---
title: "\"МУК 4.1.3504-17. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств флуксапироксада в цитрусовых, плодовых косточковых (нектарины, персики), клубнике, бананах, томатах, баклажанах, салате-латук, луке-порее, сое (бобы, масло), хлопке (семена, масло), рисе, кофе методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.3504-17"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-3504-17"
---

## "МУК 4.1.3504-17. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств флуксапироксада в цитрусовых, плодовых косточковых (нектарины, персики), клубнике, бананах, томатах, баклажанах, салате-латук, луке-порее, сое (бобы, масло), хлопке (семена, масло), рисе, кофе методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.3504-17. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств флуксапироксада в цитрусовых, плодовых косточковых (нектарины, персики), клубнике, бананах, томатах, баклажанах, салате-латук, луке-порее, сое (бобы, масло), хлопке (семена, масло), рисе, кофе методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 29.12.2017)


<a id="p100001"></a>Утверждаю
Руководитель Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека,
Главный государственный санитарный врач
Российской Федерации
**А.Ю.ПОПОВА**
29 декабря 2017 года


#### <a id="p100002"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ФЛУКСАПИРОКСАДА**
**В ЦИТРУСОВЫХ, ПЛОДОВЫХ КОСТОЧКОВЫХ (НЕКТАРИНЫ, ПЕРСИКИ),**
**КЛУБНИКЕ, БАНАНАХ, ТОМАТАХ, БАКЛАЖАНАХ, САЛАТЕ-ЛАТУК,**
**ЛУКЕ-ПОРЕЕ, СОЕ (БОБЫ, МАСЛО), ХЛОПКЕ (СЕМЕНА, МАСЛО), РИСЕ,**
**КОФЕ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100004"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.3504-17**

<a id="p100006"></a>Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в цитрусовых, плодовых косточковых (нектарины, персики), клубнике, бананах, томатах, баклажанах, салате-латук, луке-порее, сое (бобы, масло), хлопке (семена, масло), рисе, кофе массовой концентрации флуксапироксада в диапазонах 0,01 - 0,1 мг/кг (растения) и 0,008 - 0,08 мг/кг (масло).
<a id="p100007"></a>Методические указания носят рекомендательный характер.
<a id="p100008"></a>Флуксапироксад
<a id="p100009"></a>3-Дифторметил-1-метил-N-(3,4,5-трифтор[1,1-бифенил]-2-ил)-1H-пиразол-4-карбоксамид (ИЮПАК).
<a id="p100010"></a>Структурная формула:

<a id="p100011"></a> ![рис. 1](https://i.bukva.ai/jAWmKNwy/img_0.png) 

<a id="p100012"></a>Эмпирическая формула: C<sub>18</sub>H<sub>12</sub>F<sub>5</sub>N<sub>3</sub>O.
<a id="p100013"></a>Молекулярная масса: 381,3.
<a id="p100014"></a>Твердое порошкообразное вещество бежевого цвета без запаха. Температура плавления: 156,8 °C. Давление паров: 2,7 x 10-7 МПа (при 25 °C). Растворимость в органических растворителях при 20 °C (в г/дм3): ацетон - 250; ацетонитрил > 100; дихлорметан > 100; метанол - 53,4; толуол - 20,0; этилацетат - 123,3. Растворимость в воде при 20 °C (в мг/дм3): 3,78. Флуксапироксад гидролитически стабилен при pH 4 - 9.
<a id="p100015"></a>Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность (LD50) для крыс > 2 000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD50) для кроликов > 2 000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LC50) для крыс > 5,1 мг/дм3.
<a id="p100016"></a>Область применения. Флуксапироксад - системный фунгицид, относится к классу пиразолкарбоксамидов, рекомендуется для борьбы с комплексом болезней зерновых культур.


## 1. <a id="p100017"></a>Метрологические характеристики


<a id="p100018"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в [табл. 1](#p100020) для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100019"></a>Таблица 1

<a id="p100020"></a>Значения характеристики погрешности, нормативов оперативного
контроля точности, повторяемости, воспроизводимости


| <a id="p100021"></a>Анализируемый объект | <a id="p100022"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг | <a id="p100023"></a>Показатель точности (границы относительной погрешности, P = 0,95), $\pm \delta$ , % | <a id="p100024"></a>Показатель повторяемости (среднеквадратичное отклонение повторяемости), $\sigma_{r}$ , % | <a id="p100025"></a>Показатель воспроизводимости (среднеквадратичное отклонение воспроизводимости), $\sigma_{R}$ , % | <a id="p100026"></a>Предел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных определений), r, % | <a id="p100027"></a>Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученных в разных лабораториях), R, %, (P = 0,95) |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100028"></a>Цитрусовые (лимон) | <a id="p100029"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100030"></a>50 | <a id="p100031"></a>9,3 | <a id="p100032"></a>13,0 | <a id="p100033"></a>26 | <a id="p100034"></a>36 |
| <a id="p100035"></a>Плодовые косточковые (персик) | <a id="p100036"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100037"></a>50 | <a id="p100038"></a>7,1 | <a id="p100039"></a>9,9 | <a id="p100040"></a>20 | <a id="p100041"></a>28 |
| <a id="p100042"></a>Клубника | <a id="p100043"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100044"></a>50 | <a id="p100045"></a>3,1 | <a id="p100046"></a>4,4 | <a id="p100047"></a>9 | <a id="p100048"></a>12 |
| <a id="p100049"></a>Бананы | <a id="p100050"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100051"></a>50 | <a id="p100052"></a>9,5 | <a id="p100053"></a>13,3 | <a id="p100054"></a>27 | <a id="p100055"></a>37 |
| <a id="p100056"></a>Томаты | <a id="p100057"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100058"></a>50 | <a id="p100059"></a>11,2 | <a id="p100060"></a>15,7 | <a id="p100061"></a>31 | <a id="p100062"></a>44 |
| <a id="p100063"></a>Баклажаны | <a id="p100064"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100065"></a>50 | <a id="p100066"></a>9,9 | <a id="p100067"></a>13,8 | <a id="p100068"></a>28 | <a id="p100069"></a>39 |
| <a id="p100070"></a>Салат-латук | <a id="p100071"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100072"></a>50 | <a id="p100073"></a>9,5 | <a id="p100074"></a>13,3 | <a id="p100075"></a>27 | <a id="p100076"></a>37 |
| <a id="p100077"></a>Лук-порей | <a id="p100078"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100079"></a>50 | <a id="p100080"></a>6,5 | <a id="p100081"></a>9,1 | <a id="p100082"></a>18 | <a id="p100083"></a>25 |
| <a id="p100084"></a>Соя (семена) | <a id="p100085"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100086"></a>50 | <a id="p100087"></a>7,5 | <a id="p100088"></a>10,5 | <a id="p100089"></a>21 | <a id="p100090"></a>29 |
| <a id="p100091"></a>Хлопок (семена) | <a id="p100092"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100093"></a>50 | <a id="p100094"></a>7,9 | <a id="p100095"></a>11,0 | <a id="p100096"></a>22 | <a id="p100097"></a>31 |
| <a id="p100098"></a>Рис | <a id="p100099"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100100"></a>50 | <a id="p100101"></a>9,1 | <a id="p100102"></a>12,8 | <a id="p100103"></a>26 | <a id="p100104"></a>36 |
| <a id="p100105"></a>Кофе | <a id="p100106"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100107"></a>50 | <a id="p100108"></a>9,2 | <a id="p100109"></a>12,9 | <a id="p100110"></a>26 | <a id="p100111"></a>36 |
| <a id="p100112"></a>Растительное масло (хлопок, соя) | <a id="p100113"></a>0,008 - 0,08 | <a id="p100114"></a>50 | <a id="p100115"></a>7,9 | <a id="p100116"></a>11,0 | <a id="p100117"></a>22 | <a id="p100118"></a>31 |


<a id="p100119"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для всего диапазона измерений (n = 20) приведены в [табл. 2](#p100121).

<a id="p100120"></a>Таблица 2

<a id="p100121"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение,
доверительный интервал среднего результата


<table>
<colgroup><col width="20%"><col width="16%"><col width="18%"><col width="14%"><col width="16%"><col width="16%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100122"></a>Анализируемый объект</td><td colspan="5"><a id="p100123"></a>Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td><a id="p100124"></a>предел обнаружения, мг/кг</td><td><a id="p100125"></a>диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td><a id="p100126"></a>полнота извлечения вещества, %</td><td><a id="p100127"></a>стандартное отклонение, %</td><td><a id="p100128"></a>доверительный интервал среднего результата, +/-, %</td></tr>
<tr><td><a id="p100129"></a>Цитрусовые (лимон)</td><td><a id="p100130"></a>0,01</td><td><a id="p100131"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100132"></a>96,3</td><td><a id="p100133"></a>11,6</td><td><a id="p100134"></a>6,1</td></tr>
<tr><td><a id="p100135"></a>Плодовые косточковые (персик)</td><td><a id="p100136"></a>0,01</td><td><a id="p100137"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100138"></a>106,5</td><td><a id="p100139"></a>13,9</td><td><a id="p100140"></a>7,2</td></tr>
<tr><td><a id="p100141"></a>Клубника</td><td><a id="p100142"></a>0,01</td><td><a id="p100143"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100144"></a>93,5</td><td><a id="p100145"></a>10,4</td><td><a id="p100146"></a>5,4</td></tr>
<tr><td><a id="p100147"></a>Бананы</td><td><a id="p100148"></a>0,01</td><td><a id="p100149"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100150"></a>85,3</td><td><a id="p100151"></a>10,4</td><td><a id="p100152"></a>5,4</td></tr>
<tr><td><a id="p100153"></a>Томаты</td><td><a id="p100154"></a>0,01</td><td><a id="p100155"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100156"></a>95,3</td><td><a id="p100157"></a>13,1</td><td><a id="p100158"></a>6,8</td></tr>
<tr><td><a id="p100159"></a>Баклажаны</td><td><a id="p100160"></a>0,01</td><td><a id="p100161"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100162"></a>104,5</td><td><a id="p100163"></a>16,3</td><td><a id="p100164"></a>8,5</td></tr>
<tr><td><a id="p100165"></a>Салат-латук</td><td><a id="p100166"></a>0,01</td><td><a id="p100167"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100168"></a>91,8</td><td><a id="p100169"></a>11,3</td><td><a id="p100170"></a>5,9</td></tr>
<tr><td><a id="p100171"></a>Лук-порей</td><td><a id="p100172"></a>0,01</td><td><a id="p100173"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100174"></a>104,8</td><td><a id="p100175"></a>10,7</td><td><a id="p100176"></a>5,6</td></tr>
<tr><td><a id="p100177"></a>Соя (семена)</td><td><a id="p100178"></a>0,01</td><td><a id="p100179"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100180"></a>96,2</td><td><a id="p100181"></a>11,6</td><td><a id="p100182"></a>6,0</td></tr>
<tr><td><a id="p100183"></a>Хлопок (семена)</td><td><a id="p100184"></a>0,01</td><td><a id="p100185"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100186"></a>95,0</td><td><a id="p100187"></a>10,5</td><td><a id="p100188"></a>5,5</td></tr>
<tr><td><a id="p100189"></a>Рис</td><td><a id="p100190"></a>0,01</td><td><a id="p100191"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100192"></a>84,7</td><td><a id="p100193"></a>9,5</td><td><a id="p100194"></a>5,0</td></tr>
<tr><td><a id="p100195"></a>Кофе</td><td><a id="p100196"></a>0,01</td><td><a id="p100197"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100198"></a>88,0</td><td><a id="p100199"></a>13,7</td><td><a id="p100200"></a>7,2</td></tr>
<tr><td><a id="p100201"></a>Растительное масло (хлопок, соя)</td><td><a id="p100202"></a>0,008</td><td><a id="p100203"></a>0,008 - 0,08</td><td><a id="p100204"></a>92,3</td><td><a id="p100205"></a>10,4</td><td><a id="p100206"></a>5,4</td></tr>
</table>



## 2. <a id="p100207"></a>Метод измерений


<a id="p100208"></a>Методика основана на определение вещества с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с тройным квадрупольным масс-спектрометрическим детектором.
<a id="p100209"></a>Уровни флуксапироксада в цитрусовых, плодовых косточковых, клубнике, бананах, томатах, баклажанах, салате-латук, луке-порее, сое (семена), хлопке (семена), рисе, кофе определяют после экстракции из анализируемых проб смесью метанол - вода, центрифугирования, очистки переэкстракцией в этилацетат. Флуксапироксад в растительном масле определяют после экстракции образца, растворенного в гексане, ацетонитрилом.
<a id="p100210"></a>Нижний предел измерения флуксапироксада в анализируемом объеме пробы - 0,004 нг.


## 3. <a id="p100211"></a>Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы



#### <a id="p100212"></a>3.1 Средства измерений



| <a id="p100213"></a>Жидкостный хроматограф с тандемным масс-спектрометрическим детектором: тройной квадруполь, снабженный автоматическим пробоотборником и термостатом колонки |  |
| --- | --- |
| <a id="p100214"></a>Барометр-анероид с диапазоном измерения атмосферного давления 5 - 790 мм рт. ст. | <a id="p100215"></a>ТУ 2504-1797-75 |
| <a id="p100216"></a>Весы лабораторные аналитические, наибольший предел взвешивания 110 г, предел допустимой погрешности +/- 0,1 мг | <a id="p100217"></a>ГОСТ Р 53228-08 |
| <a id="p100218"></a>Весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания до 420 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,01 г | <a id="p100219"></a>ГОСТ Р 53228-08 |
| <a id="p100220"></a>Колбы мерные 2-го класса точности 2-100-2 вместимостью 50 и 100 см3 | <a id="p100221"></a>[ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |
| <a id="p100222"></a>Меры массы | <a id="p100223"></a>ГОСТ OIML R 111-1-09 |
| <a id="p100224"></a>Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0; 2,0; 5,0; 10 см3 | <a id="p100225"></a>[ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) |
| <a id="p100226"></a>Термометр лабораторный, пределы измерения -35...+55 °C | <a id="p100227"></a>ТУ 25-2021.003-88 |
| <a id="p100228"></a>Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 25, 50, 100, 250 и 500 см3 | <a id="p100229"></a>[ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |
| <a id="p100230"></a>Гигрометр с диапазоном измерений относительной влажности от 30 до 90% | <a id="p100231"></a>ТУ 25-11-1645-84 |


<a id="p100232"></a>*Примечание.* Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.


#### <a id="p100233"></a>3.2 Реактивы



| <a id="p100234"></a>Флуксапироксад, аналитический стандарт с содержанием основного компонента 99,7% |  |
| --- | --- |
| <a id="p100235"></a>Азот осч, из баллона | <a id="p100236"></a>ГОСТ 9293-74 (ИСО 2435-73) |
| <a id="p100237"></a>Ацетонитрил для хроматографии, хч | <a id="p100238"></a>ТУ 6-09-14.2167-84 |
| <a id="p100239"></a>Вода для лабораторного анализа (бидистиллированная или деионизованная) | <a id="p100240"></a>[ГОСТ Р 52501-05](https://bukva.ai/docs/gost-r-52501-2005) |
| <a id="p100241"></a>н-Гексан (гексан) для хроматографии, хч | <a id="p100242"></a>ТУ 6-09-06-657-84 |
| <a id="p100243"></a>Калий углекислый (карбонат калия, поташ), хч, прокаленный | <a id="p100244"></a>[ГОСТ 4221-76](https://bukva.ai/docs/standart-gost-4221-76) |
| <a id="p100245"></a>Метиловый спирт (метанол), хч | <a id="p100246"></a>[ГОСТ 6995-77](https://bukva.ai/docs/standart-gost-6995-77) |
| <a id="p100247"></a>Муравьиная кислота, 99,7%, чда | <a id="p100248"></a>[ГОСТ 5848-73](https://bukva.ai/docs/gost-5848-73) |
| <a id="p100249"></a>Соляная кислота (хлороводородная), 37%, хч | <a id="p100250"></a>ГОСТ 3118-77 |
| <a id="p100251"></a>Фосфор (V) оксид (фосфорный ангидрид, пентоксид фосфора), хч | <a id="p100252"></a>ТУ 6-09-4173-85 |
| <a id="p100253"></a>Натрий хлористый (хлорид натрия), хч, насыщенный водный раствор | <a id="p100254"></a>ГОСТ 4233-77 |
| <a id="p100255"></a>Этиловый эфир уксусной кислоты (этилацетат), хч | <a id="p100256"></a>[ГОСТ 22300-76](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76) |


<a id="p100257"></a>*Примечание.* Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.


#### <a id="p100258"></a>3.3 Вспомогательные устройства, материалы



| <a id="p100259"></a>Аппарат для встряхивания проб, орбита до 10 мм | <a id="p100260"></a>ТУ 64-1-2851-78 |
| --- | --- |
| <a id="p100261"></a>Баня ультразвуковая с рабочей частотой 35 кГц |  |
| <a id="p100262"></a>Воронка химическая конусная диаметром 40 - 45 мм | <a id="p100263"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100264"></a>Воронка делительная вместимостью 250 см3 | <a id="p100265"></a>ГОСТ 23932-90 |
| <a id="p100266"></a>Груша резиновая | <a id="p100267"></a>ТУ 9398-005-0576-9082-03 |
| <a id="p100268"></a>Колба коническая плоскодонная вместимостью 250 - 300 см3 | <a id="p100269"></a>ГОСТ 23932-90 |
| <a id="p100270"></a>Колба круглодонная вместимостью 50 см3 | <a id="p100271"></a>ГОСТ 23932-90 |
| <a id="p100272"></a>Мельница лабораторная |  |
| <a id="p100273"></a>Мембраны микропористые капроновые, диаметр пор 0,45 мкм | <a id="p100274"></a>ТУ 9471-002-10471723-03 |
| <a id="p100275"></a>Набор для фильтрации растворителей через мембрану |  |
| <a id="p100276"></a>Пробирки градуированные из полипропилена с крышкой объемом 15,0 и 50,0 см3 |  |
| <a id="p100277"></a>Ротационный вакуумный испаритель с мембранным насосом, обеспечивающим вакуум до 10 мбар |  |
| <a id="p100278"></a>Стаканы химические с носиком вместимостью 150 и 2 000 см3 | <a id="p100279"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100280"></a>Установка для перегонки растворителей |  |
| <a id="p100281"></a>Холодильник обратный водяной |  |
| <a id="p100282"></a>Хроматографическая колонка стальная длиной 50 мм, внутренним диаметром 2,1 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18, зернением 1,8 мкм |  |
| <a id="p100283"></a>Центрифуга лабораторная роторная, скорость вращения до 4 000 об./мин с центрифужными стаканами на 100 см3 |  |
| <a id="p100284"></a>Фильтры мембранные полипропиленовые на шприц диаметром 13 мм и размером пор 0,22 мкм |  |
| <a id="p100285"></a>Шприцы медицинские одноразовые с разъемом Льюера вместимостью 5 см3 | <a id="p100286"></a>ГОСТ 22090 |


<a id="p100287"></a>*Примечание.* Допускается использование вспомогательных средств измерений, устройств и материалов с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.


## 4. <a id="p100288"></a>Требования безопасности


<a id="p100289"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.
<a id="p100290"></a>4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-15. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313-03 и ГН 2.2.5.2308-07. Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.
<a id="p100291"></a>4.3. При работе с газами, находящимися в баллонах под давлением до 15 МПа (150 кгс/см2), необходимо соблюдать Федеральные нормы и правила в области промышленной безопасности "Правила промышленной безопасности опасных производственных объектов, на которых используется оборудование, работающее под избыточным давлением" (утв. Приказом Ростехнадзора от 25.03.2014 N 116). Запрещается открывать вентиль баллона, не установив на нем понижающий редуктор.


## 5. <a id="p100292"></a>Требования к оператору


<a id="p100293"></a>Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на жидкостном хроматографе, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.


## 6. <a id="p100294"></a>Условия измерений


<a id="p100295"></a>При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- <a id="p100296"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100297"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


## 7. <a id="p100298"></a>Подготовка к выполнению измерений



#### <a id="p100299"></a>7.1 Очистка органических растворителей


<a id="p100300"></a>Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление растворов, подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, приготовление градуировочных растворов, растворов внесения, установление градуировочной характеристики.


##### <a id="p100301"></a>7.1.1 Очистка ацетонитрила


<a id="p100302"></a>Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на 1 дм3 ацетонитрила 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 часа, после чего перегоняют. Непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 дм3 ацетонитрила 10 г карбоната калия).


##### <a id="p100303"></a>7.1.2 Очистка этилацетата


<a id="p100304"></a>7.1.2.1. Приготовление раствора натрия углекислого с массовой долей 5%. Навеску (25 +/- 0,1) г натрия углекислого помещают в мерную колбу вместимостью 500 см3, растворяют в бидистиллированной воде, доводят водой до метки, перемешивают. Раствор хранят в стеклянной посуде в течение 3 месяцев.
<a id="p100305"></a>7.1.2.2. Очистка растворителя. Этилацетат промывают последовательно 5%-м водным раствором натрия углекислого, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над прокаленным карбонатом калия и перегоняют или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 30. Растворитель хранят в стеклянной посуде в течение 1 месяца.


##### <a id="p100306"></a>7.1.3 Очистка н-гексана


<a id="p100307"></a>Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты, до тех пор, пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над прокаленным карбонатом калия.


#### <a id="p100308"></a>7.2 Приготовление смеси метанол - вода (1:1, по объему)


<a id="p100309"></a>В мерную колбу вместимостью 1 000 см3 помещают 500 см3 метанола, доводят до метки бидистиллированной водой, перемешивают.
<a id="p100310"></a>Раствор хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.


#### <a id="p100311"></a>7.3 Приготовление раствора соляной кислоты с концентрацией

2 моль/дм3(2 М раствор)

<a id="p100312"></a>В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 50 см3 бидистиллированной воды, осторожно приливают 16,6 см3 37%-й соляной кислоты, доводят до метки водой, перемешивают.


#### <a id="p100313"></a>7.4 Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ


<a id="p100314"></a>Компонент А: в мерную колбу вместимостью 1 000 см3 помещают 500 см3 ацетонитрила, вносят 1,0 см3 муравьиной кислоты, доводят до метки ацетонитрилом, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр, дегазируют.
<a id="p100315"></a>Компонент Б: в мерную колбу вместимостью 1 000 см3 помещают 500 см3 деионизированной воды, вносят 1,0 см3 муравьиной кислоты, доводят до метки деионизированной водой, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр, дегазируют.
<a id="p100316"></a>Каждый компонент подвижной фазы хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.


#### <a id="p100317"></a>7.5 Кондиционирование хроматографической колонки для ВЭЖХ


<a id="p100318"></a>Промывают колонку подвижной фазой (смесь компонентов А и Б, приготовленных по [п. 7.4](#p100313), в соотношении 1:1) при скорости подачи растворителя 0,4 см3/мин до установления стабильной базовой линии.


#### <a id="p100319"></a>7.6 Приготовление градуировочных растворов и растворов

внесения

<a id="p100320"></a>7.6.1. Исходный раствор флуксапироксада для градуировки (концентрация 100 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают (0,0100 +/- 0,0001) г флуксапироксада, добавляют 50 - 70 см3 метанола, перемешивают, доводят метанолом до метки, вновь перемешивают. Раствор хранят в холодильнике при температуре (4 +/- 2) °C в течение 6 месяцев.
<a id="p100321"></a>Растворы N 1 - 8 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора для градуировки.
<a id="p100322"></a>7.6.2. Раствор N 1 флуксапироксада для градуировки и внесения (концентрация 10 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 10 см3 исходного раствора флуксапироксада [(п. 7.6.1)](#p100320) с концентрацией 100 мкг/см3, разбавляют метанолом до метки, перемешивают. Раствор N 1 хранят в холодильнике при температуре (4 +/- 2) °C в течение 6 месяцев.
<a id="p100323"></a>7.6.3. Раствор N 2 флуксапироксада для градуировки и внесения (концентрация 0,1 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают по 1,0 см3 градуировочного растворов N 1 с концентрацией флуксапироксада 10,0 мкг/см3 [(п. 7.6.2)](#p100322), доводят до метки метанолом, тщательно перемешивают, получают рабочий раствор N 2 с концентрацией флуксапироксада 0,1 мкг/см3. Раствор N 2 хранят в холодильнике при температуре (4 +/- 2) °C) в течение одного месяца.
<a id="p100324"></a>7.6.4. Рабочие растворы N 3 - 7 флуксапироксада для градуировки (концентрация 0,8 - 10 нг/см3). В 5 мерных колб вместимостью 100 см3 помещают 10,0; 5,0; 2,5; 1,0 и 0,8 см3 градуировочного раствора N 2 с концентрацией флуксапироксада 0,1 мкг/см3 [(п. 7.6.3)](#p100323), доводят до метки смесью растворителей, приготовленной по [п. 7.2](#p100308), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 3 - 7 с концентрацией флуксапироксада 10,0; 5,0; 2,5; 1,0 и 0,8 нг/см3 соответственно. Растворы хранят в холодильнике при температуре (4 +/- 2) °C в течение одной недели.


#### <a id="p100325"></a>7.7 Установление градуировочной характеристики


<a id="p100326"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (I) от концентрации флуксапироксада в растворе (нг/см3), устанавливают методом абсолютной калибровки по 5 растворам для градуировки.
<a id="p100327"></a>В инжектор хроматографа вводят по 5 мм3 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 9.2](#p100342). Осуществляют не менее 5 параллельных измерений.


## 8. <a id="p100328"></a>Отбор и хранение проб


<a id="p100329"></a>Отбор проб осуществляют в соответствии с [ГОСТ Р 53596-09](https://bukva.ai/docs/gost-r-53596-2009) "Плоды цитрусовых культур для употребления в свежем виде. Технические условия"; [ГОСТ Р 54702-11](https://bukva.ai/docs/gost-r-54702-2011) "Персики и нектарины свежие. Технические условия"; [ГОСТ Р 53884-10](https://bukva.ai/docs/gost-r-53884-2010) "Земляника, реализуемая в розничной торговле. Технические условия", [ГОСТ Р 50520-93](https://bukva.ai/docs/gost-r-50520-93) "Земляника. Руководство по хранению в холодильных камерах"; [ГОСТ Р 51603-2000](https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-51603-2000) "Бананы свежие. Технические условия"; [ГОСТ 1725-85](https://bukva.ai/docs/gost-1725-85) "Томаты свежие. Технические условия"; [ГОСТ 13907-86](https://bukva.ai/docs/gost-13907-86) "Баклажаны свежие. Технические условия"; [ГОСТ Р 54703-11](https://bukva.ai/docs/gost-r-54703-2011) "Салат-латук, эндивий кудрявый, эндивий эскариол свежие. Технические условия"; [ГОСТ 31854-12](https://bukva.ai/docs/gost-31854-2012) "Лук-порей свежий, реализуемый в розничной торговле"; [ГОСТ 17109-88](https://bukva.ai/docs/gost-17109-88) "Соя. Требования при заготовках и поставках"; ГОСТ 16298-81 "Хлопок-сырец машинного сбора. Технические условия"; [ГОСТ 6292-93](https://bukva.ai/docs/gost-6292-93) "Крупа рисовая. Технические условия"; [ГОСТ ISO 4072-15](https://bukva.ai/docs/gost-iso-4072-2015) "Кофе зеленый в мешках. Отбор проб", а также в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79).
<a id="p100330"></a>Растительные пробы хранят при температуре (4 +/- 2) °C не более недели. Для длительного хранения образцы замораживают и хранят при температуре не выше -18 °C.
<a id="p100331"></a>Перед анализом образцы измельчают.


## 9. <a id="p100332"></a>Выполнение определения



#### <a id="p100333"></a>9.1 Экстракция



##### <a id="p100334"></a>9.1.1 Растительные образцы


<a id="p100335"></a>Образец массой 5 г помещают в плоскодонную колбу вместимостью 250 - 300 см3, добавляют 100 см3 смеси метанол - вода (подготовленной по [п. 7.2](#p100308)), помещают на аппарат для встряхивания на 15 минут.
<a id="p100336"></a>Пробам дают отстояться. Затем аликвоту экстракта объемом 10 см3 переносят в центрифужную пробирку с пробкой на 15 см3, центрифугируют 5 мин при 4 000 об./мин. Переносят 2 см3 супернатанта в центрифужную пробирку с пробкой на 50 см3, добавляют 200 мм3 2 М соляной кислоты (подготовленной по [п. 7.3](#p100311)), 8 см3 насыщенного раствора хлорида натрия и 10 см3 этилацетата, интенсивно встряхивают в течение 1 мин, затем центрифугируют 2 мин при 4 000 об./мин.
<a id="p100337"></a>Переносят 8 см3 верхней фазы в круглодонную колбу на 50 см3 и упаривают досуха при 40 °C. Остаток растворяют в 1 мл смеси метанол - вода (подготовленной по [п. 7.2](#p100308)) при помощи ультразвуковой бани, фильтруют и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 9.2](#p100342).


##### <a id="p100338"></a>9.1.2 Растительное масло


<a id="p100339"></a>Образец масла массой 5 г помещают в делительную воронку вместимостью 250 см3, добавляют 50 см3 гексана и 50 см3 ацетонитрила, интенсивно встряхивают в течение 1 мин, затем сливают ацетонитрильную фазу (нижняя) в новую делительную воронку.
<a id="p100340"></a>Промывают ацетонитрильную фазу 50 см3 гексана, сливают ацетонитрильную фазу (нижняя) в мерную колбу на 100 см3 и доводят до метки ацетонитрилом.
<a id="p100341"></a>Переносят аликвоту 2 см3 в круглодонную колбу на 50 см3 и упаривают досуха при 40 °C. Остаток растворяют в 1 мл смеси метанол - вода (подготовленной по [п. 7.2](#p100308)) при помощи ультразвуковой бани, фильтруют и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 9.2](#p100342).


#### <a id="p100342"></a>9.2 Условия хроматографирования


<a id="p100343"></a>Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:
<a id="p100344"></a>Жидкостный хроматограф с тандемным масс-спектрометрическим детектором (тройной квадруполь с источником ионизации, оснащенным соосной подачей горячего азота для эффективной десольвации ионов).
<a id="p100345"></a>Источник ионизации: электростатическое распыление.
<a id="p100346"></a>Режим работы: регистрация дочерних положительных ионов после разрушения материнских ионов (регистрация "перехода").
<a id="p100347"></a>Материнский ион (масса/заряд): 382,1.
<a id="p100348"></a>Дочерние ионы (масса/заряд): 362,2 (количественный расчет), 342,2
<a id="p100349"></a>Напряжение на фрагментаторе, В: 119.
<a id="p100350"></a>Энергия разрушения (соударения), В: 9 $(382,1 \rightarrow 362,2)$ , 17 $(382,1 \rightarrow 342,2)$ .
<a id="p100351"></a>Скорость сканирования: 200 мс.
<a id="p100352"></a>Давление на распылителе: 35 psi.
<a id="p100353"></a>Скорость осушающего газа 1 (азот): 10 дм3/мин.
<a id="p100354"></a>Температура газа 1: 250 °C.
<a id="p100355"></a>Скорость газа 2 (азот): 11 дм3/мин.
<a id="p100356"></a>Температура газа 2: 340 °C.
<a id="p100357"></a>Температура квадруполей (1 и 3): 100 °C.
<a id="p100358"></a>Хроматографическая колонка стальная длиной 50 мм, внутренним диаметром 2,1 мм, заполненная обращенно-фазовым сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18, зернением 1,8 мкм.
<a id="p100359"></a>Температура колонки: 40 °C.
<a id="p100360"></a>Скорость потока элюента: 0,4 см3/мин.
<a id="p100361"></a>Объем вводимой пробы: 5 мм3.
<a id="p100362"></a>Подвижная фаза: 0,1%-й раствор муравьиной кислоты в ацетонитриле - 0,1%-й раствор муравьиной кислоты в воде (50:50, изократический режим элюирования).
<a id="p100363"></a>Линейный диапазон детектирования: 0,004 - 0,05 нг.
<a id="p100364"></a>Образцы, дающие пики большие, чем градуировочный раствор с концентрацией 10,0 нг/см3, разбавляют подвижной фазой (не более чем в 50 раз).


## 10. <a id="p100365"></a>Обработка результатов анализа


<a id="p100366"></a>Содержание флуксапироксада в растительных пробах и пробах масла (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:

<a id="p100367"></a> $X = \frac{A \cdot V \cdot K}{1000 \cdot m}$ , где

<a id="p100368"></a>A - концентрация флуксапироксада, найденная по градуировочному графику в соответствии с величинами площадей хроматографических пиков, нг/см3;
<a id="p100369"></a>V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3;
<a id="p100370"></a>m - масса анализируемого образца, г;
<a id="p100371"></a>C - коэффициент, учитывающий объем экстракта, взятого для анализа, C = 62,5 (растения), C = 50 (масло).


## 11. <a id="p100372"></a>Проверка приемлемости результатов параллельных определений


<a id="p100373"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости:

<a id="p100374"></a> $\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq r$ , где (1)

<a id="p100375"></a>X<sub>1</sub>, X<sub>2</sub> - результаты параллельных определений, мг/кг;
<a id="p100376"></a>r - значение предела повторяемости [(табл. 1)](#p100020), при этом $r = 2,8 \cdot \sigma_{r}$ .
<a id="p100377"></a>При невыполнении [условия (1)](#p100374) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


## 12. <a id="p100378"></a>Оформление результатов


<a id="p100379"></a>Результат анализа представляют в виде:

<a id="p100380"></a> $(\overline{X} \pm \Delta)$ , мг/кг при вероятности P = 0,95, где

<a id="p100381"></a> $\overline{X}$ - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
<a id="p100382"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

<a id="p100383"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot X}{100}$ , где

<a id="p100384"></a> $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100020)), %.
<a id="p100385"></a>Если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100386"></a>"содержание флуксапироксада в растительных пробах - менее 0,01 мг/кг [<*>](#p100388); в пробах масла - менее 0,008 мг/кг [<*>](#p100388)".

<a id="p100387"></a>

---

<a id="p100388"></a><*> 0,01 мг/кг; 0,008 мг/кг - пределы обнаружения флуксапироксада в растительных пробах и пробах масла соответственно.


## 13. <a id="p100389"></a>Контроль качества результатов измерений


<a id="p100390"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-02](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-2-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

#### <a id="p100391"></a>13.1 Контроль стабильности градуировочной характеристики.

<a id="p100392"></a>Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.
<a id="p100393"></a>При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее двух образцов концентраций для градуировки, содержание флуксапироксада в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,8 до 10,0 нг/см3.
<a id="p100394"></a>Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:

<a id="p100395"></a> $A = \frac{(X - C) \cdot 100}{C} \leq B$ , где

<a id="p100396"></a>X - концентрация флуксапироксада в пробе при контрольном измерении, нг/см3;
<a id="p100397"></a>C - известная концентрация градуировочного раствора флуксапироксада, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, нг/см3;
<a id="p100398"></a>B - норматив контроля погрешности градуировочной характеристики, % (равен 10% при P = 0,95).
<a id="p100399"></a>Если величина расхождения (A) превышает 10%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов флуксапироксада, предусмотренных МИ. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики устанавливают ее заново согласно [п. 7.7](#p100325).
<a id="p100400"></a>Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100401"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом "добавок".
<a id="p100402"></a>Величина добавки Cд должна удовлетворять условию:

<a id="p100403"></a> $\text{С}_{\text{д}} \geq \Delta_{\text{л},X} + \Delta_{\text{л},X\prime}$ , где

<a id="p100404"></a> $\pm \Delta_{\text{л},X}( \pm \Delta_{\text{л},X\prime})$ - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно) мг/кг, при этом:

<a id="p100405"></a> $\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta$ , где

<a id="p100406"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

<a id="p100407"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot X}{100}$ , где

<a id="p100408"></a> $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100020)), %.
<a id="p100409"></a>Результат контроля процедуры Кк рассчитывают по формуле:

<a id="p100410"></a> $\text{К}_{\text{к}} = \overline{X}\prime - \overline{X} - \text{С}_{\text{д}}$ , где

<a id="p100411"></a> $\overline{X}\prime$ , $\overline{X}$ , Cд - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100372)) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки соответственно, мг/кг.
<a id="p100412"></a>Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

<a id="p100413"></a> $\text{К} = \sqrt{\Delta_{\text{л},X\prime}^{2} + \Delta_{\text{л },X}^{2}}$ 

<a id="p100414"></a>Проводят сопоставление результата контроля процедуры (Кк) с нормативом контроля (К).
<a id="p100415"></a>Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию

<a id="p100416"></a>|Кк| <= К, (2)

<a id="p100417"></a>процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100418"></a>При невыполнении [условия (2)](#p100416) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении [условия (2)](#p100416) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
<a id="p100419"></a>13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
<a id="p100420"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):

<a id="p100421"></a> $\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq R$ , где (3)

<a id="p100422"></a>X<sub>1</sub>, X<sub>2</sub> - результаты измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), мг/кг;
<a id="p100423"></a>R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100020)), %.

<a id="p100005"></a>Методические указания разработаны ФБУН "Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана" Роспотребнадзора (В.Н. Ракитский, Н.Е. Федорова, В.В. Баюшева).



<a id="p100424"></a>

---