МУК 4.1.4088-24. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение массовых концентраций полициклических ароматических углеводородов (нафталин, 2-метилнафталин, антрацен, 9-метилантрацен, пирен, бенз(а)пирен) в крови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания по методам контроля
(утв. Роспотребнадзором 25.12.2024)
Примечание
Документ введен в действие с 25.03.2025.
Утверждаю Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации А. Ю. Попова 25 декабря 2024 года
Дата введения 25 марта 2025 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ИЗМЕРЕНИЕ МАССОВЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ ПОЛИЦИКЛИЧЕСКИХ АРОМАТИЧЕСКИХ УГЛЕВОДОРОДОВ (НАФТАЛИН, 2-МЕТИЛНАФТАЛИН, АНТРАЦЕН, 9-МЕТИЛАНТРАЦЕН, ПИРЕН, БЕНЗ(А)ПИРЕН) В КРОВИ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО МЕТОДАМ КОНТРОЛЯ МУК 4.1.4088-24
1. Разработаны Федеральным бюджетным учреждением науки «Федеральный научный центр медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (Н.В. Зайцева, Т.В. Нурисламова, Т.Д. Карнажицкая, М.О. Старчикова, Т.С. Пермякова).
2. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 25 декабря 2024 г
I. Общие положения и область применения
1.1. Настоящие методические указания по методам контроля (далее — МУК) описывают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (далее — ВЭЖХ) для измерения массовых концентраций полициклических ароматических углеводородов (далее — ПАУ) (нафталин, 2-метилнафталин, антрацен, 9-метилантрацен, пирен, бенз(a)пирен) в крови в диапазонах, указанных в табл. 1.1.
Наименования определяемых соединений, диапазоны измерений массовых концентраций ПАУ в крови и в анализируемом экстракте
1.2 МУК носят рекомендательный характер.
II. Физико-химические свойства
2.1 Физические и химические свойства.
ПАУ и их производные состоят из двух и более конденсированных ароматических колец с различным структурным расположением (см. рисунок 2.1) и представляют собой кристаллические вещества (см. таблицу 2.1). Температура плавления анализируемых ПАУ плюс 35 — 218 °C, температура кипения плюс 196 — 495 °C. Большинство ПАУ являются липофильными соединениями, мало растворимы в воде, хорошо или умеренно растворимы в бензоле, толуоле, ксилоле, хлороформе, ацетонитриле и других органических растворителях. Для ПАУ характерны реакции электрофильного замещения: сульфирования, нитрования, галогенирования, алкилирования с образованием сульфо-, нитро-, галоген-, алкилпроизводных. Многие производные ПАУ более токсичны по сравнению с исходными соединениями. Большинство ПАУ являются флуоресцентными, излучающими свет с характерными длинами волн при возбуждении молекул.
 нафталин |
 2-метилнафталин |
|---|---|
 антрацен |
 9-метилантрацен |
 пирен |
 бенз(a)пирен |
Рис. 2.1 — Структурные формулы ПАУ и их производных
Физико-химические свойства ПАУ
| Показатель | Характеристика |
| 1 | 2 |
| Наименование соединения | Нафталин (бицикло[4.4.0]дека-1,3,5,7,9-пентен) <*> |
| Регистрационный номер CAS | 91-20-3 |
| Брутто-формула | C10H8 |
| Агрегатное состояние | Белые кристаллы |
| Молекулярная масса | 128,17 |
| Tпл., °C | 80,26 |
| Tкип., °C | 217,97 |
| Плотность, г/см3 | 1,0253 (20 °C) |
| Растворимость в воде, г/100 г | Мало растворим |
| Растворимость в органических растворителях | Хорошо растворим в бензоле, эфире, этаноле, хлороформе, ацетонитриле |
| Давление паров, мм рт. ст. | 0,85 (25 °C) |
| Наименование соединения | 2-Метилнафталин (бета-метилнафталин) <*> |
| Регистрационный номер CAS | 91-57-6 |
| Брутто-формула | C11H10 |
| Агрегатное состояние | Белые кристаллы |
| Молекулярная масса | 142,2 |
| Tпл., °C | 35 |
| Tкип., °C | 241 |
| Плотность, г/см3 | 1,0058 (20 °C) |
| Растворимость в воде, г/100 г | 0,003 |
| Растворимость в органических растворителях | Хорошо растворим в бензоле, этаноле, ацетонитриле |
| Давление паров, мм рт. ст. | 0,055 (25 °C) |
| Наименование соединения | Антрацен (паранафталин) <*> |
| Регистрационный номер CAS | 120-12-7 |
| Брутто-формула | C14H10 |
| Агрегатное состояние | Бесцветные кристаллы |
| Молекулярная масса | 178,23 |
| Tпл., °C | 218 |
| Tкип., °C | 340 |
| Плотность, г/см3 | 1,24 (20 °C) |
| Растворимость в воде, г/100 г | Не растворим |
| Растворимость в органических растворителях | Хорошо растворим в ацетонитриле, ацетоне, бензоле |
| Давление паров, мм рт. ст. | 6,56·10-6 (25 °C) |
| Наименование соединения | 9-Метилантрацен <*> |
| Регистрационный номер CAS | 779-02-2 |
| Брутто-формула | C15H12 |
| Агрегатное состояние | Желтые кристаллы |
| Молекулярная масса | 192,26 |
| Tпл., °C | 81,5 |
| Tкип., °C | 196 — 197 |
| Плотность, г/см3 | 1,06 (20 °C) |
| Растворимость в воде, г/100 г | Мало растворим |
| Растворимость в органических растворителях | Хорошо растворим в ацетонитриле, ацетоне, бензоле |
| Давление паров, мм рт. ст. | 4,00·10-5 (25 °C) |
| Наименование соединения | Пирен (бета-пирен) <*> |
| Регистрационный номер CAS | 129-00-0 |
| формула | C16H10 |
| Агрегатное состояние | Белые кристаллы |
| Молекулярная масса | 202,25 |
| Tпл., °C | 145 — 148 |
| Tкип., °C | 400 — 404 |
| Плотность, г/см3 | 1,271 (23 °C) |
| Растворимость в воде, г/100 г | Не растворим |
| Растворимость в органических растворителях | Хорошо растворим в ацетонитриле, этаноле, бензоле |
| Давление паров, мм рт. ст. | 4,5·10-6 (25 °C) |
| Наименование соединения | Бенз(a)пирен (3,4-бензпирен, бензо[pqr]тетрафен) <*> |
| Регистрационный номер CAS | 50-32-8 |
| Брутто-формула | C20H12 |
| Агрегатное состояние | Бледно-желтые кристаллы |
| Молекулярная масса | 252,31 |
| Tпл., °C | 179 |
| Tкип., °C | 495 |
| Плотность, г/см3 | 1,4 |
| Растворимость в воде, г/100 г | Мало растворим |
| Растворимость в органических растворителях | Хорошо растворим в ацетонитриле, бензоле, толуоле, ксилоле |
| Давление паров, мм рт. ст. | 5,49·10-9 (25 °C) |
| Примечание: <*> — в соответствии с классификацией Международного союза теоретической и прикладной химии (ИЮПАК) (англ. International Union of Pure and Applied Chemistry, IUPAC). | |
2.2 Краткая токсикологическая характеристика.
Нафталин — при остром отравлении парами и пылью нафталин вызывает головные боли, тошноту, рвоту, раздражение слизистых оболочек. Длительное воздействие нафталина может вызвать повреждение или разрушение красных кровяных телец (эритроцитов). Хроническое воздействие нафталина приводит к нарушению работы печени и поджелудочной железы, вызывает развитие атрофического ринита и фарингита. При действии на кожу нафталин вызывает эритемы, экземы.
2-Метилнафталин — вызывает раздражение и фотосенсибилизацию кожи. Не является канцерогеном для человека.
Антрацен — при вдыхании пыли наблюдается отек век, раздражение слизистых оболочек, эритема, резко обостряющиеся на свету (фотодерматит), жжение и зуд кожи. При продолжительном контакте пигментация участков кожи, ороговение поверхностных слоев кожи, телеангиоэктазии.
9-Метилантрацен — вызывает повреждение глаз.
Пирен — вызывает головную боль, слабость, раздражительность, расстройство сна, приводит к лейкоцитозу, нарушению функций печени.
Бенз(a)пирен — канцероген, вызывает раздражение слизистых оболочек, дерматит, бронхит, кашель, одышку, конъюнктивит, фотосенсибилизацию, отек легких, нарушение репродуктивной функции и лейкемию. Попадание на кожу может вызвать эритему, пигментацию, шелушение, инфильтрацию.
III. Погрешность измерений
3.1. При соблюдении условий проведения анализа и методики, изложенной в настоящих МУК погрешность <1> (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 3.1 для соответствующих диапазонов концентраций.
<1> ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения», введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 № 161-ст (далее — ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002); ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений», введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 № 161-ст (далее — ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002).
Метрологические характеристики
| Диапазон измерений в крови, мкг/см3 | Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), \sigma_{r} , % | Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадратическое отклонение воспроизводимости), \sigma_{R} , % | Показатель правильности (границы относительной систематической погрешности при доверительной вероятности P = 0,95), \delta_{c} , % | Показатель точности <*> (границы относительной погрешности при доверительной вероятности P = 0,95), \delta , % |
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| Нафталин | ||||
| От 0,0001 до 0,01 включительно | 9 | 12 | 23 | 32 |
| 2-Метилнафталин | ||||
| От 0,00005 до 0,005 включительно | 7 | 12 | 22 | 32 |
| Антрацен | ||||
| От 0,000005 до 0,0016 включительно | 7 | 12 | 24 | 31 |
| 9-Метилантрацен | ||||
| От 0,000005 до 0,0016 включительно | 8 | 12 | 26 | 31 |
| Пирен | ||||
| От 0,000025 до 0,011 включительно | 8 | 11 | 23 | 30 |
| Бенз(a)пирен | ||||
| От 0,000005 до 0,0019 включительно | 9 | 12 | 19 | 31 |
| Примечание: <*> — соответствует относительному значению расширенной неопределенности (U(отн)) с коэффициентом охвата k = 2. | ||||
IV. Метод измерений
4.1. Измерение массовых концентраций нафталина, 2-метилнафталина, антрацена, 9-метилантрацена, пирена и бенз(a)пирена в крови проводят методом ВЭЖХ с флуориметрическим детектированием в режиме программирования длин волн возбуждения и эмиссии на колонке с обращенной фазой C18. Извлечение ПАУ из образцов крови проводят методом жидкостной экстракции ацетонитрилом в присутствии высаливателя хлористого натрия с предварительным подщелачиванием образца раствором гидроокиси натрия. Степень экстракции нафталина составляет 91%, 2-метилнафталина 93,5%, антрацена 95%, 9-метилантрацена 94%, пирена 94,5%, бенз(a)пирена 78%.
4.2. Нижний предел измерения нафталина в анализируемом объеме экстракта (20 мм3) составляет 2 пг, 2-метилнафталина — 1 пг, антрацена — 0,1 пг, 9-метилантрацена — 0,1 пг, бенз(a)пирена — 0,08 пг, пирена — 0,48 пг.
V. Средства измерений, реактивы, вспомогательное оборудование, устройства и материалы
5.1. При выполнении измерений и подготовке проб применяют средства измерений, реактивы, вспомогательное оборудование, устройства и материалы, приведенные в табл. 5.1 - 5.3.
| Наименование средств измерения | Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| Жидкостный хроматограф с флуориметрическим детектором | Внесено в реестр «Утвержденные типы средств измерений» Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений |
| Весы лабораторные электронные | II класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г, пределы допустимой погрешности +/- 0,001 г, ГОСТ Р 53228-2008 |
| Весы лабораторные электронные | II класса точности с наибольшим пределом взвешивания 600 г, пределы допустимой погрешности: до 500 г +/- 0,05 г; свыше 500 г +/- 0,10 г, ГОСТ Р 53228-2008 |
| Колбы мерные | 2-го класса точности 2-25-2, 2-50-2, ГОСТ 1770-74 |
| Пипетки градуированные | 2-го класса точности вместимостью 1,0; 5,0; 10 см3, ГОСТ 29227-91 |
| Пипетки градуированные | 1-го класса точности вместимостью 0,5 см3, ГОСТ 29227-91 |
| Дозаторы жидкости механические одноканальные переменного объема с одноразовыми наконечниками | Вместимость 10 — 100 мм3; 100 — 1000 мм3, ГОСТ 28311-2021 |
| Прибор/приборы для измерения атмосферного давления, температуры и относительной влажности воздуха | Внесено в реестр «Утвержденные типы средств измерений» Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений |
| Стандартный образец состава раствора антрацена в ацетонитриле 200 мкг/см3 | Относительная погрешность аттестованного значения +/- 2% |
| Стандартный образец состава раствора пирена в ацетонитриле 200 мкг/см3 | Относительная погрешность аттестованного значения +/- 5% |
| Стандартный образец состава раствора бенз(a)пирена в ацетонитриле 100 мкг/см3 | Относительная погрешность аттестованного значения +/- 2% |
| Примечание: допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками. | |
| Наименование реактивов | Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| Нафталин | Аналитический стандартный образец с содержанием основного компонента не менее 98% |
| 2-метилнафталин | Аналитический стандартный образец с содержанием основного компонента не менее 95% |
| 9-Метилантрацен | Аналитический стандартный образец с содержанием основного компонента не менее 98% |
| Ацетонитрил для хроматографии | Сорт «0» |
| Дистиллированная вода | ГОСТ Р 58144-2018 |
| Серная кислота | Химически чистая, ГОСТ 4204-77 |
| Калий двухромовокислый | Чистый для анализа, ГОСТ 4220-75 |
| Натрий хлористый | Химически чистый, ГОСТ 4233-77 |
| Натрия гидроокись | Химически чистая, ГОСТ 4328-77 |
| Раствор гепарина в ампулах | 5000 ед. в 1 см3 |
| Примечание: допускается использование реактивов с более высокой квалификацией. | |
Вспомогательное оборудование, устройства, материалы
| Наименование вспомогательного оборудования, устройств, материалов | Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| 1 | 2 |
| Хроматографическая колонка | Стальная, длиной 50 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18 зернением 3,5 мкм |
| Предколонка | Длина 12,5 мм, внутренний диаметр 4,6 мм с обращенно-фазным сорбентом C18 зернением 5 мкм |
| Шкаф сушильный электрический | Диапазон рабочих температур от 50 до 200 °C |
| Устройство для очистки воды, позволяющее получать воду чистоты «для жидкостной хроматографии» и выше | - |
| Центрифуга | Допустимая скорость центрифугирования не менее 5000 об/мин |
| Стаканы химические с носиком В-1-1000-ТС, В-1-2000-ТС | ГОСТ 25336 |
| Устройство для фильтрации растворителей | - |
| Стеклянная палочка ХС1 | - |
| Пробирки полипропиленовые конические градуированные с завинчивающимися крышками | Вместимость 15 см3 |
| Мембранный фильтр из полиамида (ПА, нейлон) для фильтрации растворителей | Размер пор 0,45 мкм |
| Шприц медицинский одноразовый типа «Луер» | Вместимость 2 см3, ГОСТ ISO 7886-1-2011 |
| Шприцевые фильтрующие насадки гидрофильные из политетрафторэтилена (далее — ПТФЭ) или регенерированной целлюлозы (РЦ) | Диаметр насадки 15 мм, размер пор 0,2 мкм |
| Хроматографические виалы с крышкой | Вместимость 2 см3 |
| Бутыль из толстого стекла с притертой пробкой | Вместимость 1 дм3 |
| Примечание: допускается использование вспомогательного оборудования, устройств и материалов с аналогичными или лучшими техническими характеристиками. | |
VI. Требования безопасности
6.1. При выполнении измерений соблюдают правила противопожарной безопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.004-91 и электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-2017, имеются средства пожаротушения в соответствии с ГОСТ 12.4.009-83.
6.2. При работе в лаборатории необходимо соблюдать правила техники безопасности <2>.
<2> ПНД Ф 12.13.1-03 «Методические рекомендации. Техника безопасности при работе в аналитических лабораториях (общие положения)», утвержденные директором ФГУ «Центр экологического контроля и анализа» Министерства природных ресурсов Российской Федерации 04.09.2003.
6.3. При работе с химическими реактивами соблюдают требования безопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76 и ГОСТ 12.1.005-88. Помещение должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать гигиенических нормативов <3>.
<3> СанПиН 1.2.3685-21 «Гигиенические нормативы и требования к обеспечению безопасности и (или) безвредности для человека факторов среды обитания», утвержденные постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 28.01.2021 № 2 (зарегистрировано Минюстом России 29.01.2021, регистрационный № 62296), с изменениями, внесенными постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 30.12.2022 № 24 (зарегистрировано Минюстом России 09.03.2023, регистрационный № 72558).
6.4. При выполнении измерений на жидкостном хроматографе соблюдают меры безопасности, указанные в руководстве по эксплуатации прибора.
6.5. Утилизацию растворов после выполнения измерений проводят в соответствии с инструкцией по обращению с химическими отходами, действующей в лаборатории.
VII. Требования к квалификации операторов
7.1. К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются лица, имеющие опыт работы на жидкостном хроматографе, освоившие метод измерений и получившие удовлетворительные результаты оперативного контроля процедуры измерений.
VIII. Условия измерений
8.1 При подготовке к проведению измерений соблюдают следующие условия:
- температура воздуха плюс (20 +/- 5) °C;
- атмосферное давление 84,0 — 106,7 кПа, 630 — 800 мм рт. ст.;
- влажность воздуха не более 80%;
8.2. Выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендуемых технической документацией к прибору.
IX. Подготовка к выполнению измерений
9.1. Перед выполнением измерений проводят следующие работы: подготовку посуды, приготовление растворов, подготовку хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики.
9.2 Подготовка посуды.
Стеклянную посуду замачивают в хромовой смеси на 1 ч, тщательно промывают проточной водопроводной водой, ополаскивают дистиллированной водой и сушат при температуре плюс 105 — 110 °C. Перед использованием всю посуду ополаскивают ацетонитрилом.
9.3 Приготовление растворов.
9.3.1 Подвижная фаза для элюирования.
Состав подвижной фазы — смесь ацетонитрила и дистиллированной воды задают на двух каналах насоса в градиентном режиме. Перед использованием растворители фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм с помощью устройства для фильтрации. Срок хранения дистиллированной воды 1 сутки при комнатной температуре.
9.3.2. Исходный раствор нафталина в ацетонитриле с массовой концентрацией 1 мг/см3.
Взвешивают навеску (0,050 +/- 0,001) г чистого вещества нафталина, переносят в мерную колбу вместимостью 50 см3, приливают 10 см3 ацетонитрила, содержимое колбы перемешивают до полного растворения навески, доводят объем раствора в колбе до метки ацетонитрилом, закрывают притертой пробкой и перемешивают. Массовая концентрация нафталина в растворе составляет 1 мг/см3. Используют свежеприготовленный раствор.
9.3.3. Разбавленный раствор нафталина в ацетонитриле с массовой концентрацией 2 мкг/см3.
В мерную колбу вместимостью 25 см3 вносят пипеткой (или дозатором) 0,050 см3 исходного раствора нафталина в ацетонитриле с массовой концентрацией 1 мг/см3, доводят содержимое колбы ацетонитрилом до метки, закрывают пробкой и перемешивают. Массовая концентрация нафталина в растворе составляет 2 мкг/см3. Используют свежеприготовленный раствор.
9.3.4. Разбавленный раствор нафталина в ацетонитриле с массовой концентрацией 0,1 мкг/см3.
В мерную колбу вместимостью 25 см3 вносят 1,25 см3 разбавленного раствора нафталина в ацетонитриле с массовой концентрацией 2 мкг/см3, доводят содержимое колбы ацетонитрилом до метки, закрывают пробкой и перемешивают. Массовая концентрация нафталина в растворе составляет 0,1 мкг/см3. Используют свежеприготовленный раствор.
9.3.5 Исходный раствор 2-метилнафталина в ацетонитриле с массовой концентрацией 1 мг/см3
Взвешивают навеску (0,050 +/- 0,001) г чистого вещества 2-метилнафталина, переносят в мерную колбу вместимостью 50 см3, приливают 10 см3 ацетонитрила, содержимое колбы перемешивают до полного растворения навески, доводят объем раствора в колбе до метки ацетонитрилом, закрывают притертой пробкой и перемешивают. Массовая концентрация 2-метилнафталина в растворе составляет 1 мг/см3. Используют свежеприготовленный раствор.
9.3.6. Разбавленный раствор 2-метилнафталина в ацетонитриле с массовой концентрацией 2 мкг/см3.
В мерную колбу вместимостью 25 см3 вносят 0,050 см3 исходного раствора 2-метилнафталина в ацетонитриле с массовой концентрацией 1 мг/см3, доводят содержимое колбы ацетонитрилом до метки, закрывают пробкой и перемешивают. Массовая концентрация 2-метилнафталина в растворе составляет 2 мкг/см3. Используют свежеприготовленный раствор.
9.3.7. Разбавленный раствор 2-метилнафталина в ацетонитриле с массовой концентрацией 0,05 мкг/см3.
В мерную колбу вместимостью 50 см3 вносят 1,25 см3 разбавленного раствора 2-метилнафталина в ацетонитриле с массовой концентрацией 2 мкг/см3, доводят содержимое колбы ацетонитрилом до метки, закрывают пробкой и перемешивают. Массовая концентрация 2-метилнафталина в растворе составляет 0,05 мкг/см3. Используют свежеприготовленный раствор.
9.3.8. Исходный раствор антрацена в ацетонитриле с массовой концентрацией 1 мкг/см3.
В мерную колбу вместимостью 50 см3 вносят 0,25 см3 раствора стандартного образца антрацена в ацетонитриле с массовой концентрацией 200 мкг/см3, доводят содержимое колбы ацетонитрилом до метки, закрывают пробкой и перемешивают. Массовая концентрация антрацена в растворе составляет 1 мкг/см3. Срок хранения раствора 6 месяцев.
9.3.9. Разбавленный раствор антрацена в ацетонитриле с массовой концентрацией 0,025 мкг/см3.
В мерную колбу вместимостью 50 см3 вносят 1,25 см3 исходного раствора антрацена в ацетонитриле с массовой концентрацией 1 мкг/см3, доводят содержимое колбы ацетонитрилом до метки, закрывают пробкой и перемешивают. Массовая концентрация антрацена в растворе составляет 0,025 мкг/см3. Используют свежеприготовленный раствор.
9.3.10. Исходный раствор 9-метилантрацена 1 мг/см3 в ацетонитриле с массовой концентрацией 1 мг/см3.
Взвешивают навеску (0,050 +/- 0,001) г чистого вещества 9-метилантрацена, переносят в мерную колбу вместимостью 50 см3, приливают 10 см3 ацетонитрила, содержимое колбы перемешивают до полного растворения навески, доводят объем раствора в колбе до метки ацетонитрилом, закрывают притертой пробкой и перемешивают. Массовая концентрация 9-метилантрацена в растворе составляет 1 мг/см3. Срок хранения раствора 1 месяц.
9.3.11. Разбавленный раствор 9-метилантрацена в ацетонитриле с массовой концентрацией 1 мкг/см3.
В мерную колбу вместимостью 50 см3 вносят 0,05 см3 исходного раствора 9-метилантрацена в ацетонитриле с массовой концентрацией 1 мг/см3, доводят содержимое колбы ацетонитрилом до метки, закрывают пробкой и перемешивают. Массовая концентрация 9-метилантрацена в растворе составляет 1 мкг/см3. Используют свежеприготовленный раствор.
9.3.12. Разбавленный раствор 9-метилантрацена в ацетонитриле с массовой концентрацией 0,025 мкг/см3.
В мерную колбу вместимостью 50 см3 вносят 1,25 см3 разбавленного раствора 9-метилантрацена в ацетонитриле с массовой концентрацией 1 мкг/см3, доводят содержимое колбы ацетонитрилом до метки, закрывают пробкой и перемешивают. Массовая концентрация 9-метилантрацена в растворе составляет 0,025 мкг/см3. Используют свежеприготовленный раствор.
9.3.13. Исходный раствор пирена в ацетонитриле с массовой концентрацией 1 мкг/см3.
В мерную колбу вместимостью 50 см3 вносят 0,25 см3 раствора стандартного образца пирена в ацетонитриле с массовой концентрацией 200 мкг/см3, доводят содержимое колбы ацетонитрилом до метки, закрывают пробкой и перемешивают. Массовая концентрация пирена в растворе составляет 1 мкг/см3. Срок хранения раствора 6 месяцев.
9.3.14. Разбавленный раствор пирена в ацетонитриле с массовой концентрацией 0,04 мкг/см3.
В мерную колбу вместимостью 25 см3 вносят 1,0 см3 исходного раствора пирена в ацетонитриле с массовой концентрацией 1 мкг/см3, доводят содержимое колбы ацетонитрилом до метки, закрывают пробкой и перемешивают. Массовая концентрация пирена в растворе составляет 0,04 мкг/см3. Используют свежеприготовленный раствор.
9.3.15. Исходный раствор бенз(a)пирена в ацетонитриле с массовой концентрацией 1 мкг/см3.
В мерную колбу вместимостью 50 см3 вносят 0,50 см3 раствора стандартного образца бенз(a)пирена в ацетонитриле с массовой концентрацией 100 мкг/см3, доводят содержимое колбы ацетонитрилом до метки, закрывают пробкой и перемешивают. Массовая концентрация бенз(a)пирена в растворе составляет 1 мкг/см3. Срок хранения раствора 6 месяцев.
9.3.16. Разбавленный раствор бенз(a)пирена в ацетонитриле с массовой концентрацией 0,01 мкг/см3.
В мерную колбу вместимостью 25 см3 вносят 0,25 см3 исходного раствора бенз(a)пирена в ацетонитриле с массовой концентрацией 1 мкг/см3, доводят содержимое колбы ацетонитрилом до метки, закрывают пробкой и перемешивают. Массовая концентрация бенз(a)пирена в растворе составляет 0,01 мкг/см3. Используют свежеприготовленный раствор.
9.3.17. 0,2 М раствор натрия гидроокиси в дистиллированной воде.
Взвешивают навеску (0,40 +/- 0,01) г натрия гидроокиси, переносят в мерную колбу вместимостью 50 см3, вносят пипеткой в колбу 10 см3 дистиллированной воды, перемешивают содержимое колбы до полного растворения натрия гидроокиси, доводят дистиллированной водой до метки, закрывают пробкой и перемешивают. Срок хранения раствора 2 недели.
9.3.18 Раствор хромовой смеси.
В термостойкий стакан вместимостью 2 дм3 вносят (50,00 +/- 0,01) г калия двухромовокислого, осторожно приливают по палочке частями, тщательно перемешивая, 1 дм3 концентрированной серной кислоты. Хромовую смесь хранят в темном прохладном месте в плотно закрытой стеклянной посуде 6 месяцев. При появлении осадка или изменении темно-оранжевой окраски на темно-зеленую готовят свежий раствор.
9.4 Подготовка хроматографической колонки.
Колонку устанавливают в хроматограф. Подают смесь ацетонитрила и дистиллированной воды в соотношении 80:20 (объемные доли) со скоростью 0,4 см3/мин до установления равновесия колонки, которое определяют по стабильности нулевой линии детектора.
9.5 Установление градуировочной характеристики.
9.5.1. Градуировочную характеристику, выражающую зависимость величины площади хроматографического пика (в условных единицах (далее — у.е.) от концентрации соответствующего ПАУ в анализируемом растворе (мкг/см3), устанавливают по 3 сериям градуировочных растворов. Каждую серию, состоящую из пяти градуировочных растворов, готовят из растворов для градуировки, приготовленных по пп. 9.2.2 - 9.2.16.
9.5.2. Градуировочные растворы готовят в мерных колбах вместимостью 50 см3. В каждую колбу вносят пипеткой (или дозатором) растворы нафталина, 2-метилнафталина, антрацена, 9-метилантрацена, пирена, бенз(a)пирена в соответствии с табл. 9.1 - 9.6, доводят содержимое колб до метки ацетонитрилом. Используют свежеприготовленные растворы.
Приготовление градуировочных растворов для измерения концентраций нафталина
| Номер раствора | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
|---|---|---|---|---|---|
| Объем раствора с концентрацией 0,1 мкг/см3, см3 | 0,05 | 0,25 | 0,50 | 2,50 | 5,00 |
| Концентрация нафталина в градуировочном растворе, мкг/см3 | 0,0001 | 0,0005 | 0,001 | 0,005 | 0,01 |
Приготовление градуировочных растворов для измерения концентраций 2-метилнафталина
| Номер раствора | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
|---|---|---|---|---|---|
| Объем раствора с концентрацией 0,05 кг/см3, см3 | 0,05 | 0,10 | 0,50 | 1,00 | 5,00 |
| Концентрация 2-метилнафталина в градуировочном растворе, мкг/см3 | 0,00005 | 0,0001 | 0,0005 | 0,001 | 0,005 |
Приготовление градуировочных растворов для измерения концентраций антрацена
| Номер раствора | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
|---|---|---|---|---|---|
| Объем раствора с концентрацией 0,025 мкг/см3, см3 | 0,01 | 0,02 | 0,20 | 1,00 | 3,00 |
| Концентрация антрацена в градуировочном растворе, мкг/см3 | 0,000005 | 0,00001 | 0,0001 | 0,0005 | 0,0015 |
Приготовление градуировочных растворов для измерения концентраций 9-метилантрацена
Приготовление градуировочных растворов для измерения концентраций пирена
| Номер раствора | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
|---|---|---|---|---|---|
| Объем раствора с концентрацией 0,04 мкг/см3, см3 | 0,03 | 0,06 | 0,15 | 1,25 | 12,5 |
| Концентрация пирена в градуировочном растворе, мкг/см3 | 0,000024 | 0,000048 | 0,00012 | 0,001 | 0,01 |
Приготовление градуировочных растворов для измерения концентраций бенз(a)пирена
| Номер раствора | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
|---|---|---|---|---|---|
| Объем раствора с концентрацией 0,01 мкг/см3, см3 | 0,020 | 0,05 | 0,5 | 2,5 | 7,5 |
| Концентрация бенз(a)пирена в градуировочном растворе, мкг/см3 | 0,000004 | 0,00001 | 0,0001 | 0,0005 | 0,0015 |
9.5.3 Условия хроматографирования градуировочных растворов и анализируемых проб:
- колонка 50 мм и внутренним диаметром 4,6 мм с обращенной фазой C18 зернением 3,5 мкм;
- подвижная фаза для элюирования: смесь ацетонитрила (A) и дистиллированной воды (B), подается в градиентном режиме элюирования (табл. 9.7).
Режим градиентной подачи подвижной фазы <4>
<4> Примечание: при необходимости допускается корректировка соотношения компонентов и скорости подвижной фазы с целью обеспечения удовлетворительного разрешения.
- температура термостата колонки — плюс 25 °C;
- флуориметрический детектор, программирование длин волн (табл. 9.8);
Режим программирования длин волн возбуждения (\lambda_{ex}) и эмиссии (\lambda_{em}) флуориметрического детектора
| Время, мин | Длина волны возбуждения (\lambda_{ex}) , нм | Длина волны эмиссии (\lambda_{em}) , нм |
|---|---|---|
| 0,01 | 270 | 335 |
| 4,5 | 250 | 400 |
| 5,7 | 265 | 400 |
| 8,0 | 265 | 412 |
| 25 | 265 | 412 |
2-метилнафталин — (3,7 +/- 0,1) мин;
9-метилантрацен — (6,3 +/- 0,1) мин;
бенз(a)пирен — (15,5 +/- 0,1) мин.
9.5.4. Градуировочный коэффициент (мкг/(см3·у.е.) для определения массовых концентраций нафталина, 2-метилнафталина, антрацена, 9-метилантрацена, пирена и бенз(a)пирена в анализируемом растворе (экстракте) рассчитывают по формуле (1):
K = \frac{\sum_{i = 1}^{n} C_{i}S_{i}}{n} , (1)
где: Ci — массовая концентрация анализируемого соединения в i-м градуировочном растворе, мкг/см3;
Si — среднее значение трех измерений площади пика анализируемого соединения, полученное при анализе i-го градуировочного раствора, условные единицы (у.е.);
n — количество градуировочных растворов (n = 5).
Градуировку проводят при смене реактивов или разделительной колонки, при изменении условий хроматографического анализа. Один раз в год градуировочную характеристику устанавливают заново.
9.5.5 Контроль стабильности градуировочной характеристики.
Контроль стабильности градуировочной характеристики для каждого анализируемого соединения проводят 1 раз в квартал. Образцами для контроля стабильности являются градуировочные растворы, выбранные таким образом, чтобы массовая концентрация анализируемого соединения соответствовала нижней, верхней границам и середине диапазона построения градуировочной характеристики.
Градуировочная характеристика признается стабильной, если расхождение между известным значением массовой концентрации определяемого соединения в градуировочном растворе и измеренным значением массовой концентрации в этом растворе не превышает норматива контроля Кгр, условие (2):
где: C — заданная массовая концентрация анализируемого соединения в градуировочном растворе, мкг/см3;
Ci — результат измерения массовой концентрации анализируемого соединения в градуировочном растворе, мкг/см3;
Кгр — норматив контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3, рассчитанный по формуле (3):
\text{К}_{\text{гр}} = 0,01 \cdot \delta_{\text{гр}} \cdot \text{С} , (3)
где: \delta_{\text{гр}} — погрешность построения градуировочной характеристики 15%.
При невыполнении условия (2) стабильности градуировочной характеристики эксперимент повторяют с другим градуировочным раствором. При повторном невыполнении условия стабильности градуировочной характеристики выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики, строят новую градуировочную характеристику.
X. Отбор и хранение проб
10.1. Отбор проб крови в количестве 2 см3 производят из вены в вакуумные пробирки с внесенным антикоагулянтом (гепарин) или в химически чистые, обеззараженные полипропиленовые пробирки вместимостью 15 см3 с добавлением 0,1 см3 раствора гепарина. Срок хранения отобранных проб в холодильнике при температуре плюс 2 — 6 °C — 1 день, при температуре не выше минус 18 °C — 3 дня.
XI. Выполнение измерений
11.1 Подготовка проб.
В полипропиленовую пробирку вместимостью 15 см3 помещают 1 см3 крови, вносят пипеткой (или дозатором) 0,15 см3 0,2 М раствора натрия гидроокиси, содержимое пробирки перемешивают, добавляют 1 см3 ацетонитрила, интенсивно перемешивают 1 мин, добавляют 0,5 г натрия хлористого, пробу перемешивают 1 мин и центрифугируют при комнатной температуре со скоростью 5000 об/мин в течение 10 мин. После расслоения фаз отделяют верхний слой, фильтруют через шприцевую фильтрующую насадку (ПТФЭ) с размером пор 0,2 мкм в хроматографическую виалу.
11.2 Порядок выполнения измерений.
Для измерения массовой концентрации нафталина, 2-метилнафталина, антрацена, 9-метилантрацена, пирена и бенз(a)пирена в анализируемой пробе вводят в хроматограф 20 мм3 экстракта, полученного по п. 11.1. Анализируют две параллельные пробы в условиях хроматографирования, указанных в п. 9.5.3.
XII. Обработка результатов измерений
12.1 Массовые концентрации анализируемых соединений в крови (мкг/см3) вычисляют по формуле (4):
где: C — массовая концентрация анализируемого соединения в крови, мкг/см3;
S — площадь хроматографического пика определяемого соединения в экстракте, у.е.;
К — градуировочный коэффициент для определения массовой концентрации определяемого соединения, мкг/(см3·у.е.);
КЭ — коэффициент, учитывающий степень экстракции определяемого соединения, рассчитанный по формуле (5):
K_{\text{Э}} = \frac{\text{А}}{\text{Б}} , (5)
где: А — 100% степень экстракции;
Б — рекомендуемая степень экстракции определяемого соединения (п. 4), которая устанавливается в результате расчета отношения между хроматографическими пиками, полученными при измерении площади (высоты) пика для аттестованного значения образца до и после экстракции, проводимой в соответствии с п. 11.1.
12.2. За результат измерения \overline{\text{С}} принимают среднее арифметическое значение двух параллельных определений C1, C2, для которых выполняется условие (6):
|\text{С}_{1} - \text{С}_{2}| \leq 0,01 \cdot r \cdot \frac{\text{С}_{1} + \text{С}_{2}}{2} , (6)
где: r — предел повторяемости (относительное значение), %.
Значения предела повторяемости приведены в табл. 12.1.
При невыполнении условия (6) получают дополнительно еще два результата параллельных определений.
Если максимальное абсолютное расхождение между наибольшим и наименьшим результатами измерений не превышает критического диапазона, относительное значение которого приведено в табл. 12.1 для P = 0,95 и n = 4, условие (7):
|\text{С}_{max} - \text{С}_{min}| \leq 0,01 \cdot CR_{0,95} \cdot \frac{\text{С}_{1} + \text{С}_{2} + \text{С}_{3} + \text{С}_{4}}{4} , (7)
то в этом случае все четыре результата признают приемлемыми и за окончательный результат принимают среднее арифметическое четырех измерений, полученных в условиях повторяемости.
При невыполнении условия (7) в качестве окончательного результата измерений принимают медиану четырех результатов измерений, полученных в условиях повторяемости (параллельных определений). Дополнительно выявляют и устраняют причины, приводящие к невыполнению условий (6) и (7).
Диапазон измерений массовых концентраций ПАУ в крови, значения пределов повторяемости и воспроизводимости, критического диапазона при доверительной вероятности P = 0,95
XIII. Оформление результатов измерений
13.1 Результат измерений представляют в виде выражения (8):
(\overline{\text{С}} \pm \Delta) , мкг/см3, либо (\overline{\text{С}} \pm U) , мкг/см3 (8)
где: \overline{C} — результат измерений массовых концентраций ПАУ в крови, мкг/см3.
\Delta — границы абсолютной погрешности, мкг/см3 при P = 0,95, рассчитанные по формуле (9):
\Delta = \frac{\delta \cdot \overline{\text{С}}}{100} , (9)
где: \delta — границы относительной погрешности, %.
Значение приведено в табл. 3.1.
U — расширенная неопределенность при k = 2, мкг/см3, вычисляемая по формуле (10):
U = \frac{U_{\text{отн}} \cdot \overline{\text{С}}}{100} , (10)
где: — расширенная неопределенность (в относительных единицах) при k = 2 (табл. 3.1), %.
Допустимо результат измерений в документах, выдаваемых лабораторией, представлять в виде выражения (11):
(\overline{\text{С}} \pm \Delta_{\text{л}})\text{мкг}/\text{см}^{3} , при P = 0,95, при условии: \Delta_{\text{л}}<\Delta , (11)
где: \Delta_{\text{л}} — границы абсолютной погрешности результатов измерений, установленные при внедрении методики в лаборатории и обеспечиваемые контролем стабильности результатов измерений, мкг/см3.
13.2. Численное значение C должно оканчиваться цифрой того же разряда, что и значение \Delta .
XIV. Контроль точности результатов измерений
14.1. Контроль точности результатов измерений в пределах лаборатории организуют и проводят путем проведения проверки приемлемости результатов измерений, получаемых в условиях контроля стабильности градуировочной характеристики (п. 9.5.5), повторяемости (п. 12.2), воспроизводимости (п. 14.2), оперативного контроля процедуры измерений (п. 14.3), и контроля стабильности результатов измерений в соответствии с документами по стандартизации <5>.
<5> ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002; ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002; ГОСТ Р ИСО 5725-3-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерений», введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 № 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-4-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений», введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 № 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-5-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 5. Альтернативные методы определения прецизионности стандартного метода измерений», введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 № 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике», введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 № 161-ст.
14.2. Проверка приемлемости результатов измерений, получаемых в условиях воспроизводимости.
Образцами для проверки приемлемости результатов измерений, получаемых в условиях воспроизводимости, являются образцы крови с внесенными в них добавками аттестованных растворов ПАУ, подготовленных в соответствии с п.п. 9.2.4, 9.2.7, 9.2.9, 9.2.12, 9.2.14, 9.2.16.
Проверку приемлемости результатов измерений, получаемых в условиях воспроизводимости (результаты измерений получены в разных лабораториях), проводят по результатам измерений массовых концентраций ПАУ в крови с одинаковым содержанием соединений. Результаты измерений признают приемлемыми при выполнении условия (12):
\frac{|\text{С}_{1} - \text{С}_{2}|}{(\text{С}_{1} + \text{С}_{2})2} \cdot 100\% \leq R (12)
где: C1 и C2 - результаты измерений массовых концентраций ПАУ в крови, полученные в условиях воспроизводимости, мкг/см3;
R — предел воспроизводимости (относительное значение), %. Значения предела воспроизводимости приведены в табл. 12.1.
Если условие (12) не выполняется, процедуру повторяют. При повторном превышении предела воспроизводимости выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
14.3. Алгоритм оперативного контроля процедуры измерений с использованием метода добавок.
Образцами для контроля процедуры измерений являются образцы крови с внесенными в них добавками аттестованных растворов ПАУ, приготовленных в соответствии с п. 9.5.2.
Оперативный контроль процедуры измерений проводят путем сравнения результата отдельно взятой контрольной процедуры Кк с нормативом контроля К.
Результат контрольной процедуры Кк рассчитывают по формуле (13):
\text{К}_{\text{к}} = |\overline{\text{С}\prime} - \overline{\text{С}} - \text{С}_{\text{д}}| , (13)
где: \overline{\text{С}\prime} — результат измерений массовой концентрации анализируемого ПАУ в пробе с известной добавкой — среднее арифметическое двух результатов измерений, полученных в условиях повторяемости, расхождение между которыми удовлетворяет условию (6), мкг/см3;
\overline{\text{С}} — результат измерений массовой концентрации анализируемого ПАУ в исходной пробе — среднее арифметическое двух результатов измерений, полученных в условиях повторяемости, расхождение между которыми удовлетворяет условию (6), мкг/см3;
Cд — величина введенной добавки, мкг/см3.
Норматив контроля К рассчитывают по формуле (14):
\text{К } = \sqrt{\Delta_{\text{л},\text{С}\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},\text{С}}^{2}} , (14)
где: \Delta_{\text{л},\text{С}\prime} , \Delta_{\text{л},\text{С}} — значения характеристики погрешности результатов измерений, установленные в лаборатории при реализации методики, соответствующие массовой концентрации анализируемого ПАУ в пробе с известной добавкой и в исходной пробе соответственно, мкг/см3.
Допустимо характеристику погрешности результатов измерений при внедрении методики в лаборатории устанавливать на основе выражений (15) и (16):
\Delta_{\text{л},\text{С}\prime} = 0,84 \cdot 0,01 \cdot \delta \cdot \overline{\text{С}\prime} ; (15)
\Delta_{\text{л},\text{С}} = 0,84 \cdot 0,01 \cdot \delta \cdot \overline{\text{С}} (16)
с последующим уточнением по мере накопления информации в процессе контроля стабильности результатов измерений.
Процедуру измерений признают удовлетворительной, при выполнении условия (17):
При невыполнении условия (17) контрольную процедуру повторяют. При повторном невыполнении условия (17) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
14.4. Оперативный контроль процедуры измерений, а также реализуемые процедуры контроля стабильности результатов выполняемых измерений, приведены в документах лаборатории, устанавливающих порядок и содержание работ по организации методов контроля стабильности результатов измерений в пределах лаборатории.
Библиографические ссылки
1. Федеральный закон от 30.03.1999 № 52-ФЗ «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения».
2. СанПиН 1.2.3685-21 «Гигиенические нормативы и требования к обеспечению безопасности и (или) безвредности для человека факторов среды обитания».
3. ПНД Ф 12.13.1-03 «Методические рекомендации. Техника безопасности при работе в аналитических лабораториях (общие положения)».
4. ГОСТ 12.1.004-91 «Пожарная безопасность. Общие требования».
5. ГОСТ 12.1.005-88 «Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны».
6. ГОСТ 12.1.007-76 «Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности».
7. ГОСТ 12.1.019-2017 «Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты».
8. ГОСТ 12.4.009-83 «Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание».
9. ГОСТ 1770-74 «Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия».
10. ГОСТ 4204-77 «Реактивы. Кислота серная. Технические условия».
11. ГОСТ 4220-75 «Реактивы. Калий двухромовокислый. Технические условия».
12. ГОСТ 4233-77 «Реактивы. Натрий хлористый. Технические условия».
13. ГОСТ 4328-77 «Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия».
14. ГОСТ 25336-82 «Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры».
15. ГОСТ 28311-2021 «Дозаторы медицинские лабораторные. Общие технические требования и методы испытаний».
16. ГОСТ 29227-91 «Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования».
17. ГОСТ Р 53228-2008 «Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания».
18. ГОСТ Р 58144-2018 Вода дистиллированная. Технические условия.
19. ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения».
20. ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений».
21. ГОСТ Р ИСО 5725-3-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерений».
22. ГОСТ Р ИСО 5725-4-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений».
23. ГОСТ Р ИСО 5725-5-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 5. Альтернативные методы определения прецизионности стандартного метода измерений».
24. ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике.
25. ГОСТ ISO 7886-1-2011 «Шприцы инъекционные однократного применения стерильные. Часть 1. Шприцы для ручного использования».
| ББК 51.244 |
|---|