МУК 4.1.4033-24. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств зета-циперметрина в орехах методом газовой хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием. Методические указания по методам контроля
(утв. Роспотребнадзором 31.05.2024)
Примечание
Документ введен в действие с 31.08.2024.
Утверждаю Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации А. Ю. Попова 31 мая 2024 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ЗЕТА-ЦИПЕРМЕТРИНА В ОРЕХАХ МЕТОДОМ ГАЗОВОЙ ХРОМАТОГРАФИИ С МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЧЕСКИМ ДЕТЕКТИРОВАНИЕМ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО МЕТОДАМ КОНТРОЛЯ МУК 4.1.4033-24
Дата введения 31 августа 2024 года
1. Разработаны ФБУН «ФНЦГ им. Ф.Ф. Эрисмана» Роспотребнадзора (Кузьмин С.В., Горячева Л.В., Добрева Н.И., Ларькина М.В.).
2. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой «31» мая 2024 г.
I. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ
1.1. Настоящие методические указания по методам контроля (далее — МУК) описывают порядок применения газовой хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием с тройным квадрупольным масс-детектором (далее — ГХ-МС/МС) для определения в орехах массовой концентрации зета-циперметрина в диапазоне: 0,01 — 0,4 мг/кг — без учета разбавления и 0,01 — 4,00 мг/кг — с учетом разбавления в 10 раз.
1.2 МУК носят рекомендательный характер.
II. ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА
2.1. Зета-циперметрин — смесь энантиомеров (RS)- \alpha -циано-3-феноксибензил-(1RS,3RS;1RS,3SR)-3-(2,2-дихлоровинил)-2,2-диметилциклопропанкарбоксилат <1>. Брутто-формула C22H19Cl2NO3. Молекулярная масса 416,31 г/моль.
<1> В соответствии с классификацией Международного союза теоретической и прикладной химии (ИЮПАК) (англ. International Union of Pure and Applied Chemistry, IUPAC).
2.2 Физические и химические свойства.
Вязкая жидкость от желтого до светло-коричневого цвета со слабым запахом. Температура плавления плюс 20 — 25 °C. Давление пара при температуре плюс 20 °C 1,9 x 10-7 Па. Температура вспышки плюс 181 °C в закрытом тигле. Температура кипения плюс 360 °C. Плотность 1,23 — 1,25 г/см3 при температуре плюс 25 °C. Растворим в большинстве органических растворителей. Растворимость в воде 0,01 — 0,2 мг/л при температуре плюс 21 °C.
2.3 Краткая токсикологическая характеристика.
Острая пероральная токсичность (ЛД50) для крыс — 251 — 4123 мг/кг, для мышей — 138 мг/кг, для цыплят — более 2000 мг/кг; острая дермальная токсичность (ЛД50) для кроликов — более 5000 мг/кг. Острая ингаляционная токсичность (ЛК50) для крыс — более 2,03 мг/дм3 (при 4-часовой экспозиции).
2.4 Область применения.
Зета-циперметрин — инсектицидный активный ингредиент группы синтетических пиретроидов, рекомендован к применению на широком спектре сельскохозяйственных культур, а также для защиты лиственных и хвойных пород.
III. ПОГРЕШНОСТЬ ИЗМЕРЕНИЙ
3.1. При соблюдении условий проведения анализа и методики, изложенной в настоящих МУК, погрешность <2> (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 3.1 для соответствующих диапазонов концентраций.
<2> ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения», введенный в действие постановлением Госстандарта Российской Федерации от 23.04.2002 № 161-ст (далее — ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002).
Метрологические характеристики
IV. МЕТОД ИЗМЕРЕНИЙ
4.1. Измерения концентраций зета-циперметрина выполняют методом ГХ-МС/МС.
4.2. Экстракцию вещества из анализируемых образцов выполняют ацетонитрилом с использованием смеси солей для экстракции (смесь сульфата магния, хлорида натрия, цитрата натрия и натрия лимоннокислого двузамещенного, 1,5-водного) и проводят очистку методом дисперсионной твердофазной экстракции с применением смеси сорбентов на основе первичных-вторичных аминов, октадецилсилана. В качестве дополнительной очистки используют вымораживание.
4.3. Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы — 5 пг. Средняя полнота извлечения — 99,2%, стандартное отклонение для всего диапазона измерений — 5,2%.
4.4. Количественное определение зета-циперметрина проводят методом абсолютной калибровки, согласованной с матрицей (матричной).
V. СРЕДСТВА ИЗМЕРЕНИЙ, РЕАКТИВЫ, ВСПОМОГАТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ, УСТРОЙСТВА И МАТЕРИАЛЫ
5.1. При выполнении измерений и подготовке проб применяют средства измерений, реактивы, вспомогательное оборудование, устройства и материалы, приведенные в таблицах 5.1 - 5.3.
| Наименование средств измерения | Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| Газовый хроматограф, оснащенный тандемным тройным квадрупольным масс-детектором (ГХ-МС/МС), автоматическим пробоотборником, предназначенным для работы с капиллярной колонкой, испарителем с программируемой температурой | Внесено в реестр «Утвержденные типы средств измерений» Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений |
| Дозаторы лабораторные одноканальные механические 10 — 100, 100 — 1000 мм3 | Внесено в Реестр «Утвержденные типы средств измерений» Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений |
| Весы лабораторные аналитические | С пределом допустимой погрешности +/- 0,0005 г, ГОСТ Р 53228-2008 |
| Весы лабораторные | с пределом допустимой погрешности +/- 0,01 г, ГОСТ Р 53228-2008 |
| Меры массы | ГОСТ OIML R 111-1-2009 |
| Колбы мерные | Вместимостью 10, 100 см3 типа 2-10-2, 2-100-2, ГОСТ 1770-74 |
| Пипетки градуированные | Вместимостью 10 см3 типа 1-1(2)-2-10, ГОСТ 29227-91 |
| Прибор/приборы для измерения атмосферного давления, температуры и относительной влажности воздуха | Внесено в реестр «Утвержденные типы средств измерений» Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений |
| Примечание: допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками. | |
| Наименование реактивов | Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| Зета-циперметрин | Аналитический стандартный образец с содержанием основного компонента не менее 95% |
| Ацетон | Особо чистый, ГОСТ 2603-79 |
| Ацетонитрил | Для ВЭЖХ, чистота не менее 99,9% |
| Вода | Для лабораторного анализа (бидистиллированная или деионизованная), ГОСТ Р 52501-2005 |
| Гелий газообразный (сжатый) | В баллонах, марка 6.0. Высокой чистоты, с содержанием гелия не менее 99,9999% |
| Калий марганцовокислый (перманганат калия) | Химически чистый, ГОСТ 20490-75 |
| Калий углекислый (карбонат калия, поташ) | Химически чистый, прокаленный, ГОСТ 4221-76 |
| Магний сернокислый (сульфат магния) | Безводный химически чистый |
| Натрий хлористый (хлорид натрия) | Химически чистый, ГОСТ 4233-77 |
| Натрий лимоннокислый двузамещенный | 1,5-водный, химически чистый |
| Натрий лимоннокислый трехзамещенный | 2-водный, химически чистый |
| Сорбент для твердофазной экстракции на основе первичных-вторичных аминов | Площадь поверхности сорбента ~ 570 м2/г, средний размер пор 67 А, средний размер частиц 60 мкм |
| Сорбент для твердофазной экстракции на основе октадецилсилана C18 | Площадь поверхности ~ 547 м2/г, средний размер пор 64 А, средний размер частиц 58 мкм |
| Фосфор (V) оксид (фосфорный ангидрид, пентоксид фосфора), химически чистый | Химически чистый |
| Примечание: допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки органических растворителей. | |
Вспомогательное оборудование, устройства, материалы
| Наименование вспомогательного оборудования, устройств, материалов | Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| Шейкер вихревой (типа вортекс) | Скорость оборотов не менее 1500 об/мин |
| Груша резиновая | - |
| Виалы с фторопластовой прокладкой и навинчивающейся крышкой | Вместимостью 1,5 — 2 см3 и 20 см3 |
| Ректификационная колонна | С числом теоретических тарелок не менее 30 |
| Склянка из темного стекла | - |
| Установка для перегонки растворителей при атмосферном давлении | - |
| Холодильник водяной обратный | - |
| Мельница лабораторная | - |
| Гомогенизатор лабораторный | - |
| Морозильная камера или морозильный ларь | Поддерживающий температуру не выше минус 18 °C |
| Пробирки полипропиленовые центрифужные с крышками | Вместимостью 50 и 15 см3 |
| Фильтры мембранные | Для фильтрации проб с помощью шприца, размер пор 0,45 мкм, мембрана — политетрафторэтилен (ПТФЭ) |
| Холодильная/морозильная камера | Обеспечивающая температуры плюс 2 — 6 °C для холодильной камеры и температуру не выше минус 18 °C для морозильной камеры, ГОСТ 26678-85 |
| Хроматографическая капиллярная колонка | Кварцевая, длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм, содержащая сорбент 5% фенил- и 95% диметилполисилоксана, толщина пленки сорбента 0,25 мкм |
| Центрифуга лабораторная с охлаждением, роторная | Максимальная скорость вращения не менее 8000 об/мин, охлаждение до плюс 4 °C |
| Шприцы медицинские одноразовые | Вместимостью 2 см3, ГОСТ ISO 7886-1-2011 |
| Примечание: допускается использование вспомогательного оборудования, устройств и материалов с аналогичными или лучшими техническими характеристиками. | |
VI. ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ
6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками в соответствии с ГОСТ 12.1.019-2017, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.
6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения в соответствии с ГОСТ 12.4.009-83. Организуется обучение работников безопасности труда.
6.3. Работа с газами, находящимися в баллонах под давлением до 15 МПа (150 кгс/см2) осуществляется в соответствии с законодательством Российской Федерации <3>. Запрещается открывать вентиль баллона, не установив в нем понижающий редуктор.
<3> Правила промышленной безопасности при использовании оборудования, работающего под избыточным давлением, утвержденные приказом Федеральной службы по экологическому, технологическому и атомному надзору от 15.12.2020 № 536 (зарегистрировано Минюстом России 31.12.2020, регистрационный № 61998).
6.4. Измерения в соответствии с настоящими МУК может выполнять специалист, имеющий опыт работы на ГХ-МС/МС, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментальное соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.
VII. УСЛОВИЯ ИЗМЕРЕНИЙ
7.1 При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха плюс 15 — 25 °C и относительной влажности не более 80%;
- выполнение измерений на ГХ-МС/МС проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
VIII. ПОДГОТОВКА К ВЫПОЛНЕНИЮ ИЗМЕРЕНИЙ
8.1. Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей, приготовление исходных растворов, приготовление матричных растворов для построения калибровки, согласованной с матрицей (матричная калибровка), растворов для внесения и разведения проб, смеси солей для экстракции и смеси солей и сорбентов для очистки экстрактов, установление градуировочных характеристик, подготовка проб к анализу.
8.2 Очистка растворителей.
8.2.1 Очистка ацетонитрила.
Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на 1 дм3 ацетонитрила 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 ч, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 дм3 ацетонитрила 10 г карбоната калия). Хранят в емкости из темного стекла не более 12 месяцев.
8.2.2. Очистка ацетона. Ацетон перегоняют над небольшим количеством перманганата калия и прокаленным карбонатом калия или подвергают ректификационной перегонке на колонке с числом теоретических тарелок не менее 30. Хранят при комнатной температуре в таре из темного стекла в темноте не более 1 месяца.
8.3 Приготовление исходного раствора.
Исходный раствор зета-циперметрина для градуировки (концентрация 100 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают (0,0100 +/- 0,0005) г вещества, растворяют в 20 — 30 см3 ацетона, перемешивают, доводят водой до метки ацетонитрилом, вновь перемешивают. Исходный раствор зета-циперметрина для градуировки готовят при температуре плюс 20 °C и хранят в холодильной камере при температуре плюс 2 — 6 °C не более 6 месяцев.
8.3.1. Раствор № 1 для градуировки и внесения (концентрация 10 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают по 1 см3 исходного раствора с концентрацией 100 мкг/см3 (п. 8.3), доводят ацетонитрилом до метки, перемешивают. Раствор № 1 готовят при температуре плюс 20 °C и хранят в холодильной камере при температуре плюс 2 — 6 °C не более 3 месяцев.
Раствор № 1 используют для приготовления градуировочных растворов и проб с внесением для контроля качества результатов методом стандартной добавки.
8.3.2. Раствор № 2 для градуировки и внесения (концентрация 1 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают по 1 см3 раствора № 1 с концентрацией 10 мкг/см3 (п. 8.3.1), доводят ацетонитрилом до метки, перемешивают. Раствор № 2 готовят при температуре плюс 20 °C и хранят в холодильной камере при температуре плюс 2 — 6 °C не более 6 недель.
Раствор № 2 используют для приготовления градуировочных растворов и проб с внесением для контроля качества результатов методом стандартной добавки.
8.4. Приготовление растворов для матричной калибровки и разведения образцов.
8.4.1. Приготовление раствора для разведения. От образца, не содержащего исследуемый компонент (далее — холостой образец), отбирают несколько навесок и проводят пробоподготовку (см. п. 10.1 и 10.2). Получают очищенный экстракт общим объемом не менее 10 см3. Экстракт переносят в виалы на 20 см3 с фторопластовой прокладкой и навинчивающейся крышкой и используют для приготовления растворов для градуировки и разведения проб. Экстракт готовят при температуре плюс 20 °C и хранят в холодильнике в холодильной камере при температуре плюс 2 — 6 °C не более 3 месяцев <4>.
<4> Примечание: при отсутствии холостого образца допускается использование рабочей пробы. При этом, в условиях хроматографирования по п. 10.3, измеренная величина сигнала (площадь пика) исследуемых веществ в экстракте пробы, подготовленной по п. 10.1 и 10.2, не должна превышать 30% величины сигнала (площади пика) экстракта этой же пробы, подготовленной по п. 8.4.2, с внесением исследуемого вещества на нижнем градуировочном уровне.
8.4.2 Приготовление проб с внесением на нижнем градуировочном уровне.
Приготовление экстракта пробы с внесением <5> на нижнем градуировочном уровне 0,005 мкг/см3. От пробы очищенных и измельченных ядер орехов отбирают навеску (5 +/- 0,05) г, помещают в центрифужную пробирку на 50 см3 и вносят в образец 50 мм3 градуировочного раствора № 2 с концентрацией 1 мкг/см3 (п. 8.3.2), оставляют на 10 — 30 мин при комнатной температуре, далее проводят пробоподготовку по п. 10.1 и 10.2. Получают 3 — 4 см3 экстракта с концентрацией зета-циперметрина 0,005 мкг/см3. Раствор используют свежеприготовленным.
<5> Примечание: 0,005 мкг/см3 — нижний градуировочный уровень зета-циперметрина в орехах.
8.4.3. Приготовление основного градуировочного раствора № M1 для матричной калибровки с концентрацией 0,2 мкг/см3. От пробы очищенных и измельченных ядер орехов отбирают навеску массой (5 +/- 0,05) г, помещают в центрифужную пробирку на 50 см3 и вносят в образец 200 мм3 градуировочного раствора № 1 с концентрацией 10 мкг/см3 (п. 8.3.1), оставляют на 10 — 30 мин при комнатной температуре, далее проводят пробоподготовку по п. 10.1 и 10.2. Получают 3 — 5 см3 экстракта с концентрацией зета-циперметрина 0,2 мкг/см3. Раствор № M1 готовят при температуре плюс 20 °C и хранят в холодильнике при температуре плюс 2 — 6 °C не более недели.
8.4.3.1. Приготовление рабочих градуировочных растворов. Рабочие растворы № M2 — M6 зета-циперметрина для построения матричной калибровки (концентрация 0,005 — 0,1 мкг/см3) готовят методом последовательного разбавления. В 5 виал вместимостью 1,5 — 2 см3 дозатором помещают по 0,025; 0,05; 0,125; 0,25; 0,5 см3 (25; 50; 125; 250; 500 мм3) градуировочного раствора № M1 с концентрацией 0,2 мкг/см3 (п. 8.4.3) и доводят раствором для разведения (п. 8.4.1) дозатором до 1 см3, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № M2 — M6 с концентрацией каждого вещества 0,005; 0,01; 0,025; 0,05; 0,1 мкг/см3 соответственно. Растворы используют свежеприготовленными.
8.5 Установление градуировочной характеристики.
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость суммарной площади пиков (две пары энантиомеров) от концентрации зета-циперметрина в растворе (мкг/см3), устанавливают методом абсолютной калибровки по 6 матричным растворам для градуировки (N M1 — M6).
В инжектор хроматографа вводят по 1 мм3 каждого градуировочного раствора (N M1 — M6) зета-циперметрина и анализируют в условиях хроматографирования (см. п. 10.3). Осуществляют не менее 3 параллельных измерений.
8.6 Контроль стабильности градуировочной характеристики.
Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.
Проводят измерения не менее двух матричных растворов для градуировки, содержание зета-циперметрина в которых должно входить в диапазон концентраций от 0,005 до 0,2 мкг/см3.
Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение (1), (2):
A = \frac{|X - C|}{C} \times 100, (1)
где: A — величина расхождения, %;
X — концентрация зета-циперметрина в растворе при контрольном измерении, мкг/см3;
C — известная концентрация градуировочного раствора, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3;
B — норматив контроля погрешности градуировочной характеристики, % (равен 20% при P = 0,95).
Если величина расхождения (A) превышает 20%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов зета-циперметрина, предусмотренных настоящими МУК. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики устанавливают ее заново в соответствии с п. 8.7.
8.7. Приготовление смеси солей для экстракции. Для приготовления одного набора смеси солей для экстракции смешивают (4,00 +/- 0,04) г магния сернокислого, (1,00 +/- 0,01) г натрия хлористого, (1,00 +/- 0,01) г натрия лимоннокислого трехзамещенного и (0,50 +/- 0,05) г натрия лимоннокислого двузамещенного, 1,5-водного, до использования хранят в герметичной упаковке (не более 6 месяцев).
8.8. Приготовление смеси солей и сорбентов для очистки экстрактов. Для приготовления одного набора смеси сорбентов для очистки экстрактов в центрифужную полипропиленовую пробирку вместимостью 15 см3 помещают (150 +/- 4) мг сорбента для твердофазной экстракции на основе первичного-вторичного амина, (900 +/- 4) мг магния сернокислого и (150 +/- 4) мг твердофазного сорбента на основе октадецилсилана, закрывают герметично крышкой, встряхивают для перемешивания, хранят не более 6 месяцев <6>.
<6> Примечание: возможно использование коммерческих дисперсионных наборов для продуктов с содержанием жиров и масел более 1%, помещенных в полипропиленовые пробирки вместимостью 15 см3.
IX. ОТБОР И ХРАНЕНИЕ ПРОБ
9.1. Отбор проб осуществляют в соответствии с методическими документами <7>.
<7> Унифицированные правила отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов, утвержденные заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 № 2051-79; ГОСТ 32874-2014 «Орехи грецкие. Технические условия», введенный приказом Госстандарта от 30.10.2014 № 1464-ст; ГОСТ 31852-2012 «Орехи кедровые очищенные. Технические условия», введенный приказом Госстандарта от 29.11.2012 № 1848-ст; ГОСТ 32811-2014 «Орехи миндаля сладкого в скорлупе. Технические условия», введенный приказом Госстандарта от 20.08.2014 № 927-ст; ГОСТ 31788-2012 «Орехи фисташковые неочищенные. Технические условия», введенный приказом Госстандарта от 29.11.2012 № 1780-ст; ГОСТ 32288-2013 «Орехи лещины. Технические условия», введенный приказом Госстандарта от 17.12.2013 № 2302-ст; ГОСТ 31855-2012 «Ядра кешью. Технические условия», введенный приказом Госстандарта от 29.11.2012 № 1790-ст.
9.2. Пробы хранят при температуре плюс 2 — 6 °C не более недели. Для длительного хранения образцы замораживают и хранят при температуре не выше минус 18 °C.
X. ВЫПОЛНЕНИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ
10.1. Экстракция. Ядро ореха очищают от скорлупы и тщательно измельчают. Измельченный образец массой (5,00 +/- 0,05) г, помещают в центрифужную полипропиленовую пробирку вместимостью 50 см3. Прибавляют 10 см3 деионизированной воды, встряхивают. Прибавляют 10 см3 ацетонитрила и интенсивно встряхивают с использованием шейкера типа вортекс в течение 15 — 30 мин до образования эмульсии. Вносят в пробирку смесь солей для экстракции, приготовленную по п. 8.7, интенсивно встряхивают (вручную в вертикальной плоскости) в течение 1 мин. Центрифугируют 5 мин при скорости вращения 8000 об/мин при температуре плюс 4 °C.
10.2 Очистка экстракта.
10.2.1. Очистка вымораживанием. После центрифугирования пробирку с пробой, обработанной по п. 10.1, оставляют в морозильнике на не менее 12 ч (на ночь) при температуре не выше минус 18 °C. Центрифугируют холодный экстракт в течение 1 мин при скорости вращения 8000 об/мин при температуре плюс 4 °C.
10.2.2. Очистка методом дисперсионной твердофазной экстракции. Аликвоту вымороженного экстракта объемом 6 см3 переносят в центрифужную пропиленовую пробирку вместимостью 15 см3, содержащую смесь сорбентов, приготовленную по п. 8.8, интенсивно встряхивают (вручную) в течение 1 мин, далее с интенсивностью не менее 1500 об/мин на аппарате для встряхивания (вортекс) в течение 5 мин. Центрифугируют 5 мин при скорости вращения 8000 об/мин при температуре плюс 4 °C. При необходимости полученный надосадочный раствор фильтруют через мембранный фильтр (размер пор 0,45 мкм) в виалу. Анализируют в условиях хроматографирования, указанных в п. 10.3.
Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Устанавливают суммарную площадь пиков зета-циперметрина (две пары энантиомеров), с помощью градуировочного графика определяют концентрацию компонента в хроматографируемом растворе.
10.3. Измерения выполняют на приборе ГХ-МС/МС: тройная квадруполь с источником электронной ионизации при следующих режимных параметрах масс-спектрометрического детектора <8>:
- режим ионизации: электронная ионизация;
- температура источника плюс 280 °C;
- температура первого квадруполя (MS1) плюс 150 °C;
- температура второго квадруполя (MS2) плюс 150 °C;
- температура переходной линии плюс 280 °C;
- время задержки растворителя (англ. solvent delay) 5 мин;
- режим работы: мониторинг множественных реакций (англ. Multiple Reaction Monitoring, далее — MRM).
<8> Примечание: параметры хроматографирования могут различаться в зависимости от марки и модели прибора.
Параметры переходов MRM приведены в таблице 10.1.
Параметры масс-спектрометрического детектора с тройным квадруполем
- Хроматографическая капиллярная кварцевая колонка, длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм, содержащая сорбент 5% фенил- и 95% диметилполисилоксана, толщина пленки сорбента 0,25 мкм; газ — гелий, поток — 1,0 см3/мин;
- режим испарителя: объем вводимой пробы 1 мм3; температура плюс 280 °C без деления потока;
- режим термостата колонки: начальная температура плюс 220 °C, выдержка в течение 2 мин, нагрев со скоростью 45 °C/мин до температуры плюс 240 °C, выдержка в течение 2 мин, нагрев со скоростью 30 °C/мин до температуры плюс 270 °C, выдержка в течение 8 мин, нагрев со скоростью 45 °C/мин до температуры плюс 310 °C, выдержка в течение 5 мин.
Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочный раствор с концентрацией вещества 0,2 мкг/см3, разбавляют раствором для разведения (п. 8.4.1) (не более чем в 10 раз).
XI. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ АНАЛИЗА
11.1 Содержание зета-циперметрина в образцах (X, мг/кг) рассчитывают по формуле (3):
X = \frac{C*V*\text{Кр}}{m} , (3)
где: C — концентрация зета-циперметрина, полученная по градуировочному графику в соответствии с суммарной величиной площадей хроматографических пиков (две пары энантиомеров), мкг/см3;
V — объем экстрагента, добавленного в матрицу, см3 (10 см3 ацетонитрила);
m — масса анализируемого образца, г (5 г);
Кр — коэффициент дополнительного разбавления при превышении концентрации верхнего градуировочного уровня (если экстракт подвергался разбавлению).
Идентификация и расчет концентрации вещества в пробах могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую систему.
XII. ОФОРМЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
12.1 Результат количественного анализа представляют в виде формулы (4):
(\overline{X} \pm \Delta),\text{мг}/\text{кг}, (4)
где: \overline{X} — среднее арифметическое результатов определений, мг/кг;
\Delta — граница абсолютной погрешности, мг/кг, рассчитанная по формуле (5):
где: \delta — граница относительной погрешности методики (показатель точности по диапазону концентраций, таблица 3.1), %.
Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.
Если содержание вещества менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде: «содержание зета-циперметрина в орехах — менее 0,01 мг/кг» <9>.
<9> Примечание: 0,01 мг/кг — предел обнаружения зета-циперметрина в орехах.
XIII. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ
13.1 Контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с методическими документами <10>. Периодичность и формы контроля определяются руководством по качеству.
<10> ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002; ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений», введенный в действие постановлением Госстандарта Российской Федерации от 23.04.2002 № 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-3-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерений», введенный в действие постановлением Госстандарта Российской Федерации от 23.04.2002 № 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-4-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений», введенный в действие постановлением Госстандарта Российской Федерации от 23.04.2002 № 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-5-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 5. Альтернативные методы определения прецизионности стандартного метода измерений», введенный в действие постановлением Госстандарта Российской Федерации от 23.04.2002 № 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике», введенный в действие постановлением Госстандарта Российской Федерации от 23.04.2002 № 161-ст.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЕ ССЫЛКИ
1. Федеральный закон от 30.03.1999 № 52-ФЗ «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения».
2. Федеральный закон от 19.07.1997 № 109-ФЗ «О безопасном обращении с пестицидами и агрохимикатами».
3. Технический регламент таможенного союза «О безопасности пищевой продукции» (ТР ТС 021/2011).
4. Единые санитарно-эпидемиологические и гигиенические требования к продукции (товарам), подлежащей санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю).
5. Правила промышленной безопасности при использовании оборудования, работающего под избыточным давлением.
6. ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения».
7. ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений».
8. ГОСТ Р ИСО 5725-3-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерений».
9. ГОСТ Р ИСО 5725-4-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений».
10. ГОСТ Р ИСО 5725-5-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 5. Альтернативные методы определения прецизионности стандартного метода измерений».
11. ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике».
12. ГОСТ Р 53228-2008 «Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания».
13. ГОСТ 29227-91 «Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования».
14. ГОСТ 1770-74 «Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия».
15. ГОСТ OIML R 111-1-2009 «Гири классов E(1), E(2), F(1), F(2), M(1), M(1-2), M(2), M(2-3) и M(3). Часть 1. Метрологические и технические требования».
16. ГОСТ 2603-79 «Ацетон. Технические условия».
17. ГОСТ Р 52501-2005 «Вода для лабораторного анализа. Технические условия».
18. ГОСТ 20490-75 «Калий марганцовокислый. Технические условия».
19. ГОСТ 4221-76 «Калий углекислый. Технические условия».
20. ГОСТ 4233-77 «Натрий хлористый. Технические условия».
21. ГОСТ ISO 7886-1-2011 «Шприцы инъекционные однократного применения стерильные. Часть 1. Шприцы для ручного использования».
22. ГОСТ 26678-85 «Холодильники и морозильники бытовые электрические компрессионные параметрического ряда. Общие технические условия.»
23. ГОСТ 12.1.007-76 «Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности».
24. ГОСТ 12.1.019-2017 «Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты».
25. ГОСТ 12.1.004-91 «Пожарная безопасность. Общие требования».
26. ГОСТ 12.4.009-83 «Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание».
27. ГОСТ 32874-2014 «Орехи грецкие. Технические условия».
28. ГОСТ 31852-2012 «Орехи кедровые очищенные. Технические условия».
29. ГОСТ 32811-2014 «Орехи миндаля сладкого в скорлупе. Технические условия».
30. ГОСТ 31788-2012 «Орехи фисташковые неочищенные. Технические условия».
31. ГОСТ 32288-2013 «Орехи лещины. Технические условия».
32. ГОСТ 31855-2012 «Ядра кешью. Технические условия».
33. Унифицированные правила отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов.