МУК 4.1.3943-23. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в воде, почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур, семенах масличных культур и растительных маслах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием. Методические указания
(утв. Роспотребнадзором 04.07.2023)
Примечание
Документ введен в действие с 04.10.2023.
Утверждаю Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации А. Ю. Попова 4 июля 2023 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ГАЛАУКСИФЕН-МЕТИЛА И ГАЛАУКСИФЕН-КИСЛОТЫ В ВОДЕ, ПОЧВЕ, ЗЕРНЕ И СОЛОМЕ ЗЕРНОВЫХ КОЛОСОВЫХ КУЛЬТУР, СЕМЕНАХ МАСЛИЧНЫХ КУЛЬТУР И РАСТИТЕЛЬНЫХ МАСЛАХ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ С МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЧЕСКИМ ДЕТЕКТИРОВАНИЕМ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ МУК 4.1.3943-23
Дата введения 4 октября 2023 года
1. Разработаны ФГБОУ ВО «Российский государственный аграрный университет — МСХА имени К.А. Тимирязева, Учебно-научный консультационный центр „Агроэкология пестицидов и агрохимикатов“ Минсельхоза России (А.В. Довгилевич, Е.В. Довгилевич, В.А. Нестеренко, Е.Н. Тестова).»
2. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 4 июля 2023 г.
I. Общие положения и область применения
1.1. Настоящие методические указания (далее — МУК) устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (далее — ВЭЖХ) с масс-спектрометрическим детектированием для определения массовых концентраций галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в воде в диапазоне 0,0025 — 0,0250 мг/дм3 и в почве в диапазоне 0,005 — 0,050 мг/кг, а также уровня их остаточных количеств в зерне зерновых колосовых культур, семенах масличных культур и в растительных маслах в диапазоне 0,005 — 0,050 мг/кг, в соломе зерновых колосовых культур в диапазоне 0,01 — 0,10 мг/кг.
1.2 МУК носят рекомендательный характер.
II. Физико-химические свойства
2.1 Физико-химические свойства галауксифен-метила.
Название действующего вещества по ИЮПАК: метил-4-амино-3-хлор-6-(4-хлор-2-фтор-3-метоксифенил)пиридин-2-карбоксилат.
Эмпирическая формула: C14H11Cl2FN2O3.
Агрегатное состояние: порошок.
Цвет, запах: белый, без запаха.
Давление насыщенного пара: 5,9 x 109 (Па) при 20 °C.
Температура плавления: плюс 145,5 °C.
Константа диссоциации (при плюс 20 °C): pKa — 2,84.
Коэффициент распределения в системе октанол/вода при плюс 20 °C: KowlogP = 3,76 (pH 7).
Растворимость в воде (в мг/дм3 при плюс 20 °C): 1,66 (pH 5), 1,67 (pH 7), 1,69 (pH 9).
Растворимость в органических растворителях (в г/дм3 при плюс 20 °C): ацетон — более 250; гептан — 0,00375; 1,2-дихлорэтан — 54,3; ксилол — 8,24; метанол — 31,7; октанол — 8,9.
Галауксифен-метил гидролизуется за 81 день при pH 4, за 155 дней при pH 7, за 3 дня при pH 9.
2.2 Физико-химические свойства галауксифен-кислоты.
Название действующего вещества по ИЮПАК: 4-амино-3-хлор-6-(4-хлор-2-фтор-3-метоксифенил)пиридин-2-карбоновая кислота.
Эмпирическая формула: C13H9Cl2FN2O3.
Агрегатное состояние: порошок.
Цвет, запах: белый, без запаха.
Давление насыщенного пара: 2 x 10-5 (Па) при плюс 20 °C.
Температура плавления: плюс 208 °C.
Константа диссоциации (при плюс 20 °C): pKa — 5,11.
Коэффициент распределения в системе октанол/вода при плюс 20 °C: KowlogP = 0,83 (pH 7).
Растворимость в воде (в мг/дм3 при плюс 20 °C): 102 (pH 5), 3,07 (pH 7), 46,1 (pH 9).
Растворимость в органических растворителях (в г/дм3 при плюс 20 °C): ацетон — 4,4; н-гептан — менее 0,002; 1,2-дихлорэтан — 0,13; ксилол — 0,0085; метанол — 4,2; октанол — 0,43; этилацетат — 1,2.
2.3. Галауксифен-метил и галауксифен-кислота относятся к веществам малоопасным по острой оральной (ЛД50 для крыс более 5000 мг/кг) и дермальной токсичности (ЛД50 для крыс более 5000 мг/кг).
Не обладают канцерогенными, генотоксичными и нейротоксичными свойствами.
2.4. Галауксифен-метил — гербицид из класса арилпиколинатов, применяется как послевсходовый гербицид на зерновых и других культурах для борьбы с широколиственными сорняками.
III. Метод измерения
3.1. Метод основан на определении галауксифен-метила и галауксифен-кислоты с помощью ВЭЖХ на обращенной фазе с использованием тандемного масс-спектрометрического детектора.
Определение галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в пробах воды проводится после ее подкисления и очистки на концентрирующих патронах № 1 с гидрофобным сорбентом с привитыми октадецильными группами.
Определение галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в почве проводится после их экстракции из образцов смесью ацетонитрила с водой и муравьиной кислотой и дальнейшей очистки экстракта на концентрирующих патронах № 1 с гидрофобным сорбентом с привитыми октадецильными группами.
Определение галауксифен-метил и галауксифен-кислоты в зерне зерновых колосовых культур проводится после их экстракции из образцов 0,1%-м раствором муравьиной кислоты в ацетонитриле и дальнейшей очистки экстракта на концентрирующих патронах № 1 с гидрофобным сорбентом с привитыми октадецильными группами.
Определение галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в соломе зерновых колосовых культур проводится после их экстракции из образцов смесью ацетонитрила с водой и муравьиной кислотой и дальнейшей очистки экстракта на концентрирующих патронах № 1 с гидрофобным сорбентом с привитыми октадецильными группами.
Определение галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в семенах масличных культур проводится после их экстракции из образцов ацетонитрилом и дальнейшей очистки экстракта на концентрирующих патронах № 2 с гидрофобным сорбентом на основе сверхсшитого полистирола и на концентрирующих патронах № 1 с гидрофобным сорбентом с привитыми октадецильными группами.
Определение галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в масле масличных культур проводится после растворения образца в гексане и дальнейшей очистки экстракта на концентрирующих патронах № 2 с гидрофобным сорбентом на основе сверхсшитого полистирола и на концентрирующих патронах № 1 с гидрофобным сорбентом с привитыми октадецильными группами.
Идентификация галауксифен-метила и галауксифен-кислоты проводится по времени удерживания, наличию характеристичных фрагментарных ионов и соотношению интенсивностей (площадей) пиков этих ионов. Количественное определение галауксифен-метила и галауксифен-кислоты проводится методом абсолютной калибровки.
В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность метода достигается за счет использования масс-спектрометрического детектора.
IV. Метрологические характеристики
4.1. При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.
Метрологические характеристики
Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в табл. 2.
Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для галауксифен-метила и галауксифен-кислоты
V. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы
5.1 Средства измерений:
- весы аналитические класса точности по ГОСТ Р 53228 — специальный (I) с наибольшим пределом взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г;
- весы лабораторные общего назначения класса точности по ГОСТ Р 53228 — средний (III) с наибольшим пределом взвешивания до 400 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,5 г;
- колбы мерные на 10, 100, 500 и 1000 см3, ГОСТ 1770;
- пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 и 10,0 см3, ГОСТ 29227;
- цилиндры мерные на 10, 25, 50, 100, 500 и 1000 см3, ГОСТ 1770;
- система высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спектрометрическим детектором, включающая модульный жидкостный хроматограф, состоящий из градиентного насоса на два растворителя, позволяющий регулировать поток элюента от 0,001 до 5,0 см3/мин и создавать давление от 0 до 600 бар; вакуумного дегазатора; термостата колонок с двумя независимо нагреваемыми зонами с диапазоном температур от плюс 10 до плюс 80 °C и с возможностью использования стандартного автосамплера с дозирующим объемом от 0,1 до 100 мм3 для автоматического ввода пробы в хроматографическую систему. ВЭЖХ-система соединена с тандемным масс-спектрометрическим детектором типа «тройной квадруполь» с двумя высокопроизводительными турбомолекулярными насосами, позволяющим регистрировать отдельные ионы с заданными массами от 5 до 3000 а.е.м.;
- система оснащена компьютерной системой обработки данных, контролирующей работу всего прибора, обеспечивающей сбор и хранение всех масс-хроматограмм в процессе проведения хромато-масс-спектрометрического анализа, обработку результатов измерений, вывод и расчет масс-хроматограмм и количественный анализ.
5.2 Реактивы:
- галауксифен-метил, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 99,3%;
- галауксифен-кислота, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 97,4%;
- азот, особой чистоты, ГОСТ 9293;
- ацетон, химически чистый;
- ацетонитрил, особой чистоты, УФ-200 нм;
- вода дистиллированная по ГОСТ 6709 и (или) бидистиллированная (вода дистиллированная, перегнанная повторно в стеклянной емкости);
- n-гексан, химически чистый;
- калий марганцовокислый, чистый для анализа, ГОСТ 20490;
- кальций хлористый, чистый;
- кислота муравьиная, чистая для анализа, ГОСТ 5848;
- концентрирующие патроны для твердофазной экстракции с гидрофобным сорбентом с привитыми октадецильными группами (C18) с размером частиц 70Е (масса сорбента — 0,5 г, объем картриджа 6 см3) (патрон № 1);
- концентрирующие патроны для твердофазной экстракции с гидрофобным сорбентом на основе сверхсшитого полистирола с размером частиц 50 — 100 мкм (объем — 1 см3) (патрон № 2);
- натрий сернокислый, безводный, химически чистый, ГОСТ 4166;
- спирт метиловый (метанол), химически чистый, ГОСТ 6995.
5.3 Вспомогательные устройства, материалы:
- аппарат для встряхивания проб с возвратно-поступательным направлением колебаний, с максимальной загрузкой 10 кг, с амплитудой колебаний 30 мм и скоростью от 10 до 300 колебаний в минуту;
- банки полипропиленовые с крышками для экстракции вместимостью 250 см3;
- вата медицинская гигроскопическая хлопковая нестерильная, ГОСТ 5556;
- ванна ультразвуковая с потребляемой мощностью 140 Вт, рабочей частотой 50 Гц, рабочим объемом 4,5 дм3;
- виалы объемом 2 см3, закрываемые завинчивающейся или запрессовывающейся крышкой с тефлонированной резиновой прокладкой, прокалываемой микрошприцем для автоматического дозатора проб;
- виалы с тефлоновыми прокладками, стеклянные, объемом не менее 20 см3;
- воронки делительные на 250 см3, ГОСТ 25336;
- воронки лабораторные, стеклянные, ГОСТ 25336;
- испаритель ротационный вакуумный с ручным подъемником, с диагональным конденсором и объемом испарительной колбы от 50 до 3000 см3, с изменяемой скоростью вращения штока испарителя от 5 до 240 об/мин, с водяной баней с антикоррозионным покрытием объемом 5 дм3 и с диапазоном температур от плюс 20 до плюс 100 °C;
- колбы конические плоскодонные на 100, 250 и 1000 см3, ГОСТ 25336;
- колбы круглодонные со шлифом на 100, 250 см3 и 4000 см3 ТС;
- колонка хроматографическая стальная длиной 100 мм, с внутренним диаметром 4,6 мм, зернением 3,5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами C18;
- насос диафрагменный, химически стойкий на 100%, с мощностью электропривода 245 Вт, предельным вакуумом 100 мбар/абс, с избыточным давлением 1 бар и скоростью откачки 34 дм3/мин;
- печь микроволновая с регулируемой мощностью от 100 ватт;
- предколонка хроматографическая стальная длиной 12,5 мм, внутренним диаметром 2,1 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами C18;
- стаканы стеклянные, термостойкие объемом 100 — 500 см3, ГОСТ 25336;
- установка для перегонки растворителей с круглодонной колбой объемом 4000 см3 и приемной конической колбой объемом 1000 см3;
- фильтры для фильтрации проб с помощью шприца с размером пор 0,45 мкм;
- фильтры для фильтрации органических растворителей и воды с размером пор 0,45 мкм;
- фильтры обеззоленные нейтральные, быстро фильтрующие, диаметром 11 см, зольность одного фильтра 0,00072 г;
- центрифуга лабораторная настольная с максимальным рабочим числом оборотов 4000 об/мин, с рабочим объемом ротора 200 см3 x 4 ячейки, выбираемым временным диапазоном работы от 0 до 100 минут и с набором полипропиленовых банок емкостью 200 см3.
- шарики из углеродистой стали для экстракции диаметром 8 мм.
Примечание. Допускается применение других средств измерений, вспомогательного оборудования, а также посуды, реактивов и материалов, не уступающих вышеуказанным по метрологическим и техническим характеристикам.
VI. Требования безопасности
6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.
6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Организация обучения работников безопасности труда — по ГОСТ 12.0.004.
VII. Квалификация операторов
7.1. Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на газовом хроматографе, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.
VIII. Отбор проб
8.1. Отбор проб производится в соответствии с правилами <1>.
<1> Унифицированные правила отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов, утвержденные заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 № 2051-79.
Пробы воды хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре плюс (4 +/- 2) °C не более 10 суток.
Для длительного хранения проб почвы почву подсушивают при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы могут храниться в темной таре в течение года. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм.
Пробы семян масличных культур подсушивают при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света и хранят в бумажной или тканевой упаковке в сухом хорошо проветриваемом шкафу, недоступном для грызунов.
Пробы растительного масла хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре плюс (4 +/- 2) °C не более 10 суток.
Отобранные пробы зерна и соломы подсушивают до стандартной влажности и хранят в бумажных или тканевых мешочках в сухом хорошо проветриваемом шкафу, недоступном для грызунов.
IX. Условия проведения измерений
9.1 При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха плюс (20 +/- 5) °C, относительной влажности не более 80%;
- выполнение измерений на жидкостном хроматографе с масс-спектрометрическим детектором проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
X. Подготовка к определению
10.1. Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочных характеристик.
Подготовка органических растворителей.
10.1.1 Очистка ацетонитрила.
Ацетонитрил, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 5 — 6 часов. Затем ацетонитрил сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 см3 аппарата для перегонки растворителей.
Ацетонитрил перегоняют при температуре плюс 81,5 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше плюс 81,5 °C, отбрасывают.
10.1.2 Приготовление бидистиллированной воды.
Дистиллированную воду помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 см3 от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к ней марганцовокислый калий из расчета 1 г/дм3 и кипятят в течение 6 часов.
Собирают фракции, отогнанные при температуре плюс 100,0 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше плюс 100,0 °C, отбрасывают.
10.2 Приготовление растворов для проведения анализа.
10.2.1 Приготовление рабочих растворов.
10.2.1.1 Приготовление 0,2%-го водного раствора муравьиной кислоты.
В мерную колбу объемом 1000 см3 помещают 500 см3 бидистиллированной воды, прибавляют 2,0 см3 муравьиной кислоты, перемешивают, объем доводят до метки бидистиллированной водой. Раствор используется как компонент подвижной фазы.
10.2.1.2 Приготовление 0,1%-го водного раствора муравьиной кислоты.
В мерную колбу объемом 100 см3 помещают 50 см3 бидистиллированной воды, прибавляют 0,1 см3 муравьиной кислоты, перемешивают, объем доводят до метки бидистиллированной водой. Раствор используется при очистке экстрактов на концентрирующих патронах № 1.
10.2.1.3. Приготовление 0,2%-го раствора муравьиной кислоты в метаноле.
В мерную колбу объемом 1000 см3 помещают 500 см3 метанола, прибавляют 2,0 см3 муравьиной кислоты, перемешивают, объем доводят до метки метанолом. Раствор используется как компонент подвижной фазы.
10.2.1.4. Приготовление 0,1%-го раствора муравьиной кислоты в метаноле.
В мерную колбу объемом 100 см3 помещают 50 см3 метанола, прибавляют 0,1 см3 муравьиной кислоты, перемешивают, объем доводят до метки метанолом. Раствор используется при очистке экстрактов на концентрирующих патронах № 1 и № 2.
10.2.2 Приготовление градуировочных растворов.
10.2.2.1. Стандартный раствор № 1 с концентрацией галауксифен-метила 100,0 мкг/см3.
Взвешивают 10 мг галауксифен-метила в мерной колбе объемом 100 см3. Навеску растворяют в метаноле и доводят объем до метки метанолом при перемешивании.
10.2.2.2. Стандартный раствор № 2 с концентрацией галауксифен-кислоты 100,0 мкг/см3.
Взвешивают 10 мг галауксифен-кислоты в мерной колбе объемом 100 см3. Навеску растворяют в метаноле, помещают на 5 минут в ультразвуковую ванну и доводят объем до метки метанолом при перемешивании.
Стандартные растворы № 1 и № 2 используют для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочных характеристик, и хранят в морозильной камере при температуре минус (18 +/- 2) °C не более 3 месяцев.
10.2.2.3. Стандартный раствор № 3 с концентрацией галауксифен-метила и галауксифен-кислоты по 1,0 мкг/см3.
Из стандартных растворов № 1 и 2 отбирают пипеткой по 1 см3 каждого раствора и помещают в мерную колбу объемом 100 см3, доводят объем до метки метанолом при перемешивании. Стандартный раствор № 3 используют для приготовления стандартных растворов для установления градуировочных характеристик и для хроматографического исследования. Раствор № 3 хранят в морозильной камере при температуре минус (18 +/- 2) °C не более 3 месяцев.
10.2.2.4. Стандартный раствор № 4 с концентрацией галауксифен-метила и галауксифен-кислоты по 0,1 мкг/см3.
В мерную колбу объемом 50 см3 помещают 5,0 см3 стандартного раствора № 3, доводят объем до метки смесью метанола с водой и муравьиной кислоты в соотношении 50:50:0,1 (по объему), перемешивают. Стандартный раствор № 4 используют для приготовления стандартных растворов для установления градуировочных характеристик. Стандартный раствор № 4 хранят в морозильной камере при температуре минус (18 +/- 2) °C не более 3 месяцев.
10.2.2.5. Стандартный растворы галауксифен-метила и галауксифен-кислоты с концентрацией по 0,003; 0,005; 0,010; 0,020; 0,050 и 0,070 мкг/см3 для установления градуировочной зависимости для определения галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в воде.
Методом последовательного разведения стандартного раствора № 4 смесью метанола с водой и муравьиной кислоты в соотношении 50:50:0,1 (по объему) готовят растворы, содержащие по 0,003; 0,005; 0,010; 0,020; 0,050 и 0,070 мкг/см3. Приготовленные растворы используют для установления градуировочной зависимости для определения галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в воде и для приготовления градуировочных растворов на основе анализируемых матриц. Растворы хранят в морозильной камере при температуре минус (18 +/- 2) °C не более 3 месяцев.
10.2.2.6. Стандартный растворы галауксифен-метила и галауксифен-кислоты с концентрацией по 0,003, 0,005, 0,010, 0,020, 0,050 и 0,070 мкг/см3 для установления градуировочной зависимости для определения галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур, в семенах масличных культур и растительных маслах.
Стандартные растворы для установления градуировочной зависимости для определения галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур, семенах масличных культур и растительных маслах готовятся на основе матрицы.
Градуировочные растворы на основе экстракта анализируемой матрицы готовят, растворяя очищенные экстракты контрольных образцов анализируемых матриц, подготовленные по п. 10, градуировочными растворами галауксифен-метила и галауксифен-кислоты с концентрацией каждого вещества по 0,003; 0,005; 0,010; 0,020; 0,050 и 0,070 мкг/см3, приготовленными по п. 8.2.2.5. Растворы хранят в морозильной камере при температуре минус (18 +/- 2) °C не более 3 месяцев.
10.2.2.7. Стандартный раствор № 10 с концентрацией галауксифен-метила и галауксифен-кислоты по 10,0 мкг/см3.
В мерную колбу объемом 100 см3 помещают по 10,0 см3 стандартного раствора № 1 и № 2, доводят объем до метки метанолом. Стандартный раствор № 10 используют для приготовления растворов для внесения в контрольные образцы. Раствор № 10 хранят в морозильной камере при температуре минус (18 +/- 2) °C не более 3 месяцев.
10.2.2.8. Стандартные растворы галауксифен-метила и галауксифен-кислоты с концентрацией по 2,50; 1,25; 1,00; 0,50; 0,25; 0,125; 0,10 и 0,05 мкг/см3 для внесения в образцы воды, почвы, зерна и соломы зерновых колосовых культур.
Методом последовательного разведения метанолом стандартного раствора № 10 готовят растворы, содержащие по 2,50; 1,25; 1,00; 0,50; 0,25; 0,125; 0,10 и 0,05 мкг/см3 галауксифен-метила и галауксифен-кислоты. Используют подготовленные растворы для внесения в контрольные образцы воды, почвы, зерна и соломы зерновых колосовых культур и для проверки хроматографического поведения на концентрирующих патронах № 1 и № 2.
10.2.2.9. Стандартные растворы галауксифен-метила и галауксифен-кислоты с концентрацией по 0,10; 0,05; 0,02 и 0,01 мкг/см3 для внесения в образцы семян и масла подсолнечника.
Методом последовательного разведения ацетоном стандартного раствора № 10 готовят растворы, содержащие по 0,10; 0,05; 0,02 и 0,01 мкг/см3 галауксифен-метила и галауксифен-кислоты, и используют эти растворы для внесения в контрольные образцы семян и масла подсолнечника.
10.3 Установление градуировочной характеристики.
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость отклика фрагментарного иона, используемого для количественного определения, от концентрации галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в растворе, устанавливают методом абсолютной калибровки по 6 растворам для градуировки с концентрацией 0,003; 0,005; 0,010; 0,020; 0,050 и 0,070 мкг/см3.
Градуировочную зависимость для определения галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в воде устанавливают по 6 растворам для градуировки с концентрацией 0,003; 0,005; 0,010; 0,020; 0,050 и 0,070 мкг/см3 каждого компонента, приготовленным согласно п. 10.2.2.5.
Градуировочную зависимость для определения галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур, семенах масличных культур и растительных маслах устанавливают по 6 растворам для градуировки с концентрацией 0,003; 0,005; 0,010; 0,020; 0,050 и 0,070 мкг/см3 каждого компонента, приготовленным согласно п. 10.2.2.6.
В инжектор хроматографа вводят по 5 мм3 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 11.7. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений.
Производят расчет параметров градуировочной характеристики (при помощи программного обеспечения): формулы зависимости отклика фрагментарного иона от концентрации галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в растворе, коэффициента корреляции, который должен быть не менее 0,995, и регрессионных остатков, которые не должны превышать 20% для каждого уровня градуировочной характеристики.
Если линейность градуировочной характеристики была продемонстрирована, то при анализе серий образцов допускается устанавливать градуировочную характеристику методом абсолютной калибровки при однократном измерении по 5 и более уровням концентраций, охватывающим весь диапазон измерений, выполненных как перед началом серии анализов, так и после ее окончания (рамочная калибровка; не менее 10 измерений не менее чем по пяти уровням концентраций). По полученным данным производят расчет параметров градуировочной характеристики. Рекомендуется в серию анализов образцов включать не более 12 инъекций.
10.4. Подготовка концентрирующих патронов № 1 для очистки экстрактов и проверка хроматографического поведения галауксифен-метила и галауксифен-кислоты на них.
10.4.1 Подготовка концентрирующих патронов № 1 для очистки экстракта.
Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 см3/мин.
Патрон № 1 устанавливают на аллонж с отводом для вакуума.
Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 3 см3 метанола, затем 5 см3 0,1%-го водного раствора муравьиной кислоты. Элюаты отбрасывают, высушивают патрон под вакуумом 5 — 10 секунд.
10.4.2. Проверка хроматографического поведения галауксифен-метила и галауксифен-кислоты на концентрирующих патронах № 1.
В химический стакан объемом 100 см3 помещают 10 см3 0,1%-го водного раствора муравьиной кислоты, вносят 1 см3 раствора аналитического стандарта галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в метаноле с концентрацией каждого вещества 0,1 мкг/см3, перемешивают и вносят на концентрирующий патрон. Элюат собирают в отгонную колбу объемом 100 см3 и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
Исходный стакан обмывают 2 см3 0,1%-го водного раствора муравьиной кислоты, вносят на концентрирующий патрон, элюат собирают в отгонную колбу объемом 100 см3 и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
Высушивают патрон под вакуумом 5 — 10 секунд.
На патрон вносят последовательно две порции по 5 см3 0,1%-го раствора муравьиной кислоты в метаноле. Элюат после прохождения каждой порции растворителей собирают в отдельную отгонную колбу объемом 100 см3 и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
Сухой остаток после упаривания каждой порции элюата растворяют в 5 см3 смеси метанола с водой и муравьиной кислотой в соотношении 50:50:0,1 (по объему) и анализируют на содержание галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в условиях хроматографирования по п. 11.7.
Определяют фракции, содержащие галауксифен-метил и галауксифен-кислоту, полноту смывания с патрона и необходимый объем элюентов.
Изучение поведения галауксифен-метила и галауксифен-кислоты на концентрирующих патронах № 1 проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии патронов.
Примечание: для очистки экстрактов семян подсолнечника и масла подсолнечника кондиционирование концентрирующих патронов № 1 не требуется.
10.5. Подготовка концентрирующих патронов № 2 для очистки экстрактов и проверка хроматографического поведения галауксифен-метила и галауксифен-кислоты на них.
Концентрирующий патрон № 2 (на основе сверхсшитого полистирола) используют для очистки экстрактов семян масличных культур и растительных масел.
10.5.1 Подготовка концентрирующих патронов № 2 для очистки экстракта.
Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 см3/мин.
Патрон № 2 устанавливают на аллонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 см3 (используют как емкость для элюентов).
Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 10 см3 гексана.
10.5.2. Проверка хроматографического поведения галауксифен-метила и галауксифен-кислоты на концентрирующих патронах № 2.
В химический стакан объемом 100 см3 помещают 10 см3 гексана, вносят 1 см3 раствора аналитического стандарта галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в ацетоне с концентрацией каждого вещества 0,1 мкг/см3, перемешивают и вносят на подготовленный концентрирующий патрон. Элюат собирают в отгонную колбу объемом 100 см3 и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
Исходный стакан последовательно обмывают 10 см3 гексана и двумя порциями по 10 см3 0,1%-го раствора муравьиной кислоты в метаноле, последовательно вносят на патрон. Элюат после прохождения каждой порции растворителей собирают в отдельную в отгонную колбу объемом 100 см3 и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
Сухой остаток после упаривания каждой порции элюата растворяют в 2 см3 смеси метанола с водой и муравьиной кислотой в соотношении 50:50:0,1 (по объему) и анализируют на содержание галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в условиях хроматографирования по п. 11.7.
Определяют фракции, содержащие галауксифен-метил и галауксифен-кислоту, полноту смывания с патрона и необходимый объем элюентов.
Изучение поведения галауксифен-метила и галауксифен-кислоты на концентрирующих патронах № 2 проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии патронов.
10.6. Подготовка и кондиционирование колонки для жидкостной хроматографии.
Хроматографическую колонку с предколонкой устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при температуре плюс 40 °C в течение 3 — 4 часов.
XI. Проведение измерений
11.1 Вода.
11.1.1 Подготовка образца воды.
В пробу воды объемом 100 см3 прибавляют 0,1 см3 концентрированной муравьиной кислоты и перемешивают. Отбирают аликвоту объемом 10 см3 образца воды мерным цилиндром объемом 10 см3 и очищают ее на концентрирующем патроне № 1 (C18).
11.1.2 Очистка на концентрирующем патроне № 1 (C18).
Аликвоту образца воды наносят на заранее подготовленный по п. 10.4.1 концентрирующий патрон № 1, элюат отбрасывают. Исходный цилиндр обмывают 2 см3 0,1%-го водного раствора муравьиной кислоты, вносят на концентрирующий патрон, элюат отбрасывают. Высушивают патрон под вакуумом 5 — 10 секунд.
Галауксифен-метил и галауксифен-кислоту элюируют с патрона 5 см3 0,1%-го раствора муравьиной кислоты в метаноле. Элюат собирают в отгонную колбу объемом 100 см3 и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 40 °C.
Сухой остаток после упаривания растворяют в 5 см3 смеси метанола с водой и муравьиной кислотой в соотношении 50:50:0,1 (по объему), пробу переносят в виалу объемом 2 см3 для автоматического дозатора проб и анализируют на содержание галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в условиях хроматографирования по п. 11.7.
11.2 Почва.
11.2.1 Экстракция.
Образец почвы массой 5 г помещают в химический стакан объемом 250 см3, прибавляют 5 см3 дистиллированной воды, 25 см3 смеси ацетонитрила с водой и муравьиной кислотой в соотношении 90:10:0,1 (по объему) и помещают на 1 минуту в микроволновую печь при мощности 350 ватт. Горячий экстракт декантируют в химический стакан объемом 100 см3 (работать в вытяжном шкафу). Экстракцию повторяют еще раз, используя 25 см3 смеси ацетонитрила с водой и муравьиной кислотой в соотношении 90:10:0,1 (по объему) в тех же условиях. Экстракты объединяют в химическом стакане объемом 100 см3, остужают до комнатной температуры и фильтруют через бумажный фильтр низкой плотности в отгонную колбу объемом 100 см3. К экстракту в отгонной колбе прибавляют 5 см3 дистиллированной воды и упаривают до водного остатка (~ 4 — 5 см3) на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C. Затем к водному остатку в колбе прибавляют 5 см3 0,1%-го водного раствора муравьиной кислоты, перемешивают и очищают на концентрирующем патроне № 1 (C18).
11.2.2 Очистка экстракта на концентрирующем патроне № 1 (C18).
На кондиционированный по п. 10.4.1 концентрирующий патрон № 1 вносят подготовленный экстракт и проводят очистку как указано в п. 10.1.2. Очистка на концентрирующих патронах № 1 (C18).
Сухой остаток после упаривания растворяют в 5 см3 смеси метанола с водой и муравьиной кислотой в соотношении 50:50:0,1 (по объему).
Перед анализом пробу дополнительно фильтруют через фильтр с размером пор 0,45 мкм, переносят в виалу объемом 2 см3 для автоматического дозатора проб и анализируют на содержание галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в условиях хроматографирования по п. 10.7.
11.3 Зерно зерновых колосовых культур.
11.3.1 Экстракция.
Образец измельченного зерна массой 5 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции объемом 250 см3, прибавляют 5 см3 дистиллированной воды, 30 см3 0,1%-го раствора муравьиной кислоты в ацетонитриле и помещают на 5 минут в ультразвуковую ванну, а затем на 5 минут на аппарат для встряхивания проб. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр низкой плотности в отгонную колбу объемом 250 см3. Экстракцию повторяют еще два раза порциями по 20 см3 каждая 0,1%-го раствора муравьиной кислоты в ацетонитриле в тех же условиях. Экстракты фильтруют и объединяют с предыдущими в отгонной колбе объемом 250 см3.
К экстракту в колбе прибавляют 10 см3 дистиллированной воды и упаривают до водного остатка (~ 4 — 5 см3) на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
11.3.2 Очистка экстракта на концентрирующем патроне № 1 (C18).
К водному остатку в отгонной колбе прибавляют 5 см3 0,1%-го водного раствора муравьиной кислоты, перемешивают, вносят на кондиционированный по п. 10.4.1 концентрирующий патрон № 1 и проводят очистку, как указано в п. 11.1.2. Очистка на концентрирующих патронах № 1 (C18).
Сухой остаток растворяют в 5 см3 смеси метанола с водой и муравьиной кислотой в соотношении 50:50:0,1 (по объему).
Перед анализом пробу дополнительно фильтруют через фильтр с размером пор 0,45 мкм, переносят в виалу объемом 2 см3 для автоматического дозатора проб и анализируют на содержание галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в условиях хроматографирования по п. 11.7.
11.4 Солома зерновых колосовых культур.
11.4.1 Экстракция.
Образец измельченной соломы массой 5 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции объемом 250 см3, прибавляют 50 см3 смеси ацетонитрила с водой и муравьиной кислотой в соотношении 90:10:0,1 (по объему), и помещают на 5 минут в ультразвуковую ванну, а затем на 5 минут на аппарат для встряхивания проб. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр низкой плотности в отгонную колбу объемом 250 см3. Экстракцию повторяют еще раз, используя 50 см3 смеси ацетонитрила с водой и муравьиной кислотой в соотношении 90:10:0,1 (по объему), в тех же условиях. Экстракт объединяют с предыдущим в отгонной колбе объемом 250 см3.
К экстракту в колбе прибавляют 10 см3 дистиллированной воды и упаривают до водного остатка (~ 4 — 5 см3) на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C. Затем к водному остатку в колбе прибавляют 5 см3 0,1%-го водного раствора муравьиной кислоты, перемешивают и очищают на концентрирующем патроне № 1 (C18).
11.4.2 Очистка экстракта на концентрирующем патроне № 1 (C18).
На кондиционированный по п. 8.4.1 концентрирующий патрон № 1 вносят подготовленный экстракт и проводят очистку как указано в п. 10.1.2. Очистка на концентрирующих патронах № 1 (C18).
Сухой остаток растворяют в 10 см3 смеси метанола с водой и муравьиной кислотой в соотношении 50:50:0,1 (по объему).
Перед анализом пробу дополнительно фильтруют через фильтр с размером пор 0,45 мкм, переносят в виалу объемом 2 см3 для автоматического дозатора проб и анализируют на содержание галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в условиях хроматографирования по п. 11.7.
11.5 Семена масличных культур.
11.5.1 Экстракция.
Образец измельченных семян массой 2 г помещают в плоскодонную колбу объемом 250 см3, прибавляют 1 см3 дистиллированной воды и 30 см3 ацетонитрила, помещают в микроволновую печь и нагревают 1 минуту при мощности 350 ватт. Горячий экстракт фильтруют через бумажный фильтр низкой плотности в отгонную колбу объемом 250 см3 (работать в вытяжном шкафу). Экстракцию повторяют еще 2 раза в тех же условиях, используя каждый раз для экстракции по 30 см3 ацетонитрила. Экстракты объединяют в отгонной колбе объемом 250 см3 и упаривают до маслянистого остатка на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 40 °C.
11.5.2. Очистка экстракта на концентрирующем патроне № 2 (на основе сверхсшитого полистирола).
Маслянистый остаток, полученный по п. 11.5.1, растворяют в 10 см3 гексана и наносят на кондиционированный по п. 10.5.1 концентрирующий патрон № 2. Элюат отбрасывают. Исходную колбу обмывают двумя порциями по 10 см3 гексана, вносят на концентрирующий патрон, элюаты отбрасывают.
Галауксифен-метил и галауксифен-кислоту элюируют с патрона 10 см3 0,1%-го раствора муравьиной кислоты в метаноле. Элюат собирают в отгонную колбу объемом 100 см3 и подвергают очистке на концентрирующем патроне № 1.
11.5.3 Очистка экстракта на концентрирующем патроне № 1 (C18).
Элюат, полученный по п. 11.5.2, наносят на подготовленный по п. 10.4.1 концентрирующий патрон № 1.
Элюат собирают в отгонную колбу объемом 100 см3 и упаривают досуха при температуре не выше плюс 40 °C.
Сухой остаток после упаривания растворяют в 2 см3 смеси метанола с водой и муравьиной кислотой в соотношении 50:50:0,1 (по объему).
Перед анализом пробу дополнительно фильтруют через фильтр с размером пор 0,45 мкм, переносят в виалу объемом 2 см3 для автоматического дозатора проб и анализируют на содержание галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в условиях хроматографирования по п. 11.7.
11.6 Растительные масла.
11.6.1. Очистка образца масла на концентрирующем патроне № 2 (на основе сверхсшитого полистирола).
Образец масла массой 2 г помещают в химический стакан объемом 50 см3, навеску растворяют в 10 см3 гексана, перемешивают и проводят очистку на концентрирующем патроне № 2 (на основе сверхсшитого полистирола) как указано в п. 11.5.2. Очистка экстракта на концентрирующем патроне № 2 (на основе сверхсшитого полистирола).
Галауксифен-метил и галауксифен-кислоту элюируют с патрона 10 см3 0,1%-го раствора муравьиной кислоты в метаноле. Элюат собирают в отгонную колбу объемом 100 см3 и проводят очистку экстракта на концентрирующем патроне № 1 (C18).
11.6.2 Очистка экстракта на концентрирующем патроне № 1 (C18).
Элюат, полученный по п. 10.6.1, наносят на подготовленный по п. 10.4.1 концентрирующий патрон № 1. Элюат собирают в отгонную колбу объемом 100 см3 и упаривают досуха при температуре не выше плюс 40 °C.
Сухой остаток после упаривания растворяют в 2 см3 смеси метанола с водой и муравьиной кислотой в соотношении 50:50:0,1 (по объему).
Перед анализом пробу дополнительно фильтруют через фильтр с размером пор 0,45 мкм, переносят в виалу объемом 2 см3 для автоматического дозатора проб и анализируют на содержание галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в условиях хроматографирования по п. 11.7.
11.7 Хроматографические и масс-спектрометрические условия.
11.7.1. Система высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спектрометрическим детектором.
10.7.2 Хроматографические условия.
Колонка хроматографическая стальная длиной 100 мм, с внутренним диаметром 4,6 мм, зернением 3,5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами C18.
Предколонка хроматографическая стальная длиной 12,5 мм, внутренним диаметром 2,1 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами C18.
Подвижная фаза: A — 0,2%-й водный раствор муравьиной кислоты, B — 0,2%-й раствор муравьиной кислоты в метаноле (% по объему) в градиентном режиме со скоростью потока 0,3 см3/мин.
Градиентный режим потока элюента при определении галауксифен-метила и галауксифен-кислоты
| Время (минуты) | Подвижная фаза A (0,2%-й водный раствор муравьиной кислоты), % |
Подвижная фаза B (0,2%-й раствор муравьиной кислоты в метаноле), % <*> |
|---|---|---|
| 0 | 90 | 10 |
| 7 | 0 | 100 |
| 15 | 0 | 100 |
| 16 | 90 | 10 |
| 18 | 90 | 10 |
Режим переключения шестипортового крана с электроприводом: с 0 по 8 минуту — в слив; с 8 по 15 минуту — в источник масс-детектора; с 15 по 18 минуту — в слив, время стабилизации хроматографической системы после анализа пробы — 2 мин (общее время анализа 20 мин).
11.7.3 Масс-спектрометрические условия.
Источник ионов — электроспрей.
Время подачи элюента в источник масс-детектора: с 8 по 15 минуту.
Газ-осушитель — азот с температурой плюс 300 °C, расход 10 м3/мин.
Расход газа периферийного слоя 11 м3/мин.
Температура газа периферийного слоя плюс 250 °C.
Давление в распылителе 30 psi.
Напряжение на входе в капилляр 3500 В.
Напряжение умножителя: с 0 по 12 минуту — 0 В.
Режим ионизации — положительный.
Режим сканирования — мониторинг множественных реакций (MRM).
- галауксифен-метил: 345 \rightarrow 285,1 — количественный переход, энергия соударения — 17 В; 345 \rightarrow 250,1 — качественный переход, энергия соударения — 33 В. Энергия фрагментации 128 В, время сканирования 50 мс, напряжение на ускорителе ячейки 5 В;
- галауксифен-кислота: 331 \rightarrow 250,1 — количественный переход, энергия соударения — 28 В; 331 \rightarrow 235 — качественный переход, энергия соударения — 44 В. Энергия фрагментации 123 В, время сканирования 50 мс, напряжение на ускорителе ячейки 5 В.
Образцы, дающие пики больше, чем стандартные растворы галауксифен-метила и галауксифен-кислоты с концентрацией 0,07 мкг/см3, разбавляют.
XII. Обработка результатов измерения
12.1. Для обработки результатов хроматографического анализа используется компьютерное программное обеспечение химического анализа, которое входит в хроматографическую систему.
Альтернативная обработка результатов.
Содержание галауксифен-метила или галауксифен-кислоты в пробах рассчитывают по формуле, без учета полноты извлечения вещества из проб:
X = \frac{S_{\text{пр}} \cdot A \cdot V}{100 \cdot S_{\text{ст}} \cdot m} \cdot P, (1)
где X — содержание галауксифен-метила или галауксифен-кислоты в пробе, мг/дм3 или мг/кг;
Sст — высота (площадь) пика стандарта, мм;
Sпр — высота (площадь) пика образца, мм;
A — концентрация стандартного раствора, мкг/см3;
V — объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3;
m — масса анализируемого образца, г (см3);
P — содержание галауксифен-метила или галауксифен-кислоты в аналитическом стандарте, %.
XIII. Проверка приемлемости результатов параллельных определений
13.1. За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (2):
\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq r, (2)
где X1, X2 — результаты параллельных определений, мг/кг или мг/дм3;
r — значение предела повторяемости (табл. 1), при этом r = 2,8 \times \sigma_{r} .
При невыполнении условия (2) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.
XIV. Оформление результатов
14.1 Результат анализа представляют в виде:
(\overline{X} \pm \Delta)\text{мг}/\text{кг} , при вероятности P = 0,95,
где \overline{X} — среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
\Delta — граница абсолютной погрешности, мг/кг;
\Delta = \delta \cdot \overline{X}/100,
где \delta — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.
В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
«При определении остаточных количеств галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в воде содержание веществ в пробе менее 0,0025 мг/дм3.»
При определении остаточных количеств галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в почве, зерне зерновых колосовых культур, семенах масличных культур и в растительных маслах содержание веществ в пробе менее 0,005 мг/кг.
При определении остаточных количеств галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в соломе зерновых колосовых культур содержание веществ в пробе менее 0,01 мг/кг».
XV. Контроль качества результатов измерений
15.1. Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений, а также контроль стабильности градуировочной характеристики осуществляются в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1 — 6.
Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.
При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее двух образцов концентраций для градуировки, содержание галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в которых охватывает весь диапазон концентраций градуировочных характеристик.
Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:
A = \frac{(X - C) \times 100}{C} \leq 20, (3)
где X — концентрация галауксифен-метила и галауксифен-кислоты контрольного измерения, мкг/см3;
C — известная концентрация градуировочного раствора галауксифен-метила и галауксифен-кислоты в смеси 0,01%-го раствора муравьиной кислоты в смеси метанола с водой и муравьиной кислотой в соотношении 50:50:0,1 (по объему) или в растворе контрольного экстракта анализируемой матрицы, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3;
20 — погрешность градуировочной характеристики, %.
Если величина расхождения (A) превышает 20%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов галауксифен-метила и галауксифен-кислоты, предусмотренных методикой выполнения измерений. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики определяют ее заново согласно п. 10.3.
Примечание: в случае, если градуировочная характеристика устанавливается при анализе каждой серии образцов по п. 10.3, контроль стабильности градуировочной характеристики не проводится.
15.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
Величина добавки Cд должна удовлетворять условию:
C_{\text{д}} \geq \Delta_{\text{л},X} + \Delta_{\text{л},X\prime},
где \pm \Delta_{\text{л},X} ( \pm \Delta_{\text{л},X\prime}) — характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:
\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta,
где \Delta — граница абсолютной погрешности, мг/кг;
\Delta = (\delta\overline{X})/100,
где \delta — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.
Результат контроля процедуры Кк рассчитывают по формуле:
\text{К}_{\text{к}} = \overline{X}\prime - \overline{X} - C_{\text{д}}, (5)
где \overline{X}\prime , \overline{X} , Cд — среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п. 12) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце и концентрация добавки соответственно, мг/кг.
Норматив контроля К рассчитывают по формуле:
\text{К } = \sqrt{\Delta_{\text{л},X\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},X}^{2}} .
Проводят сопоставление результата контроля процедуры (Кк) с нормативом контроля (К).
Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:
процедуру анализа признают удовлетворительной.
При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
15.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):
\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq R, (7)
где X1, X2 — результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
R — предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.
Приложение
к МУК 4.1.3943-23
Полнота извлечения галауксифен-метила из образцов воды, почвы, зерна и соломы пшеницы, семян и масла подсолнечника (5 повторностей для каждой концентрации, P = 0,95)
Полнота извлечения галауксифен-кислоты из образцов воды, почвы, зерна и соломы пшеницы, семян и масла подсолнечника (5 повторностей для каждой концентрации, P = 0,95)