Письмо Минздрава РСФСР от 20.02.1979 № 06Б/7А-342

<О Методических рекомендациях по сбору, хранению и транспортировке материала от больных для бактериологической диагностики инфекционных заболеваний>

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РСФСР

ПИСЬМО

Главное санитарно-эпидемиологическое управление направляет для руководства в работе Методические рекомендации по сбору, хранению и транспортировке материала от больных для бактериологической диагностики инфекционных заболеваний.

Н. С. Титков

МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ПО СБОРУ, ХРАНЕНИЮ И ТРАНСПОРТИРОВКЕ МАТЕРИАЛА ОТ БОЛЬНЫХ ДЛЯ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ <*>

---

<*> Рекомендации составлены сотрудниками Ленинградской, Московской областных санитарно-эпидемиологических станций, Республиканской санитарно-эпидемиологической станцией. Одобрены Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава РСФСР.

Исследуемый материал	Сроки взятия	Количество материала	Емкость для сбора материала	Консервант	Способ забора материала	Время и способ доставки материала в лабораторию
БРЮШНОЙ ТИФ, ПАРАТИФ А и Б, ДРУГИЕ САЛЬМОНЕЛЛЕЗЫ
Кровь на гемокультуру	1. Первые дни болезни 2. На поздних сроках (2 — 3 недели)	15 — 20 мл 5 — 10 мл	Стерильная пробирка или флакон	Среда Раппопорт, желчный бульон и др. в соотношении 1:10	Шприцем из локтевой вены	Собранный материал доставляется в лабораторию без промедления, лишь в исключительных случаях допускается хранение материала не более суток в холодильнике при температуре плюс 2 — 4 градуса
Для серологических	1. На 1-й -	5 — 8 мл.	Стерильная	-	Шприцем из локтевой вены. У	При транспортировке
исследований (парные	3-й день	У детей -	пробирка		маленьких детей — из сосу-	следить, чтобы жидкость не
сыворотки)	2. На 7-й — 14-й день	0,5 — 1,0 мл			дов пальца или мочки уха	смачивала ватные пробки, и предохранять собранный материал от замерзания. Доставка материала производится в жестяных контейнерах, пеналах, биксах и другой таре, исключающей повреждения пробирок
Испражнения	При подозрении на сальмонеллезную инфекцию — с первых часов заболевания, при тифопаратифах — с конца 2-й недели до начала лечения, не ранее двух дней после окончания лечения	Испражнения должны составлять 1/3 объема консерванта (1 — 2 г)	Стерильная пробирка или банка с консервантом	Глицериновая смесь, буферный раствор фосфорнокислых солей (pH — 8,0), селенитовая среда обогащения 5 — 6 мл	При естественной дефекации из судна, горшка, пеленки — стерильным деревянным шпателем, стерильной стеклянной или деревянной палочкой. При наличии в испражнениях гноя и слизи (но не крови) включить их в посевной материал непосредственно из прямой кишки ватным тампоном, который монтируется на стержень из дерева или алюминиевой проволоки сечением 3 — 4 мм, длиной 200 мм и высотой ватной части не менее 50 — 60 мм	Материал сопровождается специальным направлением, в котором указывается название учреждения, направляющего материал, фамилия, имя, отчество, возраст и адрес обследуемого, дата заболевания, диагноз или эпидемиологическое показание к проведению анализа. Дата и точное время забора материала и фамилия лица, производившего забор. В лаборатории обязательно регистрируется точное время доставки материала
Моча	У больных, начиная с конца первой недели заболевания, и у реконвалесцентов	20 — 30 мл	Стерильные бутылки, банки, флаконы	Не используется	Естественным путем после тщательного туалета с соблюдением всех необходимых условий, исключающих внесение посторонней микрофлоры	Так же
Желчь (дуоденальное содержимое)	У больных в период реконвалесценции	Раздельно порции А, Б и С	Стерильные пробирки	-	Путем зондирования при помощи дуоденального зонда получают три порции желчи (А, Б и С)	Так же
Рвотные массы,	В первые	От 50 до	Стерильные бан-	-	-	Так же
промывные воды желудка	часы заболевания, в первые дни заболевания и даже на 7-й — 8-й день	150	ки, широкогорлые флаконы
Гной и экссудат воспалительных очагов	В течение всего заболевания	Неограниченное	Стерильная посуда (банки, чашки Петри)	-	Стерильным тампоном, шпателем	Так же
Патоморфологическое		5 — 10 мл		-	Стерильным инструментом,	Так же
исследование — орга-		2 — 5 г			исключая внешнее
ны трупа (кровь из сердца, печень, селезенка, почки, костный мозг, мезентериальные узлы кишечника, отрезки тонкого и толстого кишечника с содержимым)		10 мл			загрязнение. Кровь из сердца и желчь из желчного пузыря берут стерильной пастеровской пипеткой, предварительно обжигая место введения пипетки раскаленным скальпелем. Отрезки кишечника вырезают между двумя лигатурами. Кусочки паренхиматозных органов — стерильными ножницами, скальпелем
ДИЗЕНТЕРИЯ
Испражнения	С первого дня заболевания до начала лечения, не ранее двух дней после окончания лечения	Испражнения должны составлять 1/3 объема консерванта (1 — 2 г)	Стерильные пробирки или банки с консервантом	Глицериновая смесь, буферный раствор фосфорнокислых солей (pH — 8,0), селенитовая среда обогащения 5 — 6 мл	При естественной дефекации из судна, горшка, пеленки — стерильным деревянным шпателем, стерильной стеклянной или деревянной палочкой. При наличии в испражнениях гноя и слизи (но не крови) включить их в посевной материал непосредственно из прямой кишки ватным тампоном	Так же
Серологическое	1. На 1-й -	5 — 8 мл.	Стерильная	-	Шприцем из локтевой вены. У	Так же
исследование крови	3-й день	У детей -	пробирка		маленьких детей — из
(РА и РПГА в	2. На 7-й -	0,5 — 1,0			сосудов пальца, пятки или
динамике)	14-й день	мл			мочки уха
Патоморфологическое		10 см	Стерильная	-	Стерильным инструментом,	Так же
исследование — органы трупа (кишечник, мезентериальные железы, паренхиматозные органы)		2 — 5 г	посуда (банки, чашки Петри)		исключая внешние загрязнения. Отрезки кишечника вырезают между двумя лигатурами. Кусочки паренхиматозных органов — стерильными ножницами, скальпелем
ПРОЧИЕ КИШЕЧНЫЕ ИНФЕКЦИИ (ЭНТЕРИТЫ, ГАСТРОЭНТЕРИТЫ, КОЛИТЫ), В ТОМ ЧИСЛЕ ВЫЗЫВАЕМЫЕ ЭПКП
При явлениях кишечной дисфункции -	С первого дня заболе-	1 — 2 г От 50,0 до	Стерильные пробирки или банки	Глицериновая смесь,	При естественной дефекации из судна, горшка, пеленки -	Так же
испражнения, при появлении рвоты — рвотные массы, промывные воды желудка	вания до начала лечения. В течение всего периода заболевания	150,0	с консервантом Стерильная широкогорлая посуда	буферный раствор фосфорнокислых солей (pH — 8,0), селенитовая среда обогащения 5 — 6 мл	стерильным деревянным шпателем, стерильной стеклянной или деревянной палочкой. При наличии в испражнениях гноя и слизи (но не крови) включить их в посевной материал непосредственно из прямой кишки ватным тампоном
При поражении мочевого пузыря — моча	У больных и реконвалесцентов	20 — 30 мл	Стерильные банки, бутылки, флаконы	Не используется	Естественным путем после тщательного туалета с соблюдением всех необходимых условий, исключающих внесение посторонней микрофлоры	Так же
При поражении желчного пузыря — дуоденальное содержимое (желчь)	У больных в период реконвалесценции	Раздельно порции А, Б и С	Стерильные пробирки	-	Путем зондирования при помощи дуоденального зонда получают три порции желчи (А, Б и С)	Так же
При подозрении на колибациллярный сепсис — кровь	В течение всего заболевания	5 — 10 мл	Стерильные пробирки, флаконы	Среда Раппопорт, желчный бульон и др. в соотношении 1:10	Шприцем из локтевой вены	Так же
Патоморфологическое		10 см	Стерильная	-	Стерильным инструментом,
исследование — орга-		5 — 10 мл	посуда (банки,		исключая внешнее
ны трупа (содержимое тонкого кишечника, кровь из сердца, кусочки органов печени, селезенки, легкого, почек, лимфатические узлы кишечника)		2 — 5 г	чашки Петри)		загрязнение. Кровь из сердца берут стерильной пастеровской пипеткой, предварительно обжигая место введения пипетки раскаленным скальпелем. Отрезки кишечника вырезают между двумя лигатурами. Кусочки паренхиматозных органов — стерильными ножницами, скальпелем
МЕНИНГОКОККОВАЯ ИНФЕКЦИЯ
Спинномозговая жидкость	При поступлении больного в стационар	2 — 5 мл	2 сухие стерильные пробирки	Не используется	Забор проводится с соблюдением всех правил асептики (забор проводить в маскереспираторе, не касаться руками краев канюли, иглы, краев пробирок, не переливать жидкость через край). Первую порцию ликвора (около 1 мл) помещают в сухую пробирку (для клинического исследования). Весь остальной ликвор помещают во вторую пробирку	Не допускается хранение. Доставка в лабораторию производится немедленно, в условиях, предупреждающих охлаждение. Если пунктирование проводится вечером или ночью, пробирки с материалом можно сохранять до начала работы лаборатории в термостате при температуре 37°
Кровь	С момента заболевания	5 — 10 мл для гемокультуры	Флакон с 50 мл полужидкого агара 2 предметных стекла	-	Кровь забирают из вены с соблюдением всех правил асептики во флакон с полужидким агаром. Каплю крови наносят на предметное стекло и с помощью второго стекла делают мазок (аналогично мазку для подсчета форменных элементов крови). На другом предметном стекле делают два отпечатка (толстые капли) и, не растирая, подсушивают на воздухе. Рекомендации 1 Всесоюзной научно-практической конференции по менингококковым инфекциям. Каунас, 1973. Опубликованы в сборнике материалов конференции. Каунас, 1973 г.	Доставка в лабораторию немедленно, в условиях, предупреждающих охлаждение
Носоглоточная слизь	При обращении к врачу. С целью контроля лечения после исчезновения клинических явлений и не ранее чем через трое суток после окончания лечения антибиотиками. Материал забирают двукратно с интервалом в 1 — 2 дня	-	Ватный тампон, вмонтированный в пробирку, при взятии материала изгибается под углом в 110 — 120°	Не используется	Забор носоглоточной слизи проводят натощак или не ранее 3 — 4 часов после приема пищи или питья. Шпателем, находящимся в левой руке, фиксируют корень языка, одновременно тампон (в правой руке) по шпателю заводят под мягкое небо в носоглотку, поворачивают концом вверх и делают два штриха сверху вниз. Надавливание шпателем на корень языка и забор материала тампоном должны быть одновременными. Тампон извлекают по шпателю, не касаясь зубов, слизистой щек, языка	Транспортировка незасеянных тампонов не допускается. Собранный материал засевают у постели больного на теплые чашки со свежеприготовленной питательной средой путем тщательного втирания материала в поверхность среды. Тампон поворачивают всеми сторонами. Материал от одного лица засевают на сектор (1/4 — 1/6) чашки с ристомициновой средой, затем на 1/2 — 1 чашку с сывороточным агаром. При отсутствии ристомицина материал от одного лица можно засеять на две чашки с сывороточным агаром. Засеянные чашки транспортируются в лабораторию немедленно, в условиях, предупреждающих охлаждение
Трупный материал	Производить	-	Стерильные бан-	-	Кусочки тканей и органов с	Материал доставляют в
(кровь, кусочки органов, гной с мозговых оболочек)	исследование трупного материала имеет смысл только в первые часы после смерти, пока не произошло остывание трупа		ки с притертыми пробками, сухие стерильные пробирки, пробирки с вмонтированными в них ватными тампонами		помощью стерильного пинцета помещают в банки. Кровь, гной отбирают с помощью стерильных стеклянных трубок и помещают в пробирки; для этих же целей можно использовать ватные тампоны, вмонтированные в пробирки	лабораторию в условиях, исключающих охлаждение
КОКЛЮШ И ПАРАКОКЛЮШ
Носоглоточная слизь	При первичном обращении к врачу по поводу кашля — до начала лечения (в течение 10 — 14 дней от начала заболевания). Материал забирают дважды — два дня подряд или через день	-	Ватный тампон, вмонтированный в пробирку, при взятии материала изгибается под углом в 110 — 120°	Можно применять тампон, увлажненный фосфатным буфером с углем <*>. Такой тампон может быть использован в течение 2 — 3 дней со дня получения в лаборатории (при условии хранения при температуре плюс 4 — 6 °С). Метод апробирован в лаборатории Московской областной СЭС	Забор материала производится натощак или не ранее 3 — 4 часов после приема пищи или питья. Техника забора материала сухим и влажным тампонами одинакова. Шпателем, находящимся в правой руке, фиксируют корень языка, одновременно тампон (в правой руке) по шпателю заводят за корень языка, поворачивают концом вниз и делают два штриха по задней стенке глотки. Тампон извлекают из полости рта, не касаясь слизистой языка, щек, миндалин. Метод забора материала кашлевыми пластинками используют только в случае спазматического кашля и применяют параллельно с методом активного забора тампоном. У детей первого года жизни всегда следует пользоваться заднеглоточным тампоном	Материал, забранный сухим заднеглоточным тампоном, должен быть немедленно засеян на чашки с питательной средой. Транспортировка тампона не допускается. Материал с одного тампона засевают последовательно в две чашки Петри со специальной питательной средой, тщательно втирая его сначала по периферии чашки, затем в центре (максимально используя всю поверхность питательной среды). Стеклянным шпателем тщательно растирают материал в центре чашки. В случае применения увлажненного тампона последний должен быть доставлен в лабораторию не позднее 3 — 4 часов с момента взятия материала. Чашки с посевами доставляются в лабораторию в условиях, исключающих охлаждение
ДИФТЕРИЯ
Слизь и пленки из зева (с обеих миндалин) и носа.	Немедленно при первом подозрении	-	Стерильные пробирки с вмонтированными	На случай транспортировки на	Слизь из зева и носа забирают отдельными тампонами, вмонтированными в разные	Тампоны с материалом должны быть доставлены в лабораторию не позднее 2 -
При дифтерии редких локализаций (глаз, ухо, рана, кожа, влагалище) забирают материал с пораженных участков	на заболевание дифтерийной этиологии		в них сухими ватными тампонами	дальние расстояния применяют такие же тампоны, но увлажненные	пробирки и промаркированными «зев — нос». Материал берут натощак или не ранее чем через 2 часа после еды. После проведенного курса лечения антибиотиками мазки	3 часов с момента забора в условиях, предохраняющих от переохлаждения. Увлажненные тампоны рекомендуется использовать при транспортировке на
и одновременно из зева и носа				5-процентным раствором глицерина или пробирки со средой обогащения. Тампон в последнем случае монтируется выше среды обогащения, после забора материала погружается в нее	следует брать не ранее чем через 3 дня после окончания лечения. Забор материала из зева проводится одним тампоном с обеих миндалин путем легкого надавливания на них при обязательной фиксации языка шпателем. Тампон не должен касаться языка, слизистой щек и зубов. При наличии налетов материал забирают на границе пораженных и здоровых тканей, срывать пленки не рекомендуется. Другим тампоном забирают материал из носа, вводя тампон в носовые ходы на глубину 1 — 1,5 см	дальние расстояния

---

---