МУК 4.1.4277-26. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств хлороталонила в семенах и масле подсолнечника и сои методом газожидкостной хроматографии. Методические указания по методам контроля
(утв. Роспотребнадзором 10.04.2026)
Примечание
Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте https://www.rospotrebnadzor.ru/ по состоянию на 30.06.2026. Документ введен в действие с 10.09.2026.
Утверждаю Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации А. Ю. Попова 10 апреля 2026 года
Дата введения 10 сентября 2026 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ХЛОРОТАЛОНИЛА В СЕМЕНАХ И МАСЛЕ ПОДСОЛНЕЧНИКА И СОИ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО МЕТОДАМ КОНТРОЛЯ МУК 4.1.4277-26
1. Разработаны Автономной некоммерческой организацией «Агрохимический инновационный центр развития сельскохозяйственной науки и производства» (АНО «АИЦ») (Т.В. Алдошина).
2. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой «10» апреля 2026 г.
I. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ
1.1. Настоящие методические указания по методам контроля (далее — МУК) описывают порядок применения метода капиллярной газожидкостной хроматографии (далее — ГЖХ) для определения уровня остаточных количеств хлороталонила в семенах и масле подсолнечника и сои в диапазоне концентраций 0,005 — 0,05 мг/кг.
1.2 МУК носят рекомендательный характер.
II. ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА
2.1 Физико-химические свойства.
Хлороталонил-2,4,5,6-тетрахлоробензен-1,3-дикарбонитрил <1>.
<1> В соответствии с классификацией Международного союза теоретической и прикладной химии (ИЮПАК) (англ. International Union of Pure and Applied Chemistry, IUPAC).
Регистрационный номер CAS: 1897-45-6.
Структурная формула: рисунок.
Рисунок. Структурная формула хлороталонила
Эмпирическая формула: C8Cl4N2.
Агрегатное состояние: кристаллическое вещество.
Давление насыщенного пара (при температуре плюс 25 °C): 7,6x10-2 мПа.
Температура плавления: плюс 252,1 °C.
Коэффициент распределения в системе октанол/вода: KowlogP = 3,05.
Растворимость в воде (мг/дм3): 0,81 при температуре плюс 25 °C.
Растворимость в органических растворителях (г/дм3, при температуре плюс 25 °C): ацетон — 20,9; 1,2-дихлорэтан — 22,4; этилацетат — 13,8; н-гептан — 0,2; метанол — 1,7; ксилен — 74,4.
Период полураспада (далее — ДТ50) в водных растворах равен 29,6 дней (при pH = 5); при pH 4 — 7 стабилен.
Хлороталонил является термически и химически стойким соединением. При попадании в почву он сорбируется органическим веществом и слабо передвигается по профилю. Под влиянием почвенных микроорганизмов хлороталонил относительно быстро разрушается с ДТ50 — 3,5 — 17,9 дней (ДТ50 типичная при плюс 20 °C 3,53 дня, ДТ90 полевая — 59,5 дней).
2.2 Краткая токсикологическая характеристика.
Хлороталонил относится к веществам малоопасным по острой пероральной (полулетальная доза (ЛД50) для крыс — более 5000 мг/кг) и дермальной токсичности (ЛД50 для крыс — более 5000 мг/кг), но к чрезвычайно опасным веществам по ингаляционной токсичности (полулетальная концентрация (ЛК50) для крыс (4 часа) — 100 мг/м3). Вызывает раздражения глаз и раздражает кожу. Не обладает мутагенной активностью. Хлороталонил по классификации Международного агентства по исследованию рака (IARC) (англ. International Agency for Research on Cancer) относится к группе 2B — «возможно канцерогенные для человека». Хлороталонил умеренно токсичен для птиц, пчел и дождевых червей, но считается более токсичным для водных организмов.
2.3 Область применения.
Хлороталонил — контактный фунгицид защитного действия, препятствует прорастанию спор и конидий патогенных грибов, не специфично связывая тиольные группы аминокислот, протеинов и пептидов, нарушая функции гликолитических и дыхательных ферментов клеток. Он высоко эффективен против септориоза и ржавчины на яровой и озимой пшенице; против пероноспороза на огурцах открытого грунта, семенниках лука, на хмеле; против фитофтороза на картофеле и томатах, а также различных видов вызываемых грибами заболеваний в посевах сахарной свеклы, на плантациях цитрусовых культур, винограда и яблони.
III. ПОГРЕШНОСТЬ ИЗМЕРЕНИЙ
3.1. При соблюдении условий проведения анализа и методики, изложенной в настоящих МУК, погрешность <2> (расширенная неопределенность <3>) (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 3.1 для соответствующих диапазонов концентраций. Процент извлечения хлороталонила указан в приложении к настоящим МУК.
<2> ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения», введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 № 161-ст (далее — ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002).
<3> ГОСТ Р ИСО 21748-2021 «Статистические методы. Руководство по использованию оценок повторяемости, воспроизводимости и правильности при оценке неопределенности измерений», введенный постановлением Госстандарта России от 28.09.2021 № 1018-ст.
Метрологические характеристики
IV. МЕТОД ИЗМЕРЕНИЙ
4.1. Методика основана на определении хлороталонила методом ГЖХ с использованием электронно-захватного детектора (далее — ЭЗД).
4.2. Определение хлороталонила проводится после его экстракции из образцов подкисленным ацетонитрилом, дальнейшей очистки экстракта в системе не смешивающихся растворителей или насыпных сорбентов, очистки экстракта на колонках с силикагелем.
Идентификация вещества проводится по времени удерживания, а количественное определение — методом абсолютной калибровки.
В указанных в методике условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается условиями хроматографирования и типом детектора.
V. СРЕДСТВА ИЗМЕРЕНИЙ, РЕАКТИВЫ, ВСПОМОГАТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ, УСТРОЙСТВА И МАТЕРИАЛЫ
5.1. При выполнении измерений и подготовке проб применяют средства измерений, реактивы, вспомогательное оборудование, устройства и материалы, приведенные в таблицах 5.1 - 5.3.
| Наименование средства измерения | Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| Хроматограф газовый с ЭЗД | Хроматограф, предназначенный для работы с капиллярной колонкой и электронно-захватным детектором. Внесен в Реестр «Утвержденные типы средств измерений» Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений |
| Весы аналитические | Наибольший предел взвешивания 110 г, дискретность 0,0001 г, класс точности специальный (I), ГОСТ OIML R 76-1-2011 |
| Весы лабораторные | Наибольший предел взвешивания 400 г, предел допустимой погрешности +/- 0,5 г, класс точности средний (III), ГОСТ OIML R 76-1-2011 |
| Колбы мерные лабораторные стеклянные | Тип 2-10-2 и 2-100-2, ГОСТ 1770-74 |
| Пипетки градуированные лабораторные стеклянные | Тип 1-2-2-1, 1-2-2-2 и 1-2-2-5, ГОСТ 29227-91 |
| Цилиндры мерные лабораторные стеклянные | Тип 1-10-2, 1-25-2, 1-50-2, 1-100-2, 1-250-2, 1-500-2, 1-1000-2, ГОСТ 1770-74 |
| Примечание: допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками | |
| Наименование реактивов | Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| Хлороталонил, аналитический стандарт | Содержание основного вещества не менее 99,5% |
| Азот газообразный особой чистоты | ГОСТ 9293-74 |
| Ацетон особо чистый | ГОСТ 2603-79 |
| Ацетонитрил химически чистый | Содержание основного вещества не менее 99,8% |
| Вода дистиллированная | ГОСТ Р 58144-2018 |
| Гелий очищенный | Содержание основного вещества не менее 99,9% |
| Кислота уксусная | ГОСТ 61-75 |
| н-Гексан химически чистый | Содержание основного вещества не менее 99% |
| Натрий сернокислый химически чистый | ГОСТ 4166-76 |
| Натрий хлористый химически чистый | ГОСТ 4233-77 |
| Силикагель КСМГ | Фракция 0,125 — 0,25 мм, ГОСТ 3956-76 |
| Примечание: допускается использование реактивов с более высокой квалификацией. | |
Вспомогательное оборудование, устройства и материалы
VI. ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ
6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76, требования электробезопасности при работе с электроустановками в соответствии с ГОСТ 12.1.019-2017, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.
6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения в соответствии с ГОСТ 12.4.009-83. Организуется обучение работников безопасности труда.
6.3. Измерения в соответствии с настоящими МУК может выполнять специалист, имеющий опыт работы на газовом хроматографе, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.
VII. УСЛОВИЯ ИЗМЕРЕНИЙ
7.1 При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха плюс 15 — 30 °C и относительной влажности не выше 80%;
- выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
VIII. ПОДГОТОВКА К ВЫПОЛНЕНИЮ ИЗМЕРЕНИЙ
8.1. Выполнению измерений предшествуют следующие операции: приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка колонок с силикагелем для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на колонках с силикагелем, установление градуировочной характеристики.
8.2 Приготовление растворов для проведения анализа.
8.2.1 Приготовление рабочих растворов.
8.2.1.1 Приготовление раствора для экстракции (0,1% раствора уксусной кислоты в ацетонитриле по объему).
В коническую колбу объемом 1000 см3 при помощи мерного цилиндра отмеряют 1000 см3 ацетонитрила и добавляют пипеткой 1 см3 концентрированной уксусной кислоты. Раствор в колбе перемешивают и используют для экстракции. Раствор готовят в день использования.
8.2.1.2. Приготовление смеси гексана с ацетоном в соотношении 10:1 (по объему).
В коническую колбу объемом 250 см3 помещают 200 см3 гексана и добавляют 20 см3 ацетона. Раствор в колбе перемешивают и используют при очистке экстракта на колонках с силикагелем. Раствор используют в течение 5 дней и хранят в условиях выполнении измерений (п. 7.1).
8.2.1.3. Приготовление смеси гексана с ацетоном в соотношении 1:2 (по объему).
В коническую колбу объемом 250 см3 помещают 75 см3 гексана и добавляют 150 см3 ацетона. Раствор в колбе перемешивают и используют при очистке экстракта на колонках с силикагелем. Раствор используют в течение 5 дней и хранят в условиях выполнении измерений (п. 7.1).
8.2.1.4 Приготовление насыщенного водного раствора хлорида натрия.
В коническую колбу (бутыль) объемом 1000 см3 наливают 800 см3 дистиллированной воды и насыпают в нее хлористый натрий при постоянном помешивании до тех пор, пока он не перестанет растворяться и образует стойкий осадок. Колбу ставят на аппарат для встряхивания на 30 мин. На дне посуды должен оставаться осадок не растворившегося хлорида натрия.
Если осадок растворился, добавляют еще хлористого натрия до образования стойкого осадка.
Приготовленный раствор используется при переэкстракции в делительных воронках и может храниться в течение 12 месяцев при температуре плюс 15 — 30 °C.
8.2.1.5. Приготовление ацетонитрила, насыщенного гексаном и гексана, насыщенного ацетонитрилом.
В делительную воронку объемом 250 см3 добавляют 150 см3 ацетонитрила и 50 см3 гексана. Содержимое воронки встряхивают в течение 1 — 2 мин. Нижний (насыщенный гексаном) ацетонитрил собирают в коническую колбу объемом 250 см3. Верхний слой гексана, насыщенный ацетонитрилом, собирают в другую колбу коническую колбу объемом 250 см3. Реактивы готовят перед использованием.
8.2.2 Приготовление растворов аналитического стандарта.
8.2.2.1. Раствор № 1 аналитического стандарта хлороталонила с концентрацией 100,0 мкг/см3.
Взвешивают 0,01 г хлороталонила в мерную колбу объемом 100 см3. Навеску растворяют и доводят объем до метки ацетоном. Полученный раствор № 1 используют для приготовления растворов хлороталонила для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Раствор № 1 хранят в морозильнике при температуре минус (18 +/- 2) °C не более 6 месяцев.
8.2.2.2. Раствор № 2 аналитического стандарта хлороталонила с концентрацией хлороталонила 10,0 мкг/см3.
Отбирают пипеткой 1 см3 раствора № 1, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки ацетоном. Полученный раствор № 2 используют для приготовления растворов хлороталонила для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Раствор № 2 хранят в морозильнике при температуре минус (18 +/- 2) °C не более 6 месяцев.
8.2.2.3. Приготовление растворов хлороталонила с концентрациями 1,000; 0,100; 0,050; 0,020; 0,010 и 0,005 мкг/см3.
Растворы готовят по приведенной ниже схеме (см. таблицу 8.1) в мерных колбах объемом 10 см3 при помощи пипеток и доводя объем до метки ацетоном. Полученные растворы используют для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Растворы хранят в холодильнике при температуре плюс (4 +/- 2) °C не более 1 месяца.
Схема приготовления растворов аналитического стандарта
8.3. Установление и контроль стабильности градуировочной характеристики.
8.3.1 Установление градуировочной характеристики.
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика от концентрации хлороталонила в растворе (мкг/см3), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки с концентрацией 0,005; 0,010; 0,020 и 0,050 мкг/см3.
В инжектор хроматографа вводят по 1 мм3 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 10.3. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений.
8.3.2 Контроль стабильности градуировочной характеристики.
Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят при помощи градуировочных растворов. Периодичность и формы контроля стабильности градуировочной характеристики определяется Руководством по качеству.
Градуировочная характеристика считается стабильной, если для используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение (1):
A = \frac{(X - C) \times 100}{C} \leq B , (1)
где: X — концентрация хлороталонила, полученная при контрольном измерении, мкг/см3;
C — известная концентрация градуировочного раствора хлороталонила, взятого для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3;
A — величина отклонения градуировочной характеристики, %;
B — величина допустимого отклонения градуировочной характеристики, равная 10%.
Если величина отклонения A превышает B, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов хлороталонила. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и определяют ее заново согласно п. 8.3.1.
8.4. Подготовка колонки с силикагелем и проверка хроматографического поведения на ней хлороталонила.
8.4.1 Подготовка колонки с силикагелем для очистки экстракта.
В пластиковую или стеклянную колонку диаметром 15 мм помещают 5 г силикагеля, аккуратно постукивая по стенкам колонки, формируют слой адсорбента. На слой силикагеля наносят слой безводного сернокислого натрия толщиной 1 см.
Перед использованием колонку последовательно промывают 15 см3 ацетона и 10 см3 гексана. Элюаты отбрасывают.
8.4.2. Проверка хроматографического поведения хлороталонила на колонке с силикагелем.
В круглодонную колбу объемом 100 см3 вносят 1 см3 раствора хлороталонила в ацетоне с концентрацией 0,100 мкг/см3 и выпаривают его досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 30 °C.
Сухой остаток растворяют в 5 см3 гексана, тщательно обмывая стенки колбы, и наносят на подготовленную колонку. Затем колбу омывают 20 см3 гексана и наносят его на колонку. После прохождения гексана на колонку промывают 10 см3 смеси гексана и ацетона в соотношении 10:1, смывы с колонки собирают в круглодонную колбу объемом 100 см3.
Хлороталонил элюируют с колонки 20 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 1:2, элюат собирают круглодонную колбу объемом 100 см3.
Собранные фракции выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 30 °C.
Сухой остаток каждой фракции растворяют в 10 см3 ацетона и 1 мм3 хроматографируют.
Определяют фракции, содержащие хлороталонил, полноту смывания с колонки и необходимый объем элюента.
Изучение поведения хлороталонила на колонке проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии силикагеля.
IX. ОТБОР И ХРАНЕНИЕ ПРОБ
9.1. Отбор проб производится в соответствии с методическими документами <4>, а также документами по стандартизации <5>.
<4> Унифицированные правила отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов, утвержденные заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 № 2051-79; Методические указания по регистрационным испытаниям пестицидов в части биологической эффективности. Общая часть, утвержденные Научно-техническим советом Минсельхоза России, протокол от 08.05.2024 № 12.
<5> ГОСТ 10852-86 «Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб», введенный постановлением Госстандарта СССР от 18.12.1986 № 3979; ГОСТ 32190-2013 «Масла растительные. Правила приемки и методы отбора проб», введенный приказом Росстандарта от 28.10.2013 № 1254-ст; ГОСТ 22391-2015 «Подсолнечник. Технические условия», введенный приказом Росстандарта от 25.07.2015 № 984-ст; ГОСТ 1129-2013 «Масло подсолнечное. Технические условия», введенный приказом Росстандарта от 28.10.2013 № 1253-ст; ГОСТ 17109-88 «Соя. Требования при заготовках и поставках», введенный постановлением Госстандарта СССР от 30.09.1988 № 3402; ГОСТ 31760-2012 «Масло соевое. Технические условия», введенный приказом Росстандарта от 29.11.2012 № 1630-ст.
Пробы семян подсолнечника и сои подсушивают при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света и хранят в бумажной или тканевой упаковке в сухом, хорошо проветриваемом шкафу, недоступном для грызунов.
Пробы масла хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре плюс (4 +/- 2) °C.
X. ПРОВЕДЕНИЕ ИЗМЕРЕНИЙ
10.1 Семена подсолнечника и сои.
10.1.1. Экстракция и очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей.
Навеску измельченных семян подсолнечника или сои массой 10 г помещают в колбу объемом 250 см3, добавляют 10 см3 дистиллированной воды и оставляют на 1 минуту. Затем добавляют 50 см3 раствора для экстракции (0,1% раствора уксусной кислоты в ацетонитриле, п. 8.2.1.1), закрывают неплотно пробкой и проводят экстракцию сначала в течение 10 мин на ультразвуковой ванне, затем 15 мин на аппарате для встряхивания. Экстракт отфильтровывают через бумажный фильтр в делительную воронку емкостью 250 см3. Экстракцию повторяют таким же образом еще два раза, используя по 30 см3 раствора для экстракции. Экстракты отфильтровывают в ту же делительную воронку.
10.1.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей.
Объединенные экстракты промывают 30 см3 гексана, встряхивая делительную воронку в течение 1 мин. После разделения слоев нижний слой (ацетонитрил) сливают в стакан емкостью 200 см3, гексановый слой отбрасывают. Ацетонитрильный экстракт возвращают в делительную воронку и промывают его еще раз 30 см3 гексана. Промытый экстракт сливают в круглодонную колбу на 250 см3 и упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C до объема 5 см3.
После выпаривания добавляют в круглодонную колбу на 70 см3 дистиллированной воды и перемешивают содержимое, обмывая стенки, и отфильтровывают водную фазу в чистую делительную воронку через бумажный фильтр, добавляют 30 см3 насыщенного раствора хлористого натрия, затем в воронку приливают 50 см3 гексана и встряхивают ее содержимое в течение 1 — 2 мин. После разделения фаз верхний слой гексана сливают в чистую круглодонную колбу на 250 см3 через безводный сульфат натрия. Экстракцию повторяют еще два раза, используя каждый раз по 30 см3 гексана. Объединенные экстракты гексана упаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше плюс 30 °C.
10.1.3 Очистка экстракта на колонке с силикагелем.
Сухой остаток в круглодонной колбе, полученный по п. 10.1.2, растворяют в 10 мл гексана, тщательно обмывают стенки колбы, отбирают пипеткой аликвоту, равную 5 см3 (1/2) и наносят на подготовленную по п. 8.4.1 колонку с силикагелем.
Колонку последовательно промывают 20 см3 гексана и 10 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 10:1, элюаты отбрасывают.
Хлороталонил элюируют с колонки 20 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 1:2. Элюат собирают в чистую круглодонную колбу объемом 100 см3 и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 30 °C.
Сухой остаток в колбе растворяют в 5 см3 ацетона и вводят 1 мм3 пробы в хроматограф.
10.2 Масло подсолнечника и сои.
10.2.1. Экстракция и очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей.
Навеску растительного масла массой 5 г помещают в стакан или коническую колбу емкостью 200 см3, растворяют в 50 см3 гексана, и переносят в делительную воронку объемом 250 см3.
Добавляют 30 см3 ацетонитрила (насыщенного гексаном по п. 8.2.1.5) и интенсивно встряхивают делительную воронку в течение 5 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний ацетонитрильный слой осторожно декантируют через бумажный фильтр, помещенный в конусную воронку, в другую, чистую делительную воронку вместимостью 250 см. Процедуру повторяют еще дважды, беря порции ацетонитрила (насыщенного гексаном) объемом 25 см3.
К объединенному отфильтрованному ацетонитрильному экстракту добавляют 25 см3 гексана (насыщенного ацетонитрилом, п. 8.2.1.5), и встряхивают делительную воронку 2 мин.
После полного разделения фаз в делительной воронке нижний слой (ацетонитрил) собирают через слой безводного сульфата натрия в чистую круглодонную колбу объемом 250 см3 и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
10.2.2 Очистка экстракта масла на колонке с силикагелем.
Сухой остаток в круглодонной колбе растворяют в 10 мл гексана, тщательно обмывают стенки колбы, отбирают пипеткой аликвоту, равную 2 см3 (1/5) и наносят на подготовленную по п. 8.4.1 колонку с силикагелем.
Далее выполняют процедуру, как описано для семян масличных, соответственно п. 10.1.3.
Сухой остаток в колбе растворяют в 1 см3 ацетона и вводят 1 мм3 пробы в хроматограф.
10.3 Условия хроматографирования.
10.3.1 Хроматографическая система, включающая.
- хроматограф газовый с ЭЗД, снабженный приспособлениями для капиллярной колонки;
- компьютерное программное обеспечение, контролирующее работу всего прибора, обеспечивающее сбор и хранение всех хроматограмм в процессе проведения хроматографического анализа, обеспечивающее обработку результатов измерений, вывод и расчет хроматограмм и количественный анализ.
Колонка хроматографическая капиллярная из кварцевого стекла, с внутренний диаметром 0,25 мм, длиной 30 м, с неподвижной фазой, содержащей 5% дифенила и 95% диметилполисилоксана и толщиной пленки 0,25 мкм.
Температура детектора — плюс 320 °C, поток газа поддувки (азот) — 20,0 см3/мин (при установке параметров для детектора следует принимать во внимание рекомендации производителя оборудования).
Температура испарителя — плюс 290 °C, газ-носитель — гелий, режим с делением потока (сплит), деление потока 1:7,5; расход сбросной 10,3 см3/мин.
Температура колонки: градиентный нагрев колонки, начиная с температуры плюс 155 °C (выдержка 20 мин) по 30 °C/мин до 200 °C (выдержка 5 мин), затем по 30 °C/мин до температуры плюс 230 °C (выдержка 5 мин).
Поток газа-носителя (гелий) — 1,00 см3/мин, давление 150 кПа.
Ориентировочное время удерживания для хлороталонила — 19,6 мин.
Линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 0,005 — 0,05 нг.
Образцы, дающие пики больше, чем стандартный раствор хлороталонила с концентрацией 0,05 мкг/см3, соответственно разбавляют. В этом случае разбавление учитывают в конечной формуле расчета содержания хлороталонила в пробах.
XI. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ
11.1. Для обработки результатов хроматографического анализа используется компьютерное программное обеспечение химического анализа, которое входит в хроматографическую систему.
Альтернативная обработка результатов.
Содержание хлороталонила в пробах рассчитывают без учета полноты извлечения вещества из проб и чистоты аналитического стандарта по формуле (2):
X = \frac{A \times V \times k}{m} , (2)
где: X — содержание хлороталонила в пробе, мг/кг;
A — концентрация хлороталонила, найденная по градуировочному графику в соответствии с величинами площадей хроматографических пиков, мкг/см3;
V — объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3;
m — масса анализируемого образца, г.
k — коэффициент разбавления образца (если производили дополнительное разведение (см. п. 12.1).
11.2. За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости, r, формула (3):
\frac{2|X_{1} - X_{2}| \times 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq r , (3)
где: X1, X2 - результаты параллельных определений, мг/кг;
r — значение предела повторяемости в соответствии с диапазоном определяемых концентраций, таблица 3.1), %, принимаемый r = 2,77*\sigma_{r} .
При невыполнении условия (3) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.
11.3. Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости, не должно превышать предела воспроизводимости, R, формула (4):
\frac{2|X_{1} - X_{2}| \times 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq R , (4)
где: X1, X2 — результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
R — предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном определяемых концентраций, таблица 3.1), %, принимаемый R = 2,77*\sigma_{R} .
XII. ОФОРМЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ
12.1 Результат анализа представляют в виде выражения (5):
(\overline{X} \pm U) , мг/кг при вероятности P = 0,95, (5)
где: \overline{X} — среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
U — значение расширенной неопределенности, мг/кг, рассчитанной по формуле (6):
где: Uо — значение относительной расширенной неопределенности методики <*>, % (таблица 3.1).
Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и неопределенность (погрешность) измерения.
Если содержание хлороталонила менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде: «содержание хлороталонила в пробе — менее 0,005 мг/кг <6>».
<6> Примечание: 0,005 мг/кг — предел количественного определения концентрации хлороталонила в исследуемой продукции.
В случае если содержание компонента превышает верхнюю границу диапазона определяемых концентраций, образец кратно разбавляют ацетонитрилом и повторно вводят в хроматограф в условиях хроматографирования (п. 10.3), чтобы результат находился в диапазоне 0,005 — 0,050 мг/кг. Коэффициент разбавления указывают в программном обеспечении хроматографа, или при альтернативном расчете в формуле (2).
XIII. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ
13.1. Контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с документами по стандартизации <7>.
<7> ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002; ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений», введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 № 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-3-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерений», введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 № 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-4-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений», введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 № 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-5-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 5. Альтернативные методы определения прецизионности стандартного метода измерений», введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 № 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике», введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 № 161-ст.
Периодичность и формы контроля определяется Руководством по качеству лаборатории.
ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ ХЛОРОТАЛОНИЛА ИЗ СЕМЯН И МАСЛА ПОДСОЛНЕЧНИКА (5 ПОВТОРНОСТЕЙ ДЛЯ КАЖДОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ, P = 0,95)
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЕ ССЫЛКИ
1. Федеральный закон от 30.03.1999 № 52-ФЗ «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения».
2. Методические указания по регистрационным испытаниям пестицидов в части биологической эффективности. Общая часть.
3. ГОСТ Р 8.563-2009 «Государственная система обеспечения единства измерений. Методики (методы) измерений».
4. ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения».
5. ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений».
6. ГОСТ Р ИСО 5725-3-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерений».
7. ГОСТ Р ИСО 5725-4-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений».
8. ГОСТ Р ИСО 5725-5-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 5. Альтернативные методы определения прецизионности стандартного метода измерений».
9. ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике».
10. ГОСТ 12.1.007-76 «Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности».
11. ГОСТ 12.1.019-2017 «Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты».
12. ГОСТ 12.1.004-91 «Пожарная безопасность. Общие требования».
13. ГОСТ 12.4.009-83 «Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание».
14. ГОСТ 1770-74 «Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия».
15. ГОСТ 29227-91 «Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования».
16. ГОСТ 25336-82 «Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры».
17. ГОСТ Р 58144-2018 «Вода дистиллированная. Технические условия».
18. ГОСТ 5556 «Вата медицинская гигроскопическая. Технические условия».
19. ГОСТ 9293-74 «Азот газообразный и жидкий. Технические условия».
20. ГОСТ 2603-79 «Ацетон. Технические условия»
21. ГОСТ 4166-76 «Натрий сернокислый. Технические условия».
22. ГОСТ 4201 «Натрий углекислый кислый. Технические условия».
23. ГОСТ 4233-77 «Натрий хлористый. Технические условия».
24. ГОСТ 61-75 «Кислота уксусная».
25. ГОСТ 10852-86 «Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб».
26. ГОСТ 32190-2013 «Масла растительные. Правила приемки и методы отбора проб».
27. ГОСТ 22391-2015 «Подсолнечник. Требования при заготовках и поставках».
28. ГОСТ 1129-2013 «Масло подсолнечное. Технические условия».
29. ГОСТ 17109-88 «Соя. Требования при заготовках и поставках».
30. ГОСТ 31760-2012 «Масло соевое. Технические условия».
31. ГОСТ Р ИСО 21748-2021 «Статистические методы. Руководство по использованию оценок повторяемости, воспроизводимости и правильности при оценке неопределенности измерений».
32. Унифицированные правила отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов.