---
title: "\"ФС.2.5.0116. Фармакопейная статья. Клевера трава\""
number: "ФС.2.5.0116"
issuer: "Министерство здравоохранения Российской Федерации"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/prikaz-fs-2-5-0116"
---

## "ФС.2.5.0116. Фармакопейная статья. Клевера трава"

# "ФС.2.5.0116. Фармакопейная статья. Клевера трава"

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 N 120)

("Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание")

> [!IMPORTANT]
> Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте https://minzdrav.gov.ru/ru по состоянию на 15.03.2024.
> В соответствии с Приказом Минздрава России от 13.03.2024 N 120 данный документ введен в действие с 13.03.2024.


<a id="p100001"></a>**МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ**

<a id="p100002"></a>**ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ**


<table>
<colgroup><col width="50%"><col width="50%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100003"></a><a id="p100004"></a>Клевера трава<br>Trifolii herba</td><td><a id="p100005"></a>ФС.2.5.0116</td></tr>
<tr><td><a id="p100006"></a>Вводится впервые</td></tr>
</table>



## <a id="p100007"></a>ОПРЕДЕЛЕНИЕ

<div align="center">

<a id="p100008"></a>Собранная в фазу цветения и высушенная трава многолетнего травянистого растения дикорастущего клевера лугового (клевера красного) - Trifolium pratense L. и культивируемого клевера посевного (клевера красного) - Trifolium sativum (Schreb.) Crome, сем. бобовых - Fabaceae.<br>
<a id="p100009"></a>Содержит:<br>
- <a id="p100010"></a>не менее 1,0% суммы флавоноидов в пересчете на рутин в сухом сырье;<br>
- <a id="p100011"></a>не менее 20,0% экстрактивных веществ, извлекаемых спиртом 40%, в пересчете на сухое сырье.

</div>


## <a id="p100012"></a>ИДЕНТИФИКАЦИЯ

<div align="center">

<a id="p100013"></a>Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-5-1-0002) "Травы".<br>
<a id="p100014"></a>Цельное сырье. Облиственные, цветоносные верхние части растений. Стебли данной до 30 см. Листья тройчатые, жесткие. Листочки 2 - 3 см длиной и 1 - 1,5 см шириной, обратнояйцевидные, на конце заостренные, по краям мелко или неровно зубчатые с густой сетью боковых утолщенных к краям жилок. Черешки 4 - 8 см длиной, на большей части своей длины, срастающиеся с прилистниками. Прилистники эллиптические или округлые, в верхней части имеющие свободные шиловидные выросты. Соцветия (головки) округлой формы, состоящие из многочисленных сидячих цветков. Цветки 1,3 - 1,6 см длиной. Каждый цветок состоит из мотылькового венчика и более короткой волосистой чашечки. Чашечка трубчато-колокольчатая, с пятью узкими прямыми зубцами, из которых нижний более длинный.

</div>

<a id="p100015"></a>Цвет стеблей и листьев серовато-зеленый; прилистники белые с желтоватым оттенком, с сетью зеленых жилок; чашечка светло-зеленая, зеленовато-коричневая, чаще красноватая; венчик от светло-красного до темно-красного, иногда розовато-фиолетового цвета. Запах слабый, характерный.
<a id="p100016"></a>Измельченное сырье. Смесь кусочков стеблей, листьев и цветков различной формы, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.
<a id="p100017"></a>Цвет листьев и стеблей серовато-зеленый, цветков - от светло-красного до темно-красного, иногда розовато-фиолетового цвета. Запах слабый, характерный.
<a id="p100018"></a>При рассмотрении под лупой (10x) на обеих поверхностях фрагментов листьев видны редкие, простые, прямые волоски, ориентированные от черешка к верхушке листа. Стебли в нижней части голые, а в области цветоноса густоопушенные.
<a id="p100019"></a>Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-5-3-0003) "Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения".
<a id="p100020"></a>Цельное сырье. При рассмотрении микропрепарата листа с поверхности должны быть видны клетки эпидермиса с прямыми стенками на верхней стороне листа и клетки эпидермиса с извилистыми стенками на нижней стороне листа. Устьица окружены 4 клетками (аномоцитного типа), редкие, преобладающие на нижней стороне листа. На обеих сторонах встречаются одноклеточные волоски, преобладающие на нижней стороне листа, волоски прижаты к поверхности листа. Также встречаются трехклеточные кроющие волоски и железистые головчатые волоски, располагающиеся в основном вдоль жилки на нижней стороне листа. Базальная клетка волоска крупная шаровидная, а терминальная длинная с гладкой поверхностью и утолщенной стенкой. У основания волосков четко выделяются 10 - 12 примыкающих клеток, образующих розетку. В мезофилле листа видны крупные жилки, имеющие кристаллоносную обкладку.
<a id="p100021"></a>Под эпидермисом находится небольшое кольцо колленхимы. На поперечном срезе стебля должны быть видны бороздки. Внутри каждой бороздки лежит крупный сосудисто-волокнистый пучок с огромной "шапочкой" волокон снаружи флоэмы. Между сосудисто-волокнистыми пучками находится кольцо утолщенной паренхимы. Сердцевина представлена паренхимой.
<a id="p100022"></a>*Клетки эпидермиса чашечки цветка с обеих сторон слегка вытянуты. В клетках паренхимы содержатся многочисленные призматические кристаллы оксалата кальция, образующие кристаллоносную обкладку сосудов. Вход в трубку чашечки изнутри покрыт 3 - 4 плотными рядами прижатых, толстостенных, прямых одноклеточных волосков с короткой базальной клеткой. Глубже располагаются редко разбросанные, короткие, головчатые волоски с 3 - 5 клеточной головкой и 2 - 3 клеточной ножкой. Зубцы чашечки имеют сосочковидные выросты эпидермиса и кристаллоносную обкладку жилки, представленную сростками призматических кристаллов. Встречаются зерна пыльцы эллиптической, треугольной или субсферической формы, трехлопастные, с мелкобородавчатой экзиной.*
<a id="p100023"></a>*Измельченное сырье. При рассмотрении микропрепаратов должны быть видны фрагменты листовой пластинки с обломанными волосками и отдельными терминальными клетками волосков. Эпидермис фрагментов венчика имеет прямостенные клетки со складчатой кутикулой.*

<a id="p100024"></a> *![Идентификация](https://i.bukva.ai/57kLRwAQ/img_0.jpg)*

<a id="p100025"></a>*Рисунок 1 - Клевера трава*

<a id="p100026"></a>*1 - верхний эпидермис листа с устьицами аномоцитного типа*
*(200x); 2 - нижний эпидермис листа с устьицами аномоцитного*
*типа (200x); 3 - волоски листа: а - простой двухклеточный*
*волосок, б - головчатый волосок (200x); 4 - многоклеточные*
*железистые волоски вдоль жилки на нижнем эпидермисе листа*
*(400x); 5 - основание трехклеточного кроющего волоска*
*на краю листа (400x); 6 - кристаллоносная обкладка*
*вдоль жилки листа (400x); 7 - призматические кристаллы*
*кальция оксалата вдоль жилки чашечки (400x);*
*8 - трехлопастное пыльцевое зерно*
*с мелкобородавчатой экзиной (400x).*

<a id="p100027"></a>*Определение основных групп биологически активных веществ*
<a id="p100028"></a>*Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ ([ОФС](https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-2-1-2-0003) "Тонкослойная хроматография").*
<a id="p100029"></a>*Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.*
<a id="p100030"></a>*Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25% - бутанол - ацетонитрил - хлороформ 0,5:2,5:15:60.*
<a id="p100031"></a>*Испытуемый раствор. В фарфоровую чашку помещают 40 мл исходного раствора, полученного в [испытании](#p100051) "Количественное определение", и выпаривают до объема около 5 мл, к остатку прибавляют 5 мл спирта 96%. Полученный раствор перемешивают, отстаивают в течение 10 мин и фильтруют через беззольный фильтр. К фильтрату прибавляют 5 мл хлористоводородной кислоты разведенной 10%, 10 мл воды и нагревают в колбе с обратным холодильником на водяной бане в течение 3 ч. Полученный раствор охлаждают, фильтруют через беззольный фильтр. К фильтрату прибавляют 10 мл воды и извлекают агликоны флавоноидных соединений этилацетатом 3 раза по 10 мл. Извлечения объединяют и упаривают на водяной бане досуха. Сухой остаток растворяют в 5 мл спирта 96%.*
<a id="p100032"></a>*Раствор биоханина А. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг биоханина А, растворяют в спирте 96% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.*
<a id="p100033"></a>*На линию старта пластинки полосами длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят 40 мкл испытуемого раствора и 5 мкл раствора биоханина А. Пластинку с нанесенными пробами высушивают при температуре около 60 °C в течение 5 мин и помещают в предварительно насыщенную в течение не менее 2 - 3 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.*
<a id="p100034"></a>*Результат. На хроматограмме раствора биоханина А в нижней трети пластинки должна обнаруживаться темная зона гашения.*
<a id="p100035"></a>*На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться две темные зоны гашения, над ними темная зона гашения на уровне зоны адсорбции биоханина А, выше темная зона гашения; допускается обнаружение дополнительных зон адсорбции.*

## <a id="p100036"></a>ИСПЫТАНИЯ

<a id="p100037"></a>*Влажность. Не более 14,0% ([ОФС](https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-5-3-0007) "Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения").*
<a id="p100038"></a>*Зола общая. Не более 12,0% ([ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-2-2-2-0013) "Зола общая").*
<a id="p100039"></a>*Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 2,0% ([ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-5-3-0005) "Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте").*
<a id="p100040"></a>*Измельченность сырья. Определение проводят в соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-5-3-0004) "Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах".*
<a id="p100041"></a>*Измельченное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, - не более 5%; измельченных частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, - не более 5%.*
<a id="p100042"></a>*Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-5-3-0004) "Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах".*
<a id="p100043"></a>*Почерневшие и потемневшие листья выцветших цветков. Не более 8%.*
<a id="p100044"></a>*Органическая примесь. Не более 5%.*
<a id="p100045"></a>*Минеральная примесь. Не более 1,5%.*
<a id="p100046"></a>*Тяжелые металлы и мышьяк. В соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-5-3-0009) "Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах".*
<a id="p100047"></a>*Радионуклиды. В соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-5-3-0001) "Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах".*
<a id="p100048"></a>*Остаточные количества пестицидов. В соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-5-3-0011) "Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах".*
<a id="p100049"></a>*Зараженность вредителями запасов. В соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-5-3-0002) "Определение степени зараженности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов".*
<a id="p100050"></a>*Микробиологическая чистота. В соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/gf-xiv-minzdrav-rossii-ministerstvo-29) "Микробиологическая чистота".*

## <a id="p100051"></a>КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

<a id="p100052"></a>Сумма флавоноидов. Определение проводят методом спектрофотометрии ([ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-2-1-1-0003) "Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях").
<a id="p100053"></a>Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с размером отверстий 1 мм. В колбу со шлифом вместимостью 100 мл помещают 1,0 г (точная навеска) измельченного сырья, прибавляют 30 мл спирта 70%, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 30 мин. Горячее извлечение процеживают через вату в мерную колбу вместимостью 100 мл. Использованную вату помещают в колбу для экстрагирования. Экстракцию повторяют еще дважды в описанных выше условиях, фильтруя извлечения в ту же мерную колбу. После охлаждения объем извлечения доводят спиртом 70% до метки и фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 10 мл фильтрата.
<a id="p100054"></a>Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл исходного раствора, прибавляют 10 мл спирта 96%, 2 мл алюминия хлорида раствора 2% в спирте 96%, выдерживают в течение 10 мин, прибавляют 0,1 мл уксусной кислоты разведенной 30% и доводят объем раствора спиртом 96% до метки.
<a id="p100055"></a>Исходный раствор стандартного образца рутина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,05 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца рутина, растворяют в спирте 96% при нагревании на водяной бане, охлаждают и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
<a id="p100056"></a>Раствор стандартного образца рутина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора стандартного образца рутина, прибавляют 10 мл спирта 96%, 2 мл алюминия хлорида раствора 2% в спирте 96%, выдерживают в течение 10 мин, прибавляют 0,1 мл уксусной кислоты разведенной 30% и доводят объем раствора спиртом 96% до метки. Раствор используют свежеприготовленным.
<a id="p100057"></a>Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл исходного раствора, прибавляют 0,1 мл уксусной кислоты разведенной 30% и доводят объем раствора спиртом 96% до метки.
<a id="p100058"></a>Раствор сравнения стандартного образца рутина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора стандартного образца рутина, прибавляют 0,1 мл уксусной кислоты разведенной 30% и доводят объем раствора спиртом 96% до метки.
<a id="p100059"></a>Через 30 мин измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 410 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.
<a id="p100060"></a>Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца рутина в указанных выше условиях относительно раствора сравнения стандартного образца рутина.
<a id="p100061"></a>Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в сухом сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

<a id="p100062"></a> $X = \frac{A_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 100 \cdot 1 \cdot 25 \cdot 100 \cdot 100}{A_{0} \cdot a_{1} \cdot (100 - W) \cdot 100 \cdot 2 \cdot 25 \cdot 100}$ ,

<a id="p100063"></a>где A1 - оптическая плотность испытуемого раствора;
<a id="p100064"></a>A0 - оптическая плотность раствора стандартного образца рутина;
<a id="p100065"></a>a1 - навеска сырья, г;
<a id="p100066"></a>a0 - навеска фармакопейного стандартного образца рутина, г;
<a id="p100067"></a>P - содержание рутина в фармакопейном стандартном образце рутина, %;
<a id="p100068"></a>W - влажность сырья, %.
<a id="p100069"></a>Экстрактивные вещества. Определение проводят в соответствии с ОФС "Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах" ([метод 1](https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-5-3-0006#p100013), экстрагент - спирт 40%).

## <a id="p100070"></a>УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

<a id="p100071"></a>В соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-1-0019) "Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов".

## <a id="p100072"></a>ХРАНЕНИЕ

<a id="p100073"></a>В соответствии с [ОФС](https://bukva.ai/docs/ofs-1-1-0011) "Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов".



<a id="p100074"></a>

---