---
title: "\"МУК 4.1.3414-17. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств пиклорама в кочанах капусты методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.3414-17"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-3414-17"
---

## "МУК 4.1.3414-17. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств пиклорама в кочанах капусты методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.3414-17. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств пиклорама в кочанах капусты методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 14.02.2017)


<a id="p100001"></a>Утверждаю
Руководитель Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека,
Главный государственный санитарный врач
Российской Федерации
**А.Ю.ПОПОВА**
14 февраля 2017 года


#### <a id="p100002"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПИКЛОРАМА В КОЧАНАХ КАПУСТЫ**
**МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОЙ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100004"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.3414-17**

1. <a id="p100005"></a>Разработаны Российским государственным аграрным университетом - МСХА им. К.А. Тимирязева, Учебно-научный консультационный центр "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов" Минсельхоза России (А.В. Довгилевич, В.А. Калинин, Т.С. Калинина, А.В. Калинин, Е.Н. Тестова).
2. <a id="p100006"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 22 декабря 2016 г. N 2).
3. <a id="p100007"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 14 февраля 2017 г.
4. <a id="p100008"></a>Введены впервые.

<a id="p100009"></a>Свидетельство о метрологической аттестации МВИ N РОСС RU.0001.310430/0258.31.03.2016 от 31.03.2016.

<a id="p100010"></a>Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода капиллярной газожидкостной хроматографии для определения уровня остаточных количеств пиклорама в кочанах капусты в диапазоне 0,01 - 0,1 мг/кг.
<a id="p100011"></a>Методические указания носят рекомендательный характер.
<a id="p100012"></a>Пиклорам
<a id="p100013"></a>4-амино-3,5,6-трихлорпиридил-2-карбоновая кислота.
<a id="p100014"></a>Структурная формула:

<a id="p100015"></a> ![рис. 1](https://i.bukva.ai/FonjClDc/img_0.png) 

<a id="p100016"></a>Эмпирическая формула: C6H3Cl3N2O2.
<a id="p100017"></a>Молекулярная масса: 241,5.
<a id="p100018"></a>Агрегатное состояние: порошок.
<a id="p100019"></a>Цвет, запах: бесцветный, со слабым запахом хлора.
<a id="p100020"></a>Давление насыщенного пара: 8,4 x 102 МПа при 25 °C.
<a id="p100021"></a>Коэффициент распределения в системе октанол/вода при 20 °C: Kow lgP = 1,9 (0,1H HCl).
<a id="p100022"></a>Растворимость в воде (мг/дм3, 20 °C): 430.
<a id="p100023"></a>Растворимость в органических растворителях (г/дм3, при 25 °C): ацетон - 19,8; ацетонитрил - 1,6; диэтиловый эфир - 1,2.
<a id="p100024"></a>Пиклорам стабилен в кислотной и щелочной средах с DT50 при pH 5 - 9 (25 °C) в стерильной воде > 30 дней. В водных растворах разрушается под действием солнечной радиации с DT'so 2,6 дней (при 25 °C).
<a id="p100025"></a>Краткая токсикологическая характеристика. Пиклорам относится к мало опасным веществам по острой оральной (ЛД<sub>50</sub> для крыс более 5 000 мг/кг), к чрезвычайно опасным веществам по ингаляционной токсичности (ЛК50 (4 ч) для крыс > 35 мг/м3 воздуха) и к мало опасным веществам по дермальной (ЛД50 для кроликов > 2 000 мг/кг) токсичности. Умеренно раздражает глаза, слабо раздражает слизистые оболочки. Не раздражает кожу.
<a id="p100026"></a>Область применения. Пиклорам - гербицид из группы производных карбоновых кислот системного действия, нарушает ауксиновый обмен, вызывая сильное искривление стеблей и черенков листьев. Применяется для борьбы с двудольными и трудно искореняемыми сорняками в посевах зерновых культур и кукурузы, а также для уничтожения горчака розового и других многолетних сорняков.
<a id="p100027"></a>Предлагается в России для применения в посевах рапса ярового и озимого с нормой расхода 90 г д.в. на 1 га путем опрыскивания посевов в фазе 3 - 4 листьев культуры.
<a id="p100028"></a>В России установлены следующие гигиенические нормативы: ДСД - 0,2 мг/кг массы человека; ПДК в воде водоемов - 0,03 мг/дм3; ПДК в почве - 0,05 мг/кг; ПДК в воздухе рабочей зоны - 10,0 мг/м3; в атмосферном воздухе - 0,03 мг/м3; МДУ в продукции (мг/кг): зерно хлебных злаков, кукуруза (зерно, масло), рапс (зерно, масло) - 0,01; ягоды дикорастущие - 0,5. ВМДУ в капусте - 0,01 мг/кг.


### 1. <a id="p100029"></a>Погрешность измерений


<a id="p100030"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100031"></a>Таблица 1

<a id="p100032"></a>Метрологические параметры для пиклорама


| <a id="p100033"></a>Анализируемый объект | <a id="p100034"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг | <a id="p100035"></a>Показатель точности (граница относительной погрешности) $\pm \delta$ , % P = 0,95 | <a id="p100036"></a>Стандартное отклонение повторяемости, $\sigma_{r}$ , % | <a id="p100037"></a>Предел повторяемости, r, % | <a id="p100038"></a>Предел воспроизводимости, R, % |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100039"></a>Кочаны капусты | <a id="p100040"></a>0,01 - 0,1 вкл. | <a id="p100041"></a>50 | <a id="p100042"></a>6 | <a id="p100043"></a>17 | <a id="p100044"></a>24 |


<a id="p100045"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в табл. 2.

<a id="p100046"></a>Таблица 2

<a id="p100047"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение,
доверительный интервал среднего результата для пиклорама


<table>
<colgroup><col width="20%"><col width="17%"><col width="18%"><col width="14%"><col width="16%"><col width="14%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100048"></a>Анализируемый объект</td><td colspan="5"><a id="p100049"></a>Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td><a id="p100050"></a>предел обнаружения, мг/кг</td><td><a id="p100051"></a>диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td><a id="p100052"></a>полнота извлечения вещества, %</td><td><a id="p100053"></a>стандартное отклонение, S, %</td><td><a id="p100054"></a>доверительный интервал среднего результата, +/-, %</td></tr>
<tr><td><a id="p100055"></a>Кочаны капусты</td><td><a id="p100056"></a>0,01</td><td><a id="p100057"></a>0,01 - 0,10</td><td><a id="p100058"></a>81,05</td><td><a id="p100059"></a>5,50</td><td><a id="p100060"></a>2,09</td></tr>
</table>



### 2. <a id="p100061"></a>Метод измерений


<a id="p100062"></a>Метод основан на определении пиклорама методом капиллярной газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с использованием капиллярной колонки и детектора по захвату электронов после его экстракции подкисленным ацетонитрилом, очистки экстракта перераспределением между двумя несмешивающимися фазами с последующим бутилированием и очисткой пробы на колонках с флоризилом.
<a id="p100063"></a>Идентификация вещества проводится по времени удерживания, количественное определение - методом абсолютной калибровки.
<a id="p100064"></a>В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Избирательность обеспечивается путем подбора капиллярной колонки и условий программирования температуры.
<a id="p100065"></a>Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.


### 3. <a id="p100066"></a>Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы



#### <a id="p100067"></a>3.1 Средства измерений



| <a id="p100068"></a>Весы аналитические класса точности - специальный (I), с наибольшим пределом взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г | <a id="p100069"></a>ГОСТ Р 53228-08 |
| --- | --- |
| <a id="p100070"></a>Весы лабораторные общего назначения класса точности - средний (III) с наибольшим пределом взвешивания до 400 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,5 г | <a id="p100071"></a>ГОСТ Р 53228-08 |
| <a id="p100072"></a>Колбы мерные на 10, 25, 50, 100, 500 и 1 000 см3 | <a id="p100073"></a>[ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |
| <a id="p100074"></a>Микрошприц объемом 10 мм3 со шкалой деления 0,1 мм3 и погрешностью измерения вытесняемого объема +/- 1% |  |
| <a id="p100075"></a>Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 см3 | <a id="p100076"></a>[ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) |
| <a id="p100077"></a>pH-метр/милливольтметр с диапазоном измерения 0 - 14 pH; +/- 1 999 мВ |  |
| <a id="p100078"></a><a id="p100079"></a><a id="p100080"></a>Хроматографическая система, включающая:<br>- хроматограф газовый с электронно-захватным детектором (ЭЗД) с пределом детектирования по Линдану 4 x 10-14 г/см3 и приспособлениями для капиллярной колонки;<br>- компьютерное программное обеспечение, контролирующее работу всего прибора, обеспечивающее сбор и хранение всех хроматограмм в процессе проведения хроматографического анализа, обеспечивающее обработку результатов измерений, вывод и расчет хроматограмм и количественный анализ |  |
| <a id="p100081"></a>Цилиндры мерные на 10, 25 и 50 см3 | <a id="p100082"></a>[ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |


<a id="p100083"></a>*Примечание.* Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.


#### <a id="p100084"></a>3.2 Реактивы



| <a id="p100085"></a>Пиклорам, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 99,9% | <a id="p100086"></a>CAS 1918-02-1 |
| --- | --- |
| <a id="p100087"></a>Азот, осч | <a id="p100088"></a>ГОСТ 9293-74 |
| <a id="p100089"></a>Ацетон, осч | <a id="p100090"></a>ТУ 6-09-3513-86 |
| <a id="p100091"></a>Ацетонитрил, осч, УФ-200 нм | <a id="p100092"></a>ТУ 6-09-2167-84 |
| <a id="p100093"></a>Бутанол, ч | <a id="p100094"></a>[ГОСТ 6006-78](https://bukva.ai/docs/gost-6006-78) |
| <a id="p100095"></a>Вода дистиллированная и (или) бидистиллированная (вода дистиллированная, перегнанная повторно в стеклянной емкости) | <a id="p100096"></a>ГОСТ 6709-72 |
| <a id="p100097"></a>Гелий, очищенный | <a id="p100098"></a>ТУ 51-940-80 |
| <a id="p100099"></a>n-Гексан, хч | <a id="p100100"></a>ТУ 6-09-3818-89 |
| <a id="p100101"></a>Калий марганцовокислый, чда | <a id="p100102"></a>ГОСТ 20490-75 |
| <a id="p100103"></a>Кальций хлористый, ч | <a id="p100104"></a>ТУ 6-09-4711-81 |
| <a id="p100105"></a>Кислота серная, хч | <a id="p100106"></a>ГОСТ 4204-77 |
| <a id="p100107"></a>Кислота соляная, хч | <a id="p100108"></a>ГОСТ 3118-77 |
| <a id="p100109"></a>Метилен хлористый, хч | <a id="p100110"></a>ТУ 6-09-2662-77 |
| <a id="p100111"></a>Натрий сернокислый, безводный, хч | <a id="p100112"></a>[ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76) |
| <a id="p100113"></a>Натрий хлористый, хч | <a id="p100114"></a>ГОСТ 4233-77 |
| <a id="p100115"></a>Натрий углекислый, кислый, хч | <a id="p100116"></a>[ГОСТ 4201-79](https://bukva.ai/docs/gost-4201-79) |
| <a id="p100117"></a>Флоризил (магния силикат, 99%,) для колоночной хроматографии, зернение 60/100 меш | <a id="p100118"></a>CAS 1343-88-0 |


<a id="p100119"></a>*Примечание.* Допускается использование реактивов с аналогичными или лучшими характеристиками.


#### <a id="p100120"></a>3.3 Вспомогательные устройства и материалы



| <a id="p100121"></a>Банки полипропиленовые с крышками для экстракции вместимостью 250 см3 |  |
| --- | --- |
| <a id="p100122"></a>Блок нагревательный, сухой с регулируемой температурой с пределом 100 °C. |  |
| <a id="p100123"></a>Ванна ультразвуковая с потребляемой мощностью 140 Вт, рабочей частотой 50 Гц, рабочим объемом 4,5 дм3 |  |
| <a id="p100124"></a>Вата медицинская гигроскопическая хлопковая нестерильная | <a id="p100125"></a>[ГОСТ 5556-81](https://bukva.ai/docs/gost-5556-81) |
| <a id="p100126"></a>Виалы с тефлоновыми прокладками, стеклянные объемом не менее 20 см3 |  |
| <a id="p100127"></a>Воронки делительные на 250 см3 | <a id="p100128"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100129"></a>Воронки химические для фильтрования, стеклянные | <a id="p100130"></a>ГОСТ 8613-75 |
| <a id="p100131"></a>Испаритель ротационный вакуумный с ручным подъемником, с диагональным конденсором и объемом испарительной колбы от 50 до 3 000 см3, с изменяемой скоростью вращения штока испарителя от 5 до 240 об./мин, с водяной баней с антикоррозионным покрытием объемом 5 дм3 и с диапазоном температур от 20 до 100 °C |  |
| <a id="p100132"></a>Колбы конические плоскодонные на 100 и 250 см3 | <a id="p100133"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100134"></a>Колбы круглодонные со шлифом (концентраторы) на 100, 250 см3 и 4 000 см3 ТС | <a id="p100135"></a>ТУ 92-891.029-91 |
| <a id="p100136"></a>Колонка хроматографическая капиллярная из кварцевого стекла с внутренним диаметром 0,25 мм, длиной 30 м, с неподвижной фазой, содержащей 100% метилсилоксана и толщиной пленки 0,25 мкм |  |
| <a id="p100137"></a>Насос диафрагменный, химически стойкий на 100% с мощностью электропривода 245 Вт, предельным вакуумом 100 мбар/абс., с избыточным давлением 1 бар и скоростью откачки 34 дм3/мин |  |
| <a id="p100138"></a>Стаканы стеклянные, термостойкие объемом 100 - 2 000 см3 | <a id="p100139"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100140"></a>Установка для перегонки растворителей с круглодонной колбой объемом 4 000 см3 и приемной конической колбой объемом 1 000 см3 |  |
| <a id="p100141"></a>Фильтры обеззоленные нейтральные, быстро фильтрующие диаметром 11 см, зольность одного фильтра 0,00072 г | <a id="p100142"></a>ТУ-6-09-1678-86 |


<a id="p100143"></a>*Примечание.* Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.


### 4. <a id="p100144"></a>Требования безопасности


<a id="p100145"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.
<a id="p100146"></a>4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-90 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.


### 5. <a id="p100147"></a>Требования к квалификации операторов


<a id="p100148"></a>К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются специалисты, имеющие опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой проведения анализа, освоившие метод анализа в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы контроля при проведении процедуры контроля погрешности анализа.


### 6. <a id="p100149"></a>Условия измерений


<a id="p100150"></a>При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- <a id="p100151"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C, относительной влажности не более 80% и нормальном атмосферном давлении;
- <a id="p100152"></a>выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


### 7. <a id="p100153"></a>Подготовка к выполнению измерений


<a id="p100154"></a>Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка колонок с флоризилом для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на колонках с флоризилом, установление градуировочной характеристики.


#### <a id="p100155"></a>7.1 Подготовка органических растворителей



##### <a id="p100156"></a>7.1.1 Очистка ацетонитрила


<a id="p100157"></a>Ацетонитрил, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 5 - 6 часов. Затем ацетонитрил сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 000 см3 аппарата для перегонки растворителей.
<a id="p100158"></a>Ацетонитрил перегоняют при температуре 81,5 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 81,5 °C, отбрасывают.


##### <a id="p100159"></a>7.1.2 Очистка ацетона


<a id="p100160"></a>Ацетон помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 000 см3 аппарата для перегонки растворителей, добавляют к нему марганцовокислый калий из расчета 1 г/дм3. Ацетон перегоняют при температуре 56,25 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 56,2 °C, отбрасывают.


##### <a id="p100161"></a>7.1.3 Приготовление бидистиллированной воды


<a id="p100162"></a>Дистиллят помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 000 см3 аппарата для перегонки растворителей, добавляют к нему марганцовокислый калий из расчета 1 г/дм3 и кипятят в течение 6 ч.
<a id="p100163"></a>Собирают фракции, отогнанные при температуре 100,0 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 100,0 °C, отбрасывают.


##### <a id="p100164"></a>7.1.4 Очистка хлористого метилена


<a id="p100165"></a>Хлористый метилен промывают равным объемом 5%-го раствора натрия углекислого (безводного), осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 12 - 24 ч. Затем хлористый метилен сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 000 см3 аппарата для перегонки растворителей. Хлористый метилен перегоняют при температуре 40,0 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 40,0 °C, отбрасывают.


#### <a id="p100166"></a>7.2 Приготовление растворов для проведения анализа



##### <a id="p100167"></a>7.2.1 Приготовление рабочих растворов


<a id="p100168"></a>7.2.1.1. Приготовление подкисленного ацетонитрила. В емкость, содержащую 1 дм3 ацетонитрила, добавляют 10 см3 1 н раствора соляной кислоты до pH = 1 и перемешивают содержимое. Раствор готовят под тягой, строго соблюдая технику безопасности.
<a id="p100169"></a>7.2.1.2. Приготовление раствора 4 н серной кислоты. Мерным цилиндром отбирают 112 см3 концентрированной серной кислоты и осторожно переносят в мерную колбу объемом 1 000 см3, куда предварительно наливают около 300 см3 дистиллированной воды. Затем раствор перемешивают и после охлаждения доводят водой объем в колбе до метки. Раствор готовят под тягой, строго соблюдая технику безопасности.
<a id="p100170"></a>7.2.1.3. Приготовление 2%-го раствора серной кислоты в бутаноле (бутилирующей смеси). Градуированной пипеткой отбирают 2 см3 концентрированной серной кислоты и осторожно переносят в мерную колбу объемом 100 см3, куда предварительно наливают около 60 см3 бутанола. Затем раствор перемешивают и доводят бутанолом объем в колбе до метки. Раствор готовят под тягой, строго соблюдая технику безопасности.
<a id="p100171"></a>7.2.1.4. Приготовление 5%-го раствора гидрокарбоната натрия. В мерную колбу на 1 000 см3 переносят 50 г гидрокарбоната натрия, добавляют 200 - 300 см3 дистиллированной воды, перемешивают содержимое до полного растворения и доводят водой объем в колбе до метки.
<a id="p100172"></a>7.2.1.5. Приготовление 1 н раствора соляной кислоты. Мерным цилиндром отбирают 82 см3 концентрированной соляной кислоты и осторожно переносят в мерную колбу на 1 000 см3, куда предварительно наливают около 400 см3 дистиллированной воды. Затем раствор перемешивают и после охлаждения доводят водой объем в колбе до метки (при приготовлении раствора соблюдать осторожность и работать под тягой).


##### <a id="p100173"></a>7.2.2 Приготовление градуировочных растворов


<a id="p100174"></a>7.2.2.1. Стандартный раствор N 1 с концентрацией пиклорама 1,0 мг/см3. Взвешивают 25 мг пиклорама в мерной колбе объемом 25 см3. Навеску растворяют в ацетоне и доводят объем до метки ацетоном. Полученный стандартный раствор N 1 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 1 хранится в холодильнике в течение 120 суток.
<a id="p100175"></a>7.2.2.2. Стандартный раствор N 2 с концентрацией пиклорама 10,0 мкг/см3. Из стандартного раствора N 1 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу объемом 100 см3 и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор N 2 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования. Стандартный раствор N 2 хранится в холодильнике в течение 30 суток.
<a id="p100176"></a>7.2.2.3. Стандартный раствор N 3 с концентрацией пиклорама 1,0 мкг/см3. Из стандартного раствора N 2 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор N 3 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и внесения в контрольные образцы. Стандартный раствор N 3 хранится в холодильнике в течение 30 суток.
<a id="p100177"></a>7.2.2.4. Стандартный раствор N 4 с концентрацией пиклорама 0,5 мкг/см3. Из стандартного раствора N 3 отбирают пипеткой 5 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор N 4 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и внесения в контрольные образцы. Стандартный раствор N 4 хранится в холодильнике в течение 30 суток.
<a id="p100178"></a>7.2.2.5. Стандартный раствор N 5 с концентрацией пиклорама 0,25 мкг/см3. Из стандартного раствора N 4 отбирают пипеткой 5 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор N 5 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и внесения в контрольные образцы. Стандартный раствор N 5 хранится в холодильнике в течение 30 суток.
<a id="p100179"></a>7.2.2.6. Стандартный раствор N 6 с концентрацией пиклорама 0,1 мкг/см3. Из стандартного раствора N 3 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор N 6 используется для хроматографического исследования и для внесения в контрольные образцы. Стандартный раствор N 6 хранится в холодильнике в течение 30 суток.


##### <a id="p100180"></a>7.2.3 Приготовление стандартных растворов бутилового эфира

пиклорама для установления градуировочной характеристики

<a id="p100181"></a>7.2.3.1. Стандартный раствор N 7 бутилового эфира пиклорама с концентрацией 0,1 мкг/см3. Из стандартного раствора N 3 [(п. 7.2.2.3)](#p100176) отбирают пипеткой 1 см3, помещают в виалу объемом 40 см3, удаляют растворитель током теплого воздуха и проводят бутилирование как указано в [п. 7.4](#p100189). Получают стандартный раствор N 7 бутилового эфира пиклорама с концентрацией по пиклораму 0,1 мкг/см3. Стандартный раствор бутилового эфира N 7 используется для установления градуировочной характеристики.
<a id="p100182"></a>7.2.3.2. Стандартный раствор N 8 бутилового эфира пиклорама с концентрацией 0,05 мкг/см3. Из стандартного раствора N 7 отбирают пипеткой 5 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки гексаном. Получают стандартный раствор N 8 бутилового эфира пиклорама с концентрацией по пиклораму 0,05 мкг/см3. Стандартный раствор бутилового эфира N 8 используется для установления градуировочной характеристики.
<a id="p100183"></a>7.2.3.3. Стандартный раствор N 9 бутилового эфира пиклорама с концентрацией 0,025 мкг/см3. Из стандартного раствора N 8 отбирают пипеткой 5 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки гексаном. Получают стандартный раствор N 9 бутилового эфира пиклорама с концентрацией по пиклораму 0,025 мкг/см3. Стандартный раствор бутилового эфира N 9 используется для установления градуировочной характеристики.
<a id="p100184"></a>7.2.3.4. Стандартный раствор N 10 бутилового эфира пиклорама с концентрацией 0,01 мкг/см3. Из стандартного раствора N 7 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки гексаном. Получают стандартный раствор N 10 бутилового эфира пиклорама с концентрацией по пиклораму 0,01 мкг/см3. Стандартный раствор бутилового эфира N 10 используется для установления градуировочной характеристики.


#### <a id="p100185"></a>7.3 Установление градуировочной характеристики


<a id="p100186"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика от концентрации пиклорама в растворе (мкг/см3), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки бутилового эфира пиклорама с концентрацией 0,1; 0,05; 0,025 и 0,01 мкг/см3.
<a id="p100187"></a>В испаритель хроматографа вводят по 1 мм3 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 9.2](#p100217). Осуществляют не менее 5 параллельных измерений.
<a id="p100188"></a>По полученным данным строят градуировочный график зависимости площади хроматографического пика (мВ) от концентрации пиклорама в растворе в мкг/см3.


#### <a id="p100189"></a>7.4 Бутилирование


<a id="p100190"></a>Для приготовления градуировочных растворов отбирают 1 см3 стандартного раствора N 3 (концентрация пиклорама 1 мкг/см3) в виалу объемом 40 см3 и удаляют растворитель током теплого воздуха. К сухому остатку в виале прибавляют 1 см3 2%-го раствора концентрированной серной кислоты в бутаноле (бутилирующей смеси), полученной по [п. 7.2.1.3](#p100170). Виалу плотно закрывают крышкой, помещают в блок для виал, нагретый до 100 °C, и оставляют на 30 мин. По истечении этого времени виалу вынимают из блока, охлаждают до комнатной температуры, добавляют 10 см3 гексана и 20 - 25 см3 бидистиллированной воды. Смесь интенсивно встряхивают и выдерживают до полного разделения фаз в виале. Верхний гексановый слой используют для приготовления градуировочных растворов, которые применяют для установления градуировочной характеристики.


#### <a id="p100191"></a>7.5 Подготовка колонки с флоризилом для очистки экстракта

и проверка хроматографического поведения пиклорама на ней


##### <a id="p100192"></a>7.5.1 Подготовка колонки с флоризилом для очистки экстракта


<a id="p100193"></a>В пластиковую или стеклянную колонку диаметром 15 мм помещают 4 г флоризила с зернением 60/100 меш и, аккуратно постукивая по стенкам колонки, формируют слой адсорбента. На слой флоризила наносят слой безводного сернокислого натрия толщиной 1 см.
<a id="p100194"></a>В день использования колонку промывают 15 см3 ацетона и 15 см3 гексана, смывы отбрасывают.


##### <a id="p100195"></a>7.5.2 Проверка хроматографического поведения пиклорама

на колонке с флоризилом

<a id="p100196"></a>В стакан объемом 100 см3 вносят 1 см3 стандартного раствора бутилового эфира пиклорама в гексане с концентрацией по пиклораму 0,1 мкг/см3, добавляют 4 см3 гексана, перемешивают и наносят на подготовленную колонку. Элюат собирают в концентратор и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °C. Исходный стакан последовательно обмывают 30 см3 гексана, затем 10 см смеси гексана с ацетоном в соотношении 4:1, вносят на колонку. Затем колонку последовательно промывают пятью порциями смеси гексана с ацетоном в соотношении 1:1 объемом 5 см3 каждая. Каждую порцию собирают отдельно в концентраторы и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °C.
<a id="p100197"></a>Сухой остаток каждой фракции растворяют в 5 см3 гексана и 1 мм3 пробы вводят в хроматограф.
<a id="p100198"></a>Определяют фракции, содержащие пиклорам, полноту смывания с колонки и необходимый объем элюата.
<a id="p100199"></a>Изучение поведения пиклорама на колонке проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии флоризила.


### 8. <a id="p100200"></a>Отбор и хранение проб


<a id="p100201"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", N 2051-79 от 21.08.79, а также в соответствии с [ГОСТ Р 51809-01](https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-51809-2001) "Капуста белокочанная свежая, реализуемая в розничной торговой сети" и [ГОСТ 1724-85](https://bukva.ai/docs/gost-1724-85) "Капуста белокочанная свежая, заготовляемая и поставляемая. ТУ".
<a id="p100202"></a>Пробы сегментов кочанов капусты хранят в холодильнике в полиэтиленовых пакетах при температуре 0 - 4 °C в течение суток. Для длительного хранения пробы замораживают и хранятся в морозильной камере при температуре -18 °C.


### 9. <a id="p100203"></a>Выполнение определения



#### <a id="p100204"></a>9.1 Капуста



##### <a id="p100205"></a>9.1.1 Экстракция


<a id="p100206"></a>Образец измельченных сегментов кочанов капусты 10 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции объемом 250 см3, добавляют 50 см3 подкисленного ацетонитрила и проводят экстракцию в ультразвуковой ванне в течение 10 мин. Фильтруют экстракт в концентратор объемом 250 см3 через воронку с бумажным фильтром низкой плотности. Повторяют экстракцию еще дважды, используя по 30 см3 подкисленного ацетонитрила и помещая банку с образцом в ультразвуковую ванну каждый раз на 5 мин. Экстракты фильтруют и объединяют в концентраторе. Объединенный экстракт выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани не выше 35 °C.


##### <a id="p100207"></a>9.1.2 Очистка полученного экстракта перераспределением

в системе несмешивающихся растворителей

<a id="p100208"></a>К водному остатку, полученному по [п. 9.1.1](#p100205), добавляют 5 см3 ацетона, обмывают стенки концентратора и помещают на 5 мин в ультразвуковую ванну. В концентратор двумя порциями добавляют 100 см3 5%-го раствора гидрокарбоната натрия, ополаскивают стенки концентратора и содержимое переносят в делительную воронку объемом 250 см3.
<a id="p100209"></a>Добавляют в делительную воронку 5 г хлорида натрия, растворяя его путем встряхивания. В делительную воронку приливают 30 см3 гексана и встряхивают содержимое воронки 1 - 2 мин. После полного разделения фаз нижний слой сливают в стакан объемом 250 см3, а гексан отбрасывают. Содержимое стакана возвращают в делительную воронку и повторяют процедуру еще раз с тем же объемом гексана.
<a id="p100210"></a>После промывки гексаном содовую фракцию подкисляют 4 н раствором серной кислоты до pH = 1 (~ 2 см3). Смесь дегазируют. (Осторожно! Возможно разбрызгивание раствора!). Добавляют в воронку 50 см3 хлористого метилена и встряхивают смесь в течение 1 - 2 мин. После разделения слоев нижний слой хлористого метилена сливают в концентратор объемом 250 см3, пропуская через стеклянную воронку с безводным сульфатом натрия. Экстракцию повторяют еще трижды, используя для этого каждый раз по 30 см3 хлористого метилена. Экстракты собирают в концентратор объемом 250 см3, пропуская его через слой безводного сульфата натрия, и выпаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре водяной бани не выше 35 °C.


##### <a id="p100211"></a>9.1.3 Бутилирование экстракта


<a id="p100212"></a>Сухой остаток, полученный по [п. 9.1.2](#p100207), последовательно переносят тремя порциями ацетона по 3 см3 каждая в виалу объемом 40 см3 и высушивают током теплого воздуха. Проводят бутилирование как указано в [пункте 7.4](#p100189).


##### <a id="p100213"></a>9.1.4 Очистка экстракта на колонке с флоризилом


<a id="p100214"></a>Из верхнего (гексанового) слоя в виале, полученного в [п. 9.1.3](#p100211), отбирают 5 см3 и наносят на заранее подготовленную колонку с флоризилом.
<a id="p100215"></a>Промывают колонку 30 см3 гексана, смыв отбрасывают. Наносят на колонку 10 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 4:1, смыв отбрасывают. Пропускают через колонку 15 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 1:1, элюат собирают в концентратор объемом 100 см3 и выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35 °C досуха.
<a id="p100216"></a>Сухой остаток в концентраторе растворяют в 5 см3 гексана и вводят в хроматограф 1 мм3 раствора.


#### <a id="p100217"></a>9.2 Условия хроматографирования


<a id="p100218"></a>Хроматографическая система, включающая:
- <a id="p100219"></a>хроматограф газовый с электронно-захватным детектором (ЭЗД) с пределом детектирования по Линдану 4 x 10-14 г/см3 и приспособлениями для капиллярной колонки;
- <a id="p100220"></a>компьютерное программное обеспечение, контролирующее работу всего прибора, обеспечивающее сбор и хранение всех хроматограмм в процессе проведения хроматографического анализа, обеспечивающее обработку результатов измерений, вывод и расчет хроматограмм и количественный анализ.
<a id="p100221"></a>Колонка хроматографическая капиллярная из кварцевого стекла с внутренним диаметром 0,25 мм, длиной 30 м, с неподвижной фазой, содержащей 100% метилсилоксана, и толщиной пленки 0,25 мкм.
<a id="p100222"></a>Температура термостата колонки программированная: нагрев колонки с 220 °C (выдержка 2 мин) по 10 град/мин до 260 °C (выдержка 5 мин).
<a id="p100223"></a>Температура детектора - 300 °C, испарителя - 260 °C.
<a id="p100224"></a>Газ 1 (гелий) - тип регулятора расхода газа РРГ 11, режим нормальный, сброс 1:5, расход во время анализа - 10 см3/мин.
<a id="p100225"></a>Газ 2 (гелий) - давление на входе 100 кПа, линейная скорость - 80 см/мин, поток - 4,1 см3/мин.
<a id="p100226"></a>Газ 6 (азот, поддув детектора) - 35 см/мин.
<a id="p100227"></a>Линейность детектирования сохраняется в пределах - 0,01 - 0,1 нг.
<a id="p100228"></a>Каждую анализируемую пробу вводят в хроматограф 3 раза и вычисляют среднюю площадь пика.
<a id="p100229"></a>Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией пиклорама 0,1 мкг/см3, соответственно разбавляют.


### 10. <a id="p100230"></a>Обработка результатов


<a id="p100231"></a>Для обработки результатов хроматографического анализа используется компьютерное программное обеспечение химического анализа, которое входит в хроматографическую систему.
<a id="p100232"></a>Альтернативная обработка результатов.
<a id="p100233"></a>Содержание пиклорама в пробах рассчитывают по формуле, без учета полноты извлечения вещества из проб:

<a id="p100234"></a> $X = \frac{S_{\text{пр}} \cdot A \cdot V}{100 \cdot S_{\text{ст}} \cdot m} \cdot P$ , где

<a id="p100235"></a>X - содержание пиклорама в пробе, мг/кг;
<a id="p100236"></a>Sст - высота (площадь) пика стандарта, мВ;
<a id="p100237"></a>Sпр - высота (площадь) пика образца, мВ;
<a id="p100238"></a>A - концентрация стандартного раствора, мкг/см3;
<a id="p100239"></a>V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3;
<a id="p100240"></a>m - масса анализируемого образца, г (см3);
<a id="p100241"></a>P - содержание пиклорама в аналитическом стандарте, %.


### 11. <a id="p100242"></a>Проверка приемлемости результатов параллельных определений


<a id="p100243"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости:

<a id="p100244"></a> $\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{X_{1} + X_{2}} \leq r$ , где (1)

<a id="p100245"></a>X<sub>1</sub>, X<sub>2</sub> - результаты параллельных определений, мг/кг;
<a id="p100246"></a>r - значение предела повторяемости [(табл. 1)](#p100032), при этом $r = 2,8 \times \sigma_{r}$ .
<a id="p100247"></a>При невыполнении [условия (1)](#p100244) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


### 12. <a id="p100248"></a>Оформление результатов


<a id="p100249"></a>Результат анализа представляют в виде:

<a id="p100250"></a> $(\overline{X} \pm \Delta)$ , мг/кг при вероятности P = 0,95, где

<a id="p100251"></a> $\overline{X}$ - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
<a id="p100252"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

<a id="p100253"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot \overline{X}}{100}$ , где

<a id="p100254"></a> $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100032)), %.
<a id="p100255"></a>В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100256"></a>"содержание вещества в пробе менее 0,01 мг/кг". <*>

<a id="p100257"></a>

---

<a id="p100258"></a><*> 0,01 мг/кг - предел обнаружения.


### 13. <a id="p100259"></a>Контроль качества результатов измерений


<a id="p100260"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений, а также контроль стабильности градуировочной характеристики осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-02](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-2-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

#### <a id="p100261"></a>13.1 Контроль стабильности градуировочной характеристики.

<a id="p100262"></a>Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100263"></a>Контроль стабильности градуировочной характеристики для пиклорама проводят при смене основного градуировочного раствора N 1 каждые 4 месяца, при смене основных градуировочных растворов N 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 и 10 - каждый месяц, а также в начале и окончании каждой серии анализов.
<a id="p100264"></a>При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее трех образцов концентраций для градуировки, содержание пиклорама в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,01 до 0,1 мкг/см3.
<a id="p100265"></a>Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:

<a id="p100266"></a> $A = \frac{(X - C) \cdot 100}{C} \leq 5,88$ , где

<a id="p100267"></a>X - концентрация пиклорама контрольного измерения, мкг/см3;
<a id="p100268"></a>C - известная концентрация градуировочного раствора пиклорама в гексане, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3;
<a id="p100269"></a>5,88 - погрешность градуировочной характеристики, %.
<a id="p100270"></a>Если величина расхождения (A) превышает 5,88%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов пиклорама, предусмотренных МВИ. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики определяют ее заново согласно [п. 7.3](#p100185).
<a id="p100271"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
<a id="p100272"></a>Величина добавки Cд должна удовлетворять условию:

<a id="p100273"></a> $C_{\partial} = \Delta_{\text{л},X} + \Delta_{\text{л},X\prime}$ , где

<a id="p100274"></a> $\pm \Delta_{\text{л},X}( \pm \Delta_{\text{л},X\prime})$ - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:

<a id="p100275"></a> $\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta$ , где

<a id="p100276"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

<a id="p100277"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot \overline{X}}{100}$ , где

<a id="p100278"></a> $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100032)), %.
<a id="p100279"></a>Результат контроля процедуры Kк рассчитывают по формуле:

<a id="p100280"></a> $\text{К}_{\text{к}} = \overline{X}\prime - \overline{X} - C_{\partial}$ , где

<a id="p100281"></a> $\overline{X}\prime$ , $\overline{X}$ , Cд - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100242)) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце и концентрация добавки соответственно, мг/кг.
<a id="p100282"></a>Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

<a id="p100283"></a> $\text{К } = \sqrt{\Delta_{\text{л},X\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},X}^{2}}$ (1)

<a id="p100284"></a>Проводят сопоставление результата контроля процедуры (Kк) с нормативом контроля (K).
<a id="p100285"></a>Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

<a id="p100286"></a>|Kк| <= K, (2)

<a id="p100287"></a>процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100288"></a>При невыполнении [условия (2)](#p100286) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении [условия (2)](#p100286) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
<a id="p100289"></a>13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
<a id="p100290"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):

<a id="p100291"></a> $\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{X_{1} + X_{2}} \leq R$ , где (3)

<a id="p100292"></a>X<sub>1</sub>, X<sub>2</sub> - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
<a id="p100293"></a>R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100032)), %.





<a id="p100294"></a>Приложение 1

<a id="p100295"></a>**ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ ПИКЛОРАМА ИЗ КОЧАНОВ КАПУСТЫ**
**(5 ПОВТОРНОСТЕЙ ДЛЯ КАЖДОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ, P = 0,95)**


<table>
<colgroup><col width="15%"><col width="26%"><col width="31%"><col width="28%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100296"></a>Среда</td><td><a id="p100297"></a>Внесено пиклорама, мг/кг (мг/дм3)</td><td><a id="p100298"></a>Обнаружено пиклорама, мг/кг (мг/дм3)</td><td><a id="p100299"></a>Полнота определения, %</td></tr>
<tr><td rowspan="4"><a id="p100300"></a>Кочаны капусты</td><td><a id="p100301"></a>0,01</td><td><a id="p100302"></a>0,0082 +/- 0,0006</td><td><a id="p100303"></a>82,0</td></tr>
<tr><td><a id="p100304"></a>0,02</td><td><a id="p100305"></a>0,0206 +/- 0,0014</td><td><a id="p100306"></a>82,4</td></tr>
<tr><td><a id="p100307"></a>0,05</td><td><a id="p100308"></a>0,0404 +/- 0,0029</td><td><a id="p100309"></a>80,8</td></tr>
<tr><td><a id="p100310"></a>0,10</td><td><a id="p100311"></a>0,0790 +/- 0,0060</td><td><a id="p100312"></a>79,0</td></tr>
</table>




<a id="p100313"></a>

---