МУК 4.1.3870-23. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств флуоксапипролина с учетом основного метаболита BCS-CS55621-BDM-pyrazole (BCS-BP32808) в воде и флуоксапипролина в почве методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием. Методические указания
(утв. Роспотребнадзором 23.06.2023)
Примечание
Документ введен в действие с 25.09.2023.
Утверждаю Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации А. Ю. Попова 23 июня 2023 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ФЛУОКСАПИПРОЛИНА С УЧЕТОМ ОСНОВНОГО МЕТАБОЛИТА BCS-CS55621-BDM-PYRAZOLE (BCS-BP32808) В ВОДЕ И ФЛУОКСАПИПРОЛИНА В ПОЧВЕ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ С МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЧЕСКИМ ДЕТЕКТИРОВАНИЕМ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ МУК 4.1.3870-23
Дата введения 25 сентября 2023 года
1. Разработаны ФБУН «Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана» Роспотребнадзора (Кузьмин С.В., Синицкая Т.А., Федорова Н.Е., Гречина М.С., Белицкая В.В.).
2. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 23 июня 2023 г.
I. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ
1.1. Настоящие методические указания (далее — МУК) устанавливают порядок применения высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием для определения в воде массовой концентрации флуоксапипролина и его метаболита BCS-BP32808 в диапазоне (0,0001 — 0,005) мг/дм3 — без разбавления, (0,0001 — 0,25) мг/дм3 — с учетом разбавления в 50 раз; для определения в почве массовой концентрации флуоксапипролина в диапазоне (0,005 — 0,25) мг/кг без разбавления, (0,005 — 12,5) мг/кг — с учетом разбавления в 50 раз.
1.2 МУК носят рекомендательный характер.
II. ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА
2.1. Флуоксапипролин — 2-{(5RS)-3-[2-(1-{[3,5-бис(дифлуорометил)-1Н-пиразол-1-ил] ацетил}пиперидин-4-ил)-1,3-тиазол-4-ил]-4,5-дигидро-1,2-оксазол-5-ил}-3-хлорфенил метансульфонат <1>. Брутто-формула C25H24ClF4N5O5S2. Молекулярная масса 649,1 г/моль.
2.2. Физические и химические свойства. Светло-бежевый порошок со слабым нехарактерным запахом. Давление паров менее 3,0·10-5 мПа (при плюс 20 °C). Растворимость в органических растворителях (при плюс 20 °C, г/дм3): гептан — 0,061, ацетон — 84, метанол — 1,3, толуол — 1,1, октанол — 17, дихлорметан — 143, этилацетат — 15, диметилсульфоксид > 270. Растворимость в воде при плюс 20 °C — 0,08 мг/дм3. Коэффициент распределения в системе н-октанол-вода при 25 °C: Kow logP = 3,4.
2.3. Острая пероральная токсичность для крыс и мышей (ЛД50) 2000 мг/кг, острая дермальная токсичность (ЛД50) > 2000 мг/кг. Острая ингаляционная токсичность (ЛК50) для крыс выше 2,11 мг/л.
2.4. Новый фунгицид, обеспечивающий защиту плодовых культур и винограда от широкого спектра болезней.
2.5. BCS-CS55621-BDM-pyrazole (BCS-BP32808) — 3,5-бис(дифторметил)-1Н-пиразол <1>. Брутто-формула C5H4F4N2. Молекулярная масса 168,1 г/моль. Метаболит флуоксапипролина.
<1> В соответствии с Международным союзом теоретической и прикладной химии (ИЮПАК, англ. International Union of Pure and Applied Chemistry, IUPAC).
III. ПОГРЕШНОСТЬ ИЗМЕРЕНИЙ
3.1. При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 3.1 для соответствующих диапазонов концентраций.
Метрологические характеристики
IV. МЕТОД ИЗМЕРЕНИЙ
4.1. Измерения концентраций флуоксапипролина и его метаболита BCS-BP32808 выполняют методом обращенно-фазовой жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием.
4.2. Очистку и концентрирование проб воды проводят на патронах для твердофазной экстракции с гидрофильно-липофильным сорбентом на основе сополимера N-винилпирролидона и дивинилбензола. Экстракцию вещества из почвы выполняют смесью ацетонитрила с водой (4:1). Дополнительно проводят очистку экстрактов с помощью мембранных шприцевых фильтров с размером пор не более 0,20 мкм.
4.3 Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы — 5 пг.
V. СРЕДСТВА ИЗМЕРЕНИЙ, РЕАКТИВЫ, ВСПОМОГАТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ, УСТРОЙСТВА И МАТЕРИАЛЫ
5.1. При выполнении измерений и подготовке проб применяют средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы, приведенные в таблицах 5.1 - 5.3.
| Наименование средств измерения | Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
|---|---|
| Жидкостный хроматограф с тандемным масс-спектрометрическим детектором: тройной квадруполь, снабженный автоматическим пробоотборником и термостатом колонки | Внесено в реестр «Утвержденные типы средств измерений» Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений |
| Весы лабораторные аналитические | С пределом допустимой погрешности +/- 0,0005 г по ГОСТ Р 53228 |
| Весы лабораторные | С пределом допустимой погрешности +/- 0,01 г по ГОСТ Р 53228 |
| Меры массы | ГОСТ OIML R 111-1 |
| Колбы мерные | Вместимостью 50, 100, 1000 см3 типа 2-50-2, 2-100-2 и 2-1000-2 по ГОСТ 1770 |
| Цилиндр мерный | Вместимостью 25, 50 и 1000 см3, исполнение 1-4, 1(2-4)-25-2, 1(2-4)-50-2 и 1(2-4)-1000-2 по ГОСТ 1770 |
| Пипетки градуированные | Вместимостью 1, 2, 5 и 10 см3 типа 1-1(2)-2-1, 1-1(2)-2-2, 1-1(2)-2-5 и 1-1(2)-2-10 по ГОСТ 29227 |
| Прибор/приборы для измерения атмосферного давления, температуры и относительной влажности воздуха | Внесено в реестр «Утвержденные типы средств измерений» Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений |
Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.
| Наименование реактивов | Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
|---|---|
| Флуоксапипролин | Аналитический стандартный образец с содержанием основного компонента не менее 95% |
| BCS-BP32808, метаболит флуоксапипролина | Аналитический стандартный образец с содержанием основного компонента не менее 95% |
| Азот особой чистоты, сорт 1, в баллонах | ГОСТ 9293 (ИСО 2435) |
| Ацетонитрил | Для ВЭЖХ, чистота не менее 99,9% |
| Вода | Для лабораторного анализа (бидистиллированная или деионизованная) по ГОСТ Р 52501 |
| Метиловый спирт (метанол) | Химически чистый по ГОСТ 6995 |
| Муравьиная кислота | 99,7%, чистая для анализа по ГОСТ 5848 |
Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией.
Вспомогательное оборудование, устройства, материалы
| Наименование вспомогательного оборудования, устройств, материалов | Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
|---|---|
| Аппарат для встряхивания или орбитальный шейкер | Орбита до 10 мм, диапазон регулировки оборотов 50 — 200 об/мин |
| Бутыли из темного стекла | Вместимостью 1000 см3 |
| Виалы хроматографические | Вместимостью 2 см3 с септой с фторопластовым покрытием |
| Груша резиновая | - |
| Манифолд для твердофазной экстракции (ТФЭ) в комплекте с вакуумным насосом (для работ с патронами для твердофазной экстракции) | - |
| Патроны для твердофазной экстракции на основе сополимера N-винилпирролидона и дивинилбензола | Масса сорбента 60 мг, площадь поверхности ~ 831 м2/г, средний размер пор 82 А, средний размер частиц 30 мкм |
| Пробирки полипропиленовые центрифужные с крышками | Вместимостью 50 см3 |
| Стаканы химические с носиком | Вместимостью 100 — 150 см3, типа В-1-100(150) или Н-1-100(150) по ГОСТ 25336 |
| Фильтры мембранные | Для фильтрации проб с помощью шприца, размер пор 0,20 мкм, мембрана — гидрофильная |
| Холодильная/морозильная камера | ГОСТ 26678 |
| Хроматографическая колонка | Стальная, длиной 50 мм, внутренним диаметром 2,1 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18, зернением 1,8 мкм |
| Центрифуга лабораторная, роторная | Максимальная скорость вращения не менее 4000 оборотов/мин |
| Шприцы медицинские одноразовые | Вместимостью 2 см3 по ГОСТ ISO 7886-1 |
Примечание. Допускается использование вспомогательных средств измерений, устройств и материалов с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.
VI. ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ
6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.
6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Организация обучения работников безопасности труда — по ГОСТ 12.0.004.
6.3. При работе с газами, находящимися в баллонах под давлением до 15 МПа (150 кгс/см2), необходимо соблюдать правила <2>. Запрещается открывать вентиль баллона, не установив в нем понижающий редуктор.
<2> Правила промышленной безопасности при использовании оборудования, работающего под избыточным давлением, утвержденные приказом Ростехнадзора от 15.12.2020 № 536 (зарегистрировано Минюстом России 31.12.2020, регистрационный № 61998).
6.4. Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на жидкостном хроматографе с масс-спектрометрическим детектором, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментальное соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.
VII. УСЛОВИЯ ИЗМЕРЕНИЙ
7.1 При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха плюс (15 — 30) °C и относительной влажности не более 80%;
- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией на прибор.
VIII. ПОДГОТОВКА К ВЫПОЛНЕНИЮ ИЗМЕРЕНИЙ
8.1. Выполнению измерений предшествуют следующие операции: подготовка подвижной фазы, кондиционирование хроматографической колонки, приготовление смеси растворителей для экстракции и разбавления рабочих растворов, приготовление растворов для градуировки и внесения, установление градуировочных характеристик, подготовка патронов для твердофазной экстракции, отбор и подготовка проб.
8.2 Приготовление растворов муравьиной кислоты.
8.2.1. Приготовление 0,1%-ного раствора муравьиной кислоты в воде (компонент А подвижной фазы).
В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 500 см3 деионизированной воды, вносят 1,0 см3 муравьиной кислоты, доводят до метки деионизированной водой, перемешивают. При необходимости приготовленный раствор дегазируют. Компонент подвижной фазы хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14-ти дней.
8.2.2 Приготовление 2%-ного раствора муравьиной кислоты в воде.
В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 50 см3 деионизированной воды, вносят 2,0 см3 муравьиной кислоты, доводят до метки деионизированной водой, перемешивают. Хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14-ти дней.
8.3 Кондиционирование хроматографической колонки для ВЭЖХ.
Промывают колонку подвижной фазой при соотношении компонентов А и Б (компонент А — 0,1% раствор муравьиной кислоты в воде, компонент Б — ацетонитрил) 1:1 и скорости подачи растворителя 0,3 см3/мин до установления стабильной базовой линии.
8.4. Приготовление смеси растворителей для экстракции и разбавления рабочих растворов.
В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают с помощью мерного цилиндра 800 см3 ацетонитрила, доводят до метки деионизированной водой, перемешивают. Раствор хранят в герметично закрытой стеклянной емкости не более 14-ти дней.
8.5. Подготовка к работе патронов (картриджей) для твердофазной экстракции.
Патроны устанавливают на манифолд, последовательно промывают 2 см3 метанола и 2 см3 деионизированной воды. Процедуру проводят с использованием вакуума. Скорость элюирования — 2 - 5 см3/мин в минуту. Картриджи готовят непосредственно перед использованием.
8.6 Приготовление градуировочных растворов и растворов внесения.
8.6.1. Исходные растворы флуоксапипролина и его метаболита BCS-BP32808 для градуировки (концентрация 100 мкг/см3).
В две мерные колбы вместимостью 100 см3 помещают раздельно по (0,0100 +/- 0,0005) г флуоксапипролина и BCS-BP32808, растворяют в 50 — 70 см3 ацетонитрила, перемешивают, доводят ацетонитрилом до метки, вновь перемешивают. Растворы хранят в герметично закрытой таре в холодильнике при температуре плюс (2 — 6) °C не более месяца.
Растворы № 1 — 7 и № 1' — 7' готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходным раствором для градуировки.
8.6.2. Раствор № 1 флуоксапипролина и раствор № 1' метаболита BCS-BP32808 для градуировки и внесения (концентрация 1 мкг/см3).
В две мерные колбы вместимостью 100 см3 помещают раздельно по 1 см3 исходных растворов флуоксапипролина и BCS-BP32808 с концентрацией 100 мкг/см3 (п. 8.6.1), разбавляют ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают. Градуировочные растворы № 1 и № 1' хранят в холодильнике в герметично закрытой таре при температуре плюс (2 — 6) °C не более месяца.
8.6.3. Раствор № 2 флуоксапипролина и раствор № 2' метаболита BCS-BP32808 для градуировки и внесения (концентрация 0,1 мкг/см3).
В две мерные колбы вместимостью 100 см3 помещают раздельно по 10 см3 градуировочных растворов № 1 флуоксапипролина и № 1' метаболита BCS-BP32808 с концентрацией 1 мкг/см3 (п. 8.6.2), доводят до метки ацетонитрилом, тщательно перемешивают. Градуировочные растворы № 2 и № 2' хранят в холодильнике в герметично закрытой таре при температуре плюс (2 — 6) °C не более двух недель.
Растворы № 1, № 2, № 1' и № 2' используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения веществ методом «внесено-найдено» и контроля качества результатов измерений методом добавок.
8.6.4. Рабочие растворы № 3 — 7 флуоксапипролина для градуировки (концентрация 0,001 — 0,05 мкг/см3).
В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 5 см3 градуировочного раствора № 1 с концентрацией флуоксапипролина 1 мкг/см3 (п. 8.6.2), доводят до метки смесью растворителей, приготовленной по п. 8.4, тщательно перемешивают, получают рабочий раствор № 3 с концентрацией флуоксапипролина 0,05 мкг/см3.
В 4 мерные колбы вместимостью 100 см3 помещают 10,0; 5,0; 2,0 и 1,0 см3 градуировочных растворов № 2 с концентрацией флуоксапипролина 0,1 мкг/см3 (п. 8.6.3), доводят до метки смесью растворителей, приготовленной по п. 8.4, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 4 — 7 с концентрацией флуоксапипролина 0,01; 0,005; 0,002; 0,001 мкг/см3 соответственно.
Растворы хранятся в холодильнике при температуре плюс (2 — 6) °C не более 1 недели.
8.6.5. Рабочие растворы № 3' — 7' метаболита BCS-BP32808 для градуировки (концентрация 0,001 — 0,05 мкг/см3).
В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 5 см3 градуировочного раствора № 1' с концентрацией BCS-BP32808 1 мкг/см3 (п. 8.6.2), доводят до метки смесью растворителей, приготовленной по п. 8.4, тщательно перемешивают, получают рабочий раствор № 3' с концентрацией BCS-BP32808 0,05 мкг/см3.
В 4 мерные колбы вместимостью 100 см3 помещают 10,0; 5,0; 2,0 и 1,0 см3 градуировочного раствора № 2' с концентрацией BCS-BP32808 0,1 мкг/см3 (п. 8.6.3), доводят до метки смесью растворителей, приготовленной по п. 8.4, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы NN 4' — 7' с концентрацией BCS-BP32808 0,01; 0,005; 0,002 и 0,001 мкг/см3 соответственно.
Растворы хранятся в холодильнике при температуре плюс (2 — 6) °C не более 1 недели.
8.7 Установление градуировочных характеристик.
Градуировочные характеристики, выражающие зависимость площадей пиков от концентраций флуоксапипролина и его метаболита BCS-BP32808 в растворе (мкг/см3), устанавливают методом абсолютной калибровки по 5-ти растворам для градуировки.
В инжектор хроматографа вводят по 5 мм3 каждого градуировочного раствора (N 4 — № 7) для флуоксапипролина и (N 4' — № 7') для метаболита BCS-BP32808 и анализируют в условиях хроматографирования по п. 10.3. Осуществляют не менее 5-ти параллельных измерений. Устанавливают площади пиков флуоксапипролина и его метаболита BCS-BP32808.
8.8 Контроль стабильности градуировочных характеристик.
Контроль стабильности градуировочных характеристик проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.
Проводят измерения не менее двух образцов концентраций для градуировки, содержание флуоксапипролина и его метаболита BCS-BP32808 в которых должно входить в диапазон концентраций от 0,001 до 0,05 мкг/см3.
Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:
A = \frac{|(X - C)|}{C} \cdot 100 \leq B, (1)
где A — величина расхождения, %;
X — концентрация вещества в растворе при контрольном измерении, мкг/см3;
C — известная концентрация градуировочного раствора, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3;
B — норматив контроля погрешности градуировочной характеристики, % (B = 20% при P = 0,95).
Если величина расхождения (A) превышает 20%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов флуоксапипролина и его метаболита BCS-BP32808, предусмотренных методикой измерения. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики устанавливают ее заново согласно п. 8.7.
IX. ОТБОР И ХРАНЕНИЕ ПРОБ
9.1. Отбор проб осуществляется в соответствии с методическими документами <3>.
<3> ГОСТ Р 59024 «Национальный стандарт Российской Федерации. Вода. Общие требования к отбору проб», утвержден и введен в действие Приказом Росстандарта от 10.09.2020 № 640-ст; ГОСТ 17.4.3.01 «Государственный стандарт Российской Федерации. Охрана природы. Почвы. Общие требования к отбору проб», введен в действие Приказом Росстандарта от 01.06.2018 № 302-ст; ГОСТ Р 58595 «Национальный стандарт Российской Федерации. Почвы. Отбор проб», утвержден и введен в действие Приказом Росстандарта от 10.10.2019 № 954-ст.
9.2. Пробы воды отбирают и хранят в бутылях из полиэтилена (полипропилена) при температуре плюс 2 — 6 °C не более недели. При отборе допускается консервация азотной кислотой до pH 3. Пробы почвы (предварительно подсушивают) и хранят при комнатной температуре не более 2-х недель. Для длительного хранения образцы замораживают и хранят при температуре не выше минус 18 °C.
Перед анализом образцы размораживают.
X. ВЫПОЛНЕНИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ
10.1 Вода.
Очистку и концентрирование проб воды проводят на концентрирующих патронах (картриджах). Образец воды объемом 40 см3 пропускают через картридж, подготовленный по п. 8.5, со скоростью прохождения раствора 1 — 2 см3/мин, пропуская раствор до верхнего края сорбента. После нанесения пробы, патрон дополнительно промывают 2 см3 раствора, приготовленного по п. 8.2.2, и удаляют остатки водного раствора под вакуумом. Флуоксапипролин и его метаболит BCS-BP32808 элюируют 4 см3 метанола (последовательно 2 раза по 2 см3), тщательно перемешивают и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 10.3.
10.2 Почва.
Образец массой 5 г помещают в полипропиленовую пробирку на 50 см3, заливают 25 см3 смеси растворителей, приготовленной по п. 8.4, перемешивают и помещают на аппарат для встряхивания на 30 минут. После встряхивания пробу центрифугируют в течение 3 мин при скорости вращения 4000 оборотов/мин. Часть надосадочной жидкости фильтруют через мембранный фильтр (размер пор 0,20 мкм) в виалу и анализируют в условиях хроматографирования по п. 10.3.
10.3. Измерения выполняют на жидкостном хроматографе с масс-спектрометрическим детектором: тройной квадруполь с источником ионизации электроспрей (ESI) при регистрации дочерних положительных ионов (флуоксапипролин) и отрицательных ионов (метаболит BCS-BP32808) после разрушения материнских (регистрация «перехода»). Режим работы: мониторинг множественных реакций (MRM).
Рекомендуемые параметры масс-спектрометрического детектора:
Материнский ион (масса/заряд): 650,09
Дочерние ионы (масса/заряд): 157,1 (количественный расчет), 193,1
Напряжение на фрагментаторе, В: 137
Энергия разрушения (соударения), В: 61 (650,09 -> 157,1), 37 (650,09 -> 193,1)
Материнский ион (масса/заряд): 167,02
Дочерние ионы (масса/заряд): 146,9 (количественный расчет), 126,9
Напряжение на фрагментаторе, В: 81
Энергия разрушения (соударения), В: 13 (167,02 -> 146,9), 21 (167,02 -> 126,9)
Давление на распылителе: 35 psi
Скорость газа распыления (азот): 12 дм3/мин
Скорость осушающего газа (азот): 10 дм3/мин
Температура осушающего газа: плюс 350 °C.
Примечание. Параметры масс-спектрометрического детектора могут различаться в зависимости от марки и модели прибора.
- хроматографическая колонка стальная, длиной 50 мм, внутренним диаметром 2,1 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18, зернением 1,8 мкм;
- температура колонки: плюс 40 °C;
- скорость потока элюента: 0,3 см3/мин;
- объем вводимой пробы: 5 мм3;
- подвижная фаза: 0,1% раствор муравьиной кислоты в воде — ацетонитрил (40:60, по объему).
Линейный диапазон детектирования 5 — 250 пг.
Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочные растворы с концентрацией 0,05 мкг/см3, разбавляют смесью растворителей, приготовленной по п. 8.4 (не более чем в 50 раз).
XI. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ АНАЛИЗА
11.1. Содержание флуоксапипролина с учетом его метаболита BCS-BP32808 в пробах воды (X, мг/дм3) рассчитывают по формуле:
X = \frac{(C\text{ф } + \text{См } \cdot \text{К}) \cdot V_{\text{кон}} \cdot \text{Кр}}{V} , (2)
где Cф (Cм) — концентрация флуоксапипролина (метаболита BCS-BP32808), найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см3;
К — коэффициент пересчета содержания метаболита на эквивалент действующего вещества, равный 3,86 (по соотношению молекулярных масс);
Vкон — объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3 (4 см3);
V — объем анализируемого образца, см3 (40 см3);
Кр — коэффициент разбавления (если экстракт подвергался разбавлению).
11.2 Содержание флуоксапипролина в почве (X', мг/кг) рассчитывают по формуле:
X\prime = \frac{C \cdot V_{\text{кон}} \cdot \text{Кр}}{m} , (3)
где C — концентрация флуоксапипролина, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см3;
Vкон — объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3 (25 см3);
m — масса анализируемого образца, г (5 г);
Кр — коэффициент разбавления (если экстракт подвергался разбавлению).
Идентификация и расчет концентрации веществ в пробах могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую систему.
11.3 Проверка приемлемости результатов параллельных определений.
За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):
\frac{2*|X_{1} - X_{2}|*100}{(X_{1} + X_{2})} \leq r, (4)
где X1, X2 — результаты параллельных определений, мг/кг;
r — значение предела повторяемости (таблица 3.1), при этом r = 2,8 \cdot \sigma_{r} .
При невыполнении условия (4) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.
XII. ОФОРМЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
12.1 Результат количественного анализа представляют в виде:
(\overline{X} \pm \Delta),\text{мг}/\text{дм}^{3},\text{мк}/\text{кг} при вероятности P = 0,95, (5)
где \overline{X} — среднее арифметическое результатов определений, мг/дм3, мг/кг;
\Delta — граница абсолютной погрешности, мг/дм3, мг/кг:
\Delta = \delta \cdot X/100, (6)
где \delta — граница относительной погрешности методики (показатель точности по диапазону концентраций, таблица 3.1), %.
Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.
Если содержание вещества менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
«содержание флуоксапипролина с учетом его метаболита BCS-BP32808 в воде — менее 0,0001 мг/дм3, содержание флуоксапипролина в почве — менее 0,005 мг/кг» <4>.
<4> 0,0001 мг/дм3 — предел обнаружения флуоксапипролина и его метаболита BCS-BP32808 в воде; 0,005 мг/кг — предел обнаружения флуоксапипролина в почве.
XIII. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ
13.1. Контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-(1 — 6). Периодичность и формы контроля определяются руководством по качеству.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЕ ССЫЛКИ
1. Федеральный закон от 30 марта 1999 г. № 52-ФЗ «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения».
2. Приказ Ростехнадзора от 15.12.2020 № 536 «Об утверждении федеральных норм и правил в области промышленной безопасности „Правила промышленной безопасности при использовании оборудования, работающего под избыточным давлением“ (зарегистрирован Минюстом России 31.12.2020, регистрационный № 61998).»
3. ГОСТ Р ИСО 5725-(1 — 6) «Межгосударственный стандарт. Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».
4. ГОСТ Р 53228 «Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания».
5. ГОСТ 29227 «Межгосударственный стандарт. Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования».
6. ГОСТ 1770 «Межгосударственный стандарт. Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия».
7. ГОСТ OIML R 111-1 «Межгосударственный стандарт. Государственная система обеспечения единства измерений (ГСИ). Гири классов E(1), E(2), F(1), F(2), M(1), M(1-2), M(2), M(2-3) и M(3). Часть 1. Метрологические и технические требования».
8. ГОСТ Р 52501 «Вода для лабораторного анализа. Технические условия».
9. ГОСТ ISO 7886-1 «Межгосударственный стандарт. Шприцы инъекционные однократного применения стерильные. Часть 1. Шприцы для ручного использования».
10. ГОСТ 5848 «Государственный стандарт союза ССР. Реактивы. Кислота муравьиная. Технические условия».
11. ГОСТ 6995 «Государственный стандарт союза ССР. Реактивы. Метанол-яд. Технические условия».
12. ГОСТ 25336 «Межгосударственный стандарт. Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры».
13. ГОСТ 26678 «Государственный стандарт союза ССР. Холодильники и морозильники бытовые электрические компрессионные параметрического ряда. Общие технические условия».
14. ГОСТ 9293 (ИСО 2435) «Межгосударственный стандарт. Азот газообразный и жидкий. Технические условия».
15. ГОСТ 12.1.007 «Межгосударственный стандарт. Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности».
16. ГОСТ 12.1.019 «Межгосударственный стандарт. Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты».
17. ГОСТ 12.1.004 «Межгосударственный стандарт. Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования».
18. ГОСТ 12.4.009 «Межгосударственный стандарт. Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание».
19. ГОСТ 12.0.004 «Межгосударственный стандарт. Система стандартов безопасности труда. Организация обучения безопасности труда. Общие положения».
20. ГОСТ 31861 «Межгосударственный стандарт. Вода. Общие требования к отбору проб».
21. ГОСТ 17.4.3.01 «Межгосударственный стандарт. Охрана природы. Почвы. Общие требования к отбору проб».
22. ГОСТ Р 58595 «Почвы. Отбор проб».
23. ГОСТ 27384 «Межгосударственный стандарт. Вода. Нормы погрешности измерений показателей состава и свойств».