ОФС.1.7.2.0038.18. Общая фармакопейная статья. Определение содержания тритона X-100 методом обращенно-фазовой ВЭЖХ
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том II»)
Примечание
В соответствии с Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749 данный документ введен в действие с 01.12.2018. Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте http://femb.ru/femb/pharmacopea.php по состоянию на 14.03.2019 и разделен в Информационном банке на отдельные фармакопейные статьи.
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
| Определение содержания тритона X-100 методом обращенно-фазовой ВЭЖХ | ОФС.1.7.2.0038.18 Вводится впервые |
|---|
Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения содержания тритона X-100 в биологических лекарственных препаратах методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).
Тритон X-100 (4-(1,1,3,3-тетраметилбутил) фенил-полиэтиленгликоль) — неионное поверхностно-активное вещество, используется в качестве детергента в процессах инактивации вирусов с липидными оболочками биологических лекарственных препаратов.
Принцип метода обращенно-фазовой ВЭЖХ заключается в распределении компонентов исследуемого образца между полярным элюентом и неполярными группами на поверхности сорбента хроматографической колонки. Основные положения метода обращенно-фазовой ВЭЖХ изложены в ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография».
Для проведения хроматографии используют колонку с сорбентом C18.
В качестве подвижной фазы применяют смесь ацетонитрил (или метанол): вода с использованием градиента концентраций или при разделении в изократическом режиме разделения.
Анализ проводят с использованием ультрафиолетового детектора. Выбор длины волны (223 нм или 280 нм) зависит от состава препарата.
Для исключения влияния системных пиков на результаты анализа, хроматографии подвергают растворы подвижной фазы и плацебо.
Условия проведения анализа (тип колонки, состав подвижной фазы, вид элюирования, учет и интерпретация результатов) должны быть указаны в нормативной документации.
Определение пригодности хроматографической системы
Оценку пригодности хроматографической системы проводят по хроматограммам стандартного раствора.
Если в нормативной документации не указано иное, должны выполняться следующие требования пригодности хроматографической системы:
- величина фактора асимметрии пика тритона X-100 должна находиться в пределах от 0,8 до 1,5;
- относительное стандартное отклонение площади пика тритона X-100 не должно превышать 2,0%;
- время удерживания пика тритона X-100 на хроматограмме стандартного раствора должно соответствовать времени удерживания соответствующего пика на хроматограмме стандартного раствора.
Содержание тритона X-100 в препарате должно быть не более 3 мг/мл.
Испытуемый раствор. Испытуемый образец разводят по методике, указанной в нормативной документации. Степень разведения испытуемого раствора зависит от исходного содержания тритона X-100 и условий проведения анализа. В качестве растворителя используют воду очищенную или подвижную фазу.
Стандартный раствор. В качестве стандартного раствора используют соответствующие стандартные образцы тритона X-100, разведенные до необходимой концентрации тем же растворителем, что и испытуемый раствор.
Контрольный раствор. Используют серию препарата с известным содержанием тритона X-100. Процедура разведения должна быть аналогична процедуре, предусмотренной для испытуемого раствора, и указана в нормативной документации.