---
title: "\"МУК 4.1.3555-19. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение токсинов T-2 и HT-2 методом ВЭЖХ-МС с иммуноаффинной очисткой на колонках. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.3555-19"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-3555-19"
---

## "МУК 4.1.3555-19. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение токсинов T-2 и HT-2 методом ВЭЖХ-МС с иммуноаффинной очисткой на колонках. Методические указания"

# "МУК 4.1.3555-19. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение токсинов T-2 и HT-2 методом ВЭЖХ-МС с иммуноаффинной очисткой на колонках. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 09.10.2019)


<a id="p100001"></a>Утверждаю
Руководитель Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека,
Главный государственный санитарный врач
Российской Федерации
**А.Ю.ПОПОВА**
9 октября 2019 года


#### <a id="p100002"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТОКСИНОВ T-2 И HT-2 МЕТОДОМ ВЭЖХ-МС**
**С ИММУНОАФФИННОЙ ОЧИСТКОЙ НА КОЛОНКАХ**

<a id="p100004"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.3555-19**

1. <a id="p100005"></a>Разработаны ФГБУН "ФИЦ питания и биотехнологии" (В.А. Тутельян, И.Б. Седова, М.Г. Киселева, А.Д. Малинкин, З.А. Чалый, Л.П. Захарова, Т.В. Аристархова).
2. <a id="p100006"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 09 октября 2019 г.
3. <a id="p100007"></a>Введены впервые.


## <a id="p100008"></a>I. Область применения


<a id="p100009"></a>1.1. Настоящие методические указания (далее - МУК) устанавливают порядок применения метода высокоэффективной или ультравысокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием (ВЭЖХ-МС/МС или УВЭЖХ-МС/МС) с предварительной очисткой на иммуноаффинных колонках для определения массовой доли токсинов T-2 и HT-2 в зерне и зернопродуктах, в том числе в специализированной продукции для питания детей, беременных и кормящих женщин, в диапазоне от 0,0015 до 0,15 мг/кг и от 0,0075 до 0,15 мг/кг соответственно.
<a id="p100010"></a>1.2. МУК предназначены для органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, осуществляющих контроль качества и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов, а также могут быть использованы организациями, аккредитованными в установленном порядке на проведение исследований продовольственного сырья, пищевых продуктов.

#### <a id="p100011"></a>1.3 МУК носят рекомендательный характер.



## <a id="p100012"></a>II. Общие положения


<a id="p100013"></a>2.1. Токсин T-2 - трихотеценовый микотоксин, продуцируемый плесневыми рода Fusarium; наиболее распространенными продуцентами являются грибы F. sporotrichiella; высокотоксичен для эукариотических организмов.
<a id="p100014"></a>Рациональное название: (3aR,12cS)-3a,12c дигидро-8-гидрокси-6-метокси-7H-фуро[3',2':4,5]фуро[2,3-c] ксантен-7-он.
<a id="p100015"></a>**CAS N: 21259-20-1.**

<a id="p100016"></a> ![II. Общие положения](https://i.bukva.ai/AhyFPh0Q/img_0.png) 

<a id="p100017"></a>T-2: R1=OH, R2=R3=OAc, R4=H, R5=OCOCH2CH(CH3)2
<a id="p100018"></a>HT-2: R1=R2=OH, R3=OAc, R4=H, R5=OCOCH2CH(CH3)2

<a id="p100019"></a>Рис. 1. Химическая структура токсинов T-2 и HT-2

<a id="p100020"></a>Физические свойства: белое кристаллическое вещество, не имеет максимумов поглощения в УФ-спектре при длине волны более 210 нм, не обладает флуоресценцией; T-2 токсин хорошо растворим в бензоле, ацетоне, этилацетате, спиртах, практически не растворим в воде и гексане. Температура плавления T-2 токсина 151 - 152 °C.
<a id="p100021"></a>Токсичность: токсин T-2 является одним из наиболее опасных микотоксинов и обладает высокой острой токсичностью (LD50 для различных видов животных составляет 3 - 10,5 мг/кг массы тела). Обладает нейротоксическим, геморрагическим, лейкопеническим, иммунодепрессивным, дерматотоксическим, тератогенным действием. Международное агентство по изучению рака (МАИР) относит токсин T-2 к группе 3B: соединение, не канцерогенное для человека.

#### <a id="p100022"></a>2.2 HT-2 токсин - производное токсина T-2.

<a id="p100023"></a>Рациональное название: Трихотец-9-ен( $3\alpha$ , $4\beta$ , $8\alpha$ , 15-тетрол), 12,13-эпокси-, 15-ацетат 8-изовалерат.
<a id="p100024"></a>**CAS N: 26934-87-2.**
<a id="p100025"></a>Физические свойства: белое кристаллическое вещество, не имеет максимумов поглощения в УФ-спектре при длине волны более 210 нм, не обладает флуоресценцией; токсин HT-2 растворим в дихлорметане (5 мг/мл). Температура плавления токсина HT-2 - 128 - 133 °C.
<a id="p100026"></a>Токсичность: токсин HT-2 менее токсичен, чем токсин T-2. Обладает нейротоксическим, геморрагическим, лейкопеническим, иммунодепрессивным, дерматотоксическим, тератогенным действием.


## <a id="p100027"></a>III. Погрешность измерений


<a id="p100028"></a>3.1. При соблюдении всех регламентируемых условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерения при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в [табл. 1](#p100030) для соответствующих диапазонов концентраций (согласно [ГОСТ Р ИСО 5725-(1-6)](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002)).

<a id="p100029"></a>Таблица 1

<a id="p100030"></a>Значения характеристики погрешности, нормативов оперативного
контроля точности, повторяемости, воспроизводимости


<table>
<colgroup><col width="16%"><col width="11%"><col width="12%"><col width="14%"><col width="14%"><col width="16%"><col width="16%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100031"></a>Анализируемый объект</td><td><a id="p100032"></a>Диапазон определяемых концентраций <a href="#p100068">&lt;*&gt;</a>, мг/кг, (средняя полнота извлечения, %)</td><td><a id="p100033"></a>Показатель точности (границы относительной погрешности, P = 0,95), $\pm \delta$ , %</td><td><a id="p100034"></a>Показатель повторяемости (среднеквадратичное отклонение повторяемости), $\sigma_{r}$ , %</td><td><a id="p100035"></a>Показатель воспроизводимости (среднеквадратичное отклонение воспроизводимости), $\sigma_{R}$ , %</td><td><a id="p100036"></a>Предел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных определений), r, %</td><td><a id="p100037"></a>Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в разных лабораториях), R, %, (P = 0,95)</td></tr>
<tr><td colspan="7"><a id="p100038"></a>Токсин T-2</td></tr>
<tr><td><a id="p100039"></a>Пищевая продукция для детей, беременных и кормящих женщин на зерновой основе</td><td><a id="p100040"></a>0,0015 - 0,15<br>(75,5)</td><td><a id="p100041"></a>65</td><td><a id="p100042"></a>7,6</td><td><a id="p100043"></a>10,7</td><td><a id="p100044"></a>22</td><td><a id="p100045"></a>30</td></tr>
<tr><td><a id="p100046"></a>Зерно и зернопродукты</td><td><a id="p100047"></a>0,0015 - 0,15<br>(84,9)</td><td><a id="p100048"></a>52</td><td><a id="p100049"></a>9,2</td><td><a id="p100050"></a>12,9</td><td><a id="p100051"></a>26</td><td><a id="p100052"></a>37</td></tr>
<tr><td colspan="7"><a id="p100053"></a>Токсин HT-2</td></tr>
<tr><td><a id="p100054"></a>Пищевая продукция для детей, беременных и кормящих женщин на зерновой основе</td><td><a id="p100055"></a>0,0075 - 0,15<br>(80,5)</td><td><a id="p100056"></a>67</td><td><a id="p100057"></a>8,3</td><td><a id="p100058"></a>11,7</td><td><a id="p100059"></a>24</td><td><a id="p100060"></a>33</td></tr>
<tr><td><a id="p100061"></a>Зерно и зернопродукты</td><td><a id="p100062"></a>0,0075 - 0,15<br>(87,9)</td><td><a id="p100063"></a>54</td><td><a id="p100064"></a>9,1</td><td><a id="p100065"></a>12,8</td><td><a id="p100066"></a>26</td><td><a id="p100067"></a>36</td></tr>
<tr><td colspan="7"><a id="p100068"></a>&lt;*&gt; Диапазон определяемого содержания токсина установлен в соответствии с диапазоном измерений, с учетом фактора разведения и степени извлечения</td></tr>
</table>



## <a id="p100069"></a>IV. Метод измерений


<a id="p100070"></a>4.1. Методика основана на определении токсинов T-2 и HT-2 с помощью высокоэффективной или ультравысокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спектрометрическим детектированием в режиме электрораспылительной ионизации. Подготовка пробы включает в себя экстракцию метанольным раствором с последующим выделением аналитов на иммуноаффинных колонках. Идентификацию аналитов проводят по совпадению времен удерживания, присутствию аналитических сигналов заявленных количественных и качественных переходов материнский - дочерний ионы и соответствию их соотношения с таковым в стандартных образцах (возможное отклонение +/- 30%). Количественное определение проводится методом внешней абсолютной калибровки.


## <a id="p100071"></a>V. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы



#### <a id="p100072"></a>5.1 Средства измерений



| <a id="p100073"></a>Хроматограф жидкостный, оснащенный насосом высокого или ультравысокого давления, инжектором для ручного или автоматического ввода проб, термостатом колонок, тройным квадрупольным масс-спектрометрическим детектором и программным обеспечением для сбора и обработки хроматографических данных |  |
| --- | --- |
| <a id="p100074"></a>Колонка хроматографическая, заполненная объемно-пористым силикагелем с привитыми группами октадецилсилана (ОДС, С18) с размером частиц 3,5 - 5 мкм, размер колонки (4,6 - 3) x (100 - 150) мм (ВЭЖХ) или с размером частиц 1,8 - 2 мкм размер колонки 2,1 x (50 - 100) мм (УВЭЖХ). Размер пор сорбентов не более 120Е , рабочий диапазон pH 1 - 8, содержание углерода ~8 - 15% |  |
| <a id="p100075"></a>Весы неавтоматического действия с пределом допускаемой абсолютной погрешности однократного взвешивания +/- 0,01 г | <a id="p100076"></a>[ГОСТ OIML R 76-1](https://bukva.ai/docs/gost-oiml-r-76-1-2011) |
| <a id="p100077"></a>Меры массы | <a id="p100078"></a>ГОСТ OIML R 111-1 |
| <a id="p100079"></a>Дозатор пипеточный вместимостью от 0,5 до 5 см3 | <a id="p100080"></a>[ГОСТ 28311](https://bukva.ai/docs/gost-28311-89) |
| <a id="p100081"></a>Дозатор пипеточный вместимостью от 0,1 до 1 см3 | <a id="p100082"></a>[ГОСТ 28311](https://bukva.ai/docs/gost-28311-89) |
| <a id="p100083"></a>Дозатор пипеточный вместимостью от 0,04 до 0,2 см3 | <a id="p100084"></a>[ГОСТ 28311](https://bukva.ai/docs/gost-28311-89) |
| <a id="p100085"></a>Цилиндры стеклянные объемом 25, 100 и 500 см3 | <a id="p100086"></a>[ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |
| <a id="p100087"></a>Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0; 2,0; 5,0 и 10 см3 | <a id="p100088"></a>[ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) |
| <a id="p100089"></a>Мерные колбы 2-го класса точности, вместимостью 100 и 500 см3 | <a id="p100090"></a>[ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |



#### <a id="p100091"></a>5.2 Вспомогательное оборудование



| <a id="p100092"></a>Мельница лабораторная, обеспечивающая размол зерна и зернопродуктов до частиц размером не более 0,5 мм |  |
| --- | --- |
| <a id="p100093"></a>Лабораторный шейкер (встряхиватель) для пробирок, обеспечивающий скорость встряхивания 50 - 100 об./мин |  |
| <a id="p100094"></a>Лабораторный шейкер (встряхиватель) для колб, обеспечивающий скорость встряхивания 50 - 100 об./мин |  |
| <a id="p100095"></a>Центрифуга настольная со скоростью вращения не менее 4 000 об./мин, снабженная адаптерами для пробирок вместимостью 225 см3 |  |
| <a id="p100096"></a>Ванна ультразвуковая лабораторная с регулятором времени |  |
| <a id="p100097"></a>Система для твердофазной экстракции (вакуумная или аналогичная) |  |
| <a id="p100098"></a>Установка для вакуумного фильтрования и дегазирования подвижной фазы |  |
| <a id="p100099"></a>Холодильник бытовой электрический | <a id="p100100"></a>ГОСТ 26678 |
| <a id="p100101"></a>Банки стеклянные вместимостью 250 - 1000 см3 |  |
| <a id="p100102"></a>Пробирки полимерные центрифужные конические с завинчивающейся крышкой вместимостью 225 см3 | <a id="p100103"></a>[ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74); |
| <a id="p100104"></a>Пробирки полимерные центрифужные типа "Эппендорф" вместимостью 2 см3 |  |
| <a id="p100105"></a>Емкости для жидких проб (виалы) с завинчивающимися крышками вместимостью 2 и 4 см3 |  |
| <a id="p100106"></a>Колбы плоскодонные конические объемом 50, 100 и 250 см3 | <a id="p100107"></a>[ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |
| <a id="p100108"></a>Шприц медицинский вместимостью 5 см3 с разъемом типа Луер Лок |  |
| <a id="p100109"></a>Пробирки типа "Эппендорф" объемом 2 см3 |  |
| <a id="p100110"></a>Фильтр бумажный складчатый "Синяя лента" |  |
| <a id="p100111"></a>Наконечники одноразовые полимерные для дозаторов |  |



#### <a id="p100112"></a>5.3 Реактивы и материалы



| <a id="p100113"></a>Вода дистиллированная | <a id="p100114"></a>ГОСТ 6709 |
| --- | --- |
| <a id="p100115"></a>Вода для лабораторного анализа, второй степени чистоты | <a id="p100116"></a>[ГОСТ Р 52501](https://bukva.ai/docs/gost-r-52501-2005) (ИСО 3696) |
| <a id="p100117"></a>Метанол для градиентной жидкостной хроматографии с коэффициентом пропускания не менее 99,8% (относительно дистиллированной воды) |  |
| <a id="p100118"></a>Метанол, хч | <a id="p100119"></a>[ГОСТ 6995](https://bukva.ai/docs/standart-gost-6995-77) |
| <a id="p100120"></a>Таблетки фосфатно-солевого буфера (pH 7,3 +/- 0,2) из смеси солей: 1,15 г натрия фосфорнокислого двузамещенного 12-водного, 0,2 г калия фосфорнокислого однозамещенного 2-водного, 0,2 г калия хлорида, 8,0 г натрия хлорида |  |
| <a id="p100121"></a>Калий фосфорнокислый однозамещенный, хч | <a id="p100122"></a>[ГОСТ 4198](https://bukva.ai/docs/gost-4198-75) |
| <a id="p100123"></a>Натрий фосфорнокислый двузамещенный чда | <a id="p100124"></a>[ГОСТ 11773](https://bukva.ai/docs/gost-11773-76) |
| <a id="p100125"></a>Натрий хлористый, хч | <a id="p100126"></a>ГОСТ 4233 |
| <a id="p100127"></a>Калий хлористый, хч | <a id="p100128"></a>ГОСТ 4234 |
| <a id="p100129"></a>Колонки иммуноаффинные для определения токсинов T-2 и HT-2 (емкость до 1500 нг токсинов T-2 и HT-2, степень извлечения не менее 70%) |  |
| <a id="p100130"></a>Азот осч, из баллона | <a id="p100131"></a>ГОСТ 9293 (ИСО 2435) |
| <a id="p100132"></a>Сухой токсин T-2, с чистотой >= 98% | <a id="p100133"></a>CAS N: 21259-20-1 |
| <a id="p100134"></a>Сухой токсин HT-2, с чистотой >= 98% | <a id="p100135"></a>CAS N: 26934-87-2 |


<a id="p100136"></a>Примечание: допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками и вспомогательного оборудования с техническими характеристиками не хуже, а также материалов и реактивов по качеству не ниже указанных в настоящем документе.


## <a id="p100137"></a>VI. Требования при проведении испытаний


<a id="p100138"></a>6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на прибор.
<a id="p100139"></a>6.2. Помещение лаборатории должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать гигиенических нормативов <1>.

<a id="p100140"></a>

---

<a id="p100141"></a><1> ГН 2.2.5.3532-18 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны", утвержденные постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 13.02.2018 N 25; ГН 2.2.5.2308-07 "Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны", утвержденные постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 19.12.2007 N 89.


## <a id="p100142"></a>VII. Требования к квалификации операторов


<a id="p100143"></a>7.1. Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на жидкостном хроматографе с масс-спектрометрическим детектором, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.


## <a id="p100144"></a>VIII. Отбор проб


<a id="p100145"></a>8.1. Отбор проб продовольственного сырья и пищевых продуктов на анализ проводят в соответствии с нормативным документом, регламентирующим отбор проб на конкретный вид продукции, в частности, продукты пищевые - по [ГОСТ 33303](https://bukva.ai/docs/standart-gost-33303-2015), продукты пищевые консервированные - по [ГОСТ 8756.0](https://bukva.ai/docs/gost-8756-0-70).


## <a id="p100146"></a>IX. Условия измерений



#### <a id="p100147"></a>9.1 При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- <a id="p100148"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100149"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


## <a id="p100150"></a>X. Подготовка к выполнению измерений


<a id="p100151"></a>Измерениям предшествуют следующие операции: приготовление стандартных и градуировочных растворов, приготовление растворов для экстракции, приготовление подвижной фазы, подготовка проб для анализа.


#### <a id="p100152"></a>10.1 Приготовление стандартных растворов токсинов

T-2 и HT-2

<a id="p100153"></a>10.1.<sub>1</sub>. Приготовление стандартного раствора токсина T-2.
<a id="p100154"></a>Для приготовления стандартного раствора токсина T-2 с концентрацией 10 000 нг/см3 сухой стандарт массой 1,0 мг количественно переносят в мерную колбу объемом 100 см3 и доводят объем до метки метанолом.
<a id="p100155"></a>Раствор хранят в холодильнике при температуре минус (18 +/- 2) °C не более 12 мес.

##### <a id="p100156"></a>10.1.2 Приготовление стандартного раствора токсина HT-2.

<a id="p100157"></a>Для приготовления стандартного раствора токсина HT-2 с концентрацией 10 000 нг/см3 сухой стандарт токсина массой 1,0 мг количественно переносят в мерную колбу объемом 100 см3 и доводят объем до метки метанолом.
<a id="p100158"></a>Раствор хранят в холодильнике при температуре минус (18 +/- 2) °C не более 12 мес.

##### <a id="p100159"></a>10.1.3 Приготовление стандартного раствора смеси токсинов T-2 и HT-2.

<a id="p100160"></a>Для приготовления стандартного раствора смеси токсинов с массовой концентрацией токсинов T-2 и HT-2 по 1 000 нг/см3 в виалу объемом 4 см3 переносят 0,4 см3 стандартного раствора токсина T-2, 0,4 см3 стандартного раствора токсина HT-2 и добавляют 3,2 см3 метанола. Перемешивают.
<a id="p100161"></a>Раствор хранят в холодильнике при температуре минус (18 +/- 2) °C не более 12 мес.


#### <a id="p100162"></a>10.2 Приготовление градуировочных растворов смеси токсинов

T-2 и HT-2

<a id="p100163"></a>Для определения содержания токсинов T-2 и HT-2 готовят градуировочные растворы их смеси с массовой концентрацией: 100 нг/см3 (раствор 8), 50 нг/см3 (раствор 7), 25 нг/см3 (раствор 6), 12,5 нг/см3 (раствор 5), 6,25 нг/см3 (раствор 4), 3,125 нг/см3 (раствор 3), 1,56 нг/см3 (раствор 2), 0,63 нг/см3 (раствор 1).
<a id="p100164"></a>Для приготовления раствора 8 в виалу объемом 4 см3 переносят 0,2 см3 стандартного раствора смеси токсинов T-2 и HT-2 с массовой долей 1000 нг/см3 (п. [8.1.3](#p100159)) и 1,8 см3 метанола. Перемешивают.
<a id="p100165"></a>Для приготовления раствора 7 в виалу объемом 4 см3 переносят 0,15 см3 стандартного раствора смеси токсинов T-2 и HT-2 с массовой долей 1000 нг/см3 (п. [8.1.3](#p100159)) и 2,85 см3 метанола. Перемешивают.
<a id="p100166"></a>Для приготовления раствора 6 в виалу объемом 4 см3 переносят 0,5 см3 раствора 8 и 1,5 см3 метанола. Перемешивают.
<a id="p100167"></a>Для приготовления раствора 5 в виалу объемом 4 см3 переносят 0,5 см3 раствора 7 и 1,5 см3 метанола. Перемешивают.
<a id="p100168"></a>Для приготовления раствора 4 в виалу объемом 4 см3 переносят 0,5 см3 раствора 6 и 1,5 см3 метанола. Перемешивают.
<a id="p100169"></a>Для приготовления раствора 3 в виалу объемом 4 см3 переносят 0,5 см3 раствора 5 и 1,5 см3 метанола. Перемешивают.
<a id="p100170"></a>Для приготовления раствора 2 в виалу объемом 4 см3 переносят 0,5 см3 раствора 4 и 1,5 см3 метанола. Перемешивают.
<a id="p100171"></a>Для приготовления раствора 1 в виалу объемом 4 см3 переносят 0,6 см3 раствора 2 и 0,9 см3 метанола. Перемешивают.
<a id="p100172"></a>Растворы хранят в холодильнике при температуре минус (18 +/- 2) °C не более 6 мес. Перед проведением измерений растворы доводят до комнатной температуры, перемешивают и переносят по 0,5 - 1 см3 в хроматографические виалы.


#### <a id="p100173"></a>10.3 Приготовление фосфатно-солевого буферного раствора,

pH = 7,4

<a id="p100174"></a>Фосфатно-солевой буфер можно приготовить двумя способами.
<a id="p100175"></a>Способ 1. Навеску натрия фосфорнокислого двузамещенного 12-водного массой 1,15 г, навеску натрия фосфорнокислого однозамещенного 2-водного массой 0,124 г и навеску натрия хлорида массой 1,74 г переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, добавляют 10 - 20 см3 дистиллированной воды. Перемешивают до полного растворения солей. Доводят объем раствора до метки и перемешивают.
<a id="p100176"></a>Способ 2. Фосфатно-солевой буфер из таблетированной смеси готовят в соответствии с инструкцией производителя. В мерную колбу на 100 см3 помещают 1 таблетку смеси солей, добавляют дистиллированную воду, перемешивают, доводят до метки. Полученный раствор имеет pH = 7,4.
<a id="p100177"></a>Раствор хранят в колбе с притертой пробкой в холодильнике при температуре (4 +/- 1) °C не более 1 мес.
<a id="p100178"></a>Вследствие хранения при низкой температуре возможно выпадение осадка солей. Для растворения осадка обычно достаточно довести раствор до комнатной температуры или немного нагреть на водяной бане.
<a id="p100179"></a>Для подготовки пробы [(п. 8.6)](#p100193) используют фосфатно-солевой буфер комнатной температуры.


#### <a id="p100180"></a>10.4 Приготовление раствора для экстракции токсинов

T-2 и HT-2

<a id="p100181"></a>В колбу вместимостью 500 см3 отмеряют цилиндром объемом 500 см3 350,0 см3 метанола, а затем 150,0 см3 дистиллированной воды. Раствор тщательно перемешивают.
<a id="p100182"></a>Раствор хранят в герметично упакованной емкости при комнатной температуре не более 12 мес.


#### <a id="p100183"></a>10.5 Приготовление подвижной фазы


<a id="p100184"></a>Хроматографическое разделение компонентов пробы проводят в режиме изократического или градиентного элюирования. Компоненты подвижной фазы - метанол и вода. Параметры элюирования оптимизируют для конкретной хроматографической колонки с целью достижения достаточного разделения компонентов пробы за приемлемое время анализа.
<a id="p100185"></a>В качестве примера приведен состав подвижных фаз для изократического элюирования токсинов на аналитической ВЭЖХ колонке длиной 150 мм с внутренним диаметром 4,6 мм, заполненной силикагелем с привитыми группами октадецилсилана (размер частиц - 3,5 мкм, пор - 80Е , содержание углерода - 10%) [(пункт 10.5.1)](#p100186) и градиентного элюирования на УВЭЖХ колонке длиной 100 мм с внутренним диаметром 2,1 мм, заполненной силикагелем с привитыми группами октадецилсилана (размер частиц - 1,9 мкм, пор - 90Е , содержание углерода - 13%) [(п. 10.5.2)](#p100188).
<a id="p100186"></a>10.5.1. Для разделения компонентов проб в изократическом режиме элюирования используют подвижную фазу метанол - вода (80:20 об. %). Для приготовления подвижной фазы в колбу вместимостью 500 см3 отмеряют цилиндром на 500 см3 400,0 см3 метанола, а затем 100,0 см3 воды для лабораторного анализа второй степени чистоты. Раствор тщательно перемешивают и фильтруют с помощью установки для вакуумного фильтрования и дегазирования подвижной фазы.
<a id="p100187"></a>Подвижную фазу хранят в колбе с притертой пробкой или в герметично упакованной емкости не более 1 мес.

##### <a id="p100188"></a>10.5.2 Градиентное элюирование осуществляют с помощью бинарного хроматографического насоса:

- <a id="p100189"></a>фаза А: вода для лабораторного анализа первой степени чистоты;
- <a id="p100190"></a>фаза Б: метанол для градиентной жидкостной хроматографии.
<a id="p100191"></a>Перед проведением измерений подвижные фазы фильтруют с помощью установки для вакуумного фильтрования и дегазирования подвижной фазы. При использовании приведенного выше градиентного элюирования обязательно наличие в хроматографической системе дегазирующего устройства. В противном случае в подвижную фазу А добавляют 20 - 40% метанола и вновь подбирают схему градиента.
<a id="p100192"></a>Фаза А не хранится, перед каждой серией анализов готовят свежую фазу А. Фаза Б хранится в соответствии с указаниями производителя растворителя.


#### <a id="p100193"></a>10.6 Подготовка проб


<a id="p100194"></a>Отобранные пробы измельчают в течение нескольких минут в лабораторной мельнице до однородного состояния, размер частиц не должен превышать 0,5 мм.
<a id="p100195"></a>В химическом стакане/колбе Эрленмейера объемом 250 см3 или центрифужной пробирке объемом 225 см3 взвешивают 20,0 г однородного и мелко измельченного образца, добавляют 100 см3 раствора для экстракции и 2,0 г хлорида натрия, закрывают пробку/завинчивают крышку. Экстракцию проводят в течение 30 минут: сначала на аппарате для встряхивания проб (10 минут), затем в ультразвуковой ванне (10 минут) и вновь на аппарате для встряхивания проб (10 минут). Полученный экстракт фильтруют через бумажный складчатый фильтр "синяя лента" или центрифугируют в течение 15 минут при не менее 4000 об./мин.
<a id="p100196"></a>Выделение аналитов и их очистку от компонентов матрицы проводят на иммуноаффинных колонках. Условия хранения и сроки годности колонок - в соответствии с рекомендациями производителя. Обычно колонки хранят в холодильнике при температуре (2 - 8) °C. Перед использованием необходимое количество колонок должно быть обязательно доведено до комнатной температуры.
<a id="p100197"></a>Отбирают 7 см3 фильтрата/надосадочной жидкости и добавляют 28 см3 фосфатно-солевого буферного раствора, pH 7,4, перемешивают. 25 см3 фильтрата наносят на иммуноаффинную колонку со скоростью не более 2 см3/мин. Промывают 20 см3 дистиллированной воды со скоростью не более 5 см3/мин, продувают колонку воздухом из шприца с разъемом типа Луер Лок для удаления остаточной жидкости. Токсины элюируют с колонки со скоростью 1 капля в секунду 1,5 см3 метанола в пробирки полимерные центрифужные типа "Эппендорф" вместимостью 2 см3. Прямое элюирование в хроматографические виалы нецелесообразно, так как образование пузыря воздуха в узком горлышке виалы может привести к потере элюата. Для обеспечения полноты извлечения аналитов во время элюирования рекомендуется проводить обратную промывку патрона, поднимая и опуская плунжер шприца для обеспечения потока метанола в противоположных направлениях, повторяют 3 раза. Элюат переносят в хроматографическую виалу вместимостью 2 см3.


## <a id="p100198"></a>XI. Проведение измерений



#### <a id="p100199"></a>11.1 Параметры хромато-масс-спектрометрического

детектирования токсинов HT-2 и T-2

<a id="p100200"></a>Для настройки масс-спектрометрического детектора устанавливают следующие параметры, представленные в [табл. 2](#p100202).

<a id="p100201"></a>Таблица 2

<a id="p100202"></a>Основные параметры масс-спектрометрического
детектирования <2>


<a id="p100203"></a>

---

<a id="p100204"></a><2> В качестве ориентировочных ниже приведены значения для тройных квадрупольных масс-детекторов: 6410 TripQuad LC/MS, Agilent Technologies: напряжение на капилляре 4000 В; температура источника - 100 °C; температура газа осушителя (десольватации) (азот) - 350 °C; давление небулайзера - 60 psi (4,14 Бар); TSQ Endura, HESI, Thermo Scientific: напряжение на капилляре 4 900 В, температура подогреваемого капилляра - 350 °C; температура испарителя - 400 °C; скорость потока оболочного газа - 35 ед.; скорость потока вспомогательного газа - 15 ед.; скорость потока сметающего газа - 25 ед.; давление газа для соударений - 1,5 mTorr.


<table>
<colgroup><col width="25%"><col width="75%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100205"></a>Способ ионизации</td><td><a id="p100206"></a>электрораспылительная ионизация при атмосферном давлении</td></tr>
<tr><td><a id="p100207"></a>Полярность</td><td><a id="p100208"></a>положительная</td></tr>
<tr><td><a id="p100209"></a>Режим детектирования</td><td><a id="p100210"></a>мониторинг множественных реакций (MRM)</td></tr>
<tr><td colspan="2"><a id="p100211"></a>Рабочие параметры масс-спектрометра устанавливаются в соответствии с рекомендациями производителя для используемой скорости подвижной фазы <a href="#p100305">(п. 11.2)</a>. Допускается изменение параметров, если показано, что таковое не ухудшает метрологические характеристики измерений</td></tr>
</table>


<a id="p100212"></a>Условия детектирования оптимизируют в ручном или автоматическом режиме. Для этого используют стандартные растворы токсинов T-2 и HT-2 ([п. 10.1.1](#p100153), [10.1.2](#p100156)). Токсины детектируют в виде аддуктов [M+Na]+. Выбирают следующие материнские и дочерние ионы: токсин T-2: материнский ион 489 а.е.м., дочерние - 245, 327 и 387 а.е.м; токсин HT-2: материнский ион 447 а.е.м., дочерние - 345, 285 а.е.м. Определяют значения напряжения на фрагменторе и энергии соударения для указанных переходов. Наиболее интенсивные переходы выбирают для количественного анализа, остальные - подтверждающие. Примеры приведены в [табл. 3](#p100214).

<a id="p100213"></a>Таблица 3

<a id="p100214"></a>Условия детектирования ионов в режиме мониторинга
множественных реакций (MRM) <3>


<a id="p100215"></a>

---

<a id="p100216"></a><3> В качестве ориентировочных приведены значения для тройных квадрупольных масс-детекторов. (I) для 6410 TripQuad LC/MS, Agilent Technologies; (II) TSQ Endura, HESI, Thermo Scientific.


<table>
<colgroup><col width="16%"><col width="11%"><col width="21%"><col width="14%"><col width="19%"><col width="18%"></colgroup>
<tr><td colspan="2"><a id="p100217"></a>Аналит</td><td><a id="p100218"></a>Материнский ион [M+Na]+, m/z</td><td><a id="p100219"></a>Дочерние ионы, m/z</td><td><a id="p100220"></a>Напряжение на фрагменторе, В</td><td><a id="p100221"></a>Энергия соударения, В</td></tr>
<tr><td colspan="6"><a id="p100222"></a>(I)</td></tr>
<tr><td rowspan="3"><a id="p100223"></a>Токсин T-2</td><td><a id="p100224"></a>Q &lt;*&gt;</td><td><a id="p100225"></a>489,2</td><td><a id="p100226"></a>245,1</td><td><a id="p100227"></a>190</td><td><a id="p100228"></a>24</td></tr>
<tr><td><a id="p100229"></a>q1 &lt;*&gt;</td><td><a id="p100230"></a>489,2</td><td><a id="p100231"></a>327,1</td><td><a id="p100232"></a>190</td><td><a id="p100233"></a>20</td></tr>
<tr><td><a id="p100234"></a>q2</td><td><a id="p100235"></a>489,2</td><td><a id="p100236"></a>387,1</td><td><a id="p100237"></a>190</td><td><a id="p100238"></a>16</td></tr>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100239"></a>Токсин HT-2</td><td><a id="p100240"></a>Q</td><td><a id="p100241"></a>447,2</td><td><a id="p100242"></a>345,0</td><td><a id="p100243"></a>190</td><td><a id="p100244"></a>16</td></tr>
<tr><td><a id="p100245"></a>q1</td><td><a id="p100246"></a>447,2</td><td><a id="p100247"></a>285,0</td><td><a id="p100248"></a>190</td><td><a id="p100249"></a>16</td></tr>
<tr><td colspan="6"><a id="p100250"></a>(II)</td></tr>
<tr><td rowspan="3"><a id="p100251"></a>Токсин T-2</td><td><a id="p100252"></a>Q</td><td><a id="p100253"></a>489,14</td><td><a id="p100254"></a>244,95</td><td><a id="p100255"></a>138</td><td><a id="p100256"></a>23</td></tr>
<tr><td><a id="p100257"></a>q1</td><td><a id="p100258"></a>489,14</td><td><a id="p100259"></a>326,89</td><td><a id="p100260"></a>138</td><td><a id="p100261"></a>23</td></tr>
<tr><td><a id="p100262"></a>q2</td><td><a id="p100263"></a>489,14</td><td><a id="p100264"></a>387,37</td><td><a id="p100265"></a>138</td><td><a id="p100266"></a>21</td></tr>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100267"></a>Токсин HT-2</td><td><a id="p100268"></a>Q</td><td><a id="p100269"></a>447,38</td><td><a id="p100270"></a>284,92</td><td><a id="p100271"></a>164</td><td><a id="p100272"></a>20</td></tr>
<tr><td><a id="p100273"></a>q1</td><td><a id="p100274"></a>447,38</td><td><a id="p100275"></a>345,38</td><td><a id="p100276"></a>164</td><td><a id="p100277"></a>17</td></tr>
<tr><td colspan="6"><a id="p100278"></a>&lt;*&gt; Q - колич. переход, используемый для количественного расчета; q - кач. переходы, используемые для подтверждения правильной идентификации токсинов</td></tr>
</table>


<a id="p100279"></a>Сравнение интенсивностей мониторинга множественных реакций (MRM) переходов, полученных для аналита в пробе и стандарте, проводят с помощью программного обеспечения, возможное отклонение +/- 30%.

<a id="p100280"></a>Таблица 4

<a id="p100281"></a>Отношения интенсивностей переходов для токсинов
T-2 и HT-2 <4>


<a id="p100282"></a>

---

<a id="p100283"></a><4> В качестве примера отношений интенсивностей переходов для токсинов T-2 и HT-2 ниже приведены значения для тройного квадрупольного масс-детектора 6410 TripQuad LC/MS, Agilent Technologies.


<table>
<colgroup><col width="25%"><col width="25%"><col width="25%"><col width="25%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100284"></a>Аналит</td><td><a id="p100285"></a>Тип перехода</td><td><a id="p100286"></a>Переход, m/z</td><td><a id="p100287"></a>qi/Q, %</td></tr>
<tr><td rowspan="3"><a id="p100288"></a>Токсин T-2</td><td><a id="p100289"></a>Q</td><td><a id="p100290"></a>$489,2 \rightarrow 245,1$</td><td><a id="p100291"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100292"></a>q1</td><td><a id="p100293"></a>$489,2 \rightarrow 327,1$</td><td><a id="p100294"></a>50</td></tr>
<tr><td><a id="p100295"></a>q2</td><td><a id="p100296"></a>$489,2 \rightarrow 387,1$</td><td><a id="p100297"></a>45</td></tr>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100298"></a>Токсин HT-2</td><td><a id="p100299"></a>Q</td><td><a id="p100300"></a>$447,2 \rightarrow 345,0$</td><td><a id="p100301"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100302"></a>q1</td><td><a id="p100303"></a>$447,2 \rightarrow 285,0$</td><td><a id="p100304"></a>90</td></tr>
</table>



#### <a id="p100305"></a>11.2 Условия хроматографических измерений


<a id="p100306"></a>Хроматографическое разделение компонентов пробы проводят в режиме изократического или градиентного элюирования. Параметры элюирования оптимизируют для конкретной хроматографической колонки с целью достижения достаточного разделения компонентов пробы за приемлемое время анализа.

<a id="p100307"></a>Таблица 5

<a id="p100308"></a>Условия хроматографических измерений <5>


<a id="p100309"></a>

---

<a id="p100310"></a><5> В качестве примера приведены условия ВЭЖХ для изократического элюирования токсинов на аналитической колонке длиной 150 мм с внутренним диаметром 4,6 мм, заполненной силикагелем с привитыми группами октадецилсилана (размер частиц - 3,5 мкм, пор - 80Е , содержание углерода - 10%) (Agilent Zorbax SB-C18, 150 x 4,6 мм, 3,5 мкм) и градиентного элюирования на УВЭЖХ колонке длиной 100 мм с внутренним диаметром 2,1 мм, заполненной силикагелем с привитыми группами октадецилсилана (размер частиц - 1,9 мкм, пор - 90Е , содержание углерода - 13%) (Titan C18, 100x2,1 мм, 1,9 мкм).


<table>
<colgroup><col width="24%"><col width="24%"><col width="51%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100311"></a>Режим элюирования</td><td><a id="p100312"></a>Изократическое</td><td><a id="p100313"></a>Градиентное</td></tr>
<tr><td><a id="p100314"></a>Подвижная фаза</td><td><a id="p100315"></a>метанол - вода<br>(80 : 20 об. %)</td><td><a id="p100316"></a><a id="p100317"></a><a id="p100318"></a>Фаза А: вода; фаза Б: метанол.<br>Схема градиента:<br>от 0 до 6 мин: линейное увеличение от 40 до 80% Б; от 6 до 8 мин: постоянное 80% Б; от 8 до 8,3 мин: линейное уменьшение Б до 40%; от 8,3 до 10 мин: уравновешивание системы 40% Б</td></tr>
<tr><td><a id="p100319"></a>Время анализа, мин</td><td colspan="2"><a id="p100320"></a>10</td></tr>
<tr><td><a id="p100321"></a>Скорость подачи элюента, см3/мин</td><td colspan="2"><a id="p100322"></a>0,4</td></tr>
<tr><td><a id="p100323"></a>Температура колонки, °C</td><td colspan="2"><a id="p100324"></a>30</td></tr>
<tr><td><a id="p100325"></a>Объем пробы, x 10-3 см3 (мкл)</td><td><a id="p100326"></a>10</td><td><a id="p100327"></a>4</td></tr>
<tr><td><a id="p100328"></a>Время удерживания токсинов, мин</td><td><a id="p100329"></a>6,0 (HT-2); 6,8 (T-2)</td><td><a id="p100330"></a>4,1 (HT-2); 4,9 (T-2)</td></tr>
<tr><td><a id="p100331"></a>Пример хроматограммы</td><td><a id="p100332"></a><a href="#p100335">Рис. 2</a></td><td><a id="p100333"></a><a href="#p100337">Рис. 3</a></td></tr>
</table>


<a id="p100334"></a> ![XI. Проведение измерений](https://i.bukva.ai/AhyFPh0Q/img_1.png) 

<a id="p100335"></a>Рис. 2. Хроматограмма образца детского питания, искусственно
загрязненного токсинами HT-2 и T-2 на уровне 50 мкг/кг
(А - токсин HT-2, Б - токсин T-2)



<a id="p100336"></a> ![XI. Проведение измерений](https://i.bukva.ai/AhyFPh0Q/img_2.png) 

<a id="p100337"></a>Рис. 3. Хроматограмма образца детского питания, искусственно
загрязненного токсинами HT-2 и T-2 на уровне 50 мкг/кг
(А - токсин HT-2, Б - токсин T-2).
Приведены хроматограммы для количественных переходов
материнский - дочерний ионы


#### <a id="p100338"></a>11.3 Выполнение измерений


<a id="p100339"></a>Перед проведением измерений виалы с серией градуировочных растворов смеси токсинов T-2 и HT-2 доводят до комнатной температуры.
<a id="p100340"></a>Хроматографическую систему кондиционируют подвижной фазой до установления стабильной базовой линии в условиях и порядке, рекомендуемых изготовителем. Для уравновешивания системы в качестве первых двух вколов последовательности рекомендуется использовать градуировочный раствор 8 и раствор для экстракции [(п. 10.4)](#p100180), которые не учитываются в расчетах. Объем вкола 10 x 10-3 см3 (10 мкл).
<a id="p100341"></a>Для получения 8 точек на градуировочной кривой необходимо получить хроматограммы всех восьми градуировочных растворов, объем вкола 10 x 10-3 см3 (10 мкл).
<a id="p100342"></a>Проводят 2 параллельных измерения серии градуировочных образцов (в начале и в конце последовательности) и по 2 параллельных измерения анализируемых проб.
<a id="p100343"></a>Образцы, дающие большие пики, чем градуировочный раствор 8, разбавляют подвижной фазой (не более чем в 20 раз).

##### <a id="p100344"></a>11.3.1 Построение градуировочных графиков.

<a id="p100345"></a>В соответствии с данными, полученными при измерении градуировочных растворов, создают калибровочную таблицу, содержащую наименование, время удерживания, концентрацию и площадь хроматографического пика для каждого токсина. Определение площади аналитов выполняют в автоматическом режиме системой обработки данных хроматографа. На основании калибровочной таблицы вручную или в автоматическом режиме строят градуировочный график зависимости аналитических сигналов (площади хроматографического пика, соответствующего количественному переходу материнский - дочерний ион) двух параллельных измерений серии градуировочных образцов от содержания аналита в растворе.
<a id="p100346"></a>Оценивают линейность и воспроизводимость результатов калибровки. При необходимости удаляют единичные выпадающие результаты. Коэффициент линейной корреляции полученной градуировочной зависимости должен быть не менее 0,97, а полученные результаты измерений не должны отличаться от действительного значения концентрации определяемых веществ в градуировочном растворе более чем на 15%, относительное стандартное отклонение времени удерживания аналитов - не более чем на 5%. При невыполнении этого условия выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их. В случае невыполнения указанного критерия стабильности градуировочной характеристики проводят новую градуировку.
<a id="p100347"></a>Проведение градуировки обязательно выполнять при каждом измерении.

##### <a id="p100348"></a>11.3.2 Контроль аналитической системы.

<a id="p100349"></a>Контроль стабильности результатов измерений (повторяемости, промежуточной прецизионности и погрешности) проводят в соответствии с порядком, установленным в лаборатории, по ГОСТ ИСО 5725-6 (п. 6.2).
<a id="p100350"></a>Контроль аналитической системы осуществляется при условиях, указанных в [п. 9](#p100146), перед началом проведения измерений, а также при смене хроматографической колонки, чистке блоков аналитического прибора и т.д.


#### <a id="p100351"></a>11.4 Обработка результатов анализа



##### <a id="p100352"></a>11.4.1 Расчет содержания токсина в пробе.

<a id="p100353"></a>Массовую долю токсина T-2 (HT-2), мг/кг, вычисляют по формуле:

<a id="p100354"></a> $X = \frac{Cx \cdot V\text{р} \cdot V\text{э}}{V\text{а} \cdot M \cdot 1000} = 0,0015 \cdot Cx$ , где (1)

<a id="p100355"></a>Cx - объемная концентрация аналита, нг/см3;
<a id="p100356"></a>Vр - объем раствора для экстракции; в данном случае 100 см3;
<a id="p100357"></a>Vэ - объем элюата; в данном случае 1,5 см3;
<a id="p100358"></a>Vа - аликвота неразбавленного экстракта, нанесенного на иммуноаффинную колонку; в данном случае 5 см3;
<a id="p100359"></a>M - масса анализируемой пробы; в данном случае 20 г;
<a id="p100360"></a>1000 - коэффициент, введенный для пересчета массовой доли токсина, рассчитанной в единицах нг/г (что эквивалентно мкг/кг) в мг/кг. За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных измерений, если удовлетворяются условия повторяемости.

##### <a id="p100361"></a>11.4.2 Проверка приемлемости результатов параллельных определений.

<a id="p100362"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости [(2)](#p100363):

<a id="p100363"></a> $\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq r$ , где (2)

<a id="p100364"></a>X1, X2 - результаты параллельных определений, мг/кг;
<a id="p100365"></a>r - значение предела повторяемости [(табл. 1)](#p100030), при этом $r = 2,8 \cdot \sigma_{r}$ .
<a id="p100366"></a>При невыполнении [условия (2)](#p100363) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


## <a id="p100367"></a>XII. Оформление результатов



#### <a id="p100368"></a>12.1 Результат анализа представляют в виде:


<a id="p100369"></a> $(\overline{X} \pm \Delta)$ , мг/кг, при вероятности P = 0,95, где

<a id="p100370"></a> $\overline{X}$ - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг,
<a id="p100371"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

<a id="p100372"></a> $\Delta = \frac{\delta X}{100}$ ,

<a id="p100373"></a> $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100030)), %.
<a id="p100374"></a>Если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
- <a id="p100375"></a>содержание токсина HT-2 в пробе - менее 0,0075 мг/кг;
<a id="p100376"></a>Примечание: 0,0075 мг/кг - предел количественного определения токсина HT-2.

- <a id="p100377"></a>содержание токсина T-2 в пробе - менее 0,0015 мг/кг.
<a id="p100378"></a>Примечание: 0,0015 мг/кг - предел количественного определения токсина T-2.


## <a id="p100379"></a>XIII. Контроль качества результатов измерений


<a id="p100380"></a>Контроль качества результатов измерений в лаборатории при реализации методики осуществляют по [ГОСТ Р ИСО 5725-6](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002), используя контроль стабильности среднеквадратического (стандартного) отклонения промежуточной прецизионности и показателя правильности.



<a id="p100381"></a>

---