</td><td><a id="p100666"></a><a id="p100667"></a>190,3<br>66 - 151</td><td><a id="p100668"></a><a id="p100669"></a>181,4<br>70 - 144</td><td><a id="p100670"></a><a id="p100671"></a>175,7<br>72 - 139</td><td><a id="p100672"></a><a id="p100673"></a>172,9<br>75 - 134</td><td><a id="p100674"></a><a id="p100675"></a>167,4<br>77 - 130</td><td><a id="p100676"></a><a id="p100677"></a>164,7<br>79 - 126</td><td><a id="p100678"></a><a id="p100679"></a>159,5<br>81 - 123</td><td><a id="p100680"></a><a id="p100681"></a>154,4<br>82, 121</td></tr>
<tr><td><a id="p100682"></a>18</td><td><a id="p100683"></a><a id="p100684"></a>356,6<br>39 - 258</td><td><a id="p100685"></a><a id="p100686"></a>294,0<br>49 - 205</td><td><a id="p100687"></a><a id="p100688"></a>258,5<br>56 - 178</td><td><a id="p100689"></a><a id="p100690"></a>231,0<br>62 - 162</td><td><a id="p100691"></a><a id="p100692"></a>216,5<br>66 - 151</td><td><a id="p100693"></a><a id="p100694"></a>203,0<br>70 - 143</td><td><a id="p100695"></a><a id="p100696"></a>196,5<br>73 - 137</td><td><a id="p100697"></a><a id="p100698"></a>190,3<br>75 - 134</td><td><a id="p100699"></a><a id="p100700"></a>187,3<br>77 - 130</td><td><a id="p100701"></a><a id="p100702"></a>181,4<br>79 - 126</td><td><a id="p100703"></a><a id="p100704"></a>167,4<br>81 - 123</td><td><a id="p100705"></a><a id="p100706"></a>162,2<br>82 - 121</td></tr>
<tr><td><a id="p100707"></a>17</td><td><a id="p100708"></a><a id="p100709"></a>432,5<br>38 - 268</td><td><a id="p100710"></a><a id="p100711"></a>345,3<br>48 - 210</td><td><a id="p100712"></a><a id="p100713"></a>294,0<br>56 - 180</td><td><a id="p100714"></a><a id="p100715"></a>262,7<br>62 - 162</td><td><a id="p100716"></a><a id="p100717"></a>242,4<br>67 - 150</td><td><a id="p100718"></a><a id="p100719"></a>227,5<br>70 - 143</td><td><a id="p100720"></a><a id="p100721"></a>216,5<br>73 - 136</td><td><a id="p100722"></a><a id="p100723"></a>209,7<br>76 - 132</td><td><a id="p100724"></a><a id="p100725"></a>206,3<br>78 - 128</td><td><a id="p100726"></a><a id="p100727"></a>199,8<br>80 - 125</td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100728"></a>16</td><td><a id="p100729"></a><a id="p100730"></a>516,5<br>36 - 279</td><td><a id="p100731"></a><a id="p100732"></a>399,1<br>47 - 214</td><td><a id="p100733"></a><a id="p100734"></a>339,8<br>55 - 181</td><td><a id="p100735"></a><a id="p100736"></a>298,7<br>62 - 162</td><td><a id="p100737"></a><a id="p100738"></a>271,2<br>67 - 150</td><td><a id="p100739"></a><a id="p100740"></a>254,6<br>71 - 141</td><td><a id="p100741"></a><a id="p100742"></a>238,5<br>74 - 134</td><td><a id="p100743"></a><a id="p100744"></a>231,0<br>77 - 131</td><td><a id="p100745"></a><a id="p100746"></a>227,5<br>79 - 127</td><td><a id="p100747"></a><a id="p100748"></a>209,7<br>81 - 124</td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100749"></a>15</td><td><a id="p100750"></a><a id="p100751"></a>606,5<br>35 - 288</td><td><a id="p100752"></a><a id="p100753"></a>461,1<br>46 - 217</td><td><a id="p100754"></a><a id="p100755"></a>380,3<br>55 - 181</td><td><a id="p100756"></a><a id="p100757"></a>334,5<br>62 - 162</td><td><a id="p100758"></a><a id="p100759"></a>298,7<br>67 - 149</td><td><a id="p100760"></a><a id="p100761"></a>280,4<br>72 - 140</td><td><a id="p100762"></a><a id="p100763"></a>262,0<br>75 - 133</td><td><a id="p100764"></a><a id="p100765"></a>254,6<br>78 - 130</td><td><a id="p100766"></a><a id="p100767"></a>246,3<br>80 - 125</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td rowspan="9"></td><td><a id="p100768"></a>14</td><td><a id="p100769"></a><a id="p100770"></a>712,3<br>34 - 294</td><td><a id="p100771"></a><a id="p100772"></a>524,8<br>46 - 218</td><td><a id="p100773"></a><a id="p100774"></a>425,7<br>55 - 181</td><td><a id="p100775"></a><a id="p100776"></a>368,2<br>63 - 160</td><td><a id="p100777"></a><a id="p100778"></a>329,1<br>68 - 147</td><td><a id="p100779"></a><a id="p100780"></a>303,6<br>73 - 137</td><td><a id="p100781"></a><a id="p100782"></a>289,3<br>76 - 131</td><td><a id="p100783"></a><a id="p100784"></a>280,1<br>79 - 126</td><td><a id="p100785"></a><a id="p100786"></a>250,3<br>81 - 124</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100787"></a>13</td><td><a id="p100788"></a><a id="p100789"></a>810,4<br>34 - 296</td><td><a id="p100790"></a><a id="p100791"></a>587,4<br>46 - 217</td><td><a id="p100792"></a><a id="p100793"></a>468,8<br>56 - 178</td><td><a id="p100794"></a><a id="p100795"></a>399,25<br>64 - 157</td><td><a id="p100796"></a><a id="p100797"></a>356,6<br>70 - 144</td><td><a id="p100798"></a><a id="p100799"></a>334,5<br>74 - 135</td><td><a id="p100800"></a><a id="p100801"></a>313,75<br>78 - 128</td><td><a id="p100802"></a><a id="p100803"></a>303,6<br>81 - 124</td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100804"></a>12</td><td><a id="p100805"></a><a id="p100806"></a>908<br>34 - 295</td><td><a id="p100807"></a><a id="p100808"></a>647,6<br>47 - 213</td><td><a id="p100809"></a><a id="p100810"></a>508,6<br>57 - 175</td><td><a id="p100811"></a><a id="p100812"></a>432,6<br>65 - 154</td><td><a id="p100813"></a><a id="p100814"></a>386,5<br>71 - 140</td><td><a id="p100815"></a><a id="p100816"></a>356,6<br>76 - 131</td><td><a id="p100817"></a><a id="p100818"></a>345,3<br>81 - 124</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100819"></a>11</td><td><a id="p100820"></a><a id="p100821"></a>983<br>35 - 285</td><td><a id="p100822"></a><a id="p100823"></a>690,6<br>48 - 208</td><td><a id="p100824"></a><a id="p100825"></a>542<br>59 - 170</td><td><a id="p100826"></a><a id="p100827"></a>464,4<br>67 - 148</td><td><a id="p100828"></a><a id="p100829"></a>413,3<br>74 - 134</td><td><a id="p100830"></a><a id="p100831"></a>386,5<br>80 - 125</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100832"></a>10</td><td><a id="p100833"></a><a id="p100834"></a>1048<br>36 - 276</td><td><a id="p100835"></a><a id="p100836"></a>727,3<br>50 - 199</td><td><a id="p100837"></a><a id="p100838"></a>568,75<br>62 - 163</td><td><a id="p100839"></a><a id="p100840"></a>484,2<br>71 - 142</td><td><a id="p100841"></a><a id="p100842"></a>432,6<br>78 - 128</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100843"></a>9</td><td><a id="p100844"></a><a id="p100845"></a>1065<br>38 - 260</td><td><a id="p100846"></a><a id="p100847"></a>747,9<br>53 - 187</td><td><a id="p100848"></a><a id="p100849"></a>567,4<br>66 - 153</td><td><a id="p100850"></a><a id="p100851"></a>492<br>76 - 133</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100852"></a>8</td><td><a id="p100853"></a><a id="p100854"></a>1065<br>42 - 236</td><td><a id="p100855"></a><a id="p100856"></a>736,6<br>58 - 172</td><td><a id="p100857"></a><a id="p100858"></a>578<br>71 - 140</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100859"></a>7</td><td><a id="p100860"></a><a id="p100861"></a>999,25<br>48 - 208</td><td><a id="p100862"></a><a id="p100863"></a>691,25<br>68 - 153</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100864"></a>6</td><td><a id="p100865"></a><a id="p100866"></a>678,5<br>57 - 176</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td></td><td></td><td><a id="p100867"></a>5</td><td><a id="p100868"></a>6</td><td><a id="p100869"></a>7</td><td><a id="p100870"></a>8</td><td><a id="p100871"></a>9</td><td><a id="p100872"></a>10</td><td><a id="p100873"></a>11</td><td><a id="p100874"></a>12</td><td><a id="p100875"></a>13</td><td><a id="p100876"></a>14</td><td><a id="p100877"></a>15</td><td><a id="p100878"></a>16</td></tr>
<tr><td></td><td></td><td colspan="12"><a id="p100879"></a>Разница выживших от наибольшей и от наименьшей дозы</td></tr>
</table>


<a id="p100880"></a>Примеры расчета количества МЕ в 1 мл по методу Вильсона и Вустера приведены в [табл. 6](#p100882).

<a id="p100881"></a>Таблица 6

<a id="p100882"></a>*Пример* расчета иммуногенной активности вакцины


<table>
<colgroup><col width="14%"><col width="12%"><col width="15%"><col width="15%"><col width="16%"><col width="14%"><col width="14%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100883"></a>Препарат</td><td colspan="3"><a id="p100884"></a>Доза препарата в 0,5 мл</td><td rowspan="2"><a id="p100885"></a>Количество выживших мышей/общее число зараженных в группе</td><td rowspan="2"><a id="p100886"></a>Величины A/B и ED50 по <a href="#p100221">таблице</a></td><td rowspan="2"><a id="p100887"></a>ED50 (стандартные отклонения в опыте)</td></tr>
<tr><td><a id="p100888"></a>Разведение</td><td><a id="p100889"></a>Количество исходного препарата, мл</td><td><a id="p100890"></a>Количество МЕ в иммунизирующей дозе</td></tr>
<tr><td rowspan="3"><a id="p100891"></a>Референс-препарат</td><td><a id="p100892"></a>1:60</td><td><a id="p100893"></a>0,0167</td><td><a id="p100894"></a>0,5</td><td><a id="p100895"></a>14/16</td><td rowspan="3"><a id="p100896"></a><a id="p100897"></a><a id="p100898"></a>27/11<br>71,3<br>72 - 139</td><td rowspan="3"><a id="p100899"></a><a id="p100900"></a>0,0023<br>(0,00327 - 0,00169)</td></tr>
<tr><td><a id="p100901"></a>1:300</td><td><a id="p100902"></a>0,0033</td><td><a id="p100903"></a>0,1</td><td><a id="p100904"></a>10/16</td></tr>
<tr><td><a id="p100905"></a>1:1500</td><td><a id="p100906"></a>0,00066</td><td><a id="p100907"></a>0,02</td><td><a id="p100908"></a>3/16</td></tr>
<tr><td rowspan="3"><a id="p100909"></a>Вакцина</td><td><a id="p100910"></a>1:28</td><td><a id="p100911"></a>0,0357</td><td></td><td><a id="p100912"></a>13/16</td><td rowspan="3"><a id="p100913"></a><a id="p100914"></a><a id="p100915"></a>23/11<br>111,75<br>72 - 139</td><td rowspan="3"><a id="p100916"></a><a id="p100917"></a>0,0079<br>(0,011 - 0,0057)</td></tr>
<tr><td><a id="p100918"></a>1:140</td><td><a id="p100919"></a>0,0071</td><td></td><td><a id="p100920"></a>8/16</td></tr>
<tr><td><a id="p100921"></a>1:700</td><td><a id="p100922"></a>0,00142</td><td></td><td><a id="p100923"></a>2/16</td></tr>
</table>


<a id="p100924"></a>Средняя иммунизирующая доза референс-препарата, выраженная в мл (0,0033 мл), содержит 0,1 МЕ [(табл. 6)](#p100882). При определении ED50 референс-препарата используют значение средней иммунизирующей дозы, выраженное в МЕ.

<a id="p100925"></a> $ED_{50}\text{референс} = \frac{71,3 \cdot 0,1}{100} = 0,0713\text{МЕ}$ ,

<a id="p100926"></a> $ED_{50}\text{макс}. = \frac{0,0713 \cdot 139}{100} = 0,0991\text{МЕ}$ ,

<a id="p100927"></a> $ED_{50}\text{мин} = \frac{0,0713 \cdot 72}{100} = 0,0513\text{МЕ}$ ,

<a id="p100928"></a> $ED_{50}\text{вакцины } = \frac{111,75 \cdot 0,0071}{100} = 0,0079\text{мл}$ ,

<a id="p100929"></a> $ED_{50}\text{макс}. = \frac{0,0079 \cdot 139}{100} = 0,011\text{мл}$ ,

<a id="p100930"></a> $ED_{50}\text{мин} = \frac{0,0079 \cdot 72}{100} = 0,0057\text{мл}$ .

<a id="p100931"></a>Количество МЕ в 1 мл вакцины определяют по формуле:

<a id="p100932"></a> $X = \frac{ED_{50}\text{референс}}{ED_{50}\text{вакцины}}$ ,

<a id="p100933"></a> $X = \frac{0,0713}{0,0079} = 9,0\text{МЕ}/\text{мл}$ .

<a id="p100934"></a>Доверительный интервал значения иммуногенности (МЕ/мл) препарата рассчитывают по формулам:

<a id="p100935"></a> $R_{\text{мин}} = \frac{R}{K}$ ;

<a id="p100936"></a>Rмакс = R·K,

<a id="p100937"></a>где R - количество МЕ в 1 мл препарата;
<a id="p100938"></a>Rмин - нижний предел доверительного интервала;
<a id="p100939"></a>Rмакс - верхний предел доверительного интервала;
<a id="p100940"></a>K - доверительный коэффициент.

<a id="p100941"></a> $K = \text{анти}lg \sqrt{(S_{1}^{2} + S_{2}^{2})}$ ,

<a id="p100942"></a>где S1 = (lg ED50)макс. - lg ED50 для более иммуногенного препарата при избранном уровне существенности различия - 95 или 99%;
<a id="p100943"></a>S2 = lg ED50 - (lg ED50)мин. для менее иммуногенного препарата.
<a id="p100944"></a>Для примера:
<a id="p100945"></a> ![формула](https://i.bukva.ai/pWA0qurM/img_0.png) 
<a id="p100946"></a>K = 1,6
<a id="p100947"></a>Отсюда:

<a id="p100948"></a> $R_{\text{мин}} = \frac{R}{K} ;\text{т}.\text{е}. \frac{9,0\text{МЕ}}{1,6} = 5,6\text{МЕ}$ 

<a id="p100949"></a>Rмакс = R·K; т.е. 9,0 МЕ·1,6 = 14,4 МЕ

<a id="p100950"></a>Таким образом, в 1 мл вакцины содержится 9,0 МЕ с доверительным интервалом от 5,6 до 14,4 МЕ.
<a id="p100951"></a>Если в первом опыте активность препарата не соответствует установленным требованиям, опыт повторяют. В этом случае при вычислении количества МЕ в 1,0 мл препарата учитывают результаты всех достоверных опытов (не более 3). Используют расчет средней геометрической (Xгеом.) величины значения по формуле:

<a id="p100952"></a> $\text{Хгеом}. = \sqrt[n]{\text{П}_{\text{х}}}$ ,

<a id="p100953"></a>где Пx - произведение усредняемых величин;
<a id="p100954"></a>n - число определений.
<a id="p100955"></a>Критерии достоверности теста:
- <a id="p100956"></a>ED50 референс-препарата и испытуемой вакцины лежит в интервале между наибольшей и наименьшей иммунизирующими дозами;
- <a id="p100957"></a>LD50 не превышает 1000 микробных клеток;
- <a id="p100958"></a>заражающая доза микробных клеток содержит не менее 100 и не более 1000 LD50;
- <a id="p100959"></a>в 0,03 мл разведения из пробирки 8 содержится не более 50 КОЕ.



<a id="p100960"></a>

---