---
title: "\"МУК 4.1.3767-22. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств 6-бензиламинопурина в воде, почве, яблоках и соке яблок методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.3767-22"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-3767-22"
---

## "МУК 4.1.3767-22. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств 6-бензиламинопурина в воде, почве, яблоках и соке яблок методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.3767-22. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств 6-бензиламинопурина в воде, почве, яблоках и соке яблок методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 30.05.2022)


<a id="p100001"></a>Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
**А.Ю.ПОПОВА**
30 мая 2022 года


#### <a id="p100002"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ 6-БЕНЗИЛАМИНОПУРИНА В ВОДЕ,**
**ПОЧВЕ, ЯБЛОКАХ И СОКЕ ЯБЛОК МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ**
**ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100004"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.3767-22**

1. <a id="p100005"></a>Разработаны Федеральным государственным бюджетным образовательным учреждением высшего образования "Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова" (Р.А. Стрелецкий, В.С. Горбатов).
2. <a id="p100006"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 30 мая 2022 г.
3. <a id="p100007"></a>Введены впервые.


### <a id="p100008"></a>I. Общие положения и область применения


<a id="p100009"></a>1.1. Настоящие методические указания (далее - МУК) устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (далее - ВЭЖХ) для определения остаточных количества 6-бензиламинопурина в воде в диапазоне 0,001 - 0,01 мг/л и в почве, яблоках, соке яблок в диапазоне 0,01 - 0,1 мг/кг.
<a id="p100010"></a>1.2. МУК предназначены для органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, осуществляющих контроль качества и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов, а также могут быть использованы организациями, аккредитованными в установленном порядке на проведение исследований продовольственного сырья, пищевых продуктов, воды и почвы.

#### <a id="p100011"></a>1.3 МУК носят рекомендательный характер.



### <a id="p100012"></a>II. Физико-химические свойства и токсикологическая характеристика


<a id="p100013"></a>2.1. 6-бензиламинопурин (бензиладенин, 6-БА, 6-БАП) - N-(фенилметил)1N-пурин-6-амин [<1>](#p100015). Синтетический цитокинин. Брутто формула C12H11N5. Молекулярная масса 225,25.

<a id="p100014"></a>

---

<a id="p100015"></a><1> В соответствии с Международным союзом теоретической и прикладной химии (ИЮПАК, англ. International Union of Pure and Applied Chemistry, IUPAC).

<a id="p100016"></a>2.2. Физические и химические свойства. Белый порошок без запаха. Температура кипения плюс 387 °C. Давление паров 6,0 x 10-0,4 МПа (плюс 25 °C). Растворимость в воде 64,5 мг/л (плюс 20 °C). Коэффициент распределение н-октанол - вода KowlogP = 2,16 (плюс 20 °C). Растворим в органических растворителях (мг/дм3, при плюс 20 °C): ацетон - 1130; этилацетат - 493; метанол - 5820. Гидролитически стабилен (pH 7, плюс 20 °C).
<a id="p100017"></a>2.3. Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность (LD50) для крыс - 1584 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD50) для крыс - > 2000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LK50) 4 ч, для крыс - > 5 мг/кг.
<a id="p100018"></a>2.4. Область применения. 6-бензиламинопурин - регулятор роста растений. Стимулирует биосинтез белка, ускоряет скорость деления клеток.


### <a id="p100019"></a>III. Погрешность измерений


<a id="p100020"></a>3.1. При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в [таблице 3.1](#p100022) для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100021"></a>Таблица 3.1

<a id="p100022"></a>Метрологические параметры


| <a id="p100023"></a>Анализируемый объект | <a id="p100024"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/дм3) | <a id="p100025"></a>Показатель точности (граница относительной погрешности) $\pm \delta$ , %<br>P = 0,95 | <a id="p100026"></a>Стандартное отклонение повторяемости, $\sigma_{r}$ , % | <a id="p100027"></a>Предел повторяемости, r, % | <a id="p100028"></a>Предел воспроизводимости, R, % |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100029"></a>Вода | <a id="p100030"></a>0,001 - 0,010 вкл. | <a id="p100031"></a>40 | <a id="p100032"></a>3,0 | <a id="p100033"></a>8,3 | <a id="p100034"></a>11,6 |
| <a id="p100035"></a>Почва | <a id="p100036"></a>0,01 - 0,10 вкл. | <a id="p100037"></a>25 | <a id="p100038"></a>6,5 | <a id="p100039"></a>18,1 | <a id="p100040"></a>25,3 |
| <a id="p100041"></a>Яблоки | <a id="p100042"></a>0,01 - 0,10 вкл. | <a id="p100043"></a>25 | <a id="p100044"></a>3,4 | <a id="p100045"></a>9,6 | <a id="p100046"></a>13,4 |
| <a id="p100047"></a>Сок яблок | <a id="p100048"></a>0,01 - 0,10 вкл. | <a id="p100049"></a>25 | <a id="p100050"></a>3,6 | <a id="p100051"></a>10,1 | <a id="p100052"></a>14,1 |


<a id="p100053"></a>3.2. Полнота извлечения веществ, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для всего диапазона измерений (n = 20) приведены в [таблице 3.2](#p100055).

<a id="p100054"></a>Таблица 3.2

<a id="p100055"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение,
доверительный интервал среднего результата


<table>
<colgroup><col width="17%"><col width="16%"><col width="19%"><col width="16%"><col width="15%"><col width="16%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100056"></a>Анализируемый объект</td><td colspan="5"><a id="p100057"></a>Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td><a id="p100058"></a>Предел обнаружения, мг/кг</td><td><a id="p100059"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td><a id="p100060"></a>Полнота извлечения вещества, %</td><td><a id="p100061"></a>Стандартное отклонение, S, %</td><td><a id="p100062"></a>Доверительный интервал среднего результата, +/-, %</td></tr>
<tr><td><a id="p100063"></a>Вода</td><td><a id="p100064"></a>0,001</td><td><a id="p100065"></a>0,001 - 0,010</td><td><a id="p100066"></a>96,7</td><td><a id="p100067"></a>2,2</td><td><a id="p100068"></a>1,0</td></tr>
<tr><td><a id="p100069"></a>Почва</td><td><a id="p100070"></a>0,01</td><td><a id="p100071"></a>0,01 - 0,10</td><td><a id="p100072"></a>93,3</td><td><a id="p100073"></a>3,9</td><td><a id="p100074"></a>1,7</td></tr>
<tr><td><a id="p100075"></a>Яблоки</td><td><a id="p100076"></a>0,01</td><td><a id="p100077"></a>0,01 - 0,10</td><td><a id="p100078"></a>92,2</td><td><a id="p100079"></a>3,8</td><td><a id="p100080"></a>1,6</td></tr>
<tr><td><a id="p100081"></a>Сок яблок</td><td><a id="p100082"></a>0,01</td><td><a id="p100083"></a>0,01 - 0,10</td><td><a id="p100084"></a>93,7</td><td><a id="p100085"></a>3,8</td><td><a id="p100086"></a>1,7</td></tr>
</table>



### <a id="p100087"></a>IV. Метод измерений


<a id="p100088"></a>4.1. Метод основан на определении 6-бензиламинопурина с помощью ВЭЖХ с использованием ультрафиолетового детектора (ВЭЖХ-УФ).
<a id="p100089"></a>4.2. Определение 6-бензиламинопурина в воде проводится после его экстракции хлористым метиленом при pH = 7. Определение 6-бензиламинопурина в почве проводится после его экстракции смесью водного раствора ацетата аммония с метанолом, очистки и концентрирования в системе несмешивающихся растворителей, очистки на концентрирующих патронах C16 и дополнительного концентрирования. Определение 6-бензиламинопурина в яблоках проводится после его экстракции смесью водного фосфатного буфера с ацетоном, очистки и концентрирования в системе несмешивающихся растворителей, очистки на концентрирующих патронах C16 и дополнительного концентрирования. Определение 6-бензиламинопурина в соке яблок проводится после его экстракции этилацетатом при pH = 7, очистки на концентрирующих патронах C16 и дополнительного концентрирования. Идентификация 6-бензиламинопурина проводится по времени удерживания. Концентрацию 6-бензиламинопурина определяют по площадям соответствующих хроматографических пиков на хроматограммах по методу абсолютной калибровки. В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором колонки и условий хроматографирования.
<a id="p100090"></a>4.3. Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы для воды, почвы, яблок и сока яблок 1,0 нг, средняя полнота извлечения: для воды 96,7%, почвы 93,3%, яблок 92,2%, сока яблок 93,7%.


### <a id="p100091"></a>V. Средства измерений, реактивы и вспомогательные устройства и материалы


<a id="p100092"></a>5.1. При выполнении измерений и подготовке проб применяют средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы, приведенные в [табл. 5.1](#p100094) - [5.3](#p100156).

<a id="p100093"></a>Таблица 5.1

<a id="p100094"></a>Средства измерений


| <a id="p100095"></a>Наименование средств измерения | <a id="p100096"></a>Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| --- | --- |
| <a id="p100097"></a>Весы аналитические, с пределом взвешивания 110 г и дискретностью 0,0001 г | <a id="p100098"></a>ГОСТ Р 53228 |
| <a id="p100099"></a>Весы лабораторные с наибольшим пределом взвешивания до 320 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,001 г | <a id="p100100"></a>ГОСТ Р 53228 |
| <a id="p100101"></a>Прибор/приборы для измерения атмосферного давления, температуры и относительной влажности воздуха | <a id="p100102"></a>Внесено в реестр "Утвержденные типы средств измерений" Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений |
| <a id="p100103"></a>Колбы мерные 2-го класса точности, вместимостью 10, 25, 50, 100, 500 и 1000 см3 | <a id="p100104"></a>[ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |
| <a id="p100105"></a>Меры массы | <a id="p100106"></a>ГОСТ OIML R 111-1 |
| <a id="p100107"></a>Система высокоэффективной жидкостной хроматографии с ультрафиолетовым детектором | <a id="p100108"></a>Внесено в реестр "Утвержденные типы средств измерений" Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений |
| <a id="p100109"></a>Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0; 2,0; 5,0 и 10,0 см3 | <a id="p100110"></a>[ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) |
| <a id="p100111"></a>Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 10, 25, 50, 100, 500 и 1000 см3 | <a id="p100112"></a>[ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |
| <a id="p100113"></a>pH-метр/милливольтметр с диапазоном измерения 0 ... 14 pH; +/- 1999 мВ | <a id="p100114"></a>Внесено в реестр "Утвержденные типы средств измерений" Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений |


<a id="p100115"></a>*Примечание.* Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

<a id="p100116"></a>Таблица 5.2

<a id="p100117"></a>Реактивы


| <a id="p100118"></a>Наименование реактива | <a id="p100119"></a>Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| --- | --- |
| <a id="p100120"></a>6-бензиламинопурин, аналитический стандарт | <a id="p100121"></a>CAS 1214-39-7, содержание основного компонента не менее 99,1% |
| <a id="p100122"></a>Ацетон, химически чистый | <a id="p100123"></a>ГОСТ 2603 |
| <a id="p100124"></a>Вода дистиллированная | <a id="p100125"></a>[ГОСТ Р 58144](https://bukva.ai/docs/usloviya-gost-r-58144-2018) |
| <a id="p100126"></a>Вода для лабораторного анализа 1 степени чистоты | <a id="p100127"></a>[ГОСТ Р 52501](https://bukva.ai/docs/gost-r-52501-2005) |
| <a id="p100128"></a>Ацетонитрил, особой чистоты | <a id="p100129"></a>- |
| <a id="p100130"></a>Натрий углекислый (карбонат натрия), химически чистый | <a id="p100131"></a>ГОСТ 83 |
| <a id="p100132"></a>Метилен хлористый, химически чистый | <a id="p100133"></a>- |
| <a id="p100134"></a>Гидрофосфат натрия 12-водный, чистый | <a id="p100135"></a>[ГОСТ 4172](https://bukva.ai/docs/gost-4172-76) |
| <a id="p100136"></a>Дигидрофосфат натрия 2-водный, чистый | <a id="p100137"></a>[ГОСТ 245](https://bukva.ai/docs/gost-245-76) |
| <a id="p100138"></a>Кальций хлористый, чистый | <a id="p100139"></a>- |
| <a id="p100140"></a>Кислота соляная, химически чистая | <a id="p100141"></a>ГОСТ 3118-77 |
| <a id="p100142"></a>Этилацетат, химически чистый | <a id="p100143"></a>[ГОСТ 22300](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76) |
| <a id="p100144"></a>Гидроксид натрия, чистый для анализа | <a id="p100145"></a>ГОСТ 4328 |
| <a id="p100146"></a>Метанол, химически чистый | <a id="p100147"></a>[ГОСТ 6995](https://bukva.ai/docs/standart-gost-6995-77) |
| <a id="p100148"></a>Аммоний уксуснокислый, чистый для анализа | <a id="p100149"></a>ГОСТ 3117 |
| <a id="p100150"></a>Калий марганцовокислый (перманганат), химически чистый | <a id="p100151"></a>ГОСТ 20490 |
| <a id="p100152"></a>Калий углекислый (карбонат калия, поташ), химически чистый | <a id="p100153"></a>[ГОСТ 4221](https://bukva.ai/docs/standart-gost-4221-76) |


<a id="p100154"></a>*Примечание.* Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.

<a id="p100155"></a>Таблица 5.3

<a id="p100156"></a>Вспомогательные устройства, материалы


<table>
<colgroup><col width="76%"><col width="24%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100157"></a>Наименование вспомогательных устройств, материалов</td><td><a id="p100158"></a>Обозначение и наименование документов, технические характеристики</td></tr>
<tr><td><a id="p100159"></a>1</td><td><a id="p100160"></a>2</td></tr>
<tr><td><a id="p100161"></a>Аппарат для встряхивания</td><td><a id="p100162"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100163"></a>Баня ультразвуковая с потребляемой мощностью 35 Вт, рабочей частотой 37 кГц</td><td><a id="p100164"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100165"></a>Виалы объемом 2 см3, закрываемые завинчивающейся или запрессовывающейся крышкой с тефлонированной резиновой прокладкой</td><td><a id="p100166"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100167"></a>Воронки делительные на 50, 100, 250, 500 и 1000 см3</td><td><a id="p100168"></a>ГОСТ 25336</td></tr>
<tr><td><a id="p100169"></a>Шприцевые мембранные фильтры с диаметром пор 0,45 микрон, диаметром 25 мм</td><td><a id="p100170"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100171"></a>Концентрирующие патроны C16 на основе силикагеля с привитыми гексадецильными группами, масса сорбента 500 мг</td><td><a id="p100172"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100173"></a>Колбы круглодонные (для упаривания) на шлифе вместимостью 150 см3</td><td><a id="p100174"></a><a href="https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93">ГОСТ 9737</a></td></tr>
<tr><td><a id="p100175"></a>Насос диафрагменный, химически стойкий на 100%</td><td><a id="p100176"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100177"></a>Ротационный вакуумный испаритель с ручным подъемником, с диагональным конденсором и объемом испарительной колбы от 50 до 3000 см3, с изменяемой скоростью вращения штока испарителя от 5 до 240 об/мин, с водяной баней с антикоррозионным покрытием объемом 5 дм3 и с диапазоном температур от 20 до 100 °C</td><td><a id="p100178"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100179"></a>Колбы конические плоскодонные на 250 см3</td><td><a id="p100180"></a>ГОСТ 25336</td></tr>
<tr><td><a id="p100181"></a>Колбы круглодонные со шлифом (концентраторы) на 100, 250, 1000, 4000 см3</td><td><a id="p100182"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100183"></a>Колбы остродонные со шлифом на 50 см3</td><td><a id="p100184"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-8682-93">ГОСТ 8682</a></td></tr>
<tr><td><a id="p100185"></a>Колонка хроматографическая стальная, длиной 150 мм, с внутренним диаметром 4,6 мм, зернением 4 мкм, заполненная сорбентом с привитыми октадецильными группами и полярным эндкеппированием</td><td><a id="p100186"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100187"></a>Предколонка хроматографическая стальная, длиной 12,5 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, зернением 4 мкм, заполненная сорбентом с привитыми октадецильными группами</td><td><a id="p100188"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100189"></a>Стаканы стеклянные, термостойкие объемом 25 - 500 см3</td><td><a id="p100190"></a>ГОСТ 25336</td></tr>
<tr><td><a id="p100191"></a>Центрифуга лабораторная с максимальным рабочим числом оборотов 10000 об/мин, с рабочим объемом ротора 50 см3 x 6 ячеек</td><td><a id="p100192"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100193"></a>Химические бутыли объемом 1 дм3 с завинчивающейся крышкой</td><td><a id="p100194"></a>ГОСТ Р 51477</td></tr>
<tr><td colspan="2"><a id="p100195"></a><a id="p100196"></a>Шприцы медицинские объемом 50 см3<br><a href="https://bukva.ai/docs/gost-iso-7886-1-2011">ГОСТ 7886-1</a></td></tr>
<tr><td><a id="p100197"></a>Вакуумная установка для твердофазной экстракции (манифолд) на 12 позиций</td><td><a id="p100198"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100199"></a>Аппарат для перегонки растворителей</td><td><a id="p100200"></a>-</td></tr>
<tr><td></td><td><a id="p100201"></a>Примечание. Допускается использование вспомогательных средств измерений, устройств и материалов с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.</td></tr>
</table>



### <a id="p100202"></a>VI. Требования безопасности


<a id="p100203"></a>6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на комплекс жидкостного хроматографа.
<a id="p100204"></a>6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.
<a id="p100205"></a>6.3. К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются специалисты, имеющие опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой проведения анализа, освоившие метод анализа в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы контроля при проведении процедуры контроля погрешности анализа.


### <a id="p100206"></a>VII. Условия измерений



#### <a id="p100207"></a>7.1 При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- <a id="p100208"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80% и нормальном атмосферном давлении;
- <a id="p100209"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе с УФ-детектором проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


### <a id="p100210"></a>VIII. Подготовка к выполнению измерений


<a id="p100211"></a>8.1. Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочных характеристик, отбор проб.

#### <a id="p100212"></a>8.1 Подготовка органических растворителей


##### <a id="p100213"></a>8.1.1 Очистка ацетонитрила

<a id="p100214"></a>Ацетонитрил, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 5 - 6 часов. Затем ацетонитрил сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 см3 аппарата для перегонки растворителей. Ацетонитрил перегоняют при температуре плюс 81,5 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше плюс 81,5 °C, отбрасывают.

##### <a id="p100215"></a>8.1.2 Приготовление бидистиллированной воды

<a id="p100216"></a>Дистиллированную воду помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 см3 от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к ней марганцовокислый калий из расчета 1 г/дм3 и кипятят в течение 6 часов. Собирают фракции, отогнанные при температуре плюс 100,0 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше плюс 100,0 °C, отбрасывают.

##### <a id="p100217"></a>8.1.5 Очистка хлористого метилена

<a id="p100218"></a>Хлористый метилен промывают равным объемом 5% раствора натрия углекислого (безводного), осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 12 - 24 часов. Затем хлористый метилен сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 см3 аппарата для перегонки растворителей. Хлористый метилен перегоняют при температуре 40,0 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 40,0 °C, отбрасывают.

##### <a id="p100219"></a>8.1.6 Очистка ацетона

<a id="p100220"></a>Ацетон перегоняют над перманганатом калия и прокаленным карбонатом калия (на 1 дм3 ацетона 10 г KMnO<sub>4</sub> и 2 г K<sub>2</sub>CO<sub>3</sub>).

#### <a id="p100221"></a>8.2 Приготовление растворов для проведения анализа


##### <a id="p100222"></a>8.2.1 Приготовление рабочих растворов


###### <a id="p100223"></a>8.2.1.1 Приготовление 5% раствора натрия углекислого

<a id="p100224"></a>50 г гидрокарбоната натрия переносят в мерную колбу на 1000 см3, добавляют 200 - 300 см3 дистиллированной воды, перемешивают до полного растворения и доводят водой объем в колбе до метки.

###### <a id="p100225"></a>8.2.1.2 Приготовление 0,5 М ацетата аммония

<a id="p100226"></a>В мерную колбу объемом 1 дм3 помещают 38,54 г ацетата аммония, добавляют 200 - 300 см3 дистиллированной воды, перемешивают до полного растворения и доводят водой объем в колбе до метки.

###### <a id="p100227"></a>8.2.1.3 Приготовление 5 М гидроксида натрия

<a id="p100228"></a>В термостойкий стакан объемом 1 дм3 помещают 200 г гидроксида натрия, добавляют 500 см3 дистиллированной воды, перемешивают до полного растворения, переливают в мерную колбу объемом 1 дм3 и доводят водой объем в колбе до метки.

###### <a id="p100229"></a>8.2.1.4 Приготовление 0,05 М водного раствора гидрофосфата натрия

<a id="p100230"></a>17,91 г гидрофосфата натрия переносят в мерную колбу на 1000 см3, добавляют 200 - 300 см3 дистиллированной воды, перемешивают до полного растворения и доводят водой объем в колбе до метки.

###### <a id="p100231"></a>8.2.1.5 Приготовление 0,05 М водного раствора дигидрофосфата натрия

<a id="p100232"></a>7,8 г дигидрофосфата натрия переносят в мерную колбу на 1000 см3, добавляют 200 - 300 см3 дистиллированной воды, перемешивают до полного растворения и доводят водой объем в колбе до метки.

###### <a id="p100233"></a>8.2.1.6 Приготовление 0,05 М фосфатного буфера

<a id="p100234"></a>В мерную колбу объемом 1 дм3 помещают 500 см3 дистиллированной воды, прибавляют 30,5 см3 0,05 М раствора гидрофосфата натрия [(п. 8.2.1.4)](#p100229) и 19,5 см3 0,5 М раствора дигидрофосфата натрия [(п. 8.2.1.5)](#p100231), перемешивают и доводят до метки водой.

###### <a id="p100235"></a>8.2.1.7 Приготовление 5 М раствора соляной кислоты

<a id="p100236"></a>Мерным цилиндром отбирают 205 см3 концентрированной соляной кислоты и осторожно переносят в мерную колбу на 500 см3, куда предварительно наливают около 100 см3 дистиллированной воды. Затем раствор перемешивают и после охлаждения доводят водой объем в колбе до метки (при приготовлении раствора соблюдать осторожность и работать под тягой).

###### <a id="p100237"></a>8.2.1.8 Приготовление 80% раствора метанола в 0,5 М ацетате аммония

<a id="p100238"></a>В мерную колбу объемом 1 дм3 помещают 500 см3 метанола, прибавляют 200 см3 0,5 М ацетата аммония [(п. 8.2.1.2)](#p100225), перемешивают, объем доводят до метки метанолом.

###### <a id="p100239"></a>8.2.1.9 Приготовление 80% раствора ацетона в фосфатном буфере

<a id="p100240"></a>В мерную колбу объемом 1 дм3 помещают 500 см3 ацетона, прибавляют 200 см3 0,05 М фосфатного буфера [(п. 8.2.1.6)](#p100233), перемешивают, объем доводят до метки ацетоном.

###### <a id="p100241"></a>8.2.1.10 Приготовление 50% раствора метанола в фосфатном буфере

<a id="p100242"></a>В мерную колбу объемом 1 дм3 помещают 500 см3 метанола, доводят объем до метки 0,05 М фосфатным буфером [(п. 8.2.1.6)](#p100233) и перемешивают.

###### <a id="p100243"></a>8.2.1.11 Приготовление 20% раствора метанола в фосфатном буфере

<a id="p100244"></a>В мерную колбу объемом 1 дм3 помещают 200 см3 метанола, доводят объем до метки 0,05 М фосфатным буфером [(п. 8.2.1.6)](#p100233) и перемешивают.

##### <a id="p100245"></a>8.2.2 Приготовление градуировочных растворов


###### <a id="p100246"></a>8.2.2.1 Стандартный раствор N 1 с концентрацией 6-бензиламинопурина 1,0 мг/см3

<a id="p100247"></a>Взвешивают 10 мг 6-бензиламинопурина в мерной колбе объемом 10 см3. Навеску растворяют в ацетоне и доводят объем до метки ацетоном. Полученный стандартный раствор N 1 используется для приготовления стандартных раствора N 2. Стандартный раствор N 1 хранится в холодильнике в течение 6 месяцев.

###### <a id="p100248"></a>8.2.2.2 Промежуточный раствор N 2 с концентрацией 6-бензиламинопурина 10,0 мкг/см3

<a id="p100249"></a>Из стандартного раствора N 1 отбирают пипеткой 1 см3 и помещают в мерную колбу объемом 100 см3. Доводят объем до метки ацетоном при перемешивании. Промежуточный раствор N 2 используется для для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Промежуточный раствор N 2 хранят в холодильнике не более 2 месяцев.

###### <a id="p100250"></a>8.2.2.3 Стандартный раствор N 3 с концентрацией 6-бензиламинопурина 1,0 мкг/см3

<a id="p100251"></a>Из стандартного раствора N 2 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор N 3 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике не более 30 суток.

###### <a id="p100252"></a>8.2.2.4 Стандартный раствор N 4 с концентрацией 6-бензиламинопурина 0,5 мкг/см3

<a id="p100253"></a>Из стандартного раствора N 3 отбирают пипеткой 5 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор N 4 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике не более 30 суток.

###### <a id="p100254"></a>8.2.2.5 Стандартный раствор N 5 с концентрацией 6-бензиламинопурина 0,2 мкг/см3

<a id="p100255"></a>Из стандартного раствора N 3 отбирают пипеткой 2 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки смесью ацетоном. Стандартный раствор N 5 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике не более 30 суток.

###### <a id="p100256"></a>8.2.2.6 Стандартный раствор N 6 с концентрацией 6-бензиламинопурина 0,08 мкг/см3

<a id="p100257"></a>Из стандартного раствора N 5 отбирают пипеткой 4 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор N 6 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике не более 30 суток.
<a id="p100258"></a>8.2.2.7 Стандартные растворы 6-бензиламинопурина с концентрацией по 1,0; 0,5; 0,2, 0,1 мкг/см3 для внесения в контрольные образцы и установления метрологических характеристик
<a id="p100259"></a>Методом последовательного разведения ацетоном стандартного раствора N 2 готовят растворы, содержащие по 1,0; 0,5; 0,2; 0,1 мкг/см3, и вносят 1 см3 этих растворов в контрольные образцы.

#### <a id="p100260"></a>8.3 Установление градуировочной характеристики

<a id="p100261"></a>Градуировочную характеристику, выражающую отношение поглощения при длине волны 268 нм от концентрации 6-бензиламинопурина в растворе (мкг/см3), устанавливают путем определения соотношения площади пиков, отвечающих идентифицируемому компоненту, и концентрации аналитического стандарта по 4 растворам для установления градуировочной характеристики.
<a id="p100262"></a>Градуировочную зависимость для определения 6-бензиламинопурина в воде, почве, яблоках и соке яблок устанавливают по 4 растворам для градуировки с концентрацией 0,08, 0,2, 0,5 и 1,0 мкг/см3, приготовленным согласно [п.п. 8.2.2.3](#p100250) - [8.2.2.6](#p100256).
<a id="p100263"></a>В инжектор хроматографа вводят по 10 мм3 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 10.5](#p100331). Осуществляют не менее 5 параллельных измерений.
<a id="p100264"></a>При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее двух образцов растворов для градуировки, содержание 6-бензиламинопурина в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,08 до 1,0 мкг/см3.
<a id="p100265"></a>Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:

<a id="p100266"></a> $A = \frac{|X - C| \cdot 100}{C} \leq B,$ 

<a id="p100267"></a>где X - концентрация 6-бензиламинопурина в пробе при контрольном измерении, мкг/см3;
<a id="p100268"></a>C - известная концентрация градуировочного раствора 6-бензиламинопурина, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3;
<a id="p100269"></a>B - норматив контроля погрешности градуировочной характеристики, % (B = 5% при P = 0,95).
<a id="p100270"></a>8.4. Подготовка концентрирующих патронов типа C16 для очистки экстрактов и проверка хроматографического поведения 6-бензиламинопурина на них

##### <a id="p100271"></a>8.4.1 Подготовка концентрирующих патронов для очистки экстракта

<a id="p100272"></a>Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 1 капля/сек.
<a id="p100273"></a>Патрон C16 устанавливают в манифолд.
<a id="p100274"></a>Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 5 см3 метанола, затем 5 см3 фосфатного буфера [(п. 8.2.1.6)](#p100233). Элюаты отбрасывают.
<a id="p100275"></a>Высыхание поверхности патрона не допускается.

##### <a id="p100276"></a>8.4.2 Проверка хроматографического поведения 6-бензиламинопурина на концентрирующих патронах C16

<a id="p100277"></a>В концентратор объемом 100 см3 вносят 1 см3 стандартного раствора 6-бензиламинопурина в ацетонитриле с концентрацией 1,0 мкг/см3 и упаривают его досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 60 °C.
<a id="p100278"></a>В концентратор помещают 10 см3 фосфатного буфера [(п. 8.2.1.6)](#p100233), обрабатывают концентратор 2 минуты в ультразвуковой ванне, обмывают стенки концентратора и вносят раствор на подготовленный патрон. Процедуру обработки концентратора повторяют еще раз тем же объемом буфера и вторую порцию раствора также наносят на тот же патрон. Пропускают элюат, собирая его в отдельный концентратор объемом 100 см3 и упаривая досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 60 °C.
<a id="p100279"></a>На патрон вносят 5 см3 20% раствора метанола в буфере [(п. 8.2.1.11)](#p100243) и собирают элюат в отдельный концентратор объемом 100 см3, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 60 °C.
<a id="p100280"></a>После этого на патрон вносят 10 см3 50% метанола в буфере [(п. 8.2.1.10)](#p100241), собирают элюат в отдельные концентраторы объемом 50 см3 порциями по 2 см3, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 60 °C.
<a id="p100281"></a>Сухой остаток каждой фракции растворяют в 1 см3 ацетона, обрабатывая колбы в ультразвуковой ванне в течение 2 минут, и хроматографируют.
<a id="p100282"></a>Определяют фракции, содержащие 6-бензиламинопурина, полноту смывания с патрона и необходимый объем элюента.
<a id="p100283"></a>Изучение поведения 6-бензиламинопурина на концентрирующих патронах типа C16 проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии патронов.

#### <a id="p100284"></a>8.5 Подготовка и кондиционирование колонки для жидкостной хроматографии

<a id="p100285"></a>Хроматографическую колонку с предколонкой устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при температуре 25 °C 3 - 4 часа.


### <a id="p100286"></a>IX. Отбор и хранение проб


<a id="p100287"></a>9.1. Отбор проб производится в соответствии с документами [<2>](#p100289).

<a id="p100288"></a>

---

<a id="p100289"></a><2> Унифицированные [правила](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов, утвержденные Минздравом СССР 21.08.1979 N 2051-79; [ГОСТ 31861](https://bukva.ai/docs/gost-31861-2012) "Вода. Общие требования к отбору проб"; [ГОСТ 17.4.3.01](https://bukva.ai/docs/standart-gost-17-4-3-01-2017) "Охрана природы. Почвы. Общие требования к отбору проб"; [ГОСТ Р 58595](https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-58595-2019) "Почвы. Отбор проб"; [ГОСТ 27572](https://bukva.ai/docs/usloviya-gost-27572-2017) "Яблоки свежие для промышленной переработки. Технические условия".

<a id="p100290"></a>9.2. Пробы воды хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре плюс 4 °C не более 10 суток.
<a id="p100291"></a>9.3. Для длительного хранения проб почвы, почву подсушивают при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы могут храниться в темной таре в течение года. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм.
<a id="p100292"></a>9.4. Пробы яблок хранят в холодильнике в полиэтиленовых пакетах при температуре от 0 до плюс 4 °C не более суток. Для длительного хранения пробы замораживают и хранят в морозильной камере при температуре минус 18 °C до 2 лет. Перед анализом яблоки размораживают и измельчают на терке. Пробы яблочного сока хранят до анализа в морозильной камере при температуре не выше минус 18 °C в течение месяца, в холодильнике при температуре 0 до плюс 4 °C в стеклянной таре с притертой пробкой в течение недели.


### <a id="p100293"></a>X. Выполнение измерений



#### <a id="p100294"></a>10.1 Вода


##### <a id="p100295"></a>10.1.1 Экстракция

<a id="p100296"></a>Пробу воды объемом 100 см3 помещают в делительную воронку объемом 500 см3. Доводят до pH = 7 при помощи 5 М гидроксида натрия [(п. 8.2.1.3)](#p100227) или 5 М соляной кислоты [(п. 8.2.1.7)](#p100235). 6-бензиламинопурин экстрагируют тремя порциями хлористого метилена объемом по 20 см3 каждая, встряхивая делительную воронку каждый раз по 2 минуты. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний слой (хлористый метилен) собирают в концентратор объемом 100 см3. Полученный экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани плюс 30 °C. Сухой остаток растворяют в 1 см3 ацетона, обрабатывая в ультразвуковой ванне в течение 2 минут, после чего пробу переносят в виалу объемом 2 см3 для автоматического дозатора проб и 10 мм3 вводят в хроматограф.

#### <a id="p100297"></a>10.2 Почва


##### <a id="p100298"></a>10.2.1 Экстракция

<a id="p100299"></a>Образец почвы массой 10 г помещают в коническую плоскодонную колбу на 250 см3, добавляют 40 см3 смеси метанола и 0,5 М водного раствора ацетата аммония [(п. 8.2.1.8)](#p100237) и помещают на 15 минут на аппарат для встряхивания проб и затем на 15 минут в ультразвуковую ванну. Дают отстояться 3 минуты, сливают супернатант в центрифужную пробирку на 50 см3 и центрифугируют в течение 10 минут при скорости 5000 оборотов в минуту. Супернатант фильтруют через фильтр 0,45 микрон при помощи медицинского шприца объемом 50 см3 в концентратор объемом 250 см3. Экстракцию повторяют еще раз, переливают экстракт вместе с пробой (не отстаивая) в центрифужную пробирку на 50 см3, центрифугируют, фильтруют и объединяют экстракты.

##### <a id="p100300"></a>10.2.2 Подготовка экстракта для определения 6-бензиламинопурина

<a id="p100301"></a>Полученный экстракт [(п. 10.2.1)](#p100298) упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани плюс 45 °C до полного улетучивания метанола.

##### <a id="p100302"></a>10.2.3 Очистка полученного экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей

<a id="p100303"></a>К водному остатку [(п. 10.2.2)](#p100300) добавляют 10 см3 0,05 М фосфатного буфера [(п. 8.2.1.6)](#p100233), обрабатывают концентратор в ультразвуковой ванне в течение 2 минут и переносят экстракт в делительную воронку объемом 100 см3. Экстракцию производят 30 см3 этилацетата при помощи интенсивного встряхивания в течение 2 минут. Жидкости в воронке дают расслоиться и отбирают верхний слой в колбу концентратор объемом 100 см3. Экстракцию повторяют еще дважды, экстракты объединяют. Экстракт отгоняют на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре водяной бани 30 °C.

##### <a id="p100304"></a>10.2.4 Очистка полученного экстракта при помощи твердофазной экстракции

<a id="p100305"></a>К экстракту в концентраторе [(п. 10.2.3)](#p100302) приливают 10 см3 фосфатного буфера [(п. 8.2.1.6)](#p100233), обрабатывают в ультразвуковой ванне в течение 2 минут и переносят в лабораторный стакан объемом 25 см3. Процедуру переноса повторяют еще раз тем же объемом буфера, вторую порцию экстракта объединяют с первой и наносят на подготовленный патрон C16. Процедуру переноса повторяют еще раз тем же объемом буфера и вторую порцию раствора объединяют с первой. Далее патрон промывают 5 см3 20% раствора метанола в фосфатном буфере [(п. 8.2.1.11)](#p100243). Затем через патрон пропускают 10 см3 50% раствора метанола в фосфатном буфере [(п. 8.2.1.10)](#p100241), отбрасывая первые 2 см3 и собирая остальные 8 см3 в остродонную колбу объемом 50 см3. Для регенерации патрона с целью повторного использования его промывают 10 см3 метанола.

##### <a id="p100306"></a>10.2.5 Дополнительное концентрирование и очистка экстракта

<a id="p100307"></a>Экстракт [(п. 10.2.4)](#p100304) отгоняют на ротационном вакуумном испарителе при плюс 50 °C до улетучивания метанола. К водному остатку приливают 10 см3 фосфатного буфера [(п. 8.2.1.6)](#p100233), обрабатывают в ультразвуковой ванне в течение 2 мин и помещают в делительную воронку объемом 50 см3. Далее в отгонную колбу приливают еще 5 см3 фосфатного буфера [(п. 8.2.1.6)](#p100233), повторяют обработку в ультразвуковой ванне и присоединяют к экстракту в воронке. Затем в воронку приливают 20 см3 этилацетата и производят экстракцию интенсивным встряхиванием в течение 2 мин. Дают фазам расслоиться и отбирают верхний органический слой в остродонную колбу объемом 50 см3. Экстракцию повторяют еще раз, экстракты объединяют. Далее экстракт отгоняют на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре водяной бани плюс 30 °C. Затем в колбу добавляют 1 см3 ацетона и обрабатывают в ультразвуковой ванне в течение 2 мин.
<a id="p100308"></a>После этого экстракт переносится в хроматографическую виалу объемом 2 см3 для автоматического дозатора проб и 10 мм3 вводят в хроматограф.

#### <a id="p100309"></a>10.3 Яблоки


##### <a id="p100310"></a>10.3.1 Экстракция

<a id="p100311"></a>Образец измельченных яблок массой 10 г помещают в плоскодонную колбу объемом 250 см3, прибавляют 40 см3 раствора 80% ацетона в фосфатном буфере [(п. 8.2.1.9)](#p100239) и помещают на 30 минут на аппарат для встряхивания проб. Экстракт отстаивают в течение 3 минут и фильтруют надосадочную жидкость через фильтр "красная лента" в колбу для концентрирования объемом 250 см3. Экстракцию повторяют еще раз, экстракты объединяют.

##### <a id="p100312"></a>10.3.2 Подготовка экстракта для определения 6-бензиламинопурина

<a id="p100313"></a>Полученный экстракт [(п. 10.3.1)](#p100310) упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани плюс 45 °C до полного улетучивания ацетона.

##### <a id="p100314"></a>10.3.3 Очистка полученного экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей

<a id="p100315"></a>Экстракт [(п. 10.3.3)](#p100314) подготавливается согласно [п. 10.2.3](#p100302).

##### <a id="p100316"></a>10.3.4 Очистка полученного экстракта при помощи твердофазной экстракции

<a id="p100317"></a>Экстракт [(п. 10.3.3)](#p100314) подготавливается согласно [п. 10.2.4](#p100304).

##### <a id="p100318"></a>10.3.5 Дополнительное концентрирование и очистка экстракта

<a id="p100319"></a>Экстракт [(п. 10.3.4)](#p100316) подготавливается согласно [п. 10.2.5](#p100306).

#### <a id="p100320"></a>10.4 Сок яблок


##### <a id="p100321"></a>10.4.1 Экстракция

<a id="p100322"></a>Образец сока массой 20 граммов помещают в делительную воронку объемом 125 см3. Доводят значение pH до 7 при помощи 5 М гидроксида натрия [(п. 8.2.1.3)](#p100227). Затем в воронку приливают 20 см3 этилацетата и производят экстракцию интенсивным встряхиванием в течение 2 мин. Дают фазам расслоиться и отбирают верхний органический слой в остродонную колбу объемом 50 см3. Экстракцию повторяют еще раз, экстракты объединяют. Далее экстракт отгоняют на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре водяной бани плюс 30 °C.

##### <a id="p100323"></a>10.4.2 Подготовка экстракта для определения 6-бензиламинопурина

<a id="p100324"></a>Полученный экстракт [(п. 10.4.1)](#p100321) упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани плюс 30 °C.

##### <a id="p100325"></a>10.4.3 Очистка полученного экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей

<a id="p100326"></a>Экстракт [(п. 10.4.2)](#p100323) подготавливается согласно [п. 10.2.3](#p100302).

##### <a id="p100327"></a>10.4.4 Очистка полученного экстракта при помощи твердофазной экстракции

<a id="p100328"></a>Экстракт [(п. 10.4.3)](#p100325) подготавливается согласно [п. 10.2.4](#p100304).

##### <a id="p100329"></a>10.4.5 Дополнительное концентрирование и очистка экстракта

<a id="p100330"></a>Экстракт [(п. 10.4.4)](#p100327) подготавливается согласно [п. 10.2.5](#p100306), к сухому остатку добавляют 2 см3 ацетона и обрабатывают в ультразвуковой ванне в течение 2 мин. После этого экстракт переносится в хроматографическую виалу объемом 2 см3 для автоматического дозатора проб и 10 мм3 вводят в хроматограф.

#### <a id="p100331"></a>10.5 Условия хроматографирования

<a id="p100332"></a>Режим хроматографа:
- <a id="p100333"></a>температура колонки: плюс 25 °C;
- <a id="p100334"></a>подвижная фаза: вода - ацетонитрил в градиентном режиме при постоянной скорости потока 1 см3/мин. Градиент потока элюента: 0 - 5 мин - 80:20; к 15 мин - 0:100; 15 - 17 мин - 0:100;
- <a id="p100335"></a>время стабилизации хроматографической системы после анализа пробы - 5 мин (общее время анализа 22 мин);
- <a id="p100336"></a>объем вводимой пробы: 10 мм3;
- <a id="p100337"></a>длина волны детектирования: 268 нм;
- <a id="p100338"></a>линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 0,8 - 10 нг.


### <a id="p100339"></a>XI. Обработка результатов анализа


<a id="p100340"></a>11.1. Для обработки результатов хроматографического анализа используется компьютерное программное обеспечение химического анализа, которое входит в хроматографическую систему.

<a id="p100341"></a>X = C x V/m,

<a id="p100342"></a>где X - содержание 6-бензиламинопурина в пробе, мг/кг (мг/л);
<a id="p100343"></a>C - концентрация 6-бензиламинопурина в экстракте, мкг/см3 (рассчитана при помощи программного обеспечения хроматографической системы);
<a id="p100344"></a>V - объем экстракта;
<a id="p100345"></a>m - масса (объем) анализируемого образца, г (см3).
<a id="p100346"></a>Результат округляют до четвертого знака после запятой.

#### <a id="p100347"></a>11.2 Альтернативная обработка результатов

<a id="p100348"></a>Содержание 6-бензиламинопурина в пробах рассчитывают по формуле:

<a id="p100349"></a> $X = \frac{S_{\text{пр}} \times A \times V}{S_{\text{ст}} \times m} ,$ 

<a id="p100350"></a>где X - содержание 6-бензиламинопурина в пробе, мг/кг;
<a id="p100351"></a>Sст - высота (площадь) пика стандарта, е.о.п. x сек;
<a id="p100352"></a>Sпр - высота (площадь) пика образца, е.о.п. x сек;
<a id="p100353"></a>A - концентрация стандартного раствора, мкг/см3;
<a id="p100354"></a>V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3;
<a id="p100355"></a>m - масса анализируемого образца, г.
<a id="p100356"></a>Результат округляют до четвертого знака после запятой.


### <a id="p100357"></a>XII. Оформление результатов



#### <a id="p100358"></a>12.1 Результат анализа представляют в виде:


<a id="p100359"></a> $(\overline{X} \pm \Delta)\text{мг}/\text{кг}$ при вероятности P = 0,95,

<a id="p100360"></a>где $\overline{X}$ - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
<a id="p100361"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

<a id="p100362"></a> $\Delta = \delta \cdot X/100,$ 

<a id="p100363"></a> $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности по диапазону концентраций, [табл. 3.1](#p100022)), %.
<a id="p100364"></a>Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.
<a id="p100365"></a>В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100366"></a>"При определении остаточного количества 6-бензиламинопурина в воде - содержание вещества в пробе менее 0,001 мг/л" [<3>](#p100369);
<a id="p100367"></a>"При определении остаточного количества 6-бензиламинопурина в почве, яблоках и соке яблок - содержание вещества в пробе менее 0,01 мг/кг" [<4>](#p100370).

<a id="p100368"></a>

---

<a id="p100369"></a><3> 0,001 мг/кг - предел обнаружения определяемой концентрации 6-бензиламинопурина в воде.
<a id="p100370"></a><4> 0,01 мг/кг - предел обнаружения определяемой концентрации 6-бензиламинопурина в почве, яблоках и соке яблок.


### <a id="p100371"></a>XIII. Контроль качества результатов измерений


<a id="p100372"></a>13.1. Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений, а также контроль стабильности градуировочной характеристики осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1 - 6](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002).
<a id="p100373"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
<a id="p100374"></a>Величина добавки Cд должна удовлетворять условию:

<a id="p100375"></a> $C_{\text{д}} \geq \Delta_{\text{л},\text{Х}} + \Delta_{\text{л},\text{Х }\prime},$ 

<a id="p100376"></a>где $\pm \Delta_{\text{л},\text{Х}}( \pm \Delta_{\text{л},\text{Х }\prime})$ - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой), мг/м3.
<a id="p100377"></a>Допустимо характеристику погрешности результатов анализа при внедрении методики в лаборатории устанавливать на основе выражения $\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta$ , с последующим уточнением по мере накопления информации, где $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/м3;

<a id="p100378"></a> $\Delta = \delta \cdot \text{Х }/100,$ 

<a id="p100379"></a>где $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [таблица 3.1](#p100022)), %.
<a id="p100380"></a>Контроль проводят путем сравнения результата контрольной процедуры Кк с нормативом контроля К.
<a id="p100381"></a>Результат контрольной процедуры Кк рассчитывают по формуле:

<a id="p100382"></a> $\text{К}_{\text{к}} = \overline{\text{Х}}\prime - \overline{\text{Х}} - \text{С}_{\text{д}},$ 

<a id="p100383"></a>где $\overline{\text{Х}}\prime$ , $\overline{\text{Х}}$ , Cд - среднее значение массовой концентрации анализируемого компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки, соответственно (мг/м3).
<a id="p100384"></a>Норматив оперативного контроля точности К рассчитывают по формуле:

<a id="p100385"></a> $\text{К } = \sqrt{\Delta_{\text{л},\text{Х }\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},\text{Х}}^{2}} .$ 

<a id="p100386"></a>Проводят сопоставление результата контрольной процедуры (Кк) с нормативом контроля (К).
<a id="p100387"></a>Если результат контрольной процедуры удовлетворяет условию

<a id="p100388"></a>|Кк| <= К,

<a id="p100389"></a>процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100390"></a>При невыполнении условия процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

#### <a id="p100391"></a>13.3 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:

<a id="p100392"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):

<a id="p100393"></a> $\frac{2 \cdot |\text{Х}_{1} - \text{Х}_{2}| \cdot 100}{(\text{Х}_{1} + \text{Х}_{2})} \leq R,$ 

<a id="p100394"></a>где X<sub>1</sub>, X<sub>2</sub> - результаты измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), мг/кг;
<a id="p100395"></a>R - предел воспроизводимости [(табл. 3.1)](#p100022), мг/м3.






## <a id="p100396"></a>БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЕ ССЫЛКИ


1. <a id="p100397"></a>Федеральный закон от 30.03.1999 N 52-ФЗ "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения".
2. <a id="p100398"></a>Унифицированные [правила](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов, утвержденные Минздравом СССР 21.08.1979 N 2051-79.
3. <a id="p100399"></a>[ГОСТ Р ИСО 5725-(1 - 6)](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
4. <a id="p100400"></a>ГОСТ Р 53228 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания".
5. <a id="p100401"></a>ГОСТ OIML R 111-1 "Государственная система обеспечения единства измерений (ГСИ). Гири классов E(1), E(2), F(1), F(2), M(1), M(1-2), M(2), M(2-3) и M(3). Часть 1. Метрологические и технические требования".
6. <a id="p100402"></a>[ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) "Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия".
7. <a id="p100403"></a>[ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) "Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования".
8. <a id="p100404"></a>[ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) "Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия".
9. <a id="p100405"></a>[ГОСТ Р 58144](https://bukva.ai/docs/usloviya-gost-r-58144-2018) "Вода дистиллированная. Технические условия".
10. <a id="p100406"></a>[ГОСТ Р 52501](https://bukva.ai/docs/gost-r-52501-2005) "Вода для лабораторного анализа. Технические условия и методы испытаний".
11. <a id="p100407"></a>ГОСТ 2603 "Реактивы. Ацетон. Технические условия".
12. <a id="p100408"></a>[ГОСТ 4172](https://bukva.ai/docs/gost-4172-76) "Реактивы. Натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный. Технические условия".
13. <a id="p100409"></a>ГОСТ 83 "Натрий углекислый. Технические условия".
14. <a id="p100410"></a>[ГОСТ 245](https://bukva.ai/docs/gost-245-76) "Реактивы. Натрий фосфорнокислый однозамещенный 2-водный. Технические условия".
15. <a id="p100411"></a>ГОСТ 3118 "Реактивы. Кислота соляная. Технические условия".
16. <a id="p100412"></a>[ГОСТ 22300](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76) "Реактивы. Эфиры этиловый и бутиловый уксусной кислоты. Технические условия".
17. <a id="p100413"></a>ГОСТ 4328 "Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия".
18. <a id="p100414"></a>[ГОСТ 6995](https://bukva.ai/docs/standart-gost-6995-77) "Реактивы. Метанол-яд. Технические условия".
19. <a id="p100415"></a>ГОСТ 3117 "Реактивы. Аммоний уксуснокислый. Технические условия".
20. <a id="p100416"></a>ГОСТ 20490 "Реактивы. Калий марганцовокислый. Технические условия".
21. <a id="p100417"></a>[ГОСТ 4221](https://bukva.ai/docs/standart-gost-4221-76) "Реактивы. Калий углекислый. Технические условия".
22. <a id="p100418"></a>ГОСТ 25336 "Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры".
23. <a id="p100419"></a>[ГОСТ 9737](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93) "Посуда лабораторная стеклянная. Шлифы сферические взаимозаменяемые".
24. <a id="p100420"></a>ГОСТ 25336 "Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры".
25. <a id="p100421"></a>[ГОСТ 8682](https://bukva.ai/docs/gost-8682-93) "Посуда лабораторная стеклянная. Шлифы конические взаимозаменяемые".
26. <a id="p100422"></a>[ГОСТ 34037](https://bukva.ai/docs/standart-gost-34037-2016) "Упаковка стеклянная для химических реактивов и особо чистых химических веществ. Общие технические условия".
27. <a id="p100423"></a>[ГОСТ ISO 7886-1](https://bukva.ai/docs/gost-iso-7886-1-2011) "Шприцы инъекционные однократного применения стерильные. Часть 1. Шприцы для ручного использования".
28. <a id="p100424"></a>ГОСТ 12.1.007 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности".
29. <a id="p100425"></a>ГОСТ 12.1.019 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты".
30. <a id="p100426"></a>ГОСТ 12.1.004 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Пожарная безопасность. Общие требования".
31. <a id="p100427"></a>ГОСТ 12.0.004 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Организация обучения безопасности труда. Общие положения".
32. <a id="p100428"></a>[ГОСТ 31861](https://bukva.ai/docs/gost-31861-2012) "Вода. Общие требования к отбору проб".
33. <a id="p100429"></a>[ГОСТ 17.4.3.01](https://bukva.ai/docs/standart-gost-17-4-3-01-2017) "Охрана природы. Почвы. Общие требования к отбору проб".
34. <a id="p100430"></a>[ГОСТ Р 58595](https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-58595-2019) "Почвы. Отбор проб".
35. <a id="p100431"></a>[ГОСТ 27572](https://bukva.ai/docs/usloviya-gost-27572-2017) "Яблоки свежие для промышленной переработки. Технические условия".



<a id="p100432"></a>

---