---
title: "<Письмо> Минздравсоцразвития России от 10.10.2008 N 15-4/3118-09"
number: "15-4/3118-09"
issuer: "Министерство здравоохранения и социального развития Российской Федерации"
issued_on: 2008-10-10
status: утратил силу
canonical: "https://bukva.ai/docs/pismo-15-43118-09"
---

## <Письмо> Минздравсоцразвития России от 10.10.2008 N 15-4/3118-09

# <Письмо> Минздравсоцразвития России от 10.10.2008 N 15-4/3118-09

"О порядке проведения иммуногематологических исследований у беременных, рожениц, плодов и новорожденных"

> [!WARNING]
> Документ утратил силу в связи с изданием [Приказа](https://bukva.ai/docs/prikaz-702-2020-minzdrav-rossii-ministerstvo#p100020) Минздрава России от 14.07.2020 N 702.


<a id="p100001"></a>**МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И СОЦИАЛЬНОГО РАЗВИТИЯ**
**РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ**


## <a id="p100002"></a>ПИСЬМО

от 10 октября 2008 г. N 15-4/3118-09

<a id="p100003"></a>**О ПОРЯДКЕ ПРОВЕДЕНИЯ ИММУНОГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ**
**У БЕРЕМЕННЫХ, РОЖЕНИЦ, ПЛОДОВ И НОВОРОЖДЕННЫХ**

<a id="p100004"></a>Департамент развития медицинской помощи детям и службы родовспоможения направляет методическое [письмо](#p100006) "Порядок проведения иммуногематологических исследований у беременных, рожениц, плодов и новорожденных" для использования в работе лечебно-профилактических учреждений, оказывающих медицинскую помощь беременным, роженицам и новорожденным.

<div align="right">

<a id="p100005"></a>Директор Департамента<br>
**В.И.ШИРОКОВА**

</div>






<a id="p100006"></a>**МЕТОДИЧЕСКОЕ ПИСЬМО**

<a id="p100007"></a>**ПОРЯДОК ПРОВЕДЕНИЯ ИММУНОГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ**
**У БЕРЕМЕННЫХ, РОЖЕНИЦ, ПЛОДОВ И НОВОРОЖДЕННЫХ**

<a id="p100008"></a>Предложена система методических и организационных требований к проведению иммуногематологических исследований у беременных женщин, плодов и новорожденных, применение которой повышает достоверность диагностики иммунологических конфликтов мать - плод, обусловленных несовместимостью по антигенам эритроцитов, а также обеспечивает подбор крови для заменных трансфузий новорожденным с учетом специфичности антител матери.
<a id="p100009"></a>Настоящее методическое письмо подготовили специалисты Федерального государственного учреждения "Российский НИИ гематологии и трансфузиологии" Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи (г. Санкт-Петербург)", Гематологического научного центра (г. Москва), Государственного учреждения НИИ акушерства и гинекологии им. Д.О. Отта РАМН (г. Санкт-Петербург), Государственного учреждения здравоохранения "Краевая клиническая больница N 1 им. С.В. Очаповского" (г. Краснодар).


### <a id="p100010"></a>СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ


<a id="p100011"></a>АГТ  - антиглобулиновый тест (реакция Кумбса)
<a id="p100012"></a>ГБ   - гемолитическая болезнь
<a id="p100013"></a>ГБН  - гемолитическая болезнь новорожденного
<a id="p100014"></a>ГБП  - гемолитическая болезнь плода
<a id="p100015"></a>НАГТ - непрямой антиглобулиновый тест
<a id="p100016"></a>ПАГТ - прямой антиглобулиновый тест
<a id="p100017"></a>СЗП  - свежезамороженная плазма
<a id="p100018"></a>НИИ  - научно-исследовательский институт
<a id="p100019"></a>СПК  - станция переливания крови
<a id="p100020"></a>ОПК  - отделение переливания крови


### <a id="p100021"></a>ВВЕДЕНИЕ


<a id="p100022"></a>Основное значение в развитии гемолитической болезни у плода (ГБП) и в последующем у новорожденного (ГБН) имеют антитела матери - иммуноглобулины класса G, которые легко проникают через плацентарный барьер и попадают в кровоток плода. Аллоантитела матери, имеющие специфичность к антигенам эритроцитов плода, разрушают его эритроциты или угнетают гемопоэз. Уровень гемолиза эритроцитов плода и новорожденного зависит от специфичности антител, их концентрации, а также от выраженности антигенов на эритроцитах.
<a id="p100023"></a>Несмотря на достижения в перинатальной диагностике, профилактике и лечении, полностью предупредить заболеваемость и смертность детей от гемолитической болезни (ГБ) не удается. Иммуногематологические исследования у матери, плода и новорожденного помогают прогнозировать возможность развития и тяжесть ГБ, оптимизировать проведение гемотрансфузионной терапии плодов и новорожденных, а также осуществить подбор гемотрансфузионных сред женщине.


### <a id="p100024"></a>А. Организационные требования

<a id="p100025"></a>А.1. Иммуногематологические исследования проводят:
- <a id="p100026"></a>в кабинетах, отделениях переливания крови, клинико-диагностических лабораториях родовспомогательных учреждений, лечебных учреждений гинекологического и педиатрического профиля;
- <a id="p100027"></a>в централизованных лабораториях (городских, областных, региональных), организованных на базе ОПК, СПК или НИИ гематологии и трансфузиологии.
<a id="p100028"></a>[Перечень](#p100188) иммуногематологических исследований приведен в Приложении 1.
<a id="p100029"></a>А.1.1. В женских консультациях исследование AB0 и резус-принадлежности крови проводит врач-лаборант клинико-диагностической лаборатории дважды разными сериями реактивов или разными методами (допускается первое исследование проводить специалистам со средним образованием). Исследование антител проводит врач-лаборант.
<a id="p100030"></a>В родовспомогательных учреждениях, а также при стационарном (или амбулаторном) лечении взрослых или детей первичное исследование группы крови AB0 проводит врач клинического отделения. Подтверждающие исследования (определение группы крови по системе AB0, определение резус-принадлежности), а также исследование аллоантител и индивидуальный подбор крови проводятся централизованно в лаборатории.
<a id="p100031"></a>А.1.2. Централизованные лаборатории и иммуногематологические отделы СПК консультируют ЛПУ по вопросам определения специфичности аллоантител, сложнодиагностируемых групп крови, проводят индивидуальные подборы крови сенсибилизированным беременным и роженицам, а также плодам и новорожденным.
<a id="p100032"></a>А.1.3. Лаборатории, осуществляющие иммуногематологические исследования, должны принимать участие в Федеральной системе внешней оценки качества (ФСВОК) по разделу "Иммуногематология".
<a id="p100033"></a>А.2. Требования к оборудованию, реактивам и методам исследования. Все применяемые методики и реактивы должны быть разрешены к применению Министерством здравоохранения и социального развития Российской Федерации. Подробный перечень оборудования, реактивов и методик приведен в Приказе МЗ РФ N 2 от 09.01.98 и инструкциях по применению, прилагаемых к реактивам.
<a id="p100034"></a>Минимальный набор оборудования для выполнения иммуногематологических исследований: термостаты на +37 °С и на +46° - 48 °С (или водяная баня), лабораторная центрифуга для пробирок, микроскоп, сушильный шкаф, рефрижератор +4° - 8 °С, тарелки или планшеты, пробирки и штативы для них, таймер, пипетки, предметные стекла, термометры, лупа пяти- или восьмикратного увеличения.
<a id="p100035"></a>А.3. Порядок документирования исследований приведен в [Приложении 1](#p100188). Необходимая документация:
- <a id="p100036"></a>[журнал](#p100195) регистрации иммуногематологических исследований у беременных, рожениц и новорожденных (Приложение 2);
- <a id="p100037"></a>бланки "Направления на исследование и результаты исследования в лаборатории", а также бланки ответов о результатах исследования антител, выдаваемые на руки женщинам [(Приложение 3)](#p100203);
- <a id="p100038"></a>журнал регистрации учебных занятий с медперсоналом по вопросам иммуногематологии.
<a id="p100039"></a>А.4. Требования к персоналу. Врачебный и средний медперсонал, осуществляющий иммуногематологические исследования, должен иметь специальную подготовку по вопросам иммуногематологии. Подготовка специалистов проводится на рабочем месте и на специализированных циклах обучения в институтах постдипломного образования или профильных НИИ.


### <a id="p100040"></a>ПОРЯДОК ПРОВЕДЕНИЯ ИММУНОГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ



#### <a id="p100041"></a>Б. Иммуногематологические исследования у беременных

<a id="p100042"></a>Б.1. Требования к образцам крови, взятым для исследования.
<a id="p100043"></a>Кровь на исследование берут из вены в сухую пробирку без консерванта в количестве 8 - 10 мл. Пробирку с кровью маркируют в присутствии пациентки [указывают фамилию, имя, отчество (полностью), дату рождения, дату взятия крови, номер обменной карты или истории родов, наименование лечебного учреждения и отделения]. Одновременно оформляют направление на исследование. Кровь годна для проведения исследования в течение 3 дней при условии хранения при +4° - 8 °С.
<a id="p100044"></a>Б.2. Исследование групповой принадлежности крови по системе AB0. Первичное определение группы крови проводят моноклональными антителами или стандартными изогемагглютинирующими сыворотками. Подтверждающее исследование группы крови AB0 проводят в лаборатории перекрестным способом на плоскости или агглютинацией в геле. Для исследования используют стандартные эритроциты 0, A и B и реактивы на основе моноклональных антител или стандартные изогемагглютинирующие сыворотки анти-A, анти-B, анти-AB. Заключение о групповой принадлежности делают на основании первичного и подтверждающего исследований группы крови женщины.
<a id="p100045"></a>Б.3. Определение резус-принадлежности крови беременных.
<a id="p100046"></a>    Б.3.1.  Резус-принадлежность  крови беременных определяют двумя сериями
реактивов  анти-D  следующими методами: методом в пробирках без подогрева с
использованием  универсального  реагента  анти-D,  методом  агглютинации на
плоскости  с  применением  моноклональных  антител (реактив цоликлон анти-D
супер),   методом   конглютинации   в   пробирках   с   желатином  или  33%
полиглюкином,   гелевым   методом,   антиглобулиновым   тестом   (АГТ)    с
использованием   сыворотки  анти-D.  Для  исключения  ложноположительных  и
ложноотрицательных  результатов  используют  соответствующие  контроли. При
использовании  реагентов,  приготовленных на основе моноклональных антител,
необходимо учитывать, что реагенты типа "Цоликлон анти-D супер", содержащие
антитела  класса  иммуноглобулинов  M,  не  выявляют  варианты  антигена  D
             VI
(например,  D  ), а также некоторые образцы D слабого антигена. Поэтому все
образцы  крови  беременных,  показавшие отрицательный результат с реактивом
"Цоликлон  анти-D  супер",  дополнительно  исследуют  с  реактивом  анти-D,
содержащим   неполные  антитела  (иммуноглобулины  класса  G),  желатиновым
методом,  экспресс-методом  в пробирках с 33% полиглюкином, агглютинацией в
геле или антиглобулиновым тестом (реакцией Кумбса).
<a id="p100047"></a>Б.3.2. В труднодиагностируемых случаях определения резус-принадлежности крови (расхождение в результатах при использовании разных методов и реактивов) проводят непрямой антиглобулиновый тест (НАГТ).
<a id="p100048"></a>Антиген D слабый обычно хорошо выявляется в АГТ (характер реакции агглютинации от 1+ до 3+). Резус-принадлежность крови беременных, имеющих антиген D слабый, считается положительной.
<a id="p100049"></a>Б.3.3. Диагностика D вариантного (D partial) антигена проводят при необходимости, при этом используют специальную тест-систему DiaMed с применением гелевого метода. Если у беременной женщины выявлен D вариантный антиген, то резус-принадлежность считается отрицательной, так как лица, имеющие указанный антиген, при беременности плодом с резус-положительной принадлежностью эритроцитов могут выработать анти-D антитела.
<a id="p100050"></a>Б.4. Определение аллоантител у беременных.
<a id="p100051"></a>Сыворотки всех беременных исследуют на наличие антител к антигенам эритроцитов независимо от резус-принадлежности крови. Исследование аллоантител проводят в два этапа: скрининг антител и идентификация (определение специфичности) выявленных при скрининге антител.
<a id="p100052"></a>Б.4.1. Тесты, применяемые для скрининга антител, должны выявлять клинически значимые антитела: метод с применением 10% желатина с микроскопированием результата, антиглобулиновый тест при +37 °С либо его модификация (с раствором низкой ионной силы соли, гелевый тест). Наиболее чувствительным является метод агглютинации в геле.
<a id="p100053"></a>    Б.4.2.  Для скрининга антител используют три образца эритроцитов группы
                                        +
0  фенотипов:   ccDEEK,  CCDeeK,  ccdeeK . Эритроциты в панели должны также
                        a     b      a    b
содержать  антигены:  Fy ,  Fy ,  Jk ,  Jk , S, s (желательно гомозиготы по
соответствующим генам).
<a id="p100054"></a>    Б.4.3.  Определение  специфичности  антител,  выявленных  при скрининге
(идентификация):   для   установления   специфичности   антител  необходимо
использовать  панель  эритроцитов,  включающую не менее 10 образцов. Панель
стандартных  эритроцитов  должна  состоять  из  такого сочетания фенотипов,
которое  позволяет  определить  специфичности  основных клинически значимых
антител:  моноспецифических и полиспецифических анти-D, -C, -c, -E, -e, -K,
       a     b     a     b
-k, -Fy , -Fy , -Jk , -Jk , -S, -s, -M.
<a id="p100055"></a>Б.4.4. При установлении специфичности антител в сложнодиагностируемых случаях целесообразно проводить типирование антигенов эритроцитов беременной и отца ребенка.
<a id="p100056"></a>Б.4.5. Титрование антител. Определение титра и специфичности антител, наряду с данными об УЗ-маркерах ГБП и акушерского анамнеза, помогает решить вопрос о необходимости и времени проведения инвазивных исследований.
<a id="p100057"></a>Б.4.5.1. Титрование антител проводят одним из методов: АГТ в общепринятой постановке, гелевым тестом или методом с применением 10% желатина. Желатиновый метод обычно дает расхождение титров на две - три ступени по сравнению с антиглобулиновым тестом. При использовании желатинового метода для титрования антител не нужно проводить микроскопирование результата. Метод агглютинации в геле дает более высокие титры антител, чем АГТ в обычной постановке.
<a id="p100058"></a>Б.4.5.2. При исследованиях важно выявить возможное повышение титра антител. Величина титра антител, полученная при первом исследовании, рассматривается как базовая. Повышение титра антител на две и более ступеней разведения может являться признаком ГБН.
<a id="p100059"></a>Б.4.5.3. Повторные исследования целесообразно проводить в одной лаборатории одним и тем же методом. Сыворотка крови беременной может сохраняться при +4° - 8 °С (консервированная 0,1% раствором азида натрия) или замораживанием при -10° - -20 °С. Вновь взятые и ранее заготовленные образцы сыворотки можно исследовать одновременно, что позволяет с большей степенью достоверности судить о динамике титра антител.
<a id="p100060"></a>Б.5. Результаты исследования группы крови, резус-принадлежности и аллоантител беременной регистрируют в журнале результатов исследования, вписывают в бланк ответа, который выдается беременной, а также в бланк ответа, который вклеивается в обменную карту беременной или историю родов. Данные о группе крови, резус-принадлежности и аллоантителах выносятся врачом на лицевую страницу обменной карты или истории родов.

<a id="p100061"></a>В. Иммуногематологические исследования отца ребенка проводят:
1. <a id="p100062"></a>При обнаружении у беременной группы крови 0.
2. <a id="p100063"></a>При выявлении у беременной резус-отрицательной принадлежности крови.
3. <a id="p100064"></a>При обнаружении у беременной аллоантител к антигенам эритроцитов.
<a id="p100065"></a>В.1. Кровь отца ребенка исследуют на группу крови, резус-принадлежность и наличие антигенов эритроцитов, к которым у беременной найдены антитела. Определение фенотипа антигенов эритроцитов отца позволяет прогнозировать вероятность иммунологического конфликта "мать - плод" по антигенам эритроцитов и начать раннюю профилактику гемолитической болезни плода (если мать не сенсибилизирована к антигену D).


#### <a id="p100066"></a>Г. Алгоритм иммуногематологических исследований у женщин во время беременности

<a id="p100067"></a>Перед проведением иммуногематологических исследований собирают акушерский и трансфузионный анамнез. Наличие предшествующих беременностей, их неблагоприятный исход (выкидыши, мертворождение, рождение детей с ГБН), а также наличие в анамнезе гемотрансфузий выделяет данную категорию женщин в группу риска в отношении развития ГБП. Данные об акушерском и трансфузионном анамнезе вносят в карту иммуногематологического обследования беременной, обменную карту и в историю родов.
<a id="p100068"></a>Г.1. При первом обращении беременных в консультацию у них исследуют группу и резус-принадлежность крови. Для исключения ошибок в определении группы крови и резус-принадлежности всем беременным повторяют исследования в 28 - 30 недель беременности. При несовпадении результатов первого и повторного исследования кровь направляют на исследование в централизованную лабораторию или на станцию переливания крови.
<a id="p100069"></a>Г.2. Одновременно с определением групповой и резус-принадлежности крови проводят исследование антител к антигенам эритроцитов системы Резус и другим клинически значимым системам антигенов эритроцитов (скрининг антител). Исследование проводят независимо от резус-принадлежности крови беременной: как у лиц с резус-отрицательной, так и резус-положительной принадлежностью крови. Беременным с D-положительной принадлежностью крови, у которых антитела не выявились при первом обращении в консультацию, проводят повторное исследование в 28 - 30 недель.
<a id="p100070"></a>Г.2.1. Если скрининг антител дал положительный результат, то проводят идентификацию антител. Клиническое значение в развитии ГБП имеют только IgG антитела. IgM антитела не вызывают ГБ плода и новорожденного, так как они имеют большую молекулярную массу и не проходят через плаценту. Если у беременной выявлены IgM антитела и специфичность антител направлена к антигенам, которые могут вызывать ГБ, необходимо в последующем проводить выявление антител в динамике, так как с увеличением срока беременности дополнительно к IgM могут выработаться IgG антитела (особенно при наличии акушерских и экстрагенитальных заболеваний у беременной).
<a id="p100071"></a>Г.2.2. При необходимости исследуют принадлежность антител матери к субклассам IgG с использованием диагностической системы DiaMed (Швейцария). Если в сыворотке присутствуют только IgG1 антитела, то интенсивность гемолиза эритроцитов у плода и новорожденного будет зависеть от титра антител. Если присутствуют только IgG3 антитела - гемолиз не будет зависеть от титра антител.
<a id="p100072"></a>В таблице 1 перечислены антитела к антигенам эритроцитов, вызывающие и не вызывающие развитие ГБП и ГБН.

<div align="right">

<a id="p100073"></a>Таблица 1

</div>



| Система антигенов эритроцитов | Антитела часто вызывают ГБН | Антитела могут вызвать ГБН | Антитела не вызывают ГБН |
| --- | --- | --- | --- |
| AB0 | анти-A, -B |  | анти-A 1 |
| MNS | анти-S, -s, -U | анти-M | анти-N |
| P |  |  | анти-P1 |
| Резус | анти-D, -c, -C, w -C , -E, -e, -G |  |  |
| Лютеран |  | a b анти-Lu , -Lu |  |
| Келл | анти-K, -k | b анти-Kp |  |
| Левис |  |  | a b анти-Le , -Le |
| Даффи | a анти-Fy | b анти-Fy |  |
| Кидд |  | a b анти-Jk , -Jk |  |


<a id="p100084"></a>Г.3. Беременным с группой крови 0, A, B, имеющим супруга с иной группой крови, проводят выявление IgG антител системы AB0. Для исследования используют метод с применением унитиола [(Приложение 4)](#p100234).
<a id="p100085"></a>Г.4. Сроки исследования антител. Исследование сывороток крови женщин на наличие антител проводят несколько раз в течение беременности. Первое исследование проводят при первичном обращении в женскую консультацию. Последующие исследования приведены на схеме 1.

<div align="right">

<a id="p100086"></a>Схема 1

</div>


<div align="center">

<a id="p100087"></a>**ИММУНОГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ У БЕРЕМЕННЫХ**

</div>



```text
          ┌─────────────────────────────────────────────────────┐
          │Определение группы крови, Rh-принадлежности, скрининг│<───────┐
          │  антител при первичном обращении в 28 - 30 недель   │        │
          └─────────────────────────────────────────────────────┘        │
            ┌──────────────────────────────────────────────────┐         │
            │Скрининг и идентификация антител беременных женщин│         │
            └────────┬───────────────────────────────────┬─────┘         │
                     \/                                  \/              │
         ┌──────────────────────┐              ┌──────────────────────┐  │
┌───────>│ Сенсибилизированные  │              │Несенсибилизированные │  │
│        │ (антитела выявлены)  │              │(антитела не выявлены)│  │
│        └┬──────────┬─────────┬┘              └─────┬──────────────┬─┘  │
│         \/         \/        \/                    \/             \/   │
│┌────────────┐ ┌───────────┐ ┌───────────┐  ┌────────────────┐ ┌────────┴┐
││К антигенам │ │К антигенам│ │К антигенам│  │ Женщины группы │ │Остальные│
││системы Rh и│ │др. систем │ │системы AB0│  │     риска:     │ │ женщины │
││др. (клинич.│ │клинически │ └────┬─────┬┘  │  возможность   │ └─────────┘
││значимым)   │ │незначимым │      │     │   │ сенсибилизации │
│└┬──────┬────┘ └─────┬─────┘      │     │   │при беременности│
│ │      │            │            │     │   └─────┬─────────┬┘
│ │      \/           \/           \/    │         \/        \/
│ │┌──────────┐ ┌──────────┐  ┌─────────┐│   ┌────────────┐ ┌────────┐
│ ││Фенотипи- │ │Исследова-│  │Определе-││   │  Женщины,  │ │  Rh(-) │
│ ││рование   │ │ние анти- │  │ние груп-││   │группа крови│ │женщины,│
│ ││крови отца│ │тел в 28 -│  │пы крови ││   │ которых не │ │имеющие │
│ ││ребенка   │ │30 недель │  │отца     ││   │совпадает с │ │  Rh(+) │
│ │└──────────┘ └──────────┘  │ребенка  ││   │  группой   │ │  мужа  │
│ │                           └─────────┘│   │ крови мужа │ └────┬───┘
│ │                                      │   └───┬────────┘      │
│ \/                                     \/      \/              \/
│┌──────────────┐                    ┌──────────────┐     ┌────────────┐
││ До 32 недель │                    │Контроль титра│     │Исследование│
││контроль титра│                    │ антител в 36 │     │антител в 28│
││   каждые 4   │                    │  недель для  │     │   недель   │
││    недели    │                    │выбора сроков │     └─┬─────────┬┘
│└──────┬───────┘                    │родоразрешения│       │         │
│       \/                           └──────────────┘       \/        \/
│┌──────────────┐                                 ┌────────────┐ ┌────────┐
││После 32 не-  │                                 │Антител нет:│ │Антитела│
││дель контроль │                                 │профилактика│ │  есть  │
││титра каждые 2│                                 │иммуноглобу-│ └────┬───┘
││недели        │                                 │лином анти-D│      │
│└──────────────┘                                 └────────────┘      \/
<──────────────────────────────────────────────────────────────────────
```


<a id="p100089"></a>Всех беременных после первичного исследования на антитела распределяют на две группы: сенсибилизированные и несенсибилизированные.
<a id="p100090"></a>Г.4.1. Сроки исследования антител у сенсибилизированных женщин зависят от специфичности выявленных антител.
<a id="p100091"></a>Г.4.1.1. Женщинам, сенсибилизированным к антигенам эритроцитов системы Резус или имеющим клинически значимые антитела к антигенам других систем, контроль титра антител до 32 недель беременности проводят 1 раз в 4 недели. После 32 недель контроль титра проводят один раз в 2 недели.
<a id="p100092"></a>Г.4.1.2. Контроль титра антител к антигенам эритроцитов системы AB0 проводят при первичном обращении и в 36 недель беременности. Тяжесть ГБ плода и новорожденного, обусловленная AB0 несовместимостью, не коррелирует с титром, поэтому нет необходимости часто исследовать титр антител системы AB0, как это предусмотрено для антител к антигенам эритроцитов системы Резус.
<a id="p100093"></a>Г.4.1.3. Женщинам, у которых выявлены антитела, не имеющие клинического значения, контроль титра антител повторяют в 28 - 30 недель беременности для исключения возможной выработки клинически значимых антител.
<a id="p100094"></a>Г.4.2. Несенсибилизированные женщины распределяются на группы риска (имеющие возможность сенсибилизации при беременности) и остальных женщин, не имеющих антител. Несенсибилизированным женщинам, не входящим в группу риска, исследование антител проводят повторно в 28 - 32 недели.
<a id="p100095"></a>Г.4.2.1. Женщинам, группа крови которых не совпадает с группой крови мужа, контроль титра антител проводят в 36 недель.
<a id="p100096"></a>Г.4.2.2. Несенсибилизированным Rh(-) женщинам, имеющим Rh(+) мужа, исследование антител проводят в 28 недель беременности. При наличии клинических показаний скрининг антител проводят ежемесячно.
<a id="p100097"></a>Г.4.2.3. Несенсибилизированным женщинам, имеющим в анамнезе выкидыши и мертворождения, исследования антител повторяют в 28 - 30 недель.
<a id="p100098"></a>Г.4.2.4. При появлении аллоантител в процессе наблюдения дальнейшие исследования женщине проводятся так же, как и сенсибилизированным беременным.
                                                           VI
<a id="p100099"></a>    Г.4.3.  Беременным с вариантами антигена D (например, D  ) исследования
аллоантител   проводят  так же,  как   беременным   с   резус-отрицательной
принадлежностью крови.
<a id="p100100"></a>Г.5. По результатам исследования для каждой сенсибилизированной беременной или беременной группы повышенного риска аллоиммунизации оформляют карту иммунологического обследования (вклеивают в обменную карту беременной).
<a id="p100101"></a>    Г.6.   Несенсибилизированным   женщинам,   имеющим  резус-отрицательную
принадлежность  крови, вводят иммуноглобулин анти-Rh (D)  для  профилактики
                                                    0
последующей  иммунизации  при  условии,  если  отец ребенка и ребенок имеет
резус-положительную   принадлежность   (двухкратная  пре-  и  постнатальная
профилактика).   Если  ребенок  имеет  резус-отрицательную  принадлежность,
постнатальная профилактика не проводится. Если пренатальная профилактика не
проводилась,  а  ребенок  имеет  резус-положительную  принадлежность крови,
проводят однократную послеродовую профилактику.
<a id="p100102"></a>Сроки введения и дозы препарата определяются в соответствии с инструкциями производителей. При наличии акушерских осложнений профилактика проводится по показаниям.
<a id="p100103"></a>    Исследование  анти-D  антител  после проведения профилактики проводится
отсроченно  и   только  по  клиническим  показаниям.  В  36  -  38   недель
целесообразно  провести у  женщин, получавших  иммуноглобулин  анти-Rh (D),
                                                                      0
исследование  антител  к  антигенам  эритроцитов  другой  специфичности для
обеспечения женщин в случае необходимости совместимыми гемотрансфузиями.
<a id="p100104"></a>    Г.7. Иммуногематологические исследования у беременных, обратившихся для
искусственного  прерывания  беременности.  Перед  искусственным прерыванием
беременности    женщинам    проводят   определение:   группы   крови   AB0,
резус-принадлежности,   антител   к  антигенам  эритроцитов.  Требования  к
проведению  исследований  такие  же, как и для остальных беременных. Если у
женщины   выявлена   резус-отрицательная  принадлежность  крови,  при  этом
антитела   анти-D   отсутствуют,   а   резус-принадлежность   отца  ребенка
положительная   или   неизвестна,   проводят   профилактику  сенсибилизации
иммуноглобулином    анти-Rh D  сразу   после   искусственного    прерывания
                           0
беременности  (не  позднее  48  -  72 часов после прерывания беременности в
зависимости от рекомендаций производителя).


#### <a id="p100105"></a>Д. Иммуногематологические исследования у плода

<a id="p100106"></a>Проводят в специализированных стационарах.


#### <a id="p100107"></a>Е. Иммуногематологическое обследование новорожденного для диагностики конфликта мать - ребенок по антигенам эритроцитов

<a id="p100108"></a>Е.1. Определение группы и резус-принадлежности крови новорожденного позволяет исключить или установить возможность иммунологического конфликта матери и новорожденного. Исследование группы крови проводят изогемагглютинирующими сыворотками или моноклональными антителами. Исследование резус-принадлежности крови новорожденных проводят двумя сериями реактивов анти-D. Необходимо учитывать, что новорожденные, которым проводили внутрипуповинные трансфузии rh-отрицательных эритроцитов, могут иметь в циркуляции до 90% эритроцитов доноров. Это может приводить к ошибочному заключению о резус-принадлежности их крови (как D-отрицательной или слабоположительной).
<a id="p100109"></a>Е.2. Прямой антиглобулиновый тест новорожденным проводят при клинических признаках ГБН, а также родившимся от сенсибилизированных женщин и женщин повышенной группы риска. Для проведения исследования целесообразно использовать моноспецифический анти-IgG реактив взамен полиспецифической антиглобулиновой сыворотки. Положительный результат теста свидетельствует о присутствии на эритроцитах новорожденного фиксированных аллоантител. Прямой антиглобулиновый тест, обычно положительный при ГБН, обусловленной анти-D антителами. При ГБН, вызванной AB0-антителами, ПАГТ может быть слабоположительным или даже отрицательным. У новорожденных, получавших внутриутробные трансфузии, не исключен слабоположительный ПАГТ.
<a id="p100110"></a>Е.3. Выявление IgG антител к антигенам эритроцитов в сыворотке матери и новорожденного. Положительный результат свидетельствует о возможном иммунологическом конфликте мать-новорожденный по антигенам эритроцитов.

<div align="center">

<a id="p100111"></a>**КАРТА ИММУНОГЕМАТОЛОГИЧЕСКОГО ОБСЛЕДОВАНИЯ БЕРЕМЕННЫХ**

</div>


1. <a id="p100112"></a>Наименование учреждения, проводившего исследования
2. <a id="p100113"></a>Ф.И.О. беременной:
3. <a id="p100114"></a>Дата рождения:
4. <a id="p100115"></a>Домашний адрес, тел.:
5. <a id="p100116"></a>Какое учреждение направило на исследование:
6. <a id="p100117"></a>Акушерский анамнез: К-во беременностей -
<a id="p100118"></a>Кол-во выкидышей -     Кол-во мертворождений -
<a id="p100119"></a>Кол-во родов -         Кол-во детей с ГБН -       Абортов -
7. <a id="p100120"></a>Трансфузионный анамнез:

```text
                                                        ┌─┐             ┌─┐
Наличие трансфузий: эритроцит содержащих сред        Да │ │         Нет │ │
                                ┌─┐              ┌─┐    └─┘             └─┘
                    СЗП      Да │ │          Нет │ │
                                └─┘              └─┘
                                ┌─┐              ┌─┐
Гемолитические реакции:      Да │ │          Нет │ │
                                └─┘              └─┘
                                ┌─┐              ┌─┐
Температурные реакции:       Да │ │          Нет │ │
                                └─┘              └─┘
                                ┌─┐              ┌─┐
Негемолитические реакции:    Да │ │          Нет │ │
                                └─┘              └─┘
```

8. <a id="p100126"></a>AB0 и резус-принадлежность беременной -
9. <a id="p100127"></a>Фенотип антигенов эритроцитов беременной -
10. <a id="p100128"></a>Антитела к антигенам эритроцитов в сыворотке беременной:


| Дата исследования | Срок беременности (недели) | Специфичность антител | Титр антител | Учреждение, проводившее исследование |
| --- | --- | --- | --- | --- |
| 1. |  |  |  |  |
| 2. |  |  |  |  |
| 3. |  |  |  |  |
| 4. |  |  |  |  |
| 5. |  |  |  |  |
| 6. |  |  |  |  |


11. <a id="p100136"></a>Исследование крови отца:
<a id="p100137"></a>AB0 и резус-принадлежность -
<a id="p100138"></a>Фенотип антигенов эритроцитов -
12. <a id="p100139"></a>Исследование крови плода (при необходимости)
<a id="p100140"></a>AB0 и Резус-принадлежность -
<a id="p100141"></a>**ПАГТ -**
13. <a id="p100142"></a>Исследование крови новорожденного:
<a id="p100143"></a>AB0 и резус-принадлежность -
<a id="p100144"></a>Прямой антиглобулиновый тест -
<a id="p100145"></a>Специфичность антител в элюате -

```text
                          ┌─┐              ┌─┐
Наличие ГБН:           Да │ │          Нет │ │
                          └─┘              └─┘
                          ┌─┐              ┌─┐
Заменные трансфузии:   Да │ │          Нет │ │
                          └─┘              └─┘
```


<a id="p100148"></a>Е.4. Выявление IgG антител анти-A, анти-B в сыворотке крови матери при разногруппности матери и плода по системе AB0. Положительный результат свидетельствует о возможном иммунологическом конфликте мать - новорожденный по антигенам эритроцитов системы AB0.
<a id="p100149"></a>Е.5. Исследование элюата, полученного с эритроцитов новорожденного, позволяет установить специфичность антител, вызвавших разрушение эритроцитов, а также подобрать эритроциты совместимого донора для заменных трансфузий.
<a id="p100150"></a>Е.6. О степени выраженности гемолиза эритроцитов ребенка на момент рождения судят по повышенному содержанию непрямого билирубина в пуповинной крови. Почасовой прирост билирубина позволяет обосновать необходимость проведения заменных переливаний новорожденному.
<a id="p100151"></a>Е.7. Лабораторное подтверждение диагноза ГБН, обусловленной антителами AB0. Необходимо доказать наличие антител, фиксированных на эритроцитах, а также установить их направленность против антигенов A/B.
<a id="p100152"></a>Для установления диагноза ГБН, обусловленной несовместимостью по антигенам AB0, используются следующие критерии:
1. <a id="p100153"></a>Наличие клинических признаков гемолитического заболевания.
2. <a id="p100154"></a>Исследования показывают, что сыворотка матери содержит AB0 IgG антитела, направленные против антигенов, присутствующих на эритроцитах плода или новорожденного, и не содержит антител другой специфичности (непрямой антиглобулиновый тест отрицательный).
3. <a id="p100155"></a>Прямой антиглобулиновый тест с эритроцитами плода или новорожденного слабоположительный или отрицательный.
4. <a id="p100156"></a>В сыворотке или элюате плода или новорожденного имеются анти-A или анти-B антитела.

<a id="p100157"></a>Схема 2

<div align="center">

<a id="p100158"></a>**АЛГОРИТМ УСТАНОВЛЕНИЯ ДИАГНОЗА ГБ ПЛОДА/НОВОРОЖДЕННОГО,**

</div>

**ОБУСЛОВЛЕННОЙ AB0 АНТИТЕЛАМИ**


```text
┌───────────────────────────────────┐      ┌──────────────────────────────┐
│Сопоставить результаты исследования│      │Оценить клинику ГБ. Определить│
│группы крови ребенка и AB0 антител │<──┐  │ группу крови новорожденного  │
│              матери               │   │  │        Провести ПАГТ         │
└──────┬────────────────────┬───────┘   │  └────────┬───────────────┬─────┘
       \/                   \/          │           \/              \/
┌──────────────┐    ┌────────────────┐  │     ┌──────────┐ ┌──────────────┐
│ Мать - плод  │    │   Мать - плод  │  └─────┤Клиника ГБ│ │Клиники ГБ нет│
│AB0 совместимы│    │AB0 несовместимы│        │ ПАГТ +/- │ │    ПАГТ -    │
└───────────┬──┘    └┬─────────────┬─┘        └──────────┘ └──────────────┘
            \/       \/            \/
      ┌───────────────┐ ┌──────────────────────────────┐
      │  Мать имеет   │ │ Мать не имеет антител другой │
      │антитела другой│ │   специфичности, кроме AB0   │
      │ специфичности │ │            (IgG)             │
      └───────┬───────┘ └───────────────┬──────────────┘
              \/                        \/
        ┌───────────┐              ┌─────────┐
        │См. схему 3│              │ГБ по AB0│
        └───────────┘              └─────────┘
```


<a id="p100160"></a>Е.8. Лабораторное подтверждение диагноза ГБН, обусловленной антителами к антигенам системы Резус и другим системам антигенов эритроцитов. Используются критерии:
1. <a id="p100161"></a>Имеются клинические доказательства наличия заболевания у плода/новорожденного.
2. <a id="p100162"></a>Исследования показывают, что сыворотка матери содержит аллоантитела, специфичность которых установлена.
3. <a id="p100163"></a>Доказано, что новорожденный имеет антиген эритроцитов, против которого у матери есть антитела (по результатам фенотипирования эритроцитов).
4. <a id="p100164"></a>Прямой антиглобулиновый тест у новорожденного положительный - аллоантитела на эритроцитах присутствуют. Результаты исследования элюата с эритроцитов новорожденного показывают, что специфичность их соответствует специфичности аллоантител матери. См. схему 3.

<a id="p100165"></a>Схема 3

<div align="center">

<a id="p100166"></a>**АЛГОРИТМ ПОСТАНОВКИ ДИАГНОЗА ГБН, ОБУСЛОВЛЕННОЙ АНТИТЕЛАМИ**<br>
**К АНТИГЕНАМ ЭРИТРОЦИТОВ СИСТЕМЫ РЕЗУС И ДРУГИМ КЛИНИЧЕСКИ**<br>
**ЗНАЧИМЫМ СИСТЕМАМ АНТИГЕНОВ ЭРИТРОЦИТОВ**

</div>



```text
┌───────────────────────────────┐          ┌────────────────────────────┐
│Мать имеет антитела к антигенам│          │Оценить клинику ГБ. Провести│
│      эритроцитов (НАГТ+)      │          │ПАГТ. Определить Rh-принад- │
└──────────────┬────────────────┘          │лежность новорожденного     │
               │                           └───┬─────────────────┬──────┘
               \/                              \/                \/
  ┌────────────────────────────┐        ┌───────────────┐  ┌──────────────┐
  │Сравнить фенотип эритроцитов│        │Клиника ГБ есть│  │Клиники ГБ нет│
  │ ребенка со специфичностью  │<───┐   │    ПАГТ +     │  │    ПАГТ -    │
  │       антител матери       │    │   └───────┬───────┘  └───────┬──────┘
  └───┬───────────────┬────────┘    │           │                  │
      \/              \/            │           \/                 \/
┌───────────────┐ ┌──────────────┐  │   ┌──────────────┐       ┌───────┐
│Мать - ребенок │ │Мать - ребенок│  │   │Фенотипировать│       │ГБН нет│
│ совместимы по │ │ несовместимы │  └───│  эритроциты  │       └───────┘
│   антигенам   │ │ по антигенам │      │новорожденного│
│  эритроцитов  │ │ эритроцитов  │      └──────────────┘
└──────┬────────┘ └──────┬───────┘
```

       \/                \/

<table>
<colgroup><col width="45%"><col width="55%"></colgroup>
<tr><td colspan="2">Провести идентификацию антител в элюате, полученном с эритроцитов плода</td></tr>
</table>

              \/

```text
 ┌───────────────────────────┐
 │Использовать результаты для│
 │подбора крови для заменного│
 │переливания новорожденному │
 └───────────────────────────┘
```



#### <a id="p100168"></a>Ж. Подбор гемотрансфузионных сред новорожденному и плоду

<a id="p100169"></a>Ж.1. При подборе эритроцитов для заменной трансфузии исходят из того, что у плода и до 3-х месяцев жизни у новорожденного все антитела являются материнскими. Поэтому подбор совместимых компонентов крови должен производиться с учетом специфичности антител матери.
<a id="p100170"></a>Ж.1.1. Схема подбора компонентов крови для заменных трансфузий, когда группа крови AB0 матери и новорожденного не совпадает, приведена в Приказе Минздрава России N 363 от 25.11.2002.
<a id="p100171"></a>Эритроцитарная масса донора не должна содержать IgG антител системы AB0 (предпочтительнее использовать трансфузии отмытых эритроцитов).
<a id="p100172"></a>Ж.1.2. При несовместимости матери и ребенка по антигену D системы антигенов эритроцитов Резус переливают эритроциты группы крови 0 резус-отрицательные. Если мать и ребенок имеют одинаковую группу крови AB0, допускаются трансфузии эритроцитов доноров одноименной группы крови резус-отрицательной принадлежности.
<a id="p100173"></a>Ж.1.3. При несовместимости мать - плод по антигенам эритроцитов других систем индивидуальный подбор крови доноров проводят среди образцов, не имеющих антигена, к которому найдены антитела, явившиеся причиной заболевания, с учетом AB0 совместимости.
<a id="p100174"></a>Ж.1.4. Эритроциты доноров для заменных трансфузий должны быть совместимы с сывороткой новорожденных.
<a id="p100175"></a>Ж.1.5. Для заменных трансфузий используют эритроцитсодержащие среды малых сроков хранения.
<a id="p100176"></a>Ж.1.6. При использовании для заменных трансфузий цельной консервированной крови целесообразно предварительно удалять из нее лейкоциты лейкофильтрацией, а также применять радиационное облучение.
<a id="p100177"></a>Ж.1.7. Возможно использование для проведения иммуногематологических исследований (скрининг и идентификация антител к антигенам эритроцитов) сыворотки новорожденного. При подозрении на ГБН одновременно исследуют элюат, полученный с эритроцитов новорожденного. Исследование антител проводят антиглобулиновым тестом.
<a id="p100178"></a>Ж.1.8. Для внутриутробных трансфузий используют эритроциты доноров 0 резус-отрицательной принадлежности крови, не содержащие антиген K и антигены, к которым у матери имеются антитела.


#### <a id="p100179"></a>З. Подбор гемотрансфузионных сред для трансфузий сенсибилизированным женщинам

<a id="p100180"></a>Для трансфузий подбираются AB0 совместимые эритроциты доноров, не имеющих антигены, соответствующие специфичности антителам женщины. Подбор крови проводится в лаборатории с использованием антиглобулинового теста.


### <a id="p100181"></a>ПЕРЕЧЕНЬ ДОКУМЕНТОВ


1. <a id="p100182"></a>Приказ МЗ РФ N 2 от 09.01.98 "Об утверждении инструкций по иммуносерологии".
2. <a id="p100183"></a>Приказ Минздрава РФ N 363 от 25 ноября 2002 г. "Об утверждении Инструкции по применению компонентов крови".
3. <a id="p100184"></a>Приказ МЗ РФ N 50 от 10.02.2003 "О совершенствовании акушерско-гинекологической помощи в амбулаторно-поликлинических учреждениях".
4. <a id="p100185"></a>Методические рекомендации МЗ РФ N 99/181. Утв. 17.05.2000. "Алгоритмы исследования антигенов эритроцитов и антиэритроцитарных антител в сложнодиагностируемых случаях".
5. <a id="p100186"></a>Методические указания МЗ РФ N 2001/109, утв. 11.04.2002. "Требования к проведению иммуногематологических исследований доноров и реципиентов на СПК и в ЛПУ".





<a id="p100187"></a>Приложение 1

<div align="center">

<a id="p100188"></a>**ПЕРЕЧЕНЬ**

</div>

**ИММУНОГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ДОКУМЕНТАЦИИ**


<table>
<colgroup><col width="15%"><col width="25%"><col width="26%"><col width="34%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Тип ЛПУ</td><td rowspan="2">Перечень исследований</td><td colspan="2">Документирование результатов исследования</td></tr>
<tr><td>Документы учреждения</td><td>Ответы о результатах исследования</td></tr>
<tr><td>Женская консультация</td><td>Определение группы крови AB0, резуспринадлежности. Исследование наличия антител к антигенам эритроцитов</td><td>1. Обменная карта беременной. 2. Карта иммуногематологического обследования беременных (для женщин с антителами и лиц группы риска сенсибилизации) - вклеивается в обменную карту беременной. 3. Журнал регистрации иммуногематологических исследований</td><td>1. Бланк ответа о результатах исследования группы крови AB0, резус-принадлежности, антител. Выписывается в двух экземплярах: - вклеивается в карту беременной; - хранится у женщины пожизненно. 2. Справка о сенсибилизации к антигенам эритроцитов - хранится у женщины пожизненно, предъявляется при каждой госпитализации</td></tr>
<tr><td>Родовспомога-</td><td>Определение группы</td><td>1. История родов.</td><td>1. Бланк ответа о результатах</td></tr>
<tr><td>тельное</td><td>крови AB0, резус-при-</td><td>2. Карта новорожденного.</td><td>исследования группы крови AB0,</td></tr>
<tr><td>учреждение</td><td>надлежности. Исследование наличия антител к антигенам эритроцитов. Прямая проба Кумбса. Исследование аллоантител в элюате. Подбор крови для трансфузий женщинам, новорожденным, плодам. Постановка проб на совместимость перед гемотрансфузией</td><td>3. Журнал регистрации иммуногематологических исследований. 4. Журнал проведения индивидуального подбора крови. 5. Журнал проведения проб на совместимость перед трансфузией</td><td>резус-принадлежности, антител. Вклеивается в историю родов. 2. Бланк ответа о результатах исследования крови новорожденного - вклеивается в историю развития новорожденного. 3. Справка о сенсибилизации к антигенам эритроцитов (если антитела не были выявлены ранее)</td></tr>
<tr><td>Стационар</td><td>Определение группы</td><td>1. История болезни.</td><td>1. Бланк ответа о результатах</td></tr>
<tr><td>взрослый или детский</td><td>крови AB0, резуспринадлежности. Исследование наличия антител к антигенам эритроцитов. Прямая проба Кумбса новорожденным. Подбор крови для трансфузий женщинам и новорожденным. Постановка проб на совместимость перед гемотрансфузией</td><td>2. Амбулаторная карта больного. 3. Журнал регистрации иммуногематологических исследований. 4. Журнал проведения индивидуального подбора крови. 5. Журнал проведения проб на совместимость перед гемотрансфузией</td><td>исследования группы крови AB0, резус-принадлежности, антител. Вклеивается в историю болезни или амбулаторную карту больного. 2. Ответ о результатах индивидуального подбора крови. Вклеивается в историю болезни или амбулаторную карту больного. 3. Справка о сенсибилизации к антигенам эритроцитов</td></tr>
<tr><td>Централизованная лаборатория</td><td>Определение группы крови AB0, резуспринадлежности. Определение антител к антигенам эритроцитов. Определение специфичности антител. Исследование антител в динамике наблюдения. Подбор крови донора, совместимого с антителами реципиента по антигенам эритроцитов. Исследование крови отца</td><td>1. Журнал регистрации крови, поступившей на исследование. 2. Журнал регистрации иммуногематологических исследований. 3. Журнал проведения индивидуального подбора крови</td><td>1. Бланк ответа о результатах исследования группы крови AB0, резус-принадлежности, антител. Выписывается в двух экземплярах: - вклеивается в обменную карту беременной, - выдается на руки беременной. 2. Справка о сенсибилизации к антигенам эритроцитов - хранится у женщины пожизненно, предъявляется при каждой госпитализации. 3. Ответ о результатах индивидуального подбора крови. Вклеивается в историю болезни или амбулаторную карту больного</td></tr>
</table>






<a id="p100194"></a>Приложение 2

<a id="p100195"></a>                                  ЖУРНАЛ
        регистрации результатов иммуногематологических исследований
                            у беременных женщин

<a id="p100196"></a>Начат "__" __________ 20__ г.               Окончен "__" __________ 20__ г.

    1. <a id="p100197"></a>Заполняется лицом, выполняющим исследование.
    2.  <a id="p100198"></a>В  реквизиты вписываются результаты реакций, которые оцениваются по
выраженности (в плюсах).
    3. <a id="p100199"></a>Страницы журнала должны быть пронумерованы, прошнурованы и скреплены
печатью и подписью главного врача.


<table>
<colgroup><col width="5%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="7%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="7%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="10%"></colgroup>
<tr><td>N, Дата</td><td colspan="4">Общие сведения</td><td colspan="10">Определение группы крови, резус-принадлежности в лаборатории</td><td>Заключение о группе крови и</td></tr>
<tr><td></td><td>Фамилия, имя, отчество</td><td>Отделение (кто направил)</td><td>N истории болезни</td><td>Группа крови первичн.</td><td colspan="7">Реактивы (Цоликлоны или сыворотки)</td><td colspan="3">Стандартные эритроциты</td><td>резус-принадлежности (примечания)</td></tr>
<tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td>Анти-A серия</td><td>Анти-B серия</td><td>Анти-AB серия</td><td>Контроль AB или NaCl</td><td>Анти-D серия</td><td>Анти-Dсупер серия</td><td>Контроль</td><td>0 Серия</td><td>A Серия</td><td>B Серия</td><td></td></tr>
<tr><td>1</td><td>2</td><td>3</td><td>4</td><td>5</td><td>6</td><td>7</td><td>8</td><td>9</td><td>10</td><td>11</td><td>12</td><td>13</td><td>14</td><td>15</td><td>16</td></tr>
</table>



<table>
<colgroup><col width="5%"><col width="5%"><col width="5%"><col width="5%"><col width="5%"><col width="5%"><col width="5%"><col width="5%"><col width="6%"><col width="5%"><col width="5%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="7%"><col width="9%"><col width="6%"><col width="5%"><col width="6%"></colgroup>
<tr><td colspan="9">Типирование антигенов с реактивами</td><td colspan="7">Выявление антиэритроцитных антител с тест-эритроцитами</td><td colspan="2">Аутоантитела</td></tr>
<tr><td>Антисерия</td><td>Антисерия</td><td>Антисерия</td><td>Антисерия</td><td>Антисерия</td><td>Антисерия</td><td>Антисерия</td><td>Антисерия</td><td>Заключение о фенотипе</td><td>A серия</td><td>B серия</td><td>ccDEEKсерия</td><td>CCDeeКсерия</td><td>ccddeeK+ серия</td><td>Результаты идентификации антител (указать, с какими эритроцитами)</td><td>Заключение о титре и специфичности антител</td><td>Прямая проба Кумбса</td><td>Специфичность антител в элюате</td></tr>
</table>







### <a id="p100203"></a>Приложение 3


                          Наименование учреждения


#### <a id="p100204"></a>НАПРАВЛЕНИЕ на иммуногематологические исследования


<a id="p100205"></a>Отделение _____________________
<a id="p100206"></a>N истории болезни _____________

<a id="p100207"></a>Фамилия, имя, отчество (полностью) ________________________________________
___________________________________________________________________________
<a id="p100208"></a>Дата и год рождения _______________________________________________________
<a id="p100209"></a>Диагноз ___________________________________________________________________
<a id="p100210"></a>Группа крови ______________________________________________________________
<a id="p100211"></a>Предыдущие трансфузии, беременности, аборты (подчеркнуть)
Ф.И.О. и подпись врача ____________________________________________________
___________________________________________________________________________




#### <a id="p100212"></a>РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ В ЛАБОРАТОРИИ


<a id="p100213"></a>                         Наименование лаборатории

<a id="p100214"></a>Регистрационный N исследования ____________________
<a id="p100215"></a>Группа крови ______________ Резус-принадлежность ____________
<a id="p100216"></a>Фенотип антигенов эритроцитов _____________________________________________
<a id="p100217"></a>Аллоантитела к антигенам эритроцитов ______________________________________
<a id="p100218"></a>Аутоантитела к антигенам эритроцитов ______________________________________
<a id="p100219"></a>*Примечания* ________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________

<a id="p100220"></a>Врач, проводивший исследование
Ф.И.О., подпись                           Дата



            Министерство здравоохранения и социального развития
                           Российской Федерации
        __________________________________________________________
            (город и название учреждения, исследовавшего кровь)


#### <a id="p100221"></a>СПРАВКА


<a id="p100222"></a>Фамилия, имя, отчество ____________________________________________________
<a id="p100223"></a>Группа крови ____________________ Резус-принадлежность ____________________
<a id="p100224"></a>Фенотип антигенов эритроцитов _____________________________________________
<a id="p100225"></a>Выявлены антиэритроцитные антитела: анти-__________________________________
___________________________________________________________________________
<a id="p100226"></a>При  необходимости  трансфузий  компонентов крови обязателен индивидуальный
подбор донора, совместимого по антигенам эритроцитов.

Фамилия, имя, отчество врача ______________________________________________
телефон _____________                              дата ___________________

                                                               печать

                                                                  Формат А5

---

линия отрыва

            Министерство здравоохранения и социального развития
                           Российской Федерации
        __________________________________________________________
            (город и название учреждения, исследовавшего кровь)

<a id="p100227"></a>                       СПРАВКА

<a id="p100228"></a>Фамилия, имя, отчество ______________________________
<a id="p100229"></a>Группа крови _______ Резус-принадлежность ___________
<a id="p100230"></a>Фенотип антигенов эритроцитов _______________________
<a id="p100231"></a>Выявлены антиэритроцитные антитела: анти-____________
_____________________________________________________
<a id="p100232"></a>При необходимости трансфузий компонентов крови ______
обязателен индивидуальный подбор донора, совместимого
по антигенам эритроцитов.
Фамилия, имя, отчество врача ________________________
телефон ___________ Дата __________       печать





<div align="center">

<a id="p100233"></a>Приложение 4

<a id="p100234"></a>ВЫЯВЛЕНИЕ ИММУННЫХ (IgG) АНТИ-A, АНТИ-B АНТИТЕЛ

</div>

**С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ УНИТИОЛА**


#### <a id="p100235"></a>НАЗНАЧЕНИЕ МЕТОДА


<a id="p100236"></a>Определение IgG антител к антигенам эритроцитов системы AB0 проводится при иммуногематологическом обследовании доноров, беременных, новорожденных с признаками гемолитической болезни, а также при исследовании причин гемотрансфузионных осложнений гемолитического типа.


#### <a id="p100237"></a>ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА


<a id="p100238"></a>Выявление IgG антител к антигенам эритроцитов системы AB0 затруднено из-за одновременного присутствия в сыворотке естественных изогемагглютининов, относящихся к классу IgM. В данном методе иммунные IgG анти-A, анти-B антитела выявляются после полного разрушения унитиолом естественных IgM анти-A, анти-B антител.
<a id="p100239"></a>Для инактивации IgM используют 5% раствор унитиола (2,3-димеркаптопропансульфоната Na), разрушающий дисульфидные связи в молекулах иммуноглобулинов M. Выявление IgG анти-A, анти-B затем проводится в антиглобулиновом тесте с эритроцитами A и B <*>.

<a id="p100240"></a>

---

<a id="p100241"></a><*> При выявлении IgG анти-A, анти-B у доноров допускается проводить исследование на плоскости без подогрева.

<a id="p100242"></a>Метод пригоден для дифференциальной диагностики IgG и IgM антител к антигенам эритроцитов любой специфичности в сыворотке крови человека, а также моноклональных антителах.


#### <a id="p100243"></a>МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ


<a id="p100244"></a>При проведении исследования необходимо надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, т.к. образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита или любой другой возбудитель вирусной инфекции.


#### <a id="p100245"></a>ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАКТИВЫ


- <a id="p100246"></a>5% раствор унитиола;
- <a id="p100247"></a>моноклональные антитела анти-D супер IgM;
- <a id="p100248"></a>стандартные эритроциты групп крови A, B, а также эритроциты 0 резус-положительной принадлежности;
- <a id="p100249"></a>раствор натрия хлорида 0,9%;
- <a id="p100250"></a>термостат лабораторный на +37 °С;
- <a id="p100251"></a>пробирки вместимостью 5 - 10 мл;
- <a id="p100252"></a>пипетки;

<div align="center">

- <a id="p100253"></a>таймер;

</div>

- <a id="p100254"></a>перчатки резиновые хирургические.


#### <a id="p100255"></a>ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЙ


<a id="p100256"></a>Техника реакции
1. <a id="p100257"></a>В сухой чистой пробирке смешать равные объемы испытуемой сыворотки и 5% раствора унитиола - опыт.
2. <a id="p100258"></a>Во второй пробирке смешать равные объемы моноклональных антител анти-D супер IgM и 5% раствора унитиола - контроль.
3. <a id="p100259"></a>Все пробы инкубировать в термостате при +37 °С в течение 30 мин.
4. <a id="p100260"></a>Сыворотки после обработки раствором унитиола исследуют с эритроцитами A и/или B в непрямом антиглобулиновом или в гелевом тесте с анти-IgG реактивом. Контроль испытывают с эритроцитами группы крови 0 резус-положительной принадлежности.
<a id="p100261"></a>Интерпретация результатов
<a id="p100262"></a>Сыворотки, сохранившие способность агглютинировать эритроциты групп A и/или B после инкубации с раствором унитиола, содержат IgG анти-A или анти-B антитела - положительный результат.
<a id="p100263"></a>Сыворотки, утратившие способность агглютинировать эритроциты групп A и/или B после инкубации с раствором унитиола, не содержат IgG анти-A или анти-B антител - отрицательный результат.

<div align="center">

<a id="p100264"></a>Результат в контрольной пробе должен быть всегда отрицательным, что свидетельствует о разрушении антител класса IgM в моноклональных антителах анти-D и эффективности действия унитиола.

</div>

<a id="p100265"></a>Для установления титра IgG антител производят последовательное разведение сывороток, обработанных унитиолом. За титр принимают величину наибольшего разведения, в котором отчетливо видна агглютинация со стандартными эритроцитами групп A и/или B.


#### <a id="p100266"></a>УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ


<a id="p100267"></a>Срок хранения вскрытой ампулы 5% раствора унитиола (2,3-димеркаптопропансульфоната натрия) не должен превышать 5 дней при хранении в холодильнике (+4 - 8 °С).

<div align="center">

<a id="p100268"></a>Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции по применению.

</div>




<a id="p100269"></a>

---