---
title: "\"МУК 4.1.3515-17. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств ацетамиприда в зерне гороха, капусте, моркови и луке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.3515-17"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-3515-17"
---

## "МУК 4.1.3515-17. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств ацетамиприда в зерне гороха, капусте, моркови и луке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.3515-17. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств ацетамиприда в зерне гороха, капусте, моркови и луке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 29.12.2017)


<a id="p100001"></a>Утверждаю
Руководитель Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека,
Главный государственный санитарный врач
Российской Федерации
**А.Ю.ПОПОВА**
29 декабря 2017 года


#### <a id="p100002"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ АЦЕТАМИПРИДА**
**В ЗЕРНЕ ГОРОХА, КАПУСТЕ, МОРКОВИ И ЛУКЕ**
**МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ**
**ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100004"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.3515-17**

1. <a id="p100005"></a>Разработаны сотрудниками ФГБНУ "Всероссийский НИИ защиты растений" (И.А. Цибульская, Т.Д. Черменская) и ООО "Инновационный центр защиты растений" (Е.Ю. Алексеев).
2. <a id="p100006"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 24 ноября 2017 г. N 1).
3. <a id="p100007"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 29 декабря 2017 г.
4. <a id="p100008"></a>Введены впервые.

<a id="p100009"></a>Свидетельство об аттестации методики измерений N 88-16207-036-RA.RU.310657-2017.
<a id="p100010"></a>Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации ацетамиприда в зерне гороха, капусте, моркови и луке в диапазоне концентраций 0,025 - 0,25 мг/кг.
<a id="p100011"></a>Методические указания носят рекомендательный характер.
<a id="p100012"></a>Ацетамиприд
<a id="p100013"></a>(E)-N<sub>1</sub>-[(<sub>6</sub>-хлор-3-пиридил)метил]-N2-циано-N1-метилацетамидин (IUPAC).
<a id="p100014"></a>Структурная формула:

<a id="p100015"></a> ![рис. 1](https://i.bukva.ai/TCdQeLxh/img_0.png) 

<a id="p100016"></a>Молекулярная масса: 222,7.
<a id="p100017"></a>Брутто формула: C10H11ClN4.
<a id="p100018"></a>Химически чистое вещество представляет собой бесцветные кристаллы.
<a id="p100019"></a>Температура плавления: 98,9 °C. Давление пара: < 1 x 10-3 МРа (25 °C).
<a id="p100020"></a>Коэффициент распределения в системе н-октанол-вода: Kow log P = 0,80 (25 °C).
<a id="p100021"></a>Растворимость в воде 4 250 мг/дм3 при 25 °C. Растворимость в органических растворителях: хорошо растворим в ацетоне, метаноле, этаноле, дихлорметане, хлороформе, ацетонитриле и тетрагидрофуране. Стабилен в буферных при pH 4, 5, 7. Медленно разлагается при pH 9 и 45 °C. Устойчив к воздействию света. Слабое основание, pKa 0,7.
<a id="p100022"></a>Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность LD50 146 - 217 мг/кг (крысы). При подкожном введении LD50 для крыс > 2 000 мг/кг. Ингаляционная токсичность LC50 > 0,29 мг на 1 дм3 воздуха (крысы). Практически не раздражает кожу и слизистую глаз у кроликов.
<a id="p100023"></a>Область применения. Системный инсектицид - агонист никотиновых ацетилхолиновых рецепторов, влияющий на синапсы центральной нервной системы насекомых.
<a id="p100024"></a>Используется для подавления развития тлей, трипсов и чешуекрылых посредством обработки почвы и листьев растений на широком спектре овощных и плодовых культур при нормах расхода 75 - 700 г/га.
<a id="p100025"></a>Гигиенические нормативы для ацетамиприда в России: МДУ (мг/кг) - зерно хлебных злаков, картофель - 0,5; рапс (зерно, масло) - 0,1; огурцы, томаты - 0,3; плодовые семечковые - 0,8*; сахарная свекла - 0,1; ВМДУ плодовые семечковые - 0,8*.

1. <a id="p100026"></a>Погрешность измерений

<a id="p100027"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1, для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100028"></a>Таблица 1

<a id="p100029"></a>Метрологические параметры


<table>
<colgroup><col width="13%"><col width="15%"><col width="12%"><col width="13%"><col width="13%"><col width="15%"><col width="19%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100030"></a>Анализируемый объект</td><td><a id="p100031"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td><a id="p100032"></a>Показатель точности <a href="#p100065">&lt;*&gt;</a> (границы относительной погрешности (P = 0,95), $\pm \delta$ , %</td><td><a id="p100033"></a>Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), $\sigma_{r}$ , %</td><td><a id="p100034"></a>Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадратическое отклонение воспроизводимости), $\sigma_{R}$ , %</td><td><a id="p100035"></a>Предел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных определений), r, %</td><td><a id="p100036"></a>Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученных в разных лабораториях), R, % (P = 0,95)</td></tr>
<tr><td><a id="p100037"></a>Зерно гороха</td><td><a id="p100038"></a>0,025 - 0,25</td><td><a id="p100039"></a>25</td><td><a id="p100040"></a>10</td><td><a id="p100041"></a>12,5</td><td><a id="p100042"></a>28</td><td><a id="p100043"></a>36</td></tr>
<tr><td><a id="p100044"></a>Капуста</td><td><a id="p100045"></a>0,025 - 0,25</td><td><a id="p100046"></a>25</td><td><a id="p100047"></a>10</td><td><a id="p100048"></a>12,5</td><td><a id="p100049"></a>28</td><td><a id="p100050"></a>36</td></tr>
<tr><td><a id="p100051"></a>Морковь</td><td><a id="p100052"></a>0,025 - 0,25</td><td><a id="p100053"></a>25</td><td><a id="p100054"></a>10</td><td><a id="p100055"></a>12,5</td><td><a id="p100056"></a>28</td><td><a id="p100057"></a>36</td></tr>
<tr><td><a id="p100058"></a>Лук-репка</td><td><a id="p100059"></a>0,025 - 0,25</td><td><a id="p100060"></a>25</td><td><a id="p100061"></a>10</td><td><a id="p100062"></a>12,5</td><td><a id="p100063"></a>28</td><td><a id="p100064"></a>36</td></tr>
<tr><td colspan="7"><a id="p100065"></a>&lt;*&gt; Соответствует расширенной неопределенности Uотн. (в относительных единицах) при коэффициенте охвата k = 2.</td></tr>
</table>


<a id="p100066"></a>Таблица 2

<a id="p100067"></a>Полнота извлечения ацетамиприда, стандартное отклонение,
доверительный интервал среднего результата
для n = 20, P = 0,95


| <a id="p100068"></a>Анализируемый объект | <a id="p100069"></a>Предел определения, мг/кг | <a id="p100070"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/дм3) | <a id="p100071"></a>Полнота извлечения, % | <a id="p100072"></a>Стандартное отклонение, S | <a id="p100073"></a>Доверительный интервал среднего результата, +/- % |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100074"></a>Зерно гороха | <a id="p100075"></a>0,025 | <a id="p100076"></a>0,025 - 0,25 | <a id="p100077"></a>85,2 | <a id="p100078"></a>7,70 | <a id="p100079"></a>3,37 |
| <a id="p100080"></a>Капуста | <a id="p100081"></a>0,025 | <a id="p100082"></a>0,025 - 0,25 | <a id="p100083"></a>87,0 | <a id="p100084"></a>5,85 | <a id="p100085"></a>2,56 |
| <a id="p100086"></a>Морковь | <a id="p100087"></a>0,025 | <a id="p100088"></a>0,025 - 0,25 | <a id="p100089"></a>81,5 | <a id="p100090"></a>3,04 | <a id="p100091"></a>1,33 |
| <a id="p100092"></a>Лук | <a id="p100093"></a>0,025 | <a id="p100094"></a>0,025 - 0,25 | <a id="p100095"></a>82,6 | <a id="p100096"></a>4,78 | <a id="p100097"></a>2,09 |


2. <a id="p100098"></a>Метод измерений

<a id="p100099"></a>Метод основан на определении ацетамиприда методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового (УФ) детектора после извлечения из образцов ацетонитрилом в присутствии цитратного буфера, насыщенного сульфатом магния, и обеспечивающего разделение водной и органической фаз; очистке ацетонитрильного экстракта с помощью дисперсионной твердофазной экстракции при одновременном удалении воды безводным сульфатом магния и на патронах для твердофазной экстракции.
<a id="p100100"></a>Идентификация ацетамиприда проводится по времени удерживания, количественное определение - методом абсолютной калибровки.
<a id="p100101"></a>Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования.

3. <a id="p100102"></a>Средства измерений, реактивы, вспомогательные
устройства и материалы


#### <a id="p100103"></a>3.1 Средства измерений



| <a id="p100104"></a>Жидкостный хроматограф с УФ-детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки |  |
| --- | --- |
| <a id="p100105"></a>Весы лабораторные аналитические, наибольший предел взвешивания 150 г, предел допустимой погрешности 5 мг | <a id="p100106"></a>ГОСТ 53228-08 |
| <a id="p100107"></a>Весы лабораторные аналитические, наибольший предел взвешивания 81/210 г, предел допустимой погрешности 0,1/0,3 мг | <a id="p100108"></a>ГОСТ 53228-08 |
| <a id="p100109"></a>Дозаторы пипеточные переменного объема от 10 до 100 мм3 и от 100 до 1 000 мм3 | <a id="p100110"></a>ГОСТ 23932-90 |
| <a id="p100111"></a>Колбы мерные на 100, 500 и 1 000 см3 | <a id="p100112"></a>ГОСТ 23932-90 |
| <a id="p100113"></a>Цилиндры мерные на 50 и 100 см3 | <a id="p100114"></a>ГОСТ 23932-90 |


<a id="p100115"></a>*Примечание.* Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.


#### <a id="p100116"></a>3.2 Реактивы



| <a id="p100117"></a>Ацетонитрил для ВЭЖХ | <a id="p100118"></a>ТУ 2634-002-04715285-12 |
| --- | --- |
| <a id="p100119"></a>Вода для лабораторного анализа (бидистиллированная, деионизованная) | <a id="p100120"></a>[ГОСТ Р 52501-05](https://bukva.ai/docs/gost-r-52501-2005) |
| <a id="p100121"></a>Гексан, чда | <a id="p100122"></a>ТУ 2631-001-54260861-13 |
| <a id="p100123"></a>Кислота ортофосфорная 98%, хч | <a id="p100124"></a>ГОСТ 6552-80 |
| <a id="p100125"></a>Ацетамиприд с содержанием основного вещества 99,9% |  |
| <a id="p100126"></a>Динатрия цитрат сесквигидрат, 99% |  |
| <a id="p100127"></a>Магний сернокислый безводный, 99% |  |
| <a id="p100128"></a>Натрия цитрат двуводный, 99% |  |
| <a id="p100129"></a>Натрий хлористый, чда | <a id="p100130"></a>ГОСТ 4233-77 |
| <a id="p100131"></a>Патроны для твердофазной экстракции, заполненные гидрофильным слабокислотным сорбентом на основе силикагеля, объем 1 мл | <a id="p100132"></a>ТУ 4215-002-0545-931-94 |
| <a id="p100133"></a>Подвижная фаза для ВЭЖХ: смесь ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 20:80 |  |
| <a id="p100134"></a>Смесь первичных и вторичных аминов, N 5982-5753. |  |
| <a id="p100135"></a>Элюент N 1: гексан-этилацетат в соотношении 1:1 по объему |  |
| <a id="p100136"></a>Этилацетат, хч | <a id="p100137"></a>[ГОСТ 22300-76](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76) |


<a id="p100138"></a>*Примечание.* Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.


#### <a id="p100139"></a>3.3 Вспомогательные устройства и материалы



| <a id="p100140"></a>Аналитическая колонка, заполненная сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18, (100 x 2,1) мм, 1,7 мкм |  |
| --- | --- |
| <a id="p100141"></a>Вакуумный манипулятор для работы с патронами для твердофазной экстракции |  |
| <a id="p100142"></a>Воздушный испаритель |  |
| <a id="p100143"></a>Мельница зерновая А11В |  |
| <a id="p100144"></a>Пробирки полипропиленовые центрифужные с крышками объемом 50 и 15 см3 |  |
| <a id="p100145"></a>Устройство перемешивающее (50 - 200 колебаний в минуту) | <a id="p100146"></a>ТУ 4389-007-44330709-11 |
| <a id="p100147"></a>Центрифуга со скоростью вращения 4 000 об./мин |  |


<a id="p100148"></a>*Примечание.* Допускается использование вспомогательных устройств и материалов с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. <a id="p100149"></a>Требования безопасности

<a id="p100150"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.
<a id="p100151"></a>4.2. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией, соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313-03 и ГН 2.2.5.2308-07.
<a id="p100152"></a>Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.
<a id="p100153"></a>4.3. При работе с газами, находящимися в баллонах под давлением до 15 МПа (150 кгс/см2), необходимо соблюдать Федеральные нормы и правила в области промышленной безопасности "Правила промышленной безопасности опасных производственных объектов, на которых используется оборудование, работающее под избыточным давлением" (утв. Приказом Ростехнадзора от 25.03.2014 N 116). Запрещается открывать вентиль баллона, не установив на нем понижающий редуктор.

5. <a id="p100154"></a>Требования к квалификации операторов

<a id="p100155"></a>Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на жидкостном хроматографе, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.

6. <a id="p100156"></a>Условия измерений

<a id="p100157"></a>При выполнении измерений выполняют следующие условия:
- <a id="p100158"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100159"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. <a id="p100160"></a>Подготовка к определению


#### <a id="p100161"></a>7.1 Кондиционирование колонки


<a id="p100162"></a>Перед началом анализа аналитическую колонку кондиционируют в потоке подвижной фазы (0,1 - 0,2 см3/мин) до стабилизации нулевой линии.


#### <a id="p100163"></a>7.2 Кондиционирование патрона для твердофазной экстракции


<a id="p100164"></a>Патрон промывают 2,5 см3 этилацетата, затем 3 см3 элюента N 1.


#### <a id="p100165"></a>7.3 Приготовление растворов


<a id="p100166"></a>7.3.1. 0,005 М раствор ортофосфорной кислоты: (0,5 +/- 0,01) г 98% ортофосфорной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1 дм3, растворяют в деионизированной воде и доводят объем до метки.


#### <a id="p100167"></a>7.4 Приготовление основного и градуировочных растворов


<a id="p100168"></a>7.4.1. Основной раствор ацетамиприда с концентрацией 0,5 мг/см3: точную навеску ацетамиприда (50 +/- 0,5 мг) помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3, растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом.
<a id="p100169"></a>7.4.2. Приготовление градуировочных растворов. Градуировочные растворы с концентрациями ацетамиприда 0,02, 0,05, 0,1, 0,2 и 0,5 мкг/см3 готовят методом последовательного разбавления по объему, используя ацетонитрил.
<a id="p100170"></a>7.4.2.1. Раствор N 1 с концентрацией 1,0 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 100 см3 вносят 0,2 см3 основного раствора и доводят до метки подвижной фазой.
<a id="p100171"></a>7.4.2.2. Раствор N 2 с концентрацией 0,5 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 5,0 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100172"></a>7.4.2.3. Раствор N 3 с концентрацией 0,2 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 2,0 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100173"></a>7.4.2.4. Раствор N 3 с концентрацией 0,1 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 1,0 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100174"></a>7.4.2.5. Раствор N 4 с концентрацией 0,05 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 1,0 см3 раствора N 2 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100175"></a>7.4.2.6. Раствор N 5 с концентрацией 0,02 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 1,0 см3 раствора N 3 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100176"></a>Основной раствор ацетамиприда можно хранить в холодильнике при температуре 0 - 4 °C в течение 6 месяцев, градуировочные растворы - в течение недели.
<a id="p100177"></a>При изучении полноты определения ацетамиприда используют ацетонитрильные растворы веществ, приготовленные из основного раствора методом последовательного разбавления по объему ацетонитрилом.


#### <a id="p100178"></a>7.5 Построение градуировочного графика


<a id="p100179"></a>Для установления градуировочной характеристики (площадь пика - концентрация ацетамиприда в растворе) в хроматограф вводят по 10 мм3 градуировочных растворов (не менее 3 параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4 точек по диапазону измеряемых концентраций). Затем измеряют площади пиков и строят график зависимости среднего значения площади пика от концентрации ацетамиприда в градуировочном растворе.
<a id="p100180"></a>Методом наименьших квадратов рассчитывают градуировочный коэффициент (К) в уравнении линейной регрессии:

<a id="p100181"></a>**C = К·S,**

<a id="p100182"></a>где S - площадь пика градуировочного раствора.
<a id="p100183"></a>Градуировку признают удовлетворительной, если значение коэффициента линейной корреляции оказывается не ниже 0,99.
<a id="p100184"></a>Градуировочную характеристику необходимо проверять при замене реактивов, хроматографической колонки или элементов хроматографической системы, а также при отрицательном результате контроля градуировочного коэффициента.
<a id="p100185"></a>Градуировочную зависимость признают стабильной при выполнении следующего условия:

<a id="p100186"></a> $\frac{|C - C_{\text{К}}|}{C} \cdot 100 \leq \lambda_{\text{контр}.},$ 

<a id="p100187"></a>где C - аттестованное значение массовой концентрации ацетамиприда в градуировочном растворе;
<a id="p100188"></a>CК - результат контрольного измерения массовой концентрации ацетамиприда в градуировочном растворе;
<a id="p100189"></a> $\lambda_{\text{контр}.}$ - норматив контроля градуировочного коэффициента, %. ( $\lambda_{\text{контр}.} = 10\%$ при P = 0,95).


#### <a id="p100190"></a>7.6 Проверка хроматографического поведения ацетамиприда

на патроне для твердофазной экстракции

<a id="p100191"></a>В круглодонную колбу емкостью 10 см3 отбирают 1 см3 стандартного раствора ацетамиприда с концентрацией 0,5 мкг/см3. Отдувают растворитель током воздуха. Остаток растворяют в 1 см3 элюента N 1 и переносят на подготовленный патрон. Промывают патрон 3 см3 элюента N 1, элюат отбрасывают. Затем элюируют ацетамиприд 10 см3 этилацетата со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Отбирают фракции по 2 см3, упаривают досуха, растворяют в 1 см3 подвижной фазы и анализируют по [п. 9.3](#p100200).
<a id="p100192"></a>Фракции, содержащие ацетамиприд, объединяют и вновь анализируют. Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с патрона и необходимый для очистки объем элюата.

8. <a id="p100193"></a>Отбор проб и хранение

<a id="p100194"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79). Отбор проб зерна гороха проводят в соответствии с [ГОСТ 6201-68](https://bukva.ai/docs/gost-6201-68) "Горох шлифованный. Технические условия". Пробы гороха хранят в бумажной или тканевой упаковке при комнатной температуре. Пробы капусты отбирают в соответствии с [ГОСТ 1724-85](https://bukva.ai/docs/gost-1724-85) "Капуста белокочанная свежая, заготовляемая и поставляемая. Технические условия (с Изменениями N 1 - 4)"; моркови - в соответствии с [ГОСТ 1721-85](https://bukva.ai/docs/gost-1721-85) "Морковь столовая свежая, заготовляемая и поставляемая. Технические условия"; лука - в соответствии с [ГОСТ 1723-86](https://bukva.ai/docs/gost-1723-86) "Лук репчатый свежий заготовляемый и поставляемый. Технические условия". Пробы капусты, моркови и лука хранят до анализа в герметичной таре в морозильной камере при температуре не выше -18 °C.

9. <a id="p100195"></a>Проведение определения


#### <a id="p100196"></a>9.1 Определение ацетамиприда в зерне гороха,

в капусте, моркови, луке

<a id="p100197"></a>Навеску измельченной матрицы 10 г помещают в полипропиленовую центрифужную пробирку вместимостью 50 см3, последовательно добавляют 10 см3 ацетонитрила, 4 г безводного сульфата магния, 1 г хлористого натрия, 1 г цитрата натрия двуводного и 0,5 г динатрия цитрата сесквигидрата. В случае зерна гороха, добавляют 10 мл воды. Пробирку плотно закрывают и помещают в перемешивающее устройство на 10 мин, затем центрифугируют в течение 10 мин при скорости 4 000 об./мин. От верхнего ацетонитрильного слоя отбирают 5 см3, переносят в центрифужную пробирку вместимостью 15 см3, содержащую 150 мг смеси первичных и вторичных аминов и 900 мг безводного сульфата магния. Пробирку плотно закрывают и помещают в перемешивающее устройство на 10 мин, затем центрифугируют в течение 10 мин при скорости 4 000 об./мин. От верхнего ацетонитрильного слоя отбирают 1 см3 и упаривают растворитель в токе воздуха при температуре не выше 40 °C. Сухой остаток чистят на патроне для твердофазной экстракции по [п. 9.2](#p100198).


#### <a id="p100198"></a>9.2 Очистка на патроне для твердофазной экстракции


<a id="p100199"></a>Остаток в колбе, полученный при упаривании экстрактов [(п. 9.1)](#p100196), растворяют в 1 см3 элюента N 1 и переносят на подготовленный патрон [(п. 7.2)](#p100163). Промывают патрон 5 см3 элюента N 1. Ацетамиприд элюируют 8 см3 этилацетата. Элюат упаривают досуха в токе воздуха при температуре не выше 40 °C. Сухой остаток растворяют в 1 см3 подвижной фазы и анализируют по [п. 9.3](#p100200).


#### <a id="p100200"></a>9.3 Условия хроматографирования


<a id="p100201"></a>Ультраэффективный жидкостной хроматограф с быстросканирующим УФ-детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки. Аналитическая колонка, заполненная сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18, (100 x 2,1) мм, 1,7 мкм. Температура колонки: (30 +/- 1) °C. Подвижная фаза: смесь ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 20:80. Скорость потока элюента: 0,2 см3/мин. Рабочая длина волны УФ-детектора: 245 нм. Объем вводимой пробы: 10 мм3.

10. <a id="p100202"></a>Обработка результатов анализа

<a id="p100203"></a>Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки. Содержание ацетамиприда в пробе (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

<a id="p100204"></a> $X = \frac{S_{\text{х}} \cdot K \cdot V}{P} \cdot \frac{100}{f} ,$ 

<a id="p100205"></a>где f - полнота извлечения ацетамиприда, приведенная в [табл. 2](#p100067), %;
<a id="p100206"></a>Sх - площадь пика ацетамиприда на хроматограмме испытуемого образца, (AU);
<a id="p100207"></a>K - градуировочный коэффициент, найденный на стадии построения соответствующей градуировочной зависимости;
<a id="p100208"></a>V - объем экстракта первичный, см3, равен 10 см3;
<a id="p100209"></a>P - навеска анализируемого образца, г.
<a id="p100210"></a>Содержание остаточных количеств ацетамиприда в образце вычисляют как среднее из двух параллельных определений.
<a id="p100211"></a>Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор ацетамиприда с концентрацией 0,5 мкг/см3, разбавляют подвижной фазой.

11. <a id="p100212"></a>Проверка приемлемости результатов параллельных
определений

<a id="p100213"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости:

<a id="p100214"></a> $\frac{2·|X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq r,$ 

<a id="p100215"></a>где X<sub>1</sub>, X<sub>2</sub> - результаты параллельных определений, мг/кг;
<a id="p100216"></a>r - значение предела повторяемости $(r = 2,8\sigma_{r})$ .
<a id="p100217"></a>При невыполнении условия выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

12. <a id="p100218"></a>Оформление результатов

<a id="p100219"></a>Результат анализа представляют в виде:

<a id="p100220"></a> $(\overline{X} \pm \Delta)$ мг/кг при вероятности P = 0,95,

<a id="p100221"></a>где $\overline{X}$ - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
<a id="p100222"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

<a id="p100223"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot X}{100} ,$ 

<a id="p100224"></a>где $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
<a id="p100225"></a>В случае если содержание компонента меньше нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100226"></a>"содержание вещества в пробе "менее нижней границы определения" (например: менее 0,025 мг/кг*, где * 0,025 мг/кг - предел определения ацетамиприда в капусте).

13. <a id="p100227"></a>Контроль качества результатов измерений

<a id="p100228"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1 - 6-02](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-2-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
<a id="p100229"></a>13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100230"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода "добавок".
<a id="p100231"></a>Величина добавки Cд должна удовлетворять условию:

<a id="p100232"></a> $C_{\text{д}} = \Delta_{\text{л},X} + \Delta_{\text{л},X'},$ 

<a id="p100233"></a>где $\pm \Delta_{\text{л},X}( \pm \Delta_{\text{л},X'})$ - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой, соответственно), мг/кг; при этом:

<a id="p100234"></a> $\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta,$ 

<a id="p100235"></a>где $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

<a id="p100236"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot X}{100} ,$ 

<a id="p100237"></a>где $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
<a id="p100238"></a>Результат контроля процедуры Кк рассчитывают по формуле:

<a id="p100239"></a>Кк = X' - X - Cд,

<a id="p100240"></a>где X', X, Cд - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100212)) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки соответственно, мг/кг.
<a id="p100241"></a>Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

<a id="p100242"></a> $\text{К } = \sqrt{\Delta_{\text{л},X'}^{2} + \Delta_{\text{л},X}^{2})} .$ (1)

<a id="p100243"></a>Проводят сопоставление результата контроля процедуры (Кк) с нормативом контроля (К).
<a id="p100244"></a>Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию

<a id="p100245"></a>|Кк| <= К, (2)

<a id="p100246"></a>процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100247"></a>При невыполнении [условия (2)](#p100245) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении [условия (2)](#p100245) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры к их устранению.
<a id="p100248"></a>13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
<a id="p100249"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

<a id="p100250"></a> $\frac{2·|X_{1} - X_{2}|·100}{(X_{1} + X_{2})} \leq R,$ (3)

<a id="p100251"></a>где X1, X2 - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
<a id="p100252"></a>R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций), %.



<a id="p100253"></a>

---