---
title: "\"ОФС.1.7.1.0017.18. Общая фармакопейная статья. Генно-инженерные препараты инсулина человека\""
number: "ОФС.1.7.1.0017.18"
issuer: "Министерство здравоохранения Российской Федерации"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-7-1-0017-18"
---

## "ОФС.1.7.1.0017.18. Общая фармакопейная статья. Генно-инженерные препараты инсулина человека"

# "ОФС.1.7.1.0017.18. Общая фармакопейная статья. Генно-инженерные препараты инсулина человека"

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)

("Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том II")

> [!IMPORTANT]
> В соответствии с Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749 данный документ введен в действие с 01.12.2018.
> Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте http://femb.ru/femb/pharmacopea.php по состоянию на 13.05.2021 и разделен в Информационном банке на отдельные фармакопейные статьи.


<a id="p100001"></a>МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

<div align="center">

<a id="p100002"></a>**ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ**

</div>



| <a id="p100003"></a>Генно-инженерные препараты инсулина человека | <a id="p100004"></a><a id="p100005"></a>ОФС.1.7.1.0017.18<br>Вводится впервые |
| --- | --- |


<a id="p100006"></a>Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на генно-инженерные препараты инсулина человека, полученные с использованием технологии рекомбинантной ДНК из генетически стабильных и безопасных микроорганизмов.
<a id="p100007"></a>Требования, изложенные в настоящей общей фармакопейной статье, не распространяются на бычий инсулин, свиной инсулин и инсулин полусинтетический.
<a id="p100008"></a>Инсулин представляет собой двухцепочечный пептид, имеющий структуру антидиабетического гормона, вырабатываемого поджелудочной железой человека.
<a id="p100009"></a>Требования на генно-инженерные препараты инсулина человека, могут быть дополнены с учетом специфических свойств лекарственного средства и технологии его производства.


## <a id="p100010"></a>ПРОИЗВОДСТВО


<a id="p100011"></a>Производство инсулина осуществляется с применением технологии рекомбинантной ДНК и должно проводиться в условиях соблюдения правил надлежащей производственной практики и в соответствии с требованиями, изложенными в [ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-7-1-0007-15) "Лекарственные средства, получаемые методами рекомбинантных ДНК".
<a id="p100012"></a>В качестве клеток-хозяина для создания штамма-продуцента используются бактерии (Escherichia coli) или грибы (Saccharomyces cerevisiae или Pichia pastoris). Производство основано на системе банков клеток-продуцентов - Главного банка клеток (ГБК) и Рабочего банка клеток (РБК).
<a id="p100013"></a>Схема производственного процесса генно-инженерных препаратов инсулина, как правило, включает:
1. <a id="p100014"></a>Получение посевного материала штамма-продуцента.
2. <a id="p100015"></a>Биосинтез рекомбинантного белка (РБ) (препроинсулина):
- <a id="p100016"></a>ферментация (культивирование продуцента);
- <a id="p100017"></a>сепарирование (получение биомассы);
- <a id="p100018"></a>дезинтеграция клеточной суспензии;
- <a id="p100019"></a>центрифугирование (выделение и отмывка телец включения).
3. <a id="p100020"></a>Выделение и очистка РБ (препроинсулина).
4. <a id="p100021"></a>Солюбилизация телец включения и восстановление (денатурация) РБ:
- <a id="p100022"></a>ренатурация (рефолдинг) РБ;
- <a id="p100023"></a>хроматографическая очистка проинсулина.
5. <a id="p100024"></a>Ферментативное расщепление проинсулина.
6. <a id="p100025"></a>Ступени очистки инсулина, каждая из которых включает несколько стадий очистки, например:
- <a id="p100026"></a>хроматографическая очистка инсулина 1
- <a id="p100027"></a>хроматографическая очистка инсулина 2
- <a id="p100028"></a>хроматографическая очистка инсулина 3
7. <a id="p100029"></a>Получение кристаллического инсулина:
- <a id="p100030"></a>кристаллизация и отмывка;
- <a id="p100031"></a>высушивание.
8. <a id="p100032"></a>Получение лекарственной формы.
<a id="p100033"></a>Все этапы процесса производства должны быть валидированы, в том числе, эффективность каждого этапа очистки в отношении удаления и/или инактивации посторонних агентов и примесей, источником которых могут быть штамм-продуцент (ДНК), примеси, связанные с процессом производства, например, гетерологичных белков (иммуногенные примеси, компоненты питательных сред, иммуносорбенты для афинной хроматографии и пр.). На всех этапах производства должно контролироваться качество всех полупродуктов и продуктов в соответствии с установленными требованиями или спецификациями.
<a id="p100034"></a>Экспрессирующая конструкция, штамм-продуцент, производство лекарственного средства, включая банки штаммов-продуцентов, должны быть, охарактеризованы в объеме и в соответствии с требованиями, изложенными в [ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-7-1-0007-15) "Лекарственные средства, получаемые методами рекомбинантных ДНК".
<a id="p100035"></a>При изменениях производственного процесса, представляются доказательства сопоставимости продуктов до и после внесения изменений. Изменения не должны оказывать влияние на качество инсулина и/или стабильность и воспроизводимость процесса производства.


## <a id="p100036"></a>ИСПЫТАНИЯ



### <a id="p100037"></a>ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ СУБСТАНЦИЯ


<a id="p100038"></a>Требования к испытаниям фармацевтических субстанций инсулина регламентируются нижеприведенными показателями, а также требованиями [ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-7-1-0007-15) "Лекарственные средства, получаемые методами рекомбинантных ДНК".
<a id="p100039"></a>Описание. Белый или почти белый порошок. Определение проводят визуально.
<a id="p100040"></a>Подлинность. Подлинность подтверждается методом ВЭЖХ с использованием стандартного образца (пептидным картированием, идентификацией основного вещества), а также определением биоидентичности.
<a id="p100041"></a>Испытания проводят в соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-2-1-2-0005-15) "Высокоэффективная жидкостная хроматография" и ОФС "Пептидное картирование", [ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-2-4-0001-15) "Биологическое испытание инсулина".
<a id="p100042"></a>Методики должны быть приведены в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию.
<a id="p100043"></a>Растворимость. Указывают не менее трех растворителей субстанции (например, вода, хлороформ или этанол, разбавленные растворы минеральных кислот и щелочей). Концентрации используемых растворов кислот и щелочей должны быть определенны в фармакопейной статье или нормативной документации. Испытания проводят в соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-2-1-0005-15) "Растворимость".
<a id="p100044"></a>Прозрачность. Раствор должен быть прозрачным или степень опалесценции не должна превышать эталон I. Испытания проводят в соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-2-1-0007-15) "Прозрачность и степень мутности жидкостей".
<a id="p100045"></a>Цветность. Раствор должен быть бесцветным. Испытания проводят в соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-2-1-0006-15) "Степень окраски жидкостей".
<a id="p100046"></a>Вода или Потеря в массе при высушивании. Предельно допустимое содержание воды и навеску субстанции, в которой проводят определение, а также методику определения, указывают в фармакопейной статье или нормативной документации. Определение проводят в соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-2-3-0002-15) "Определение воды" или [ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-2-1-0010-15) "Потеря в массе при высушивании".
<a id="p100047"></a>Чистота. Родственные соединения и посторонние примеси. Содержание родственных соединений и посторонних примесей определяться методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-2-1-2-0001-15) "Хроматография", [ОФС](https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-2-1-2-0005-15) "Высокоэффективная жидкостная хроматография", а также другими физико-химическими методами.
<a id="p100048"></a>Методики должны быть приведены в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию.
<a id="p100049"></a>В зависимости от вида соединения определяют:
- <a id="p100050"></a>содержание высокомолекулярных белков (примеси): уровень которых не должен превышать 1,0%. Испытания проводят методом эксклюзионной хроматографии;
- <a id="p100051"></a>содержание родственных соединений (А21-дезамидоинсулин и другие родственные белки, установленной структуры). Уровень А21-дезамидоинсулина и родственных белков установленной структуры нормируется индивидуально. Содержание А21-дезамидоинсулина не должно превышать 2,0%; родственных белков установленной структуры - не должно превышать 1,0%. Содержание А21-дезамидоинсулина и родственных белков установленной структуры также может нормироваться суммарно. При этом их суммарный уровень не должен превышать 2,0%. Испытание проводят методом обращенно-фазовой ВЭЖХ;
- <a id="p100052"></a>посторонние примеси (нормированию подлежит содержание единичная примесь и сумма примесей, при этом содержания А21-дезамидоинсулина и родственных белков установленной структуры не учитываются). Испытание проводят методом обращенно-фазовой ВЭЖХ.
<a id="p100053"></a>Уровень содержания примесей и родственных соединений нормируется в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию.
<a id="p100054"></a>Сульфатная зола. Не более 10,0%. Испытание проводят в соответствие с методикой определения, приведенной в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию.
<a id="p100055"></a>Цинк. Не более 1,0% в пересчете на сухое вещество. Испытание проводят методом атомной абсорбционной спектрометрии в соответствие с ОФС "Атомная абсорбция" или иным валидированным методом.
<a id="p100056"></a>Методика определения, приводится в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию.
<a id="p100057"></a>Проинсулин. Не более 10 ppm. Испытание проводят в соответствие с методикой определения, приведенной в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию.
<a id="p100058"></a>Контроль содержания проинсулина предусматривает в случае, если молекулу инсулина получают отщеплением от молекулы проинсулина (внеклеточная экспрессия).
<a id="p100059"></a>Одноцепочечный предшественник. Контроль содержания одноцепочечного предшественника предусматриваться в случае, если производство инсулина осуществляется методом раздельного конструирования цепей инсулина (Two-chain method).
<a id="p100060"></a>Остаточные белки штамма-продуцента. Не более 10 ppm. Остаточные белки клетки-хозяина могут быть определены иммунохимическими методами (например, радиоиммунологическим или ИФА). Методика должна быть приведена в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию.
<a id="p100061"></a>Остаточная ДНК штамма-продуцента и плазмидная ДНК. Не более 10 ppm. Определяют методом гибридизации с зондами, меченными биотином, дигоксигенином, другой меткой или другим валидированным методом, например, методом ПЦР или иммуноферментным методом (Treshold system).
<a id="p100062"></a>Содержание остаточных белков штамм-продуцента и ДНК штамма-продуцента не должно превышать значений, установленных в фармакопейной статье или в нормативной документации, и не превышать показателей, определенных международными требованиями.
<a id="p100063"></a>Микробиологическая чистота. Субстанция должна выдерживать требования, предъявляемые к фармацевтическим субстанциям, предназначенным для приготовления лекарственных форм для парентерального применения (категория 1.2.Б). Испытания проводят в соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".
<a id="p100064"></a>Бактериальные эндотоксины. Не более 10 ЕЭ/мг. Испытание проводят в соответствии с ОФС "Бактериальные эндотоксины".
<a id="p100065"></a>Количественное определение. Не менее 27,5 МЕ/мг в пересчете на сухое вещество. Испытания проводят методом ВЭЖХ, в соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-2-1-2-0001-15) "Хроматография", [ОФС](https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-2-1-2-0005-15) "Высокоэффективная жидкостная хроматография".
<a id="p100066"></a>Биологическая активность. Не менее 27,5 МЕ/мг в пересчете на сухое вещество. Определяют по гипогликемическому действию субстанции в сравнении с международным стандартным образцом человеческого инсулина (USP RS или международный стандартный образец или ГСО). Испытание проводят соответствие с [ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-2-4-0001-15) "Биологические испытания инсулина".
<a id="p100067"></a>Транспортирование и хранение. В герметичном контейнере при температуре, указанной в нормативной документации.


### <a id="p100068"></a>ЛЕКАРСТВЕННЫЙ ПРЕПАРАТ


<a id="p100069"></a>Лекарственные генно-инженерные препараты инсулина человека выпускают в лекарственных формах для парентерального применения (раствор для подкожного введения).
<a id="p100070"></a>Требования к испытаниям лекарственных препаратов инсулина человека регламентируются нижеприведенными показателями, а также требованиями [ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-7-1-0007-15) "Лекарственные средства, получаемые методами рекомбинантных ДНК" и [ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-4-1-0007-15) "Лекарственные формы для парентерального применения" и [ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-4-1-0011-18) "Растворы".
<a id="p100071"></a>Описание. Бесцветный прозрачный раствор без посторонних включений.
<a id="p100072"></a>Определение проводят визуально.
<a id="p100073"></a>Подлинность. Подлинность подтверждается методом ВЭЖХ с использованием стандартного образца (пептидным картированием, идентификацией основного вещества), а также определением биологической активности и/или биоидентичности.
<a id="p100074"></a>Испытания проводят в соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-2-1-2-0005-15) "Высокоэффективная жидкостная хроматография", ОФС "Пептидное картирование" и [ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-2-4-0001-15) "Биологические испытания инсулина".
<a id="p100075"></a>Методики должны быть приведены в фармакопейной статье или нормативной документации на лекарственный препарат.
<a id="p100076"></a>Прозрачность. Должен быть прозрачным. Определение проводят визуально в соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-2-1-0007-15) "Прозрачность и степень мутности жидкостей".
<a id="p100077"></a>Цветность. Должен быть бесцветным. Определение проводят визуально в соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-2-1-0006-15) "Степень окраски жидкостей".
<a id="p100078"></a>pH. Приводится допустимый интервал значений pH. Лекарственный препарат должен соответствовать требованиям, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации. Определение проводят потенциометрическим методом в соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-2-1-0004-15) "Ионометрия".
<a id="p100079"></a>Извлекаемый объем. Извлекаемый объем должен быть не менее номинального. Определение проводят в соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-4-2-0003-15) "Извлекаемый объем для лекарственных форм для парентерального применения".
<a id="p100080"></a>Осмолярность. Приводится допустимый интервал значений осмолярности лекарственного препарата. Лекарственный препарат должен выдерживать требования, определенные в фармакопейной статье или нормативной документации. Определение проводят в соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-2-1-0003-15) "Осмолярность".
<a id="p100081"></a>Примечание: <*> - при необходимости показатель "Осмолярность" может быть заменен на показатель "Осмолярность с приведением обоснования.

<a id="p100082"></a>Механические включения. Видимые и невидимые частицы должны соответствовать требованиям, указанным в ОФС "Видимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения и глазных лекарственных формах" и [ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-4-2-0006-15) "Невидимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения", соответственно. Испытание проводят соответствующими методами, указанными в ОФС.
<a id="p100083"></a>Чистота. Родственные соединения и посторонние примеси. В зависимости от вида соединения определяют:
- <a id="p100084"></a>содержание высокомолекулярных белков (примеси). Испытания проводят методом эксклюзионной хроматографии;
- <a id="p100085"></a>содержание родственных соединений, к которым относится А21-дезамидоинсулин и другие родственные белки установленной структуры;
- <a id="p100086"></a>посторонние примеси.
<a id="p100087"></a>Уровень содержания примесей и родственных соединений нормируется в фармакопейной статье или нормативной документации на лекарственный препарат.
<a id="p100088"></a>Испытание проводят в соответствие с методиками определения, приведенными в фармакопейной статье или нормативной документации на лекарственный препарат.
<a id="p100089"></a>Пролонгированное действие. Лекарственный препарат должен соответствовать требованиям, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации. Испытание проводят в соответствие с методикой определения, приведенной в фармакопейной статье или нормативной документации на лекарственный препарат.
<a id="p100090"></a>Контроль пролонгированного действия предусматривается в случае, если лекарственный препарат обладает пролонгированным действием.
<a id="p100091"></a>Стерильность. Лекарственный препарат должен быть стерильным. Испытания проводят в соответствии с ОФС "Стерильность" методом прямого посева или мембранной фильтрации.
<a id="p100092"></a>Бактериальные эндотоксины. Указывают допустимое содержание бактериальных эндотоксинов. Содержание бактериальных эндотоксинов должно соответствовать требованиям, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации. Испытание проводят в соответствии с ОФС "Бактериальные эндотоксины".
<a id="p100093"></a>Вещества, вносимые в препарат. Определяют количественное содержание веществ, используемых в качестве консервантов. Содержание консерванта, должно соответствовать нормам, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации на лекарственный препарат.
<a id="p100094"></a>Используемый метод, методика определения и нормы определяются типом соединения, входящего в состав лекарственного препарата и приводятся в фармакопейной статье или нормативной документации на лекарственный препарат. Выбор метода определения должен быть обоснован.
<a id="p100095"></a>Количественное определение. Содержание действующего вещества должно соответствовать требованиям, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации. Испытания проводят методом ВЭЖХ, в соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-2-1-2-0001-15) "Хроматография", [ОФС](https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-2-1-2-0005-15) "Высокоэффективная жидкостная хроматография".
<a id="p100096"></a>Биологическая активность. Не менее 27,5 МЕ/мг в пересчете на сухое вещество. Определяют по гипогликемическому действию лекарственного препарата в сравнении с международным стандартным образцом человеческого инсулина (USP RS или международный стандартный образец или ФСО). Испытание проводят по [ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-2-4-0001-15) "Биологические испытания инсулина".
<a id="p100097"></a>Упаковка и маркировка. В соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-4-1-0007-15) "Лекарственные формы для парентерального применения" и [ОФС](https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-1-0025-18) "Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств".
<a id="p100098"></a>Транспортирование и хранение. В соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-4-1-0007-15) "Лекарственные формы для парентерального применения" и [ОФС](https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-1-0025-18) "Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств". В защищенном от света месте при температуре от 2 до 8 °C, не допускается замораживание, если в фармакопейной статье или нормативной документации не указано иное.



<a id="p100099"></a>

---