---
title: "\"МУК 4.2.2428-08. 4.2. Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Метод определения бактерий Cronobacter spp. (Enterobacter sakazakii) в продуктах для питания детей раннего возраста. Методические указания\""
number: "МУК 4.2.2428-08"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-2-2428-08-2"
---

## "МУК 4.2.2428-08. 4.2. Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Метод определения бактерий Cronobacter spp. (Enterobacter sakazakii) в продуктах для питания детей раннего возраста. Методические указания"

# "МУК 4.2.2428-08. 4.2. Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Метод определения бактерий Cronobacter spp. (Enterobacter sakazakii) в продуктах для питания детей раннего возраста. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 29.10.2008)

(ред. от 26.11.2013)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента Таможенного союза "О безопасности пищевой продукции" (ТР ТС 021/2011) и осуществления оценки (подтверждения) соответствия продукции (Решение Комиссии Таможенного союза от 09.12.2011 N 880).
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).
> [МУК 4.2.3144-13](https://bukva.ai/docs/muk-4-2-3144-13#p100001), утв. Роспотребнадзором 26.11.2013 введены в качестве Дополнения и изменения к данному документу.


<a id="p100001"></a>Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере

<div align="right">

защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**<br>
29 октября 2008 года

</div>



#### <a id="p100003"></a>4.2 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ.

<div align="right">

**БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ**

</div>


<a id="p100256"></a>**МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ БАКТЕРИЙ CRONOBACTER SPP.**
**(ENTEROBACTER SAKAZAKII) В ПРОДУКТАХ ДЛЯ ПИТАНИЯ ДЕТЕЙ**
**РАННЕГО ВОЗРАСТА**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.2.2428-08**

<a id="p100002"></a>Дата введения
15 декабря 2008 года

1. <a id="p100006"></a>Разработаны Государственным учреждением "Научно-исследовательский институт питания" Российской Академии медицинских наук.
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
3. <a id="p100008"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 29 октября 2008 г.

<div align="center">

4. <a id="p100009"></a>Введены в действие с 15 декабря 2008 г.

</div>

<div align="right">

5. <a id="p100010"></a>Введены впервые.

1. <a id="p100011"></a>Общие положения и область применения

</div>


<a id="p100257"></a>1.1. Настоящие методические указания устанавливают порядок контроля и методы определения бактерий Cronobacter spp. (Enterobacter sakazakii) - возбудителей пищевых токсикоинфекций у детей раннего возраста - при осуществлении государственного санитарно-эпидемиологического надзора, а также при санитарно-эпидемиологическом расследовании вспышек пищевых отравлений и инфекций с пищевым путем передачи.

> *(в ред. [МУК 4.2.3144-13](https://bukva.ai/docs/muk-4-2-3144-13#p100010), утв. Роспотребнадзором 26.11.2013)*

<a id="p100013"></a>1.2. Методические указания предназначены для органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, осуществляющих контроль качества и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов, в т.ч. импортируемых в Российскую Федерацию, а также лабораторную диагностику заболеваний с пищевым путем передачи. Методические указания могут быть использованы другими лабораторными центрами, осуществляющими контроль качества и безопасности пищевых продуктов и аккредитованными в установленном порядке.
<a id="p100014"></a>1.3. Контролю на наличие бактерий E. sakazakii подлежат детские молочные смеси и продукты прикорма сухие, а также специализированные продукты для лечебного и профилактического питания детей первого года жизни, при анализе которых на наличие патогенных микроорганизмов, в т.ч. сальмонелл, не были выявлены облигатные патогены, принадлежащие к родам Salmonella, Shigella, Yersinia, группам энтеровирулентных Escherichia coli, но выявлялся рост сопутствующей грамотрицательной неспорообразующей микрофлоры.
<a id="p100015"></a>1.4. Необходимость контроля указанных групп продукции на наличие E. sakazakii обусловлена регистрацией в последние годы документированных спорадических случаев и вспышек септических инфекций и некротизирующего энтероколита у детей 1 года жизни, в первую очередь недоношенных, новорожденных с низкой массой тела или иммунокомпромиссных. Все случаи заболеваний связаны с употреблением детских молочных смесей, контаминированных E. sakazakii, в т.ч. при очень низких уровнях возбудителя (1 - 10 КОЕ/г). При этом установлено, что в первую очередь E. sakazakii может попадать в сухие молочные смеси с контаминированными ингредиентами, добавляемыми после сушки, или из окружающей среды в процессе упаковки готового продукта.
<a id="p100016"></a>1.5. Предлагаемый метод определения бактерий E. sakazakii в пищевых продуктах, предназначенных для детей раннего возраста, предусматривает определение наличия или отсутствия указанных микроорганизмов в определенной массе (объеме) продукта в соответствии с нормативами СанПиН 2.3.2.1078-01 "Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов", выраженными в альтернативной форме и основанными на существующей системе отбора образцов и оценки результатов анализа по двухклассной системе. Настоящие методические указания также предусматривают определение количества E. sakazakii в пищевых продуктах для детей раннего возраста методом наиболее вероятного числа (НВЧ).
<a id="p100017"></a>1.6. Обнаружение E. sakazakii в 300 г инстантных молочных смесей и продуктов прикорма сухих, предназначенных для детей 1 года жизни, или в 300 г сухих молочных смесей или специализированных продуктов для детей младше 6 месяцев должно рассматриваться как присутствие патогенных бактерий в исследуемых образцах, свидетельствующее о высокой степени риска для детей данной возрастной категории, и служить основанием для запрета использования такой продукции с принятием соответствующих мер, направленных на обеспечение безопасности продуктов детского питания.

#### <a id="p100258"></a>1.7 Методические указания носят рекомендательный характер.


> *(п. 1.7 введен [МУК 4.2.3144-13](https://bukva.ai/docs/muk-4-2-3144-13#p100011), утв. Роспотребнадзором 26.11.2013)*


<div align="center">

2. <a id="p100259"></a>Сущность метода

</div>


(раздел 2 в ред. [МУК 4.2.3144-13](https://bukva.ai/docs/muk-4-2-3144-13#p100013),
утв. Роспотребнадзором 26.11.2013)

<a id="p100260"></a>*2.1. Метод определения бактерий Enterobacter sakazakii (Cronobacter spp.) основан на высеве определенных количеств продукта в жидкие неселективные среды для предварительного обогащения проб, пересеве в жидкие селективные среды для выделения бактерий семейства Enterobacteriaceae с последующим пересевом на поверхность твердых селективных сред, инкубировании посевов, выявлении в этих посевах бактерий, способных расти и образовывать типичные колонии на поверхности селективного агара, с последующим выделением чистой культуры.*
<a id="p100261"></a>*Ниже представлена методическая схема определения Cronobacter spp.*

<a id="p100262"></a>Таблица 1

<a id="p100263"></a>**СХЕМА ИССЛЕДОВАНИЯ СУХИХ ДЕТСКИХ СМЕСЕЙ НА НАЛИЧИЕ**
**CRONOBACTER SPP.**


| <a id="p100264"></a>Этап | <a id="p100265"></a>Продолжительность инкубации, ч | <a id="p100266"></a>Температура |
| --- | --- | --- |
| <a id="p100267"></a>1. Подготовка реактивов и материалов |  |  |
| <a id="p100268"></a>2. Растворение навесок продукта в забуференной пептонной воде (ЗПВ) в соотношении 1:9 (при необходимости определения количества - навесок массой 100, 10 и 1 г в 3 колбы или пробирки с ЗПВ каждая), смешивание и инкубация | <a id="p100269"></a>18 +/- 2 | <a id="p100270"></a>37 °С |
| <a id="p100271"></a>3. Посев 0,1 куб. см проинкубированной суспензии в селективный питательный бульон для выделения бактерий семейства Enterobacteriaceae и инкубация | <a id="p100272"></a>24 +/- 2 | <a id="p100273"></a>44 °С |
| <a id="p100274"></a>4. Персеев 0,1 мл проинкубированного бульона для выделения Enterobacteriaceae на поверхность хромогенного агара для выявления Cronobacter spp. $(ESIA^{TM})$ или фиолетово-красного желчного агара с глюкозой (VRBG-agar) | <a id="p100275"></a>24 +/- 2 | <a id="p100276"></a>44 °С |
| <a id="p100277"></a>5. Отбор 5 подозрительных на Cronobacter spp. колоний с поверхности хромогенного ESIA-агара, отбор всех типов колонии с поверхности фиолетово-красного желчного агара с глюкозой (VRBG-agar); пересев на триптон-соевый агар с дрожжевым экстрактом (TSYEA) и инкубация | <a id="p100278"></a>48 +/-2 | <a id="p100279"></a>25 °С |
| <a id="p100280"></a>6. Отбор колоний с желтым пигментом, микроскопия по Граму и подтверждение их видовой принадлежности по биохимическим тестам идентификации |  |  |
| <a id="p100281"></a>7. Интерпретация результатов. При необходимости - подсчет наиболее вероятного числа (НВЧ) по количеству положительных проб в каждой из засеянных навесок продукта |  |  |


<a id="p100282"></a>2.2. Идентификация чистых культур проводится по совокупности морфологических, биохимических и других признаков, определяющих принадлежность к E.sakazakii (Cronobacter spp.). Подтверждение принадлежности к Cronobacter spp. производится путем получения развернутых биохимических характеристик штаммов. Допускается использование тест-систем для биохимической дифференциации энтеробактерий API 20E, Rapid 20E, ID 32E (ф. "БиоМерье", Франция) и др.
<a id="p100283"></a>Определение биохимических характеристик, подтверждающих принадлежность выделенных штаммов к роду Cronobacter spp. и дифференцирующих их от близкородственных представителей энтеробактерий Enterobacter cloacae и Pantoea agglomerans, приведены в табл. 2.

<div align="center">

<a id="p100284"></a>Таблица 2

<a id="p100285"></a>**БИОХИМИЧЕСКАЯ ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ CRONOBACTER SPP.**

</div>



<table>
<colgroup><col width="38%"><col width="21%"><col width="20%"><col width="21%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100286"></a>Тест или субстрат</td><td colspan="3"><a id="p100287"></a>Реакции</td></tr>
<tr><td><a id="p100288"></a>E. sakazakii (Cronobacter spp.)</td><td><a id="p100289"></a>E. cloacae</td><td><a id="p100290"></a>P. agglomerans</td></tr>
<tr><td><a id="p100291"></a>Желтый пигмент при 25 °С</td><td><a id="p100292"></a>+</td><td><a id="p100293"></a>-</td><td><a id="p100294"></a>(+)</td></tr>
<tr><td><a id="p100295"></a>D-сорбит</td><td><a id="p100296"></a>-</td><td><a id="p100297"></a>+</td><td><a id="p100298"></a>(+)</td></tr>
<tr><td><a id="p100299"></a>$\alpha - \text{глюкозидаза}$</td><td><a id="p100300"></a>+</td><td><a id="p100301"></a>(-)</td><td><a id="p100302"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100303"></a>Разжижение желатины (22 °С)</td><td><a id="p100304"></a>-</td><td><a id="p100305"></a>-</td><td><a id="p100306"></a>+</td></tr>
<tr><td><a id="p100307"></a>Оксидаза</td><td><a id="p100308"></a>-</td><td><a id="p100309"></a>-</td><td><a id="p100310"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100311"></a>Лизиндекарбоксилаза</td><td><a id="p100312"></a>-</td><td><a id="p100313"></a>-</td><td><a id="p100314"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100315"></a>Аргининдигидролаза</td><td><a id="p100316"></a>+</td><td><a id="p100317"></a>+</td><td><a id="p100318"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100319"></a>Орнитиндекарбоксилаза</td><td><a id="p100320"></a>+</td><td><a id="p100321"></a>+</td><td><a id="p100322"></a>(-)</td></tr>
<tr><td><a id="p100323"></a>Утилизация цитратов</td><td><a id="p100324"></a>+</td><td><a id="p100325"></a>+</td><td><a id="p100326"></a>+</td></tr>
<tr><td><a id="p100327"></a>Реакция Фогес-Проскауэра</td><td><a id="p100328"></a>+</td><td><a id="p100329"></a>+</td><td><a id="p100330"></a>(+)</td></tr>
<tr><td><a id="p100331"></a>Индол</td><td><a id="p100332"></a>-</td><td><a id="p100333"></a>-</td><td><a id="p100334"></a>(-)</td></tr>
<tr><td><a id="p100335"></a>Глюкоза</td><td><a id="p100336"></a>+</td><td><a id="p100337"></a>+</td><td><a id="p100338"></a>+</td></tr>
<tr><td><a id="p100339"></a>Маннит</td><td><a id="p100340"></a>+</td><td><a id="p100341"></a>+</td><td><a id="p100342"></a>+</td></tr>
<tr><td><a id="p100343"></a>Лактоза</td><td><a id="p100344"></a>+</td><td><a id="p100345"></a>+</td><td><a id="p100346"></a>(+)</td></tr>
<tr><td><a id="p100347"></a>Сахароза</td><td><a id="p100348"></a>+</td><td><a id="p100349"></a>+</td><td><a id="p100350"></a>(+)</td></tr>
<tr><td><a id="p100351"></a>L-рамноза</td><td><a id="p100352"></a>+</td><td><a id="p100353"></a>+</td><td><a id="p100354"></a>0)</td></tr>
<tr><td><a id="p100355"></a>D-мелибиоза</td><td><a id="p100356"></a>+</td><td><a id="p100357"></a>+</td><td><a id="p100358"></a>+</td></tr>
<tr><td><a id="p100359"></a>Амигдалин</td><td><a id="p100360"></a>+</td><td><a id="p100361"></a>-</td><td><a id="p100362"></a>(-)</td></tr>
<tr><td><a id="p100363"></a>Подвижность</td><td><a id="p100364"></a>+</td><td><a id="p100365"></a>+</td><td><a id="p100366"></a>(+)</td></tr>
<tr><td><a id="p100367"></a>Мукоидный рост</td><td><a id="p100368"></a>+</td><td><a id="p100369"></a>+</td><td><a id="p100370"></a>+</td></tr>
<tr><td colspan="4"><a id="p100371"></a>Примечания:<br>"+" - 90 - 100% штаммов положительные; "(+)" - 21 - 89% штаммов положительные;<br>"-" - 0 - 9% штаммов положительные; "(-)" - 10 - 24% штаммов положительные.</td></tr>
</table>


<div align="center">

<a id="p100372"></a>Ведущими дифференцирующими признаками Cronobacter spp. являются:<br>
- <a id="p100373"></a>способность к образованию желтого пигмента при культивировании на неселективных средах при температуре 25 °С;<br>
- <a id="p100374"></a>наличие $\alpha - \text{глюкозидазной}$ активности на хромогенных средах, содержащих $5 - \text{бромо} - 4 - \text{хлоро} - 3 - \text{индолил} - \alpha - D - \text{глюкопиранозид}$ ;<br>
- <a id="p100375"></a>отсутствие способности к ферментации D-сорбита.<br>
<a id="p100376"></a>Для дифференциации Cronobacter spp. от сорбитвариабельных и обладающих желтым пигментом представителей рода Pantoea agglomerans (Syn: Erwinia spp.) используется тест разжижения желатины.".

3. <a id="p100063"></a>Аппаратура, материалы, лабораторная посуда,<br>
реактивы и питательные среды

</div>



#### <a id="p100064"></a>3.1 Аппаратура и инструментарий


<div align="center">

<a id="p100065"></a>Анализатор потенциометрический, погрешность<br>
измерений pH +/- 0,01 [ГОСТ 19881-74](https://bukva.ai/docs/gost-19881-74)<br>
<a id="p100066"></a>Шкаф сушильный стерилизационный ШСС-80П<br>
или других марок, позволяющий поддерживать<br>
температуру (160 +/- 5) °C                           ТУ 64-1-28-70-76<br>
<a id="p100067"></a>Термостат, позволяющий поддерживать рабочую<br>
температуру 37 °C с отклонением от заданной<br>
**+/- 1 °C                                             ТУ 64-1-1382-83**<br>
<a id="p100068"></a>Термостат, позволяющий поддерживать рабочую<br>
температуру 41,5 °C с отклонением от заданной<br>
**+/- 1 °C                                             ТУ 64-1-1382-83**<br>
<a id="p100069"></a>Весы лабораторные общего назначения 2 и 4<br>
класса точности с наибольшим пределом<br>
взвешивания 200 г                                    ГОСТ 24104-88<br>
<a id="p100070"></a>Микроскоп биологический МБИ-1, МБИ-2, МБИ-3,<br>
**МБР-1, МБР-3, МБС                                    ГОСТ 8284-78**<br>
<a id="p100071"></a>Стерилизаторы паровые медицинские или<br>
аналогичные                                          ГОСТ 19569-89Е<br>
<a id="p100072"></a>Дистиллятор, обеспечивающий качество<br>
дистиллированной воды в соответствии с ГОСТ 6709-72<br>
<a id="p100073"></a>Гомогенизатор перистальтического типа "Микс-2",<br>
"Стомайкер" или других наименований                  AES Lab,<br>
                                                     Cat. N AESAP 1066<br>
<a id="p100074"></a>Гомогенизатор типа "вортекс"<br>
<a id="p100075"></a>Микропипетки на 200 - 1000 мкл                       BIOHIT, Cat. N 720040<br>
                                                     или "Ленпипет"<br>
<a id="p100076"></a>Облучатель бактерицидный настенный<br>
ОБН-150 или других видов                             ТУ-16-535-84<br>
<a id="p100077"></a>Холодильник бытовой электрический ГОСТ 16317-87<br>
<a id="p100078"></a>Пинцет медицинский [ГОСТ 21241-89](https://bukva.ai/docs/trebovaniya-gost-21241-89)<br>
<a id="p100079"></a>Ножницы медицинские                                  ГОСТ 21239-89<br>
<a id="p100080"></a>Скальпель хирургический, 15 см [ГОСТ 21240-89](https://bukva.ai/docs/trebovaniya-gost-21240-89)<br>
<a id="p100081"></a>Часы механические сигнальные [ГОСТ 3145-84](https://bukva.ai/docs/standart-gost-3145-84)<br>
<a id="p100082"></a>Электроплитка ГОСТ 14919-83<br>
<a id="p100083"></a>Аппарат универсальный для встряхивания<br>
жидкости в колбах и пробирках<br>
(или другая аппаратура для встряхивания)             ТУ 64-1-2451-78

</div>



#### <a id="p100084"></a>3.2 Лабораторная посуда и материалы


<div align="center">

<a id="p100085"></a>Бумага фильтровальная лабораторная ГОСТ 12026-76<br>
<a id="p100086"></a>Марля медицинская ГОСТ 9412-77

</div>

<a id="p100087"></a>Колбы плоскодонные конические
или круглые разной вместимости [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100088"></a>Воронки стеклянные ГОСТ 25336-82
<a id="p100089"></a>Вата медицинская гигроскопическая [ГОСТ 5556-81](https://bukva.ai/docs/gost-5556-81)
<a id="p100090"></a>Пипетки вместимостью 1, 2, 5 и 10 куб. см [ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91)
<a id="p100091"></a>Пробирки типов П1, П2 ГОСТ 25336-82
<a id="p100092"></a>Стекла предметные для микропрепаратов [ГОСТ 6672-75](https://bukva.ai/docs/gost-6672-75-gosstandart-sssr)
<a id="p100093"></a>Спиртовки лабораторные стеклянные ГОСТ 23932-90
<a id="p100094"></a>Термометр ртутный с диапазоном измерения
от 0 до 100 °C (цена деления шкалы 1 °C) ГОСТ 13646-68
<a id="p100095"></a>Чашки биологические (Петри) или одноразовые
из полимерных материалов ГОСТ 23932-90

<div align="center">

<a id="p100096"></a>Пакеты стерильные для гомогенизатора                 AES Lab.,<br>
                                                     Cat. N AES400/50G<br>
<a id="p100097"></a>Отраслевой стандарт для визуальной<br>
оценки мутности N 10                                 ГИСК

</div>

                                                     им. Л.А. Тарасевича
<a id="p100098"></a>Денситометр для бактериальных суспензий
типа "Densi-La-Meter" или "Денсимат"                 ф. "Лахема",

<div align="center">

                                                     "BioMerieux"<br>
<a id="p100099"></a>Стандарт Макфарланда N 1, 2, 3                       ф. "BioMerieux"<br>
<a id="p100100"></a>Петля бактериологическая

</div>



#### <a id="p100101"></a>3.3 Реактивы и питательные среды


<a id="p100102"></a>Агар микробиологический ГОСТ 17206-84
<a id="p100103"></a>Вода дистиллированная ГОСТ 6709-72
<a id="p100104"></a>D-глюкоза, ч. [ГОСТ 6038-79](https://bukva.ai/docs/gost-6038-79)
<a id="p100105"></a>D-лактоза, 1-водная                                  ТУ 6-09-22-98-79
<a id="p100106"></a>Маннит
<a id="p100107"></a>D-сорбит
<a id="p100108"></a>Рамноза
<a id="p100109"></a>Калия гидроокись [ГОСТ 24363-80](https://bukva.ai/docs/gost-24363-80)
<a id="p100110"></a>Калий фосфорнокислый однозамещенный, ч. [ГОСТ 4198-75](https://bukva.ai/docs/gost-4198-75)
<a id="p100111"></a>Калий фосфорнокислый двузамещенный 3-водный [ГОСТ 2493-75](https://bukva.ai/docs/standart-gost-2493-75)
<a id="p100112"></a>Кислота соляная, х.ч. ГОСТ 3118-77
<a id="p100113"></a>Литий хлористый, ч., или х.ч., или ч.д.а. ГОСТ 4328-77
<a id="p100114"></a>Масло иммерсионное для микроскопии                   ГОСТ 31739-78
<a id="p100115"></a>Набор реактивов для окраски по Граму
<a id="p100116"></a>Натрий-аммоний фосфорнокислый
двузамещенный, 4-водный, ч. или х.ч. [ГОСТ 4170-78](https://bukva.ai/docs/gost-4170-78)
<a id="p100117"></a>Натрия гидроокись, ч.д.а. ГОСТ 4328-77
<a id="p100118"></a>Натрий лимоннокислый, 5,5-водный, ч.д.а.             ГОСТ 22280-75
<a id="p100119"></a>Натрий хлористый, ч., или х.ч., или ч.д.а. ГОСТ 4233-77
<a id="p100120"></a>Пара-диметиламинобензальдегид, ч.                    ТУ 6-09-3272-77
<a id="p100121"></a>Пептон сухой ферментативный для
бактериологических целей [ГОСТ 13805-76](https://bukva.ai/docs/standart-gost-13805-76)
<a id="p100122"></a>Спирт этиловый ректификованный технический ГОСТ 18300-87
<a id="p100123"></a>Спирт этиловый ректификованный [ГОСТ 5962-67](https://bukva.ai/docs/gost-5962-67)
<a id="p100124"></a>Феноловый красный ГОСТ 5853-51
<a id="p100125"></a>Фенолфталеин                                         ГОСТ 5850-72
<a id="p100126"></a>Фуксин основной                                      ТУ 6-09-4119-75
<a id="p100127"></a>Хлороформ технический                                ГОСТ 2-15-76-72
<a id="p100128"></a>Уксусная кислота ГОСТ 61-75
<a id="p100129"></a>Сульфаниловая кислота
альфа-Нафтол
<a id="p100130"></a>Цинк порошкообразный ГОСТ 3640
<a id="p100131"></a>Желатин сухой
<a id="p100132"></a>Экстракт дрожжевой сухой
<a id="p100377"></a>Тест-штамм Cronobacter spp. (Enterobacter
sakazakii), типичный по культуральным,
морфологическим и биохимическим свойствам            ГИСК
                                                     им. Л.А. Тарасевича

> *(в ред. [МУК 4.2.3144-13](https://bukva.ai/docs/muk-4-2-3144-13#p100010), утв. Роспотребнадзором 26.11.2013)*


<a id="p100134"></a>Пептонная вода забуференная (сухая)
<a id="p100135"></a>Триптозный ГРМ-агар и ГРМ-бульон,                    ФС 42-3377-97
                                                     (ГНЦПМ)
<a id="p100136"></a>Питательный бульон и питательный агар                ТУ 10-02-02-789-176-94
<a id="p100137"></a>Триптон-соевый агар с дрожжевым
экстрактом (TSYEA)                                   HiMedia M1214
<a id="p100138"></a>Триптон-соевый бульон с дрожжевым

<div align="center">

экстрактом (TSYEB)                                   HiMedia M1263

</div>

<a id="p100139"></a>Среды Гисса с глюкозой, лактозой, маннитом,
рамнозой, дульцитом, адонитом, сахарозой,
сорбитом                                             ФС (ЦНИИВС
                                                     им. И.И. Мечникова
                                                     НИИ питательных сред)
<a id="p100140"></a>SIM-arap (сероводород-индол-подвижность)             Difco
<a id="p100141"></a>Среда Эндо                                           ТУ 9229-072-00419785
<a id="p100142"></a>Агар желчный фиолетово-красный                       ТУ 9229-072-00419785
<a id="p100143"></a>Среда Кесслер с глюкозой [ГОСТ 30519-97](https://bukva.ai/docs/gost-30519-97)
<a id="p100144"></a>Бульон Мак-Конки с глюкозой [ГОСТ 30519-97](https://bukva.ai/docs/gost-30519-97)
<a id="p100145"></a>Бульон с желчью, бриллиантовым зеленым
и глюкозой [ГОСТ 30519-97](https://bukva.ai/docs/gost-30519-97)
<a id="p100146"></a>Тест-системы биохимические для видовой
идентификации API 20E, Rapid 20E, ID 32E,
для идентификации Enterobacteriaceae
и других грамотрицательных палочек                   BioMerieux
<a id="p100147"></a>Набор реактивов для окраски по Граму
<a id="p100148"></a>Набор для постановки оксидазного теста
<a id="p100378"></a>модифицированный лаурилсульфат триптозный бульон
с ванкомицином (мЛСТ с ванкомицином)

> *(введено [МУК 4.2.3144-13](https://bukva.ai/docs/muk-4-2-3144-13#p100132), утв. Роспотребнадзором 26.11.2013)*

<a id="p100379"></a>Enterobacter sakazakii хромогенный агар $(ESIA^{TM})$ 
или селективные хромогенные среды аналогичного
назначения, соответствующие требованиями стандарта
**ISO/TS 22964:2006 IDF/RM 210:2006**

> *(введено [МУК 4.2.3144-13](https://bukva.ai/docs/muk-4-2-3144-13#p100133), утв. Роспотребнадзором 26.11.2013)*


<a id="p100149"></a>Примечание. Допускается использование других питательных сред и диагностических препаратов с аналогичными характеристиками, прошедших регистрацию в РФ в установленном порядке, после процедуры их стандартизации относительно официально утвержденных методов анализа.

<a id="p100150"></a>Питательные среды и биологические препараты зарубежного производства должны иметь международный сертификат качества ИСО 9000 или EN 29000. Питательные среды и препараты отечественного производства должны вырабатываться по нормативной документации, утвержденной в установленном порядке.

<div align="center">

4. <a id="p100151"></a>Подготовка к анализу

</div>



#### <a id="p100152"></a>4.1 Приготовление растворов и реактивов



| 4.1.1. Пептонно-солевой раствор | По [ГОСТ 26669-85](https://bukva.ai/docs/gost-26669-85) |
| --- | --- |
| 4.1.2. Изотонический (0,85%-й водный) раствор хлорида натрия | По [ГОСТ 26669-85](https://bukva.ai/docs/gost-26669-85) |
| 4.1.3. Приготовление растворов и реактивов для окраски препаратов по Граму | По [ГОСТ 10444.1](https://bukva.ai/docs/gost-10444-1-84) или в соответствии с инструкцией по применению |
| 4.1.4. Стерильный фосфатный буфер с pH 7,2 +/- 0,1 | KH PO - 0,45 г, Na HPO - 5,34 г 2 4 2 4 в 1000 куб. см дистиллированной H O, 2 стерилизовать при температуре 121 °C в течение 30 мин. |



#### <a id="p100157"></a>4.2 Приготовление питательных сред


<a id="p100158"></a>4.2.1. Среды промышленного изготовления, поименованные в [п. 3.3](#p100101), готовят согласно прописям на этикетке или в соответствии с рекомендациями фирмы-изготовителя.
<a id="p100159"></a>4.2.2. Питательный агар с 5% глюкозы готовят в соответствии с [ГОСТ 10444.1-84](https://bukva.ai/docs/gost-10444-1-84) "Консервы. Приготовление растворов, красок, индикаторов, питательных сред, применяемых в микробиологическом анализе".
<a id="p100160"></a>4.2.3. Триптон-соевый бульон с дрожжевым экстрактом, триптон-соевый агар с дрожжевым экстрактом.
<a id="p100161"></a>Состав сред (г/л): ферментативный гидролизат казеина - 17,0; пептон соевый - 3,0; натрий хлористый - 5,0; фосфат калия однозамещенный - 2,5; глюкоза - 2,5; дрожжевой экстракт - 6,0; агар микробиологический (для TSYEA) - 15,0.
<a id="p100162"></a>Компоненты растворяют в 1000 куб. см дистиллированной воды, тщательно перемешивают, устанавливают pH 7,3 +/- 0,2 и автоклавируют при 121 °C в течение 15 мин.
<a id="p100163"></a>Готовые среды разливают в стерильные колбы или пробирки и хранят в защищенных от света условиях при температуре не выше 8 °C.
<a id="p100164"></a>4.2.4. Среда для определения подвижности: 20 г гидролизата казеина ферментативного, 6 г пептона мясного ферментативного и 5 г агара растворяют в 1000 куб. см дистиллированной воды, устанавливают pH 7,3 +/- 0,2, разливают в пробирки по 5 - 7 куб. см и стерилизуют при 121 °C в течение 15 мин.
<a id="p100165"></a>4.2.5. Среды Гисса с углеводами: 10 г пептона ферментативного и 5 г натрия хлористого растворяют в 1000 куб. см дистиллированной воды и добавляют 10 г соответствующего углевода. Устанавливают pH 7,1 +/- 0,1, вносят 10 мл индикатора Андреде (также возможно использование индикатора бромкрезолового пурпурного, "ВР" и др.), разливают в пробирки и стерилизуют при 112 °C в течение 20 мин.


##### <a id="p100380"></a>4.2.6 Забуференная пептонная вода



> *(п. 4.2.6 введен [МУК 4.2.3144-13](https://bukva.ai/docs/muk-4-2-3144-13#p100135), утв. Роспотребнадзором 26.11.2013)*



| <a id="p100381"></a>Состав среды | <a id="p100382"></a>Концентрация, г/куб. дм |
| --- | --- |
| <a id="p100383"></a>Хлорид натрия (NaCl) | <a id="p100384"></a>5,0 |
| <a id="p100385"></a>Ферментативный гидролизат казеина | <a id="p100386"></a>10,0 |
| <a id="p100387"></a>Двузамещенный фосфат натрия 12-водный $(Na_{2}HPO_{4} \times 12\text{Н}_{2}O)$ | <a id="p100388"></a>9,0 |
| <a id="p100389"></a>Однозамещенный фосфат калия $(\text{КН}_{2}\text{РО}_{4})$ | <a id="p100390"></a>1,5 |


<a id="p100391"></a>Компоненты растворяют в 1000 куб. см дистиллированной воды, тщательно перемешивают, устанавливают рН 7,0 +/- 0,2 при 25 °С, и автоклавируют при 121 °С в течение 15 мин.


##### <a id="p100392"></a>4.2.7 Модифицированный лаурилсульфат триптозный бульон

(мЛСТ) с ванкомицином


> *(п. 4.2.7 введен [МУК 4.2.3144-13](https://bukva.ai/docs/muk-4-2-3144-13#p100147), утв. Роспотребнадзором 26.11.2013)*



| <a id="p100393"></a>Состав среды | <a id="p100394"></a>Концентрация, г/куб. дм |
| --- | --- |
| <a id="p100395"></a>Хлорид натрия (NaCl) | <a id="p100396"></a>34,0 |
| <a id="p100397"></a>Пептон ферментативный | <a id="p100398"></a>20,0 |
| <a id="p100399"></a>Лактоза | <a id="p100400"></a>5,0 |
| <a id="p100401"></a>Однозамещенный фосфат калия $(KH_{2}PC_{4})$ | <a id="p100402"></a>2,75 |
| <a id="p100403"></a>Двузамещенный фосфат калия $(\text{К}_{2}\text{НР}0_{4})$ | <a id="p100404"></a>2,75 |
| <a id="p100405"></a>Лаурилсульфат натрия $(C_{12}H_{25}NaO_{5}S)$ | <a id="p100406"></a>0,1 |


<a id="p100407"></a>Компоненты растворяют в 1000 куб. см дистиллированной воды, тщательно перемешивают, устанавливают рН 6,8 +/- 0,2 при 25 °С, разливают по 10 мл в пробирки и автоклавируют при 121 °С в течение 15 мин.
<a id="p100408"></a>Приготовление рабочего раствора ванкомицина: 10 мг ванкомицина растворяют в 10 куб. см дистиллированной воды, тщательно перемешивают и стерилизуют методом мембранной фильтрации. Готовый раствор ванкомицина может храниться при температуре от 0 до 5 °С в течение 15 суток.
<a id="p100409"></a>Для получения готовой среды раствор ванкомицина вносят в каждую пробирку со стерильной основой мЛСТ в количестве 0,1 куб. см для получения конечной концентрации ванкомицина в готовой среде 10 мкг/куб. см. Готовая среда может храниться при температуре от 0 до 5 °С в течение 1 суток.


##### <a id="p100410"></a>4.2.8 Enterobacter sakazakii хромогенный агар $(ESIA^{TM})$



> *(п. 4.2.8 введен [МУК 4.2.3144-13](https://bukva.ai/docs/muk-4-2-3144-13#p100165), утв. Роспотребнадзором 26.11.2013)*



<table>
<colgroup><col width="76%"><col width="24%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100411"></a>Состав среды</td><td><a id="p100412"></a>Концентрация, г/куб. дм</td></tr>
<tr><td><a id="p100413"></a>Панкреатический гидролизат казеина (триптон)</td><td><a id="p100414"></a>7,0</td></tr>
<tr><td><a id="p100415"></a>Дрожжевой экстракт</td><td><a id="p100416"></a>3,0</td></tr>
<tr><td><a id="p100417"></a>Хлорид натрия (NaCl)</td><td><a id="p100418"></a>5,0</td></tr>
<tr><td><a id="p100419"></a>Деоксихолат натрия</td><td><a id="p100420"></a>0,6</td></tr>
<tr><td><a id="p100421"></a>$(C_{14}H_{15}BrClNO_{6})$ $5 - \text{бромо} - 4 - \text{хлоро} - 3 - \text{индолил} - \alpha - D - \text{глюкопиранозид}$</td><td><a id="p100422"></a>0,15</td></tr>
<tr><td><a id="p100423"></a>Кристаллический фиолетовый</td><td><a id="p100424"></a>2 мг</td></tr>
<tr><td><a id="p100425"></a>Агар-агар</td><td><a id="p100426"></a>12,0 - 18,0 &lt;*&gt;</td></tr>
<tr><td colspan="2"><a id="p100427"></a>--------------------------------<br>&lt;*&gt; В зависимости от способности агара к гелеобразованию.</td></tr>
</table>


<a id="p100428"></a>Компоненты растворяют в 1000 куб. см дистиллированной воды, тщательно перемешивают, устанавливают рН 7,0 +/- 0,2 при 25 °С и автоклавируют при 121 °С в течение 15 мин. Стерилизованную агаровую среду охлаждают до температуры 44 - 47 °С и разливают по 15 куб. см в стерильные чашки Петри.
<a id="p100429"></a>Готовая среда может храниться при температуре от 0 до 5 °С в течение 1 суток.

<div align="center">

5. <a id="p100166"></a>Отбор и подготовка проб к анализу

</div>


<a id="p100167"></a>5.1. Отбор и подготовку проб продукции производят в соответствии с [ГОСТ 26668-85](https://bukva.ai/docs/gost-26668-85) "Методы отбора проб для микробиологических анализов", [ГОСТ 26669-85](https://bukva.ai/docs/gost-26669-85) "Продукты пищевые и вкусовые. Подготовка проб для микробиологических анализов", [МУК 4.2.577-96](https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-muk-4-2-577-96) "Методы микробиологического контроля продуктов детского, лечебного питания и их компонентов", [ГОСТ Р 51446-99](https://bukva.ai/docs/standart-601-st) (ИСО 7218-96). Масса или объем отбираемых проб должны быть достаточными для проведения исследования на патогенные микроорганизмы и минимально вдвое превышать аналитический образец.
<a id="p100168"></a>5.2. От продукции в потребительской таре пробы отбирают в количестве одной или нескольких единиц в зависимости от массы или объема потребительской тары, с тем чтобы количество было достаточным для проведения анализа. От продукции в транспортной или потребительской таре больших размеров (или неупакованной) пробы отбирают из разных мест с различной глубины, включая поверхность.
<a id="p100169"></a>5.3. Для микробиологических анализов пробы отбирают до взятия проб на физико-химические и органолептические анализы стерильным инструментом в стерильную посуду.
<a id="p100170"></a>5.4. Первичный посев исследуемых проб продуктов на патогенные микроорганизмы проводят в соответствии с порядком, изложенным в [МУК 4.2.577-96](https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-muk-4-2-577-96) "Методы микробиологического контроля продуктов детского, лечебного питания и их компонентов".
<a id="p100171"></a>5.5. При отсутствии роста облигатных патогенов, принадлежащих к родам Salmonella, Shigella, Yersinia, группам энтеровирулентных Escherichia coli, но при обнаружении роста сопутствующей грамотрицательной неспорообразующей микрофлоры в нормируемых навесках исследуемых продуктов, от них отбирают дополнительные пробы (2 навески по 100 г при первичном посеве 100 г продукта, 2 невески по 125 г при первичном посеве 50 г, 2 навески по 137,5 г при первичном посеве 25 г) и анализируют в соответствии с процедурой, изложенной в разделе 6.

6. <a id="p100430"></a>Проведение анализа

(раздел 6 в ред. [МУК 4.2.3144-13](https://bukva.ai/docs/muk-4-2-3144-13#p100186),
утв. Роспотребнадзором 26.11.2013)

<a id="p100431"></a>6.1. Пробы продуктов массой 100 г, 125 г или 137,5 г вносят в забуференную пептонную воду (ЗПВ) по [п. 4.2.6](#p100380) в соотношении 1:9 по объему. Посевы термостатируют при температуре (37 +/- 1) °С в течение (18 +/- 2) ч.
<a id="p100432"></a>6.2. При количественном анализе общая масса (объем) навески должна быть не менее 400 г (куб. см).
<a id="p100433"></a>Из подготовленной по [п. 5](#p100166) пробы отбирают 4 навески (порции) продукта массой 100 г (куб. см) каждая для анализа. Производят посев каждой из трех навесок (порций) в 900 куб. см ЗПВ и перемешивают.
<a id="p100434"></a>Из четвертой навески (порции) массой (объемом) 100 г (куб. см) отбирают три навески (порции) продукта массой 10 г (куб. см) и производят посев в 90 куб. см ЗПВ и перемешивают. Из этой же пробы отбирают три навески (порции) продукта массой 1 г (куб. см) и производят посев в 9 куб. см ЗПВ. Для посева (при необходимости - предполагаемом высоком содержании Cronobacter spp. в продукте) меньших количеств продукта - 0,1 и 0,01 г, делают десятикратно убывающие разведения навески массой 10 г, и вносят по 1 куб. см (х 3) соответствующих разведений в 9 куб. см ЗПВ.
<a id="p100435"></a>Посевы термостатируют при температуре (37 +/- 1) °С в течение (22 +/- 2) ч.
<a id="p100436"></a>6.3. После термостатирования проб продукта в среде для первичного накопления 0,1 куб. см суспензии пересевают в 10 куб. см модифицированного лаурилсульфат триптозного бульона с ванкомицином (арбитражная среда) или в 10 куб. см одной из жидких селективных сред для выделения бактерий семейства Enterobacteriaceae по [ГОСТ 29184-91](https://bukva.ai/docs/gost-29184-91) - среду Кесслер с глюкозой или буферный глюкозный бульон с бриллиантовым зеленым и желчью, или бульон Мак-Конки. Посевы термостатируют при температуре 44 °С в течение (24 +/- 2) ч.
<a id="p100437"></a>6.4. Из посевов после термостатирования, независимо от наличия или отсутствия признаков роста, делают пересев штрихом на поверхность хромогенного агара по [п. 4.2.8](#p100410) для выявления Cronobacter spp., содержащего $5 - \text{бромо} - 4 - \text{хлоро} - 3 - \text{индолил} - \alpha - D - \text{глюкопиранозид}$ (арбитражная среда), или на поверхность фиолетово-красного желчного агара с глюкозой (VRBG-arap). Чашки с агаризованной средой предварительно подсушивают. Посевы термостатируют при температуре 44 °С в течение (24 +/- 2) ч.
<a id="p100438"></a>6.5. При отсутствии роста на поверхности хромогенного агара для выявления Cronobacter spp. или VRBG-arapa анализ прекращают и дают заключение об отсутствии Cronobacter spp. в исследованной пробе.
<a id="p100439"></a>6.6. После этапа селективного обогащения проб для обнаружения Cronobacter spp. [(п. 6.3)](#p100436) допускается использовать ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в соответствии с процедурой, изложенной в [МУК 4.2.2872-11](https://bukva.ai/docs/pismo-muk-4-2-2872-11). При получении отрицательных результатов исследований образцов предварительно обогащенных жидких селективных сред с применением ПЦР анализ прекращают и дают заключение об отсутствии Cronobacter spp. в исследованной пробе.
<a id="p100440"></a>6.7. При обнаружении на чашках хромогенного агара для выявления Cronobacter spp. роста подозрительных культур для дальнейшего изучения отбирают 3 - 5 характерных колоний. При обнаружении на поверхности VRBG-агара роста дальнейшему изучению подвергают все обнаруженные варианты культур, для чего отбирают по 3 - 5 колоний каждого типа.
<a id="p100441"></a>6.8. Отобранные для исследования 3 - 5 характерных колоний пересевают на поверхность триптон-соевого агара с дрожжевым экстрактом и термостатируют при температуре 25 °С в течение (48 +/- 2) ч. В качестве положительного контроля используют референс-штамм E.sakazakii (Cronobacter spp.), типичный по фенотипическим свойствам.
<a id="p100442"></a>6.9. Культуры, растущие на триптон-соевом агаре с образованием желтого или желто-коричневого пигмента, подвергают дальнейшему изучению для подтверждения принадлежности к Cronobacter spp.

7. <a id="p100443"></a>Подтверждение принадлежности выделенных культур
к Cronobacter spp. (Enterobacter sakazakii)


> *(в ред. [МУК 4.2.3144-13](https://bukva.ai/docs/muk-4-2-3144-13#p100010), утв. Роспотребнадзором 26.11.2013)*


<a id="p100185"></a>7.1. Подтверждение принадлежности выделенных культур проводят с применением тест-систем для биохимической идентификации API 20E, Rapid 20E, ID 32E.
<a id="p100444"></a>7.2. К бактериям Cronobacter spp. (Enterobacter sakazakii) относят культуры, имеющие характерные признаки роста на дифференциально-диагностических средах, при микроскопии по Граму окрашенные отрицательно, подвижные, оксидазоотрицательные, соответствующие комплексу признаков, указанных в табл. 2, имеющие желтый пигмент, не ферментирующие сорбит и не разжижающие желатину. Бактерии Е. sakazakii обладают альфа-глюкозидазной активностью.

> *(в ред. [МУК 4.2.3144-13](https://bukva.ai/docs/muk-4-2-3144-13#p100010), утв. Роспотребнадзором 26.11.2013)*


8. <a id="p100187"></a>Учет результатов


#### <a id="p100188"></a>8.1 Результаты оценивают по каждой исследованной пробе отдельно.

<a id="p100189"></a>8.2. При получении положительного результата подтверждающего анализа дают заключение о выявлении E. sakazakii в исследованной навеске (объеме) продукта.
<a id="p100190"></a>При получении отрицательного результата дают заключение об отсутствии E. sakazakii в исследованной навеске (объеме) продукта.

#### <a id="p100191"></a>8.3 Учет результатов при количественном определении.

<a id="p100192"></a>Результат оценивают по каждой исследованной пробе продукта отдельно. Регистрируют число положительных результатов в колбах и пробирках с посевами трех последовательно убывающих масс (объемов) продукта, в которых подтверждено наличие бактерий E. sakazakii при пересеве на твердые питательные среды и последующей идентификации. В зависимости от получаемой комбинации положительных и отрицательных результатов для каждого значения массы (объема) продукта составляют трехзначное число (индекс), по которому, используя [таблицу](#p100211), приведенную в Приложении, находят наиболее вероятное число (НВЧ) бактерий E. sakazakii, соответствующее их содержанию в 1 г (куб. см) продукта.
<a id="p100193"></a>Для окончательного определения НВЧ бактерий E. sakazakii в анализируемом образце учитывают значение первой выбранной для расчета индекса НВЧ массы (объема) продукта с подтвержденным наличием E. sakazakii. Так, в случае если расчет ведется от посева массы (объема) 100 г (куб. см) (х 3) продукта, количество E. sakazakii в 1 г (куб. см) образца рассчитывается путем деления числа НВЧ, взятого из [таблицы](#p100211) соответственно установленному индексу, на 100. В случае, когда в качестве первого значения для расчета выбрана масса (объем) 10 г (х 3), количество E. sakazakii в 1 г (куб. см) образца рассчитывается путем деления числа НВЧ из таблицы на 10.

<div align="center">

<a id="p100194"></a>Пример: Бактерии E. sakazakii обнаружены в трех повторностях при посеве 100 г, в трех повторностях при посеве 10 г и в одной - при посеве 1 г.

<a id="p100195"></a>*Рисунок не приводится*

</div>


<a id="p100196"></a>Результат по числу секторов с подтвержденным ростом бактерий E. sakazakii из трех выбранных масс записывается как индекс 3:3:1, что соответствует НВЧ, равному 46 (см. [Приложение](#p100211)). Соответственно, наиболее вероятное число бактерий E. sakazakii составляет 0,46 КОЕ в 1 г продукта.
<a id="p100197"></a>Если значение НВЧ по [таблице](#p100211) составляет величину более чем 110 КОЕ (индекс 3:3:3), исследование целесообразно повторить, используя более высокие разведения образца, в которых исходная концентрация продукта будет в 10 или 100 раз ниже, чем в первоначально выбранном значении.

<div align="center">

9. <a id="p100198"></a>Требования безопасности

<a id="p100445"></a>Исследования пищевых продуктов на наличие Cronobacter spp. (Enterobacter sakazakii) проводят в соответствии с [СанПиН 1.2.731-99](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-4-2#p100011) "Безопасность работы с микроорганизмами III - IV групп патогенности и гельминтами".<br>
(в ред. [МУК 4.2.3144-13](https://bukva.ai/docs/muk-4-2-3144-13#p100010), утв. Роспотребнадзором 26.11.2013)

10. <a id="p100446"></a>Нормативные ссылки

(раздел 10 в ред. [МУК 4.2.3144-13](https://bukva.ai/docs/muk-4-2-3144-13#p100199),<br>
утв. Роспотребнадзором 26.11.2013)

</div>


<a id="p100447"></a>10.1. [ГОСТ Р 54005-2010](https://bukva.ai/docs/gost-r-54005-2010) "Продукты пищевые. Методы выявления и определения количества бактерий семейства Enterobacteriaceae".
<a id="p100448"></a>10.2. [ГОСТ ISO 7218-2011](https://bukva.ai/docs/gost-iso-7218-2011) "Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Общие требования и рекомендации по микробиологическим исследованиям".
<a id="p100449"></a>10.3. [ГОСТ Р 54004-2010](https://bukva.ai/docs/gost-r-54004-2010) "Продукты пищевые. Методы отбора проб для микробиологических испытаний".
<a id="p100450"></a>10.4. [ГОСТ 26669-85](https://bukva.ai/docs/gost-26669-85) "Продукты пищевые и вкусовые. Подготовка проб для микробиологических анализов".

<div align="center">

<a id="p100451"></a>10.5. [ГОСТ 26670-91](https://bukva.ai/docs/gost-26670-91) "Продукты пищевые. Методы культивирования микроорганизмов".<br>
<a id="p100452"></a>10.6. [ГОСТ 10444.1-84](https://bukva.ai/docs/gost-10444-1-84) "Консервы. Приготовление растворов, красок, индикаторов, питательных сред, применяемых в микробиологическом анализе".<br>
<a id="p100453"></a>*10.7. [ГОСТ 26809-86](https://bukva.ai/docs/gost-26809-86) "Молоко и молочные продукты. Правила приемки, методы отбора и подготовка проб к анализу".*<br>
<a id="p100454"></a>*10.8. [ГОСТ Р ИСО 707-2010](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-707-2010) "Молоко и молочные продукты. Руководство по отбору проб".*

</div>

<a id="p100455"></a>10.9. СП 1.3.2322-08 "Безопасность работы с микроорганизмами III - IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней".
<a id="p100456"></a>10.10. [МУК 4.2.577-96](https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-muk-4-2-577-96) "Методы микробиологического контроля продуктов детского, лечебного питания и их компонентов".
<a id="p100457"></a>10.11. Стандарт ISO/TS 22964:2006 IDF/RM 210:2006 "Milk and milk products - Detection of Enterobacter sakazakii".

<div align="center">

<a id="p100458"></a>10.12. [МУК 4.2.2872-11](https://bukva.ai/docs/pismo-muk-4-2-2872-11) "Методы выявления и идентификации патогенных бактерий - возбудителей инфекционных заболеваний с пищевым путем передачи в продуктах питания на основе ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией".<br>
<a id="p100459"></a>10.13. Технический регламент Таможенного союза ТР ТС 021/2011 "О безопасности пищевой продукции".

</div>






<div align="center">

<a id="p100210"></a>Приложение

<a id="p100211"></a>**ТАБЛИЦА ДЛЯ РАСЧЕТА НАИБОЛЕЕ ВЕРОЯТНОГО ЧИСЛА**<br>
**МИКРООРГАНИЗМОВ**

</div>



<table>
<colgroup><col width="16%"><col width="12%"><col width="16%"><col width="12%"><col width="10%"><col width="12%"><col width="11%"><col width="11%"></colgroup>
<tr><td colspan="3"><a id="p100212"></a>Число секторов с подтвержденным ростом E. sakazakii (из трех выбранных значений массы (объема))</td><td rowspan="3">НВЧ, КОЕ/г, куб. см</td><td colspan="4">Действительное число микроорганизмов в 1 г (куб. см) с вероятностью, %</td></tr>
<tr><td rowspan="2">1,0</td><td rowspan="2">0,1</td><td rowspan="2">0,01</td><td colspan="2">95</td><td colspan="2">99</td></tr>
<tr><td>от</td><td>до</td><td>от</td><td>до</td></tr>
<tr><td><a id="p100213"></a>1</td><td>2</td><td>3</td><td>4</td><td>5</td><td>6</td><td>7</td><td>8</td></tr>
<tr><td><a id="p100214"></a>0</td><td>0</td><td>0</td><td>&lt; 0,30</td><td>0,00</td><td>0,94</td><td>0,00</td><td>1,40</td></tr>
<tr><td><a id="p100215"></a>0</td><td>0</td><td>1</td><td>0,30</td><td>0,01</td><td>0,95</td><td>0,00</td><td>1,40</td></tr>
<tr><td><a id="p100216"></a>0</td><td>1</td><td>0</td><td>0,30</td><td>0,01</td><td>1,00</td><td>0,00</td><td>1,60</td></tr>
<tr><td><a id="p100217"></a>0</td><td>1</td><td>1</td><td>0,61</td><td>0,12</td><td>1,70</td><td>0,05</td><td>2,50</td></tr>
<tr><td><a id="p100218"></a>0</td><td>2</td><td>0</td><td>0,62</td><td>0,12</td><td>1,70</td><td>0,05</td><td>2,50</td></tr>
<tr><td><a id="p100219"></a>0</td><td>3</td><td>0</td><td>0,94</td><td>0,35</td><td>3,30</td><td>0,18</td><td>4,60</td></tr>
<tr><td><a id="p100220"></a>1</td><td>0</td><td>0</td><td>0,36</td><td>0,02</td><td>1,70</td><td>0,05</td><td>2,50</td></tr>
<tr><td><a id="p100221"></a>1</td><td>0</td><td>1</td><td>0,72</td><td>0,12</td><td>1,70</td><td>0,05</td><td>2,50</td></tr>
<tr><td><a id="p100222"></a>1</td><td>0</td><td>2</td><td>1,10</td><td>0,40</td><td>3,50</td><td>0,20</td><td>4,60</td></tr>
<tr><td><a id="p100223"></a>1</td><td>1</td><td>0</td><td>0,74</td><td>0,13</td><td>2,00</td><td>0,06</td><td>2,70</td></tr>
<tr><td><a id="p100224"></a>1</td><td>1</td><td>1</td><td>1,10</td><td>0,40</td><td>3,50</td><td>0,20</td><td>4,60</td></tr>
<tr><td><a id="p100225"></a>1</td><td>2</td><td>0</td><td>1,10</td><td>0,40</td><td>3,50</td><td>0,20</td><td>4,60</td></tr>
<tr><td><a id="p100226"></a>1</td><td>2</td><td>1</td><td>1,50</td><td>0,50</td><td>3,80</td><td>0,20</td><td>5,20</td></tr>
<tr><td><a id="p100227"></a>1</td><td>3</td><td>0</td><td>1,60</td><td>0,50</td><td>3,80</td><td>0,20</td><td>5,20</td></tr>
<tr><td><a id="p100228"></a>2</td><td>0</td><td>0</td><td>0,92</td><td>0,15</td><td>3,50</td><td>0,07</td><td>4,60</td></tr>
<tr><td><a id="p100229"></a>2</td><td>0</td><td>1</td><td>1,40</td><td>0,40</td><td>3,50</td><td>0,20</td><td>4,60</td></tr>
<tr><td><a id="p100230"></a>2</td><td>0</td><td>2</td><td>2,00</td><td>0,50</td><td>3,80</td><td>0,20</td><td>5,20</td></tr>
<tr><td><a id="p100231"></a>2</td><td>1</td><td>0</td><td>1,50</td><td>0,40</td><td>3,80</td><td>0,20</td><td>5,20</td></tr>
<tr><td><a id="p100232"></a>2</td><td>1</td><td>1</td><td>2,00</td><td>0,50</td><td>3,80</td><td>0,20</td><td>5,20</td></tr>
<tr><td><a id="p100233"></a>2</td><td>1</td><td>1</td><td>2,00</td><td>0,50</td><td>3,80</td><td>0,20</td><td>5,20</td></tr>
<tr><td><a id="p100234"></a>2</td><td>1</td><td>2</td><td>2,70</td><td>0,90</td><td>9,40</td><td>0,50</td><td>14,20</td></tr>
<tr><td><a id="p100235"></a>2</td><td>2</td><td>0</td><td>2,10</td><td>0,50</td><td>4,00</td><td>0,20</td><td>5,60</td></tr>
<tr><td><a id="p100236"></a>2</td><td>2</td><td>1</td><td>2,80</td><td>0,90</td><td>9,40</td><td>0,50</td><td>14,20</td></tr>
<tr><td><a id="p100237"></a>2</td><td>2</td><td>2</td><td>3,50</td><td>0,90</td><td>9,40</td><td>0,50</td><td>14,20</td></tr>
<tr><td><a id="p100238"></a>2</td><td>3</td><td>0</td><td>2,90</td><td>0,90</td><td>9,40</td><td>0,50</td><td>14,20</td></tr>
<tr><td><a id="p100239"></a>2</td><td>3</td><td>1</td><td>3,60</td><td>0,90</td><td>9,40</td><td>0,50</td><td>14,20</td></tr>
<tr><td><a id="p100240"></a>3</td><td>0</td><td>0</td><td>2,30</td><td>0,50</td><td>9,40</td><td>0,30</td><td>14,20</td></tr>
<tr><td><a id="p100241"></a>3</td><td>0</td><td>1</td><td>3,80</td><td>0,90</td><td>10,40</td><td>0,50</td><td>15,70</td></tr>
<tr><td><a id="p100242"></a>3</td><td>0</td><td>2</td><td>6,40</td><td>1,60</td><td>18,10</td><td>1,00</td><td>25,00</td></tr>
<tr><td><a id="p100243"></a>3</td><td>1</td><td>0</td><td>4,30</td><td>0,90</td><td>18,10</td><td>0,50</td><td>25,00</td></tr>
<tr><td><a id="p100244"></a>3</td><td>1</td><td>1</td><td>7,50</td><td>1,70</td><td>19,90</td><td>1,10</td><td>27,00</td></tr>
<tr><td><a id="p100245"></a>3</td><td>1</td><td>2</td><td>12,00</td><td>3,00</td><td>36,00</td><td>2,00</td><td>44,00</td></tr>
<tr><td><a id="p100246"></a>3</td><td>1</td><td>3</td><td>16,00</td><td>3,00</td><td>38,00</td><td>2,00</td><td>52,00</td></tr>
<tr><td><a id="p100247"></a>3</td><td>2</td><td>0</td><td>9,30</td><td>1,80</td><td>36,00</td><td>1,20</td><td>43,00</td></tr>
<tr><td><a id="p100248"></a>3</td><td>2</td><td>1</td><td>15,00</td><td>3,00</td><td>38,00</td><td>2,00</td><td>52,00</td></tr>
<tr><td><a id="p100249"></a>3</td><td>2</td><td>2</td><td>21,00</td><td>3,00</td><td>40,00</td><td>2,00</td><td>56,00</td></tr>
<tr><td><a id="p100250"></a>3</td><td>2</td><td>3</td><td>29,00</td><td>9,00</td><td>99,00</td><td>5,00</td><td>152,00</td></tr>
<tr><td><a id="p100251"></a>3</td><td>3</td><td>0</td><td>24,00</td><td>4,00</td><td>99,00</td><td>5,00</td><td>152,00</td></tr>
<tr><td><a id="p100252"></a>3</td><td>3</td><td>1</td><td>46,00</td><td>9,00</td><td>198,00</td><td>5,00</td><td>283,00</td></tr>
<tr><td><a id="p100253"></a>3</td><td>3</td><td>2</td><td>110,00</td><td>20,00</td><td>400,00</td><td>10,00</td><td>570,00</td></tr>
<tr><td><a id="p100254"></a>3</td><td>3</td><td>3</td><td>&gt; 110,00</td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
</table>




<a id="p100255"></a>

---