---
title: "\"МУК 4.1.3631-20. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств ипроваликарба и его метаболита п-метил-фенетиламина в почве методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.3631-20"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-3631-20"
---

## "МУК 4.1.3631-20. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств ипроваликарба и его метаболита п-метил-фенетиламина в почве методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.3631-20. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств ипроваликарба и его метаболита п-метил-фенетиламина в почве методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 17.08.2020)


<a id="p100001"></a>Утверждаю
Руководитель Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека,
Главный государственный санитарный врач
Российской Федерации
**А.Ю.ПОПОВА**
17 августа 2020 года


#### <a id="p100002"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ИПРОВАЛИКАРБА И ЕГО**
**МЕТАБОЛИТА П-МЕТИЛ-ФЕНЕТИЛАМИНА В ПОЧВЕ МЕТОДОМ**
**ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100004"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.3631-20**

1. <a id="p100005"></a>Разработаны ФБУН "Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана" Роспотребнадзора (В.Н. Ракитский, Н.Е. Федорова, В.В. Баюшева).
2. <a id="p100006"></a>Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 17 августа 2020 г.
3. <a id="p100007"></a>Введены впервые.


### <a id="p100008"></a>I. Общие положения и область применения


<a id="p100009"></a>1.1. Настоящие методические указания (далее - МУК) устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации ипроваликарба и его метаболита п-метил-фенетиламина в почве в диапазоне 0,01 - 0,1 мг/кг.
<a id="p100010"></a>1.2. МУК предназначены для органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, а также могут быть использованы организациями, осуществляющими исследования в области загрязнения почвы.

#### <a id="p100011"></a>1.3 МУК носят рекомендательный характер.



### <a id="p100012"></a>II. Физико-химические и токсикологические свойства



#### <a id="p100013"></a>2.1 Ипроваликарб.

<a id="p100014"></a>2.1.1. Ипроваликарб - изопропил-N-[2-метил-1-[1-(4-толуил) этилкарбамоил]-(S)-пропил] карбамат <1>. Брутто формула C<sub>18</sub>H<sub>28</sub> N<sub>2</sub>O<sub>3</sub>. Молекулярная масса 320,4. Бело-желтый порошок. Смесь (S,S)- и (S,R)-диастереомеров. Tпл.: 183 °C (SR), 199 °C (SS), 163 - 165 °C (смесь). Давление паров при 20 °C: 4,4·10-5 Па (SR), 3,5·10-5 Па (SS), 7,7·10-5 Па (смесь). Растворимость в органических растворителях (при 20 °C, г/дм3): толуол - 5300, ацетон - 41000, этилацетат 20000, дихлорметан - 132000. Растворимость в воде при 20 °C (г/дм3) - 11 (SR), 6,8 (SS). Коэффициент распределения в системе н-октанол/вода при 20 °C (pH 7), Kow logP = 3,2. Ипроваликарб разлагается в почве при аэробных условиях, образуя CO2.

<a id="p100015"></a>

---

<a id="p100016"></a><1> В соответствии с Международным союзом теоретической и прикладной химии (ИЮПАК. англ. International Union of Pure and Applied Chemistry, IUPAC).

<a id="p100017"></a>2.1.2. Острая пероральная токсичность (LD<sub>50</sub>) для крыс - более 5000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD<sub>50</sub>) для крыс - более 5000 мг/кг; не раздражает глаза и кожу. Ингаляционная токсичность (LC50) для крыс - более 4977 мг/м3 воздуха. Мутагенная, нейротоксическая, эмбриотоксическая и канцерогенная токсичности отсутствуют. LD50 для пчел более 199 мкг/особь при экспозиции 48 часов. LC50 для рыб более 20 мг/л при экспозиции 96 часов.
<a id="p100018"></a>2.1.3. Ипроваликарб - системный фунгицид с защитным и лечебным действием. Используется для защиты на виноградниках, на картофеле, томатах, огурцах и табаке.

#### <a id="p100019"></a>2.2 П-метил-фенетиламин.

<a id="p100020"></a>2.2.1. П-метил-фенетиламин [<1>](#p100016). Брутто-формула C<sub>9</sub>H<sub>13</sub>N. Молекулярная масса 135,2. Прозрачная вязкая жидкость. Растворимость в воде при 20 °C (мг/дм3) - 24400. Коэффициент распределения в системе н-октанол/вода при 20 °C (pH 7), Kow logP = 1,83. П-метил-фенетиламин - основной продукт разложения ипроваликарба в почве при аэробных условиях.


### <a id="p100021"></a>III. Погрешность измерений


<a id="p100022"></a>3.1. При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в [табл. 3.1](#p100024), для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100023"></a>Таблица 3.1

<a id="p100024"></a>Метрологические параметры


<table>
<colgroup><col width="10%"><col width="13%"><col width="14%"><col width="14%"><col width="14%"><col width="16%"><col width="19%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100025"></a>Анализируемый объект</td><td><a id="p100026"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td><a id="p100027"></a>Показатель точности (границы относительной погрешности, P = 0,95), $\pm \delta$ , %</td><td><a id="p100028"></a>Показатель повторяемости (среднеквадратичное отклонение повторяемости), $\sigma_{r}$ , %</td><td><a id="p100029"></a>Показатель воспроизводимости (среднеквадратичное отклонение воспроизводимости), $\sigma_{R}$ , %</td><td><a id="p100030"></a>Предел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных определений), r, %</td><td><a id="p100031"></a>Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученных в разных лабораториях), R, %, (P = 0,95)</td></tr>
<tr><td colspan="7"><a id="p100032"></a>Ипроваликарб</td></tr>
<tr><td><a id="p100033"></a>Почва</td><td><a id="p100034"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100035"></a>50</td><td><a id="p100036"></a>5,5</td><td><a id="p100037"></a>11</td><td><a id="p100038"></a>15</td><td><a id="p100039"></a>31</td></tr>
<tr><td colspan="7"><a id="p100040"></a>П-метил-фенетиламин</td></tr>
<tr><td><a id="p100041"></a>Почва</td><td><a id="p100042"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100043"></a>50</td><td><a id="p100044"></a>7,5</td><td><a id="p100045"></a>15</td><td><a id="p100046"></a>21</td><td><a id="p100047"></a>42</td></tr>
</table>


<a id="p100048"></a>Полнота извлечения ипроваликарба и п-метил-фенетиламина, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для всего диапазона измерений (n = 20) приведены в [табл. 3.2](#p100050).

<a id="p100049"></a>Таблица 3.2

<a id="p100050"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение,
доверительный интервал среднего результата для всего
диапазона измерений (n = 20)


<table>
<colgroup><col width="12%"><col width="16%"><col width="19%"><col width="15%"><col width="16%"><col width="23%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100051"></a>Анализируемый объект</td><td colspan="5"><a id="p100052"></a>Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td><a id="p100053"></a>предел обнаружения, мг/кг</td><td><a id="p100054"></a>диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td><a id="p100055"></a>полнота извлечения вещества, %</td><td><a id="p100056"></a>стандартное отклонение, %</td><td><a id="p100057"></a>доверительный интервал среднего результата, +/-, %</td></tr>
<tr><td colspan="6"><a id="p100058"></a>Ипроваликарб</td></tr>
<tr><td><a id="p100059"></a>Почва</td><td><a id="p100060"></a>0,01 мг/кг</td><td><a id="p100061"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100062"></a>108,2</td><td><a id="p100063"></a>9,6</td><td><a id="p100064"></a>5,0</td></tr>
<tr><td colspan="6"><a id="p100065"></a>П-метил-фенетиламин</td></tr>
<tr><td><a id="p100066"></a>Почва</td><td><a id="p100067"></a>0,01 мг/кг</td><td><a id="p100068"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100069"></a>94,4</td><td><a id="p100070"></a>7,1</td><td><a id="p100071"></a>3,7</td></tr>
</table>



### <a id="p100072"></a>IV. Метод измерений


<a id="p100073"></a>4.1. Методика основана на определении веществ с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (далее - ВЭЖХ) на обращенной фазе с тройным квадрупольным масс-спектрометрическим детектором.
<a id="p100074"></a>4.2. Уровни ипроваликарба и его метаболита п-метил-фенетиламина в образцах почвы определяют после экстракции пробы на аппарате Сокслета смесью метанол-вода-аммиак водный (25%) (80:20:1, по объему). Экстракт пропускают через мембранный фильтр, упаривают до водного остатка, доводят до объема 10 см3 смесью ацетонитрил-вода-аммиак водный (25%) (500:500:1, по объему) и пропускают через мембранный фильтр.
<a id="p100075"></a>4.3. Нижний предел измерения ипроваликарба и его метаболита п-метил-фенетиламина в анализируемом объеме пробы 0,125 нг.


### <a id="p100076"></a>V. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы


<a id="p100077"></a>5.1. При выполнении измерений и подготовке проб применяют средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы, приведенные в [табл. 5.1](#p100079) - [5.3](#p100130).

<a id="p100078"></a>Таблица 5.1

<a id="p100079"></a>Средства измерений


| <a id="p100080"></a>Наименование средств измерения | <a id="p100081"></a>Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| --- | --- |
| <a id="p100082"></a>Жидкостный хроматограф с тандемным масс-спектрометрическим детектором (тройной квадруполь, снабженный автоматическим пробоотборником и термостатом колонки) | <a id="p100083"></a>Внесено в Госреестр "Утвержденные типы средств измерений" Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений |
| <a id="p100084"></a>Прибор/приборы для измерения атмосферного давления, температуры и относительной влажности воздуха |  |
| <a id="p100085"></a>Весы лабораторные аналитические, предел допустимой погрешности +/- 0,1 мг | <a id="p100086"></a>ГОСТ Р 53228 |
| <a id="p100087"></a>Весы лабораторные, предел допустимой погрешности +/- 0,01 г | <a id="p100088"></a>ГОСТ Р 53228 |
| <a id="p100089"></a>Колбы мерные 2-го класса точности 2-100-2 вместимостью 100, 500 и 1000 см3 | <a id="p100090"></a>[ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |
| <a id="p100091"></a>Меры массы | <a id="p100092"></a>ГОСТ OIML R 111-1 |
| <a id="p100093"></a>Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0, 2,0, 5,0, 10 см3 | <a id="p100094"></a>[ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) |
| <a id="p100095"></a>Пробирки градуированные 2-го класса точности объемом 10,0 см3 | <a id="p100096"></a>[ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |
| <a id="p100097"></a>Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 10 и 50 см3 | <a id="p100098"></a>[ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |


<a id="p100099"></a>Примечание: допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

<a id="p100100"></a>Таблица 5.2

<a id="p100101"></a>Реактивы


| <a id="p100102"></a>Наименование реактива | <a id="p100103"></a>Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| --- | --- |
| <a id="p100104"></a>1 | <a id="p100105"></a>2 |
| <a id="p100106"></a>Ипроваликарб | <a id="p100107"></a>Аналитический стандарт с содержанием основного компонента не менее 95% |
| <a id="p100108"></a>П-метил-фенетиламин | <a id="p100109"></a>Аналитический стандарт с содержанием основного компонента не менее 95% |
| <a id="p100110"></a>Азот особой чистоты (из баллона) | <a id="p100111"></a>ГОСТ 9293 (ИСО 2435) |
| <a id="p100112"></a>Ацетонитрил для хроматографии | <a id="p100113"></a>Квалификация не ниже "химически чистый" |
| <a id="p100114"></a>Аммония ацетат химически чистый | <a id="p100115"></a>ГОСТ 3117 |
| <a id="p100116"></a>Аммиак водный особой чистоты | <a id="p100117"></a>[ГОСТ 24147](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-gost-24147-80) |
| <a id="p100118"></a>Вода для лабораторного анализа (бидистиллированная или деионизованная) | <a id="p100119"></a>[ГОСТ Р 52501](https://bukva.ai/docs/gost-r-52501-2005) |
| <a id="p100120"></a>Калий углекислый (карбонат калия, поташ) химически чистый, прокаленный | <a id="p100121"></a>[ГОСТ 4221](https://bukva.ai/docs/standart-gost-4221-76) |
| <a id="p100122"></a>Метиловый спирт (метанол) химически чистый | <a id="p100123"></a>[ГОСТ 6995](https://bukva.ai/docs/standart-gost-6995-77) |
| <a id="p100124"></a>Фосфор (V) оксид (фосфорный ангидрид, пентоксид фосфора | <a id="p100125"></a>Квалификация не ниже "химически чистый" |
| <a id="p100126"></a>Этиловый спирт, химически чистый | <a id="p100127"></a>[ГОСТ 17299](https://bukva.ai/docs/gost-17299-78) |


<a id="p100128"></a>Примечание: допускается использование реактивов с более высокой квалификацией и не требующих дополнительной очистки растворителей.

<a id="p100129"></a>Таблица 5.3

<a id="p100130"></a>Вспомогательное оборудование, устройства, материалы


| <a id="p100131"></a>Наименование вспомогательного оборудования, устройств, материалов | <a id="p100132"></a>Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| --- | --- |
| <a id="p100133"></a>Аппарат Сокслета |  |
| <a id="p100134"></a>Воронки химические конусные диаметром 40 - 45 мм | <a id="p100135"></a>ГОСТ 25336 |
| <a id="p100136"></a>Груша резиновая | <a id="p100137"></a>- |
| <a id="p100138"></a>Колба круглодонная вместимостью 100 и 250 см3 | <a id="p100139"></a>- |
| <a id="p100140"></a>Колба коническая плоскодонная вместимостью 250 и 500 см3 | <a id="p100141"></a>ГОСТ 23932 |
| <a id="p100142"></a>"Кипелки" (керамические осколки) | <a id="p100143"></a>- |
| <a id="p100144"></a>Мембраны микропористые капроновые, диаметр пор 0,45 мкм | <a id="p100145"></a>- |
| <a id="p100146"></a>Набор для фильтрации растворителей через мембрану | <a id="p100147"></a>- |
| <a id="p100148"></a>Стаканы химические с носиком (вместимостью 150 см3) | <a id="p100149"></a>ГОСТ 25336 |
| <a id="p100150"></a>Стекловата | <a id="p100151"></a>- |
| <a id="p100152"></a>Установка для перегонки растворителей | <a id="p100153"></a>- |
| <a id="p100154"></a>Фильтры мембранные для фильтрации проб с помощью шприца, размер пор 0,22 мкм | <a id="p100155"></a>- |
| <a id="p100156"></a>Хроматографическая колонка стальная (длиной 50 мм, внутренним диаметром 2,1 мм), заполненная обращенно-фазным сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами С18, зернением 1,8 мкм | <a id="p100157"></a>- |
| <a id="p100158"></a>Холодильник обратный | <a id="p100159"></a>- |
| <a id="p100160"></a>Шприцы медицинские одноразовые вместимостью 5 см3 | <a id="p100161"></a>- |


<a id="p100162"></a>Примечание: допускается использование вспомогательных средств измерений, устройств и материалов с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.


### <a id="p100163"></a>VI. Требования безопасности


<a id="p100164"></a>6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.
<a id="p100165"></a>6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.
<a id="p100166"></a>6.3. При работе с газами, находящимися в баллонах под давлением до 15 МПа (150 кгс/см2), необходимо соблюдать нормы и правила <2>.

<a id="p100167"></a>

---

<a id="p100168"></a><2> Правила промышленной безопасности опасных производственных объектов, на которых используется оборудование, работающее под избыточным давлением, утвержденные приказом Ростехнадзора от 25.03.2014 N 116.

<a id="p100169"></a>Запрещается открывать вентиль баллона, не установив на нем понижающий редуктор.
<a id="p100170"></a>6.4. Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на жидкостном хроматографе, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений


### <a id="p100171"></a>VII. Условия измерений



#### <a id="p100172"></a>7.1 При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- <a id="p100173"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100174"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


### <a id="p100175"></a>VIII. Подготовка к выполнению измерений


<a id="p100176"></a>8.1. Очистка ацетонитрила. Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на 1 дм3 ацетонитрила 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 дм3 ацетонитрила 10 г карбоната калия).

#### <a id="p100177"></a>8.2 Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

<a id="p100178"></a>8.2.1. Компонент А (10 мМ раствор ацетата аммония в воде): в мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 500 см3 деионизированной воды, вносят 0,77 г ацетата аммония, доводят до метки водой, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр.
<a id="p100179"></a>8.2.2. Компонент Б (10 мМ раствор ацетата аммония в метаноле): в мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 500 см3 метанола, вносят 0,77 г ацетата аммония, доводят до метки метанолом, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр.
<a id="p100180"></a>Каждый компонент подвижной фазы хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.

#### <a id="p100181"></a>8.3 Кондиционирование хроматографической колонки для ВЭЖХ.

<a id="p100182"></a>Промывают колонку подвижной фазой (смесь компонентов А и Б, приготовленных по [п. 8.2.1](#p100178) и [8.2.2](#p100179), в соотношении 1:1) при скорости подачи растворителя 0,4 см3/мин до установления стабильной базовой линии.

#### <a id="p100183"></a>8.4 Приготовление смеси растворителей для экстракции веществ.

<a id="p100184"></a>В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 200 см3 деионизированной воды, вносят 10,0 см3 25% водного раствора аммиака, добавляют 800 см3 метанола, перемешивают.
<a id="p100185"></a>Раствор хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.
<a id="p100186"></a>8.5. Приготовление смеси растворителей для разбавления градуировочных растворов.
<a id="p100187"></a>8.5.1. В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 500 см3 деионизированной воды, вносят 1,0 см3 25%-го водного раствора аммиака, добавляют 500 см3 ацетонитрила, перемешивают.
<a id="p100188"></a>8.5.2. В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 600 см3 деионизированной воды, вносят 1,0 см3 25%-го водного раствора аммиака, добавляют 400 см3 ацетонитрила, перемешивают.

#### <a id="p100189"></a>8.6 Приготовление градуировочных растворов и растворов внесения.

<a id="p100190"></a>8.6.1. Исходный раствор ипроваликарба для градуировки (концентрация 1000 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 0,100 г ипроваликарба, добавляют 50 - 70 см3 ацетонитрила, перемешивают, доводят ацетонитрилом до метки, вновь перемешивают. Раствор хранится в холодильнике (+4 +/- 2 °C) в течение 6 месяцев.
<a id="p100191"></a>8.6.2. Исходный раствор п-метил-фенетиламина для градуировки (концентрация 1000 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 0,100 г п-метил-фенетиламина, добавляют 50 - 70 см3 ацетонитрила, перемешивают, доводят ацетонитрилом до метки, вновь перемешивают. Раствор хранятся в холодильнике (+4 +/- 2 °C) в течение 6 месяцев.
<a id="p100192"></a>Растворы N 1 - 8 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходных растворов для градуировки.
<a id="p100193"></a>8.6.3. Раствор N 1 ипроваликарба и п-метил-фенетиламина для градуировки и внесения (концентрация каждого вещества 10 мкг/см3).
<a id="p100194"></a>В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают по 1,0 см3 градуировочных растворов с концентрацией ипроваликарба и п-метил-фенетиламина 1000 мкг/см3 ([п. 8.6.1](#p100190) и [п. 8.6.2](#p100191)), доводят до метки смесью растворителей для градуировочных растворов [(п. 8.5.1)](#p100187), тщательно перемешивают, получают рабочий раствор N 1 с концентрацией ипроваликарба и п-метил-фенетиламина по 10 мкг/см3. Раствор N 1 хранится в холодильнике (+4 +/- 2 °C) в течение одного месяца.
<a id="p100195"></a>8.6.4. Рабочие растворы N 2 - 5 ипроваликарба и п-метил-фенетиламина для градуировки (концентрация каждого вещества по 0,025 - 0,25 мкг/см3).
<a id="p100196"></a>В 3 мерные колбы вместимостью 100 см3 помещают 2,5; 1,0 и 0,5 см3 градуировочного раствора N 1 с концентрацией ипроваликарба и п-метил-фенетиламина по 10 мкг/см3 [(п. 8.6.3)](#p100193), доводят до метки смесью растворителей, приготовленной по [п. 8.5.2](#p100188), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы NN 2 - 4 с концентрацией ипроваликарба и п-метил-фенетиламина по 0,25; 0,1 и 0,05 мкг/см3 соответственно.
<a id="p100197"></a>В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 10 см3 градуировочного раствора N 2 с концентрацией ипроваликарба и п-метил-фенетиламина по 0,25 мкг/см3, доводят до метки смесью растворителей, приготовленной по [п. 8.5.2](#p100188), тщательно перемешивают, получают рабочий раствор N 5 с концентрацией ипроваликарба и п-метил-фенетиламина по 0,025 мкг/см3.
<a id="p100198"></a>Растворы хранятся в холодильнике (+4 +/- 2 °C) в течение двух недель.

#### <a id="p100199"></a>8.7 Установление градуировочной характеристики.

<a id="p100200"></a>Градуировочные характеристики, выражающие зависимость площади пика (I) от концентрации ипроваликарба или п-метил-фенетиламина в растворе (мкг/см3), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки.
<a id="p100201"></a>В инжектор хроматографа вводят 5 мм3 градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 10.2](#p100218). Осуществляют не менее 5 параллельных измерений.
<a id="p100202"></a>Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.
<a id="p100203"></a>При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее двух образцов концентраций для градуировки, содержание ипроваликарба или п-метил-фенетиламина в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,025 до 0,25 мкг/см3.
<a id="p100204"></a>Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемых для контроля градуировочных растворов сохраняется соотношение:

<a id="p100205"></a> $A = \frac{(X - C) \cdot 100}{C} \leq B$ , где

<a id="p100206"></a>X - концентрация ипроваликарба или п-метил-фенетиламина в пробе при контрольном измерении, мкг/см3;
<a id="p100207"></a>C - известная концентрация градуировочного раствора ипроваликарба или п-метил-фенетиламина, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3;
<a id="p100208"></a>B - норматив контроля погрешности градуировочной характеристики, % (равен 20% при P = 0,95).


### <a id="p100209"></a>IX. Отбор и условия хранения проб


<a id="p100210"></a>9.1. Отбор проб осуществлен в соответствии с методическими документами <3> и [ГОСТ 17.4.3.01](https://bukva.ai/docs/standart-gost-17-4-3-01-2017).

<a id="p100211"></a>

---

<a id="p100212"></a><3> Унифицированные [правила](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов от 21.08.1979 N 2051-79. Методические указания по регистрационным испытаниям пестицидов в части биологической эффективности, Москва, 2018. 64 с.

<a id="p100213"></a>Пробы почвы подсушивают и хранят при комнатной температуре в темноте.


### <a id="p100214"></a>X. Выполнение измерений



#### <a id="p100215"></a>10.1 Экстракция

<a id="p100216"></a>Образец почвы массой 25 г экстрагируют в аппарате Сокслета в течение 1 часа с применением 40 см3 смеси метанол - вода - 25%-й водный раствор аммиака (подготовленной по [п. 8.4](#p100183)), затем дают пробе остыть в течение 30 мин.
<a id="p100217"></a>Экстракт фильтруют через мембранный фильтр, остаток дважды промывают этанолом порциями по 5 см3 и переносят в круглодонную колбу 100 см3. Пробу упаривают до водного остатка. Раствор переносят в мерную пробирку на 10 см3, объем доводят до 10 см3 смесью ацетонитрил - вода - 25%-й водный раствор аммиака (подготовленной по [п. 8.5.1](#p100187)). Полученный раствор, предварительно обмывая смесью колбу, в которой находилась проба, пропускают через мембранный фильтр и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 10.2](#p100218).

#### <a id="p100218"></a>10.2 Условия хроматографирования:

- <a id="p100219"></a>жидкостный хроматограф с тандемным масс-спектрометрическим детектором: тройной квадруполь с источником ионизации, оснащенным соосной подачей горячего азота для эффективной десольвации ионов;
- <a id="p100220"></a>источник ионизации: ионизация распылением в электрическом поле;
- <a id="p100221"></a>режим работы: режим мониторинга заданных реакций.
<a id="p100222"></a>Ипроваликарб:
- <a id="p100223"></a>материнский ион (масса/заряд): 321,2;
- <a id="p100224"></a>дочерние ионы (масса/заряд): 119,1 (количественный расчет), 91,1;
- <a id="p100225"></a>напряжение на фрагментаторе, В: 114;
- <a id="p100226"></a>энергия разрушения (соударения), В: $25(321,2 \rightarrow 119,1)$ , $53(321,2 \rightarrow 91,1)$ .
<a id="p100227"></a>П-метил-фенетиламин:
- <a id="p100228"></a>материнский ион (масса/заряд): 136,1;
- <a id="p100229"></a>дочерние ионы (масса/заряд): 119,1 (количественный расчет), 91,1;
- <a id="p100230"></a>напряжение на фрагментаторе, В: 66;
- <a id="p100231"></a>энергия разрушения (соударения), В: $13(136,1 \rightarrow 119,1)$ , $25(136,1 \rightarrow 91,1)$ ;
- <a id="p100232"></a>скорость сканирования: 200 мс;
- <a id="p100233"></a>давление на распылителе: 35 psi;
- <a id="p100234"></a>скорость осушающего газа 1 (азот): 10 дм3/мин;
- <a id="p100235"></a>температура газа 1: 250 °C;
- <a id="p100236"></a>скорость газа 2 (азот): 11 дм3/мин;
- <a id="p100237"></a>температура газа 2: 340 °C
- <a id="p100238"></a>температура квадруполей (1 и 3): 100 °C;
- <a id="p100239"></a>хроматографическая колонка стальная, длиной 50 мм, внутренним диаметром 2,1 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами С18, зернением 1,8 мкм;
- <a id="p100240"></a>температура колонки: 35 °C;
- <a id="p100241"></a>скорость потока элюента: 0,4 см3/мин;
- <a id="p100242"></a>объем вводимой пробы: 5 мм3;
- <a id="p100243"></a>режим элюирования (градиентный), пробег 11 мин [(табл. 10.1)](#p100245).

<a id="p100244"></a>Таблица 10.1

<a id="p100245"></a>Режим элюирования


<table>
<colgroup><col width="15%"><col width="43%"><col width="43%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100246"></a>Время, мин</td><td colspan="2"><a id="p100247"></a>Содержание растворителя в подвижной фазе, % (по объему)</td></tr>
<tr><td><a id="p100248"></a>Компонент А:<br>раствор 10 мМ ацетата аммония в воде</td><td><a id="p100249"></a>Компонент Б:<br>раствор 10 мМ ацетата аммония в метаноле</td></tr>
<tr><td><a id="p100250"></a>0</td><td><a id="p100251"></a>10</td><td><a id="p100252"></a>90</td></tr>
<tr><td><a id="p100253"></a>1,0</td><td><a id="p100254"></a>10</td><td><a id="p100255"></a>90</td></tr>
<tr><td><a id="p100256"></a>8,0</td><td><a id="p100257"></a>90</td><td><a id="p100258"></a>10</td></tr>
<tr><td><a id="p100259"></a>10,0</td><td><a id="p100260"></a>90</td><td><a id="p100261"></a>10</td></tr>
<tr><td><a id="p100262"></a>11,0</td><td><a id="p100263"></a>10</td><td><a id="p100264"></a>90</td></tr>
</table>


<a id="p100265"></a>Линейный диапазон детектирования 0,125 - 1,25 нг.
<a id="p100266"></a>Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочный раствор с концентрацией вещества 0,25 мкг/см3, разбавляют подвижной фазой (не более чем в 50 раз).


### <a id="p100267"></a>XI. Обработка результатов анализа


<a id="p100268"></a>11.1. Содержание ипроваликарба с учетом его метаболита п-метил-фенетиламина в пробах почвы (X), мг/кг рассчитывают по формуле:

<a id="p100269"></a> $X = \frac{(A + B \cdot K) \cdot V}{mf}$ , где

<a id="p100270"></a>A - концентрация ипроваликарба, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см3;
<a id="p100271"></a>B - концентрация п-метил-фенетиламина, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см3;
<a id="p100272"></a>V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3;
<a id="p100273"></a>m - масса (объем) анализируемого образца, г;
<a id="p100274"></a>K - коэффициент пересчета содержания п-метил-фенетиламина на эквивалент действующего вещества по соотношению молекулярных масс (K = 2,37).
<a id="p100275"></a>f - полнота извлечения вещества, выраженная в относительных единицах (величину полноты извлечения, приведенную в [табл. 3.2](#p100050), разделить на 100).


### <a id="p100276"></a>XII. Проверка приемлемости результатов параллельных определений


<a id="p100277"></a>12.1. За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

<a id="p100278"></a> $\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq r$ , где

<a id="p100279"></a>X<sub>1</sub>, X<sub>2</sub> - результаты параллельных определений, мг/кг;
<a id="p100280"></a>r - значение предела повторяемости [(табл. 3.1)](#p100024), при этом $r = 2,8 \cdot \sigma_{r}$ .
<a id="p100281"></a>При невыполнении [условия (1)](#p100278) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


### <a id="p100282"></a>XIII. Оформление результатов измерений



#### <a id="p100283"></a>13.1 Результат количественного анализа представляют в виде:


<a id="p100284"></a> $(\overline{X} \pm \Delta)$ , мг/кг при вероятности P = 0,95, где

<a id="p100285"></a> $\overline{X}$ - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг
<a id="p100286"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

<a id="p100287"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot \overline{X}}{100}$ , где

<a id="p100288"></a> $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 3.1](#p100024)), %.
<a id="p100289"></a>Если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде: "Содержание ипроваликарба или п-метил-фенетиламина в пробе почвы - менее 0,01 мг/кг".


### <a id="p100290"></a>XIV. Контроль качества результатов измерений


<a id="p100291"></a>14.1. Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002).
<a id="p100292"></a>14.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
<a id="p100293"></a>Величина добавки Cд должна удовлетворять условию:

<a id="p100294"></a> $C_{\text{д}} \geq \Delta_{\text{л}.X} + \Delta_{\text{л}.X\prime}$ , где

<a id="p100295"></a> $\pm \Delta_{\text{л}.X}( \pm \Delta_{\text{л}.X\prime})$ - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/м3
<a id="p100296"></a>при этом:

<a id="p100297"></a> $\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta$ , где

<a id="p100298"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/м3;

<a id="p100299"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot X}{100}$ , где

<a id="p100300"></a> $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 3.1](#p100024)), %.
<a id="p100301"></a>Результат контроля процедуры Кк рассчитывают по формуле:

<a id="p100302"></a> $\text{К}_{\text{к}} = \overline{X}\prime - \overline{X} - C_{\text{д}}$ , где

<a id="p100303"></a> $\overline{X}\prime$ , $\overline{X}$ , Cд - среднее значение массовой концентрации анализируемого компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки соответственно (мг/м3).
<a id="p100304"></a>Норматив оперативного контроля точности К рассчитывают по формуле [(табл. 3.1)](#p100024):

<a id="p100305"></a> $\text{К } = \sqrt{\Delta_{\text{л},X\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},X}^{2}}$ 

<a id="p100306"></a>Проводят сопоставление результата контроля процедуры (Кк) с нормативом контроля (К).
<a id="p100307"></a>Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию

<a id="p100308"></a>|Кк| <= К,

<a id="p100309"></a>процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100310"></a>При невыполнении [условия (1)](#p100278) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении [условия (1)](#p100278) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
<a id="p100311"></a>14.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости. Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):

<a id="p100312"></a> $\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq R$ , где

<a id="p100313"></a>X<sub>1</sub>, X<sub>2</sub> - результаты измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), мг/кг;
<a id="p100314"></a>R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 3.1](#p100024)), %.






## <a id="p100315"></a>Библиографические ссылки


1. <a id="p100316"></a>[ГОСТ 17299](https://bukva.ai/docs/gost-17299-78) "Спирт этиловый технический. Технические условия".
2. <a id="p100317"></a>[ГОСТ 6995](https://bukva.ai/docs/standart-gost-6995-77) "Метанол-яд. Технические условия".
3. <a id="p100318"></a>[ГОСТ 24147](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-gost-24147-80) "Аммиак водный особой чистоты. Технические условия".
4. <a id="p100319"></a>ГОСТ 3117 "Аммоний уксуснокислый. Технические условия".
5. <a id="p100320"></a>[ГОСТ 22090](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-gost-22090-2-93) "Инструменты стоматологические вращающиеся".
6. <a id="p100321"></a>ГОСТ 9293 (ИСО 2435) "Азот газообразный и жидкий. Технические условия".
7. <a id="p100322"></a>ГОСТ 23932 "Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Общие технические условия".
8. <a id="p100323"></a>[ГОСТ 17.4.3.01](https://bukva.ai/docs/standart-gost-17-4-3-01-2017) "Охрана природы. Почвы. Общие требования к отбору проб".
9. <a id="p100324"></a>[ГОСТ 28168](https://bukva.ai/docs/gost-28168-89) "Почвы. Отбор проб".
10. <a id="p100325"></a>[ГОСТ Р ИСО 5725-(1-6)](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
11. <a id="p100326"></a>ГОСТ Р 53228 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания".
12. <a id="p100327"></a>ГОСТ OIML R 111-1 "Государственная система обеспечения единства измерений".
1. <a id="p100328"></a>[ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) "Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования".
13. <a id="p100329"></a>[ГОСТ Р 52501](https://bukva.ai/docs/gost-r-52501-2005) "Вода для лабораторного анализа. Технические условия".
14. <a id="p100330"></a>[ГОСТ 4221](https://bukva.ai/docs/standart-gost-4221-76) "Реактивы. Калий углекислый. Технические условия".
15. <a id="p100331"></a>ГОСТ 25336 "Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры".
16. <a id="p100332"></a>ГОСТ 12.1.004 "Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования".
17. <a id="p100333"></a>ГОСТ 12.1.007 "Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности".
18. <a id="p100334"></a>ГОСТ 12.1.018 "Система стандартов безопасности труда. Пожаровзрывобезопасность статического электричества. Общие требования".
19. <a id="p100335"></a>[ГОСТ 17.4.3.01](https://bukva.ai/docs/standart-gost-17-4-3-01-2017) "Охрана природы. Почвы. Общие требования к отбору проб".
20. <a id="p100336"></a>ГОСТ 12.1.019 "Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты".
21. <a id="p100337"></a>ГОСТ 12.4.009 "Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание".
22. <a id="p100338"></a>ГОСТ 12.0.004 "Система стандартов безопасности труда. Организация обучения безопасности труда. Общие положения".
23. <a id="p100339"></a>[ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) (ИСО 1042, ИСО 4788) "Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия".
24. <a id="p100340"></a>Унифицированные [правила](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов N 2051-79 от 21.08.79.
26. <a id="p100341"></a>Методические указания по регистрационным испытаниям пестицидов в части биологической эффективности. Москва, 2018. 64 с.



<a id="p100342"></a>

---