Письмо Роспотребнадзора от 03.06.2011 № 01/6833-1-22
Актуально на 03.11.2026.
Как цитировать: <Письмо> Роспотребнадзора от 03.06.2011 N 01/6833-1-22. 01/6833-1-22. 03.06.2011. https://bukva.ai/docs/pismo-016833-1-22
«О направлении справочных материалов по лабораторной диагностике энтерогеморрагической группы эшерихий»
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И СОЦИАЛЬНОГО РАЗВИТИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО НАДЗОРУ В СФЕРЕ ЗАЩИТЫ ПРАВ ПОТРЕБИТЕЛЕЙ И БЛАГОПОЛУЧИЯ ЧЕЛОВЕКА
ПИСЬМО
от 3 июня 2011 г. № 01/6833-1-22
О НАПРАВЛЕНИИ СПРАВОЧНЫХ МАТЕРИАЛОВ ПО ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКЕ ЭНТЕРОГЕМОРРАГИЧЕСКОЙ ГРУППЫ ЭШЕРИХИЙ
Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека направляет для использования в работе «Справочные материалы по кишечной палочке 0104», включающие характеристику возбудителя и алгоритм лабораторных исследований на энтерогеморрагические эшерихии в лабораториях центров гигиены и эпидемиологии субъектов российской Федерации, подготовленные специалистами научно-исследовательских учреждений Роспотребнадзора.
Г. Г. Онищенко
ПО КИШЕЧНОЙ ПАЛОЧКЕ О104 СЕРОТИПА
1. Характеристика возбудителя
С 1992 по 2011 год в разных странах регистрировались заболевания спорадические и групповые, вызванные E.coli серогруппы 0104, относящейся к группе энтерогеморрагических эшерихий («ЭГКП», «ЕНЕС» — enterohemorrhagic E.coli, «STEC» — Shiga toxin-producing E.coli). Штаммы пяти различных серологических вариантов (сероваров) E.coli O104: E.coli O104:H-, E.coli O104:H2, E.coli O104:H4, E.coli O104:H7, E.coli О104:Н21 характеризовались наличием stx-генов (stx2-гена), кодирующих продукцию шига-подобного токсина 2 типа, что подтверждало их принадлежность к группе ЭГКП. Особенностью штаммов E.coli О104, отличающей их от классического представителя группы ЭГКП — E.coli О157:Н7, было отсутствие еае-гена, кодирующего продукцию белка интимина, и нередко, отсутствие hly-гена, кодирующего энтерогемолизин.
E.coli О104 выделялись в разных странах от пациентов с симптомами гемоколита и ГУС (гемолитико-уремическим синдромом) на протяжении последних 20-ти лет:
- 1992 год: неподвижный вариант E.coli O104:H- выделен в Германии (1 штамм);
- 1992 год: E.coli O104:H2 выделена в Великобритании (1 штамм);
- 1994 год: E.coli O104:H21 выделена в США (Мантана), где вызвала вспышку (18 человек) ОКЗ с ведущим синдромом гемоколита, без развития осложнения в виде ГУС;
- 2001 год: E.coli O104:H4 выделена в Германии (2 штамма);
- 2006 год: E.coli O104:H4 выделена в Корее (1 штамм).
В текущем году в период с 29 апреля по настоящее время в Европейском регионе зарегистрирована крупная вспышка заболеваний, вызванных энтерогеморрагической E.coli O104:H4. По данным Европейского бюро Всемирной Организации Здравоохранения (ЕРБ ВОЗ) по состоянию на 03.06.2011 в Европе в 11-ти странах и США зарегистрировано 1823 случая инфекции, в том числе 552 -протекающие в виде гемолитико-уремического синдрома (ГУС). Эпицентром является Германия, среди жителей которой зарегистрировано 95% всех случаев заболеваний (1733 случая). Изученные подробно штаммы, выделенные от больных в Германии, имеют одинаковые свойства: относятся к одному сиквенс-типу (ST 678), имеют stx2 ген, не содержат еае-ген и hly-ген. У нескольких штаммов с такой генетической характеристикой выявлена резистентность к антимикробным препаратам, в том числе бета-лактамным препаратам, кодируемая бета-лактамазой расширенного спектра (БЛРС) СТХ-М класса.
в Германии штаммов О104 к антибиотикам:
| Группа | Антибиотик | Чувствительность (S-чувствительный, R- устойчивый) |
| бета-лактамы | ||
| Полусинтетические пенициллины | Ампициллин | R |
| Ингибиторозащищенные пенициллины | Амоксициллин/клавулановая кислота | R |
| Пиперациллин/сульбактам | R | |
| Пиперациллин/тазобактам | R | |
| Цефалоспорины 2 поколения | Цефуроксим | R |
| Цефуроксим-аксетил | R | |
| Цефокситин | R | |
| Цефалоспорины 3 поколения | Цефотаксим | R |
| Цефтазидим | R | |
| Цефподоксим | R | |
| Карбапенемы | Имипенем | S |
| Меропенем | S | |
| Аминогликозиды | Амикацин | S |
| Гентамицин | S | |
| Канамицин | S | |
| Тобрамицин | S | |
| Стрептомицин | R | |
| Хинолоны | Налидиксовая кислота | R |
| Ципрофлоксацин | S | |
| Норфлоксацин | S | |
| Препараты других групп | Тетрациклин | R |
| Нитрофурантоин | S | |
| Триметоприм/сульфаметоксазол (ко-тримоксазол) | R | |
| Хлорамфеникол | S | |
Авторы указывают, что устойчивость к бета-лактамам (к пенициллинам и цефалоспоринам 1-3 поколения) обусловлена продукцией штаммами бета-лактамазы расширенного спектра (БЛРС) класса СТХ-М (группа СТХ-М-1), кроме того имеет дополнительную бета-лактамазу класса ТЕМ. Авторы отмечают, что изученные 2 штамма имеют сочетанную резистентность кроме бета-лактамов еще к стрептомицину, налидиксовой кислоте, ко-тримоксазолу (это триметоприм/сульфометаксозол) и тетрациклину.
2. Лабораторная диагностика
Трудности лабораторной диагностики штаммов E.coli О104 обусловлены невозможностью дифференциации этих возбудителей от нормальной непатогенной кишечной палочки по культурально-ферментативным признакам при проведении рутинного лабораторного исследования испражнений.
Целенаправленный поиск штаммов E.coli О104 у пациентов с гемоколитами или тяжелой клиникой ОКИ с выраженным колитическим синдромом или развитием ГУС включает исследование биоматериала методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) и посев испражнений на дифференциально-диагностические среды, используемые для выделения возбудителей ОКИ. Детальному исследованию на принадлежность к роду эшерихий подлежат лактозоположительные и сорбитолотрицательные колонии.
В настоящее время для детекции генов вирулентности диареегенных эшерихий разработаны отечественные тест-системы «Амплисенс Эшерихиозы FL» -детекция пяти групп Е.coli: ЕНЕС, ЕТЕС, ЕРЕС, EIEC, EAgEC в клиническом материале (или в чистой культуре эшерихий); зарегистрированы в РФ — № ФСР 2010/07977 11 июня 2010 г. Для исследования продуктов питания разработана тест-система «Амплисенс ЕНЕС FL».
2.1. Исследование материала на ЕНЕС в лабораториях субъектов Российской Федерации
Клинические показания к обследованию пациентов:
- Гемолитико-уремический синдром.
- Гемоколит при эпидемиологических данных, подтверждающих возможность наличия эшерихиоза, вызванного ЕНЕС.
- Острая кишечная инфекция (ОКИ) у пациентов, возникшая в течение 10 дней, после возвращения из Германии.
Рекомендованный алгоритм действий при работе с клиническим материалом:
1. Тестирование образцов фекалий на наличие ДНК ЕНЕС с применением зарегистрированных в Российской Федерации в установленном порядке тест-систем.
2. При получении отрицательного результата на наличие ЕНЕС — исследование прекращается.
3. При получении положительного результата на наличие ЕНЕС — проводится высев образца фекалий на плотные дифференциально-диагностические питательные среды для энтеробактерий. 8-10 изолированных колоний отбирают для идентификации Е.coli по культурально-ферментативным свойствам.
4. Каждый изолят Е.coli, полученный из положительных (по наличию ДНК ЕНЕС) образцов фекалий тестируют на принадлежность к группе ЕНЕС (выявление шигоподобных токсинов, или генов, кодирующих их синтез).
5. Изоляты с подтвержденной принадлежностью к ЕНЕС серотипируют с использованием эшерихиозных сывороток (или иммуноглобулинами) согласно инструкции производителя. В первую очередь с сыворотками О157, О26, О55, O111 (при наличии сывороток — к серогруппам О113, О117, О145). Нетипируемые культуры направляются в референс-центры.
При отсутствии возможности серотипировать, культуры с положительным ПЦР-анализом на принадлежность к энтерогеморрагической группе направляют в референс-центр.
Показания к обследованию пищевых продуктов:
Рекомендованный алгоритм действий при работе с пищевыми продуктами:
1. Посев образцов продуктов на среды для первичного обогащения (МУК 4.2.992-00 «Методы выделения и идентификации энтерогеморрагической кишечной палочки Е.coli О157: Н7», ГОСТ Р 50474-93 «Продукты пищевые. Методы выявления и определения количества бактерий группы кишечных палочек (колиформных бактерий)» — среда Кесслера, трипказо-соевый бульон, бульон лактозный с бриллиантовым зеленым и желчью, грам-негативный бульон (GN-бульон).
2. Тестирование культуральной среды на наличие ДНК ЕНЕС после 24 часового обогащения.
3. При получении отрицательного результата — исследование прекращается.
4. При получении положительного результата проводится высев на плотные питательные среды с изоляцией не менее 8-10 колоний Е.coli для дальнейшего исследования.
5. Каждый изолят Е.coli, полученный из положительных (по наличию ДНК ЕНЕС) образцов культуральной среды тестируют на принадлежность к группе ЕНЕС (выявление шигоподобных токсинов, или генов, кодирующих их синтез).
6. Изоляты с подтвержденной принадлежностью к ЕНЕС серотипируют с использованием эшерихиозных сывороток (или иммуноглобулинами), согласно инструкции производителя. В первую очередь с сыворотками О157, О26, О55, О111 (при наличии сывороток — к серогруппам О113, О117, О145). Нетипируемые культуры направляются в референс-центры.
2.2. Исследование материала в референс-центре по мониторингу за возбудителями острых кишечных инфекций
В научно-исследовательском учреждении проводят подтверждающие исследования полученных культур E.coli на принадлежность к энтерогеморрагической группе. Методом ПЦР определяют тип шиго-токсина, молекулярно-генетическими методами (метод пуль-фореза) определяют принадлежность к О104: Н4, выделенному на территории Европы.