МУК 4.1.3643-20. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств пидифлуметофена в воде и почве методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания
(утв. Роспотребнадзором 20.08.2020)
Утверждаю Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации А. Ю. Попова 20 августа 2020 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПИДИФЛУМЕТОФЕНА В ВОДЕ И ПОЧВЕ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ МУК 4.1.3643-20
1. Разработаны ФБУН «Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана» Роспотребнадзора (В.Н. Ракитский, Н.Е. Федорова, Л.Г. Бондарева).
2. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 20 августа 2020 г.
I. Общие положения и область применения
1.1 Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации пидифлуметофена в воде и почве в диапазоне 0,0005 — 0,01 мг/дм3 и 0,01 — 0,2 мг/кг соответственно.
1.2. МУК предназначены для органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, а также могут быть использованы организациями, осуществляющими контроль качества и безопасности объектов окружающей среды.
1.3 МУК носят рекомендательный характер.
II. Физико-химические свойства
2.1. Пидифлуметофен. 3-(дифторметил)-N-метокси-1-метил-N-[(RS)1-метил-2(2,4,6-трихлорфенил)этил]-1H-пиразол-4-карбоксамид <1>.
<1> В соответствии с Международным союзом теоретической и прикладной химии (ИЮПАК, англ. International Union of Pure and Applied Chemistry, IUPAC).
Брутто-формула: C16H16Cl3F2N3O2.
2.2 Физические и химические свойства:
- бесцветный порошок;
- температура плавления 113 °C;
- разлагается до кипения;
- давление паров 1,84·10-4 мПа (при 25 °C);
- коэффициент распределения н-октанол-вода Kow logP = 3,8 (20 °C);
- растворимость в воде 1,5 мг/дм3 (20 °C); растворимость в органических растворителях (мг/дм3): 22 0000 — ацетон, 130 000 — этилацетат, 26 000 — метанол, 7200 — октанол.
2.3. Синтетический фунгицид для различных спектров применения на широком ряде культур. Основной механизм действия — ингибитор дегидрогеназы.
III. Погрешность измерений
3.1. При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 3.1 для соответствующих диапазонов концентраций.
Значения характеристики погрешности, нормативов оперативного контроля точности, повторяемости, воспроизводимости
Полнота извлечения веществ, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для всего диапазона измерений (n = 20) приведены в табл. 3.2.
Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для всего диапазона измерений (n = 20)
IV. Метод измерений
4.1. Измерения концентраций пидифлуметофена выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с ультрафиолетовым детектором.
4.2. Уровень пидифлуметофена в пробах воды определяют после очистки и концентрирования на картридже, заполненном пористым сорбентом на основе сополимера N-винилпирролидона и дивинилбензола. Элюирование пидифлуметофена проводят ацетонитрилом.
4.3. Экстракцию пидифлуметофена из анализируемых проб почвы выполняют смесью ацетонитрила и воды, с добавлением 1 см3 ледяной уксусной кислоты, центрифугирования, очистки экстракта на картридже, заполненном пористым сорбентом на основе сополимера N-винилпирролидона и дивинилбензола.
4.4. Нижний предел измерения пидифлуметофена в анализируемом объеме пробы — 1 нг. Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.
V. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы
5.1. При выполнении измерений и подготовке проб применяют средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы, приведенные в табл. 5.1 - 5.3.
| Наименование средств измерения | Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
|---|---|
| Жидкостный хроматограф с быстросканирующим ультрафиолетовым детектором, снабженный дегазатором, термостатом колонки | Внесено в Реестр «Утвержденные типы средств измерений» Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений |
| Прибор/приборы для измерения атмосферного давления, температуры и относительной влажности воздуха | Внесено в Реестр «Утвержденные типы средств измерений» Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений |
| Весы лабораторные аналитические, наибольший предел взвешивания 110 г, предел допустимой погрешности 0,0005 г | ГОСТ Р 53228 |
| Весы лабораторные, наибольший предел взвешивания 420 г, предел допустимой погрешности +/- 0,01 г | ГОСТ Р 53228 |
| Меры массы | ГОСТ OIML R 111-1 |
| Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 25, 100, 500 и 1000 см3 | ГОСТ 1770 |
| Мерные колбы, вместимостью 25, 100, 500 и 1000 см3 | ГОСТ 1770 |
| Весы аналитические, с пределом взвешивания 110 г и пределом допустимой погрешности 0,001 г | ГОСТ Р 53228 |
| Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0, 2,0, 5,0, 10 см3 | ГОСТ 1770 |
Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.
| Наименование реактивов | Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
|---|---|
| 1 | 2 |
| Пидифлуметофен, аналитический стандарт | CAS 1228284-64-7 с содержанием основного компонента не менее 95% |
| Ацетонитрил | суперградиент для ВЭЖХ |
| Вода для лабораторного анализа (бидистиллированная, деионизованная) | ГОСТ Р 52501 |
| Калий углекислый (карбонат калия, поташ), хч, прокаленный | ГОСТ 4221 |
| Калий марганцовокислый (перманганат калия), хч | ГОСТ 20490 |
| Метиловый спирт (метанол), хч | ГОСТ 6995 |
| Уксусная кислота, 99,5%, чда | ГОСТ 61 |
| Фосфор (V) оксид (фосфорный ангидрид, пентоксид фосфора), хч |
Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующей дополнительной очистки растворителей.
Вспомогательное оборудование, устройства, материалы
Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.
VI. Требования безопасности
6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.
6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Организация обучения работников безопасности труда — по ГОСТ 12.0.004.
6.3. Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, освоивший данную методику и подтвердившего экспериментальное соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.
VII. Условия измерений
7.1 При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;
- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
VIII. Подготовка к выполнению измерений
8.1 Очистка растворителей
8.1.1. Ацетонитрил. Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на 1 дм3 ацетонитрила 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 дм3 ацетонитрила 10 г карбоната калия). Хранят в емкости из темного стекла.
8.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ. В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 750 см3 ацетонитрила и 250 см3 бидистиллированной или деионизованной воды, перемешивают, фильтруют и дегазируют.
Подвижную фазу хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.
8.3. Кондиционирование хроматографической колонки для ВЭЖХ. Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по п. 8.2) при скорости подачи растворителя 1,0 см3/мин до установления стабильной базовой линии.
8.4 Приготовление градуировочных растворов
и растворов внесения
8.4.1. Исходный раствор пидифлуметофена для градуировки (концентрация 100 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 0,0100 +/- 0,0005 г пидифлуметофена, растворяют в 50 — 60 см3 ацетонитрила, доводят ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают.
Раствор хранят в морозильной камере при температуре не выше -18 °C, в течение шести месяцев.
8.4.2. Рабочий раствор № 1 пидифлуметофена для градуировки и внесения (концентрация 10,0 мкг/см3. В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 10,0 см3 исходного градуировочного раствора с концентрацией 100,0 мкг/см3 (п. 8.4.1), доводят до метки ацетонитрилом, тщательно перемешивают, получают рабочий раствор № 1 с концентрацией пидифлуметофена 10,0 мкг/см3.
Раствор хранят в холодильнике при температуре +2 — 6 °C в течение трех месяцев.
Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом «внесено-найдено» и контроля качества результатов измерений методом добавок.
8.4.3. Рабочие растворы № 2 — 6 пидифлуметофена для градуировки (концентрация 0,05 — 1,0 мкг/см3). В 5 мерных колб вместимостью 100 см3 помещают 0,5; 1,0; 2,5; 5,0; 10 см3 рабочего раствора № 1 с концентрацией 10,0 мкг/см3 (п. 8.4.2), доводят до метки подвижной фазой, приготовленной по п. 8.2, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 2 — 6 с концентрациями пидифлуметофена 0,05; 0,1; 0,25; 0,5; 1,0 мкг/см3.
Растворы хранят в холодильнике при температуре +2 — 6 °C не более 14 суток.
8.5. Установление градуировочной характеристики. Градуировочную характеристику, выражающую линейную зависимость площади пика от концентрации пидифлуметофена в растворе, устанавливают методом абсолютной калибровки по 5 растворам для градуировки.
В инжектор хроматографа вводят по 20 мм3 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования, указанных ниже. Осуществляют не менее 3 параллельных измерений. Устанавливают площади пиков пидифлуметофена, на основании которых строят градуировочную зависимость.
Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.
При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят не менее двух образцов растворов для градуировки, содержание пидифлуметофена в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,05 до 1,00 мкг/см3. Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемых для контроля градуировочных растворов сохраняется соотношение:
A = \frac{|X - C| \cdot 100}{C} \leq B,
где X — концентрация пидифлуметофена в пробе при контрольном измерении, мкг/см3;
C — известная концентрация градуировочного раствора пидифлуметофена, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3;
B — норматив контроля погрешности градуировочной характеристики, % (B = 10% при P = 0,95).
8.6 Приготовление смесей органических растворителей
для экстракции
8.6.1. Смесь ацетонитрил:вода = 8:2. В мерную колбу на 500 см3 вносят 400 см3 ацетонитрила и 100 см3 бидистиллированной воды. Тщательно перемешивают.
8.6.2. Смесь ацетонитрил:вода = 2:8. В мерную колбу на 500 см3 вносят 100 см3 ацетонитрила и 400 см3 бидистиллированной воды. Тщательно перемешивают.
8.7. Подготовка картриджа для очистки и концентрирования. Картридж устанавливают на аллонж с прямым отводом для вакуума. Промывают картридж последовательно 1 см3 метанола, 1 см3 ацетонитрила, затем три раза по 1 см3 смесью ацетонитрил:вода, в соотношении 2:8 по объему, приготовленной по п. 8.6.2. Процедуру проводят с использованием вакуума. Скорость элюирования — 15 — 20 капель в минуту. Не допускать высыхания верхнего слоя сорбента в картридже.
IX. Отбор и условия хранения проб
9.1. Отбор проб производится в соответствии с методическими документами <2>.
<2> Унифицированные правила отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов от 21.08.1979 2051-79.
Пробы воды отбирают и хранят в бутылях из полиэтилена (полипропилена) при температуре +2 — 6 °C неделю. Пробы почвы подсушивают и хранят при комнатной температуре не более 2 недель. Для длительного хранения образцы замораживают и хранят при температуре не выше -18 °C.
X. Выполнение определения
10.1 Вода
Образец воды объемом 200 см3 отмеряют мерным цилиндром, переносят в коническую колбу на 250 см3. Добавляют 1 см3 метанола, тщательно перемешивают в течение 5 минут. После чего подготовленную пробу воды пропускают через подготовленный в соответствии с п. 8.7 картридж со скоростью 15 — 20 капель в минуту. Процедуру выполняют с использованием вакуума. После пропускания пробы картридж четыре раза по 1 см3 промывают смесью ацетонитрил:вода в соотношении 2:8, приготовленной в соответствии с п. 8.6.2. Пидифлуметофен элюируют с картриджа ацетонитрилом, 2 раза по 1 см3. Элюат собирают в круглодонную колбу объемом 50 см3. Упаривают на роторном испарителе при температуре не выше 30 °C до влажного остатка. Остаток в круглодонной колбе растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрил:вода, в соотношении 8:2, приготовленной в соответствии с п. 8.6.1. Фильтруют через мембранный фильтр.
10.2 Почва
Навеску почвы, массой 10 г, помещают в коническую колбу, объемом 250 см3. Добавляют 50 см3 смеси ацетонитрил:вода, в соотношении 8:2, приготовленной согласно п. 8.6.1. Перемешивают и оставляют в покое на 15 мин. Через 15 мин добавляют 1 см3 ледяной уксусной кислоты и помещают на встряхиватель на 30 минут. После чего смеси дают отстояться. Раствор осторожно (для предотвращения взмучивания) фильтруется через неплотный бумажный фильтр. Осадок в колбе заливают 30 см3 смесью ацетонитрил:вода (8:2), приготовленной согласно п. 8.6.1. Экстрагируется в течение 15 минут на встряхивателе. После отстаивания раствор фильтруют через неплотный бумажный фильтр. Фильтраты объединяются и переносятся в круглодонную колбу, объемом 250 см3. Упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C до водного остатка. Водный остаток пропускают через подготовленный в соответствии с п. 8.7 картридж со скоростью 15 — 20 капель в минуту. После пропускания пробы картридж четыре раза по 1 см3 промывают смесью ацетонитрил:вода в соотношении 2:8, приготовленной в соответствии с п. 8.6.2. Пидифлуметофен элюируют с картриджа ацетонитрилом, 2 раза по 1 см3. Элюат собирают в круглодонную колбу объемом 50 см3. Упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C до влажного остатка. Остаток в круглодонной колбе растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрил:вода, в соотношении 8:2, приготовленной в соответствии с п. 8.6.1.
10.3 Условия хроматографирования. Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:
- жидкостный хроматограф с быстросканирующим ультрафиолетовым детектором, снабженный дегазатором и термостатом колонки;
- хроматографическая колонка стальная, длиной 250 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом с привитыми алкильными группами (C-18 или C-8) для удерживания гидрофильных соединений, зернением 5 мкм;
- рабочая длина волны: 230 нм;
- температура колонки: 25 °C;
- подвижная фаза: ацетонитрил — бидистиллированная вода (75:25, по объему);
- скорость потока элюента: 1,0 см3/мин;
- объем вводимой пробы: 20 мм3;
- линейный диапазон детектирования: 1 — 20 нг.
Образцы, дающие пики большие, чем градуировочный раствор с концентрацией вещества 1,0 мкг/см3, разбавляют подвижной фазой (не более чем в 50 раз).
XI. Обработка результатов анализа
Содержание пидифлуметофена в пробах (X, мг/дм3, мг/кг) рассчитывают по формуле:
X = \frac{C \cdot V}{m \cdot f} ,
где V — объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3;
m — масса анализируемого образца, г;
C — концентрация пидифлуметофена, найденная по градуировочному графику в соответствии с площадью хроматографического пика, мкг/см3;
Примечание. Идентификация и расчет концентрации вещества в пробах могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую систему.
XII. Проверка приемлемости результатов параллельных определений
12.1. За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):
\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq r, (1)
где X1, X2 - результаты параллельных определений, мг/дм3, мг/кг;
r — значение предела повторяемости (табл. 1), при этом r = 2,8 \cdot \sigma_{r} .
При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.
XIII. Оформление результатов
13.1 Результат анализа представляют в виде:
(\overline{X} \pm \Delta)\text{мг}/\text{кг},\text{мг}/\text{дм}^{3}\text{привероятности Р } = 0,95,
где \overline{X} — среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг, мг/дм3;
\Delta — граница абсолютной погрешности, мг/кг, мг/дм3.
\Delta = \frac{\delta \cdot \text{Х}}{100} ,
где \delta — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 3.1), %.
Если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде: «содержание пидифлуметофена в пробе воды — менее 0,005 мг/дм3; в пробе почвы — менее 0,01 мг/кг» <3>.
<3> 0,005 мг/дм3; 0,01 мг/кг — пределы обнаружения пидифлуметофена в воде, почве, соответственно.
XIV. Контроль качества результатов измерений
14.1. Организация контроля качества результатов определения осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725.
14.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
Величина добавки Cд должна удовлетворять условию:
\text{С}_{\text{д}} \geq \Delta_{\text{л},\text{Х}} + \Delta_{\text{л},\text{Х }\prime},
где \pm \Delta_{\text{л},\text{Х}}( \pm \Delta_{\text{л},\text{Х }\prime}) — характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/кг, мг/дм3, при этом:
\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta,
где \Delta — граница абсолютной погрешности, мг/кг, мг/дм3;
\Delta = \frac{\delta \cdot \text{Х}}{100} ,
где \delta — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 3.1), %.
Результат контроля процедуры Kк рассчитывают по формуле:
K_{\text{к}} = \overline{\text{Х}}\prime - \overline{\text{Х}} - \text{С}_{\text{д}},
где \overline{\text{Х}}\prime , \overline{\text{Х}} , Cд — среднее арифметическое результатов параллельных определений, признанных приемлемыми, содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки, соответственно, мг/кг, мг/дм3.
Норматив контроля K рассчитывают по формуле:
K = \sqrt{\Delta_{\text{л},\text{Х }\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},\text{Х}}^{2}} .
Проводят сопоставление результата контроля процедуры (Kк) с нормативом контроля (K).
Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию
процедуру анализа признают удовлетворительной.
При невыполнении условия процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
14.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R)
\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq R,
где X1, X2 - результаты измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), мг/кг;
R — предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 3.1), %.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЕ ССЫЛКИ
1. ГОСТ Р ИСО 5725-(1 — 6) «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».
2. ГОСТ Р 53228 «Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания».
3. ГОСТ OIML R 111-1 «Государственная система обеспечения единства измерений».
4. ГОСТ 29227 «Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования».
5. ГОСТ 20490 «Реактивы. Калий марганцовокислый. Технические условия».
6. ГОСТ Р 52501 «Вода для лабораторного анализа. Технические условия».
7. ГОСТ 25336 «Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры».
8. ГОСТ 9737 «Посуда лабораторная стеклянная. Шлифы сферические взаимозаменяемые».
9. ГОСТ 21241 «Пинцеты медицинские. Общие технические требования и методы испытаний».
10. ГОСТ 12.1.004 «Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования».
11. ГОСТ 12.1.007 «Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности».
12. ГОСТ 12.1.018 «Система стандартов безопасности труда. Пожаровзрывобезопасность статического электричества. Общие требования».
13. ГОСТ 12.1.019 «Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты».
14. ГОСТ 12.4.009 «Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание».
15. ГОСТ 1770 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) «Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия».
16. «Унифицированные правила отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» (N 2051-79 от 21.08.79).
17. «Методические указания по регистрационным испытаниям пестицидов в части биологической эффективности». М., 2018. 64 с.