---
title: "\"МУК 4.1.3976-24. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств имидаклоприда в чае методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.3976-24"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-3976-24"
---

## "МУК 4.1.3976-24. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств имидаклоприда в чае методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.3976-24. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств имидаклоприда в чае методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 19.02.2024)

> [!IMPORTANT]
> Документ [введен](#p100005) в действие с 19.05.2024.


<a id="p100001"></a>Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
**А.Ю.ПОПОВА**
19 февраля 2024 года


#### <a id="p100002"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ИМИДАКЛОПРИДА В ЧАЕ МЕТОДОМ**
**ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100004"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.3976-24**

<a id="p100005"></a>Дата введения
19 мая 2024 года

1. <a id="p100006"></a>Разработаны ФБУН "ФНЦГ им. Ф.Ф. Эрисмана" Роспотребнадзора (Ракитский В.Н., Федорова Н.Е., Мухина Л.П.).
2. <a id="p100007"></a>Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 19 февраля 2024 г.
<a id="p100008"></a>3 Введены впервые.


### <a id="p100009"></a>I. Общие положения и область применения


<a id="p100010"></a>1.1. Настоящие методические указания (далее - МУК) описывают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (далее - ВЭЖХ) для определения в чае массовой концентрации имидаклоприда в диапазоне 2,5 - 50,0 мг/кг.

#### <a id="p100011"></a>1.2 МУК носят рекомендательный характер.



### <a id="p100012"></a>II. Физико-химические свойства


<a id="p100013"></a>2.1. Имидаклоприд - (E)-1-(6-хлор-3-пиридилметил)-нитроимидазолидин-2-илиденамин [<1>](#p100015). Брутто-формула: C<sub>9</sub>H<sub>10</sub>ClN<sub>5</sub>O<sub>2</sub>. Молекулярная масса 255,7.

<a id="p100014"></a>

---

<a id="p100015"></a><1> В соответствии с Международным союзом теоретической и прикладной химии (ИЮПАК, англ. International Union of Pure and Applied Chemistry, IUPAC).


#### <a id="p100016"></a>2.2 Физические и химические свойства

<a id="p100017"></a>Химически чистый имидаклоприд представляет собой бесцветные кристаллы со слабым характерным запахом. Температура плавления: плюс 144 °C. Давление паров 4·10-7 мPa (при плюс 20 °C), 9·106 мPa (при плюс 25 °C). Коэффициент распределения в системе н-октанол-вода Kow lgP = 0,57 (pH 7, при плюс 20 °C). Растворимость (г/л) при плюс 20 °C: в воде - 0,61; дихлорметане - 67; изопропаноле - 2,3; толуоле - 0,69; н-гексане - < 0,1. Стабилен к гидролизу при pH 5 - 11.

#### <a id="p100018"></a>2.3 Краткая токсикологическая характеристика

<a id="p100019"></a>Острая пероральная токсичность (LD<sub>50</sub>) для крыс - 450 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD<sub>50</sub>) для крыс - более 5000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LC50) для крыс - более 5323 мг/м3 воздуха.


### <a id="p100020"></a>III. Погрешность измерений


<a id="p100021"></a>3.1. При соблюдении условий проведения анализа [<2>](#p100023) и методики, изложенной в настоящих МУК, погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в [табл. 3.1](#p100025) для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100022"></a>

---

<a id="p100023"></a><2> [ГОСТ Р ИСО 5725-1](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-1-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст; [ГОСТ Р ИСО 5725-2](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-2-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст, [ГОСТ Р ИСО 5725-3](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-3-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерений", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст, [ГОСТ Р ИСО 5725-4](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст; [ГОСТ Р ИСО 5725-5](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-5-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 5. Альтернативные методы определения прецизионности стандартного метода измерений", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст, [ГОСТ Р ИСО 5725-6](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст (далее - [ГОСТ Р ИСО 5725-(1 - 6)](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002)).

<a id="p100024"></a>Таблица 3.1

<a id="p100025"></a>Метрологические параметры


| <a id="p100026"></a>Анализируемый объект | <a id="p100027"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг | <a id="p100028"></a>Показатель точности (границы относительной погрешности, P = 0,95), $\pm \delta$ , % | <a id="p100029"></a>Показатель повторяемости (среднеквадратичное отклонение повторяемости), $\sigma_{r}$ , % | <a id="p100030"></a>Показатель воспроизводимости (среднеквадратичное отклонение воспроизводимости), $\sigma_{R}$ , % | <a id="p100031"></a>Предел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных определений), r, % | <a id="p100032"></a>Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученных в разных лабораториях), R, % (P = 0,95) |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100033"></a>Чай | <a id="p100034"></a>2,5 - 50,0 | <a id="p100035"></a>50,0 | <a id="p100036"></a>5,9 | <a id="p100037"></a>8,3 | <a id="p100038"></a>17 | <a id="p100039"></a>23 |


<a id="p100040"></a>3.2. Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для всего диапазона измерений (n = 20) приведены в [табл. 3.2](#p100042).

<a id="p100041"></a>Таблица 3.2

<a id="p100042"></a>Полнота извлечения веществ, стандартное отклонение,
доверительный интервал среднего результата


<table>
<colgroup><col width="16%"><col width="15%"><col width="16%"><col width="18%"><col width="18%"><col width="18%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100043"></a>Анализируемый объект</td><td colspan="5"><a id="p100044"></a>Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td><a id="p100045"></a>Предел обнаружения, мг/кг</td><td><a id="p100046"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td><a id="p100047"></a>Полнота извлечения вещества, %</td><td><a id="p100048"></a>Стандартное отклонение, %</td><td><a id="p100049"></a>Доверительный интервал среднего результата, +/-, %</td></tr>
<tr><td><a id="p100050"></a>Чай</td><td><a id="p100051"></a>2,5</td><td><a id="p100052"></a>2,5 - 50,0</td><td><a id="p100053"></a>87,4</td><td><a id="p100054"></a>4,8</td><td><a id="p100055"></a>2,5</td></tr>
</table>



### <a id="p100056"></a>IV. Метод измерений


<a id="p100057"></a>4.1. Методика основана на определении вещества с помощью ВЭЖХ на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.
<a id="p100058"></a>4.2. Экстракцию имидаклоприда из пробы чая выполняют ацетонитрилом с использованием смеси солей для экстракции (смесь сульфата магния, хлорида натрия и цитрата натрия), очистку экстрактов проводят методом дисперсионной твердофазной экстракции с применением смеси сорбентов на основе амина, октадецилсилана, графитизированной сажи.
<a id="p100059"></a>4.3. Нижний предел измерения имидаклоприда в анализируемом объеме пробы - 1 нг.


### <a id="p100060"></a>V. Средства измерений, реактивы, вспомогательное оборудование, устройства и материалы


<a id="p100061"></a>5.1. При выполнении измерений и подготовке проб применяют средства измерений, реактивы, вспомогательное оборудование, устройства и материалы, приведенные в [табл. 5.1](#p100063) - [5.3](#p100117).

<a id="p100062"></a>Таблица 5.1

<a id="p100063"></a>Средства измерений


<table>
<colgroup><col width="62%"><col width="38%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100064"></a>Наименование средств измерения</td><td><a id="p100065"></a>Обозначение и наименование документов, технические характеристики</td></tr>
<tr><td><a id="p100066"></a>Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны</td><td><a id="p100067"></a>Внесено в реестр "Утвержденные типы средств измерений" Федерального информационного фонда по обеспечению</td></tr>
<tr><td><a id="p100068"></a>Весы лабораторные аналитические, предел допустимой погрешности +/- 0,5 мг</td><td><a id="p100069"></a>ГОСТ Р 53228</td></tr>
<tr><td><a id="p100070"></a>Весы лабораторные, предел допустимой погрешности +/- 0,01 г</td><td><a id="p100071"></a>ГОСТ Р 53228</td></tr>
<tr><td><a id="p100072"></a>Колбы мерные вместимостью 2-50-2, 2-100-2, 2-1000-2</td><td><a id="p100073"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-1770-74">ГОСТ 1770</a></td></tr>
<tr><td><a id="p100074"></a>Меры массы</td><td><a id="p100075"></a>ГОСТ OIML R 111-1</td></tr>
<tr><td><a id="p100076"></a>Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0, 2,0, 5,0, 10 см3</td><td><a id="p100077"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-29227-91">ГОСТ 29227</a></td></tr>
<tr><td><a id="p100078"></a>Пробирки градуированные с притертой пробкой 2-го класса точности объемом 10 см3</td><td><a id="p100079"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-1770-74">ГОСТ 1770</a></td></tr>
<tr><td><a id="p100080"></a>Приборы для измерения атмосферного давления, относительной влажности и температуры воздуха</td><td><a id="p100081"></a>Внесено в реестр "Утвержденные типы средств измерений" Федерального информационного фонда по обеспечению</td></tr>
<tr><td><a id="p100082"></a>Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 10, 25, 50, 100, 250 и 500 см3</td><td><a id="p100083"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-1770-74">ГОСТ 1770</a></td></tr>
<tr><td colspan="2"><a id="p100084"></a>Примечание: допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.</td></tr>
</table>


<a id="p100085"></a>Таблица 5.2

<a id="p100086"></a>Реактивы


<table>
<colgroup><col width="62%"><col width="38%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100087"></a>Наименование реактивов</td><td><a id="p100088"></a>Обозначение и наименование документов, технические характеристики</td></tr>
<tr><td><a id="p100089"></a>Аналитический стандартный образец имидаклоприда</td><td><a id="p100090"></a>Содержание основного компонента не менее 95%</td></tr>
<tr><td><a id="p100091"></a>Ацетонитрил для ВЭЖХ</td><td><a id="p100092"></a>Чистота не менее 99,9%</td></tr>
<tr><td><a id="p100093"></a>Вода для лабораторного анализа (бидистиллированная или деионизованная)</td><td><a id="p100094"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-r-52501-2005">ГОСТ Р 52501</a></td></tr>
<tr><td><a id="p100095"></a>Уксусная кислота, 99,5%, чистая для анализа</td><td><a id="p100096"></a>ГОСТ 61-75</td></tr>
<tr><td><a id="p100097"></a>Калий углекислый (карбонат калия, поташ), химически чистый, прокаленный</td><td><a id="p100098"></a><a href="https://bukva.ai/docs/standart-gost-4221-76">ГОСТ 4221</a></td></tr>
<tr><td><a id="p100099"></a>Фосфор (V) оксид (фосфорный ангидрид, пентоксид фосфора)</td><td><a id="p100100"></a>Квалификация реактива: химически чистый</td></tr>
<tr><td><a id="p100101"></a>Магний сернокислый (сульфат магния), безводный, химически чистый</td><td><a id="p100102"></a>Квалификация реактива: химически чистый</td></tr>
<tr><td><a id="p100103"></a>Натрий хлористый (хлорид натрия), химически чистый</td><td><a id="p100104"></a>ГОСТ 4233</td></tr>
<tr><td><a id="p100105"></a>Натрий лимоннокислый двузамещенный, 1,5-водный, химически чистый</td><td><a id="p100106"></a>ГОСТ 4233</td></tr>
<tr><td><a id="p100107"></a>Натрий лимоннокислый трехзамещенный, чистый для анализа</td><td><a id="p100108"></a><a href="https://bukva.ai/docs/standart-gost-22280-76">ГОСТ 22280</a></td></tr>
<tr><td><a id="p100109"></a>Сорбент для твердофазной экстракции на основе силикагеля с привитыми пропиламинными группами: (CH2)3NH2 (SPA)</td><td><a id="p100110"></a>Площадь поверхности ~ 550 м2/г, средний размер пор 61 А, средний размер частиц 62 мкм</td></tr>
<tr><td><a id="p100111"></a>Сорбент для твердофазной экстракции на основе силикагеля с привитыми октадецильными группами: (CH<sub>2</sub>)<sub>17</sub>CH<sub>3</sub> (C18EC)</td><td><a id="p100112"></a>Площадь поверхности ~ 550 м2/г, средний размер пор 61 А, средний размер частиц 62 мкм</td></tr>
<tr><td><a id="p100113"></a>Графитизированная сажа</td><td><a id="p100114"></a>Размер ячеек 120/400, площадь поверхности ~ 100 м2/г</td></tr>
<tr><td colspan="2"><a id="p100115"></a>Примечание: допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.</td></tr>
</table>


<a id="p100116"></a>Таблица 5.3

<a id="p100117"></a>Вспомогательное оборудование, устройства, материалы


<table>
<colgroup><col width="80%"><col width="20%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100118"></a>Наименование вспомогательного оборудования, устройств, материалов</td><td><a id="p100119"></a>Обозначение и наименование документов, технические характеристики</td></tr>
<tr><td><a id="p100120"></a>Воронки химические конусные диаметром 40 - 45 мм</td><td><a id="p100121"></a>ГОСТ 25336</td></tr>
<tr><td><a id="p100122"></a>Груша резиновая</td><td><a id="p100123"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100124"></a>Набор для фильтрации растворителей через мембрану</td><td><a id="p100125"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100126"></a>Керамические гомогенизаторы для пробирок на 50 см3</td><td><a id="p100127"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100128"></a>Пробирки полипропиленовые центрифужные с крышками, вместимостью 50 и 15 см3</td><td><a id="p100129"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100130"></a>Установка для перегонки растворителей</td><td><a id="p100131"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100132"></a>Фильтры мембранные для фильтрации проб с помощью шприца, размер пор 0,22 мкм</td><td><a id="p100133"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100134"></a>Холодильник обратный водяной</td><td><a id="p100135"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100136"></a>Хроматографическая колонка стальная длиной 250 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18, зернение 5 мкм</td><td><a id="p100137"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100138"></a>Центрифуга лабораторная, роторная, скорость вращения до 4 000 об/мин с центрифужными стаканами на 100 см3</td><td><a id="p100139"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100140"></a>Шприцы медицинские одноразовые с разъемом Льюера вместимостью 5 см3</td><td><a id="p100141"></a>ГОСТ 22090</td></tr>
<tr><td colspan="2"><a id="p100142"></a>Примечание: допускается использование вспомогательного оборудования, устройств и материалов с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.</td></tr>
</table>



### <a id="p100143"></a>VI. Требования безопасности


<a id="p100144"></a>6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами в соответствии с ГОСТ 12.1.007, требования по электробезопасности при работе с электроустановками в соответствии с ГОСТ Р 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостные хроматографы.
<a id="p100145"></a>6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения в соответствии с ГОСТ 12.4.009. Организуется обучение работников безопасности труда.
<a id="p100146"></a>6.3. Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на жидкостном хроматографе, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментальное соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.


### <a id="p100147"></a>VII. Условия измерений



#### <a id="p100148"></a>7.1 При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- <a id="p100149"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха плюс (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100150"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией на прибор.


### <a id="p100151"></a>VIII. Подготовка к выполнению измерений


<a id="p100152"></a>8.1. Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление компонентов подвижной фазы для ВЭЖХ, смеси растворителей для разбавления градуировочных растворов, градуировочных растворов, растворов внесения, смеси солей для экстракции и смеси сорбентов для очистки экстрактов, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочных характеристик, отбор проб.

#### <a id="p100153"></a>8.2 Очистка органических растворителей

<a id="p100154"></a>Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на 1 дм3 ацетонитрила 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 дм3 ацетонитрила 10 г карбоната калия). Хранят в емкости из темного стекла.
<a id="p100155"></a>8.3. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ. В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 200 см3 ацетонитрила и 800 см3 бидистиллированной или деионизованной воды, перемешивают, фильтруют и дегазируют. Подвижную фазу хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.
<a id="p100156"></a>8.4. Кондиционирование хроматографической колонки для ВЭЖХ. Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по [п. 8.3](#p100155)) при скорости подачи растворителя 0,8 см3/мин до установления стабильной базовой линии.

#### <a id="p100157"></a>8.5 Приготовление раствора уксусной кислоты в ацетонитриле с объемной долей 1% (1% раствор)

<a id="p100158"></a>В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 300 - 400 см3 ацетонитрила, вносят 10 см3 ледяной уксусной кислоты, перемешивают, доводят ацетонитрилом до метки, вновь перемешивают. Раствор готовят при температуре плюс 20 °C и хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.

#### <a id="p100159"></a>8.6 Приготовление градуировочных растворов и растворов внесения

<a id="p100160"></a>8.6.1. Исходный раствор имидаклоприда для градуировки и внесения (концентрация 100 мкг/см3).
<a id="p100161"></a>В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают (0,0100 +/- 0,0005) г имидаклоприда, добавляют 50 - 70 см3 ацетонитрила, перемешивают, доводят ацетонитрилом до метки, вновь перемешивают. Раствор хранится в холодильнике при температуре плюс (4 +/- 2) °C не более 1 месяца. Растворы N 1 - 6 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора для градуировки.
<a id="p100162"></a>8.6.2. Раствор N 1 имидаклоприда для градуировки и внесения (концентрация 10 мкг/см3).
<a id="p100163"></a>В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 10 см3 исходного раствора имидаклоприда с концентрацией 100 мкг/см3 [(п. 8.6.1)](#p100160), доводят ацетонитрилом до метки, перемешивают. Градуировочный раствор N 1 хранят в холодильнике при температуре плюс (4 +/- 2) °C не более 1 месяца.
<a id="p100164"></a>8.6.3. Рабочие растворы N 2 - 6 имидаклоприда для градуировки (концентрация каждого вещества по 0,05 - 1,0 мкг/см3).
<a id="p100165"></a>В 5 мерных колб вместимостью 100 см3 помещают по 0,5, 1,0, 2,0, 5,0 см3 и 10 см3 градуировочного раствора N 1 с концентрацией имидаклоприда 10 мкг/см3 [(п. 8.6.2)](#p100162), доводят до метки подвижной фазой, приготовленной по [п. 8.3](#p100155), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 6 с концентрацией имидаклоприда 0,05; 0,1; 0,2; 0,5 и 1,0 мкг/см3 соответственно. Растворы готовят при температуре плюс 20 °C и хранят в холодильнике при температуре плюс (4 +/- 2) °C не более 10 дней.

#### <a id="p100166"></a>8.7 Приготовление смеси солей для экстракции [<3>](#p100168)


<a id="p100167"></a>

---

<a id="p100168"></a><3> Примечание: допускается использование коммерческих наборов солей QuEChERS для экстракции проб фруктов и овощей массой 10 г.

<a id="p100169"></a>Для приготовления одного набора смеси солей для экстракции смешивают (4 +/- 0,01) г магния сернокислого, (1 +/- 0,01) г натрия хлористого, (1 +/- 0,01) г натрия лимоннокислого трехзамещенного, 2-водного и (0,5 +/- 0,01) г натрия лимоннокислого двузамещенного, 1,5-водного, до использования хранят в герметичной упаковке (не более 6 месяцев).

#### <a id="p100170"></a>8.8 Приготовление смеси сорбентов для очистки экстрактов [<4>](#p100172)


<a id="p100171"></a>

---

<a id="p100172"></a><4> Примечание: допускается использование коммерческих наборов солей QuEChERS для экстракции проб фруктов и овощей с маслом и пигментами массой 10 г, помещенных в полипропиленовые пробирки вместимостью 15 см3.

<a id="p100173"></a>Для приготовления одного набора смеси сорбентов для очистки экстрактов в центрифужную полипропиленовую пробирку вместимостью 15 см3 помещают (400 +/- 1) мг сорбента для твердофазной экстракции на основе первичного-вторичного амина, (4 +/- 1) мг графитизированной сажи, (1200 +/- 2) мг магния сернокислого и твердофазного сорбента на основе октадецилсилана (400 +/- 1) мг, закрывают герметично крышкой, встряхивают для перемешивания, хранят не более 6 месяцев.

#### <a id="p100174"></a>8.9 Установление градуировочной характеристики

<a id="p100175"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика $(mAU \times s)$ от концентрации имидаклоприда в растворе (мкг/см3), устанавливают методом абсолютной калибровки по 5 растворам для градуировки. В инжектор хроматографа вводят по 20 мм3 каждого градуировочного раствора N 2 - 6 и анализируют в условиях хроматографирования, указанных в [п. 10.3](#p100196). Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Устанавливают площади пиков имидаклоприда, на основании которых строят градуировочную зависимость.

#### <a id="p100176"></a>8.10 Контроль стабильности градуировочной характеристики

<a id="p100177"></a>При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее двух образцов концентраций для градуировки, содержание имидаклоприда в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,05 до 1,0 мкг/см3.
<a id="p100178"></a>Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемых для контроля градуировочных растворов сохраняется [соотношение (1)](#p100179), [(2)](#p100180):

<a id="p100179"></a> $A = \frac{|X - C|}{C} \times 100;$ (1)

<a id="p100180"></a>A <= B, (2)

<a id="p100181"></a>где A - величина расхождения, %;
<a id="p100182"></a>X - концентрация вещества в пробе при контрольном измерении, мкг/см3;
<a id="p100183"></a>C - известная концентрация градуировочного раствора, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3;
<a id="p100184"></a>B - норматив контроля стабильности градуировочной характеристики, % (равен 20% при P = 0,95).


### <a id="p100185"></a>IX. Отбор и хранение проб


<a id="p100186"></a>9.1. Отбор проб осуществляют в соответствии с методическими документами [<5>](#p100188).

<a id="p100187"></a>

---

<a id="p100188"></a><5> Унифицированные [правила](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов, утвержденных Минздравом СССР 21.08.1979 N 2051-79; Методические указания по регистрационным испытаниям пестицидов в части биологической эффективности, утвержденные Минсельхозом России 15.11.2018, [ГОСТ 32573](https://bukva.ai/docs/gost-32573-2013) "Чай черный. Технические условия", введенный приказом Росстандарта от 19.03.2014 N 186-ст.

<a id="p100189"></a>9.2. Пробы чая хранят при температуре плюс (4 +/- 2) °C не более 2 недель. Для длительного хранения образцы замораживают и хранят при температуре не выше минус 18 °C.

#### <a id="p100190"></a>9.3 Перед анализом образцы тщательно измельчают.



### <a id="p100191"></a>X. Выполнение определения



#### <a id="p100192"></a>10.1 Экстракция

<a id="p100193"></a>Образец чая массой 2 г помещают в центрифужную полипропиленовую пробирку вместимостью 50 см3. В пробирку с пробой чая вносят 10 см3 бидистиллированной воды, перемешивают, оставляют на 5 мин. Затем в пробирки вносят 10 см3 1% раствора уксусной кислоты в ацетонитриле, помещают в пробирку керамический гомогенизатор, закрывают крышку и интенсивно встряхивают вручную 30 сек, вносят в пробирку смесь солей для экстракции (приготовленную по [п. 8.7](#p100166)), закрывают крышкой и интенсивно встряхивают (вручную) в течение 1 мин. Затем пробу центрифугируют в течение 5 мин при скорости вращения 4000 об/мин и подвергают очистке с применением дисперсионной твердофазной экстракции по [п. 8.8](#p100170).

#### <a id="p100194"></a>10.2 Очистка экстракта

<a id="p100195"></a>Аликвоту экстракта (верхний слой в пробирке после центрифугирования) объемом 7,5 - 8 см3 с помощью пипетки переносят в пропиленовую центрифужную пробирку вместимостью 15 см3, содержащую смесь сорбентов, приготовленную по [п. 8.8](#p100170). Закрывают крышку и интенсивно встряхивают вручную в течение 30 сек. Центрифугируют 15 мин при скорости вращения 4000 об/мин. Отбирают с помощью градуированной пипетки 1 см3 экстракта в пробирку градуированную на 10 см3 с притертой пробкой, разбавляют подвижной фазой, приготовленную по [п. 8.3](#p100155) в 10 раз (до 10 см3), фильтруют через мембранный фильтр (размер пор 0,22 мкм) в виалу вместимостью 2 см3 с фторопластовой прокладкой и навинчивающейся крышкой. Помещают в автосамплер хроматографа для анализа в условиях хроматографирования по [п. 10.3](#p100196).

#### <a id="p100196"></a>10.3 Условия хроматографирования

<a id="p100197"></a>Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:
- <a id="p100198"></a>жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны;
- <a id="p100199"></a>хроматографическая колонка стальная, длиной 250 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18, зернение 5 мкм:
- <a id="p100200"></a>рабочая длина волны: 268 нм;
- <a id="p100201"></a>температура колонки: комнатная;
- <a id="p100202"></a>подвижная фаза: ацетонитрил - деонизованная вода (20:80, по объему);
- <a id="p100203"></a>скорость потока элюента: 0,8 см3/мин;
- <a id="p100204"></a>объем вводимой пробы: 20 мм3;
- <a id="p100205"></a>линейный диапазон детектирования: 1 - 20 нг.


### <a id="p100206"></a>XI. Обработка результатов анализа



#### <a id="p100207"></a>11.1 Содержание имидаклоприда в пробе чая (X, мг/кг) рассчитывают по [формуле (3)](#p100208):


<a id="p100208"></a> $X = \frac{A \cdot V \cdot C}{m} ,$ (3)

<a id="p100209"></a>где A - концентрация имидаклоприда, найденная по градуировочному графику в соответствии с величинами площадей хроматографических пиков, мкг/см3;
<a id="p100210"></a>V - объем экстракта (10 см3);
<a id="p100211"></a>m - масса анализируемого образца, г;
<a id="p100212"></a>C - коэффициент, учитывающий разбавление экстракта, взятого для анализа, C = 10.

#### <a id="p100213"></a>11.2 Проверка приемлемости результатов параллельных определений

<a id="p100214"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости и удовлетворяет [условию (4)](#p100215):

<a id="p100215"></a> $\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq r,$ (4)

<a id="p100216"></a>где X<sub>1</sub>, X<sub>2</sub> - результаты параллельных определений, мг/кг;
<a id="p100217"></a>r - значение предела повторяемости [(табл. 3.1)](#p100025), при этом $r = 2,8 \cdot \sigma_{r}$ .
<a id="p100218"></a>При невыполнении [условия (4)](#p100215) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


### <a id="p100219"></a>XII. Оформление результатов



#### <a id="p100220"></a>12.1 Результат анализа представляют в виде [формулы (5)](#p100221):


<a id="p100221"></a> $(\overline{X} \pm \Delta),$ мг/кг, при вероятности P = 0,95, (5)

<a id="p100222"></a>где $\overline{X}$ - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
<a id="p100223"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг, рассчитанная по [формуле (6)](#p100224):

<a id="p100224"></a> $\Delta = \delta \cdot X/100,$ (6)

<a id="p100225"></a>где $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [таблица 3.1](#p100025)), %.
<a id="p100226"></a>Если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде: "содержание имидаклоприда в пробе чая - менее 2,5 мг/кг" [<6>](#p100228).

<a id="p100227"></a>

---

<a id="p100228"></a><6> Примечание: 2,5 мг/кг - предел обнаружения имидаклоприда в пробе чая.


### <a id="p100229"></a>XIII. Контроль качества результатов измерений


<a id="p100230"></a>13.1. Организация контроля качества измерений осуществляется в соответствии с методическими документами [<7>](#p100232).

<a id="p100231"></a>

---

<a id="p100232"></a><7> [ГОСТ Р ИСО 5725-(1 - 6)](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002).

<a id="p100233"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
<a id="p100234"></a>Величина добавки должна удовлетворять [условию (7)](#p100235):

<a id="p100235"></a> $C_{\text{д}} \geq \Delta_{\text{л},\text{Х}} + \Delta_{\text{л},\text{Х }\prime},$ (7)

<a id="p100236"></a>где $\pm \Delta_{\text{л},\text{Х}}(\Delta_{\text{л},\text{Х }\prime})$ - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при [равенстве (8)](#p100237):

<a id="p100237"></a> $\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84,$ (8)

<a id="p100238"></a>где $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг, рассчитанная по [формуле (9)](#p100239):

<a id="p100239"></a> $\Delta_{\text{л}} = \delta \cdot \text{Х }/100,$ (9)

<a id="p100240"></a>где $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 3.1](#p100025)), %.
<a id="p100241"></a>Результат контроля процедуры Кк рассчитывают по [формуле (10)](#p100242):

<a id="p100242"></a> $\text{К}_{\text{к}} = \overline{\text{Х}}\prime - \overline{\text{Х}} - \text{С}_{\text{д}},$ (10)

<a id="p100243"></a>где $\overline{\text{Х}}\prime$ , $\overline{\text{Х}}$ , Cд - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по [п. 11.2](#p100213)) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки соответственно, мг/кг.
<a id="p100244"></a>Норматив контроля К рассчитывают по [формуле (11)](#p100245):

<a id="p100245"></a> $\text{К } = \sqrt{\Delta_{\text{л},\text{Х }\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},\text{Х}}^{2}} .$ (11)

<a id="p100246"></a>Проводят сопоставление результата контроля процедуры (Кк) с нормативом контроля (К).
<a id="p100247"></a>Если результат контроля процедуры удовлетворяет [условию (12)](#p100248):

<a id="p100248"></a>|Кк| <= К, (12)

<a id="p100249"></a>процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100250"></a>При невыполнении [условия (12)](#p100248) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении [условия (12)](#p100248) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

#### <a id="p100251"></a>13.3 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:

<a id="p100252"></a>расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости [(13)](#p100253):

<a id="p100253"></a> $\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq R,$ (13)

<a id="p100254"></a>где X1, X2 - результаты измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), мг/кг;
<a id="p100255"></a>R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, [таблица 3.1](#p100025)), %.






## <a id="p100256"></a>БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЕ ССЫЛКИ


1. <a id="p100257"></a>Федеральный закон от 30.03.1999 N 52-ФЗ "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения".
2. <a id="p100258"></a>[ГОСТ Р ИСО 5725-1](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-1-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения".
3. <a id="p100259"></a>[ГОСТ Р ИСО 5725-2](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-2-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений".
4. <a id="p100260"></a>[ГОСТ Р ИСО 5725-3](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-3-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерений".
5. <a id="p100261"></a>[ГОСТ Р ИСО 5725-4](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений".
6. <a id="p100262"></a>[ГОСТ Р ИСО 5725-5](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-5-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 5. Альтернативные методы определения прецизионности стандартного метода измерений".
7. <a id="p100263"></a>[ГОСТ Р ИСО 5725-6](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике".
8. <a id="p100264"></a>ГОСТ Р 53228 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания".
9. <a id="p100265"></a>ГОСТ OIML R 111-1 "Гири классов E(1), E(2), F(1), F(2), M(1), M(1-2), M(2), M(2-3) и M(3). Часть 1. Метрологические и технические требования".
10. <a id="p100266"></a>[ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) "Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия".
11. <a id="p100267"></a>[ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) "Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования".
12. <a id="p100268"></a>ГОСТ 25336 "Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры".
13. <a id="p100269"></a>ГОСТ 61-75 "Кислота уксусная. Технические условия"
14. <a id="p100270"></a>[ГОСТ 4221](https://bukva.ai/docs/standart-gost-4221-76) "Калий углекислый. Технические условия".
15. <a id="p100271"></a>ГОСТ 4233 "Натрий хлористый. Технические условия".
16. <a id="p100272"></a>[ГОСТ 22280](https://bukva.ai/docs/standart-gost-22280-76) "Натрий лимоннокислый 5,5-водный. Технические условия".
17. <a id="p100273"></a>[ГОСТ Р 52501](https://bukva.ai/docs/gost-r-52501-2005) "Вода для лабораторного анализа. Технические условия".
18. <a id="p100274"></a>[ГОСТ ISO 7886-1](https://bukva.ai/docs/gost-iso-7886-1-2011) "Шприцы инъекционные однократного применения стерильные. Часть 1. Шприцы для ручного использования".
19. <a id="p100275"></a>ГОСТ 12.1.004 "Пожарная безопасность. Общие требования".
20. <a id="p100276"></a>ГОСТ 12.1.007 "Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности".
21. <a id="p100277"></a>ГОСТ 12.1.019 "Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты".
22. <a id="p100278"></a>ГОСТ 12.4.009 "Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание".
23. <a id="p100279"></a>[ГОСТ 32573](https://bukva.ai/docs/gost-32573-2013) "Чай черный. Технические условия".
24. <a id="p100280"></a>Унифицированные [правила](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов.
25. <a id="p100281"></a>Методические указания по регистрационным испытаниям пестицидов в части биологической эффективности.



<a id="p100282"></a>

---