---
title: "\"МУК 4.1.3928-23. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств фенпропидина в семенах и масле сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.3928-23"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-3928-23"
---

## "МУК 4.1.3928-23. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств фенпропидина в семенах и масле сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.3928-23. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств фенпропидина в семенах и масле сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 03.07.2023)

> [!IMPORTANT]
> Документ [введен](#p100005) в действие с 03.10.2023.


<a id="p100001"></a>Утверждаю
Руководитель Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека,
Главный государственный санитарный врач
Российской Федерации
**А.Ю.ПОПОВА**
3 июля 2023 года


#### <a id="p100002"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ФЕНПРОПИДИНА**
**В СЕМЕНАХ И МАСЛЕ СОИ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ**
**ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100004"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.3928-23**

<a id="p100005"></a>Дата введения
3 октября 2023 года

1. <a id="p100006"></a>Разработаны ФБУН "Федеральный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана" Роспотребнадзора (С.В. Кузьмин, Н.Е. Федорова, Л.Г. Бондарева).
2. <a id="p100007"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 3 июля 2023 г.
3. <a id="p100008"></a>Введены впервые.


### <a id="p100009"></a>I. Общие положения и область применения


<a id="p100010"></a>1.1. Настоящие методические указания (далее - МУК) устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (далее - ВЭЖХ) для определения массовой концентрации фенпропидина в сое (семена и масло) в диапазонах 0,01 - 0,2 мг/кг без учета разбавления и при разбавлении в 50 раз - 0,01 - 10 мг/кг.

#### <a id="p100011"></a>1.2 МУК носят рекомендательный характер.



### <a id="p100012"></a>II. Физико-химические свойства


<a id="p100013"></a>2.1. Фенпропидин. RS-1-[4-третбутилфенил)-2-метилпропил]пиперидин [<1>](#p100015).

<a id="p100014"></a>

---

<a id="p100015"></a><1> В соответствии с Международным союзом теоретической и прикладной химии (ИЮПАК, англ. International Union of Pure and Applied Chemistry, IUPAC).

<a id="p100016"></a>Брутто-формула - C<sub>19</sub>H<sub>31</sub>N. Молекулярная масса 273,5.

#### <a id="p100017"></a>2.2 Физические и химические свойства:

- <a id="p100018"></a>бледно-желтая слегка вязкая жидкость без запаха;
- <a id="p100019"></a>давление паров: 17 Па, при плюс 25 °C;
- <a id="p100020"></a>растворимость в воде (при плюс 25 °C, мг/дм3): 530 (pH 7), 6,2 (pH 9);
- <a id="p100021"></a>растворимость в органических растворителях: легко смешивается с ацетоном, этанолом, толуолом, н-октаном и гексаном (при плюс 25 °C).
<a id="p100022"></a>Константа диссоциации pKa 10,1 (сильное основание). Стабилен при хранении в закрытом контейнере при комнатной температуре, по крайней мере в течение 3 месяцев. Водные растворы устойчивы к воздействию УФ-света и гидролизу при температуре 80 °C (pH 4,7 и 10).
<a id="p100023"></a>2.3. Фенпропидин является фунгицидом химического класса пиперидинов системного и профилактического действия. Механизм его действия заключается в ингибировании биосинтеза стиролов. Он особенно эффективен против таких болезнетворных микроорганизмов, как Erysiphe graminis, Rhynchosporium secalis и Puccinia.


### <a id="p100024"></a>III. Погрешность измерений


<a id="p100025"></a>3.1. При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в [табл. 3.1](#p100027) для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100026"></a>Таблица 3.1

<a id="p100027"></a>Значения характеристики погрешности, нормативов оперативного
контроля точности, повторяемости, воспроизводимости


<table>
<colgroup><col width="12%"><col width="15%"><col width="15%"><col width="15%"><col width="15%"><col width="15%"><col width="15%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100028"></a>Анализируемый объект</td><td><a id="p100029"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td><a id="p100030"></a>Показатель точности (границы относительной погрешности, P = 0,95), $\pm \delta$ , %</td><td><a id="p100031"></a>Показатель повторяемости (среднеквадратичное отклонение повторяемости), $\sigma_{r}$ , %</td><td><a id="p100032"></a>Показатель воспроизводимости (среднеквадратичное отклонение воспроизводимости), $\sigma_{R}$ , %</td><td><a id="p100033"></a>Предел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных определений r, %</td><td><a id="p100034"></a>Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в разных лабораториях), R, % (P = 0,95)</td></tr>
<tr><td><a id="p100035"></a>Соя (семена)</td><td><a id="p100036"></a>0,01 - 10,00</td><td><a id="p100037"></a>50</td><td><a id="p100038"></a>4,7</td><td><a id="p100039"></a>6,6</td><td><a id="p100040"></a>13</td><td><a id="p100041"></a>19</td></tr>
<tr><td><a id="p100042"></a>Соя (масло)</td><td><a id="p100043"></a>0,01 - 10,00</td><td><a id="p100044"></a>50</td><td><a id="p100045"></a>4,3</td><td><a id="p100046"></a>6,3</td><td><a id="p100047"></a>13</td><td><a id="p100048"></a>18</td></tr>
<tr><td colspan="7"><a id="p100049"></a>Примечание. Диапазон определяемых концентраций, указанный в <a href="#p100027">табл. 3.1</a>, приведен с учетом разбавления образца в 50 раз.</td></tr>
</table>



### <a id="p100050"></a>IV. Метод измерений


<a id="p100051"></a>4.1. Методика основана на определении вещества с помощью ВЭЖХ с ультрафиолетовым детектором.
<a id="p100052"></a>4.2. Содержание фенпропидина в пробах семян и масла сои определяют после извлечения вещества из анализируемых образцов семян сои и масла сои (после растворения масла в гексане) смесью ацетонитрила с водой (80:20 по объему), очистки и концентрирования на картридже, заполненном сорбционным материалом на основе сополимера N-винилпирролидона и дивинилбензола. Элюирование фенпропидином проводят метанолом.
<a id="p100053"></a>4.3. Нижний предел измерения фенпропидина в анализируемом объеме пробы - 1 нг.
<a id="p100054"></a>Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.


### <a id="p100055"></a>V. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы


<a id="p100056"></a>5.1. При выполнении измерений и подготовке проб применяют средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы, приведенные в [табл. 5.1](#p100058) - [5.3](#p100108).

<a id="p100057"></a>Таблица 5.1

<a id="p100058"></a>Средства измерений


| <a id="p100059"></a>Наименование средств измерения | <a id="p100060"></a>Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| --- | --- |
| <a id="p100061"></a>1 | <a id="p100062"></a>2 |
| <a id="p100063"></a>Жидкостный хроматограф с быстросканирующим ультрафиолетовым детектором, снабженный дегазатором, термостатом колонки | <a id="p100064"></a>Внесено в реестр "Утвержденные типы средств измерений" Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений |
| <a id="p100065"></a>Прибор/приборы для измерения атмосферного давления, температуры и относительной влажности воздуха | <a id="p100066"></a>Внесено в реестр "Утвержденные типы средств измерений" Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений |
| <a id="p100067"></a>Весы лабораторные аналитические | <a id="p100068"></a>Предел допустимой погрешности 0,0005 г, ГОСТ Р 53228 |
| <a id="p100069"></a>Весы лабораторные | <a id="p100070"></a>Наибольший предел взвешивания 420 г, предел допустимой погрешности +/- 0,01 г, ГОСТ Р 53228 |
| <a id="p100071"></a>Меры массы | <a id="p100072"></a>ГОСТ OIML R 111-1 |
| <a id="p100073"></a>Цилиндры мерные | <a id="p100074"></a>Вместимостью 25, 100, 500 и 1000 см3. Исполнение 1-4; 1(2-4)-25-2; 1(2-4)-100-2; 1(2-4)-500-2 и 1(2-4)-1000-2 по [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |
| <a id="p100075"></a>Колбы мерные | <a id="p100076"></a>Вместимостью 25, 100, 500 и 1000 см3 типа 2-25-2, 2-100-2, 2-500-2 и 2-1000-2 по [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |
| <a id="p100077"></a>Весы аналитические | <a id="p100078"></a>С пределом взвешивания 110 г, пределом допустимой погрешности 0,001 г по ГОСТ Р 53228 |
| <a id="p100079"></a>Пипетки градуированные | <a id="p100080"></a>Вместимостью 1, 2, 5 и 10 см3 типа 1-1(2)-2-1, 1-1(2)-2-2, 1-1(2)-2-5 и 1-1(2)-2-10 по [ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) |


<a id="p100081"></a>Примечание: допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

<a id="p100082"></a>Таблица 5.2

<a id="p100083"></a>Реактивы


| <a id="p100084"></a>Наименование реактива | <a id="p100085"></a>Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| --- | --- |
| <a id="p100086"></a>Фенпропидин | <a id="p100087"></a>Аналитический стандарт с содержанием основного компонента не менее 95% |
| <a id="p100088"></a>Ацетонитрил | <a id="p100089"></a>Квалификация не ниже "суперградиент для ВЭЖХ" |
| <a id="p100090"></a>Вода для лабораторного анализа | <a id="p100091"></a>Бидистиллированная, деионизованная по [ГОСТ Р 52501](https://bukva.ai/docs/gost-r-52501-2005) |
| <a id="p100092"></a>Калий углекислый (карбонат калия, поташ) | <a id="p100093"></a>Химически чистый прокаленный по [ГОСТ 4221](https://bukva.ai/docs/standart-gost-4221-76) |
| <a id="p100094"></a>Гексан | <a id="p100095"></a>Квалификация не ниже "суперградиент для ВЭЖХ" |
| <a id="p100096"></a>Метиловый спирт (метанол) | <a id="p100097"></a>Химически чистый по [ГОСТ 6995](https://bukva.ai/docs/standart-gost-6995-77) |
| <a id="p100098"></a>Кислота ортофосфорная | <a id="p100099"></a>Химически чистая 85%-я по ГОСТ 6552 |
| <a id="p100100"></a>Кислота серная | <a id="p100101"></a>По [ГОСТ 2184](https://bukva.ai/docs/gost-2184-2013) |
| <a id="p100102"></a>Спирт изопропиловый | <a id="p100103"></a>По [ГОСТ 9805](https://bukva.ai/docs/gost-9805-84) |
| <a id="p100104"></a>Фосфор (V) оксид (фосфорный ангидрид, пентоксид фосфора) | <a id="p100105"></a>Квалификация не ниже "химически чистый" |


<a id="p100106"></a>Примечание: допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующей дополнительной очистки растворителей.

<a id="p100107"></a>Таблица 5.3

<a id="p100108"></a>Вспомогательные устройства, материалы


| <a id="p100109"></a>Вспомогательные устройства, материалы | <a id="p100110"></a>Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| --- | --- |
| <a id="p100111"></a>1 | <a id="p100112"></a>2 |
| <a id="p100113"></a>Баня ультразвуковая | <a id="p100114"></a>Рабочая частота 35 кГц |
| <a id="p100115"></a>Воронки химические конусные | <a id="p100116"></a>Диаметром 40 - 45 мм, ГОСТ 25336 |
| <a id="p100117"></a>Груша резиновая | <a id="p100118"></a>- |
| <a id="p100119"></a>Измельчитель бытовой | <a id="p100120"></a>- |
| <a id="p100121"></a>Набор для фильтрации растворителей через мембрану | <a id="p100122"></a>- |
| <a id="p100123"></a>Установка для перегонки растворителей при атмосферном давлении | <a id="p100124"></a>- |
| <a id="p100125"></a>Холодильник/морозильник бытовой | <a id="p100126"></a>- |
| <a id="p100127"></a>Хроматографическая колонка стальная | <a id="p100128"></a>Длина 250 мм, внутренний диаметр 4,6 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом с привитыми алкильными группами C-8 или C-18, зернением 5 мкм |
| <a id="p100129"></a>Картридж для твердофазной экстракции | <a id="p100130"></a>Содержащий пористый сорбент (60 мг) на основе сополимера N-винилпирролидона и дивинилбензола, с размером частиц 30 - 60 мкм и размером пор 80 - 82Е |
| <a id="p100131"></a>Аллонж прямой с отводом для вакуума (для работ с концентрирующими патронами-картриджами) | <a id="p100132"></a>- |
| <a id="p100133"></a>Ротационный вакуумный испаритель с мембранным насосом | <a id="p100134"></a>Обеспечивающим вакуум до 10 мбар |
| <a id="p100135"></a>Аппарат для встряхивания или орбитальный шейкер | <a id="p100136"></a>Диапазон регулировки оборотов 50 - 200 об/мин, орбита до 10 мм |
| <a id="p100137"></a>Ректификационная колонна | <a id="p100138"></a>Содержащая число теоретических тарелок не менее 30 |
| <a id="p100139"></a>Груша резиновая | <a id="p100140"></a>- |
| <a id="p100141"></a>Насос водоструйный вакуумный | <a id="p100142"></a>- |
| <a id="p100143"></a>Бумажные фильтры средней и низкой плотности, обеззоленные (фильтры) | <a id="p100144"></a>- |
| <a id="p100145"></a>Мембраны микропористые капроновые на шприц | <a id="p100146"></a>Размер пор мембраны - 0,2 мкм |
| <a id="p100147"></a>Шприцы медицинские одноразовые | <a id="p100148"></a>Вместимостью 2 - 5 см3 по [ГОСТ ISO 7886-1](https://bukva.ai/docs/gost-iso-7886-1-2011) |
| <a id="p100149"></a>Пробирки | <a id="p100150"></a>П-1-15, вместимостью 15 см3 по [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |
| <a id="p100151"></a>Манифолд для ТФЭ в комплекте с вакуумным насосом (для работ с патроном для твердофазной экстракции) | <a id="p100152"></a>- |
| <a id="p100153"></a>Пробирки полипропиленовые центрифужные с крышками | <a id="p100154"></a>Вместимостью 50 см3 |
| <a id="p100155"></a>Колбы круглодонные (для упаривания) | <a id="p100156"></a>На шлифе вместимостью 50 и 250 см3, ГОСТ 25336, типы К и Гр |
| <a id="p100157"></a>Виалы хроматографические | <a id="p100158"></a>Вместимость 2 см3 с септой с фторопластовым покрытием |
| <a id="p100159"></a>Колбы конические, плоскодонные | <a id="p100160"></a>На шлифе вместимостью 250 - 300 см3, ГОСТ 25336, типы К и Гр |
| <a id="p100161"></a>Воронка Бюхнера | <a id="p100162"></a>С перегородкой, 80 x 130 мм, ГОСТ 9147 |
| <a id="p100163"></a>Колба Бунзена | <a id="p100164"></a>1-500 ТС, ГОСТ 25336-82 |


<a id="p100165"></a>Примечание: допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.


### <a id="p100166"></a>VI. Требования безопасности


<a id="p100167"></a>6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.
<a id="p100168"></a>6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.
<a id="p100169"></a>6.3. Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.


### <a id="p100170"></a>VII. Условия измерений



#### <a id="p100171"></a>7.1 При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- <a id="p100172"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха плюс (15 - 30) °C и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100173"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


### <a id="p100174"></a>VIII. Подготовка к выполнению измерений



#### <a id="p100175"></a>8.1 Очистка растворителей.

<a id="p100176"></a>8.1.1. Ацетонитрил. Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на 1 дм3 ацетонитрила 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 часа, после чего перегоняют; непосредственно перед использованием ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 дм3 ацетонитрила 10 г карбоната калия). Хранят в емкости из темного стекла.
<a id="p100177"></a>8.1.2. н-Гексан
<a id="p100178"></a>Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

#### <a id="p100179"></a>8.2 Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ.

<a id="p100180"></a>8.2.1. Приготовление раствора ортофосфорной кислоты с массовой долей 0,2% (0,2%-й раствор). В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 500 см3 бидистиллированной или деионизованной воды, 2,0 см3 ортофосфорной кислоты, перемешивают, доводят до метки бидистиллированной или деионизованной водой и еще раз тщательно перемешивают.
<a id="p100181"></a>8.2.2. Приготовление подвижной фазы. В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 600 см3 ацетонитрила и 400 см3 0,2%-го раствора ортофосфорной кислоты, перемешивают, фильтруют и дегазируют.
<a id="p100182"></a>Подвижную фазу хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14-ти дней.
<a id="p100183"></a>8.3. Кондиционирование хроматографической колонки для ВЭЖХ. Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по [п. 8.2.2](#p100181)) при скорости подачи растворителя 0,5 см3/мин до установления стабильной базовой линии.

#### <a id="p100184"></a>8.4 Приготовление градуировочных растворов и растворов внесения.

<a id="p100185"></a>8.4.1. Исходный раствор фенпропидина для градуировки (концентрация 100 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают (0,0100 +/- 0,0005) г фенпропидина, растворяют в 50 - 60 см3 ацетонитрила, доводят ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают.
<a id="p100186"></a>Раствор хранят в холодильнике при температуре плюс (2 - 6) °C не более месяца.
<a id="p100187"></a>8.4.2. Рабочий раствор N 1 фенпропидина для градуировки и внесения (концентрация 10,0 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 10,0 см3 исходного градуировочного раствора с концентрацией 100,0 мкг/см3 [(п. 8.4.1)](#p100185), доводят до метки ацетонитрилом, тщательно перемешивают, получают рабочий раствор N 1 с концентрацией фенпропидина 10,0 мкг/см3.
<a id="p100188"></a>Раствор хранят в холодильнике при температуре плюс (2 - 6) °C не более месяца.
<a id="p100189"></a>Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом "внесено-найдено", а также контроле качества результатов методом "добавок". Для внесения в образцы масла раствор внесения готовят на основе изопропанола.
<a id="p100190"></a>8.4.3. Рабочие растворы N 2 - 6 фенпропидина для градуировки (концентрация 0,05 - 1,0 мкг/см3). В 5 мерных колб вместимостью 100 см3 помещают 0,5; 1,0; 2,5; 5,0; 10 см3 рабочего раствора N 1 с концентрацией 10,0 мкг/см3 [(п. 8.4.2)](#p100187), доводят до метки подвижной фазой, приготовленной по [п. 8.2.2](#p100181), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 6 с концентрациями фенпропидина 0,05; 0,1; 0,25; 0,5; 1,0 мкг/см3.
<a id="p100191"></a>Растворы хранят в холодильнике при температуре плюс 4 - 6 °C не более суток.
<a id="p100192"></a>8.5. Установление градуировочной характеристики. Градуировочную характеристику, выражающую линейную (с угловым коэффициентом) зависимость площади пика от концентрации фенпропидина в растворе, устанавливают методом абсолютной калибровки по 5-ти растворам для градуировки.
<a id="p100193"></a>В инжектор хроматографа вводят по 20 мм3 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования, указанных ниже. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений. Устанавливают площади пиков фенпропидина, на основании которых строят градуировочную зависимость.
<a id="p100194"></a>Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.
<a id="p100195"></a>При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят не менее двух образцов растворов для градуировки, содержание фенпропидина в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,05 до 1,00 мкг/см3. Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:

<a id="p100196"></a> $A = | \frac{(X - C)}{C} | \cdot 100 \leq B,$ (1)

<a id="p100197"></a>где A - величина расхождения, %;
<a id="p100198"></a>X - концентрация фенпропидина в пробе при контрольном измерении, мкг/см3;
<a id="p100199"></a>C - известная концентрация градуировочного раствора фенпропидина, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3;
<a id="p100200"></a>B - норматив контроля погрешности градуировочной характеристики, % (B = 10% при P = 0,95).

#### <a id="p100201"></a>8.6 Приготовление смесей органических растворителей для экстракции.

<a id="p100202"></a>8.6.1. Смесь ацетонитрил - вода = 8:2. В мерную колбу на 500 см3 вносят 400 см3 ацетонитрила и 100 см3 бидистиллированной воды. Тщательно перемешивают.
<a id="p100203"></a>8.6.2. Смесь ацетонитрил - вода = 2:8. В мерную колбу на 500 см3 вносят 100 см3 ацетонитрила и 400 см3 бидистиллированной воды. Тщательно перемешивают.
<a id="p100204"></a>8.7. Подготовка картриджа для очистки и концентрирования. Картридж устанавливают на аллонж с прямым отводом для вакуума. Промывают картридж последовательно 1 см3 метанолом, 1 см3 ацетонитрилом, затем три раза по 1 см3 смесью ацетонитрил - вода, в соотношении 2:8 по объему, приготовленной по [8.6.2](#p100203). Процедуру проводят с использованием вакуума. Скорость элюирования - 15 - 20 капель в минуту. Не допускать высыхания верхнего слоя сорбента в картридже.


### <a id="p100205"></a>IX. Отбор и условия хранения проб


<a id="p100206"></a>9.1. Отбор проб осуществляется в соответствии с методическими документами [<2>](#p100208).

<a id="p100207"></a>

---

<a id="p100208"></a><2> Унифицированные правила отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов, утвержденные заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 N 2051-79, [ГОСТ 31760](https://bukva.ai/docs/gost-31760-2012) "Межгосударственный стандарт. Масло соевое. Технические условия" и [ГОСТ 17109](https://bukva.ai/docs/gost-17109-88) "Межгосударственный стандарт. Соя. Требования при заготовках и поставках".

<a id="p100209"></a>Пробы семян сои подсушивают и хранят при комнатной температуре не более 2-х недель. Для длительного хранения образцы замораживают и хранят при температуре не выше минус 18 °C.
<a id="p100210"></a>Образцы масла готовятся из семян способом горячей экстракции гексаном. Масло анализируется в день его изготовления.


### <a id="p100211"></a>X. Выполнение определения


<a id="p100212"></a>10.1. Семена сои. Образец измельченных семян сои (10 г) помещают в плоскодонную колбу вместимостью 250 - 300 см3, затем добавляют 100 см3 смеси ацетонитрил - вода, приготовленной в соответствии с [п. 8.6.1](#p100202), перемешивают. Оставляют в покое на 15 минут. Затем смесь фильтруют на воронке Бюхнера с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, через двойной бумажный фильтр низкой плотности. Образец повторно экстрагируют 50 см3 смеси ацетонитрил - вода, приготовленной в соответствии с [п. 8.6.1](#p100202), на ультразвуковой ванне в течение 15 минут, раствор фильтруют на воронке Бюхнера. Фильтраты объединяются и переносятся в круглодонную колбу объемом 250 см3. Упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 30 °C до водного остатка (15 - 20 см3). Водный остаток пропускают через подготовленный в соответствии с [п. 8.7](#p100204) картридж со скоростью 15 - 20 капель в минуту, используя разрежение, создаваемое водоструйным насосом. После пропускания пробы картридж четыре раза по 1 см3 промывают смесью ацетонитрил - вода в соотношении 2:8, приготовленной в соответствии с [п. 8.6.2](#p100203).
<a id="p100213"></a>Фенпропидин элюируют с картриджа метанолом 2 раза по 1 см3. Элюат собирают в круглодонную колбу объемом 50 см3. Упаривают на ротационном испарителе при температуре не выше плюс 30 °C до влажного остатка. Остаток в круглодонной колбе растворяют в 2 см3 подвижной фазы, приготовленной в соответствии с [п. 8.2.2](#p100181). Перед хроматографированием пробу дополнительно фильтруют через мембранный фильтр.
<a id="p100214"></a>10.2. Масло сои. Навеску масла массой 10 г помещают в плоскодонную колбу вместимостью 250 - 300 см3, затем добавляют 100 см3 гексана, интенсивно встряхивают в течение 1 мин, затем помещают на ультразвуковую ванну на 15 минут. Смесь переносят в делительную воронку объемом 250 см3, добавляют 50 см3 ацетонитрила и интенсивно встряхивают в течение 1 минуты. Отделяют ацетонитрил от смеси. После чего проводят повторную экстракцию ацетонитрилом (30 см3). Объединенный органический экстракт в круглодонной колбе упаривают при температуре не выше плюс 35 °C на роторном вакуумном испарителе досуха. Сухой остаток растворяют в воде (20 см3), поместив колбу в ультразвуковую ванну на 15 минут.
<a id="p100215"></a>Полученный раствор пропускают через подготовленный в соответствии с [п. 8.7](#p100204) картридж со скоростью 15 - 20 капель в минуту. После пропускания пробы картридж четыре раза по 1 см3 промывают смесью ацетонитрил - вода в соотношении 2:8, приготовленной в соответствии с [п. 8.6.2](#p100203). Фенпропидин элюируют с картриджа метанолом, 2 раза по 1 см3. Элюат собирают в круглодонную колбу объемом 50 см3. Упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 30 °C до влажного остатка. Остаток в круглодонной колбе растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрил - вода, в соотношении 8:2, приготовленной в соответствии с [п. 8.6.1](#p100202).

#### <a id="p100216"></a>10.3 Условия хроматографирования. Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:

- <a id="p100217"></a>жидкостный хроматограф с быстросканирующим ультрафиолетовым детектором, снабженный дегазатором и термостатом колонки;
- <a id="p100218"></a>хроматографическая колонка стальная, длиной 250 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом с привитыми алкильными группами (C-18 или C-8) для удерживания гидрофильных соединений, зернением 5 мкм;
- <a id="p100219"></a>рабочая длина волны: 220 нм;
- <a id="p100220"></a>температура колонки: плюс 30 °C;
- <a id="p100221"></a>подвижная фаза: ацетонитрил - ортофосфорная кислота (0,2%) (60:40 по объему);
- <a id="p100222"></a>скорость потока элюента: 0,5 см3/мин;
- <a id="p100223"></a>объем вводимой пробы: 20 мм3;
- <a id="p100224"></a>линейный диапазон детектирования: 1 - 20 нг.
<a id="p100225"></a>Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочный раствор фенпропидина с концентрацией 1,0 мкг/см3, разбавляют смесью ацетонитрил - ортофосфорная кислота (0,2%), приготовленной в соответствии с [п. 8.2.2](#p100181), не более чем в 50 раз.


### <a id="p100226"></a>XI. Обработка результатов анализа



#### <a id="p100227"></a>11.1 Содержание фенпропидина в пробах (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:


<a id="p100228"></a>X = (C·V)·Кр/m, (2)

<a id="p100229"></a>где V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3;
<a id="p100230"></a>m - масса анализируемого образца, г;
<a id="p100231"></a>C - концентрация фенпропидина, найденная по градуировочному графику в соответствии с площадью хроматографического пика, мкг/см3;
<a id="p100232"></a>Кр - кратность разбавления (если экстракт подвергался разбавлению).
<a id="p100233"></a>*Примечание.* Идентификация и расчет концентрации вещества в пробах могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую систему.


#### <a id="p100234"></a>11.2 Проверка приемлемости результатов параллельных определений.

<a id="p100235"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает [предела повторяемости (3)](#p100236):

<a id="p100236"></a> $\frac{2 \cdot |X_{1} + X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq r,$ (3)

<a id="p100237"></a>где X<sub>1</sub>, X<sub>2</sub> - результаты параллельных определений, мг/кг;
<a id="p100238"></a>r - значение предела повторяемости [(табл. 3.1)](#p100027), при этом $r = 2,8 \cdot \sigma_{r}$ .
<a id="p100239"></a>При невыполнении [условия (3)](#p100236) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


### <a id="p100240"></a>XII. Оформление результатов измерений



#### <a id="p100241"></a>12.1 Результат анализа представляют в виде:


<a id="p100242"></a> $(\overline{X} \pm \Delta)$ , мг/кг, при вероятности P = 0,95, (4)

<a id="p100243"></a>где $\overline{X}$ - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
<a id="p100244"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг.

<a id="p100245"></a> $\Delta = \delta \cdot X/100,$ (5)

<a id="p100246"></a>где $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 3.1](#p100027)), %.
<a id="p100247"></a>Если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде: "Содержание фенпропидина в пробе сои (семена, масло) - менее 0,01 мг/кг" [<3>](#p100249).

<a id="p100248"></a>

---

<a id="p100249"></a><3> 0,01 мг/кг - предел обнаружения фенпропидина в семенах и масле сои.


### <a id="p100250"></a>XIII. Контроль качества результатов измерений


<a id="p100251"></a>13.1. Контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-(1 - 6)](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002). Периодичность и формы контроля определяются руководством по качеству.






## <a id="p100252"></a>БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЕ ССЫЛКИ


1. <a id="p100253"></a>Федеральный закон от 30 марта 1999 г. N 52-ФЗ "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения".
2. <a id="p100254"></a>[ГОСТ Р ИСО 5725-(1 - 6)](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Государственный стандарт Российской Федерации. Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
3. <a id="p100255"></a>ГОСТ Р 53228 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания".
4. <a id="p100256"></a>ГОСТ OIML R 111-1 "Государственная система обеспечения единства измерений".
5. <a id="p100257"></a>[ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) "Межгосударственный стандарт. Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования".
6. <a id="p100258"></a>[ГОСТ Р 52501](https://bukva.ai/docs/gost-r-52501-2005) "Вода для лабораторного анализа. Технические условия".
7. <a id="p100259"></a>[ГОСТ 6995](https://bukva.ai/docs/standart-gost-6995-77) "Государственный стандарт союза ССР. Метанол-яд. Технические условия".
8. <a id="p100260"></a>ГОСТ 6552 "Межгосударственный стандарт. Кислота ортофосфорная. Технические условия".
9. <a id="p100261"></a>ГОСТ 25336 "Межгосударственный стандарт. Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры".
10. <a id="p100262"></a>[ГОСТ 9737](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93) "Межгосударственный стандарт. Посуда лабораторная стеклянная. Шлифы сферические взаимозаменяемые".
11. <a id="p100263"></a>[ГОСТ 21241](https://bukva.ai/docs/trebovaniya-gost-21241-89) "Государственный стандарт союза ССР. Пинцеты медицинские. Общие технические требования и методы испытаний".
12. <a id="p100264"></a>ГОСТ 12.1.004 "Межгосударственный стандарт. Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования".
13. <a id="p100265"></a>ГОСТ 12.1.007 "Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности".
14. <a id="p100266"></a>ГОСТ 12.1.018 "Межгосударственный стандарт. Система стандартов безопасности труда. Пожаровзрывобезопасность статического электричества. Общие требования".
15. <a id="p100267"></a>ГОСТ 12.1.019 "Межгосударственный стандарт. Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты".
16. <a id="p100268"></a>ГОСТ 12.4.009 "Межгосударственный стандарт. Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание".
17. <a id="p100269"></a>[ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) (ИСО 1042-83, ИСО 478-80) "Межгосударственный стандарт. Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия".
18. <a id="p100270"></a>Унифицированные [правила](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов, утвержденные заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 N 2051-79.
19. <a id="p100271"></a>[ГОСТ 31760](https://bukva.ai/docs/gost-31760-2012) "Межгосударственный стандарт. Масло соевое. Технические условия".
20. <a id="p100272"></a>[ГОСТ 17109](https://bukva.ai/docs/gost-17109-88) "Межгосударственный стандарт. Соя. Требования при заготовках и поставках".
21. <a id="p100273"></a>[ГОСТ 2184](https://bukva.ai/docs/gost-2184-2013) "Межгосударственный стандарт. Кислота серная техническая. Технические условия".
22. <a id="p100274"></a>[ГОСТ 9805](https://bukva.ai/docs/gost-9805-84) "Межгосударственный стандарт. Спирт изопропиловый. Технические условия".



<a id="p100275"></a>

---