ОФС.1.2.3.0034. Общая фармакопейная статья. Определение спирта этилового в лекарственных средствах

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

flowchart LR
  n0["Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск..."]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/gf-xi" "Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск 1. Общие методы анализа"
  n1["Государственная фармакопея Российской Федерации. XII..."]:::doc
  click n1 "https://bukva.ai/docs/gf-xii" "Государственная фармакопея Российской Федерации. XII издание. Часть 1"
  n2["ОФС.1.2.1.0016.15"]:::rst
  click n2 "https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-2-1-0016-15" "ОФС.1.2.1.0016.15. Общая фармакопейная статья. Определение спирта этилового в лекарственных средствах (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)"
  n3["ОФС.1.2.3.0034"]:::doc
  click n3 "https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-2-3-0034" "ОФС.1.2.3.0034. Общая фармакопейная статья. Определение спирта этилового в лекарственных средствах (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)"
  n2 --> n3
  n1 --> n2
  n0 --> n2
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Спирт этиловый в лекарственных средствах, в зависимости от их состава и физико-химических свойств, может быть определен методом дистилляции (метод 1) с последующим определением плотности с помощью пикнометра, плотномера или ареометра, или методом газовой хроматографии (метод 2). Метод количественного определения спирта этилового должен быть указан в фармакопейной статье на лекарственное средство. Содержание спирта этилового может быть выражено в объемных или массовых процентах.

Требования данной общей фармакопейной статьи распространяются на субстанции (настойки, экстракты жидкие и др.) и лекарственные препараты, представленные в жидких лекарственных формах (настойки, экстракты, растворы спиртовые и др.), содержащие в своем составе спирт этиловый.

Метод 1

Метод дистилляции заключается в отделении спирта этилового от растворенных в нем веществ.

Устройства для определения спирта этилового в лекарственных средствах представлены на рис. 1 и 2.

Определение плотности с помощью пикнометра или плотномера

В круглодонную колбу (1) (рис. 1) вместимостью 200 — 250 мл вносят точно отмеренное количество лекарственного средства. При содержании спирта в лекарственном средстве до 20% для определения берут 75 мл лекарственного средства, при содержании от 20 до 50% — 50 мл, при содержании от 50% и выше — 25 мл; перед перегонкой лекарственное средство разбавляют водой до 75 мл.

Рисунок 1 — Схема устройства для определения содержания спирта этилового

1 — круглодонная колба; 2 — термометр; 3 — холодильник; 4 — аллонж; 5 — приемник; 6 — электронагреватель.

Колбу присоединяют к горизонтально расположенному прямому холодильнику (3) с аллонжем (4), направляющим дистиллят в приемник — мерную колбу вместимостью 50 мл (5), желательно помещенную в стакан с холодной водой.

Нагревают перегонную колбу на электронагревателе (6). Для равномерного кипения в колбу с испытуемым раствором помещают капилляры, пемзу или кусочки прокаленного фарфора. Температуру паров измеряют термометром (2), размещенным в приборе таким образом, чтобы ртутный шарик располагался на 0,5 — 1,0 см ниже отверстия отводной трубки. При соблюдении температурных пределов перегонки достигается равномерное кипение испытуемого раствора. Если испытуемый раствор при перегонке сильно пенится, то прибавляют 2 — 3 мл концентрированной фосфорной или серной кислоты, кальция хлорид, парафин, воск (2 — 3 г).

В мерную колбу вместимостью 50 мл собирают 48 мл дистиллята, охлаждают до температуры 20 °C и доводят объем раствора водой до метки.

Плотность дистиллята определяют с помощью пикнометра или плотномера и по алкоголеметрическим таблицам находят содержание спирта этилового в объемных процентах.

Содержание спирта этилового в лекарственном средстве в объемных процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{50 \cdot a}{b} , (1)

где 50 — объем дистиллята, мл;

a — содержание спирта этилового в дистилляте, % (о/о);

b — объем испытуемого лекарственного средства, взятый для перегонки, мл.

В тех случаях, когда при дистилляции удаляются летучие вещества, отличные от спирта этилового и воды, следует проводить предварительную обработку в соответствии с указаниями в фармакопейной статье.

При содержании в лекарственном средстве эфирных масел, хлороформа, этилового эфира, камфоры к нему добавляют в делительной воронке равные объемы насыщенного раствора натрия хлорида и петролейного эфира. Смесь взбалтывают в течение 3 мин. После разделения слоев спиртоводный слой сливают в другую делительную воронку и обрабатывают таким же образом половинным количеством петролейного эфира. Спиртоводный слой сливают в колбу для перегонки. Объединенные эфирные извлечения взбалтывают с половинным количеством насыщенного раствора натрия хлорида и присоединяют к жидкости, находящейся в колбе для перегонки.

Если лекарственное средство содержит менее 30% спирта этилового, то высаливание проводят не раствором, а 10 г сухого натрия хлорида.

При содержании в лекарственном средстве летучих кислот их нейтрализуют раствором щелочи, а при содержании летучих оснований — фосфорной или серной кислотами.

Лекарственные средства, содержащие свободный йод, перед дистилляцией обрабатывают до обесцвечивания цинковой пылью или рассчитанным количеством сухого натрия тиосульфата. Для связывания летучих сернистых соединений к лекарственному средству прибавляют несколько капель 10% раствора натрия гидроксида.

Определение плотности с помощью ареометра

В круглодонную колбу (1) вместимостью 500 мл (рис. 2) помещают 50,0 мл лекарственного средства, отобранного при температуре 20 +/- 0,1 °C, прибавляют 200 — 300 мл воды и несколько кусочков пемзы.

Рисунок 2 — Схема устройства для определения содержания спирта этилового (размеры приведены в миллиметрах)

1 — круглодонная колба; 2 — дистилляционная головка с переходником; 3 — вертикальный холодильник; 4 — трубка холодильника; 5 — мерная колба.

Присоединяют дистилляционную головку с переходником (2) и холодильник (3), снабженный в нижней части трубкой (4), через которую дистиллят подается в нижнюю часть мерной колбы (5) вместимостью 250 мл. Мерная колба погружается в смесь льда и воды. Отгоняют и собирают в мерную колбу вместимостью 250 мл не менее 180 мл дистиллята. Дистиллят охлаждают до 20 +/- 0,1 °C и доводят объем раствора водой с температурой 20 +/- 0,1 °C до метки.

Дистиллят переносят в цилиндр, диаметр которого должен превышать ширину корпуса ареометра не менее чем на 6 мм. В случае недостаточности объема дистиллята, количество образца удваивают и доводят объем дистиллята водой с температурой 20 +/- 0,1 °C до 500,0 мл. Вносят поправку на разведение, умножая найденное по алкоголеметрическим таблицам значение содержания спирта этилового в процентах на 5. Содержание спирта этилового, рассчитанное по алкоголеметрическим таблицам, округляют до десятичного знака.

Метод 2

Методика 1

Внутренний стандарт. Пропанол.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают точно отмеренное количество испытуемого лекарственного средства, достаточное для получения раствора, содержащего 4 — 6% (о/о) спирта этилового, прибавляют 5,0 мл внутреннего стандарта, перемешивают и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл спирта этилового (не менее 96%) и 5,0 мл внутреннего стандарта, перемешивают и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Хроматографируют по 1 — 2 мкл испытуемого раствора и раствора сравнения.

Содержание спирта этилового в лекарственном средстве в объемных процентах (X) рассчитывают по формуле:

X = \frac{S \cdot S_{o}\prime \cdot 5,0 \cdot P}{S_{o} \cdot S\prime \cdot V} , (2)

где S — площадь пика спирта этилового на хроматограмме испытуемого раствора;

S' — площадь пика спирта этилового на хроматограмме раствора сравнения;

So — площадь пика внутреннего стандарта на хроматограмме испытуемого раствора;

S_{o}\prime — площадь пика внутреннего стандарта на хроматограмме раствора сравнения;

V — объем лекарственного средства, взятый для анализа, мл;

P — содержание спирта этилового в стандартном образце, %.

Проверка пригодности хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения разрешение (RS) между пиками спирта этилового и пропанола должно быть не менее 2,0;

Методика 2

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл пропанола и доводят объем раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают объем лекарственного средства, соответствующий 1 г этанола и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл этанола безводного и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл метанола для хроматографии и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор сравнения В. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора внутреннего стандарта, прибавляют 1,0 мл раствора сравнения А, 2,0 мл раствора сравнения Б и доводят объем раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Температурная программа

Хроматографируют по 1,0 мкл раствора сравнения В и испытуемого раствора.

Относительное время удерживания соединений. Этанол — 1 (около 5,3 мин); метанол — около 0,8; пропанол — около 1,6.

Проверка пригодности хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения В разрешение (RS) между пиками метанола и этанола должно быть не менее 5,0.

Содержание спирта этилового в лекарственном средстве в объемных процентах (X) рассчитывают по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot S_{2}\prime \cdot 100}{S_{2} \cdot S_{1}\prime \cdot V_{1}} , (3)

где S1 — площадь пика спирта этилового на хроматограмме испытуемого раствора;

S2 — площадь пика спирта этилового на хроматограмме раствора сравнения В;

S_{1}\prime — площадь пика внутреннего стандарта на хроматограмме испытуемого раствора;

S_{2}\prime — площадь пика внутреннего стандарта на хроматограмме раствора сравнения В;

V1 — объем лекарственного средства в испытуемом растворе, мл.

Методика 3

Данная методика подразумевает использование парофазного пробоотборника.

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл пропанола и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают объем лекарственного средства, соответствующий 0,4 г этанола и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора, прибавляют 1,0 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объем раствора водой до метки. Во флакон для инъекций помещают 2,0 мл полученного раствора.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл этанола безводного и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл данного раствора и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,5 мл раствора сравнения А, прибавляют 1,0 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объем раствора водой до метки. Во флакон для инъекций помещают 2,0 мл полученного раствора.

Раствор сравнения В. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения А, прибавляют 1,0 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объем раствора водой до метки. Во флакон для инъекций помещают 2,0 мл полученного раствора.

Раствор сравнения Г. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,5 мл раствора сравнения А, прибавляют 1,0 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объем раствора водой до метки. Во флакон для инъекций помещают 2,0 мл полученного раствора.

Раствор сравнения Д. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл метанола для хроматографии и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор сравнения Е. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора внутреннего стандарта, прибавляют 2,0 мл раствора сравнения А, 2,0 мл раствора сравнения Д и доводят объем раствора водой до метки. Во флакон для инъекций помещают 2,0 мл данного раствора.

Немедленно закрывают флаконы для инъекций плотной резиновой мембранной пробкой, покрытой политетрафторэтиленом, закрепляют алюминиевой обжимной крышкой.

Хроматографируют на газовом хроматографе с пламенно-ионизационным детектором.

Хроматографические условия

Условия для парофазного пробоотборника:

Температурная программа

Хроматографируют по 1,0 мл газовой фазы над испытуемым раствором, растворами сравнения Б, В, Г и Е.

Относительное время удерживания соединений Этанол — 1 (около 5,3 мин); метанол — около 0,8; 1-пропанол — около 1,6.

Проверка пригодности хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения Е разрешение (RS) между пиками метанола и этанола должно быть не менее 5,0.

Строят калибровочный график, откладывая по оси абсцисс концентрацию спирта этилового в растворах сравнения Б, В, Г и Е, а по оси ординат — средние значения отношений площадей пиков этанола и внутреннего стандарта на соответствующих хроматограммах.

Рассчитывают содержание спирта этилового в лекарственном средстве в объемных процентах.