МУК 4.1.3949-23. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств сафлуфенацила в воде, почве, семенах и масле сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания
(утв. Роспотребнадзором 05.07.2023)
Примечание
Документ введен в действие с 05.10.2023.
Утверждаю Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации А. Ю. Попова 5 июля 2023 года
Дата введения 5 октября 2023 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ САФЛУФЕНАЦИЛА В ВОДЕ, ПОЧВЕ, СЕМЕНАХ И МАСЛЕ СОИ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ МУК 4.1.3949-23
1. Разработаны ФГБОУ ВО «Российский государственный аграрный университет — МСХА имени К.А. Тимирязева, Учебно-научный консультационный центр „Агроэкология пестицидов и агрохимикатов“ Минсельхоза России (А.В. Довгилевич, Е.В. Довгилевич, Н.В. Устименко, Е.Н. Тестова).»
2. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 5 июля 2023 г.
I. Общие положения и область применения
1.1. Настоящие методические указания (далее — МУК) устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (далее — ВЭЖХ) для определения массовых концентраций сафлуфенацила в воде в диапазоне 0,005 — 0,050 мг/дм3 и в почве в диапазоне 0,01 — 0,10 мг/кг, а также уровня его остаточных количеств в семенах сои в диапазоне 0,01 — 0,10 мг/кг и в масле сои в диапазоне 0,02 — 0,20 мг/кг.
1.2 МУК носят рекомендательный характер.
II. Физико-химические свойства
2.1 Физико-химические свойства сафлуфенацила.
Название действующего вещества по ИЮПАК: N'-{2-хлор-4-фтор-5-[1,2,3,6-тетрагидро-3-метил-2,6-диоксо-4-(трифторметил) пиримидин-1-ил]бензо-ил}-N-изопропил-N-метилсульфамид.
Эмпирическая формула: C17H17ClF4N4O5S.
Агрегатное состояние: порошок.
Цвет, запах: белый, без запаха.
Давление насыщенного пара при плюс 25 °C: 4,5 x 10-12 C МПа.
Температура плавления: плюс 189,9 °C.
Коэффициент распределения в системе октанол/вода (при pH 7, плюс 20 °C): Кow log P = 2,6.
Константа диссоциации (pKa) при плюс 25 °C — 4,41.
Растворимость в воде (в г/дм3, при плюс 20 °C): 2,1 (pH 7).
Растворимость в органических растворителях (в г/дм3, при плюс 20 °C): ацетон — 275; ацетонитрил — 194; 1,2-дихлорметан — 244; изопропанол — 2,5; метанол — 29,8; толуол — 2,3 этилацетат — 65,5.
В водных растворах период полураспада DT50: 4,9 дня (pH 9), 248 дня (pH 7), при pH 5 сафлуфенацил гидролитически стабилен.
Подвергается фотолизу: DT50 составляет в воде 57 дней при pH 5, в почве — 87 дней при плюс 22 °C.
2.2. Сафлуфенацил относится к малоопасным по острой оральной (ЛД50 для крыс более 2000 мг/кг) и дермальной токсичности (ЛД50 для крыс более 2000 мг/кг), но к умеренно опасным веществам по ингаляционной токсичности (ЛК50 для крыс (4 часа) более 5300 мг/м3 воздуха).
2.3. Сафлуфенацил — гербицид из класса пиримидиндионов, применяется как довсходовый и послевсходовый гербицид системного действия, также используется как десикант.
III. Метод измерения
3.1. Метод основан на определении сафлуфенацила методом ВЭЖХ с использованием диодно-матричного детектора.
Определение сафлуфенацила в воде проводится после его экстракции хлористым метиленом из подкисленного образца воды.
Определение сафлуфенацила в почве проводится после его экстракции из образцов ацетонитрилом, дальнейшей очистки экстракта перераспределением между двумя несмешивающимися фазами, на колонках с окисью алюминия и на концентрирующих патронах № 1 с гидрофильным слабокислым сорбентом (С — силикагель).
Определение сафлуфенацила в семенах сои проводится после его экстракции из образцов ацетоном, дальнейшей очистки экстракта перераспределением между двумя несмешивающимися фазами, на колонках с окисью алюминия и на колонках с флорисилом.
Определение сафлуфенацила в масле сои проводится после его экстракции из растворенных в гексане образцов ацетонитрилом, дальнейшей очистки экстракта на колонках с флорисилом и на колонках с окисью алюминия.
Идентификация вещества проводится по времени удерживания, а количественное определение — методом абсолютной калибровки.
В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором состава подвижной фазы и выбором колонок различной полярности.
IV. Метрологические характеристики
4.1. При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.
Метрологические характеристики
Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в табл. 2.
Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для сафлуфенацила
V. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы
5.1 Средства измерений:
- весы аналитические класса точности по ГОСТ Р 53228 — специальный (I), с наибольшим пределом взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г;
- весы лабораторные общего назначения класса точности по ГОСТ Р 53228 — средний (III) с наибольшим пределом взвешивания до 400 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,5 г;
- колбы мерные на 10, 250 и 1000 см3, ГОСТ 1770;
- пипетки мерные на 1,0; 2,0, 5,0 и 10,0 см3, ГОСТ 29227;
- цилиндры мерные на 10, 25, 50, 100, 500 и 1000 см3, ГОСТ 1770;
- хроматографическая система, включающая:
- хроматограф жидкостной с диодно-матричным детектором, снабженный термостатом для колонок с диапазоном температур от плюс 15 до плюс 80 °C и с возможностью использования стандартного автосамплера с дозирующим объемом от 0,1 до 100 мм3 для автоматического ввода пробы в хроматографическую систему;
- компьютерное программное обеспечение, контролирующее работу всего прибора, обеспечивающее сбор и хранение всех хроматограмм в процессе проведения хроматографического анализа, обеспечивающее обработку результатов измерений, вывод и расчет хроматограмм и количественный анализ.
5.2 Реактивы:
- сафлуфенацил, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 99,2%;
- алюминий окись для хроматографии, чистый;
- ацетон, химически чистый;
- ацетонитрил, особой чистоты, УФ-200 нм;
- вода дистиллированная по ГОСТ 6709 и (или) бидистиллированная (вода дистиллированная, перегнанная повторно в стеклянной емкости);
- гелий, очищенный;
- n-Гексан, химически чистый;
- калий марганцовокислый, чистый для анализа, ГОСТ 20490;
- кальций хлористый, чистый;
- кислота соляная, химически чистая для анализа, ГОСТ 3118;
- кислота уксусная, ледяная, химически чистая, ГОСТ 61;
- концентрирующие патроны для твердофазной экстракции с гидрофильным слабокислым сорбентом с постоянной активностью с размером частиц 63 — 200 мкм (С-силикагель) (объем — 1 см3, масса сорбента — 0,6 г) (патрон № 1);
- метилен хлористый, химически чистый;
- натрий сернокислый, безводный, химически чистый, ГОСТ 4166;
- натрий углекислый, кислый, химически чистый, ГОСТ 4201;
- натрий хлористый, химически чистый, ГОСТ 4233;
- флорисил (магния силикат, 99%) для колоночной хроматографии, зернение 60/100 меш.
5.3 Вспомогательные устройства, материалы:
- алонж прямой с отводом для вакуума для работы с концентрирующими патронами — ГОСТ 25336;
- банки полипропиленовые с крышками для экстракции вместимостью 250 см3;
- ванна ультразвуковая с потребляемой мощностью 140 Вт, рабочей частотой 50 Гц, рабочим объемом 4,5 дм3;
- вата медицинская гигроскопическая хлопковая нестерильная, ГОСТ 5556;
- виалы объемом 2 см3, закрываемые завинчивающейся или запрессовывающейся крышкой с тефлонированной резиновой прокладкой, прокалываемой микрошприцем для автоматического дозатора проб;
- воронки делительные на 250 см3, ГОСТ 25336;
- воронки лабораторные, стеклянные, ГОСТ 25336;
- испаритель ротационный вакуумный с ручным подъемником, с диагональным конденсором и объемом испарительной колбы от 50 до 3000 см3, с изменяемой скоростью вращения штока испарителя от 5 до 240 об/мин, с водяной баней с антикоррозионным покрытием объемом 5 дм3 и с диапазоном температур от плюс 20 до плюс 100 °C;
- колбы конические плоскодонные на 100, 250 и 1000 см3, ГОСТ 25336;
- колбы круглодонные со шлифом на 100, 250 см3 и 4000 см3 ТС;
- колонка хроматографическая стальная, длиной 250 мм, с внутренним диаметром 4,6 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами C18;
- колонки хроматографические, стеклянные или пластиковые, длиной 150 — 250 мм и диаметром 15 мм;
- насос диафрагменный, химически стойкий на 100%, с мощностью электропривода 245 Вт, предельным вакуумом 100 мбар/абс, с избыточным давлением 1 бар и скоростью откачки 34 дм3/мин;
- стаканы стеклянные, термостойкие объемом 100 — 1000 см3, ГОСТ 25336;
- установка для перегонки растворителей с круглодонной колбой объемом 4000 см3 и приемной конической колбой объемом 1000 см3;
- фильтры обеззоленные нейтральные, быстро фильтрующие, диаметром 11 см, зольность одного фильтра 0,00072 г;
- фильтры мембранные для очистки растворителей, диаметром 47 мм с отверстиями пор 0,45 мкм;
- центрифуга лабораторная, настольная с максимальным рабочим числом оборотов 4000 об/мин, с рабочим объемом ротора 200 см3 x 4 ячейки, выбираемый временной диапазон работы от 0 до 100 минут и с набором полипропиленовых банок емкостью 200 см3;
- шприц инъекционный многократного применения объемом 10 см3, ГОСТ 22967.
Примечание. Допускается применение других средств измерений, вспомогательного оборудования, а также посуды, реактивов и материалов, не уступающих вышеуказанным по метрологическим и техническим характеристикам.
VI. Требования безопасности
6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.
6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Организация обучения работников безопасности труда — по ГОСТ 12.0.004.
VII. Квалификация операторов
7.1. Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на газовом хроматографе, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.
VIII. Отбор проб
8.1. Отбор проб производится в соответствии с правилами <1>.
<1> Унифицированные правила отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов, утвержденные заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 № 2051-79.
Пробы воды хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре плюс (4 +/- 2) °C не более 10 суток.
Для длительного хранения проб почвы, почву подсушивают при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы могут храниться в темной таре в течение года. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм.
Пробы семян сои подсушивают при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света и хранят в бумажной или тканевой упаковке в сухом, хорошо проветриваемом шкафу, недоступном для грызунов.
Пробы соевого масла хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре плюс (4 +/- 2) °C не более 10 суток.
IX. Условия проведения измерений
9.1 При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха плюс (20 +/- 5) °C, относительной влажности не более 80%;
- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
X. Подготовка к определению
10.1. Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка колонок с окисью алюминия для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на колонках с окисью алюминия, подготовка колонок с флорисилом для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на колонках с флорисилом, проверка хроматографического поведения вещества на концентрирующих патронах № 1, установление градуировочной характеристики.
Подготовка органических растворителей.
10.1.1 Очистка ацетонитрила.
Ацетонитрил, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 5 — 6 часов. Затем ацетонитрил сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 см3 аппарата для перегонки растворителей.
Ацетонитрил перегоняют при температуре плюс 81,5 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше плюс 81,5 °C, отбрасывают.
10.1.2 Очистка хлористого метилена.
Хлористый метилен промывают равным объемом 5% раствора натрия углекислого кислого (безводного), осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 12 — 24 часов. Затем хлористый метилен сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 см3 аппарата для перегонки растворителей. Хлористый метилен перегоняют при температуре плюс 40,0 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше плюс 40,0 °C, отбрасывают.
10.1.3 Очистка гексана.
Гексан, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 5 — 6 часов. Затем гексан сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 см3 аппарата для перегонки растворителей.
Гексан перегоняют при температуре плюс 68,7 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше плюс 68,7 °C, отбрасывают.
10.1.4 Очистка ацетона.
Ацетон помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 см3 аппарата для перегонки растворителей, добавляют к нему марганцовокислый калий из расчета 1 г/дм3. Ацетон перегоняют при температуре плюс 56,2 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше плюс 56,2 °C, отбрасывают.
10.1.5 Приготовление бидистиллированной воды.
Дистиллированную воду помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 см3 от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к ней марганцовокислый калий из расчета 1 г/дм3 и кипятят в течение 6 часов.
Собирают фракции, отогнанные при температуре плюс 100,0 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше плюс 100,0 °C, отбрасывают.
10.2 Приготовление растворов для проведения анализа.
10.2.1 Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ.
Для приготовления подвижной фазы используют свежеперегнанный ацетонитрил, бидистиллированную воду и ледяную уксусную кислоту. Ацетонитрил и бидистиллированную воду предварительно фильтруют через мембранные фильтры для очистки растворителей.
В плоскодонную колбу объемом 1000 см3 помещают 550 см3 ацетонитрила и 450 см3 0,2% водного раствора уксусной кислоты. Смесь тщательно перемешивают.
При использовании градиентного режима хроматографирования компоненты подвижной фазы помещают в разные емкости.
В случае отсутствия в составе хроматографической системе автоматического дегазатора через раствор подвижной фазы пропускают газообразный гелий со скоростью 20 см3/мин в течение 5 минут, после чего его помещают в ультразвуковую ванну для удаления растворенных газов на 1 минуту.
10.2.2 Приготовление рабочих растворов.
10.2.2.1 Приготовление 0,2% водного раствора уксусной кислоты.
В мерную колбу объемом 1000 см3 помещают 500 см3 бидистиллированной воды, прибавляют 2,0 см3 ледяной уксусной кислоты, доводят объем профильтрованной через мембранный фильтр бидистиллированной водой до метки и перемешивают. Раствор используют в качестве компонента подвижной фазы для хроматографического анализа.
10.2.2.2 Приготовление 0,1% раствора уксусной кислоты в ацетонитриле.
В мерную колбу объемом 100 см3 помещают 50 см3 ацетонитрила, прибавляют 0,1 см3 ледяной уксусной кислоты, перемешивают и доводят ацетонитрилом объем в колбе до метки.
10.2.2.3 Приготовление 5% раствора натрия углекислого кислого.
50 г натрия углекислого кислого переносят в мерную колбу на 1000 см3, добавляют 200 — 300 см3 дистиллированной воды, перемешивают содержимое до полного растворения и доводят водой объем в колбе до метки. Раствор используют для очистки хлористого метилена.
10.2.2.4 Приготовление 6 М раствора соляной кислоты.
Мерным цилиндром отбирают 246 см3 концентрированной соляной кислоты и осторожно переносят в мерную колбу на 500 см3, куда предварительно наливают около 100 см3 дистиллированной воды. Затем раствор перемешивают и после охлаждения доводят водой объем в колбе до метки (при приготовлении раствора соблюдать осторожность и работать под тягой).
10.2.2.5. Приготовление смеси ацетонитрила с уксусной кислотой в соотношении 99:1 (по объему).
В мерную колбу объемом 100 см3 помещают 50 см3 ацетонитрила, прибавляют 1 см3 ледяной уксусной кислоты, перемешивают и доводят ацетонитрилом объем в колбе до метки.
10.2.2.6. Приготовление смеси гексан-ацетон-уксусная кислота в соотношении 50:50:0,1 (по объему).
В мерную колбу объемом 100 см3 помещают 50 см3 гексана, 50 см3 ацетона, прибавляют 0,1 см3 ледяной уксусной кислоты. Раствор в колбе перемешивают и используют при очистке экстракта на концентрирующих патронах № 1.
10.2.2.6. Приготовление смеси гексан-ацетон-уксусная кислота в соотношении 50:50:1 (по объему).
В мерную колбу объемом 100 см3 помещают 50 см3 гексана, 50 см3 ацетона, прибавляют 1,0 см3 ледяной уксусной кислоты. Раствор в колбе перемешивают и используют при очистке экстракта на колонках с флорисилом.
10.2.3 Приготовление градуировочных растворов.
10.2.3.1. Стандартный раствор № 1 с концентрацией сафлуфенацила 1,0 мг/см3.
Взвешивают 10 мг сафлуфенацила в мерной колбе объемом 10 см3. Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом. Полученный стандартный раствор № 1 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 1 хранится в холодильнике при температуре не выше плюс (4 +/- 2) °C в течение 3 месяцев.
10.2.3.2 Стандартный раствор № 2 с концентрацией сафлуфенацила 100,0 мкг/см3
Из стандартного раствора № 1 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки ацетонитрилом. Полученный стандартный раствор № 2 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 2 хранится в холодильнике при температуре не выше плюс (4 +/- 2) °C в течение 3 месяцев.
10.2.3.3. Стандартный раствор № 3 с концентрацией сафлуфенацила 10,0 мкг/см3.
Из стандартного раствора № 2 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор № 3 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 2 хранится в холодильнике при температуре не выше плюс (4 +/- 2) °C в течение 3 месяцев.
10.2.3.4. Стандартный раствор № 4 с концентрацией сафлуфенацила 1,0 мкг/см3.
Из стандартного раствора № 3 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 1:1. Стандартный раствор № 4 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике при температуре не выше плюс (4 +/- 2) °C в течение 30 суток.
10.2.3.5. Стандартный раствор № 5 с концентрацией сафлуфенацила 0,5 мкг/см3.
Из стандартного раствора № 4 отбирают пипеткой 5 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 1:1. Стандартный раствор № 5 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике при температуре не выше плюс (4 +/- 2) °C в течение 30 суток.
10.2.3.6. Стандартный раствор № 6 с концентрацией сафлуфенацила 0,2 мкг/см3.
Из стандартного раствора № 4 отбирают пипеткой 2 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 1:1. Стандартный раствор № 6 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике при температуре не выше плюс (4 +/- 2) °C в течение 30 суток.
10.2.3.7. Стандартный раствор № 7 с концентрацией сафлуфенацила 0,1 мкг/см3.
Из стандартного раствора № 4 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 1:1. Стандартный раствор № 7 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике при температуре не выше плюс (4 +/- 2) °C в течение 30 суток.
10.2.3.8. Стандартный раствор № 8 с концентрацией сафлуфенацила 0,07 мкг/см3.
Из стандартного раствора № 7 отбирают пипеткой 7 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 1:1. Стандартный раствор № 4 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике при температуре не выше плюс (4 +/- 2) °C в течение 30 суток.
10.2.3.9. Стандартные растворы сафлуфенацила с концентрацией 5,0; 2,0; 1,0; 0,5; 0,4 и 0,2 мкг/см3 для внесения в контрольные образцы воды и почвы.
Методом последовательного разведения ацетонитрилом стандартного раствора № 3 готовят растворы, содержащие по 5,0; 2,0; 1,0; 0,5; 0,4 и 0,2 мкг/см3 и используют эти растворы для внесения в контрольные образцы воды и почвы. Стандартные растворы для внесения хранятся в холодильнике при температуре не выше плюс (4 +/- 2) °C в течение 30 суток.
10.2.3.10. Стандартные растворы сафлуфенацила с концентрацией 2,0; 1,0; 0,4 и 0,2 мкг/см3 для внесения в контрольные образцы семян и масла сои.
Методом последовательного разведения ацетоном стандартного раствора № 3 готовят растворы, содержащие по 2,0; 1,0; 0,4 и 0,2 мкг/см3 и используют эти растворы для внесения в контрольные образцы семян и масла сои. Стандартные растворы для внесения хранятся в холодильнике при температуре не выше плюс (4 +/- 2) °C в течение 30 суток.
10.3 Установление градуировочной характеристики.
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади (высоты) пика от концентрации сафлуфенацила в растворе (мкг/см3), устанавливают методом абсолютной калибровки по 5-и растворам для градуировки с концентрацией 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 и 0,07 мкг/см3.
В инжектор хроматографа вводят по 30 мм3 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 10.5. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений.
10.4. Подготовка концентрирующих патронов № 1 для очистки экстрактов и проверка хроматографического поведения сафлуфенацила на них.
10.4.1 Подготовка концентрирующих патронов № 1 для очистки экстракта.
Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 см3/мин.
Патрон № 1 устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 см3 (используют как емкость для элюентов).
Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 5 см3 ацетона, затем 5 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 4:1. Элюаты отбрасывают.
Не допускать высыхания поверхности патрона.
10.4.2. Проверка хроматографического поведения сафлуфенацила на концентрирующих патронах № 1.
В отгонную колбу объемом 100 см3 вносят 1 см3 стандартного раствора сафлуфенацила в ацетонитриле с концентрацией 1,0 мкг/см3 и упаривают его досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
Сухой остаток растворяют в 2 см3 ацетона, обмывают стенки колбы, добавляют 8 см3 гексана, перемешивают и вносят на подготовленный патрон. Элюат собирают в чистую отгонную колбу объемом 100 см3, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
Исходную колбу обмывают 10 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 4:1. Элюат собирают в чистую отгонную колбу объемом по 100 см3, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
Исходную колбу обмывают двумя порциями смеси гексан-ацетон-уксусная кислота в соотношении 50:50:0,1 объемом 10 см3 каждая и последовательно вносят их на патрон. Каждую порцию собирают отдельно в отгонные колбы объемом 100 см3 и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C. Отдувают током холодного воздуха до исчезновения запаха уксусной кислоты.
Сухой остаток каждой фракции растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрила водой в соотношении 1:1 и 30 мм3 хроматографируют.
Определяют фракции, содержащие сафлуфенацил, полноту смывания с патрона и необходимый объем элюента.
Изучение поведения сафлуфенацила на концентрирующих патронах № 1 проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии патронов.
10.5. Подготовка колонки с 3 г окиси алюминия для очистки экстракта и проверка хроматографического поведения сафлуфенацила на ней (схема № 1).
10.5.1 Подготовка колонки с 3 г окиси алюминия для очистки экстракта.
В пластиковую или стеклянную колонку диаметром 15 мм помещают 3 г окиси алюминия с зернением 40/250 меш и, аккуратно постукивая по стенкам колонки, формируют слой адсорбента. Непосредственно перед использованием колонку промывают 10 см3 ацетонитрила.
10.5.2. Проверка хроматографического поведения сафлуфенацила на колонке с 3 г окиси алюминия.
В отгонную колбу объемом 100 см3 вносят 1 см3 стандартного раствора сафлуфенацила в ацетонитриле с концентрацией 1,0 мкг/см3 и упаривают его досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
Сухой остаток растворяют в 10 см3 ацетонитрила, тщательно обмывают стенки колбы и наносят на подготовленную колонку. Элюат собирают в чистую отгонную колбу объемом 100 см3, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
Исходную колбу обмывают тремя порциями смеси ацетонитрила с уксусной кислотой в соотношении 99:1 объемом 10 см3 каждая и последовательно вносят их на колонку. Каждую порцию собирают отдельно в отгонные колбы объемом 100 см3 и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C. Отдувают током холодного воздуха до исчезновения запаха уксусной кислоты.
Сухой остаток каждой фракции растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 30 мм3 хроматографируют.
Определяют фракции, содержащие сафлуфенацил, полноту смывания с колонки и необходимый объем элюата.
Изучение поведения сафлуфенацила на колонке проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии окиси алюминия.
10.6. Подготовка колонки с 5 г окиси алюминия для очистки экстракта и проверка хроматографического поведения сафлуфенацила на ней (схема № 2).
10.6.1 Подготовка колонки с 5 г окиси алюминия для очистки экстракта.
В пластиковую или стеклянную колонку диаметром 15 мм помещают 5 г окиси алюминия с зернением 40/250 меш и, аккуратно постукивая по стенкам колонки, формируют слой адсорбента. Непосредственно перед использованием колонку промывают 10 см3 ацетонитрила.
10.6.2. Проверка хроматографического поведения сафлуфенацила на колонке с 5 г окиси алюминия.
В отгонную колбу объемом 100 см3 вносят 1 см3 стандартного раствора сафлуфенацила в ацетонитриле с концентрацией 1,0 мкг/см3 и упаривают его досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
Сухой остаток растворяют в 10 см3 ацетонитрила, тщательно обмывают стенки колбы и наносят на подготовленную колонку. Элюат собирают в чистую отгонную колбу объемом 100 см3, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
Исходную колбу последовательно обмывают двумя порциями раствора 0,1% уксусной кислоты в ацетонитриле объемом 10 см3 каждая и 10 см3 смеси ацетонитрила с уксусной кислотой в соотношении 99:1, и вносят их на колонку. Каждую порцию собирают отдельно в отгонные колбы объемом 100 см3 и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C. Отдувают холодным воздухом до исчезновения запаха уксусной кислоты.
Исходную колбу обмывают еще четырьмя порциями смеси ацетонитрила с уксусной кислотой в соотношении 99:1 объемом 5 см3 каждая и последовательно вносят их на колонку. Каждую порцию собирают отдельно в отгонные колбы объемом 100 см3 и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C. Отдувают холодным воздухом до исчезновения запаха уксусной кислоты.
Сухой остаток каждой фракции растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 30 мм3 хроматографируют.
Определяют фракции, содержащие сафлуфенацил, полноту смывания с колонки и необходимый объем элюата.
Изучение поведения сафлуфенацила на колонке проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии окиси алюминия.
10.7. Подготовка колонки с флорисилом для очистки экстракта и проверка хроматографического поведения сафлуфенацила на ней.
10.7.1 Подготовка колонки с флорисилом для очистки экстракта.
В пластиковую или стеклянную колонку диаметром 15 мм помещают 4 г флорисила с зернением 60/100 меш и, аккуратно постукивая по стенкам колонки, формируют слой адсорбента. На слой флорисила наносят слой безводного сернокислого натрия толщиной 1 см.
В день использования колонку промывают 10 см3 гексана, смыв отбрасывают.
10.7.2. Проверка хроматографического поведения сафлуфенацила на колонке с флорисилом.
В отгонную колбу объемом 100 см3 вносят 1 см3 стандартного раствора сафлуфенацила в ацетонитриле с концентрацией 1,0 мкг/см3 и упаривают его досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
Сухой остаток растворяют в 1 см3 ацетона, тщательно обмывая стенки колбы, добавляют 9 см3 гексана, перемешивают и наносят на подготовленную колонку. Элюат собирают в чистую отгонную колбу объемом 100 см3, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
Исходную колбу последовательно обмывают 10 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 4:1, 10 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 2:1, 10 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 1:1, 10 см3 ацетона и тремя порциями объемом 10 см3 каждая смеси гексан-ацетон-уксусная кислота в соотношении 50:50:1, и наносят их на колонку. Каждую порцию собирают отдельно в отгонные колбы объемом 100 см3 и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C. Отдувают холодным воздухом до исчезновения запаха уксусной кислоты.
Сухой остаток каждой фракции растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 30 мм3 хроматографируют.
Определяют фракции, содержащие сафлуфенацил, полноту смывания с колонки и необходимый объем элюата.
Изучение поведения сафлуфенацила на колонке проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии флорисила.
10.8. Подготовка и кондиционирование колонки для жидкостной хроматографии.
Хроматографическую колонку с предколонкой устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при температуре плюс 30 °C в течение 3 — 4 часов.
XI. Проведение измерений
11.1 Вода.
11.1.1 Экстракция.
Пробу воды объемом 100 см3 помещают в делительную воронку объемом 250 см3, прибавляют 1,0 см3 6 М водного раствора соляной кислоты и перемешивают. Сафлуфенацил экстрагируют тремя порциями хлористого метилена объемом по 30 см3 каждая, встряхивая делительную воронку каждый раз по 2 минуты. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний слой (хлористый метилен) собирают в отгонную колбу объемом 250 см3 через слой безводного сульфата натрия. Обмывают осушитель 5 см3 хлористого метилена, элюаты объединяют в колбе объемом 250 см3 и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани не выше плюс 40 °C.
Остатки кислоты отдувают током холодного воздуха.
Сухой остаток растворяют в 5 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 30 мм3 пробы вводят в хроматограф.
11.2 Почва.
11.2.1. Экстракция и очистка полученного экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей.
Образец почвы массой 20 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции и центрифугирования объемом 200 см3, прибавляют 10 см3 дистиллированной воды, 50 см3 ацетонитрила и помещают на 5 минут в ультразвуковую ванну. Затем пробу центрифугируют 5 минут при скорости 4000 оборотов в минуту. Супернатант фильтруют через бумажный фильтр низкой плотности в делительную воронку объемом 250 см3. Экстракцию повторяют еще два раза, используя 50 см3 ацетонитрила и помещая пробы на 5 минут в ультразвуковую ванну. Пробы центрифугируют в течение 5 минут при скорости 4000 оборотов в минуту. Экстракты фильтруют, объединяют в делительной воронке объемом 250 см3.
К ацетонитрильному экстракту прибавляют 50 см3 гексана и встряхивают делительную воронку 2 минуты. После полного разделения фаз в делительной воронке верхний слой (гексан) отбрасывают, а нижний слой (ацетонитрил) собирают в отгонную колбу объемом 250 см3, пропуская его через слой безводного сульфата натрия, и выпаривают досуха при температуре не выше плюс 40 °C.
11.2.2 Очистка экстракта на колонке с 3 г окиси алюминия (схема № 1).
Сухой остаток, полученный по п. 11.2.1, растворяют в 10 см3 ацетонитрила, тщательно обмывая стенки колбы, наносят на подготовленную колонку с 3 г окиси алюминия, элюат отбрасывают.
Исходную колбу обмывают двумя порциями смеси ацетонитрила с уксусной кислотой в соотношении 99:1 объемом 10 см3 каждая и последовательно вносят их на колонку. Элюаты объединяют в отгонной колбе объемом 100 см3 и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C. Отдувают током холодного воздуха до исчезновения запаха уксусной кислоты.
11.2.3 Очистка экстракта на концентрирующих патронах № 1.
Сухой остаток, полученный по п. 11.2.2, растворяют в 2 см3 ацетона, обмывают стенки колбы, добавляют 8 мл гексана, перемешивают и вносят раствор на подготовленный патрон. Элюат отбрасывают. Исходную колбу обмывают 10 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 4:1 и вносят раствор на патрон. Элюат отбрасывают.
Сафлуфенацил элюируют с патрона 10 см3 смеси гексан-ацетон-уксусная кислота в соотношении 50:50:0,1, элюат собирают в отгонную колбу объемом 100 см3 и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C. Отдувают током холодного воздуха до исчезновения запаха уксусной кислоты.
Сухой остаток растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 30 мм3 хроматографируют.
11.3 Семена сои.
11.3.1 Экстракция.
Образец измельченных семян сои массой 20 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции объемом 250 см3, прибавляют 50 см3 ацетона и помещают на 5 минут в ультразвуковую ванну. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр низкой плотности в отгонную колбу объемом 250 см3. Экстракцию повторяют еще раз, используя 50 см3 ацетона и помещая пробы на 5 минут в ультразвуковую ванну. Экстракты фильтруют, объединяют в отгонной колбе объемом 250 см3 и выпаривают до маслянистого остатка на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
11.3.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей.
Маслянистый остаток, полученный по п. 11.3.1, растворяют в 30 см3 гексана, тщательно обмывают стенки колбы и переносят в сухую делительную воронку объемом 250 см3. Исходную колбу повторно обмывают 30 см3 гексана и объединяют смывы в делительной воронке объемом 250 см3.
Сафлуфенацил экстрагируют тремя порциями ацетонитрила по 30, 30 и 20 см3, каждый раз интенсивно встряхивая воронку 2 минуты. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний слой (ацетонитрил) объединяют в отгонной колбе объемом 250 см3 и упаривают до масляного остатка на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
11.3.3 Очистка экстракта на колонке с 3 г окиси алюминия (схема № 1).
Масляный остаток, полученный по п. 11.3.2, растворяют в 10 см3 ацетонитрила и проводят очистку экстракта по п. 11.2.2. Очистка экстракта на колонке с 3 г окиси алюминия (схема № 1).
11.3.4 Очистка экстракта на колонке с флорисилом
Маслянистый остаток, полученный по п. 11.3.3, растворяют в 1 см3 ацетона, тщательно обмывая стенки колбы, добавляют 9 см3 гексана, перемешивают и вносят на подготовленную колонку. Колонку последовательно промывают 10 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 4:1, 10 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 2:1, 10 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 1:1 и 10 см3 ацетона. Элюаты отбрасывают.
Сафлуфенацил элюируют с колонки 20 см3 смеси гексан-ацетон-уксусная кислота в соотношении 50:50:1, элюат собирают в отгонную колбу объемом 100 см3 и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C. Отдувают током холодного воздуха до исчезновения запаха уксусной кислоты.
Сухой остаток растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 30 мм3 хроматографируют.
11.4 Масло сои.
11.4.1 Экстракция.
Образец масла сои массой 10 г помещают в химический стакан объемом 100 см3, прибавляют 30 см3 гексана, перемешивают и переносят в делительную воронку объемом 250 см3. Химический стакан обмывают последовательно еще двумя порциями гексана объемом по 30 см3 и объединяют с первым смывом в делительной воронке объемом 250 см3.
Химический стакан обмывают 30 см3 ацетонитрила, переносят в делительную воронку с гексановым экстрактом и интенсивно встряхивают 2 минуты. После разделения фаз в делительной воронке нижний ацетонитрильный слой собирают в отгонную колбу объемом 250 см3. Сафлуфенацил экстрагируют еще двумя порциями ацетонитрила объемом по 30 и 20 см3, встряхивая делительную воронку 2 минуты. После разделения фаз нижний ацетонитрильный слой объединяют в отгонной колбе объемом 250 см3 и упаривают до маслянистого остатка на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
11.4.2 Очистка экстракта на колонке с флорисилом.
Маслянистый остаток, полученный по п. 11.4.1, растворяют в 1 см3 ацетона и проводят очистку экстракта по п. 11.3.4. Очистка экстракта на колонке с флорисилом.
11.4.3 Очистка экстракта на колонке с 5 г окиси алюминия (схема № 2).
Сухой остаток, полученный по п. 10.4.2., растворяют в 10 см3 ацетонитрила, тщательно обмывая стенки колбы, наносят на подготовленную колонку с 5 г окиси алюминия, элюат отбрасывают.
Исходную колбу последовательно обмывают двумя порциями раствора 0,1% уксусной кислоты в ацетонитриле объемом 10 см3 и 10 см3 смеси ацетонитрила с уксусной кислотой в соотношении 99:1, и вносят их на колонку, элюаты отбрасывают.
Сафлуфенацил элюируют с колонки 15 см3 смеси ацетонитрила с уксусной кислотой в соотношении 99:1, элюат собирают в отгонную колбу объемом 100 см3 и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C. Отдувают током холодного воздуха до исчезновения запаха уксусной кислоты.
Сухой остаток растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 30 мм3 хроматографируют.
11.5 Условия хроматографирования.
11.5.1 Хроматографическая система.
Колонка хроматографическая стальная, длиной 250 мм, с внутренним диаметром 4,6 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами C18.
Температура колонки: плюс 30 °C.
Подвижная фаза: ацетонитрил с 0,2% водным раствором уксусной кислоты в соотношении 55:45 (по объему) при хроматографировании в изократическом режиме. Соотношение в режиме градиентного элюирования ацетонитрила с 0,2% водным раствором уксусной кислоты (%, по объему): до 13 мин — 55:45; с 13 по 22 мин — 70:30; с 22 по 25 мин — 55:45.
Скорость потока элюента: 1,0 см3/мин.
Чувствительность не менее 8 mAU (миллиединиц абсорбции) на шкалу.
Линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 2 — 20 нг.
Примечание: При хроматографировании проб длительность инъекции не менее 25 мин при работе в изократическом режиме в указанных выше условиях хроматографирования, для того, чтобы выходящие в этот интервал времени матричные пики не искажали результат следующего хроматографического анализа.
Образцы, дающие пики больше, чем стандартный раствор сафлуфенацила с концентрацией 1,0 мкг/см3, соответственно разбавляют.
XII. Обработка результатов измерения
12.1. Для обработки результатов хроматографического анализа используется компьютерное программное обеспечение химического анализа, которое входит в хроматографическую систему.
Альтернативная обработка результатов.
Содержание сафлуфенацила в пробах рассчитывают по формуле, без учета полноты извлечения вещества из проб:
X = \frac{S_{\text{пр}} \cdot A \cdot V}{100 \cdot S_{\text{ст}} \cdot m} \cdot P , (1)
где X — содержание сафлуфенацила в пробе, мг/кг или мг/дм3;
Sст — высота (площадь) пика стандарта, мм;
Sпр — высота (площадь) пика образца, мм;
A — концентрация стандартного раствора, мкг/см3;
V — объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3;
m — масса анализируемого образца, г (см3);
P — содержание сафлуфенацила в аналитическом стандарте, %.
XIII. Проверка приемлемости результатов параллельных определений
13.1. За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости:
\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq r , (2)
где X1, X2 - результаты параллельных определений, мг/кг или мг/дм3;
r — значение предела повторяемости (табл. 1), при этом r = 2,8 \times \sigma_{r} .
При невыполнении условия (2) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.
XIV. Оформление результатов
14.1 Результат анализа представляют в виде:
(\overline{X} \pm \Delta)\text{мг}/\text{кг} при вероятности P = 0,95,
где \overline{X} — среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
\Delta — граница абсолютной погрешности, мг/кг;
\Delta = \frac{(\delta \cdot \overline{X})}{100} ,
где \delta — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.
В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
«- при определении остаточного количества сафлуфенацила в воде содержание вещества в пробе менее 0,005 мг/дм3;»
- при определении остаточного количества сафлуфенацила в почве и семенах сои содержание вещества в пробе менее 0,01 мг/кг;
- при определении остаточного количества сафлуфенацила в масле сои содержание вещества в пробе менее 0,02 мг/кг».
XV. Контроль качества результатов измерений
15.1. Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений, а также контроль стабильности градуировочной характеристики осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1 — 6.
Контроль стабильности градуировочной характеристики.
Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.
При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее двух образцов концентраций для градуировки, содержание сафлуфенацила в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,07 до 1,0 мкг/см3.
Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:
A = \frac{(X - C) \times 100}{C} \leq 10 , (3)
где X — концентрация сафлуфенацила контрольного измерения, мкг/см3;
C — известная концентрация градуировочного раствора сафлуфенацила в смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 (по объему), взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3;
10 — погрешность градуировочной характеристики, %.
Если величина расхождения (A) превышает 10%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов сафлуфенацила, предусмотренных методикой выполнения измерений. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики определяют ее заново согласно п. 10.3.
15.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
Величина добавки Cд должна удовлетворять условию:
C_{\text{д}} \geq \Delta_{\text{л},X} + \Delta_{\text{л},X\prime} , (4)
где \pm \Delta_{\text{л},X} ( \pm \Delta_{\text{л},X\prime}) — характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно) мг/кг, при этом:
\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta ,
где \Delta — граница абсолютной погрешности, мг/кг;
\Delta = \frac{(\delta \cdot \overline{X})}{100} ,
где \delta — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.
Результат контроля процедуры Kк рассчитывают по формуле:
\text{К}_{\text{к}} = \overline{X\prime} - \overline{X} - C_{\text{д}} , (5)
где \overline{X\prime} , \overline{X} , Cд — среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п. 13.1), содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце и концентрация добавки, соответственно, мг/кг.
Норматив контроля K рассчитывают по формуле:
K = \sqrt{\Delta_{\text{л},X\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},X}^{2}} (6)
Проводят сопоставление результата контроля процедуры (Kк) с нормативом контроля (K).
Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:
процедуру анализа признают удовлетворительной.
При невыполнении условия (7) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (7) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
15.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):
\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq R , (8)
где X1, X2 - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
R — предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.
ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ САФЛУФЕНАЦИЛА ИЗ ВОДЫ, ПОЧВЫ, СЕМЯН И МАСЛА СОИ (5 ПОВТОРНОСТЕЙ ДЛЯ КАЖДОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ, P = 0,95)
Библиографические ссылки
1. Федеральный закон от 30.03.1999 № 52-ФЗ «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения».
2. Унифицированные правила отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов, № 2051-79 от 21.08.79 г.
3. ГОСТ Р 8.563 «Государственная система обеспечения единства измерений. Методики (методы) измерений».
4. ГОСТ Р ИСО 5725-(1 — 6) «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».
5. ГОСТ 12.0.004 «Система стандартов безопасности труда. Организация обучения безопасности труда. Общие положения».
6. ГОСТ 12.1.007 «Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности».
7. ГОСТ 12.1.019 «Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты».
8. ГОСТ 12.1.004 «Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования».
9. ГОСТ 12.4.009 «Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание».
10. ГОСТ 12.0.004 «Система стандартов безопасности труда. Организация обучения безопасности труда. Общие положения».
11. ГОСТ Р 53228 «Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания».
12. ГОСТ 1770 (ИСО 1042, ИСО 4788) «Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия».
13. ГОСТ 29227 «Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования».
14. ГОСТ 25336 «Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры».
15. ГОСТ 6709 «Вода дистиллированная. Технические условия».
16. ГОСТ Р 52501 «Вода для лабораторного анализа. Технические условия».
17. ГОСТ 5556 «Вата медицинская гигроскопическая. Технические условия».
18. ГОСТ 9293 «Азот газообразный и жидкий. Технические условия».
19. ГОСТ 2603 «Реактивы. Ацетон. Технические условия»
20. ГОСТ 20490 «Реактивы. Калий марганцовокислый. Технические условия».
21. ГОСТ 4166 «Реактивы. Натрий сернокислый. Технические условия».
22. ГОСТ 4201 «Реактивы. Натрий углекислый кислый. Технические условия».
23. ГОСТ 4233 «Реактивы. Натрий хлористый. Технические условия».
24. ГОСТ 31861 «Вода. Общие требования к отбору проб»
25. ГОСТ 17.4.3.01 «Охрана природы. Почвы. Общие требования к отбору проб».
26. ГОСТ 28168 «Почвы. Отбор проб».
27. ГОСТ 10852 «Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб».
28. ГОСТ 17109 «Соя. Требования при заготовках и поставках»
29. ГОСТ 31760 «Масло соевое. Технические условия».
30. ГОСТ 32190 «Масла растительные. Правила приемки и методы отбора проб».
| ББК 51.215+51.216+51.231 |
|---|