---
title: "\"ОФС.1.5.3.0017. Общая фармакопейная статья. Определение состава жирных кислот в маслах жирных растительных и жирах\""
number: "ОФС.1.5.3.0017"
issuer: "Министерство здравоохранения Российской Федерации"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-5-3-0017"
---

## "ОФС.1.5.3.0017. Общая фармакопейная статья. Определение состава жирных кислот в маслах жирных растительных и жирах"

# "ОФС.1.5.3.0017. Общая фармакопейная статья. Определение состава жирных кислот в маслах жирных растительных и жирах"

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)

("Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание")

> [!IMPORTANT]
> Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте https://minzdrav.gov.ru/ по состоянию на 15.08.2023.
> В соответствии с Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377 данный документ введен в действие с 01.09.2023.


<a id="p100001"></a>**МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ**

<a id="p100002"></a>**ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ**


<table>
<colgroup><col width="50%"><col width="50%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100003"></a>Определение состава жирных кислот в маслах жирных растительных и жирах</td><td><a id="p100004"></a>ОФС.1.5.3.0017</td></tr>
<tr><td><a id="p100005"></a>Вводится впервые</td></tr>
</table>


<a id="p100006"></a>Метод определения состава жирных кислот в маслах жирных растительных и жирах проводят методом газовой хроматографии ([ОФС](https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-2-1-2-0004) "Газовая хроматография").

<a id="p100007"></a>Методика 1

<a id="p100008"></a>Методика неприменима для масел, содержащих глицериды жирных кислот с эпокси-, гидроэпокси-, гидроперокси-, циклопропиловыми или циклопропениловыми группами, а также для масел, в составе которых большая часть жирных кислот имеет длину цепи менее восьми атомов углерода, или для масел с кислотным числом более 2,0.
<a id="p100009"></a>Метиловые эфиры жирных кислот могут быть получены следующими способами, если в фармакопейной статье не приведены иные условия:
1. <a id="p100010"></a>В колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 - 0,15 мл тщательно перемешанного испытуемого образца, добавляют 1 мл метанола и 0,05 - 0,1 мл ацетилхлорида. Смесь аккуратно перемешивают и нагревают на водяной бане с обратным холодильником в течение 1 ч. Избыток метанола отгоняют. К остатку прибавляют 0,2 мл гексана (гептана или другого растворителя с соответствующей полярностью) и перемешивают.
2. <a id="p100011"></a>В колбу вместимостью 50 мл, снабженную пришлифованным обратным холодильником, помещают 0,1 г тщательно перемешанного испытуемого образца, приливают 10 мл метанола. К полученной смеси прибавляют 0,28 г калия гидроксида и нагревают с обратным холодильником на песчаной бане при температуре 105 - 110 °C в течение 1 часа. Смесь охлаждают до комнатной температуры, приливают по каплям 0,5 мл диметилсульфата, нагревают с обратным холодильником на песчаной бане при температуре 105 - 110 °C в течение 30 мин и приливают еще 0,2 мл диметилсульфата. Из полученного раствора отгоняют метанол до объема 2,5 мл. Смесь охлаждают до комнатной температуры, приливают 20 мл воды, переносят в делительную воронку, добавляют 20 мл гексана (гептана или другого растворителя с соответствующей полярностью) и интенсивно встряхивают. Верхний слой отделяют и фильтруют через беззольный фильтр, содержащий 1 г натрия сульфата безводного.
<a id="p100012"></a>Раствор сравнения А. Готовят 0,5 г смеси веществ, применяемых для калибровки (калибровочной смеси), состава приведенного в [таблицах 1](#p100041), [2](#p100057) или [3](#p100082), в соответствии с указаниями в фармакопейной статье. Если в фармакопейной статье не указан определенный раствор, готовят смесь состава, приведенного в [таблице 1](#p100041). Смесь растворяют в гексане (гептане или другом растворителе с соответствующей полярностью) и доводят объем раствора тем же растворителем до 50 мл.
<a id="p100013"></a>Раствор сравнения Б. Доводят 1,0 мл раствора сравнения А гептаном до 10 мл.
<a id="p100014"></a>Раствор сравнения В. Готовят 0,5 г смеси метиловых эфиров жирных кислот, которые по составу соответствуют смеси жирных кислот, указанных в фармакопейной статье на испытуемое вещество. Смесь растворяют в гексане (гептане или другом растворителе с соответствующей полярностью) и доводят объем раствора тем же растворителем до 50 мл. Допускается также использование готовых смесей метиловых эфиров жирных кислот.
<a id="p100015"></a>Условия хроматографирования


<table>
<colgroup><col width="33%"><col width="24%"><col width="43%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100016"></a>Колонка</td><td colspan="2"><a id="p100017"></a>Кварцевая капиллярная длиной 10 - 30, диаметром от 0,2 до 0,8 мм, с неподвижной фазой полиэтиленгликоль 20 М (макрогол 20000), толщиной от 0,1 до 0,5 мкм или другая неподвижная фаза</td></tr>
<tr><td><a id="p100018"></a>Детектор</td><td colspan="2"><a id="p100019"></a>пламенно-ионизационный</td></tr>
<tr><td><a id="p100020"></a>Газ-носитель</td><td colspan="2"><a id="p100021"></a>Гелий, водород или азот для хроматографии</td></tr>
<tr><td><a id="p100022"></a>Деление потока</td><td colspan="2"><a id="p100023"></a>1:100 или менее в зависимости от внутреннего диаметра применяемой колонки (например, в случае использования колонки с внутренним диаметром 0,32 мм деление потока должно составлять 1:50)</td></tr>
<tr><td><a id="p100024"></a>Скорость потока, мл/мин</td><td colspan="2"><a id="p100025"></a>1,3 (для колонки с внутренним диаметром 0,32 мм)</td></tr>
<tr><td><a id="p100026"></a>Объем пробы, мкл</td><td colspan="2"><a id="p100027"></a>1</td></tr>
<tr><td rowspan="3"><a id="p100028"></a>Температура</td><td><a id="p100029"></a>Колонка</td><td><a id="p100030"></a>160 - 200 °C</td></tr>
<tr><td><a id="p100031"></a>Инжектор</td><td><a id="p100032"></a>250 °C</td></tr>
<tr><td><a id="p100033"></a>Детектор</td><td><a id="p100034"></a>250 °C</td></tr>
</table>


<a id="p100035"></a>Если требуется линейный градиент температуры, температуру колонки увеличивают, например, со скоростью 3 °C/мин от 170 до 230 °C.
<a id="p100036"></a>Пригодности хроматографической системы. Хроматографическая система считается пригодной, если при использовании смеси веществ, используемых для калибровки, приведенных в [таблице 1](#p100041) или [таблице 2](#p100057), выполняются следующие условия:
- <a id="p100037"></a>разрешение (RS) между пиками метилолеата и метилстеарата на хроматограмме раствора сравнения А должно быть не менее 1,8;
- <a id="p100038"></a>отношение сигнал/шум (S/N) для пика метилмиристата на хроматограмме раствора сравнения Б должно быть не менее 5;
- <a id="p100039"></a>эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику метилстеарата на хроматограмме раствора сравнения А должна быть не менее 30000 теоретических тарелок.

<a id="p100040"></a>Таблица 1

<a id="p100041"></a>Смесь веществ, применяемых для калибровки
(для газовой хроматографии с капиллярной
колонкой и системой с делением потока)


| <a id="p100042"></a>Смесь веществ | <a id="p100043"></a>Состав (в процентах м/м) |
| --- | --- |
| <a id="p100044"></a>Метиллаурат | <a id="p100045"></a>5 |
| <a id="p100046"></a>Метилмиристат | <a id="p100047"></a>5 |
| <a id="p100048"></a>Метилпальмитат | <a id="p100049"></a>10 |
| <a id="p100050"></a>Метилстеарат | <a id="p100051"></a>20 |
| <a id="p100052"></a>Метиларахидат | <a id="p100053"></a>40 |
| <a id="p100054"></a>Метилолеат | <a id="p100055"></a>20 |


<a id="p100056"></a>Таблица 2

<a id="p100057"></a>Смесь веществ, применяемых для калибровки
(для газовой хроматографии с капиллярной
колонкой и системой с делением потока)


| <a id="p100058"></a>Смесь веществ | <a id="p100059"></a>Состав (в процентах м/м) |
| --- | --- |
| <a id="p100060"></a>Метилмиристат | <a id="p100061"></a>5 |
| <a id="p100062"></a>Метилпальмитат | <a id="p100063"></a>10 |
| <a id="p100064"></a>Метилстеарат | <a id="p100065"></a>15 |
| <a id="p100066"></a>Метиларахидат | <a id="p100067"></a>20 |
| <a id="p100068"></a>Метилолеат | <a id="p100069"></a>20 |
| <a id="p100070"></a>Метилэйкозеноат | <a id="p100071"></a>10 |
| <a id="p100072"></a>Метилбехенат | <a id="p100073"></a>10 |
| <a id="p100074"></a>Метиллигноцерат | <a id="p100075"></a>10 |


<a id="p100076"></a>*Примечание* - при выполнении качественного анализа с использованием калибровочных кривых в калибровочную смесь рекомендуется добавлять компонент испытуемого раствора с максимальным числом атомов углерода в цепи.

<a id="p100077"></a>Хроматографическая система считается пригодной, если при использовании смеси веществ, применяемых для калибровки, приведенных в [таблице 3](#p100082) выполняются следующие условия:
- <a id="p100078"></a>разрешение (RS) между пиками метилкаприлата и метилдеканоата на хроматограмме раствора сравнения А должно быть не менее 4,0;
- <a id="p100079"></a>отношение сигнал/шум (S/N) для пика метилкапроата на хроматограмме раствора сравнения Б должно быть не менее 5;
- <a id="p100080"></a>эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику метилдеканоата на хроматограмме раствора сравнения А должна быть не менее 15000 теоретических тарелок.

<a id="p100081"></a>Таблица 3

<a id="p100082"></a>Смесь веществ, применяемых для калибровки
(для газовой хроматографии с капиллярной
колонкой и системой с делением потока)


| <a id="p100083"></a>Смесь веществ | <a id="p100084"></a>Состав (в процентах м/м) |
| --- | --- |
| <a id="p100085"></a>Метилкапроат | <a id="p100086"></a>10 |
| <a id="p100087"></a>Метилкаприлат | <a id="p100088"></a>10 |
| <a id="p100089"></a>Метилдеканоат | <a id="p100090"></a>20 |
| <a id="p100091"></a>Метиллаурат | <a id="p100092"></a>20 |
| <a id="p100093"></a>Метилмиристат | <a id="p100094"></a>40 |


<a id="p100095"></a>*Примечание* - при выполнении качественного анализа с использованием калибровочных кривых в калибровочную смесь рекомендуется добавлять компонент испытуемого раствора с максимальным числом атомов углерода в цепи.

<a id="p100096"></a>Следует избегать условий хроматографирования, которые могут дать неразделенные пики (наличие компонентов с небольшим различием между временами удерживания, например, линоленовая и арахидоновая кислоты).
<a id="p100097"></a>Качественный анализ. Идентифицируют пики на хроматограмме раствора сравнения В (изотермические условия хроматографирования или линейный градиент температуры).
<a id="p100098"></a>При использовании изотермических условий хроматографирования пики могут быть также идентифицированы построением калибровочных кривых с использованием хроматограммы раствора сравнения А и данных [таблиц 1](#p100041), [2](#p100057) или [3](#p100082).
<a id="p100099"></a>На хроматограмме раствора сравнения А измеряют приведенное время удерживания (t'R) каждого пика.
<a id="p100100"></a>t'R - разница между временем удерживания пика растворителя и временем удерживания несорбирующегося (в условиях определения) вещества.
<a id="p100101"></a>Строят график линейной зависимости:
<a id="p100102"></a>Lg (t'R) = f (эквивалент числа атомов углерода в цепи).
<a id="p100103"></a>Логарифмы t'R ненасыщенных жирных кислот расположены на этой линии в точках, соответствующих не целым значениям "эквивалента числа атомов углерода в цепи". Эквивалент числа атомов углерода в цепи представляет собой длину теоретической цепи насыщенной жирной кислоты, которая должна была иметь такое же t'R, как идентифицируемая жирная кислота. Например, у линолевой кислоты такое же t'R, как у теоретической насыщенной жирной кислоты, имеющей 18,8 атомов углерода.
<a id="p100104"></a>Идентификацию пиков на хроматограмме испытуемого раствора проводят по прямой линии и уменьшающимся временам удерживания.
<a id="p100105"></a>Эквиваленты числа атомов углерода в цепи представлены в [таблице 4](#p100107).

<a id="p100106"></a>Таблица 4

<a id="p100107"></a>Эквиваленты числа атомов углерода в цепи (значения
рассчитаны с использованием калибровочных кривых и приведены
в качестве примера для колонки с макроголом 20 000)


| <a id="p100108"></a>Жирная кислота | <a id="p100109"></a>Эквивалент числа атомов углерода в цепи |
| --- | --- |
| <a id="p100110"></a>Капроновая кислота | <a id="p100111"></a>6,0 |
| <a id="p100112"></a>Каприловая кислота | <a id="p100113"></a>8,0 |
| <a id="p100114"></a>Каприновая кислота | <a id="p100115"></a>10,0 |
| <a id="p100116"></a>Лауриновая кислота | <a id="p100117"></a>12,0 |
| <a id="p100118"></a>Миристиновая кислота | <a id="p100119"></a>14,0 |
| <a id="p100120"></a>Пальмитиновая кислота | <a id="p100121"></a>16,0 |
| <a id="p100122"></a>Пальмитолеиновая кислота | <a id="p100123"></a>16,3 |
| <a id="p100124"></a>Маргариновая кислота | <a id="p100125"></a>17,0 |
| <a id="p100126"></a>Стеариновая кислота | <a id="p100127"></a>18,0 |
| <a id="p100128"></a>Олеиновая кислота | <a id="p100129"></a>18,3 |
| <a id="p100130"></a>Линолевая кислота | <a id="p100131"></a>18,8 |
| <a id="p100132"></a>Гамма-линоленовая кислота | <a id="p100133"></a>19,0 |
| <a id="p100134"></a>Альфа-линоленовая кислота | <a id="p100135"></a>19,2 |
| <a id="p100136"></a>Арахиновая кислота | <a id="p100137"></a>20,0 |
| <a id="p100138"></a>11-Эйкозеиновая кислота<br>(гондоиновая кислота) | <a id="p100139"></a>20,2 |
| <a id="p100140"></a>Арахидоновая кислота | <a id="p100141"></a>21,2 |
| <a id="p100142"></a>Бегеновая кислота | <a id="p100143"></a>22,0 |
| <a id="p100144"></a>Эруковая кислота | <a id="p100145"></a>22,2 |
| <a id="p100146"></a>12-Оксостеариновая кислота | <a id="p100147"></a>22,7 |
| <a id="p100148"></a>Рицинолевая кислота | <a id="p100149"></a>23,9 |
| <a id="p100150"></a>12-Гидроксистеариновая кислота | <a id="p100151"></a>23,9 |
| <a id="p100152"></a>Лигноцериновая кислота | <a id="p100153"></a>24,0 |
| <a id="p100154"></a>Нервоновая кислота | <a id="p100155"></a>24,2 |


<a id="p100156"></a>Количественный анализ. Используют метод внутренней нормализации. Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05% от суммы площадей всех пиков.
<a id="p100157"></a>В определенных случаях, например, при наличии жирных кислот с 12 или менее атомами углерода, в фармакопейной статье должен быть указан поправочный коэффициент для преобразования площадей пиков в проценты (м/м).
<a id="p100158"></a>Содержание олеиновой кислоты представляет собой сумму олеиновой кислоты (18:1 n-9) и цис-вакциновой кислоты (18:1 n-7).

<a id="p100159"></a>Методика 2

<a id="p100160"></a>Методика неприменима для масел, содержащих глицериды жирных кислот с эпокси-, гидроэпокси-, гидроперокси-, циклопропиловыми и циклопропениловыми группами или для масел с кислотным числом более 2,0.
<a id="p100161"></a>Испытуемый раствор. В центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой помещают 0,1 г (точная навеска) испытуемого образца, растворяют в смеси 1 мл гептана (гексана или другом растворителе с соответствующей полярностью) с 1 мл диметилкарбоната, энергично перемешивают и нагревают до температуры 50 +/- 5 °C. Прибавляют к еще теплому раствору 1 мл натрия раствора 1,2% в метаноле и энергично перемешивают в течение 5 мин, прибавляют 3 мл воды и энергично перемешивают в течение 30 с. Смесь центрифугируют 15 мин со скоростью 1500 об/мин. Надосадочную жидкость используют в качестве испытуемого раствора.
<a id="p100162"></a>Растворы сравнения и анализ данных. Если в фармакопейной статье нет других указаний, поступают, как указано в [методике 1](#p100007).
<a id="p100163"></a>Условия хроматографирования


<table>
<colgroup><col width="33%"><col width="18%"><col width="21%"><col width="27%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100164"></a>Колонка</td><td colspan="3"><a id="p100165"></a>Кварцевая капиллярная 30 м x 0,25 мм, макрогол 20000, 025 мкм</td></tr>
<tr><td><a id="p100166"></a>Детектор</td><td colspan="3"><a id="p100167"></a>пламенно-ионизационный</td></tr>
<tr><td><a id="p100168"></a>Газ-носитель</td><td colspan="3"><a id="p100169"></a>гелий для хроматографии</td></tr>
<tr><td><a id="p100170"></a>Деление потока</td><td colspan="3"><a id="p100171"></a>1:100</td></tr>
<tr><td><a id="p100172"></a>Скорость потока, мл/мин</td><td colspan="3"><a id="p100173"></a>0,9</td></tr>
<tr><td><a id="p100174"></a>Объем пробы, мкл</td><td colspan="3"><a id="p100175"></a>1</td></tr>
<tr><td rowspan="5"><a id="p100176"></a>Температура</td><td rowspan="3"><a id="p100177"></a>Колонка</td><td><a id="p100178"></a>0 - 15 мин</td><td><a id="p100179"></a>100</td></tr>
<tr><td><a id="p100180"></a>15 - 36 мин</td><td><a id="p100181"></a>$100 \rightarrow 225^{\circ}C$</td></tr>
<tr><td><a id="p100182"></a>36 - 61 мин</td><td><a id="p100183"></a>225 °C</td></tr>
<tr><td colspan="2"><a id="p100184"></a>Инжектор</td><td><a id="p100185"></a>250 °C</td></tr>
<tr><td colspan="2"><a id="p100186"></a>Детектор</td><td><a id="p100187"></a>250 °C</td></tr>
</table>


<a id="p100188"></a>Методика 3

<a id="p100189"></a>Методика неприменима для масел, содержащих глицериды жирных кислот с эпокси-, гидроэпокси-, гидроперокси-, альдегидными, кетоновыми, циклопропиловыми и циклопропениловыми группами и сопряженными полиненасыщенными и ацетиленовыми соединениями из-за частичного или полного разрушения этих групп.
<a id="p100190"></a>Испытуемый раствор. В коническую колбу вместимостью 25 мл помещают 0,1 г испытуемого образца, растворяют в 2 мл натрия гидроксида раствора в метаноле 2% и кипятят с обратным холодильником в течение 30 мин. Прибавляют через холодильник 2,0 мл бора фторида в метаноле 14% и кипятят в течение 30 мин, прибавляют через холодильник 4,0 мл гептана и кипятят в течение 5 мин. Смесь охлаждают, прибавляют 10,0 мл натрия хлорида насыщенного раствора, встряхивают в течение 15 с и прибавляют такое количество натрия хлорида насыщенного раствора, чтобы верхний слой поднялся к горлу колбы. Отбирают 2,0 мл верхнего слоя, помещают в делительную воронку, промывают тремя порциями воды, по 2 мл каждая, и сушат полученный экстракт над натрия сульфатом безводным.
<a id="p100191"></a>Растворы сравнения, хроматографическая методика и анализ данных. Если в фармакопейной статье нет других указаний, поступают, как указано в [методике 1](#p100007).



<a id="p100192"></a>

---