МУК 4.1.4273-26. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств имидаклоприда в плодах и соке арбуза методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания по методам контроля
(утв. Роспотребнадзором 10.04.2026)
Примечание
Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте https://www.rospotrebnadzor.ru/ по состоянию на 30.06.2026. Документ введен в действие с 10.09.2026.
Утверждаю Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации А. Ю. Попова 10 апреля 2026 года
Дата введения 10 сентября 2026 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ИМИДАКЛОПРИДА В ПЛОДАХ И СОКЕ АРБУЗА МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО МЕТОДАМ КОНТРОЛЯ МУК 4.1.4273-26
1. Разработаны ФГБОУ ВО РГАУ — МСХА имени К.А. Тимирязева, Учебно-научный консультационный центр «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов» Минсельхоза России (А.В. Довгилевич, Е.В. Довгилевич, А.С. Поликарпов, Е.Н. Тестова).
2. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 10 апреля 2026 г.
I. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ
1.1. Настоящие методические указания по методам контроля (далее — МУК) описывают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (далее — ВЭЖХ) для определения массовых концентраций имидаклоприда в плодах и соке арбуза в диапазоне 0,01 — 0,1 мг/кг — без учета разбавления и 0,01 — 10,0 мг/кг — с учетом разбавления в 100 раз.
1.2 МУК носят рекомендательный характер.
II. ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА
2.1. Имидаклоприд — (NE)-N-[1-[(6-хлорпиридин-3-ил)метил]имидазолидин-2-илиден]нитрамид <1>. Брутто-формула: C9H10ClN5O2. CAS № 138261-41-3. Молекулярная масса: 255,7.
<1> В соответствии с классификацией Международного союза теоретической и прикладной химии (ИЮПАК) (англ. International Union of Pure and Applied Chemistry, IUPAC).
2.2 Физические и химические свойства.
Бесцветное кристаллическое вещество со слабым запахом. Давление насыщенного пара 4,0 x 10-7 мПа (при температуре плюс 20 °C). Температура плавления плюс 144 °C. Коэффициент распределения в системе октанол/вода: KowlogP = 0,57 (при температуре плюс 20 °C и значении pH 7). Растворимость в воде 610 мг/дм3 (при температуре плюс 20 °C). Растворимость в органических растворителях (г/дм3): дихлорметан — 67,0; 2-пропанол — 2,3; толуол — 0,69; н-гексан — 0,1 (при температуре плюс 20 °C).
Имидаклоприд устойчив к гидролизу при pH 5 — 11.
Относительно слабо передвигается по почвенному профилю и очень быстро разрушается в почве под действием света и микрофлоры.
2.3 Краткая токсикологическая характеристика.
Острая пероральная токсичность (ЛД50) для крыс — 450 мг/кг. Острая дермальная токсичность (ЛД50) для крыс — 5000 мг/кг. Острая ингаляционная токсичность (ЛК50) для крыс — 69 мг/м3 воздуха (при 4 часовой экспозиции).
2.4 Область применения.
Имидаклоприд — инсектицид нервно-паралитического действия, связывается с постсинаптическими никотиновыми ацетилхолиновыми рецепторами центральной нервной системы насекомых, в результате чего у них развиваются параличи и конвульсии, приводящие их к гибели. Эффективно уничтожает листовую тлю, белокрылку, минеров, трипсов, колорадского жука, долгоносиков на хлопчатнике, рисе, картофеле, кукурузе, сахарной свекле, овощных культурах, цитрусовых, косточковых и семечковых плодовых в течение вегетационного периода. Вещество обладает системной активностью и может использоваться для обработки почвы и надземных органов растений.
III. ПОГРЕШНОСТЬ ИЗМЕРЕНИЙ
3.1. При соблюдении условий проведения анализа и методики, изложенной в настоящих МУК, погрешность <2> (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 3.1 для соответствующих диапазонов концентраций.
<2> ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения», введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 № 161-ст (далее — ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002).
Метрологические характеристики
IV. МЕТОД ИЗМЕРЕНИЙ
4.1. Измерения массовых концентраций имидаклоприда выполняют методом ВЭЖХ с использованием диодно-матричного детектора.
4.2. Определение имидаклоприда в плодах и соке арбуза проводится после его экстракции из образцов ацетонитрилом, дальнейшей очистки экстракта в системе несмешивающихся растворителей и на концентрирующих патронах № 1 и № 2.
4.3 Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы — 1,75 нг.
4.4. Идентификация вещества проводится по времени удерживания, а количественное определение — методом абсолютной калибровки.
4.5. В условиях проведения анализа и методики, изложенной в настоящих МУК, метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором состава подвижной фазы и выбором хроматографических колонок различной полярности.
V. СРЕДСТВА ИЗМЕРЕНИЙ, РЕАКТИВЫ, ВСПОМОГАТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ, УСТРОЙСТВА И МАТЕРИАЛЫ
5.1. При выполнении измерений и подготовке проб применяют средства измерений, реактивы, вспомогательное оборудование, устройства и материалы, приведенные в таблицах 5.1 - 5.3.
| Наименование средств измерения | Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| Хроматограф жидкостной с диодно-матричным детектором | Внесено в Реестр «Утвержденные типы средств измерений» Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений |
| Весы аналитические | Наибольший предел взвешивания 110 г, дискретность 0,0001 г, класс точности специальный (I), ГОСТ OIML R-76-1-2011 |
| Весы лабораторные | Наибольший предел взвешивания 400 г, предел допустимой погрешности +/- 0,3 г, класс точности средний (III), ГОСТ OIML R-76-1-2011 |
| Колбы мерные | Тип 2-10-2, 2-25-2, 2-100-2, 2-250-2, 2-500-2 и 2-1000-2, ГОСТ 1770-74 |
| Меры массы | ГОСТ OIML R 111-1-2009 |
| Пипетки градуированные | Тип 1-2-2-1, 1-2-2-2, 1-2-2-5 и 1-2-2-10, ГОСТ 29227-91 |
| Прибор/приборы для измерения атмосферного давления, температуры и относительной влажности воздуха | Внесено в Реестр «Утвержденные типы средств измерений» Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений |
| Цилиндры мерные | Тип 1-10-2, 1-25-2, 1-50-2, 1-100-2, 1-250-2, 1-500-2, 1-1000-2, ГОСТ 1770-74 |
| Примечание: допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками. | |
| Наименование реактивов | Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| Имидаклоприд | Аналитический стандарт с содержанием основного вещества не менее 95,0% |
| Ацетон | Чистый, ГОСТ 2603-79 |
| Ацетонитрил | Содержание основного вещества не менее 99,8% |
| Вода дистиллированная | ГОСТ Р 58144-2018 |
| Вода для лабораторного анализа | ГОСТ Р 52501-2005 |
| Гелий очищенный | Содержание основного вещества не менее 99,9% |
| н-Гексан | Содержание основного вещества не менее 99% |
| Калий марганцовокислый | Чистый для анализа, ГОСТ 20490-75 |
| Кальций хлористый гранулированный, безводный | Содержание основного вещества не менее 99% |
| Концентрирующие патроны для пробоподготовки методом твердофазной экстракции (патрон № 1) | Корпус из инертной полиэтиленовой или полипропиленовой оболочки, заполнены гидрофильным сорбентом с привитыми аминогруппами с размером частиц 100 мкм (количество сорбента — 1 см3) |
| Концентрирующие патроны для пробоподготовки методом твердофазной экстракции (патрон № 2) | Корпус из инертной полиэтиленовой или полипропиленовой оболочки, заполнены гидрофобным сорбентом с размером частиц 63 — 200 мкм с привитыми гексадецильными (C16) группами с размером частиц 100 мкм (количество сорбента — 1 см3) |
| Метилен хлористый | Содержание основного вещества не менее 99,8% |
| Натрий сернокислый | Химически чистый, ГОСТ 4166-76 |
| Натрий углекислый кислый | Химически чистый, ГОСТ 4201-79 |
| Натрий хлористый | Химически чистый, ГОСТ 4233-77 |
| Этиловый эфир уксусной кислоты (этилацетат) | Чистый для анализа, ГОСТ 22300-76 |
| Примечание: допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей. | |
Вспомогательное оборудование, устройства и материалы
| Наименование вспомогательного оборудования, устройств и материалов | Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| Аллонж прямой стеклянный | Тип АО, ГОСТ 25336-82 |
| Аппарат для встряхивания проб | Направление колебаний — возвратно-поступательное, максимальная загрузка 10 кг, амплитуда колебаний — до 30 мм, скорость от 10 до 300 колебаний/минуту |
| Банки полипропиленовые с крышками для экстракции | Вместимость 250 см3 |
| Ванна ультразвуковая | Рабочая частота 50 Гц |
| Вата медицинская гигроскопическая хлопковая нестерильная | ГОСТ 5556-2022 |
| Виалы с завинчивающейся или запрессовывающейся крышкой с тефлоновой резиновой прокладкой, для жидких проб | Вместимость 2 см3 |
| Виалы стеклянные с крышкой с тефлоновой прокладкой | Вместимость не менее 40 см3 |
| Воронки делительные | Тип ВД, объем 250 см3, ГОСТ 25336-82 |
| Воронки лабораторные | Тип В, ГОСТ 25336-82 |
| Колбы конические | Тип П или Кн, объем 100 и 250 см3, ГОСТ 25336-82 |
| Колбы круглодонные (для упаривания) | Тип К, Гр или О, объем 100 и 250 см3, ГОСТ 25336-82 |
| Колонка хроматографическая стальная | С сорбентом с привитыми неполярными группами C18; длина 250 мм, внутренний диаметр 4,6 мм, размер частиц 5 мкм |
| Насос мембранный вакуумный | Обеспечивающий вакуум — до 10 мбар |
| Предколонка хроматографическая стальная | С сорбентом с привитыми неполярными группами C18; длина 12,5 мм, внутренний диаметр 4,6 мм, размер частиц 5 мкм |
| Ротационный вакуумный испаритель | С регулируемой скоростью вращения штока, с водяной баней с антикоррозионным покрытием с диапазоном температур плюс 20 — 100 °C |
| Стаканы лабораторные | Тип В, номинальная вместимость 100 — 800 см3, ГОСТ 25336-82 |
| Терка для овощей | - |
| Установка для перегонки растворителей при атмосферном давлении | С круглодонной колбой из термически стойкого стекла типа ТС вместимостью 4000 см3 и приемной конической колбой вместимостью 1000 см3 |
| Фильтры бумажные | Обеззоленные, нейтральные, быстро фильтрующие, типа «Красная лента», диаметром 11 см, зольность одного фильтра 0,00072 г |
| Фильтры мембранные для очистки растворителей | Диаметр 47 мм, размер пор 0,45 мкм |
| Холодильная/морозильная камера | ГОСТ 26678-85 |
| Электроплитка бытовая с закрытой спиралью | ГОСТ 14919-83 |
| Примечание: допускается использование вспомогательного оборудования, устройств и материалов с аналогичными или лучшими техническими характеристиками. | |
VI. ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ
6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками в соответствии с ГОСТ 12.1.019-2017, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостной хроматограф.
6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения в соответствии с ГОСТ 12.4.009-83. Организуется обучение работников безопасности труда.
6.3. Измерения в соответствии с настоящими МУК может выполнять специалист, имеющий опыт работы на жидкостном хроматографе, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.
VII. УСЛОВИЯ ИЗМЕРЕНИЙ
7.1 При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха плюс 15 — 30 °C и относительной влажности не более 80%;
- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
VIII. ПОДГОТОВКА К ВЫПОЛНЕНИЮ ИЗМЕРЕНИЙ
8.1. Выполнению измерений предшествуют следующие операции: подготовка лабораторной посуды, очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, проверка хроматографического поведения вещества на патронах № 1 и № 2, установление градуировочной характеристики.
8.2. Подготовка лабораторной посуды. Вся посуда и стеклянное оборудование должны быть тщательно вымыты. Для мойки используют растворы подходящих детергентов. После мойки в растворе любого моющего средства посуду и оборудование промывают водопроводной водой, ополаскивают дистиллированной водой и тщательно высушивают.
8.3 Подготовка и очистка органических растворителей.
8.3.1. Ацетонитрил. Ацетонитрил, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 5 — 6 часов. Затем ацетонитрил сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом вместимостью 4000 см3 аппарата для перегонки растворителей. Ацетонитрил перегоняют при температуре плюс 81,0 — 82,0 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше плюс 81,0 — 82,0 °C, отбрасывают.
8.3.2. Ацетон. Ацетон, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 5 — 6 часов. Затем ацетон сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 см3 аппарата для перегонки растворителей, прибавляют марганцовокислый калий из расчета 100 мг/дм3. Ацетон перегоняют при температуре плюс 56,0 — 56,5 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше плюс 56,0 — 56,5 °C, отбрасывают.
8.3.3. Гексан. Гексан, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 5 — 6 часов. Затем гексан сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом вместимостью 4000 см3 аппарата для перегонки растворителей. Гексан перегоняют при температуре плюс 68,5 — 69,0 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше плюс 68,5 — 69,0 °C, отбрасывают.
8.3.4. Хлористый метилен. Хлористый метилен промывают равным объемом 5% раствора натрия углекислого кислого (безводного), осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 12 — 24 часов. Затем хлористый метилен сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом вместимостью 4000 см3 аппарата для перегонки растворителей. Хлористый метилен перегоняют при температуре плюс 39,5 — 40,5 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше плюс 39,5 — 40,5 °C, отбрасывают.
8.3.5. Этилацетат. Этилацетат, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 5 — 6 часов. Затем этилацетат сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 см3 аппарата для перегонки растворителей. Этилацетат перегоняют при температуре плюс 76,5 — 77,5 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше плюс 76,5 — 77,5 °C, отбрасывают.
8.3.6. Бидистиллированная вода. Дистиллированную воду помещают в круглодонную колбу со шлифом вместимостью 4000 см3 от аппарата для перегонки растворителей, добавляют марганцовокислый калий из расчета 1 г/дм3 и кипятят в течение 6 часов. Собирают фракции, отогнанные при температуре плюс 99,5 — 100,0 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше плюс 99,5 — 100,0 °C, отбрасывают.
8.4 Приготовление рабочих растворов.
8.4.1. Приготовление 5% раствора натрия углекислого кислого. Переносят (50,0 +/- 0,3) г натрия углекислого кислого в мерную колбу вместимостью 1000 см3, добавляют 200 — 300 см3 дистиллированной воды, перемешивают содержимое до полного растворения и доводят водой объем в колбе до метки. Приготовленный раствор используют для очистки хлористого метилена и хранят при комнатной температуре в темном месте (в емкости из темного стекла) в течение 12 месяцев.
8.4.2. Приготовление насыщенного раствора хлористого натрия. Переносят (400,0 +/- 0,9) г хлористого натрия переносят в стеклянную емкость вместимостью 1000 см3, доливают 800 см3 дистиллированной воды, помещают на 15 минут в ультразвуковую ванну, а затем на 30 минут на аппарат для встряхивания проб. Приготовленный раствор хранят при комнатной температуре в темном месте (в емкости из темного стекла) в течение 12 месяцев.
8.4.3. Приготовление смеси ацетонитрила с водой в соотношении 2:8 (по объему). В коническую колбу вместимостью 100 см3 помещают 20 см3 ацетонитрила и добавляют 80 см3 бидистиллированной воды. Раствор в колбе перемешивают и используют для приготовления градуировочных стандартов, разведения проб и при очистке экстрактов на патронах № 2. Раствор хранят при комнатной температуре не более семи дней.
8.4.4. Приготовление смеси гексана с ацетоном в соотношении 4:1 (по объему). В коническую колбу вместимостью 100 см3 помещают 80 см3 гексана и добавляют 20 см3 ацетона. Раствор в колбе перемешивают и используют при очистке экстрактов на патронах № 1. Раствор готовят непосредственно перед использованием.
8.4.5. Приготовление смеси гексана с этилацетатом в соотношении 4:1 (по объему). В коническую колбу вместимостью 100 см3 помещают 80 см3 гексана и добавляют 20 см3 этилацетата. Раствор в колбе перемешивают и используют при очистке экстрактов на патронах № 1. Раствор готовят непосредственно перед использованием.
8.5. Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ. Для приготовления подвижной фазы используют свежеперегнанный ацетонитрил и бидистиллированную воду, которые предварительно фильтруют через мембранные фильтры для очистки растворителей.
В плоскодонную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 750 см3 бидистиллированной воды и 250 см3 ацетонитрила. Смесь тщательно перемешивают.
При использовании градиентного режима хроматографирования компоненты подвижной фазы помещают в разные емкости. В случае отсутствия в составе хроматографической системы автоматического дегазатора через раствор подвижной фазы пропускают газообразный гелий со скоростью 20 см3/минуту в течение 5 минут, после чего его помещают в ультразвуковую ванну для удаления растворенных газов на 1 минуту. Приготовленный раствор подвижной фазы хранится при комнатной температуре не более пяти дней.
8.6 Приготовление растворов аналитических стандартов имидаклоприда.
8.6.1. Стандартный раствор № 1 с концентрацией имидаклоприда 100,0 мкг/см3. Взвешивают (0,0100 +/- 0,0010) г имидаклоприда в мерной колбе вместимостью 100 см3. Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор № 1 используют для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики, для внесения в контрольные образцы матриц и хранят в холодильнике при температуре плюс (4 +/- 2) °C в течение 6 месяцев.
8.6.2. Стандартный раствор № 2 с концентрацией имидаклоприда 10,0 мкг/см3. Из стандартного раствора № 1 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу вместимостью 10 см3 и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор № 2 используют для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики и хранят в холодильнике при температуре плюс (4 +/- 2) °C в течение 30 дней.
8.6.3. Стандартный раствор № 3 с концентрацией имидаклоприда 1,0 мкг/см3. Из стандартного раствора № 2 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу вместимостью 10 см3 и доводят объем до метки смесью, приготовленной по п. 8.4.3.
8.6.4. Стандартный раствор № 4 с концентрацией имидаклоприда 0,5 мкг/см3. Из стандартного раствора № 3 отбирают пипеткой 5 см3, помещают в мерную колбу вместимостью 10 см3 и доводят объем до метки смесью, приготовленной по п. 8.4.3.
8.6.5. Стандартный раствор № 5 с концентрацией имидаклоприда 0,2 мкг/см3. Из стандартного раствора № 3 отбирают пипеткой 2 см3, помещают в мерную колбу вместимостью 10 см3 и доводят объем до метки смесью, приготовленной по п. 8.4.3.
8.6.6. Стандартный раствор № 6 с концентрацией имидаклоприда 0,1 мкг/см3. Из стандартного раствора № 3 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу вместимостью 10 см3 и доводят объем до метки смесью, приготовленной по п. 8.4.3.
8.6.7. Стандартный раствор № 7 с концентрацией имидаклоприда 0,05 мкг/см3. Из стандартного раствора № 6 отбирают пипеткой 5 см3, помещают в мерную колбу вместимостью 10 см3 и доводят объем до метки смесью, приготовленной по п. 8.4.3.
Стандартные растворы № 3 — 7 используют для установления градуировочной характеристики и хранят в холодильнике при температуре не выше плюс (4 +/- 2) °C в течение 30 дней.
8.6.8. Стандартные растворы имидаклоприда с концентрацией 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/см3 для внесения в контрольные образцы матриц. Методом последовательного разведения ацетонитрилом стандартного раствора № 2 готовят растворы, содержащие по 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/см3 и используют эти растворы для внесения в контрольные образцы матриц. Стандартные растворы для внесения хранят при температуре не выше плюс (4 +/- 2) °C в течение 30 дней.
8.7. Установление и контроль стабильности градуировочной характеристики.
8.7.1. Установление градуировочной характеристики. Градуировочную характеристику устанавливают методом абсолютной калибровки по 5 растворам для градуировки, приготовленным по п.п. 8.6.3 - 8.6.7, с концентрацией 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 и 0,05 мкг/см3.
В инжектор хроматографа вводят по 35 мм3 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 10.3. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений.
8.7.2. Контроль стабильности градуировочной характеристики. Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.
При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения растворов для градуировки с концентрацией 0,05 и 1,0 мкг/см3.
Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемых для контроля градуировочных растворов сохраняется соотношение (1):
\frac{|X - C| \times 100}{C} \leq 10, (1)
где: X — концентрация имидаклоприда при контрольном измерении, мкг/см3;
C — известная концентрация имидаклоприда в градуировочном растворе, мкг/см3;
10 — допустимая величина расхождения градуировочной характеристики, %.
Если величина расхождения превышает 10%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов имидаклоприда, предусмотренных настоящими МУК. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики устанавливают ее заново в соответствии с п. 8.7.1.
8.8. Подготовка патронов № 1 для очистки экстрактов и проверка хроматографического поведения имидаклоприда на них.
8.8.1. Подготовка патронов № 1 для очистки экстракта. Подготовку патронов проводят с использованием вакуумного насоса, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 см3/минуту.
Патрон № 1 устанавливают на аллонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц вместимостью не менее 10 см3 (используют как емкость для элюентов).
Кондиционирование: патрон промывают 10 см3 смеси гексана с этилацетатом в соотношении 4:1, а затем 10 см3 гексана. Сливы отбрасывают.
Нельзя допускать высыхания поверхности картриджа.
8.8.2. Проверка хроматографического поведения имидаклоприда на патронах № 1. В круглодонную колбу вместимостью 100 см3 вносят 1 см3 стандартного раствора имидаклоприда в ацетонитриле с концентрацией 1 мкг/см3 и упаривают его досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
Сухой остаток растворяют в 2 см3 этилацетата, тщательно обмывают стенки колбы, добавляют 8 см3 гексана, перемешивают и вносят на подготовленный патрон. Элюат собирают в чистую круглодонную колбу для упаривания вместимостью 100 см3 и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
Исходную колбу последовательно обмывают двумя порциями по 10 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 1:4 и последовательно вносят эти растворы на патрон. Элюаты собирают в чистые круглодонные колбы вместимостью по 100 см3, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
Сухой остаток каждой фракции растворяют в 2 см3 смеси, приготовленной по п. 8.4.3, и 35 мм3 хроматографируют.
Определяют фракции, содержащие имидаклоприд, полноту смывания с патрона и необходимый объем элюента.
Проверку хроматографического поведения имидаклоприда на патронах № 1 следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии сорбентов и растворителей.
8.9. Подготовка патронов № 2 для очистки экстрактов и проверка хроматографического поведения имидаклоприда на них.
8.9.1. Подготовка патронов № 2 для очистки экстракта. Подготовку патронов проводят с использованием вакуумного насоса, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 см3/минуту.
Патрон № 2 устанавливают на аллонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц вместимостью не менее 10 см3 (используют как емкость для элюентов).
Кондиционирование: патрон промывают 5 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 2:8, а затем 10 см3 воды. Сливы отбрасывают.
Нельзя допускать высыхания поверхности картриджа.
8.9.2. Проверка хроматографического поведения имидаклоприда на патронах № 2. В круглодонную колбу вместимостью 100 см3 вносят 1 см3 стандартного раствора имидаклоприда в ацетонитриле с концентрацией 1 мкг/см3 и упаривают его досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
Сухой остаток растворяют в 5 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 2:8, тщательно обмывают стенки колбы и вносят на подготовленный патрон. Элюат собирают в чистую круглодонную колбу для упаривания вместимостью 100 см3 и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
Исходную колбу последовательно обмывают двумя порциями по 5 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 2:8 и последовательно вносят эти растворы на патрон. Элюаты собирают в чистые круглодонные колбы вместимостью по 100 см3, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
Сухой остаток каждой фракции растворяют в 2 см3 смеси, приготовленной по п. 8.4.3, и 35 мм3 хроматографируют.
Определяют фракции, содержащие имидаклоприд, полноту смывания с патрона и необходимый объем элюента.
Проверку хроматографического поведения имидаклоприда на патронах № 2 следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии сорбентов и растворителей.
8.10 Подготовка и кондиционирование хроматографической колонки.
Хроматографическую колонку устанавливают в термостат хроматографа и стабилизируют ее при температуре плюс 30 °C в течение 3 — 4 часов, промывая подвижной фазой, приготовленной по п. 8.5 (смесь ацетонитрила с водой в соотношении 25:75, по объему), при скорости подачи растворителя 1,0 см3/минуту.
IX. ОТБОР И ХРАНЕНИЕ ПРОБ
9.1. Отбор проб производится в соответствии с методическими документами <3>, а также документами по стандартизации <4>.
<3> Унифицированные правила отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов, утвержденные заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 № 2051-79; Методические указания по регистрационным испытаниям пестицидов в части биологической эффективности. Общая часть, утвержденные Научно-техническим советом Минсельхоза России, протокол от 08.05.2024 № 12.
<4> ГОСТ 7177-2022 «Арбузы продовольственные свежие. Технические условия», введенный приказом Росстандарта от 30.05.2022 № 425-ст; ГОСТ 32101-2013 «Консервы. Продукция соковая. Соки фруктовые прямого отжима. Общие технические условия», введенный приказом Росстандарта от 28.06.2013 № 333-ст.
9.2. Отобранные пробы плодов арбуза хранят в холодильнике при температуре плюс (4 +/- 2) °C не более суток. Для длительного хранения пробы замораживают и хранят в полиэтиленовой таре в морозильной камере при температуре не выше минус 18 °C не более 2 лет.
9.3. Отобранные пробы сока арбуза хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре плюс (4 +/- 2) °C не более 5 суток.
X. ВЫПОЛНЕНИЕ ИЗМЕРЕНИЙ
10.1 Плоды арбуза.
10.1.1. Экстракция. Образец измельченных плодов арбуза массой (10,0 +/- 0,3) г помещают в полипропиленовую банку для экстракции вместимостью 250 см3, прибавляют 50 см3 ацетонитрила и помещают на 5 минут в ультразвуковую ванну, а затем на 5 минут на аппарат для встряхивания проб. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр «красная лента» в круглодонную колбу для упаривания вместимостью 250 см3. Экстракцию повторяют еще один раз в тех же условиях, используя 30 см3 ацетонитрила. Экстракты фильтруют, объединяют в круглодонной колбе и выпаривают до водного остатка на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
10.1.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей. К остатку в колбе, полученному по п. 10.1.1, добавляют 3 см3 ацетона, обмывают стенки колбы, прибавляют 50 см3 дистиллированной воды и 10 см3 насыщенного раствора хлористого натрия, перемешивают и переносят в делительную воронку вместимостью 250 см3.
Водную фракцию промывают двумя порциями гексана по 30 см3, каждый раз интенсивно встряхивая воронку в течение 2 минут. Верхний слой (гексан) отбрасывают, а нижний (водный) слой возвращают в делительную воронку.
Имидаклоприд экстрагируют тремя порциями хлористого метилена по 30 см3 каждая, встряхивая делительную воронку по 2 минуты. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний слой (хлористый метилен) собирают в круглодонную колбу для упаривания вместимостью 250 см3, пропуская его через слой безводного сульфата натрия, и выпаривают досуха при температуре не выше плюс 40 °C.
10.1.3. Очистка экстракта на патронах № 1. Сухой остаток в колбе, полученный по п. 10.1.2, растворяют в 2 см3 этилацетата, тщательно обмывают стенки колбы, добавляют 8 см3 гексана, перемешивают и вносят на подготовленный по п. 8.8.1 патрон № 1. Слив отбрасывают.
Имидаклоприд элюируют с патрона 10 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 1:4. Элюат собирают в чистую круглодонную колбу вместимостью по 100 см3, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
10.1.4. Очистка экстракта на патронах № 2. Сухой остаток в колбе, полученный по п. 10.1.3, растворяют в 5 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 2:8, тщательно обмывают стенки колбы и вносят на подготовленный по п. 8.9.1 патрон № 2. Элюат собирают в чистую круглодонную колбу вместимостью по 100 см3. Исходную колбу обмывают 5 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 2:8 и вносят раствор на патрон. Элюат собирают, объединяя с предыдущим в круглодонной колбе, и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
10.1.5. Сухой остаток растворяют в 1,0 см3 смеси, приготовленной по п. 8.4.3, помещают в виалу и анализируют в условиях хроматографирования, указанных в п. 10.3.
10.2 Сок арбуза.
10.2.1. Экстракция. Навеску сока массой (10,0 +/- 0,3) г помещают в стакан вместимостью 100 см3. К навеске сока добавляют 50 см3 дистиллированной воды и 15 см3 насыщенного раствора хлорида натрия, перемешивают и переносят в делительную воронку вместимостью 250 см3.
Имидаклоприд экстрагируют двумя порциями ацетонитрила по 50 см3 каждая, встряхивая делительную воронку по 2 минуты. После полного разделения фаз в делительной воронке верхний слой (ацетонитрил) собирают в коническую колбу вместимостью 250 см3 с 10 г сухого хлорида натрия, перемешивают и оставляют при комнатной температуре на 10 минут.
Объединенный экстракт из колбы переносят в делительную воронку вместимостью 250 см3 (нерастворившуюся соль оставляют в колбе), оставляют до полного разделения слоев и нижний (водный) слой отбрасывают. Верхний (ацетонитрильный) слой собирают через слой безводного сульфата натрия в круглодонную колбу для упаривания вместимостью 250 см3 и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
10.2.2. Далее проводят очистку экстракта в соответствии с пп. 10.1.2, 10.1.3, 10.1.4.
10.2.3. Сухой остаток растворяют в 1,0 см3 смеси, приготовленной по п. 8.4.3, помещают в виалу и анализируют в условиях хроматографирования, указанных в п. 10.3.
10.3 Условия хроматографирования.
10.3.1. Измерения выполняют на жидкостном хроматографе с диодно-матричным детектором при следующих режимных условиях <5>:
- колонка хроматографическая стальная, заполненная сорбентом с привитыми неполярными группами C18;
- предколонка хроматографическая стальная, заполненная сорбентом с привитыми неполярными группами C18;
- температура колонки: плюс 30 °C;
- подвижная фаза: смесь ацетонитрила с водой в соотношении 25:75 (по объему) при хроматографировании в изократическом режиме;
- скорость потока элюента: 1,0 см3/минуту;
- длина волны: 295 нм;
- чувствительность не менее 8 единиц абсорбции на шкалу;
- объем вводимой пробы: 35 мм3.
<5> Примечание: параметры хроматографирования могут различаться в зависимости от марки и модели прибора.
Образцы, дающие пики больше, чем стандартный раствор имидаклоприда с концентрацией 1 мкг/см3, разбавляют смесью, приготовленной по п. 8.4.3, но не более чем в 100 раз. В этом случае разбавление учитывают в конечной формуле расчета содержания имидаклоприда в пробах.
XI. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ АНАЛИЗА
11.1. Концентрацию имидаклоприда в пробах (X1, мг/кг) рассчитывают без учета полноты извлечения вещества из проб по формуле (2) <6>:
X_{1} = \frac{A \cdot V \cdot \text{К}_{\text{р}}}{m} , (2)
где: A — концентрация имидаклоприда в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площадей хроматографических пиков, мкг/см3;
V — объем раствора, подготовленного для хроматографирования, см3 (для всей остальной исследуемой продукции равен 1 см3);
m — масса анализируемого образца, г;
Кр — коэффициент разбавления (если экстракт подвергался разбавлению).
<6> Примечание: идентификация и расчет концентрации вещества в пробах могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую систему.
11.2 Проверка приемлемости результатов параллельных определений.
За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости, условие (3):
\frac{2*|\text{Х}_{1} - \text{Х}_{2}|*100}{(\text{Х}_{1} + \text{Х}_{2})} \leq r, (3)
где: X1, X2 - результаты параллельных определений, мг/кг;
r — значение предела повторяемости (таблица 3.1), где r = 2,8 \cdot \sigma_{r} .
При невыполнении условия (3) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.
XII. ОФОРМЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ
12.1 Результат анализа представляют в виде выражения (4):
(\overline{X} \pm \Delta),\text{мг}/\text{кг}, при вероятности P = 0,95, (4)
где: \overline{X} — среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
\Delta — граница абсолютной погрешности, мг/кг, рассчитанная по формуле (5):
\Delta = \delta \cdot \overline{X}/100, (5)
где: \delta — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, таблица 3.1), %.
Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.
Если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде: «содержание имидаклоприда в пробе — менее 0,01 мг/кг» <7>.
<7> Примечание: 0,01 мг/кг — предел количественного определения концентрации имидаклоприда в исследуемой продукции.
XIII. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ
13.1. Контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с документами по стандартизации <8>.
<8> ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002; ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений», введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 № 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-3-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерений», введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 № 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-4-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений», введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 № 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-5-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 5. Альтернативные методы определения прецизионности стандартного метода измерений», введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 № 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике», введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 № 161-ст.
Периодичность и формы контроля определяются системой менеджмента качества лаборатории.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЕ ССЫЛКИ
1. Федеральный закон от 30.03.1999 № 52-ФЗ «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения».
2. Федеральный закон от 19.07.1997 № 109-ФЗ «О безопасном обращении с пестицидами и агрохимикатами».
3. Методические указания по регистрационным испытаниям пестицидов в части биологической эффективности. Общая часть.
4. ГОСТ Р 8.563-2009 «Государственная система обеспечения единства измерений. Методики (методы) измерений».
5. ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения».
6. ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений».
7. ГОСТ Р ИСО 5725-3-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерений».
8. ГОСТ Р ИСО 5725-4-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений».
9. ГОСТ Р ИСО 5725-5-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 5. Альтернативные методы определения прецизионности стандартного метода измерений».
10. ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике».
11. ГОСТ 12.1.007-76 «Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности».
12. ГОСТ 12.1.019-2017 «Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты».
13. ГОСТ 12.1.004-91 «Пожарная безопасность. Общие требования».
14. ГОСТ 12.4.009-83 «Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание».
15. ГОСТ OIML R-76-1-2011 «Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания».
16. ГОСТ OIML R 111-1-2009 «Гири классов E1, E2, F1, F2, M1, M1-2, M2, M2-3 и M3. Часть 1. Метрологические и технические требования».
17. ГОСТ 1770-74 «Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия».
18. ГОСТ 29227-91 «Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования».
19. ГОСТ 25336-82 «Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры».
20. ГОСТ 26678-85 «Холодильники и морозильники бытовые электрические компрессионные параметрического ряда. Общие технические условия».
21. ГОСТ 14919-83 «Электроплиты, электроплитки и жарочные электрошкафы бытовые. Общие технические условия».
22. ГОСТ Р 58144-2018 «Вода дистиллированная. Технические условия».
23. ГОСТ Р 52501-2005 «Вода для лабораторного анализа. Технические условия».
24. ГОСТ 5556-2022 «Вата медицинская гигроскопическая. Технические условия».
25. ГОСТ 2603-79 «Ацетон. Технические условия».
26. ГОСТ 20490-75 «Калий марганцовокислый. Технические условия».
27. ГОСТ 4166-76 «Натрий сернокислый. Технические условия».
28. ГОСТ 4201-79 «Натрий углекислый кислый. Технические условия».
29. ГОСТ 4233-77 «Натрий хлористый. Технические условия».
30. ГОСТ 22300-76 «Эфиры этиловый и бутиловый уксусной кислоты. Технические условия».
31. ГОСТ 7177-2022 «Арбузы продовольственные свежие. Технические условия».
32. ГОСТ 32101-2013 «Консервы. Продукция соковая. Соки фруктовые прямого отжима. Общие технические условия».
33. Унифицированные правила отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов.