---
title: "\"МУК 4.1.4051-24. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств аклонифена в семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания по методам контроля\""
number: "МУК 4.1.4051-24"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-4051-24"
---

## "МУК 4.1.4051-24. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств аклонифена в семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания по методам контроля"

# "МУК 4.1.4051-24. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств аклонифена в семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания по методам контроля"

(утв. Роспотребнадзором 28.09.2024)

> [!IMPORTANT]
> Документ [введен](#p100002) в действие с 28.12.2024.


<a id="p100001"></a>Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
**А.Ю.ПОПОВА**
28 сентября 2024 года

<a id="p100002"></a>Дата введения
28 декабря 2024 года


#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ АКЛОНИФЕНА В СЕМЕНАХ**
**И МАСЛЕ ПОДСОЛНЕЧНИКА МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ**
**ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО МЕТОДАМ КОНТРОЛЯ**
**МУК 4.1.4051-24**

1. <a id="p100006"></a>Разработаны ФГБНУ "Всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений" (Т.Д. Черменская, А.С. Комарова, В.И. Долженко) и ООО "Инновационный центр защиты растений" (С.Б. Левченко).
2. <a id="p100007"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 28 сентября 2024 г.
3. <a id="p100008"></a>Введены впервые.


### <a id="p100009"></a>I. Общие положения и область применения


<a id="p100010"></a>1.1. Настоящие методические указания по методам контроля (далее - МУК) описывают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (далее - ВЭЖХ) для определения массовой концентрации аклонифена в семенах и масле подсолнечника в диапазоне концентраций 0,01 - 0,1 мг/кг без учета разбавления, 0,01 - 1,0 мг/кг с учетом разбавления в 10 раз.

#### <a id="p100011"></a>1.2 МУК носят рекомендательный характер.



### <a id="p100012"></a>II. Физико-химические свойства


<a id="p100013"></a>2.1. Аклонифен. 2-хлор-6-нитро-3-феноксианилин [<1>](#p100015). Брутто формула: C<sub>12</sub>H<sub>9</sub>ClN<sub>2</sub>O<sub>3</sub>. Молекулярная масса: 264,7.

<a id="p100014"></a>

---

<a id="p100015"></a><1> В соответствии с классификацией Международного союза теоретической и прикладной химии (ИЮПАК) (англ. International Union of Pure and Applied Chemistry, IUPAC).


#### <a id="p100016"></a>2.2 Физические и химические свойства.

<a id="p100017"></a>Желтые кристаллы. Температура плавления плюс 81 - 82 °C. Давление паров: 1,6 x 10-2 МПа (при плюс 20 °C). Коэффициент распределения в системе н-октанол-вода: Kow logP = 4,37. Растворимость в воде (при температуре плюс 20 °C): 1,4 мг/дм3. Хорошо растворим в большинстве органических растворителей. Растворимость (г/дм3, при температуре плюс 20 °C): в гексане - 4,8, толуоле - 442, метаноле - 49,2, ацетоне - 730. Стабилен к гидролизу, медленно разлагается на свету.

#### <a id="p100018"></a>2.3 Краткая токсикологическая характеристика.

<a id="p100019"></a>Острая пероральная токсичность для крыс и мышей ЛД<sub>50</sub> > 5000 мг/кг, острая дермальная токсичность для крыс ЛД<sub>50</sub> > 5000 мг/кг, ингаляционная токсичность ЛК50 (4 ч) > 5,1 мг/м3. Не ирритант для глаз (кролики), не мутагенный, не эмбриотоксичный, не тератогенный (крысы). Не токсичен для пчел.

#### <a id="p100020"></a>2.4 Область применения.

<a id="p100021"></a>Системный, селективный гербицид для борьбы со злаковыми и однолетними широколистными сорными растениями при возделывании озимой пшеницы, кукурузы, картофеля, подсолнечника, гороха, моркови в предвсходовый период.


### <a id="p100022"></a>III. Погрешность измерений


<a id="p100023"></a>3.1. При соблюдении условий проведения анализа [<2>](#p100025) и методики, изложенной в настоящих МУК, погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в [табл. 3.1](#p100027) для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100024"></a>

---

<a id="p100025"></a><2> [ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-1-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст (далее - ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002).

<a id="p100026"></a>Таблица 3.1

<a id="p100027"></a>Метрологические характеристики


<table>
<colgroup><col width="14%"><col width="15%"><col width="12%"><col width="12%"><col width="16%"><col width="14%"><col width="16%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100028"></a>Анализируемый объект</td><td><a id="p100029"></a>Диапазон определяемых концентраций,<br>мг/кг</td><td><a id="p100030"></a>Показатель точности (границы относительной погрешности,<br>P = 0,95),<br>$\pm \delta$ , %</td><td><a id="p100031"></a>Показатель повторяемости (среднеквадратичное отклонение повторяемости), $\sigma_{r}$ , %</td><td><a id="p100032"></a>Показатель воспроизводимости (среднеквадратичное отклонение воспроизводимости),<br>$\sigma_{R}$ , %</td><td><a id="p100033"></a>Предел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных определений), r, %</td><td><a id="p100034"></a>Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в разных лабораториях), R, %, (P = 0,95)</td></tr>
<tr><td><a id="p100035"></a>Семена подсолнечника</td><td><a id="p100036"></a>От 0,01 до 1,0 вкл.</td><td><a id="p100037"></a>25</td><td><a id="p100038"></a>10</td><td><a id="p100039"></a>12,5</td><td><a id="p100040"></a>28</td><td><a id="p100041"></a>35</td></tr>
<tr><td><a id="p100042"></a>Масло подсолнечника</td><td><a id="p100043"></a>От 0,01 до 1,0 вкл.</td><td><a id="p100044"></a>25</td><td><a id="p100045"></a>10</td><td><a id="p100046"></a>12,5</td><td><a id="p100047"></a>28</td><td><a id="p100048"></a>35</td></tr>
<tr><td colspan="7"><a id="p100049"></a>Примечание: диапазон определяемых концентраций, указанный в <a href="#p100027">табл. 3.1</a>, приведен с учетом разбавления образца в 10 раз.</td></tr>
</table>


<a id="p100050"></a>Таблица 3.2

<a id="p100051"></a>Объект анализа, диапазон определяемых концентраций, полнота
извлечения аклонифена, стандартное отклонение, доверительный
интервал среднего результата для всего диапазона измерений
для n = 20, P = 0,95


| <a id="p100052"></a>Анализируемый объект | <a id="p100053"></a>Предел определения, мг/кг | <a id="p100054"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг | <a id="p100055"></a>Среднее значение полноты извлечения, % | <a id="p100056"></a>Стандартное отклонение, S, % | <a id="p100057"></a>Доверительный интервал среднего результата, +/-, % |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100058"></a>Семена | <a id="p100059"></a>0,01 | <a id="p100060"></a>От 0,01 до 1,0 вкл. | <a id="p100061"></a>91,5 | <a id="p100062"></a>6,26 | <a id="p100063"></a>2,74 |
| <a id="p100064"></a>Масло | <a id="p100065"></a>0,01 | <a id="p100066"></a>От 0,01 до 1,0 вкл. | <a id="p100067"></a>89,6 | <a id="p100068"></a>5,18 | <a id="p100069"></a>2,27 |



### <a id="p100070"></a>IV. Метод измерения


<a id="p100071"></a>4.1. Методика основана на определении аклонифена методом ВЭЖХ с использованием детектора на диодной матрице после извлечения из образцов ацетонитрилом и очистке ацетонитрильного экстракта на патроне для твердофазной экстракции.
<a id="p100072"></a>4.2. Идентификация аклонифена проводится по времени удерживания, количественное определение - методом абсолютной калибровки. Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования.
<a id="p100073"></a>4.3. Нижний предел измерения содержания аклонифена в анализируемом объеме пробы - 0,2 нг.


### <a id="p100074"></a>V. Средства измерения, реактивы, вспомогательное оборудование, устройства и материалы


<a id="p100075"></a>5.1. При выполнении измерений и подготовке проб применяют средства измерений, реактивы, вспомогательное оборудование, устройства и материалы, приведенные в [табл. 5.1](#p100077) - [5.3](#p100113).

<a id="p100076"></a>Таблица 5.1

<a id="p100077"></a>Средства измерений


<table>
<colgroup><col width="35%"><col width="65%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100078"></a>Наименование средств измерения</td><td><a id="p100079"></a>Обозначение и наименование документов, технические характеристики</td></tr>
<tr><td><a id="p100080"></a>Жидкостный хроматограф с детектором на диодной матрице</td><td><a id="p100081"></a>Максимальное рабочее давление 100 МПа, диапазон длин волн детектора (190 - 800) нм, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки; относительное среднее квадратическое отклонение (СКО) выходного сигнала по площади пика 1%, по времени удерживания 0,3%</td></tr>
<tr><td><a id="p100082"></a>Весы лабораторные общего назначения</td><td><a id="p100083"></a>Наибольший предел взвешивания, предел допустимой погрешности 5 мг, ГОСТ Р 53228-2008</td></tr>
<tr><td><a id="p100084"></a>Весы лабораторные аналитические</td><td><a id="p100085"></a>Наибольший предел взвешивания 81/210 г, предел допустимой погрешности 0,1/0,3 мг, ГОСТ Р 53228-2008</td></tr>
<tr><td><a id="p100086"></a>Дозаторы пипеточные переменного объема: 10 - 100 мм3; 100 - 1000 мм3, 1000 - 5000 мм3, 1000 - 10000 мм3</td><td><a id="p100087"></a><a href="https://bukva.ai/docs/standart-gost-28311-2021">ГОСТ 28311-2021</a></td></tr>
<tr><td><a id="p100088"></a>Колбы мерные</td><td><a id="p100089"></a>Объем 10, 100 и 1000 см3, <a href="https://bukva.ai/docs/gost-1770-74">ГОСТ 1770-74</a></td></tr>
<tr><td><a id="p100090"></a>Цилиндры мерные</td><td><a id="p100091"></a>Объем 50 и 100 см3, <a href="https://bukva.ai/docs/gost-1770-74">ГОСТ 1770-74</a></td></tr>
<tr><td colspan="2"><a id="p100092"></a>Примечание: допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.</td></tr>
</table>


<a id="p100093"></a>Таблица 5.2

<a id="p100094"></a>Реактивы


<table>
<colgroup><col width="35%"><col width="65%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100095"></a>Наименование реактивов</td><td><a id="p100096"></a>Обозначение и наименование документов, технические характеристики</td></tr>
<tr><td><a id="p100097"></a>1</td><td><a id="p100098"></a>2</td></tr>
<tr><td><a id="p100099"></a>Аклонифен</td><td><a id="p100100"></a>Аналитический стандартный образец с содержанием основного вещества не менее 95,1%</td></tr>
<tr><td><a id="p100101"></a>Ацетонитрил для ВЭЖХ</td><td><a id="p100102"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100103"></a>Вода дистиллированная</td><td><a id="p100104"></a><a href="https://bukva.ai/docs/usloviya-gost-r-58144-2018">ГОСТ Р 58144-2018</a></td></tr>
<tr><td><a id="p100105"></a>Гексан</td><td><a id="p100106"></a>Чистый для анализа</td></tr>
<tr><td><a id="p100107"></a>Кислота ортофосфорная</td><td><a id="p100108"></a>98%, химически чистая</td></tr>
<tr><td><a id="p100109"></a>Метилен хлористый</td><td><a id="p100110"></a>Химически чистый</td></tr>
<tr><td colspan="2"><a id="p100111"></a>Примечание: допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки.</td></tr>
</table>


<a id="p100112"></a>Таблица 5.3

<a id="p100113"></a>Вспомогательное оборудование, устройства и материалы


<table>
<colgroup><col width="44%"><col width="56%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100114"></a>Наименование вспомогательного оборудования, устройств, материалов</td><td><a id="p100115"></a>Обозначение и наименование документов, технические характеристики</td></tr>
<tr><td><a id="p100116"></a>1</td><td><a id="p100117"></a>2</td></tr>
<tr><td><a id="p100118"></a>Аналитическая колонка</td><td><a id="p100119"></a>Заполненная сорбентом с привитыми группами C18 (100 x 2,1) мм, 1,7 мкм</td></tr>
<tr><td><a id="p100120"></a>Ванна ультразвуковая</td><td><a id="p100121"></a>С рабочей частотой не менее 35 кГц</td></tr>
<tr><td><a id="p100122"></a>Виалы хроматографические</td><td><a id="p100123"></a>Объем <sub>2</sub> см<sub>3</sub></td></tr>
<tr><td><a id="p100124"></a>Воздушный испаритель</td><td><a id="p100125"></a>Состоящий из термостата (300 Вт, макс. температура плюс 130 °C), газодозатора (макс. давление 0,5 бар) и компрессора (макс. давление 2,4 бар)</td></tr>
<tr><td><a id="p100126"></a>Колбы круглодонные на шлифе</td><td><a id="p100127"></a>Объем 25 см3, тип Гр-1-25-14/23 ТС,<br>ГОСТ 25336-82</td></tr>
<tr><td><a id="p100128"></a>Колбы плоскодонные на шлифе</td><td><a id="p100129"></a>Объем 100 см3, тип Кн-1-100-14/23 ТС, ГОСТ 25336-82</td></tr>
<tr><td><a id="p100130"></a>Патроны для твердофазной экстракции</td><td><a id="p100131"></a>Заполненные гидрофильным слабокислотным сорбентом на основе силикагеля с постоянной активностью, по 0,6 г</td></tr>
<tr><td><a id="p100132"></a>Пробирки полипропиленовые центрифужные с крышками</td><td><a id="p100133"></a>Объем 50 см3</td></tr>
<tr><td><a id="p100134"></a>Пробирки стеклянные</td><td><a id="p100135"></a>Объем 15 см3, тип П2-14-100 ХС,<br>ГОСТ 25336-82</td></tr>
<tr><td><a id="p100136"></a>Ротационный вакуумный испаритель с мембранным насосом</td><td><a id="p100137"></a>Обеспечивающим вакуум до 10 мбар</td></tr>
<tr><td><a id="p100138"></a>Устройство перемешивающее</td><td><a id="p100139"></a>С орбитальным движением платформы, (50 - 200) колебаний в мин, амплитуда 20 мм</td></tr>
<tr><td><a id="p100140"></a>Центрифуга</td><td><a id="p100141"></a>С частотой вращения не менее 4000 об/мин</td></tr>
<tr><td><a id="p100142"></a>Холодильник</td><td><a id="p100143"></a>Температура от 0 до плюс 4 °C</td></tr>
<tr><td colspan="2"><a id="p100144"></a>Примечание: допускается использование вспомогательного оборудования, устройств и материалов с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.</td></tr>
</table>



### <a id="p100145"></a>VI. Требования безопасности


<a id="p100146"></a>6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками в соответствии с ГОСТ 12.1.019-2017, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.
<a id="p100147"></a>6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения в соответствии с ГОСТ 12.4.009-83. Обучение работников безопасности труда организуется в соответствии с законодательством Российской Федерации [<3>](#p100149).

<a id="p100148"></a>

---

<a id="p100149"></a><3> Постановление Правительства Российской Федерации от 24.12.2021 N 2464 "О порядке обучения по охране труда и проверки знания требований охраны труда".

<a id="p100150"></a>6.3. Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на жидкостном хроматографе, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментальное соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.


### <a id="p100151"></a>VII. Условия измерений



#### <a id="p100152"></a>7.1 При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- <a id="p100153"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха плюс (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100154"></a>выполнение измерений на высокоэффективном жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


### <a id="p100155"></a>VIII. Подготовка к выполнению измерений



#### <a id="p100156"></a>8.2 Подготовка и очистка реактивов и растворителей.

<a id="p100157"></a>Реактивы и растворители, используемые для анализа, специальной подготовки не требуют. Рекомендуется проверить чистоту применяемых растворителей. При обнаружении примесей, которые могут мешать определению, растворители очищают общепринятыми методами.

#### <a id="p100158"></a>8.3 Кондиционирование колонки.

<a id="p100159"></a>Перед началом анализа аналитическую колонку кондиционируют в потоке подвижной фазы (0,1 - 0,2) см3/мин до стабилизации нулевой линии.

#### <a id="p100160"></a>8.4 Приготовление растворов.

<a id="p100161"></a>8.4.1. 0,005 М раствор ортофосфорной кислоты: (0,50 +/- 0,01) г 98% ортофосфорной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1000 см3, растворяют в дистиллированной воде и доводят объем до метки.
<a id="p100162"></a>Раствор хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) при комнатной температуре не более 14 дней.

##### <a id="p100163"></a>8.4.2 Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ.

<a id="p100164"></a>В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 550 см3 ацетонитрила и доводят до метки 0,005 М раствором ортофосфорной кислоты.
<a id="p100165"></a>Раствор хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) при комнатной температуре не более 14 дней.
<a id="p100166"></a>8.4.3. Приготовление элюента N 1 (смесь гексан-метилен хлористый 9:1): в плоскодонную колбу вместимостью 100 см3 мерным цилиндром вносят 90 см3 гексана и 10 см3 метилена хлористого.
<a id="p100167"></a>Смесь используется в день приготовления.
<a id="p100168"></a>8.4.4. Приготовление элюента N 2 (смесь гексан-метилен хлористый 1:1): в плоскодонную колбу вместимостью 100 см3 вносят 50 см3 гексана и 50 см3 метилена хлористого.
<a id="p100169"></a>Смесь используется в день приготовления.

#### <a id="p100170"></a>8.5 Приготовление основного, рабочего и градуировочных растворов.

<a id="p100171"></a>8.5.1. Основной раствор аклонифена с концентрацией 0,5 мг/см3: точную навеску аклонифена (50,0 +/- 0,5) мг помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3, растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом.
<a id="p100172"></a>8.5.2. Рабочий раствор с концентрацией 10,0 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 100 см3 дозатором вносят 2,0 см3 основного раствора и доводят до метки ацетонитрилом.

##### <a id="p100173"></a>8.5.3 Приготовление градуировочных растворов.

<a id="p100174"></a>Градуировочные растворы с концентрациями аклонифена 0,02, 0,05, 0,1 и 0,2 мкг/см3 готовят методом последовательного разбавления по объему, используя подвижную фазу.
<a id="p100175"></a>8.5.3.1. Раствор N 1 с концентрацией 0,2 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 дозатором вносят 0,2 см3 рабочего раствора и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100176"></a>8.5.3.2. Раствор N 2 с концентрацией 0,1 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 дозатором вносят 0,1 см3 рабочего раствора и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100177"></a>8.5.3.3. Раствор N 3 с концентрацией 0,05 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 дозатором вносят 2,5 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100178"></a>8.5.3.4. Раствор N 4 с концентрацией 0,02 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 дозатором вносят 1,0 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100179"></a>Основной и рабочий растворы хранят в холодильнике при температуре от 0 до плюс 4 °C в течение 1 месяца, градуировочные растворы - в течение недели.
<a id="p100180"></a>При изучении полноты определения аклонифена используют ацетонитрильные растворы вещества, приготовленные из рабочего раствора методом последовательного разбавления по объему ацетонитрилом.

#### <a id="p100181"></a>8.6 Установление градуировочной характеристики.

<a id="p100182"></a>Для установления градуировочной характеристики (площадь пика - концентрация аклонифена в растворе) в хроматограф вводят по 10 мм3 градуировочных растворов (не менее 3-х параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4-х точек по диапазону измеряемых концентраций) и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 10.3](#p100200). Определяют площади пиков вещества, строят график зависимости среднего значения площади пика от концентрации аклонифена в градуировочном растворе, на основании которого устанавливают градуировочную зависимость. Градуировку признают удовлетворительной, если значение коэффициента линейной корреляции оказывается не ниже 0,99.
<a id="p100183"></a>Градуировочную характеристику проверяют перед началом измерений, при замене реактивов, хроматографической колонки или элементов хроматографической системы.

#### <a id="p100184"></a>8.7 Подготовка концентрирующего патрона для твердофазной экстракции.

<a id="p100185"></a>Концентрирующий патрон промывают 2,5 см3 элюента N 2 и затем 3 см3 элюента N 1 со скоростью 1 - 2 капли в секунду.
<a id="p100186"></a>8.8. Проверка хроматографического поведения аклонифена на концентрирующем патроне.
<a id="p100187"></a>В стеклянную пробирку дозатором помещают 2 см3 градуировочного раствора N 1 с концентрацией аклонифена 0,2 мкг/см3 (п. 9.4.3.1). Растворитель упаривают досуха на воздушном испарителе при температуре не выше 40 °C, остаток растворяют в 1 см3 элюента N 1 (п. 9.3.3), помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на патрон, подготовленный по п. 9.6. Пробирку ополаскивают 1 см3 элюента N 1 (п. 9.3.3) и также наносят на патрон, элюат отбрасывают. Затем через патрон пропускают сначала 6 см3 элюента N 1, затем 10 см3 элюента N 2, отбирая последовательно по 2 см3 элюата. Полученные фракции упаривают досуха при температуре не выше 40 °C, остатки растворяют в 1 см3 подвижной фазы, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин, и растворы анализируют на содержание аклонифена по [п. 10.3](#p100200).
<a id="p100188"></a>По результатам обнаружения аклонифена в каждой из фракций определяют объем элюента N 2, необходимый для полного вымывания аклонифена с патрона.


### <a id="p100189"></a>IX. Отбор и условия хранения проб


<a id="p100190"></a>9.1. Отбор проб производится в соответствии с методическими документами [<4>](#p100192), а также документами по стандартизации [<5>](#p100193).

<a id="p100191"></a>

---

<a id="p100192"></a><4> Унифицированные [правила](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов, утвержденные заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 N 2051-79.
<a id="p100193"></a><5> [ГОСТ 10852-86](https://bukva.ai/docs/3979) "Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб", введенный в действие постановлением Госстандарта СССР от 18.12.1986 N 3979; [ГОСТ 32190-2013](https://bukva.ai/docs/gost-32190-2013) "Масла растительные. Правила приемки и методы отбора проб", введенный в действие приказом Росстандарта от 28.10.2013 N 1254-ст.

<a id="p100194"></a>9.2. Пробы семян хранят в бумажной или тканевой упаковке при комнатной температуре. Сухие образцы хранят в течение года. Пробы масла хранят в холодильнике при температуре от 0 до плюс 4 °C в герметично закрытой стеклянной таре не более 2-х месяцев.


### <a id="p100195"></a>X. Выполнение определения



#### <a id="p100196"></a>10.1 Экстракция аклонифена из семян и масла подсолнечника.

<a id="p100197"></a>Навеску масла или измельченных семян массой 10 г помещают в центрифужную полипропиленовую пробирку вместимостью 50 см3 и добавляют 10 см3 ацетонитрила. Пробирку плотно закрывают, помещают в перемешивающее устройство на 10 мин, затем центрифугируют в течение 10 мин при 4000 об/мин. Экстракт декантируют, экстракцию повторяют с 10 см3 ацетонитрила. Из объединенного экстракта отбирают аликвоту, соответствующую 2 г пробы, переносят в круглодонную колбу и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °C. Сухой остаток подвергают очистке на патроне для твердофазной экстракции по [п. 10.2](#p100198).

#### <a id="p100198"></a>10.2 Очистка экстракта на патронах для твердофазной экстракции.

<a id="p100199"></a>Сухой остаток, полученный по [п. 10.1](#p100196), растворяют в 1 см3 элюента N 1 и наносят на предварительно кондиционированный патрон [(п. 8.7)](#p100184). Колбу ополаскивают еще 1 см3 элюента N 1, который также наносят на патрон. Патрон промывают 5 см3 элюента N 1, элюат отбрасывают. Аклонифен элюируют 6 см3 элюента N 2, элюат собирают и упаривают досуха в потоке воздуха при температуре не выше 40 °C. Сухой остаток растворяют в 1 см3 подвижной фазы и анализируют по [п. 10.3](#p100200).

#### <a id="p100200"></a>10.3 Условия хроматографирования.

<a id="p100201"></a>Ультраэффективный жидкостный хроматограф с диодно-матричным детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки. Аналитическая колонка, заполненная сорбентом с привитыми группами C18 (100 x 2,1) мм, 1,7 мкм. Температура колонки плюс (30 +/- 1) °C. Подвижная фаза: смесь ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 55:45. Скорость потока элюента 0,2 см3/мин. Рабочая длина волны детектора 235 нм. Объем вводимой пробы 10 мм3. Приблизительное время удерживания 5,4 мин.


### <a id="p100202"></a>XI. Обработка результатов анализа


<a id="p100203"></a>11.1. Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки. Содержание аклонифена в пробе X (мг/кг) рассчитывают по [формуле (1)](#p100204):

<a id="p100204"></a> $X = \frac{C \times V \times 100 \times K}{M \times f} ,$ (1)

<a id="p100205"></a>где: C - концентрация аклонифена, полученная по градуировочному графику в соответствии с площадью хроматографического пика, мкг/см3;
<a id="p100206"></a>f - полнота извлечения аклонифена, приведенная в [табл. 3.2](#p100051), %;
<a id="p100207"></a>V - объем пробы, подготовленной для хроматографического анализа, см3 (1 см3);
<a id="p100208"></a>M - окончательная масса анализируемого образца, г (аликвота, равная 2 г);
<a id="p100209"></a>K - коэффициент разбавления.
<a id="p100210"></a>11.2. Содержание аклонифена в образце вычисляют как среднее из двух параллельных определений.


### <a id="p100211"></a>XII. Проверка приемлемости результатов параллельных определений


<a id="p100212"></a>11.2. За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости [(2)](#p100213):

<a id="p100213"></a> $\frac{2 \cdot |\text{Х}_{1} - \text{Х}_{2}| \cdot 100}{(\text{Х}_{1} + \text{Х}_{2})} \leq r,$ (2)

<a id="p100214"></a>где: X<sub>1</sub>, X<sub>2</sub> - результаты параллельных определений, мг/кг;
<a id="p100215"></a>r - значение предела повторяемости (приведено в [табл. 3.1](#p100027)), при этом $r = 2,8 \times \sigma_{r}$ .
<a id="p100216"></a>При невыполнении [условия (2)](#p100213) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


### <a id="p100217"></a>XIII. Оформление результатов



#### <a id="p100218"></a>12.1 Результат анализа представляют в виде [формулы (3)](#p100219):


<a id="p100219"></a> $(X_{cp} \pm \Delta)\text{мг}/\text{кг}$ при вероятности P = 0,95, (3)

<a id="p100220"></a>где: Xср - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
<a id="p100221"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг, рассчитанная по [формуле (4)](#p100222);

<a id="p100222"></a> $\Delta = \delta \times X_{cp}/100,$ (4)

<a id="p100223"></a>где: $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, приведена в [табл. 3.1](#p100027)), %.
<a id="p100224"></a>В случае, если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде: "Содержание аклонифена в пробах - 0,01 мг/кг" [<6>](#p100226).

<a id="p100225"></a>

---

<a id="p100226"></a><6> Примечание: 0,01 мг/кг - предел количественного определения аклонифена в пробах в семенах и масле подсолнечника.


### <a id="p100227"></a>XIV. Контроль качества результатов измерений


<a id="p100228"></a>14.1. Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с документами по стандартизации <7>.

<a id="p100229"></a>

---

<a id="p100230"></a><6> [ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-1-2002); [ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-2-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст; [ГОСТ Р ИСО 5725-3-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-3-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерений", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст; [ГОСТ Р ИСО 5725-4-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст; [ГОСТ Р ИСО 5725-5-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-5-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 5. Альтернативные методы определения прецизионности стандартного метода измерений", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст; [ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст.

<a id="p100231"></a>Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100232"></a>Градуировочную зависимость признают стабильной при выполнении следующего [условия (4)](#p100233):

<a id="p100233"></a> $\frac{|C - C_{\text{К}}|}{C} \cdot 100 \leq \lambda_{\text{контр}.},$ (4)

<a id="p100234"></a>где: C - известная концентрация аклонифена в градуировочном растворе;
<a id="p100235"></a>CК - результат контрольного измерения массовой концентрации аклонифена в градуировочном растворе;
<a id="p100236"></a> $\lambda_{\text{контр}.}$ - норматив контроля градуировочного коэффициента, % ( $\lambda_{\text{контр}.} = 10\%$ при P = 0,95).
<a id="p100237"></a>Если расхождение превышает 10%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов аклонифена. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики устанавливают ее заново.
<a id="p100238"></a>14.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.
<a id="p100239"></a>Величина добавки Cд должна удовлетворять [условию (5)](#p100240):

<a id="p100240"></a> $C_{\text{д}} = \Delta_{\text{л},\text{Х}} + \Delta_{\text{л},\text{Х }\prime},$ (5)

<a id="p100241"></a>где: $\pm \Delta_{\text{л},\text{Х}}( \pm \Delta_{\text{л},\text{Х }\prime})$ - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой, соответственно), мг/кг, рассчитывается по [формуле (6)](#p100242):

<a id="p100242"></a> $\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta,$ (6)

<a id="p100243"></a>где: $\Delta$ - граница абсолютной погрешности рассчитывается по [формуле (7)](#p100244), мг/кг:

<a id="p100244"></a> $\Delta = \delta \times X_{\text{ср}}/100,$ (7)

<a id="p100245"></a>где: $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, приведена в [табл. 3.1](#p100027)), %.
<a id="p100246"></a>Результат контроля процедуры Кк рассчитывают по [формуле (8)](#p100247):

<a id="p100247"></a> $\text{К}_{\text{к}} = \text{Х}_{\text{с}}\prime_{\text{р}} - \text{Х}_{\text{ср}} - \text{С}_{\text{д}},$ (8)

<a id="p100248"></a>где: $\text{Х}_{\text{с}}\prime_{\text{р}}$ - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по [п. 12.1](#p100218)) содержания компонента в образце с добавкой, мг/кг;
<a id="p100249"></a>Xср - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по [п. 12.1](#p100218)) содержания компонента в испытуемом образце, мг/кг;
<a id="p100250"></a>Cд - величина добавки, мг/кг.
<a id="p100251"></a>Норматив контроля К рассчитывают по [формуле (9)](#p100252):

<a id="p100252"></a> $\text{К } = \sqrt{\Delta_{\text{л},\text{Х}_{\text{с}}\prime_{\text{р}}}^{2} + \Delta_{\text{л},\text{Х}_{\text{ср}}}^{2}} .$ (9)

<a id="p100253"></a>Проводят сопоставление результата контроля процедуры (Кк) с нормативом контроля (К). Если результат контроля процедуры удовлетворяет [условию (10)](#p100254):

<a id="p100254"></a>|Кк| <= К, (10)

<a id="p100255"></a>процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100256"></a>При невыполнении этого условия процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры к их устранению.
<a id="p100257"></a>14.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
<a id="p100258"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, рассчитанное по левой части [условия (11)](#p100259), не должно превышать предела воспроизводимости (R):

<a id="p100259"></a> $\frac{2 \cdot |\text{Х}_{1} - \text{Х}_{2}| \cdot 100}{(\text{Х}_{1} + \text{Х}_{2})} \leq R,$ (11)

<a id="p100260"></a>где: X1, X2 - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
<a id="p100261"></a>R - предел воспроизводимости (приведен в [табл. 3.1](#p100027)), %.






## <a id="p100262"></a>БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЕ ССЫЛКИ


1. <a id="p100263"></a>Федеральный закон от 30.03.1999 N 52-ФЗ "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения".
2. <a id="p100264"></a>Постановление Правительства Российской Федерации от 24.12.2021 N 2464 "О порядке обучения по охране труда и проверке знания требований охраны труда".
3. <a id="p100265"></a>[ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-1-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения".
4. <a id="p100266"></a>[ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-2-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений".
5. <a id="p100267"></a>[ГОСТ Р ИСО 5725-3-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-3-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерений".
6. <a id="p100268"></a>[ГОСТ Р ИСО 5725-4-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений".
7. <a id="p100269"></a>[ГОСТ Р ИСО 5725-5-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-5-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 5. Альтернативные методы определения прецизионности стандартного метода измерений".
8. <a id="p100270"></a>[ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике".
9. <a id="p100271"></a>ГОСТ Р 53228-2008 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания".
10. <a id="p100272"></a>[ГОСТ 28311-2021](https://bukva.ai/docs/standart-gost-28311-2021) "Дозаторы медицинские лабораторные. Общие технические требования и методы испытаний".
11. <a id="p100273"></a>[ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) "Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия".
12. <a id="p100274"></a>[ГОСТ Р 58144-2018](https://bukva.ai/docs/usloviya-gost-r-58144-2018) "Вода дистиллированная. Технические условия".
13. <a id="p100275"></a>ГОСТ 25336-82 "Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры".
14. <a id="p100276"></a>ГОСТ 12.1.007-76 "Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности".
15. <a id="p100277"></a>ГОСТ 12.1.019-2017 "Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты".
16. <a id="p100278"></a>ГОСТ 12.1.004-91 "Пожарная безопасность. Общие требования".
17. <a id="p100279"></a>ГОСТ 12.4.009-83 "Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание".
18. <a id="p100280"></a>[ГОСТ 10852-86](https://bukva.ai/docs/3979) "Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб".
19. <a id="p100281"></a>[ГОСТ 32190-2013](https://bukva.ai/docs/gost-32190-2013) "Масла растительные. Правила приемки и методы отбора проб".
20. <a id="p100282"></a>Унифицированные [правила](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов.






| <a id="p100283"></a>ББК 51.231 |
| --- |




<a id="p100284"></a>

---