ФС.2.5.0068.18. Фармакопейная статья. Горца почечуйного трава

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том IV»)

ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

flowchart LR
  n0["Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск..."]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/gf-xi-minzdrav-sssr-ministerstvo" "Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье"
  n1["ФС.2.5.0068.18"]:::doc
  click n1 "https://bukva.ai/docs/prikaz-fs-2-5-0068-18" "ФС.2.5.0068.18. Фармакопейная статья. Горца почечуйного трава (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)"
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;

Горца почечуйного трава

ПОДЛИННОСТЬ

Внешние признаки. Цельное сырье. Цельные или частично измельченные цветоносные олиственные побеги длиной до 40 см без грубых нижних частей, с плодами разной степени зрелости. Стебли ветвистые или простые, продольно-бороздчатые, со вздутыми узлами. Листья очередные, короткочерешковые, ланцетные, длинно-заостренные с клиновидным основанием, на верхней стороне с темным пятном или без него, цельнокрайние, длиной до 16 см, шириной до 2,5 см. Находящиеся при основании черешков листьев пленчатые раструбы покрыты прижатыми волосками и плотно охватывают стебли, по верхнему краю с ресничками длиной от 0,2 до 4,5 мм. Соцветия верхушечные, густые колосовидные кисти. Цветки мелкие, с простым глубоко 4 — 5-рассеченным околоцветником, длиной около 2 — 3,5 мм. Доли околоцветника и цветонос с единичными железками (под лупой). Плоды трехгранные, чечевицеобразные или плоские с одной или с обеих сторон, орешки длиной 2,2 — 2,9 мм, шириной 1,6 — 2 мм, блестящие, черные или темно-коричневые.

Цвет стеблей зеленый, иногда с коричневатым оттенком; листьев с верхней стороны зеленый, с нижней — серовато-зеленый; околоцветника — розовый, реже белый, при основании зеленоватый. Запах отсутствует. Вкус водного извлечения горьковатый.

Измельченное сырье. Кусочки стеблей, листьев, соцветий различной формы, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

При рассмотрении измельченного сырья под лупой (10x) или стереомикроскопом (16x) видны: кусочки цветоносов и стеблей, чаще в продольном сечении, желтоватые в изломе, снаружи от светло-зеленого до коричневого цвета; кусочки листьев от серовато-зеленого до коричневого цвета; части бутонов желтовато-коричневого цвета; лепестки, их кусочки желтого, беловато-желтого и желто-коричневого цвета; отдельные чашелистики и их части, изредка — недозрелые плоды зеленовато-коричневого цвета.

Цвет от серовато- или желтовато-зеленого до темно-зеленого, с зеленовато-желтыми, желтыми, зеленовато-коричневыми, редко — розовато-фиолетовыми и коричневыми вкраплениями. Запах отсутствует. Вкус водного извлечения горьковатый.

Порошок. Кусочки стеблей, листьев, соцветий, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 2 мм.

При рассмотрении порошка под лупой (10x) или стереомикроскопом (16x) видны: кусочки цветоносов и стеблей, чаще в продольном сечении, беловатые в изломе, снаружи — от светло-зеленого до коричневого цвета; кусочки листьев от серовато-зеленого до коричневого цвета; части бутонов желтовато-коричневого цвета; лепестки, их кусочки желтого, беловато-желтого и желто-коричневого цвета; отдельные чашелистики и их части, изредка — недозрелые плоды зеленовато-коричневого цвета.

Цвет от серовато-зеленого до темно-зеленого и зеленовато-коричневого с многочисленными белыми, желтовато-белыми, желтыми и коричневыми вкраплениями. Запах отсутствует, вкус водного извлечения горьковатый.

Микроскопические признаки. Цельное сырье, измельченное сырье. При рассмотрении листа с поверхности должны быть видны клетки верхнего эпидермиса с прямыми стенками, нижнего — с извилистыми. Устьица с 2 — 4 околоустьичными клетками, иногда они окружены двумя клетками, расположенными вдоль устьичной щели (аномоцитный тип). На обеих поверхностях листа имеются железки на 2 — 4-клеточной ножке с головкой из 8 (12 — 16) клеток, реже с 2 — 4-клеточной головкой с бурым содержимым или бесцветные. По всей пластинке листа и по краю встречаются пучковые волоски, образованные 2 — 5 сросшимися клетками, которые на верхушке волоска часто слегка расходятся. В мезофилле листа крупные друзы оксалата кальция. На эпидермисе стебля и раструба, кроме вышеперечисленных признаков, имеются длинные, многоклеточные реснитчатые волоски по краю раструба, пучковые волоски по всей поверхности раструба, имеющие многоклеточное основание, часто остающееся при обламывании волосков, и пленчатые волоски, состоящие из нескольких рядов клеток и имеющие 2-клеточное основание. В ткани околоцветника — призматические кристаллы оксалата кальция.

На поверхности фрагментов листа должны быть железки на 2 — 4-клеточной ножке с головкой из 8 (12 — 16) клеток, реже с 2 — 4-клеточной головкой с бурым содержимым или бесцветные. По поверхности фрагмента пластинки листа и по краю должны встречаться пучковые волоски, образованные 2 — 5 сросшимися клетками, которые на верхушке волоска часто слегка расходятся. В мезофилле фрагментов листа должны быть крупные друзы оксалата кальция. На фрагментах эпидермиса стебля и раструба, которые, кроме вышеперечисленных признаков, должны быть реснитчатые волоски и пленчатые волоски, состоящие из нескольких рядов клеток и имеющие 2-клеточное основание. На фрагментах ткани околоцветника должны быть призматические кристаллы оксалата кальция.

и железкой (100x), 7 — фрагмент раструба: реснитчатые

пучковые и пленчатые волоски (100x).

Определение основных групп биологически активных веществ

Приготовление растворов.

Раствор СО рутина. Около 0,005 г СО рутина (рутина тригидрата) растворяют в 10 мл спирта 96% и перемешивают. Срок годности раствора не более 3 месяцев при хранении в прохладном, защищенном от света месте.

Тонкослойная хроматография

На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля с флуоресцентным индикатором наносят 5 мкл (0,005 мл) испытуемого раствора А (см. раздел «Количественное определение»), рядом — 5 мкл (0,005 мл) раствора СО рутина. Пластинку с нанесенными пробами сушат, помещают в камеру со смесью растворителей (без предварительного насыщения) этилацетат — муравьиная кислота безводная — вода (10:2:3) и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

На хроматограмме раствора СО рутина должна обнаруживаться зона адсорбции сине-фиолетового цвета.

На хроматограмме раствора А должна обнаруживаться сине-фиолетовая зона адсорбции на уровне зоны адсорбции СО рутина, одна зона адсорбции сине-фиолетового цвета ниже зоны адсорбции СО рутина, две зоны адсорбции сине-фиолетового цвета выше зоны адсорбции СО рутина (флавоноиды).

Затем пластинку обрабатывают алюминия хлорида спиртовым раствором 1%, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100 — 105 °C в течение 2 — 3 мин и просматривают УФ-свете при длине волны 365 нм.

На хроматограмме раствора СО рутина должна обнаруживаться зона адсорбции с флюоресценцией желто-зеленого цвета.

На хроматограмме раствора А должны обнаруживаться зоны адсорбции с желто-зеленой флюоресценцией: одна — на уровне зоны адсорбции СО рутина, одна — ниже зоны адсорбции СО рутина и две зоны выше зоны адсорбции СО рутина (флавоноиды).

2,5 г измельченного сырья помещают в колбу вместимостью 250 мл, заливают 50 мл кипящей воды и кипятят на плитке в течение 5 мин, полученное извлечение фильтруют через складчатый фильтр. К 1 — 3 мл фильтрата прибавляют 1 мл железа(III) аммония сульфата раствора 1%; должно наблюдаться черно-синее окрашивание (дубильные вещества).

ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок — не более 13%.

Зола общая. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок — не более 10%.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок — не более 1%.

Измельченность сырья. Цельное сырье: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм — не более 5%. Измельченное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, — не более 5%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, — не более 5%. Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, — не более 5%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, — не более 5%.

Посторонние примеси

Сырье, изменившее окраску (потемневшее, почерневшее.) Цельное сырье, измельченное сырье — не более 3%.

Органическая примесь. Цельное сырье, измельченное сырье — не более 3%.

Минеральная примесь. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок — не более 1%.

Тяжелые металлы и мышьяк. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок. Суммы флавоноидов в пересчете на рутин — не менее 0,9%; экстрактивных веществ, извлекаемых 50% спиртом, — не менее 19%.

Приготовление растворов.

Раствор СО рутина. Около 0,05 г (точная навеска) СО рутина, предварительно высушенного при температуре 130 — 135 °C в течение 3 ч, растворяют в 85 мл спирта 96% в мерной колбе вместимостью 100 мл при нагревании на водяной бане, охлаждают, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора тем же спиртом до метки и перемешивают (раствор А СО рутина). Раствор используют свежеприготовленным.

Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. Около 1,0 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу со шлифом вместимостью 250 мл, прибавляют 50 мл спирта 70%. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 60 мин, периодически встряхивая для смывания частиц сырья со стенок. Горячее извлечение фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 50 мл так, чтобы частицы сырья не попадали на фильтр. После охлаждения до комнатной температуры объем извлечения доводят спиртом 70% до метки и перемешивают (раствор А испытуемого раствора).

1,0 мл раствора А испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 0,5 мл уксусной кислоты разведенной 30%, 1 мл алюминия хлорида спиртового раствора 2%, доводят объем раствора спиртом 96% до метки и перемешивают (раствор Б испытуемого раствора).

Через 40 мин измеряют оптическую плотность раствора Б испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 408 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор, состоящий из 1 мл раствора А, 0,5 мл уксусной кислоты разведенной 30%, доведенный спиртом 96% до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл.

Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в абсолютно сухом сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{A \cdot a_{0} \cdot 50 \cdot 1 \cdot 25 \cdot 100 \cdot P \cdot 100}{A_{0} \cdot a \cdot 100 \cdot 1 \cdot 25 \cdot (100 - W) \cdot 100} = \frac{A \cdot a_{0} \cdot 50 \cdot P}{A_{0} \cdot a \cdot (100 - W) \cdot} ,

где: A — оптическая плотность раствора Б испытуемого раствора;

A0 — оптическая плотность раствора Б СО рутина;

a — навеска сырья, г;

a0 — навеска СО рутина, г;

P — содержание основного вещества в СО рутина, %;

W — влажность сырья, %.

Допускается содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в абсолютно сухом сырье вычислять с использованием удельного показателя поглощения комплекса рутина с алюминия хлоридом по формуле:

X = \frac{A \cdot 50 \cdot 25 \cdot 100}{A_{1\text{см}}^{1\%} \cdot a \cdot 1 \cdot (100 - W)} = \frac{A \cdot 125000}{A_{1\text{см}}^{1\%} \cdot a \cdot 1 \cdot (100 - W)} ,

где A — оптическая плотность раствора Б испытуемого раствора;

A_{1\text{см}}^{1\%} — удельный показатель поглощения комплекса рутина с алюминия хлоридом при длине волны 408 нм, равный 248;

a — навеска сырья, г;

W — влажность сырья, %.

Экстрактивные вещества. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» (метод 1, навеска 1,0 г сырья, измельченного до величины частиц 1 мм, экстрагент — спирт 50%).

Примечание. Определение суммы флавоноидов в пересчете на рутин проводят в сырье, предназначенном для производства лекарственных растительных препаратов (пачки, фильтр-пакеты); определение экстрактивных веществ, извлекаемых спиртом 50%, проводят для сырья, предназначенного для производства экстрактов.

Упаковка, маркировка и транспортирование. В соответствии с требованиями ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».