МУК 4.1.3791-22. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств глюфосината аммония и его метаболита 3-метилфосфино-пропионовой кислоты в ботве и клубнях картофеля, зерне и соломе зерновых колосовых культур методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием. Методические указания
(утв. Роспотребнадзором 25.10.2022)
Утверждаю Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации А. Ю. Попова 25 октября 2022 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ГЛЮФОСИНАТА АММОНИЯ И ЕГО МЕТАБОЛИТА 3-МЕТИЛФОСФИНО-ПРОПИОНОВОЙ КИСЛОТЫ В БОТВЕ И КЛУБНЯХ КАРТОФЕЛЯ, ЗЕРНЕ И СОЛОМЕ ЗЕРНОВЫХ КОЛОСОВЫХ КУЛЬТУР МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ С МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЧЕСКИМ ДЕТЕКТИРОВАНИЕМ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ МУК 4.1.3791-22
1. Разработаны ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений» (В.В. Человечкова, Т.Д. Черменская), ООО «Инновационный центр защиты растений» (В.В. Волосатова).
2. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 25 октября 2022 г.
I. Общие положения и область применения
1.1. Настоящие методические указания (далее — МУК) устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (далее — ВЭЖХ) с масс-спектрометрическим детектированием для определения массовой концентрации глюфосината аммония и его метаболита — 3-метилфосфино-пропионовой кислоты (далее — МФПК) в диапазоне концентраций:
- в ботве картофеля от 0,025 до 0,2 мг/кг включительно;
- в клубнях картофеля от 0,025 до 0,2 мг/кг включительно;
- в зерне зерновых колосовых культур 0,025 до 0,2 мг/кг включительно;
- в соломе зерновых колосовых культур от 0,125 до 1,0 мг/кг включительно.
1.2. МУК предназначены для органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, осуществляющих контроль качества и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов, а также могут быть использованы организациями, аккредитованными на проведение исследований продовольственного сырья, пищевой продукции.
1.3 МУК носят рекомендательный характер.
II. Физико-химические и токсикологические свойства
2.1. Глюфосинат аммония (далее — ГФА). Аммоний DL-гомоаланин-4-ил-(метил)-фосфинат <1>.
<1> В соответствии с Международным союзом теоретической и прикладной химии (ИЮПАК, англ. International Union of Pure and Applied Chemistry, IUPAC).
Кристаллический порошок со слабым специфическим запахом. Температура плавления плюс 215 °C. Давление пара менее 0,1 мПа. Растворимость (плюс 20 °C): в воде — 1370 г/дм3, в ацетоне — 0,16 г/дм3, в этаноле — 0,65 г/дм3, в этилацетате — 0,14 г/дм3, в толуоле — 0,14 г/дм3, в гексане — 0,2 г/дм3.
Коэффициент распределения в системе н-октанол — вода Kow logP < 0,1 (плюс 22 °C). При нормальных условиях, в щелочных и умеренно кислых средах вещество стабильно.
Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность (ЛД50) для крыс — 1620 мг/кг, для рыб — 710 мг/дм3 (96 ч), острая ингаляционная токсичность (ЛД50) для крыс — (1,26 — 2,6) мг/м3 воздуха. Не обладает тератогенным, канцерогенным и мутагенным действием, не токсичен для водорослей, дафний, дождевых червей, пчел, птиц.
Неселективный, контактный гербицид с ограниченной системностью, передвигающийся только внутри обработанных листьев. Используется для уничтожения однолетних и многолетних широколистных и злаковых сорняков. Десикант.
В воде и растениях подвержен разрушению с образованием метаболита — 3-метилфосфино-пропионовой кислоты.
2.2. 3-метилфосфино-пропионовая кислота (далее — МФПК).
Белый кристаллический порошок. Температура плавления плюс (288 — 291) °C. Растворим в воде и метаноле.
III. Погрешность измерений
3.1. При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 3.1 и 3.2, для соответствующих диапазонов концентраций.
Полнота извлечения, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в табл. 3.3 и 3.4.
Метрологические параметры для глюфосината аммония
Метрологические параметры для 3-метилфосфино-пропионовой кислоты
Объекты анализа, диапазоны определяемых концентраций, полнота извлечения глюфосината аммония, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата
Объекты анализа, диапазоны определяемых концентраций, полнота извлечения 3-метилфосфино-пропионовой кислоты, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата
IV. Метод измерения
4.1. Определение глюфосината аммония и его метаболита основано на экстракционном извлечении определяемых компонентов из проб анализируемых объектов подкисленным метанолом, дальнейшей очистке сорбентом для твердофазной экстракции на основе силикагеля с привитыми пропиламинными группами и последующем анализе экстракта методом ВЭЖХ с использованием масс-спектрометрического (далее — МС) детектора. Идентификация глюфосината аммония и его метаболита проводится по времени удерживания, количественное определение — методом абсолютной калибровки. Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования.
V. Средства измерений, реактивы, вспомогательное оборудование, устройства и материалы
5.1. При выполнении измерений и подготовке проб применяют средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы, приведенные в табл. 5.1 - 5.3.
| Наименование средств измерения | Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
|---|---|
| 1 | 2 |
| Хромато-масс-спектрометр, состоящий из высокоэффективного жидкостного хроматографа, снабженного дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки и масс-спектрометра | - |
| Весы лабораторные общего назначения, наибольший предел взвешивания 150 г, предел допустимой погрешности 5 мг | ГОСТ Р 53228 |
| Весы лабораторные аналитические, наибольший предел взвешивания 81/210 г, предел допустимой погрешности 0,1/0,3 мг | ГОСТ Р 53228 |
| Дозаторы пипеточные переменного объема от 10 до 100 мм3 и от 100 до 1000 мм3 | ГОСТ 28311 |
| Колбы мерные на 50, 100 и 1000 см3 | ГОСТ 1770 |
| Цилиндры мерные на 50 и 100 см3 | ГОСТ 1770 |
Примечание: допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.
| Наименование реактивов | Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
|---|---|
| Метанол для масс-спектрометрии | - |
| Вода для лабораторного анализа (бидистиллированная, деионизованная) | ГОСТ Р 52501 |
| Глюфосинат аммония с содержанием основного вещества 97,5% | - |
| 3-метилфосфино-пропионовая кислота, с содержанием основного вещества 99,8% | - |
| Соляная кислота, особой чистоты | ГОСТ 14261 |
| Кислота муравьиная для масс-спектрометрии | - |
| Метанол химически чистый | ГОСТ 6995 |
| Сорбент для твердофазной экстракции на основе силикагеля с привитыми N-пропилэтилендиаминными группами (primary secondary amine = PSA), площадь поверхности ~ 500 м2/г, средний размер пор 70 А, средний размер частиц 50 мкм | - |
Примечание: допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.
Вспомогательные устройства и материалы
Примечание: допускается использование вспомогательных средств измерений, устройств и материалов с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.
VI. Требования безопасности
6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать технику безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также технику безопасности, изложенную в технической документации на хромато-масс-спектрометр.
6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Организация обучения работников безопасности труда — по ГОСТ 12.0.004.
6.3. При работе с газами, находящимися в баллонах под давлением до 15 Мпа (150 кгс/см2), необходимо соблюдать нормы и правила <2>. Запрещается открывать вентиль баллона, не установив в нем понижающий редуктор.
<2> Приказ Ростехнадзора от 15.12.2020 № 536 «Об утверждении федеральных норм и правил в области промышленной безопасности „Правила промышленной безопасности при использовании оборудования, работающего под избыточным давлением“ (зарегистрирован Минюстом России 31.12.2020, регистрационный № 61998).»
6.4. Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на хромато-масс-спектрометре, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.
VII. Условия измерений
7.1 При выполнении измерений выполняют следующие условия:
- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха плюс (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;
- выполнение измерений на хромато-масс-спектрометре проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
Отбор проб производится в соответствии с утвержденными документами <3>.
<3> Унифицированные правила отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов, утвержденные заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 № 2051-79, ГОСТ ISO 24333 «Межгосударственный стандарт. Зерно и продукты его переработки. Отбор проб»; ГОСТ 7194 «Государственный стандарт союза ССР. Картофель свежий. Правила приемки и методы определения качества».
Пробы зерна и соломы для определения остатков в урожае хранят в бумажной или тканевой упаковке при комнатной температуре не более 6 месяцев. Перед анализом пробы зерна доводят до стандартной влажности и измельчают. Пробы картофеля хранят до анализа в герметичной таре в морозильной камере при температуре не выше минус 18 °C.
VIII. Подготовка к выполнению измерений
8.1 Подготовка к выполнению измерений.
Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление растворов и контрольной пробы, кондиционирование хроматографической колонки, приготовление основных и градуировочных растворов, установление градуировочной характеристики.
8.2 Очистка органических растворителей.
Растворители, используемые для анализа, специальной подготовки не требуют. Рекомендуется проверить чистоту применяемых растворителей. При обнаружении примесей, которые могут мешать определению, растворители очищают общепринятыми методами.
8.3 Приготовление растворов.
8.3.1. Раствор для экстракции — раствор соляной кислоты в метаноле в соотношении 1:99. 1 см3 соляной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1 дм3 и доводят объем до метки метанолом. Раствор используют сразу после приготовления.
8.3.2. Фаза A — 0,5%-й раствор муравьиной кислоты в воде: 5 см3 муравьиной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1 дм3 и доводят объем до метки водой. Раствор хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней при комнатной температуре.
Фаза B — метанол для масс-спектрометрии.
8.3.3. Приготовление контрольной пробы: контрольную пробу измельченного зерна, ботвы или клубней картофеля (5 г) или соломы (2 г) помещают в пробирки полипропиленовые центрифужные на 50 см3, добавляют 10 см3 раствора для экстракции (п. 8.3.1), в случае соломы — 20 см3, и помещают в перемешивающее устройство на 15 мин, затем на 10 мин в центрифугу. После этого 6 см3 экстракта переносят в пробирки полипропиленовые центрифужные на 15 см3, добавляют 0,18 г сорбента для твердофазной экстракции. Затем пробирки помещают в перемешивающее устройство на 10 мин, далее на 10 мин в центрифугу. Аликвоту (5 см3) упаривают на ротационном испарителе досуха. Сухой остаток растворяют в 5 см3 фазы A (п. 8.3.2) и используют для приготовления градуировочных растворов. Срок хранения — не более 1 недели при температуре плюс (4 — 6) °C.
8.4 Кондиционирование колонки.
Перед началом анализа аналитическую колонку кондиционируют в потоке подвижной фазы (0,2 — 0,3) см3/мин до стабилизации нулевой линии.
8.5 Приготовление основных, рабочих и градуировочных растворов.
8.5.1 Приготовление основных и рабочих растворов.
8.5.1.1. Основной раствор глюфосината аммония с концентрацией 1,0 мг/см3: точную навеску глюфосината аммония (50,0 +/- 0,5) мг помещают в мерную колбу вместимостью 50 см3, растворяют в фазе A (п. 8.3.2) и доводят объем до метки тем же растворителем.
8.5.1.2. Основной раствор 3-метилфосфино-пропионовой кислоты с концентрацией 1,0 мг/см3: точную навеску 3-метилфосфино-пропионовой кислоты (50,0 +/- 0,5) мг помещают в мерную колбу вместимостью 50 см3, растворяют в фазе A (п. 8.3.2) и доводят объем до метки тем же растворителем.
8.5.1.3. Рабочий раствор глюфосината аммония с концентрацией 1,0 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 100 см3 пипеточным дозатором вносят 0,1 см3 основного раствора глюфосината аммония и доводят до метки фазой A (п. 8.3.2).
8.5.1.4. Рабочий раствор 3-метилфосфино-пропионовой кислоты с концентрацией 1,0 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 100 см3 пипеточным дозатором вносят 0,1 см3 основного раствора 3-метилфосфино-пропионовой кислоты и доводят до метки фазой A (п. 8.3.2).
8.5.2 Приготовление градуировочных растворов.
Градуировочные растворы глюфосината аммония и 3-метилфосфино-пропионовой кислоты с концентрациями по 10, 25, 50, 100 и 200 нг/см3 каждого вещества готовят следующим образом, используя в качестве растворителя контрольную пробу каждой матрицы, приготовленной по п. 8.3.3.
8.5.2.1. Раствор № 1 с концентрацией 200 нг/см3: в хроматографическую виалу с помощью пипеточного дозатора помещают по 200 мм3 рабочего раствора глюфосината аммония и 3-метилфосфино-пропионовой кислоты и добавляют 600 мм3 раствора контрольной пробы соответствующей матрицы, приготовленной по п. 8.3.3.
8.5.2.2. Раствор № 2 с концентрацией 100 нг/см3: в хроматографическую виалу с помощью пипеточного дозатора помещают по 100 мм3 рабочего раствора глюфосината аммония и 3-метилфосфино-пропионовой кислоты и добавляют 800 мм3 раствора контрольной пробы соответствующей матрицы, приготовленной по п. 8.3.3.
8.5.2.3. Раствор № 3 с концентрацией 50 нг/см3: в хроматографическую виалу с помощью пипеточного дозатора помещают по 50 мм3 рабочего раствора глюфосината аммония и 3-метилфосфино-пропионовой кислоты и добавляют 900 мм3 раствора контрольной пробы соответствующей матрицы, приготовленной по п. 8.3.3.
8.5.2.4. Раствор № 4 с концентрацией 25 нг/см3: в хроматографическую виалу с помощью пипеточного дозатора помещают по 25 мм3 рабочего раствора глюфосината аммония и 3-метилфосфино-пропионовой кислоты и добавляют 950 мм3 раствора контрольной пробы соответствующей матрицы, приготовленной по п. 8.3.3.
8.5.2.5. Раствор № 5 с концентрацией 10 нг/см3: в хроматографическую виалу с помощью пипеточного дозатора помещают по 10 мм3 рабочего раствора глюфосината аммония и 3-метилфосфино-пропионовой кислоты и добавляют 980 мм3 раствора контрольной пробы соответствующей матрицы, приготовленной по п. 8.3.3.
Основной раствор можно хранить в холодильнике при температуре плюс (0 — 4) °C в течение 1 месяца, рабочий и градуировочные растворы — в течение 1 дня.
При изучении полноты определения глюфосината аммония и 3-метилфосфино-пропионовой кислоты в матрицах используют растворы в фазе A (п. 8.3.2), приготовленные из основного раствора методом последовательного разбавления по объему.
8.6 Установление градуировочной характеристики.
Для каждого из градуировочных растворов регистрируют хроматограммы в условиях, указанных в п. 9.2, и определяют абсолютное время удерживания и площади пиков глюфосината аммония и 3-метилфосфино-пропионовой кислоты (в усл. ед.) при регистрации дочерних отрицательных ионов после разрушения материнских ионов (регистрация «перехода») в режиме динамического мультиреакционного мониторинга (глюфосинат аммония 180 \rightarrow 63 , 180 \rightarrow 85 , 180 \rightarrow 95 и 3-метилфосфино-пропионовая кислота 151 \rightarrow 63 , 151 \rightarrow 107 , 151 \rightarrow 133 ).
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика от концентрации глюфосината аммония и 3-метилфосфино-пропионовой кислоты в растворе (нг/см3), устанавливают методом абсолютной калибровки по не менее чем 4-м растворам для градуировки.
В инжектор хромато-масс-спектрометра вводят по 5 мм3 каждого градуировочного раствора и анализируют по п. 9.2. Осуществляют не менее 5-ти параллельных измерений.
Градуировку признают удовлетворительной, если значение коэффициента линейной корреляции оказывается не ниже 0,99.
Градуировочную зависимость признают стабильной при выполнении следующего условия:
\frac{|C - C_{\text{К}}|}{C} \cdot 100 \leq \lambda_{\text{контр}.} ,
где: C — аттестованное значение массовой концентрации глюфосината аммония или 3-метилфосфино-пропионовой кислоты в градуировочном растворе, нг/см3;
Cк — результат контрольного измерения массовой концентрации глюфосината аммония или 3-метилфосфино-пропионовой кислоты в градуировочном растворе, нг/см3;
\lambda_{\text{контр}.} — норматив контроля градуировочного коэффициента, % ( \lambda_{\text{контр}.} = 10% при P = 0,95).
Если расхождение превышает 10%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов глюфосината аммония и 3-метилфосфино-пропионовой кислоты. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики устанавливают ее заново.
Градуировочную характеристику следует проверять перед началом измерений, при замене реактивов, хроматографической колонки или элементов хроматографической системы.
IX. Выполнение определения
9.1. Экстракция глюфосината аммония и 3-метилфосфино-пропионовой кислоты.
Навеску измельченной ботвы, клубней картофеля, зерна (5 г) или соломы (2 г) помещают в полипропиленовую центрифужную пробирку объемом 50 см3, добавляют 10 см3 раствора для экстракции (п. 8.3.1), для соломы — 20 см3. Пробирку плотно закрывают, помещают в перемешивающее устройство на 15 мин, затем на 10 мин в центрифугу. Пипеточным дозатором аликвоту экстракта объемом 6 см3 переносят в пробирку объемом 15 см3, содержащую 0,18 г сорбента для твердофазной экстракции, помещают на 10 мин в перемешивающее устройство и затем центрифугируют в течение 10 мин при скорости 4000 об/мин. От верхнего слоя отбирают пипеточным дозатором 1 см3 экстракта, соответствующего 0,5 г ботвы, клубней картофеля или зерна и 0,1 г соломы, переносят в круглодонную колбу и упаривают на ротационном испарителе досуха. Сухой остаток растворяют в 1 см3 фазы A (п. 8.3.2) и 5 мм3 вводят в хромато-масс-спектрометра.
9.2 Условия измерений.
9.2.1. Хроматографические условия измерений для ботвы и клубней картофеля.
Хромато-масс-спектрометр, состоящий из высокоэффективного жидкостного хроматографа и масс-спектрометра. Аналитическая колонка, заполненная сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18 (100 x 2,1) мм, 2,2 мкм. Температура колонки плюс (40 +/- 1) °C. Скорость потока элюента 0,15 см3/мин. Объем вводимой пробы 5 мм3. Режим элюирования — изократический: фаза A — 0,5% муравьиная кислота, фаза B — метанол в соотношении 99:1. Время удерживания глюфосината аммония (1,7 +/- 0,1) мин, 3-метилфосфино-пропионовой кислоты (3,4 +/- 0,1) мин.
9.2.2 Хроматографические условия измерений для зерна.
Хромато-масс-спектрометр, состоящий из высокоэффективного жидкостного хроматографа и масс-спектрометра. Аналитическая колонка, заполненная сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18 (100 x 2,1) мм, 2,2 мкм. Температура колонки плюс (40 +/- 1) °C. Скорость потока элюента 0,3 см3/мин. Объем вводимой пробы 5 мм3. Время удерживания глюфосината аммония (1,0 +/- 0,1) мин, 3-метилфосфино-пропионовой кислоты (1,8 +/- 0,1) мин.
| Время, мин | % A | % B |
|---|---|---|
| 0 | 99 | 1 |
| 1 | 70 | 30 |
| 1,5 | 70 | 30 |
| 1,51 | 99 | 1 |
| 3,0 | 99 | 1 |
Режим элюирования — градиентный для анализа зерна
9.2.3 Хроматографические условия измерений для соломы.
Хромато-масс-спектрометр, состоящий из высокоэффективного жидкостного хроматографа и масс-спектрометра. Аналитическая колонка, заполненная сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18 (100 x 2,1) мм, 2,2 мкм. Температура колонки плюс (40 +/- 1) °C. Объем вводимой пробы 5 мм3. Время удерживания глюфосината аммония (1,8 +/- 0,1) мин, 3-метилфосфино-пропионовой кислоты (2,5 +/- 0,1) мин.
| Время, мин | % A | % B | Скорость потока элюента, см3/мин |
|---|---|---|---|
| 0 | 99 | 1 | 0,15 |
| 1,5 | 60 | 40 | 0,15 |
| 2,5 | 60 | 40 | 0,30 |
| 3,5 | 60 | 40 | 0,30 |
| 4,0 | 99 | 1 | 0,15 |
| 4,5 | 99 | 1 | 0,15 |
Режим элюирования — градиентный для анализа соломы
9.3 Масс-спектрометрические условия измерений.
9.3.1. Масс-спектрометрические условия измерений для ботвы и клубней картофеля.
Ионный источник (англ. Heated Electrospray Ionisation (HESI)). Напряжение на источнике 4200 V (отрицательная полярность). Температура конуса плюс 250 °C, поток газа из конуса 20 дм3/мин, поток распыляющего газа 50 дм3/мин, температура осушающего газа плюс 650 °C, поток осушающего газа 40 дм3/мин. Режим сканирования: мониторинг заданных реакций глюфосината аммония 180 \rightarrow 63 (количественный), 180 \rightarrow 85 , 180 \rightarrow 95 и 3-метилфосфино-пропионовой кислоты 151 \rightarrow 63 (количественный), 151 \rightarrow 107 , 151 \rightarrow 133 .
9.3.2 Масс-спектрометрические условия измерений для зерна и соломы.
Ионный источник HESI. Напряжение на источнике 5000 V (отрицательная полярность). Температура конуса плюс 250 °C, поток газа из конуса 20 дм3/мин, поток распыляющего газа 40 дм3/мин, температура осушающего газа плюс 280 °C, поток осушающего газа 40 дм3/мин. Режим сканирования: мониторинг заданных реакций глюфосината аммония 180 \rightarrow 63 (количественный), 180 \rightarrow 85 , 180 \rightarrow 95 и 3-метилфосфино-пропионовой кислоты 151 \rightarrow 63 (количественный), 151 \rightarrow 107 , 151 \rightarrow 133 .
X. Обработка результатов анализа
10.1. Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки. Содержание глюфосината аммония и 3-метилфосфино-пропионовой кислоты в пробе (Xгфа или Xмфпк, мг/кг) вычисляют по формуле:
где C — концентрация вещества, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, нг/см3;
f — полнота извлечения глюфосината аммония и 3-метилфосфино-пропионовой кислоты, приведенная в табл. 3.1 и 3.2, %;
V — объем пробы, подготовленной для хроматографического анализа, см3 (1 см3);
m — масса анализируемого образца, г (аликвоты, равные 0,5 г для ботвы, клубней и зерна, 0,1 г для соломы).
Содержание остаточных количеств определяемых веществ в образце вычисляют как среднее из двух параллельных определений.
Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 200 нг/см3, разбавляют контрольной пробой, приготовленной по п. 8.3.3.
Суммарное содержание глюфосината аммония и 3-метилфосфино-пропионовой кислоты (Xсум) вычисляют по формуле:
где Xгфа — содержание глюфосината аммония в пробе, мг/кг;
Xмфпк — содержание 3-метилфосфино-пропионовой кислоты в пробе, мг/кг;
1,31 — коэффициент пересчета метаболита в действующее вещество по соотношению молекулярных масс.
XI. Проверка приемлемости результатов параллельных определений
11.1. За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости:
\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq r ,
где X1, X2 - результаты параллельных определений, мг/кг;
r — значение предела повторяемости (приведено в табл. 3.1 и 3.2).
При невыполнении этого условия выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.
XII. Оформление результатов
12.1 Результат анализа представляют в виде:
(X \pm \Delta)\text{мг}/\text{кг} при вероятности P = 0,95,
где X — среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
\Delta — граница абсолютной погрешности, мг/кг;
где \delta — граница относительной погрешности методики (приведено в табл. 3.1 и 3.2), %.
В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
«содержание вещества в пробе „менее нижней границы определения“.»
Например: менее 0,025 мг/кг, где 0,025 мг/кг — предел определения глюфосината аммония в зерне.
XIII. Контроль качества результатов измерений
13.1. Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1 — 6.
Стабильность градуировочной характеристики.
Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят ежедневно перед анализом серии проб. Средствами контроля являются свежеприготовленные образцы для градуировки с массовыми концентрациями, соответствующими нижней и верхней границам и середине диапазона построения градуировочной характеристики.
Градуировочная характеристика признается стабильной при выполнении условия, указанного в п. 8.6.
13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.
Величина добавки Cд должна удовлетворять условию:
C_{\text{д}} = \Delta_{\text{л},X} + \Delta_{\text{л},X\prime} ,
где \pm \Delta_{\text{л},X}( \pm \Delta_{\text{л},X\prime}) — характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой, соответственно), мг/кг; при этом:
\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta ,
где \Delta — граница абсолютной погрешности, мг/кг:
\Delta = \delta \times X_{\text{ср}}100 ,
где \delta — граница относительной погрешности методики (приведено в табл. 3.1 и 3.2), %.
Результат контроля процедуры Кк рассчитывают по формуле:
где X'ср — среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п. 11.1) содержания компонента в образце с добавкой, мг/кг;
Xср — среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п. 11.1) содержания компонента в испытуемом образце, мг/кг;
Норматив контроля К рассчитывают по формуле:
\text{К } = \sqrt{\Delta_{\text{л},X\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},X}^{2}} ,
Проводят сопоставление результата контроля процедуры (Кк) с нормативом контроля (К).
Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:
процедуру анализа признают удовлетворительной.
При невыполнении этого условия процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры к их устранению.
13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):
\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq R ,
где: X1, X2 - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
R — предел воспроизводимости (приведены в табл. 3.1 и 3.2), %.
Библиографические ссылки
1. Федеральный закон от 30.03.1999 № 52-ФЗ «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения».
2. Приказ Ростехнадзора от 15.12.2020 № 536 «Об утверждении федеральных норм и правил в области промышленной безопасности „Правила промышленной безопасности при использовании оборудования, работающего под избыточным давлением“.»
3. Унифицированные правила отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов, утвержденные заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 № 2051-79.
4. ГОСТ Р ИСО 5725-1 — 6 «Государственный стандарт Российской Федерации. Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Части 1 — 6».
5. ГОСТ 12.1.007 «Межгосударственный стандарт. Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности».
6. ГОСТ 12.1.019 «Межгосударственный стандарт. Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты».
7. ГОСТ 12.1.004 «Межгосударственный стандарт. Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования».
8. ГОСТ 12.4.009 «Межгосударственный стандарт. Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание».
9. ГОСТ 12.0.004 «Межгосударственный стандарт. Система стандартов безопасности труда. Организация обучения безопасности труда. Общие положения».
10. ГОСТ Р 53228 «Национальный стандарт Российской Федерации. Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания».
11. ГОСТ 1770 «Межгосударственный стандарт. Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия».
12. ГОСТ 28311 «Дозаторы медицинские лабораторные. Общие технические требования и методы испытаний».
13. ГОСТ Р 52501 «Национальный стандарт Российской Федерации. Вода для лабораторного анализа. Технические условия».
14. ГОСТ 6995 «Государственный стандарт союза ССР. Реактивы. Метанол-яд. Технические условия».
15. ГОСТ 14261 «Государственный стандарт союза ССР. Кислота соляная особой чистоты. Технические условия».
16. ГОСТ 25336 «Межгосударственный стандарт. Посуда и оборудование лабораторные стеклянные».
17. ГОСТ ISO 24333 «Межгосударственный стандарт. Зерно и продукты его переработки. Отбор проб».
18. ГОСТ 7194 «Государственный стандарт союза ССР. Картофель свежий. Правила приемки и методы определения качества».