МУК 4.1.3859-23. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение массовой концентрации рифампицина в молоке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания
(утв. Роспотребнадзором 22.06.2023)
Примечание
Документ введен в действие с 22.09.2023.
Утверждаю Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации А. Ю. Попова 22 июня 2023 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ИЗМЕРЕНИЕ МАССОВОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ РИФАМПИЦИНА В МОЛОКЕ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ МУК 4.1.3859-23
Дата введения 22 сентября 2023 года
1. Разработаны ФБУН «Федеральный научный центр медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения» (Уланова Т.С., Зайцева Н.В., Карнажицкая Т.Д., Старчикова М.О.).
2. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 2023 г.
I. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ
1.1. Настоящие методические указания (далее — МУК) устанавливают методику измерений массовой концентрации рифампицина в молоке (молоко питьевое, молоко сырое) методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (далее — ВЭЖХ).
Диапазон измерения массовых концентраций рифампицина в молоке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии составляет от 0,008 до 0,4 мг/дм3.
1.2 МУК носят рекомендательный характер.
II. ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ И ТОКСИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА
2.1. Физико-химические свойства представлены в таблице 2.1.
Физико-химические свойства рифампицина
Рифампицин (синонимы: 3-[[(4-метил-1-пиперазинил)имино]метил] рифамицин, рифавет, рифадин, рифалдазин, рифалдин) — полусинтетический антибиотик из группы рифамицинов (рисунок 1).
Рис. 1. Структурная формула рифампицина
2.2 Токсикологические свойства.
Наиболее часто наблюдаемые патологии при интоксикации рифампицином являются сонливость, общая депрессивная деятельность, нарушение дыхания, раздражение желудочно-кишечного тракта, тошнота, рвота и диарея.
III. ПОКАЗАТЕЛИ ТОЧНОСТИ ИЗМЕРЕНИЙ
3.1. При соблюдении всех регламентированных условий и проведении анализа в точном соответствии с данной методикой, значения погрешности (и ее составляющих) результатов измерений не превышают значений, приведенных в таблице 3.1.
Диапазон измерений массовых концентраций рифампицина в молоке, значения показателей точности, правильности, повторяемости, воспроизводимости
IV. МЕТОД ИЗМЕРЕНИЯ
4.1. Измерение массовой концентрации рифампицина в молоке проводят методом ВЭЖХ со спектрофотометрическим детектированием в обращенно-фазном режиме хроматографирования. Извлечение рифампицина из молока осуществляют жидкостной экстракцией ацетонитрилом с последующей очисткой экстракта способом диффузионной твердофазной экстракции, степень экстракции рифампицина из молока 86%. Количественное определение рифампицина в экстракте проводят методом абсолютной градуировки.
Нижний предел измерения рифампицина в анализируемом объеме пробы (20 мм3) — 1,6 нг.
V. СРЕДСТВА ИЗМЕРЕНИЙ, ВСПОМОГАТЕЛЬНЫЕ УСТРОЙСТВА, МАТЕРИАЛЫ, РЕАКТИВЫ
5.1. При выполнении измерений и подготовке проб применяют средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы, приведенные в таблице 5.1.
Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы
| Наименование средств измерений, стандартных образцов, вспомогательных устройств, материалов и реактивов | Обозначение и наименование документов, в соответствии с которыми выпускают средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы |
| 1 | 2 |
| Средства измерений | |
| Жидкостный хроматограф со спектрофотометрическим детектором | - |
| Весы неавтоматического действия I класса точности; наибольший предел взвешивания 220 г, наименьший предел взвешивания 0,001 г | ГОСТ Р 53228 |
| Колбы мерные: 2-25-2 2-50-2 | ГОСТ 1770 |
| Пипетки градуированные: 1-2-1-1 1-2-1-2 1-2-1-5 1-2-1-10 | ГОСТ 29227 |
| Дозаторы жидкости механические одноканальные переменного объема с одноразовыми наконечниками вместимостью: (1 — 10) см3, (100 — 1000) мм3 | - |
| Секундомер механический СОПпр-2а-3, диапазон шкал: от 0 до 30 мин; от 0 до 60 с | - |
| Метеоскоп-М, диапазон измерений: - относительной влажности воздуха от 3% до 97%, - температуры воздуха от минус 40 °C до 85 °C, - давления воздуха от 80 до 110 кПа | - |
| Примечание. Допускается использование других средств измерений утвержденных типов, обеспечивающих измерения с установленной точностью. | |
| Реактивы | |
| Аналитический стандарт рифампицина, содержание основного компонента не менее 97% | - |
| Ацетонитрил для жидкостной хроматографии, сорт «0» | - |
| Метанол для жидкостной хроматографии | ТУ 6-09-1709 |
| Дистиллированная вода | ГОСТ 6709 |
| Вода для лабораторного анализа, степень чистоты 1 | ГОСТ Р 52501 |
| Аскорбиновая кислота, содержание основного компонента не менее 99,0% | - |
| Натрия гидроокись | ГОСТ 4328 |
| Экстракционные наборы VetexQ для анализа мясных и молочных продуктов, содержащие смесь солей для экстракции (состав: сульфат магния:хлорид натрия:цитрат натрия трехзамещенный 2-водный:цитрат натрия двузамещенный 1,5-водный в соотношении 4:1:1:0,5, массовые доли) и смесь для очистки экстракта (состав: магния сульфат, сорбент C18 в соотношении 1:6, массовые доли) | |
| Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, изготовленных по другой документации, в том числе импортных. | |
| Вспомогательные устройства и материалы | |
| Хроматографическая колонка металлическая с обращенно-фазным сорбентом, зернение 5 мкм, длина 150 мм, внутренний диаметр 4,6 мм | - |
| Предколонка, заполненная обращенно-фазным сорбентом, зернение 5 мкм, длина 12,5 мм, внутренний диаметр 4,6 мм | - |
| Шкаф сушильный электрический, диапазон рабочих температур от плюс 50 °C до плюс 200 °C | - |
| Шприц медицинский одноразовый типа «Луер», вместимость 2 см3 ГОСТ ИСО 7886 | |
| Фильтры шприцевые мембранные гидрофильные из политетрафторэтилена (ПТФЭ), диаметр фильтра 15 мм, размер пор 0,2 мкм | - |
| Установка для фильтрации растворителей | - |
| Вакуумный насос для фильтрации растворителей, максимальное давление 0,025 МПа (250 мбар) | - |
| Хроматографические виалы с завинчивающимися крышками, вместимость 2 см3 | - |
| Центрифуга с охлаждением, обеспечивающая рабочую температуру 4 °C, допустимая скорость центрифугирования не менее 4000 об/мин | - |
| Пробирки полипропиленовые конические градуированные с завинчивающимися крышками, вместимость 15 см3 и 50 см3 | - |
| Вакуумный центрифужный концентратор | - |
| Примечание. Допускается использование других вспомогательных устройств и материалов аналогичного назначения, технические характеристики которых не уступают указанным. | |
| VI. ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ | |
6.1 При выполнении измерений соблюдают меры противопожарной безопасности в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.004, имеются средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009 и соблюдаются правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019.
6.2 При работе в лаборатории необходимо соблюдать правила техники безопасности <1>.
<1> ПНД Ф 12.13.1-03 «Методические рекомендации. Техника безопасности при работе в аналитических лабораториях (общие положения)».
6.3 При работе с химическими реактивами соблюдают требования безопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.007 и ГОСТ 12.1.005. Помещение должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией.
6.4. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать гигиенические нормативы <2>, а также соответствовать ГОСТ 12.1.005.
<2> СанПиН 1.2.3685-21 «Гигиенические нормативы и требования к обеспечению безопасности и (или) безвредности для человека факторов среды обитания», утвержденные постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 28.01.2021 № 2 (зарегистрировано Минюстом России 29.01.2021 № 62296).
6.5. При выполнении измерений на жидкостном хроматографе соблюдают меры безопасности, указанные в руководстве по правилам эксплуатации прибора.
6.6. Утилизацию растворов после выполнения измерений проводят в соответствии с инструкцией по обращению с химическими отходами, действующей на предприятии.
VII. КВАЛИФИКАЦИЯ ОПЕРАТОРОВ
7.1. К выполнению измерений и обработке результатов допускаются лица, имеющие квалификацию не ниже инженера-химика с опытом работы на жидкостном хроматографе, освоившие метод измерений и получившие удовлетворительные результаты оперативного контроля процедуры измерений.
VIII. УСЛОВИЯ ИЗМЕРЕНИЙ
8.1 При выполнении приготовления растворов и подготовке проб в лаборатории соблюдают следующие условия:
- температура воздуха плюс (20 +/- 5) °C;
- атмосферное давление от 84,0 до 106,7 кПа (от 630 до 800 мм рт. ст.);
- влажность воздуха от 30% до 80%.
8.2. Выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендуемых технической документацией прибора.
IX. ПОДГОТОВКА К ВЫПОЛНЕНИЮ ИЗМЕРЕНИЙ
9.1 Подготовка посуды.
Используемую посуду вымыть моющим раствором, промыть проточной водопроводной водой, ополоснуть дистиллированной водой и высушить в сушильном шкафу при температуре плюс 105 +/- 2 °C.
9.2 Приготовление растворов.
9.2.1 Подвижная фаза для элюирования.
В стеклянной емкости смешивают метанол и дистиллированную воду в соотношении 70:30 (объемные доли) или задают состав подвижной фазы на двух каналах насоса жидкостного хроматографа.
9.2.2 Натрия гидроокись, раствор с массовой долей 10%.
Взвешивают (5,0 +/- 0,0005) г натрия гидроокиси, переносят в мерную колбу вместимостью 50 см3, приливают 30 см3 дистиллированной воды, перемешивают до полного растворения натрия гидроокиси, после охлаждения раствора до комнатной температуры доводят дистиллированной водой до метки, закрывают пробкой и перемешивают. Срок хранения раствора 6 месяцев в пластмассовой посуде с крышкой при комнатной температуре.
9.2.3. Исходный раствор рифампицина в ацетонитриле с массовой концентрацией 200 мг/дм3.
Взвешивают (10 +/- 0,5) мг рифампицина, переносят в мерную колбу вместимостью 50 см3, доводят ацетонитрилом до метки, закрывают пробкой и перемешивают. Массовая концентрация рифампицина в исходном растворе составляет 200 мг/дм3. Используют свежеприготовленный раствор.
9.2.4. Разбавленный раствор рифампицина в ацетонитриле с массовой концентрацией 10 мг/дм3 для градуировки № 1.
В мерную колбу вместимостью 50 см3 вносят 2,5 см3 исходного раствора рифампицина с концентрацией 200 мг/дм3, доводят ацетонитрилом до метки, закрывают пробкой и перемешивают. Массовая концентрация рифампицина в разбавленном растворе № 1 составляет 10 мг/дм3. Используют свежеприготовленный раствор.
9.2.5. Разбавленный раствор рифампицина в ацетонитриле с массовой концентрацией 1 мг/дм3 для градуировки № 2.
В мерную колбу вместимостью 50 см3 вносят 0,25 см3 исходного раствора рифампицина с концентрацией 200 мг/дм3, доводят ацетонитрилом до метки, закрывают пробкой и перемешивают. Массовая концентрация рифампицина в разбавленном растворе № 2 составляет 1 мг/дм3. Используют свежеприготовленный раствор.
9.2.6. Раствор рифампицина для идентификации с массовой концентрацией 1,2 мг/дм3.
В мерную колбу вместимостью 25 см3 вносят 0,15 см3 исходного раствора рифампицина с концентрацией 200 мг/дм3, 8 см3 дистиллированной воды, 0,3 г аскорбиновой кислоты, доводят ацетонитрилом до метки, закрывают пробкой и перемешивают до полного растворения аскорбиновой кислоты. Массовая концентрация рифампицина в растворе для идентификации составляет 1,2 мг/дм3. Используют свежеприготовленный раствор.
9.3 Подготовка хроматографической колонки.
Колонку устанавливают в хроматограф. Подают смесь метанола и дистиллированной воды в соотношении 70:30 (объемные доли) до установления равновесия колонки, которое определяют по стабильности нулевой линии детектора. Проводят холостую разгонку в режиме работы хроматографа (п. 9.4.4).
9.4 Установление градуировочной характеристики.
9.4.1. Градуировочную характеристику, выражающую зависимость величины площади хроматографического пика (в условных единицах, у.е.) от концентрации рифампицина в молоке (мг/дм3), устанавливают на 3 сериях градуировочных растворов рифампицина. Каждую серию, состоящую из пяти градуировочных растворов, готовят из разбавленных растворов рифампицина в ацетонитриле для градуировки № 1 и № 2, приготовленных по п. 9.2.3 - 9.2.4.
9.4.2. Для построения градуировочной характеристики в градуированные полипропиленовые пробирки вместимостью 50 см3 вносят дозатором молоко, растворы рифампицина в ацетонитриле для градуировки с концентрацией 1 мг/дм3 или 10 мг/дм3 в количестве, указанном в таблице 9.1. Затем в каждую пробирку добавляют 0,2 г аскорбиновой кислоты, закрывают крышкой и перемешивают. Используют свежеприготовленные градуировочные растворы.
Градуировочные растворы для определения рифампицина в молоке в диапазоне концентраций от 0,008 до 0,4 мг/дм3
9.4.3 Подготовка градуировочных растворов к анализу.
В каждую пробирку с градуировочным раствором рифампицина в молоке вносят 0,2 г аскорбиновой кислоты, добавляют дозатором 1 см3 раствора натрия гидроокиси с массовой долей 10%, закрывают крышкой и перемешивают 1 мин, затем добавляют 10 см3 ацетонитрила, закрывают крышкой и тщательно перемешивают 1 — 2 мин, прибавляют 2,5 г смеси солей для экстракции, закрывают крышкой и тщательно перемешивают 1 — 2 мин. Растворы центрифугируют со скоростью вращения 4000 об/мин в течение 10 мин при температуре плюс 4 °C, отбирают дозатором 8 см3 верхнего слоя (ацетонитрильный экстракт) в полипропиленовые градуированные пробирки вместимостью 15 см3 и упаривают экстракты в вакуумном центрифужном концентраторе при комнатной температуре до объема 1 см3. В пробирки с упаренными экстрактами добавляют 0,5 см3 дистиллированной воды и 0,02 г аскорбиновой кислоты, закрывают крышками и слегка перемешивают до полного растворения аскорбиновой кислоты. Растворы фильтруют через фильтры шприцевые мембранные с диаметром пор 0,2 мкм в хроматографические виалы и аликвотную часть (20 мм3) анализируют на жидкостном хроматографе в рабочем режиме работы хроматографа. Параллельно проводят анализ холостой пробы (нулевая точка), которую вычитают, в случае обнаружения рифампицина, при построении градуировочной зависимости.
9.4.4 Режим работы хроматографа:
- колонка с обращенной фазой <3>, внутренний диаметр 4,6 мм, длина 150 мм, размер частиц 5 мкм;
- элюент: смесь метанол:дистиллированная вода в соотношении 70:30 (объемные доли);
| - режим элюирования | изократический; |
|---|---|
| - скорость движения элюента | 0,7 см3/мин; |
| - температура термостата колонки | плюс 30 °C; |
| - спектрофотометрический детектор, длина волны | 340 нм. |
<3> Например, Eclipse XDB C18.
9.4.5 Градуировочный коэффициент рассчитывают по формуле:
K = \frac{\sum_{i = 1}^{n} C_{i}/S_{i}}{n} , (1)
где Ci — массовая концентрация рифампицина в i-ом градуировочном растворе, мг/дм3;
Si — среднее значение трех измерений площади пика рифампицина, полученное при анализе i-го градуировочного раствора, условные единицы, у.е.;
n — количество градуировочных смесей (n = 5).
Градуировку проводят при смене реактивов или разделительной колонки. Один раз в год градуировочную характеристику устанавливают заново.
9.4.6 Контроль стабильности градуировочной характеристики.
Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят 1 раз в квартал в анализируемой серии измерений. Образцами для контроля стабильности являются градуировочные растворы, выбранные таким образом, чтобы массовая концентрация рифампицина соответствовала нижней и верхней границе и середине диапазона построения градуировочной характеристики. Градуировка признается стабильной при выполнении условия:
где C — заданная массовая концентрация рифампицина в градуировочном растворе, мг/дм3;
X — результат измерения массовой концентрации рифампицина в образце для градуировки, мг/дм3.
При невыполнении условия (2) эксперимент повторяют с другим градуировочным раствором. При повторном невыполнении условия стабильности градуировочной характеристики выясняют и устраняют причины нестабильности, строят новую градуировочную характеристику.
X. ОТБОР И ПОДГОТОВКА ПРОБ К АНАЛИЗУ, ВЫПОЛНЕНИЕ ИЗМЕРЕНИЙ
10.1 Отбор проб.
Для анализа отбирают пипеткой или дозатором пробу молока из упаковки в количестве 10 см3 в полипропиленовую коническую градуированную пробирку вместимостью 50 см3. Анализируют 2 параллельные пробы молока.
10.2 Подготовка проб.
В каждую пробирку с отобранной пробой вносят 0,2 г аскорбиновой кислоты, закрывают крышкой и перемешивают в течение 1 мин, добавляют 1 см3 10% водного раствора натрия гидроокиси, закрывают крышкой и перемешивают 1 мин, добавляют по 10 см3 ацетонитрила, закрывают крышкой и тщательно перемешивают 1 — 2 мин, затем прибавляют 2,5 г смеси солей для экстракции, закрывают крышкой и тщательно перемешивают 1 — 2 мин. Пробы центрифугируют со скоростью вращения 4000 об/мин в течение 10 мин при температуре плюс 4 °C, отбирают дозатором 8 см3 верхнего слоя (ацетонитрильный экстракт) в полипропиленовые градуированные пробирки вместимостью 15 см3 и упаривают экстракты в вакуумном центрифужном концентраторе при комнатной температуре до объема 1 см3. В пробирки с упаренными экстрактами добавляют 0,5 см3 дистиллированной воды и 0,02 г аскорбиновой кислоты, закрывают крышками и слегка перемешивают до полного растворения аскорбиновой кислоты. Пробы фильтруют через фильтры шприцевые мембранные с диаметром пор 0,2 мкм в хроматографические виалы.
10.3 Порядок выполнения измерений.
Для измерения массовой концентрации рифампицина в пробе (мг/дм3) анализируют 20 мм3 экстракта, полученного по п. 10.2, в условиях повторяемости в рабочем режиме хроматографа (п. 9.4.4).
10.4. Идентификацию рифампицина на хроматограмме проводят путем сравнения времен удерживания хроматографических пиков, полученных при анализе пробы и раствора рифампицина для идентификации, приготовленного в соответствии с п. 9.2.5.
XI. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ
11.1 Массовую концентрацию рифампицина в молоке рассчитывают по формуле:
где C — массовая концентрация рифампицина в молоке, мг/дм3;
\overline{a} — среднее значение двух параллельных измерений площади хроматографического пика рифампицина в экстракте, у.е.;
K — градуировочный коэффициент.
11.2. За результат измерения \overline{C} принимают среднее арифметическое значение двух параллельных определений C1, C2, для которых выполняется условие:
|C_{1} - C_{2}| \leq 0,01 \cdot r \cdot \frac{C_{1} + C_{2}}{2} , (4)
где r — предел повторяемости, % (относительное значение).
Значения предела повторяемости приведены в таблице 11.1.
Диапазон измерений массовой концентрации рифампицина в молоке, в экстракте, значения пределов повторяемости, воспроизводимости при доверительной вероятности P = 0,95
При невыполнении условия (4) получают дополнительно еще два результата параллельных определений.
Если максимальное абсолютное расхождение между наибольшим и наименьшим результатами измерений не превышает критического диапазона, относительное значение которого приведено в таблице 4 для P = 0,95 и n = 4:
|C_{max} - C_{min}| \leq 0,01 \cdot CR_{0,95} \cdot \frac{C_{1} + C_{2} + C_{3} + C_{4}}{4} , (5)
то в этом случае все четыре результата признают приемлемыми и за окончательный результат принимают среднее арифметическое четырех измерений, полученных в условиях повторяемости.
При невыполнении условия (5) в качестве окончательного результата измерений принимают медиану четырех результатов измерений, полученных в условиях повторяемости (параллельных определений). Дополнительно выявляют и устраняют причины, приводящие к невыполнению условий (4) и (5).
XII. ОФОРМЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ
12.1 Результат измерений представляют в виде:
(\overline{C} \pm \Delta),\text{мг}/\text{дм}^{3}, (6)
где \overline{C} — результат измерений массовой концентрации рифампицина в молоке, мг/дм3;
\Delta — границы абсолютной погрешности, мг/дм3, при P = 0,95, рассчитанная по формуле:
\Delta = \frac{\delta \cdot \overline{C}}{100} , (7)
где \delta — границы относительной погрешности, %.
Значение \delta приведено в таблице 1.
Допустимо результат измерений в документах, выдаваемых лабораторией, представлять в виде:
(\overline{C} \pm \Delta_{\text{л}})\text{мг}/\text{дм}^{3}, при P = 0,95, при условии: \Delta_{\text{л}}<\Delta, (8)
где \Delta_{\text{л}} — границы абсолютной погрешности результатов измерений, установленные при внедрении методики в лаборатории, и обеспечиваемые контролем стабильности результатов измерений, мг/дм3.
12.2. Численное значение C должно оканчиваться цифрой того же разряда, что и значение \Delta (\Delta_{\text{л}}) .
XIII. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ
13.1. Контроль точности результатов измерений организуют и проводят путем проведения проверки приемлемости результатов измерений, получаемых в условиях повторяемости (п. 11.2), воспроизводимости (п. 13.2), оперативного контроля процедуры измерений (п. 13.3), контроля стабильности градуировочной характеристики (п. 9.4.5) и контроля стабильности результатов измерений в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-6.
13.2. Проверка приемлемости результатов измерений, получаемых в условиях воспроизводимости.
Образцами для проверки приемлемости результатов измерений, получаемых в условиях воспроизводимости, являются образцы молока, отобранные из одной упаковки.
Проверку приемлемости результатов измерений, получаемых в условиях воспроизводимости (результаты измерений получены в разных лабораториях), проводят по результатам измерений массовых концентраций рифампицина в молоке с одинаковым содержанием. Результаты измерений признают приемлемыми при выполнении условия:
\frac{|C_{1} - C_{2}|}{(C_{1} + C_{2})/2} \cdot 100\% \leq R, (9)
где C1 и C2 - результаты измерений массовых концентраций рифампицина в молоке, полученные в условиях воспроизводимости, мг/дм3;
R — предел воспроизводимости (относительное значение), %. Значения предела воспроизводимости приведены в таблице 4.
Если условие (9) не выполняется, процедуру повторяют. При повторном превышении предела воспроизводимости выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
13.3. Алгоритм оперативного контроля процедуры измерений с использованием метода добавок.
Образцами для контроля процедуры измерений являются образцы молока с внесенными в них добавками аттестованного раствора рифампицина, приготовленного в соответствии с п. 9.4.2 и 9.4.3.
Оперативный контроль процедуры измерений проводят путем сравнения результата отдельно взятой контрольной процедуры Кк с нормативом контроля К.
Результат контрольной процедуры Кк рассчитывают по формуле:
\text{К}_{\text{к}} = |\overline{C}\prime - \overline{C} - C_{\text{д}}|, (10)
где \overline{C}\prime — результат измерений массовой концентрации рифампицина в пробе с известной добавкой — среднее арифметическое двух результатов измерений, полученных в условиях повторяемости, расхождение между которыми удовлетворяет условию (4), мг/дм3;
\overline{C} — результат измерений массовой концентрации рифампицина в исходной пробе — среднее арифметическое двух результатов измерений, полученных в условиях повторяемости, расхождение между которыми удовлетворяет условию (4), мг/дм3;
Cд — величина введенной добавки, мг/дм3.
Норматив контроля К рассчитывают по формуле:
\text{К } = \sqrt{\Delta_{\text{л},\text{С}\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},\text{С}}^{2}} , (11)
где \Delta_{\text{л},\text{С}\prime} , \Delta_{\text{л},\text{С}} — значения характеристики погрешности результатов измерений, установленные в лаборатории при реализации методики, соответствующие массовой концентрации рифампицина в пробе с известной добавкой и в исходной пробе соответственно, мг/дм3.
Примечание. Допустимо характеристику погрешности результатов измерений при внедрении методики в лаборатории устанавливать на основе выражений:
\Delta_{\text{л},\text{С}\prime} = 0,84 \cdot 0,01 \cdot \delta \cdot \overline{\text{С}}\prime, (12)
\Delta_{\text{л},\text{С}} = 0,84 \cdot 0,01 \cdot \delta \cdot \overline{\text{С}}, (13)
с последующим уточнением по мере накопления информации в процессе контроля стабильности результатов измерений.
Процедуру измерений признают удовлетворительной при выполнении условия:
При невыполнении условия (14) контрольную процедуру повторяют. При повторном невыполнении условия (14) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
13.4. Оперативный контроль процедуры измерений, а также реализуемые процедуры контроля стабильности результатов выполняемых измерений, приводят в документах лаборатории, устанавливающих порядок и содержание работ по организации методов контроля стабильности результатов измерений в пределах лаборатории.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЕ ССЫЛКИ
1. Федеральный закон от 30.03.1999 № 52-ФЗ «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения».
2. СанПиН 1.2.3685-21 «Гигиенические нормативы и требования к обеспечению безопасности и (или) безвредности для человека факторов среды обитания».
3. ГОСТ 12.1.004 «ССБТ. Пожарная безопасность. Общие требования».
4. ГОСТ 12.1.005 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны».
5. ГОСТ 12.1.007 «ССБТ. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности».
6. ГОСТ 12.4.009 «ССБТ. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание».
7. ГОСТ 1770 «Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Технические условия».
8. ГОСТ 4328 «Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия».
9. ГОСТ 6709 «Вода дистиллированная. Технические условия».
10. ГОСТ 25336 «Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры».
11. ГОСТ 29227 «Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования».
12. ГОСТ 12.1.019 «ССБТ. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты».
13. ГОСТ Р 53228 «Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания».
14. ГОСТ Р ИСО 5725-6 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике».
15. ГОСТ ISO 7886-1 «Шприцы инъекционные однократного применения стерильные. Часть 1. Шприцы для ручного использования».
16. ТУ 25-2021.003 «Термометры ртутные стеклянные лабораторные. Технические условия».
17. ТУ 95-1021 «Фильтродержатели».
18. ТУ 6-09-14-2167 «Ацетонитрил. Технические условия».
19. ТУ 2504-1797 «Барометр-анероид контрольный М-67. Технические условия».