---
title: "\"МУК 4.1.3827-22. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств мефентрифлуконазола в семенах бобовых (соя и горох), масличных (рапс и подсолнечник) и растительных маслах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.3827-22"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-3827-22"
---

## "МУК 4.1.3827-22. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств мефентрифлуконазола в семенах бобовых (соя и горох), масличных (рапс и подсолнечник) и растительных маслах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием. Методические указания"

# "МУК 4.1.3827-22. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств мефентрифлуконазола в семенах бобовых (соя и горох), масличных (рапс и подсолнечник) и растительных маслах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 21.12.2022)


<a id="p100001"></a>Утверждаю
Руководитель Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека,
Главный государственный санитарный врач
Российской Федерации
**А.Ю.ПОПОВА**
21 декабря 2022 года


#### <a id="p100002"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ МЕФЕНТРИФЛУКОНАЗОЛА**
**В СЕМЕНАХ БОБОВЫХ (СОЯ И ГОРОХ), МАСЛИЧНЫХ (РАПС**
**И ПОДСОЛНЕЧНИК) И РАСТИТЕЛЬНЫХ МАСЛАХ МЕТОДОМ**
**ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**
**С МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЧЕСКИМ ДЕТЕКТИРОВАНИЕМ**

<a id="p100004"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.3827-22**

1. <a id="p100005"></a>Разработаны ФБУН "Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана" Роспотребнадзора (С.В. Кузьмин, В.Н. Ракитский, Н.Е. Федорова, М.С. Гречина); ФГБОУ ДПО "Российская медицинская академия непрерывного профессионального образования" (И.З. Мустафина).
2. <a id="p100006"></a>Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 21 декабря 2022 г.
3. <a id="p100007"></a>Введены впервые.


### <a id="p100008"></a>I. Область применения и область применения


<a id="p100009"></a>1.1. Настоящие методические указания (далее - МУК) устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (далее - ВЭЖХ) с масс-спектрометрическим детектированием для определения в семенах бобовых (соя и горох), масличных (рапс и подсолнечник) и растительных маслах массовой концентрации мефентрифлуконазола в диапазонах 0,0016 - 0,032 мг/кг без разбавления и 0,0016 - 1,6 мг/кг при разбавлении в 50 раз.
<a id="p100010"></a>1.2. МУК предназначены для органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, осуществляющих контроль качества и безопасности продовольственного (пищевого) сырья и пищевой продукции, а также могут быть использованы организациями, аккредитованными в установленном порядке на проведение исследований продовольственного (пищевого) сырья, пищевой продукции.
<a id="p100011"></a>МУК носят рекомендательный характер.


### <a id="p100012"></a>II. Физико-химические и токсикологические свойства


<a id="p100013"></a>2.1. Мефентрифлуконазол. 2-[4-(4-Хлорфенокси)-2-(трифторметил)фенил]-1-(1H-1,2,4-триазол-1-ил)-2-пропан-2-ол <1>. Брутто-формула: C18H15ClF3N3O2. Молекулярная масса 397,8. Белый кристаллический порошок без запаха. Температура плавления плюс 126,0 °C. Давление паров 3,2·10-3 мПа (при плюс 20 °C); 6,5·10-3 мПа (при плюс 25 °C). Растворимость в органических растворителях при плюс 20 °C (в г/дм3): ацетон - 93,2; этилацетат - 116,2; метанол - 73,2; 1,2-дихлорэтан - 55,3; ацетонитрил - 49,4; ксилен - 8,5; гептан - 0,0946. Растворимость в воде при 25 °C: 0,81 мг/дм3.

<a id="p100014"></a>

---

<a id="p100015"></a><1> В соответствии с Международным союзом теоретической и прикладной химии (ИЮПАК, англ. International Union of Pure and Applied Chemistry, IUPAC).

<a id="p100016"></a>2.2. Краткая токсикологическая характеристика: острая пероральная токсичность (LD50) для крыс > 2000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD50) для крыс > 5000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LC50) для крыс > 5,31 мг/дм3.
<a id="p100017"></a>2.3. Мефентрифлуконазол - фунгицид широкого спектра действия из группы триазолов, рекомендуется к использованию в качестве протравителя семян злаковых культур для борьбы с широким спектром патогенов, ржавчиной и септориозом.


### <a id="p100018"></a>III. Погрешность измерений


<a id="p100019"></a>3.1. При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в [табл. 3.1](#p100021) для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100020"></a>Таблица 3.1

<a id="p100021"></a>Метрологические характеристики


| <a id="p100022"></a>Анализируемый объект | <a id="p100023"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг | <a id="p100024"></a>Показатель точности (границы относительной погрешности, P = 0,95), $\pm \delta$ , % | <a id="p100025"></a>Показатель повторяемости (среднеквадратичное отклонение повторяемости), $\sigma_{r}$ , % | <a id="p100026"></a>Показатель воспроизводимости (среднеквадратичное отклонение воспроизводимости), $\sigma_{R}$ , % | <a id="p100027"></a>Предел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных определений), r, % | <a id="p100028"></a>Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученных в разных лабораториях), R, %,<br>(P = 0,95) |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100029"></a>Соя (бобы) | <a id="p100030"></a>0,0016 - <sub>1</sub>,6 | <a id="p100031"></a>50 | <a id="p100032"></a>8,4 | <a id="p100033"></a>11,8 | <a id="p100034"></a>24 | <a id="p100035"></a>33 |
| <a id="p100036"></a>Рапс (семена) | <a id="p100037"></a>0,0016 - 1,6 | <a id="p100038"></a>50 | <a id="p100039"></a>8,6 | <a id="p100040"></a>12,0 | <a id="p100041"></a>24 | <a id="p100042"></a>34 |
| <a id="p100043"></a>Семена подсолнечника | <a id="p100044"></a>0,0016 - 1,6 | <a id="p100045"></a>50 | <a id="p100046"></a>9,3 | <a id="p100047"></a>13,0 | <a id="p100048"></a>26 | <a id="p100049"></a>36 |
| <a id="p100050"></a>Растительное масло (подсолнечное) | <a id="p100051"></a>0,0016 - 1,6 | <a id="p100052"></a>50 | <a id="p100053"></a>9,2 | <a id="p100054"></a>12,8 | <a id="p100055"></a>26 | <a id="p100056"></a>36 |


<a id="p100057"></a>Примечание. Диапазон определяемых концентраций, указанный в [табл. 3.1](#p100021), приведен с учетом разбавления образца в 50 раз.


### <a id="p100058"></a>IV. Метод измерений


<a id="p100059"></a>4.1. Методика основана на определении вещества с помощью ВЭЖХ на обращенной фазе с тройным квадрупольным масс-спектрометрическим детектором.
<a id="p100060"></a>4.2. Экстракцию вещества из анализируемых проб растительной продукции выполняют ацетонитрилом, с использованием смеси солей для экстракции (смесь сульфата магния, хлорида натрия, цитрата натрия и натрия лимоннокислого двузамещенного, 1,5-водного), очистку экстрактов проводят методом дисперсионной твердофазной экстракции с применением смеси сорбентов на основе первичных-вторичных аминов и октадецилсилана.
<a id="p100061"></a>4.3. Нижний предел измерения мефентрифлуконазола в анализируемом объеме пробы - 0,8 пг.


### <a id="p100062"></a>V. Средства измерений, реактивы, вспомогательное оборудование, устройства и материалы


<a id="p100063"></a>5.1. При выполнении измерений и подготовке проб применяют средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы, приведенные в [табл. 5.1](#p100065) - [5.3](#p100123).

<a id="p100064"></a>Таблица 5.1

<a id="p100065"></a>Средства измерений


| <a id="p100066"></a>Наименование средств измерения | <a id="p100067"></a>Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| --- | --- |
| <a id="p100068"></a>1 | <a id="p100069"></a>2 |
| <a id="p100070"></a>Жидкостный хроматограф с тандемным масс-спектрометрическим детектором: тройной квадруполь, снабженный автоматическим пробоотборником и термостатом колонки | <a id="p100071"></a>Внесено в реестр "Утвержденные типы средств измерений" Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений |
| <a id="p100072"></a>Прибор для измерения атмосферного давления, температуры и относительной влажности воздуха | <a id="p100073"></a>Внесено в реестр "Утвержденные типы средств измерений" Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений |
| <a id="p100074"></a>Весы лабораторные аналитические | <a id="p100075"></a>С пределом допустимой погрешности +/- 0,0005 г по ГОСТ Р 53228 |
| <a id="p100076"></a>Весы лабораторные | <a id="p100077"></a>С пределом допустимой погрешности +/- 0,01 г по ГОСТ Р 53228 |
| <a id="p100078"></a>Колбы | <a id="p100079"></a>2 - (50, 100, 1000) - 2 по [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |
| <a id="p100080"></a>Меры массы | <a id="p100081"></a>ГОСТ OIML R 111-1 |
| <a id="p100082"></a>Пипетки градуированные | <a id="p100083"></a>1-1-2-1; 1-1-2-2; 1-1-2-5; 1-1-2-10 по [ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) |
| <a id="p100084"></a>Пробирки | <a id="p100085"></a>П-2-10-14/23 ХС, П-2-15-14/23 ХС по [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |
| <a id="p100086"></a>Цилиндры | <a id="p100087"></a>2-500-2 по [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |


<a id="p100088"></a>*Примечание.* Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

<a id="p100089"></a>Таблица 5.2

<a id="p100090"></a>Реактивы


| <a id="p100091"></a>Наименование реактивов | <a id="p100092"></a>Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| --- | --- |
| <a id="p100093"></a>1 | <a id="p100094"></a>2 |
| <a id="p100095"></a>Аналитический стандартный образец мефентрифлуконазола | <a id="p100096"></a>CAS 1417782-03-6, с содержанием основного компонента не менее 95% |
| <a id="p100097"></a>Азот особой чистоты, сорт 1, в баллонах | <a id="p100098"></a>ГОСТ 9293 (ИСО 2435) |
| <a id="p100099"></a>Ацетонитрил для ВЭЖХ | <a id="p100100"></a>Чистота не менее 99,9% |
| <a id="p100101"></a>Вода для лабораторного анализа (бидистиллированная или деионизованная) | <a id="p100102"></a>[ГОСТ Р 52501](https://bukva.ai/docs/gost-r-52501-2005) |
| <a id="p100103"></a>Калий углекислый (карбонат калия, поташ) | <a id="p100104"></a>Химически чистый, прокаленный, [ГОСТ 4221](https://bukva.ai/docs/standart-gost-4221-76) |
| <a id="p100105"></a>Муравьиная кислота | <a id="p100106"></a>99,7%, чистая для анализа по [ГОСТ 5848](https://bukva.ai/docs/gost-5848-73) |
| <a id="p100107"></a>Фосфор (V) оксид (фосфорный ангидрид, пентоксид фосфора) | <a id="p100108"></a>Химически чистый |
| <a id="p100109"></a>Магний сернокислый (сульфат магния) | <a id="p100110"></a>Безводный химически чистый |
| <a id="p100111"></a>Натрий хлористый (хлорид натрия) | <a id="p100112"></a>Химически чистый по ГОСТ 4233 |
| <a id="p100113"></a>Натрий лимоннокислый двузамещенный, 1,5-водный | <a id="p100114"></a>Химически чистый |
| <a id="p100115"></a>Натрий лимоннокислый трехзамещенный | <a id="p100116"></a>Чистый для анализа по [ГОСТ 22280](https://bukva.ai/docs/standart-gost-22280-76) |
| <a id="p100117"></a>Сорбент для твердофазной экстракции на основе первичного-вторичного амина | <a id="p100118"></a>Площадь поверхности ~ 570 м2/г, средний размер пор 67 А, средний размер частиц 60 мкм |
| <a id="p100119"></a>Сорбент для твердофазной экстракции на основе силикагеля с привитыми октадецильными группами (C18) | <a id="p100120"></a>Площадь поверхности ~ 547 м2/г, средний размер пор 64 А, средний размер частиц 58 мкм |


<a id="p100121"></a>*Примечание.* Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.

<a id="p100122"></a>Таблица 5.3

<a id="p100123"></a>Вспомогательное оборудование, устройства, материалы


| <a id="p100124"></a>Наименование вспомогательного оборудования, устройств, материалов | <a id="p100125"></a>Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| --- | --- |
| <a id="p100126"></a>1 | <a id="p100127"></a>2 |
| <a id="p100128"></a>Аппарат для встряхивания проб | <a id="p100129"></a>Орбита до 10 мм |
| <a id="p100130"></a>Баня ультразвуковая | <a id="p100131"></a>Рабочая частота 35 кГц |
| <a id="p100132"></a>Воронки | <a id="p100133"></a>В-36-50 ХС по ГОСТ 25336 |
| <a id="p100134"></a>Груша резиновая | <a id="p100135"></a>- |
| <a id="p100136"></a>Колба | <a id="p100137"></a>П2-50-14ТХС по ГОСТ 25336 |
| <a id="p100138"></a>Керамические гомогенизаторы для пробирок на 50 см3 | <a id="p100139"></a>- |
| <a id="p100140"></a>Пробирки полипропиленовые центрифужные с крышками | <a id="p100141"></a>Вместимостью 50 и 15 см3 |
| <a id="p100142"></a>Мельница лабораторная | <a id="p100143"></a>- |
| <a id="p100144"></a>Установка для перегонки растворителей | <a id="p100145"></a>- |
| <a id="p100146"></a>Морозильная камера или морозильный ларь | <a id="p100147"></a>Поддерживающий температуру не выше минус 18 °C |
| <a id="p100148"></a>Стаканы | <a id="p100149"></a>В-1-100 ТС, В-1-400 ТС по ГОСТ 25336 |
| <a id="p100150"></a>Фильтры мембранные для фильтрации проб с помощью шприца | <a id="p100151"></a>Размер пор 0,20 мкм |
| <a id="p100152"></a>Хроматографическая колонка стальная | <a id="p100153"></a>Длина 50 мм, внутренний диаметром 2,1 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18, зернением 1,8 мкм |
| <a id="p100154"></a>Центрифуга лабораторная, роторная | <a id="p100155"></a>Скорость вращения до 4000 об/мин |
| <a id="p100156"></a>Шприцы | <a id="p100157"></a>Инъекционные однократного применения вместимостью 5 см3,<br>[ГОСТ ISO 7886-1](https://bukva.ai/docs/gost-iso-7886-1-2011) |


<a id="p100158"></a>*Примечание.* Допускается использование вспомогательных средств измерений, устройств и материалов с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.


### <a id="p100159"></a>VI. Требования безопасности


<a id="p100160"></a>6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать технику безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостной хроматограф.
<a id="p100161"></a>6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.
<a id="p100162"></a>6.3. При работе с газами, находящимися в баллонах под давлением до 15 МПа (150 кгс/см2), необходимо соблюдать правила <2>. Запрещается открывать вентиль баллона, не установив в нем понижающий редуктор.

<a id="p100163"></a>

---

<a id="p100164"></a><2> Правила промышленной безопасности при использовании оборудования, работающего под избыточным давлением, утвержденные приказом Ростехнадзора от 15.12.2020 N 536 (зарегистрировано Минюстом России 31.12.2020, регистрационный N 61998).

<a id="p100165"></a>6.4. Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на жидкостном хроматографе с тройным квадрупольным масс-спектрометрическим детектором, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментальное соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.


### <a id="p100166"></a>VII. Условия проведения измерений



#### <a id="p100167"></a>7.1 При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- <a id="p100168"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха плюс (15 - 30) °C и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100169"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией на прибор.


### <a id="p100170"></a>VIII. Подготовка к выполнению измерений


<a id="p100171"></a>8.1. Очистка растворителей. Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на 1 дм3 ацетонитрила 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 дм3 ацетонитрила 10 г карбоната калия). Хранят в емкости из темного стекла.

#### <a id="p100172"></a>8.2 Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ.

<a id="p100173"></a>8.2.1. Компонент А: в мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 500 см3 деионизированной воды, вносят 1,0 см3 муравьиной кислоты, доводят до метки деионизированной водой, перемешивают и дегазируют.
<a id="p100174"></a>8.2.2. Компонент Б: в мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 500 см3 ацетонитрила, вносят 1,0 см3 муравьиной кислоты, доводят до метки ацетонитрилом, перемешивают и дегазируют.
<a id="p100175"></a>Каждый компонент подвижной фазы хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14-ти дней.

#### <a id="p100176"></a>8.3 Кондиционирование хроматографической колонки для ВЭЖХ.

<a id="p100177"></a>Промывают колонку подвижной фазой (смесь компонентов А и Б, приготовленных по [п. 8.2](#p100172), в соотношении 1:1) при скорости подачи растворителя 0,4 см3/мин до установления стабильной базовой линии.
<a id="p100178"></a>8.4. Приготовление смеси растворителей для приготовления рабочих растворов.
<a id="p100179"></a>В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 500 см3 ацетонитрила, 500 см3 деионизованной воды, перемешивают. Раствор хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14-ти дней.

#### <a id="p100180"></a>8.5 Приготовление смеси солей для экстракции.

<a id="p100181"></a>Для приготовления одного набора смеси солей для экстракции смешивают (4,00 +/- 0,01) г магния сернокислого, (1,00 +/- 0,01) г натрия хлористого, (1,00 +/- 0,01) г натрия лимоннокислого трехзамещенного и (0,50 +/- 0,01) г натрия лимоннокислого двузамещенного, 1,5-водного, до использования хранят в герметичной упаковке не более 6-ти месяцев.
<a id="p100182"></a>*Примечание.* Возможно использование наборов солей для экстракции проб фруктов и овощей массой 10 г.


#### <a id="p100183"></a>8.6 Приготовление смеси сорбентов для очистки экстрактов.

<a id="p100184"></a>Для приготовления одного набора смеси сорбентов для очистки экстрактов в центрифужную полипропиленовую пробирку вместимостью 15 см3 помещают (150 +/- 4) мг сорбента для твердофазной экстракции на основе первичного-вторичного амина, (900 +/- 4) мг магния сернокислого и (150 +/- 4) мг твердофазного сорбента на основе октадецилсилана, закрывают герметично крышкой, встряхивают для перемешивания, хранят не более 6-ти месяцев.
<a id="p100185"></a>*Примечание.* Возможно использование дисперсионных наборов для фруктов и овощей с маслом и воском, помещенных в полипропиленовые пробирки вместимостью 15 см3.


#### <a id="p100186"></a>8.7 Приготовление градуировочных растворов.

<a id="p100187"></a>8.7.1. Исходный раствор мефентрифлуконазола для градуировки (концентрация 100 мкг/см3).
<a id="p100188"></a>В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 0,0100 +/- 0,0005 г мефентрифлуконазола, добавляют 50 - 70 см3 ацетонитрила, перемешивают, доводят ацетонитрилом до метки, вновь перемешивают. Раствор хранится в холодильнике при температуре плюс (2 - 6) °C не более 3 месяцев.
<a id="p100189"></a>8.7.2. Раствор N 1 мефентрифлуконазола для градуировки и внесения (концентрация 10 мкг/см3).
<a id="p100190"></a>В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 10 см3 исходного раствора мефентрифлуконазола [(п. 8.7.1)](#p100187) с концентрацией 100 мкг/см3, доводят до метки ацетонитрилом, тщательно перемешивают, получают рабочий раствор N 1 с концентрацией мефентрифлуконазола 10 мкг/см3. Раствор N 1 хранится в холодильнике при температуре плюс (2 - 6) °C не более одного месяца.
<a id="p100191"></a>Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом "внесено-найдено" и контроля качества результатов измерений методом добавок.
<a id="p100192"></a>8.7.3. Раствор N 2 мефентрифлуконазола для градуировки и внесения (концентрация 0,1 мкг/см3).
<a id="p100193"></a>В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 1,0 см3 градуировочного раствора N 1 с концентрацией мефентрифлуконазола 10,0 мкг/см3 [(п. 8.7.2)](#p100189), доводят до метки ацетонитрилом, тщательно перемешивают, получают рабочий раствор N 2 с концентрацией мефентрифлуконазола 0,1 мкг/см3. Раствор N 2 хранится в холодильнике температуре плюс (2 - 6) °C не более одного месяца.
<a id="p100194"></a>8.7.4. Рабочие растворы N 3 - 7 мефентрифлуконазола для градуировки (концентрация 0,08 - 1,6 нг/см3).
<a id="p100195"></a>В 3 мерные колбы вместимостью 100 см3 помещают 1,6; 0,8 и 0,4 см3 градуировочного раствора N 2 с концентрацией мефентрифлуконазола 0,1 мкг/см3 [(п. 8.7.3)](#p100192), доводят до метки смесью растворителей, приготовленной по [п. 8.4](#p100178), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 3 - 5 с концентрацией мефентрифлуконазола 1,6; 0,8 и 0,4 нг/см3, соответственно.
<a id="p100196"></a>В 2 мерные колбы вместимостью 100 см3 помещают 10 и 5 см3 градуировочного раствора N 3 с концентрацией мефентрифлуконазола 1,6 нг/см3 (п. 8.7.4), доводят до метки смесью растворителей, приготовленной по [п. 8.4](#p100178), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 6 - 7 с концентрацией мефентрифлуконазола 0,16 и 0,08 нг/см3, соответственно.
<a id="p100197"></a>Растворы хранятся в холодильнике при температуре плюс (2 - 6) °C не более двух недель.

#### <a id="p100198"></a>8.8 Установление градуировочной характеристики.

<a id="p100199"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (I) от концентрации мефентрифлуконазола в растворе (нг/см3), устанавливают методом абсолютной калибровки по 5-ти растворам для градуировки N 3 - 7.
<a id="p100200"></a>В инжектор хроматографа вводят по 10 мм3 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования, указанных в [п. 10.2](#p100224). Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений.

#### <a id="p100201"></a>8.9 Контроль стабильности градуировочной характеристики.

<a id="p100202"></a>Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.
<a id="p100203"></a>При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее двух образцов концентраций для градуировки, содержание мефентрифлуконазола в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,08 до 1,6 нг/см3.
<a id="p100204"></a>Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение (A):

<a id="p100205"></a> $A = \frac{|X - C|}{C} \cdot 100 \leq B$ , (1)

<a id="p100206"></a>где A - величина расхождения, %;
<a id="p100207"></a>X - концентрация мефентрифлуконазола в пробе при контрольном измерении, нг/см3;
<a id="p100208"></a>C - известная концентрация градуировочного раствора, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, нг/см3;
<a id="p100209"></a>B - норматив контроля стабильности градуировочной характеристики, % (равен 20% при P = 0,95).


### <a id="p100210"></a>IX. Отбор и хранение проб


<a id="p100211"></a>9.1. Отбор проб осуществлен в соответствии с методическими документами <3>.

<a id="p100212"></a>

---

<a id="p100213"></a><3> Унифицированные [правила](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов, утвержденные заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 N 2051-79, Методические указания по регистрационным испытаниям пестицидов в части биологической эффективности, Москва 2018. 64 с., [ГОСТ 17109](https://bukva.ai/docs/gost-17109-88) "Межгосударственный стандарт. Соя. Требования при заготовках и поставках", [ГОСТ 28674](https://bukva.ai/docs/standart-gost-28674-2019) "Межгосударственный стандарт. Горох. Технические условия", [ГОСТ 10583](https://bukva.ai/docs/gost-10583-76-gosstandart-sssr) "Государственный стандарт союза ССР. Рапс для промышленной переработки. Технические условия", [ГОСТ 22391](https://bukva.ai/docs/standart-gost-22391-2015) "Межгосударственный стандарт. Подсолнечник. Технические условия", [ГОСТ 32190-2013](https://bukva.ai/docs/gost-32190-2013) "Межгосударственный стандарт. Масла растительные. Правила приемки и методы отбора проб".

<a id="p100214"></a>9.2. Растительные пробы хранят при температуре плюс (2 - 6) °C не более недели. Для длительного хранения образцы замораживают и хранят при температуре не выше минус 18 °C. Перед анализом образцы измельчают.


### <a id="p100215"></a>X. Выполнение определения



#### <a id="p100216"></a>10.1 Экстракция. Бобовые, рапс, семена подсолнечника.

<a id="p100217"></a>Измельченный образец массой 5 г помещают в центрифужную полипропиленовую пробирку вместимостью 50 см3. Вносят 5 см3 бидистиллированной воды для увлажнения и выдерживают 5 - 10 минут. Затем вносят 10 см3 ацетонитрила и перемешивают. В пробирку помещают керамический гомогенизатор, закрывают крышку и интенсивно встряхивают вручную 2 мин, добавляют в пробирку смесь солей для экстракции (приготовленную по [п. 8.5](#p100180)), закрывают крышкой и интенсивно встряхивают (вручную) в течение 1 мин. Затем пробу центрифугируют 5 мин при скорости вращения 4000 оборотов/мин.
<a id="p100218"></a>Пробирку с экстрактом помещают в морозильную камеру на 2 - 2,5 часа при температуре не выше минус 18 °C. Полученный холодный образец центрифугируют 2 мин при скорости вращения 4000 оборотов/мин.
<a id="p100219"></a>Часть экстракта (верхний слой в пробирке после центрифугирования) объемом 6 - 7 см3 с помощью пипетки переносят в пропиленовую центрифужную пробирку вместимостью 15 см3, содержащую смесь сорбентов, приготовленную по [п. 8.6](#p100183). Закрывают крышку и интенсивно встряхивают вручную в течение 30 сек. Центрифугируют 5 мин при скорости вращения 4000 оборотов/мин. Отбирают в градуированную пробирку на 10 см3 раствор экстракта объемом 0,5 см3, добавляют 0,5 см3 ацетонитрила и 4 см3 бидистиллированной воды. Общий объем пробы 5 см3. Перемешивают и фильтруют через мембранный фильтр (размер пор 0,20 мкм) в виалу вместимостью 2 см3 с фторопластовой прокладкой и навинчивающейся крышкой. Помещают в автосамплер хроматографа для анализа в условиях хроматографирования по [п. 10.3](#p100224).

#### <a id="p100220"></a>10.2 Экстракция. Растительные масла.

<a id="p100221"></a>Образец масла массой 5 г помещают в центрифужную полипропиленовую пробирку вместимостью 50 см3. Вносят 10 см3 ацетонитрила и перемешивают. В пробирку помещают керамический гомогенизатор и добавляют в смесь солей для экстракции (приготовленную по [п. 8.5](#p100180)), закрывают крышкой и интенсивно встряхивают (вручную) в течение 1 мин. Затем пробу центрифугируют 5 мин при скорости вращения 4000 оборотов/мин.
<a id="p100222"></a>Пробирку с экстрактом помещают в морозильную камеру на 2 - 2,5 часа при температуре не выше минус 18 °C. Полученный холодный образец центрифугируют 2 мин при скорости вращения 4000 оборотов/мин. Вымораживание образца повторяют дважды, переливая экстракт в чистую пробирку.
<a id="p100223"></a>Часть экстракта (верхний слой в пробирке после центрифугирования) объемом 6 - 7 см3 с помощью пипетки переносят в пропиленовую центрифужную пробирку вместимостью 15 см3, содержащую смесь сорбентов, приготовленную по [п. 8.6](#p100183). Закрывают крышку и интенсивно встряхивают вручную в течение 30 сек. Центрифугируют 5 мин при скорости вращения 4000 оборотов/мин. Отбирают в градуированную пробирку на 10 см3 раствор экстракта объемом 0,5 см3, добавляют 0,5 см3 ацетонитрила и 4 см3 бидистиллированной воды. Общий объем пробы 5 см3. Перемешивают и фильтруют через мембранный фильтр (размер пор 0,20 мкм) в виалу вместимостью 2 см3 с фторопластовой прокладкой и навинчивающейся крышкой. Помещают в автосамплер хроматографа для анализа в условиях хроматографирования по [п. 10.3](#p100224).
<a id="p100224"></a>10.3. Измерения выполняют на жидкостном хроматографе с тандемным масс-спектрометрическим детектором: тройной квадруполь с источником ионизации, оснащенным соосной подачей горячего азота для эффективной десольвации ионов при следующих режимных параметрах:
- <a id="p100225"></a>источник ионизации: электростатическое распыление;
- <a id="p100226"></a>режим работы: регистрация дочерних положительных ионов после разрушения материнских ионов (регистрация "перехода").
<a id="p100227"></a>Параметры масс-спектрометрического детектора:
- <a id="p100228"></a>материнский ион (масса/заряд): 398;
- <a id="p100229"></a>дочерние ионы (масса/заряд): 70,2 (количественный расчет), 182;
- <a id="p100230"></a>напряжение на фрагментаторе, В: 109;
- <a id="p100231"></a>энергия разрушения (соударения), В: $25(398 \rightarrow 70,2)$ , $33(398 \rightarrow 182)$ ;
- <a id="p100232"></a>скорость сканирования: 200 мс;
- <a id="p100233"></a>давление на распылителе: 35 psi;
- <a id="p100234"></a>скорость газа распыления 1 (азот): 10 дм3/мин;
- <a id="p100235"></a>температура газа 1: плюс 350 °C;
- <a id="p100236"></a>скорость осушающего газа 2 (азот): 12 дм3/мин;
- <a id="p100237"></a>температура газа 2: плюс 400 °C;
- <a id="p100238"></a>температура квадруполей (1 и 3): плюс 100 °C.
<a id="p100239"></a>Условия хроматографирования:
- <a id="p100240"></a>хроматографическая колонка стальная, длиной 50 мм, внутренним диаметром 2,1 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18, зернением 1,8 мкм;
- <a id="p100241"></a>температура колонки: плюс 30 °C;
- <a id="p100242"></a>скорость потока элюента: 0,4 см3/мин;
- <a id="p100243"></a>объем вводимой пробы: 10 мм3;
- <a id="p100244"></a>подвижная фаза: 0,1% раствор муравьиной кислоты в ацетонитриле - 0,1% раствор муравьиной кислоты в воде (60:40, по объему).
<a id="p100245"></a>Линейный диапазон детектирования 0,8 - 16 пг.
<a id="p100246"></a>Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочный раствор с концентрацией 1,6 нг/см3, разбавляют подвижной фазой (не более чем в 50 раз).


### <a id="p100247"></a>XI. Обработка результатов анализа


<a id="p100248"></a>11.1. Содержание мефентрифлуконазола в пробах бобовых (соя, горох), рапсе, семенах подсолнечника и растительных маслах (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:

<a id="p100249"></a> $X = \frac{C \cdot V_{\text{кон}} \cdot \text{К } \cdot \text{Кр}}{1000 \cdot m}$ , (2)

<a id="p100250"></a>где C - концентрация мефентрифлуконазола, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, нг/см3;
<a id="p100251"></a>Vкон - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3 (V = 5 см3);
<a id="p100252"></a>m - масса анализируемого образца, г;
<a id="p100253"></a>К - коэффициент, учитывающий объем экстракта, взятого для анализа, C = 20;
<a id="p100254"></a>Кр - коэффициент разбавления (если экстракт подвергался разбавлению).

#### <a id="p100255"></a>11.2 Проверка приемлемости результатов параллельных определений.

<a id="p100256"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости:

<a id="p100257"></a> $\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq r$ , (3)

<a id="p100258"></a>где X1, X2 - результаты параллельных определений, мг/кг;
<a id="p100259"></a>r - значение предела повторяемости [(табл. 3.1)](#p100021), при этом $r = 2,8 \cdot \sigma_{r}$ 
<a id="p100260"></a>При невыполнении условия выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


### <a id="p100261"></a>XII. Оформление результатов



#### <a id="p100262"></a>12.1 Результат анализа представляют в виде:


<a id="p100263"></a> $(\overline{X} \pm \Delta)\text{мг}/\text{кг}$ при вероятности P = 0,95, (4)

<a id="p100264"></a>где $\overline{X}$ - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
<a id="p100265"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

<a id="p100266"></a> $\Delta = \delta \cdot X100$ , (5)

<a id="p100267"></a>где $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 3.1](#p100021)), %.
<a id="p100268"></a>Если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде: "содержание мефентрифлуконазола в семенах бобовых (соя, горох), масличных (рапс и подсолнечник) и растительных маслах - менее 0,0016 мг/кг" <4>.

<a id="p100269"></a>

---

<a id="p100270"></a><4> 0,0016 мг/кг - нижний предел количественного определения мефентрифлуконазола.


### <a id="p100271"></a>XIII. Контроль качества результатов измерений


<a id="p100272"></a>13.1. Контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-(1 - 6)](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002).
<a id="p100273"></a>Периодичность и формы контроля определяются руководством по качеству.






## <a id="p100274"></a>Библиографические ссылки


1. <a id="p100275"></a>Федеральный закон от 30.03.1999 N 52-ФЗ "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения".
2. <a id="p100276"></a>Унифицированные [правила](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов, утвержденные заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 N 2051-79.
3. <a id="p100277"></a>Приказ Ростехнадзора от 15.12.2020 N 536 "Об утверждении федеральных норм и правил в области промышленной безопасности "Правила промышленной безопасности при использовании оборудования, работающего под избыточным давлением" (зарегистрирован Минюстом России 31.12.2020, регистрационный N 61998).
4. <a id="p100278"></a>[ГОСТ Р ИСО 5725-(1 - 6)](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
5. <a id="p100279"></a>ГОСТ Р 53228 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания".
6. <a id="p100280"></a>ГОСТ OIML R 111-1 "Государственная система обеспечения единства измерений (ГСИ). Гири классов E(1), E(2), F(1), F(2), M(1), M(1-2), M(2), M(2-3) и M(3). Часть 1. Метрологические и технические требования".
7. <a id="p100281"></a>[ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) "Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия".
8. <a id="p100282"></a>[ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) "Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования".
9. <a id="p100283"></a>ГОСТ 25336 "Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры".
10. <a id="p100284"></a>ГОСТ 9293 (ИСО 2435) "Азот газообразный и жидкий. Технические условия".
11. <a id="p100285"></a>[ГОСТ 5848](https://bukva.ai/docs/gost-5848-73) "Реактивы. Кислота муравьиная. Технические условия".
12. <a id="p100286"></a>[ГОСТ 4221](https://bukva.ai/docs/standart-gost-4221-76) "Калий углекислый. Технические условия".
13. <a id="p100287"></a>ГОСТ 4233 "Реактивы. Натрий хлористый. Технические условия".
<a id="p100288"></a>[ГОСТ 22280](https://bukva.ai/docs/standart-gost-22280-76) "Реактивы. Натрий лимоннокислый 5,5-водный. Технические условия".
14. <a id="p100289"></a>[ГОСТ 22280](https://bukva.ai/docs/standart-gost-22280-76) "Реактивы. Натрий лимоннокислый 5,5-водный. Технические условия".
15. <a id="p100290"></a>[ГОСТ Р 52501](https://bukva.ai/docs/gost-r-52501-2005) "Вода для лабораторного анализа. Технические условия".
16. <a id="p100291"></a>[ГОСТ ISO 7886-1](https://bukva.ai/docs/gost-iso-7886-1-2011) "Шприцы инъекционные однократного применения стерильные. Часть 1. Шприцы для ручного использования".
17. <a id="p100292"></a>ГОСТ 12.1.004 "Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования".
18. <a id="p100293"></a>ГОСТ 12.1.007 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности".
19. <a id="p100294"></a>ГОСТ 12.1.019 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты".
20. <a id="p100295"></a>ГОСТ 12.0.004 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Организация обучения безопасности труда. Общие положения".
21. <a id="p100296"></a>ГОСТ 12.4.009 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание".
22. <a id="p100297"></a>[ГОСТ 17109](https://bukva.ai/docs/gost-17109-88) "Межгосударственный стандарт. Соя. Требования при заготовках и поставках".
23. <a id="p100298"></a>[ГОСТ 28674](https://bukva.ai/docs/standart-gost-28674-2019) "Межгосударственный стандарт. Горох. Технические условия".
24. <a id="p100299"></a>[ГОСТ 10583](https://bukva.ai/docs/gost-10583-76-gosstandart-sssr) "Государственный стандарт союза ССР. Рапс для промышленной переработки. Технические условия".
25. <a id="p100300"></a>[ГОСТ 22391](https://bukva.ai/docs/standart-gost-22391-2015) "Межгосударственный стандарт. Подсолнечник. Технические условия".
26. <a id="p100301"></a>[ГОСТ 32190](https://bukva.ai/docs/gost-32190-2013) "Межгосударственный стандарт. Масла растительные. Правила приемки и методы отбора проб".
27. <a id="p100302"></a>Методические указания по регистрационным испытаниям пестицидов в части биологической эффективности, Москва - 2018. 64 с.



<a id="p100303"></a>

---