---
title: "\"МУК 4.1.3413-17. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств пентиопирада в плодах томата и томатном соке, в ягодах винограда и виноградном соке, в семенах и масле подсолнечника, рапса и сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.3413-17"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-3413-17"
---

## "МУК 4.1.3413-17. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств пентиопирада в плодах томата и томатном соке, в ягодах винограда и виноградном соке, в семенах и масле подсолнечника, рапса и сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.3413-17. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств пентиопирада в плодах томата и томатном соке, в ягодах винограда и виноградном соке, в семенах и масле подсолнечника, рапса и сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 14.02.2017)


<a id="p100001"></a>Утверждаю
Руководитель Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека,
Главный государственный санитарный врач
Российской Федерации
**А.Ю.ПОПОВА**
14 февраля 2017 года


#### <a id="p100002"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕНТИОПИРАДА В ПЛОДАХ**
**ТОМАТА И ТОМАТНОМ СОКЕ, В ЯГОДАХ ВИНОГРАДА И ВИНОГРАДНОМ**
**СОКЕ, В СЕМЕНАХ И МАСЛЕ ПОДСОЛНЕЧНИКА, РАПСА И СОИ МЕТОДОМ**
**ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100004"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.3413-17**

1. <a id="p100005"></a>Разработаны Российским государственным аграрным университетом - МСХА им. К.А. Тимирязева, Учебно-научный консультационный центр "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов" Минсельхоза России (А.В. Довгилевич, Е.В. Довгилевич, Е.Н. Тестова, Ю.Н. Савушкин).
2. <a id="p100006"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 22 декабря 2016 г. N 2).
3. <a id="p100007"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 14 февраля 2017 г.
4. <a id="p100008"></a>Введены впервые.

<a id="p100009"></a>Свидетельство о метрологической аттестации МВИ N РОСС RU. 0001.310430/0259.31.03.2016 от 31.03.2016.

<a id="p100010"></a>Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения уровня остаточных количеств пентиопирада в ягодах винограда и виноградном соке в диапазоне 0,01 - 0,1 мг/кг, в плодах томата и томатном соке, в семенах и масле подсолнечника, рапса и сои в диапазоне 0,05 - 0,5 мг/кг. Методические указания носят рекомендательный характер.
<a id="p100011"></a>Пентиопирад
<a id="p100012"></a>(RS)-<sub>N</sub>-[2-(1,3-диметилбутил)-3-тиенил]-1-метил-3-(трифторметил)-1H-пиразол-4 карбоксамид
<a id="p100013"></a>Структурная формула:

<a id="p100014"></a> ![рис. 1](https://i.bukva.ai/4UacAR2p/img_0.png) 

<a id="p100015"></a>Молекулярная масса: 359,4.
<a id="p100016"></a>Эмпирическая формула: C16H20F3N3OS.
<a id="p100017"></a>Агрегатное состояние: порошок.
<a id="p100018"></a>Цвет, запах: белый, без запаха.
<a id="p100019"></a>Давление паров: 6,43 x 10-6 Па (25 °C).
<a id="p100020"></a>Коэффициент распределения октанол-вода: log Kow = 4,36 (pH 4); log Kow = 4,62 (pH 7); log Kow = 4,54 (pH 10).
<a id="p100021"></a>Температура плавления: 108,7 °C.
<a id="p100022"></a>Растворимость в воде (мг/дм3, при 20 °C): 7,53.
<a id="p100023"></a>Растворимость в органических растворителях (г/дм3, 20 °C): ацетон - 557; н-гексан - 0,75; гептан - 0,74; дихлорметан - 531; ксилол - 42,7; толуол - 67,0; метанол - 402; этанол - 234,5; этилацетат - 349.
<a id="p100024"></a>Стабилен в водных растворах при pH 3 - 10 и температуре 20 °C в низких концентрациях (менее 1 мг/дм3).
<a id="p100025"></a>Краткая токсикологическая характеристика. Пентиопирад относится к мало опасным по острой оральной (ЛД50 для крыс более 2 000 мг/кг) и дермальной токсичности (ЛД50 для крыс более 2 000 мг/кг), но к умеренно опасным веществам по ингаляционной токсичности (ЛК50 для крыс (4 часа) более 5 669 мг/м3). Не раздражает кожу и слизистую оболочку глаз. Не является мутагеном.
<a id="p100026"></a>Область применения. Пентиопирад - системный фунгицид, ингибирует процесс дыхания грибов путем связывания с митохондриальным дыхательным комплексом II, останавливает прорастание спор, ингибирует рост мицелия и обладает сильным антиспоруляционным действием.
<a id="p100027"></a>Пентиопирад используется для борьбы с паршой и мучнистой росой на яблонях с нормой расхода 0,375 - 1,125 л/га.
<a id="p100028"></a>Пентиопирад рекомендуется для борьбы с грибковыми заболеваниями зерновых колосовых культур - септриозом, фузариозом, сетчатой пятнистостью, листовой ржавчиной и мучнистой росой в дозах 125 - 1 000 г действующего вещества на гектар.
<a id="p100029"></a>В России установлены следующие гигиенические нормативы: ДСД - 0,13 мг/кг массы тела человека; ОДК в почве - 0,9 мг/кг; ПДК в воде водоемов - 0,02 мг/дм3; ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 0,8 мг/м3; ОБУВ в атмосферном воздухе - 0,02 мг/м3; МДУ в сельскохозяйственной продукции (мг/кг): плодовые семечковые - 0,5.
<a id="p100030"></a>МДУ в импортируемой продукции (мг/кг): зерно пшеницы - 0,1.


### 1. <a id="p100031"></a>Погрешность измерений


<a id="p100032"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100033"></a>Таблица 1

<a id="p100034"></a>Метрологические параметры для пентиопирада


<table>
<colgroup><col width="20%"><col width="18%"><col width="19%"><col width="16%"><col width="13%"><col width="14%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100035"></a>Анализируемый объект</td><td><a id="p100036"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td><a id="p100037"></a>Показатель точности (граница относительной погрешности), $\pm \delta$ , % P = 0,95</td><td><a id="p100038"></a>Стандартное отклонение повторяемости, $\sigma_{r}$ , %</td><td><a id="p100039"></a>Предел повторяемости, r, %</td><td><a id="p100040"></a>Предел воспроизводимости, R, %</td></tr>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100041"></a>Плоды томата</td><td><a id="p100042"></a>0,05 - 0,1 вкл.</td><td><a id="p100043"></a>50</td><td><a id="p100044"></a>2</td><td><a id="p100045"></a>5</td><td><a id="p100046"></a>7</td></tr>
<tr><td><a id="p100047"></a>0,2 - 0,5 вкл.</td><td><a id="p100048"></a>25</td><td><a id="p100049"></a>2</td><td><a id="p100050"></a>7</td><td><a id="p100051"></a>9</td></tr>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100052"></a>Томатный сок</td><td><a id="p100053"></a>0,05 - 0,1 вкл.</td><td><a id="p100054"></a>50</td><td><a id="p100055"></a>2</td><td><a id="p100056"></a>6</td><td><a id="p100057"></a>8</td></tr>
<tr><td><a id="p100058"></a>0,2 - 0,5 вкл.</td><td><a id="p100059"></a>25</td><td><a id="p100060"></a>2</td><td><a id="p100061"></a>6</td><td><a id="p100062"></a>8</td></tr>
<tr><td><a id="p100063"></a>Ягоды винограда</td><td><a id="p100064"></a>0,01 - 0,1 вкл.</td><td><a id="p100065"></a>50</td><td><a id="p100066"></a>2</td><td><a id="p100067"></a>5</td><td><a id="p100068"></a>7</td></tr>
<tr><td><a id="p100069"></a>Виноградный сок</td><td><a id="p100070"></a>0,01 - 0,1 вкл.</td><td><a id="p100071"></a>50</td><td><a id="p100072"></a>2</td><td><a id="p100073"></a>4</td><td><a id="p100074"></a>6</td></tr>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100075"></a>Семена подсолнечника</td><td><a id="p100076"></a>0,05 - 0,1 вкл.</td><td><a id="p100077"></a>50</td><td><a id="p100078"></a>2</td><td><a id="p100079"></a>7</td><td><a id="p100080"></a>9</td></tr>
<tr><td><a id="p100081"></a>0,2 - 0,5 вкл.</td><td><a id="p100082"></a>25</td><td><a id="p100083"></a>3</td><td><a id="p100084"></a>7</td><td><a id="p100085"></a>10</td></tr>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100086"></a>Масло подсолнечника</td><td><a id="p100087"></a>0,05 - 0,1 вкл.</td><td><a id="p100088"></a>50</td><td><a id="p100089"></a>2</td><td><a id="p100090"></a>5</td><td><a id="p100091"></a>7</td></tr>
<tr><td><a id="p100092"></a>0,2 - 0,5 вкл.</td><td><a id="p100093"></a>25</td><td><a id="p100094"></a>2</td><td><a id="p100095"></a>4</td><td><a id="p100096"></a>6</td></tr>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100097"></a>Семена рапса</td><td><a id="p100098"></a>0,05 - 0,1 вкл.</td><td><a id="p100099"></a>50</td><td><a id="p100100"></a>2</td><td><a id="p100101"></a>6</td><td><a id="p100102"></a>8</td></tr>
<tr><td><a id="p100103"></a>0,2 - 0,5 вкл.</td><td><a id="p100104"></a>25</td><td><a id="p100105"></a>1</td><td><a id="p100106"></a>4</td><td><a id="p100107"></a>5</td></tr>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100108"></a>Масло рапса</td><td><a id="p100109"></a>0,05 - 0,1 вкл.</td><td><a id="p100110"></a>50</td><td><a id="p100111"></a>3</td><td><a id="p100112"></a>6</td><td><a id="p100113"></a>8</td></tr>
<tr><td><a id="p100114"></a>0,2 - 0,5 вкл.</td><td><a id="p100115"></a>25</td><td><a id="p100116"></a>1</td><td><a id="p100117"></a>3</td><td><a id="p100118"></a>5</td></tr>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100119"></a>Семена сои</td><td><a id="p100120"></a>0,05 - 0,1 вкл.</td><td><a id="p100121"></a>50</td><td><a id="p100122"></a>2</td><td><a id="p100123"></a>6</td><td><a id="p100124"></a>8</td></tr>
<tr><td><a id="p100125"></a>0,2 - 0,5 вкл.</td><td><a id="p100126"></a>25</td><td><a id="p100127"></a>2</td><td><a id="p100128"></a>4</td><td><a id="p100129"></a>6</td></tr>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100130"></a>Масло сои</td><td><a id="p100131"></a>0,05 - 0,1 вкл.</td><td><a id="p100132"></a>50</td><td><a id="p100133"></a>2</td><td><a id="p100134"></a>6</td><td><a id="p100135"></a>8</td></tr>
<tr><td><a id="p100136"></a>0,2 - 0,5 вкл.</td><td><a id="p100137"></a>25</td><td><a id="p100138"></a>2</td><td><a id="p100139"></a>4</td><td><a id="p100140"></a>6</td></tr>
</table>


<a id="p100141"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в табл. 2.

<a id="p100142"></a>Таблица 2

<a id="p100143"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение,
доверительный интервал среднего результата для пентиопирада


<table>
<colgroup><col width="20%"><col width="16%"><col width="18%"><col width="14%"><col width="16%"><col width="16%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100144"></a>Анализируемый объект</td><td colspan="5"><a id="p100145"></a>Метрологические параметры, P = 0,95; n = 20</td></tr>
<tr><td><a id="p100146"></a>предел обнаружения, мг/кг</td><td><a id="p100147"></a>диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td><a id="p100148"></a>среднее значение определения, %</td><td><a id="p100149"></a>стандартное отклонение, S, %</td><td><a id="p100150"></a>доверительный интервал среднего результата, +/-, %</td></tr>
<tr><td><a id="p100151"></a>Плоды томата</td><td><a id="p100152"></a>0,05</td><td><a id="p100153"></a>0,05 - 0,5</td><td><a id="p100154"></a>82,63</td><td><a id="p100155"></a>2,48</td><td><a id="p100156"></a>0,56</td></tr>
<tr><td><a id="p100157"></a>Томатный сок</td><td><a id="p100158"></a>0,05</td><td><a id="p100159"></a>0,05 - 0,5</td><td><a id="p100160"></a>83,41</td><td><a id="p100161"></a>4,02</td><td><a id="p100162"></a>0,90</td></tr>
<tr><td><a id="p100163"></a>Ягоды винограда</td><td><a id="p100164"></a>0,01</td><td><a id="p100165"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100166"></a>88,91</td><td><a id="p100167"></a>4,73</td><td><a id="p100168"></a>1,06</td></tr>
<tr><td><a id="p100169"></a>Виноградный сок</td><td><a id="p100170"></a>0,01</td><td><a id="p100171"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100172"></a>81,50</td><td><a id="p100173"></a>7,35</td><td><a id="p100174"></a>1,64</td></tr>
<tr><td><a id="p100175"></a>Семена подсолнечника</td><td><a id="p100176"></a>0,05</td><td><a id="p100177"></a>0,05 - 0,5</td><td><a id="p100178"></a>82,50</td><td><a id="p100179"></a>3,93</td><td><a id="p100180"></a>0,88</td></tr>
<tr><td><a id="p100181"></a>Масло подсолнечника</td><td><a id="p100182"></a>0,05</td><td><a id="p100183"></a>0,05 - 0,5</td><td><a id="p100184"></a>86,30</td><td><a id="p100185"></a>2,83</td><td><a id="p100186"></a>0,63</td></tr>
<tr><td><a id="p100187"></a>Семена рапса</td><td><a id="p100188"></a>0,05</td><td><a id="p100189"></a>0,05 - 0,5</td><td><a id="p100190"></a>87,08</td><td><a id="p100191"></a>2,93</td><td><a id="p100192"></a>0,65</td></tr>
<tr><td><a id="p100193"></a>Масло рапса</td><td><a id="p100194"></a>0,05</td><td><a id="p100195"></a>0,05 - 0,5</td><td><a id="p100196"></a>83,40</td><td><a id="p100197"></a>4,06</td><td><a id="p100198"></a>0,91</td></tr>
<tr><td><a id="p100199"></a>Семена сои</td><td><a id="p100200"></a>0,05</td><td><a id="p100201"></a>0,05 - 0,5</td><td><a id="p100202"></a>85,02</td><td><a id="p100203"></a>2,42</td><td><a id="p100204"></a>0,54</td></tr>
<tr><td><a id="p100205"></a>Масло сои</td><td><a id="p100206"></a>0,05</td><td><a id="p100207"></a>0,05 - 0,5</td><td><a id="p100208"></a>85,54</td><td><a id="p100209"></a>2,89</td><td><a id="p100210"></a>0,65</td></tr>
</table>



### 2. <a id="p100211"></a>Метод измерений


<a id="p100212"></a>Метод основан на определении пентиопирада с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием диодно-матричного детектора после его экстракции из образцов органическим растворителем, очистки экстракта на колонках с окисью алюминия, на колонках с флоризилом.
<a id="p100213"></a>Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.
<a id="p100214"></a>В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором состава подвижной фазы и выбором колонок различной полярности.


### 3. <a id="p100215"></a>Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы



#### <a id="p100216"></a>3.1 Средства измерений



| <a id="p100217"></a>Весы аналитические класса точности - специальный (I) с наибольшим пределом взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г | <a id="p100218"></a>ГОСТ Р 53228-08 |
| --- | --- |
| <a id="p100219"></a>Весы лабораторные общего назначения класса точности - средний (III) с наибольшим пределом взвешивания до 400 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,5 г | <a id="p100220"></a>ГОСТ Р 53228-08 |
| <a id="p100221"></a>Колбы мерные на 10, 25, 50, 100, 500 и 1 000 см3 | <a id="p100222"></a>[ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |
| <a id="p100223"></a>Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 см3 | <a id="p100224"></a>[ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) |
| <a id="p100225"></a>pH-метр/милливольтметр с диапазоном измерения 0 - 14 pH; +/- 1 999 мВ |  |
| <a id="p100226"></a><a id="p100227"></a><a id="p100228"></a>Хроматографическая система, включающая:<br>- хроматограф жидкостный с диодно-матричным детектором, снабженный термостатом для колонок с диапазоном температур от 15 до 80 °C и с возможностью использования стандартного автосамплера с дозирующим объемом от 0,1 до 100 мм3 для автоматического ввода пробы в хроматографическую систему;<br>- компьютерное программное обеспечение, контролирующее работу всего прибора, обеспечивающее сбор и хранение всех хроматограмм в процессе проведения хроматографического анализа, обеспечивающее обработку результатов измерений, вывод и расчет хроматограмм и количественный анализ |  |
| <a id="p100229"></a>Цилиндры мерные на 10, 25 и 50 см3 | <a id="p100230"></a>[ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |


<a id="p100231"></a>*Примечание.* Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.


#### <a id="p100232"></a>3.2 Реактивы



| <a id="p100233"></a>Пентиопирад, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 99,9% | <a id="p100234"></a>CAS 183675-82-3 |
| --- | --- |
| <a id="p100235"></a>Алюминий окись для хроматографии, ч | <a id="p100236"></a>ТУ 6-09-3916-75 |
| <a id="p100237"></a>Ацетон, осч | <a id="p100238"></a>ТУ 6-09-3513-86 |
| <a id="p100239"></a>Ацетонитрил, осч, УФ-200 нм | <a id="p100240"></a>ТУ 6-09-2167-84 |
| <a id="p100241"></a>Вода дистиллированная и (или) бидистиллированная (вода дистиллированная, перегнанная повторно в стеклянной емкости) | <a id="p100242"></a>ГОСТ 6709-72 |
| <a id="p100243"></a>Гелий, очищенный | <a id="p100244"></a>ТУ 51-940-80 |
| <a id="p100245"></a>n-Гексан, хч | <a id="p100246"></a>ТУ 6-09-3818-89 |
| <a id="p100247"></a>Калий марганцовокислый, чда | <a id="p100248"></a>ГОСТ 20490-75 |
| <a id="p100249"></a>Калий фосфорнокислый двузамещенный, 3-водный, чда | <a id="p100250"></a>[ГОСТ 2493-75](https://bukva.ai/docs/standart-gost-2493-75) |
| <a id="p100251"></a>Кальций хлористый, ч | <a id="p100252"></a>ТУ 6-09-4711-81 |
| <a id="p100253"></a>Кислота муравьиная, чда | <a id="p100254"></a>[ГОСТ 5848-73](https://bukva.ai/docs/gost-5848-73) |
| <a id="p100255"></a>Метилен хлористый, хч | <a id="p100256"></a>ТУ 6-09-2662-77 |
| <a id="p100257"></a>Натрия гидроокись, хч | <a id="p100258"></a>ГОСТ 4328-77 |
| <a id="p100259"></a>Натрий сернокислый, безводный, хч | <a id="p100260"></a>[ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76) |
| <a id="p100261"></a>Натрий углекислый, кислый, хч | <a id="p100262"></a>[ГОСТ 4201-79](https://bukva.ai/docs/gost-4201-79) |
| <a id="p100263"></a>Натрий хлористый, хч | <a id="p100264"></a>ГОСТ 4233-77 |
| <a id="p100265"></a>Флоризил (магния силикат, 99%,) для колоночной хроматографии, зернение 60/100 меш | <a id="p100266"></a>CAS 1343-88-0 |


<a id="p100267"></a>*Примечание.* Допускается использование реактивов с аналогичными или лучшими характеристиками.


#### <a id="p100268"></a>3.3 Вспомогательные устройства и материалы



| <a id="p100269"></a>Алонж прямой с отводом для вакуума для работы с концентрирующими патронами | <a id="p100270"></a>ГОСТ 25336-82 |
| --- | --- |
| <a id="p100271"></a>Аппарат для встряхивания проб с возвратно-поступательным направлением колебаний, с максимальной загрузкой 10 кг, с амплитудой колебаний 30 мм и скоростью от 10 до 300 колебаний в минуту |  |
| <a id="p100272"></a>Банки полипропиленовые с крышками для экстракции вместимостью 250 см3 |  |
| <a id="p100273"></a>Ванна ультразвуковая с потребляемой мощностью 140 Вт, рабочей частотой 50 Гц, рабочим объемом 4,5 дм3 |  |
| <a id="p100274"></a>Вата медицинская гигроскопическая хлопковая нестерильная | <a id="p100275"></a>[ГОСТ 5556-81](https://bukva.ai/docs/gost-5556-81) |
| <a id="p100276"></a>Виалы объемом 2 см3, закрываемые завинчивающейся или запрессовывающейся крышкой с тефлонированной резиновой прокладкой, прокалываемой микрошприцем для автоматического дозатора проб |  |
| <a id="p100277"></a>Воронки делительные на 250 см3 | <a id="p100278"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100279"></a>Воронки лабораторные, стеклянные | <a id="p100280"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100281"></a>Испаритель ротационный вакуумный с ручным подъемником, с диагональным конденсором и объемом испарительной колбы от 50 до 3 000 см3, с изменяемой скоростью вращения штока испарителя от 5 до 240 об./мин, с водяной баней с антикоррозионным покрытием объемом 5 дм3 и с диапазоном температур от 20 до 100 °C |  |
| <a id="p100282"></a>Колбы конические плоскодонные на 100, 250 и 1 000 см3 | <a id="p100283"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100284"></a>Колбы круглодонные со шлифом (концентраторы) на 100, 250 и 4 000 см3 ТС | <a id="p100285"></a>ТУ 92-891.029-91 |
| <a id="p100286"></a>Колонка хроматографическая стальная, длиной 150 мм, с внутренним диаметром 4,6 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами C18 |  |
| <a id="p100287"></a>Насос диафрагменный, химически стойкий на 100%, с мощностью электропривода 245 Вт, предельным вакуумом 100 мбар/абс., с избыточным давлением 1 бар и скоростью откачки 34 дм3/мин |  |
| <a id="p100288"></a>Предколонка хроматографическая стальная, длиной 4 мм, внутренним диаметром 4 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами C18 |  |
| <a id="p100289"></a>Стаканы стеклянные, термостойкие объемом 100 - 500 см3 | <a id="p100290"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100291"></a>Установка для перегонки растворителей с круглодонной колбой объемом 4 000 см3 и приемной конической колбой объемом 1000 см3 |  |
| <a id="p100292"></a>Фильтры обеззоленные нейтральные, быстро фильтрующие, диаметром 11 см, зольность одного фильтра 0,00072 г | <a id="p100293"></a>ТУ 6-09-1678-86 |
| <a id="p100294"></a>Шприц инъекционный многократного применения объемом 10 см3 | <a id="p100295"></a>[ГОСТ 22967-90](https://bukva.ai/docs/standart-gost-22967-90) |


<a id="p100296"></a>*Примечание.* Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.


### 4. <a id="p100297"></a>Требования безопасности


<a id="p100298"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостной хроматограф.
<a id="p100299"></a>4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-91.


### 5. <a id="p100300"></a>Требования к квалификации операторов


<a id="p100301"></a>К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются специалисты, имеющие опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой проведения анализа, освоившие метод анализа в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы контроля при проведении процедуры контроля погрешности анализа.


### 6. <a id="p100302"></a>Условия измерений


<a id="p100303"></a>При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- <a id="p100304"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C, относительной влажности не более 80% и нормальном атмосферном давлении;
- <a id="p100305"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


### 7. <a id="p100306"></a>Подготовка к выполнению определений


<a id="p100307"></a>Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка колонок с окисью алюминия и флоризилом для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на колонках с окисью алюминия и флоризилом и установление градуировочной характеристики.


#### <a id="p100308"></a>7.1 Подготовка органических растворителей


<a id="p100309"></a>7.1.1. Очистка ацетонитрила. Ацетонитрил, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 5 - 6 ч. Затем ацетонитрил сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 000 см3 аппарата для перегонки растворителей.
<a id="p100310"></a>Ацетонитрил перегоняют при температуре 81,5 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 81,5 °C, отбрасывают.
<a id="p100311"></a>7.1.2. Очистка ацетона. Ацетон, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 5 - 6 ч. Затем ацетон сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 000 см3 аппарата для перегонки растворителей, прибавляют туда марганцовокислый калий из расчета 100 мг/дм3. Ацетон перегоняют при температуре 56,2 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 56,2 °C, отбрасывают.
<a id="p100312"></a>7.1.3. Приготовление бидистиллированной воды. Дистиллированную воду помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 000 см3 от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к ней марганцовокислый калий из расчета 1 г/дм3 и кипятят в течение 6 ч.
<a id="p100313"></a>Собирают фракции, отогнанные при температуре 100,0 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 100,0 °C, отбрасывают.
<a id="p100314"></a>7.1.4. Очистка хлористого метилена. Хлористый метилен промывают равным объемом 5% раствора натрия углекислого (безводного), осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 12 - 24 ч. Затем хлористый метилен сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 000 см3 аппарата для перегонки растворителей. Хлористый метилен перегоняют при температуре 40,0 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 40,0 °C, отбрасывают.
<a id="p100315"></a>7.1.5. Очистка гексана. Гексан, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 5 - 6 ч. Затем гексан сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 000 см3 аппарата для перегонки растворителей.
<a id="p100316"></a>Гексан перегоняют при температуре 68,7 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 68,7 °C, отбрасывают.


#### <a id="p100317"></a>7.2 Приготовление растворов для проведения анализа



##### <a id="p100318"></a>7.2.1 Приготовление рабочих растворов


<a id="p100319"></a>7.2.1.1. Приготовление 0,1%-го водного раствора муравьиной кислоты. В мерную колбу объемом 1 дм3 помещают 500 см3 бидистиллированной воды, прибавляют 1,0 см3 муравьиной кислоты, перемешивают, объем доводят до метки бидистиллированной водой.
<a id="p100320"></a>7.2.1.2. Приготовление 1 М раствора гидроокиси натрия. В мерную колбу на 500 см3 переносят 20 г гидроокиси натрия, добавляют 200 - 300 см3 дистиллированной воды. Затем раствор перемешивают и после охлаждения доводят водой объем в колбе до метки (при приготовлении раствора соблюдать осторожность и работать под тягой).
<a id="p100321"></a>7.2.1.3. Приготовление 0,05 М раствора двузамещенного фосфорнокислого калия. В мерную колбу на 500 см3 переносят 5,7 г двузамещенного фосфорнокислого калия и 50 г хлористого натрия, добавляют 200 - 300 см3 бидистиллированной воды, перемешивают до полного растворения солей, проверяют pH полученного раствора. Если pH раствора менее 9, доводят его до указанного значения с помощью 1 М раствора гидроокиси натрия, контролируя pH. После достижения нужного значения pH объем доводят водой до метки. Раствор хранят не более 3 месяцев при комнатной температуре.


##### <a id="p100322"></a>7.2.2 Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ


<a id="p100323"></a>Для приготовления подвижной фазы используют свежеперегнанные ацетонитрил и 0,1%-й водный раствор муравьиной кислоты.
<a id="p100324"></a>В плоскодонную колбу объемом 1 дм3 помещают 600 см3 ацетонитрила и 350 см3 0,1%-го водного раствора муравьиной кислоты. Смесь тщательно перемешивают, пропускают через нее газообразный гелий со скоростью 20 см3/мин в течение 5 мин, после чего помещают в ультразвуковую ванну для удаления растворенных газов на 1 мин.


##### <a id="p100325"></a>7.2.3 Приготовление градуировочных растворов


<a id="p100326"></a>7.2.3.1. Стандартный раствор N 1 с концентрацией пентиопирада 1,0 мг/см3. Взвешивают 50 мг пентиопирада в мерной колбе объемом 50 см3. Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом. Полученный стандартный раствор N 1 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 1 хранится в холодильнике в течение 6 месяцев.
<a id="p100327"></a>7.2.3.2. Стандартный раствор N 2 с концентрацией пентиопирада 10,0 мкг/см3. Из стандартного раствора N 1 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу объемом 100 см3 и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор N 2 используется для приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 2 хранится в холодильнике не более 3 месяцев.
<a id="p100328"></a>7.2.3.3. Стандартный раствор N 3 с концентрацией пентиопирада 1,0 мкг/см3. Из стандартного раствора N 2 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 1:1. Стандартный раствор N 3 используется для приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 3 хранится в холодильнике не более 1 месяца.
<a id="p100329"></a>7.2.3.4. Стандартный раствор N 4 с концентрацией пентиопирада 0,5 мкг/см3. Из стандартного раствора N 3 отбирают пипеткой 5 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 1:1. Стандартный раствор N 4 используется для приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 4 хранится в холодильнике не более 1 месяца.
<a id="p100330"></a>7.2.3.5. Стандартный раствор N 5 с концентрацией пентиопирада 0,2 мкг/см3. Из стандартного раствора N 2 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу объемом 50 см3 и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 1:1. Стандартный раствор N 5 используется для приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 5 хранится в холодильнике не более 1 месяца.
<a id="p100331"></a>7.2.3.6. Стандартный раствор N 6 с концентрацией пентиопирада 0,1 мкг/см3. Из стандартного раствора N 2 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу объемом 100 см3 и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 1:1. Стандартный раствор N 6 используется для приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 5 хранится в холодильнике не более 1 месяца.
<a id="p100332"></a>7.2.3.7. Стандартные растворы пентиопирада с концентрацией 5,0; 2,0; 1,0; 0,5; 0,4 и 0,2 мкг/см3 для внесения в контрольные образцы. Из стандартного раствора N 2 методом последовательного разведения ацетонитрилом готовят растворы, содержащие по 5,0; 2,0; 1,0; 0,5; 0,4 и 0,2 мкг/см3 и используют эти растворы для внесения в контрольные образцы. Стандартные растворы для внесения хранят в холодильнике не более месяца.
<a id="p100333"></a>7.2.3.8. Стандартные растворы пентиопирада с концентрацией 5,0; 2,0; 1,0 и 0,5 мкг/см3 для внесения в контрольные образцы растительных масел. Из стандартного раствора N 2 методом последовательного разведения ацетоном готовят растворы, содержащие по 5,0; 2,0; 1,0 и 0,5 мкг/см3 и используют эти растворы для внесения в контрольные образцы растительных масел. Стандартные растворы для внесения хранят в холодильнике не более месяца.


#### <a id="p100334"></a>7.3 Установление градуировочной характеристики


<a id="p100335"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади (высоты) пика от концентрации пентиопирада в растворе (мкг/см3), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки с концентрацией 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/см3.
<a id="p100336"></a>В инжектор хроматографа вводят по 20 мм3 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 9.5](#p100391). Осуществляют не менее 5 параллельных измерений.


#### <a id="p100337"></a>7.4 Подготовка колонки с окисью алюминия для очистки

экстракта и проверка хроматографического поведения
пентиопирада на ней


##### <a id="p100338"></a>7.4.1 Подготовка колонки с окисью алюминия

для очистки экстракта

<a id="p100339"></a>В пластиковую или стеклянную колонку диаметром 15 мм помещают 3 г окиси алюминия с зернением 40/250 меш. и, аккуратно постукивая по стенкам колонки, формируют слой адсорбента. Непосредственно перед использованием колонку промывают 10 см3 ацетонитрила.


##### <a id="p100340"></a>7.4.2 Проверка хроматографического поведения пентиопирада

на колонке с окисью алюминия

<a id="p100341"></a>В концентратор объемом 100 см3 вносят 1 см3 стандартного раствора пентиопирада в ацетонитриле с концентрацией 1,0 мкг/см3 и выпаривают его досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C. Сухой остаток растворяют в 10 см3 ацетонитрила, тщательно обмывают стенки концентратора и наносят на подготовленную колонку. Элюат собирают в концентратор и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100342"></a>Исходный концентратор последовательно обмывают двумя порциями по 10 см3 ацетонитрила. Каждую порцию собирают отдельно в концентраторы объемом по 100 см3 и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100343"></a>Сухой остаток каждой фракции растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 20 мм3 пробы вводят в хроматограф.
<a id="p100344"></a>Определяют фракции, содержащие пентиопирад, полноту смывания с колонки и необходимый объем элюента.
<a id="p100345"></a>Изучение поведения пентиопирада на колонке проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии окиси алюминия.


#### <a id="p100346"></a>7.5 Подготовка колонки с флоризилом для очистки экстракта

и проверка хроматографического поведения пентиопирада на ней


##### <a id="p100347"></a>7.5.1 Подготовка колонки с флоризилом для очистки экстракта


<a id="p100348"></a>В пластиковую или стеклянную колонку диаметром 15 мм помещают 4 г флоризила с зернением 60/100 меш. и, аккуратно постукивая по стенкам колонки, формируют слой адсорбента. На слой флоризила наносят слой безводного сернокислого натрия толщиной 1 см.
<a id="p100349"></a>Непосредственно перед использованием колонку последовательно промывают 10 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 8:2, а затем 15 см3 гексана.


##### <a id="p100350"></a>7.5.2 Проверка хроматографического поведения пентиопирада

на колонке с флоризилом

<a id="p100351"></a>Из стандартного раствора пентиопирада в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/см3, отбирают 1 см3, помещают в круглодонную колбу объемом 100 см3 и упаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 30 °C. Сухой остаток растворяют в 1 см3 ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 9 см3 гексана, перемешивают и полученный раствор вносят на колонку. Элюат собирают в концентратор, упаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и хроматографируют.
<a id="p100352"></a>Исходную колбу последовательно обмывают 10 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 9:1, 10 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 4:1 и 5 порциями объемом 5 см3 каждая смеси гексана с ацетоном в соотношении 2:1. Каждую порцию собирают отдельно в концентраторы и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100353"></a>Сухой остаток каждой фракции растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и хроматографируют.
<a id="p100354"></a>Определяют фракции, содержащие пентиопирад, полноту смывания с колонки и необходимый объем элюента.
<a id="p100355"></a>Изучение поведения пентиопирада на колонке проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии флоризила.


#### <a id="p100356"></a>7.6 Подготовка и кондиционирование колонки

для жидкостной хроматографии

<a id="p100357"></a>Хроматографическую колонку с предколонкой устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при температуре 30 °C и скорости потока подвижной фазы 1 см3/мин 3 - 4 ч.


### 8. <a id="p100358"></a>Отбор проб и хранение


<a id="p100359"></a>Отбор проб проводится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" N 2051-79 от 21.08.79, а также в соответствии с [ГОСТ Р 55906-13](https://bukva.ai/docs/gost-r-55906-2013) "Томаты свежие, реализуемые в розничной торговой сети", [ГОСТ Р 32876-14](https://bukva.ai/docs/standart-gost-32876-2014) "Консервы. Соки овощные, Сок томатный. ТУ", [ГОСТ 32786-14](https://bukva.ai/docs/gost-32786-2014) "Виноград свежий столовый. ТУ", [ГОСТ Р 52184-03](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-414-st-gosstandart-rossii) "Соки плодовые и ягодные натуральные. ТУ", [ГОСТ 22391-89](https://bukva.ai/docs/gost-22391-89) "Подсолнечник. Требования при заготовках и поставках", [ГОСТ 1129-13](https://bukva.ai/docs/gost-1129-2013) "Масло подсолнечное. ТУ", [ГОСТ 31759-12](https://bukva.ai/docs/gost-31759-2012) "Масло рапсовое. ТУ", [ГОСТ 10852-86](https://bukva.ai/docs/3979) "Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб", [ГОСТ 17109-88](https://bukva.ai/docs/gost-17109-88) "Соя. Требования при заготовках и поставках", [ГОСТ 31760-12](https://bukva.ai/docs/gost-31760-2012) "Масло соевое. ТУ", [ГОСТ 32190-13](https://bukva.ai/docs/gost-32190-2013) "Масла растительные. Правила приемки и методы отбора проб".
<a id="p100360"></a>Пробы плодов томатов и ягод винограда хранят в холодильнике в полиэтиленовых пакетах при температуре 0 - 4 °C в течение суток. Для длительного хранения пробы замораживают и хранят в морозильной камере при температуре -18 °C.
<a id="p100361"></a>Отобранные пробы семян подсолнечника, рапса и сои подсушивают до стандартной влажности и хранят в бумажных или тканевых мешочках в сухом, хорошо проветриваемом шкафу, недоступном для грызунов.
<a id="p100362"></a>Пробы томатного и виноградного соков, а также подсолнечного, рапсового и соевого масел хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре 4 °C не более 10 суток.


### 9. <a id="p100363"></a>Выполнение определения



#### <a id="p100364"></a>9.1 Плоды томатов и ягоды винограда



##### <a id="p100365"></a>9.1.1 Экстракция


<a id="p100366"></a>Образец измельченных плодов томатов массой 10 г или измельченных ягод винограда массой 20 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции объемом 250 см3, прибавляют 30 см3 ацетонитрила и помещают на 5 мин в ультразвуковую ванну. Экстракт фильтруют в коническую колбу объемом 250 см3 с 5 г хлорида натрия через фильтр низкой плотности. Экстракцию повторяют еще два раза, используя по 30 см3 ацетонитрила в тех же условиях. Ацетонитрильные экстракты объединяют в конической колбе объемом 250 см3 с 5 г хлорида натрия, перемешивают и выдерживают 10 мин при комнатной температуре.
<a id="p100367"></a>Затем объединенный экстракт из колбы переносят в делительную воронку (не растворившуюся соль оставляют в колбе) объемом 250 см3, оставляют до полного разделения слоев в делительной воронке. Нижний водный слой отбрасывают, а верхний ацетонитрильный слой собирают через слой безводного сульфата натрия в концентратор объемом 250 см3 и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.


##### <a id="p100368"></a>9.1.2 Очистка экстракта на колонке с флоризилом


<a id="p100369"></a>Сухой остаток, полученный в [п. 9.1.1](#p100365), растворяют в 1 см3 ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 9 см3 гексана, перемешивают и полученный раствор вносят на колонку, элюат отбрасывают. Исходный концентратор обмывают 10 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 9:1 и 10 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 4:1, элюаты отбрасывают. Исходный концентратор обмывают 20 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 2:1, вносят на колонку, элюат собирают в концентратор объемом 100 см3 и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не более 30 °C.
<a id="p100370"></a>Сухой остаток растворяют в 5 см3 (для ягод винограда - в 2 см3) смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 20 мм3 пробы вводят в хроматограф.


#### <a id="p100371"></a>9.2 Томатный и виноградный сок



##### <a id="p100372"></a>9.2.1 Экстракция


<a id="p100373"></a>Навеску томатного сока массой 10 г или виноградного сока массой 20 г помещают в делительную воронку объемом 250 см3, добавляют 10 см3 насыщенного раствора хлорида натрия, перемешивают содержимое воронки, приливают 20 см3 ацетонитрила и встряхивают содержимое воронки в течение двух минут. После разделения фаз нижний слой сливают в стакан объемом 100 см3, а ацетонитрил пропускают через безводный сульфат натрия и собирают в концентратор объемом 250 см3. Водно-солевую фазу из стакана возвращают в делительную воронку и повторяют экстракцию пентиопирада в ацетонитрил еще 2 раза, используя каждый раз по 20 см3 ацетонитрила и встряхивая смесь в течение двух минут. Объединенный ацетонитрильный экстракт выпаривают до водного остатка на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100374"></a>Далее проводят очистку экстракта по схеме, указанной в [п. 9.1.2](#p100368).
<a id="p100375"></a>Сухой остаток растворяют в 5 см3 (для виноградного сока - в 2 см3) смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 20 мм3 пробы вводят в хроматограф.


#### <a id="p100376"></a>9.3 Семена подсолнечника, рапса и сои



##### <a id="p100377"></a>9.3.1 Экстракция


<a id="p100378"></a>Образец измельченных семян подсолнечника (рапса или сои) массой 10 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции объемом 250 см3, прибавляют 30 см3 ацетонитрила и помещают на 5 минут в ультразвуковую ванну, а затем на 5 минут на аппарат для встряхивания проб. Ацетонитрильный экстракт фильтруют в концентратор объемом 250 см3 через фильтр низкой плотности. Экстракцию повторяют еще два раза, используя по 30 см3 ацетонитрила, в тех же условиях. Ацетонитрильные экстракты объединяют в концентраторе объемом 250 см3 и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.


##### <a id="p100379"></a>9.3.2 Очистка экстракта на колонке с флоризилом


<a id="p100380"></a>Сухой остаток, полученный в [п. 9.3.1](#p100377), растворяют в 1 см3 ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 9 см3 гексана и проводят очистку экстракта по схеме, указанной в [п. 9.1.2](#p100368).


##### <a id="p100381"></a>9.3.3 Очистка экстракта на колонке с окисью алюминия


<a id="p100382"></a>Сухой остаток, полученный в [п. 9.3.2](#p100379), растворяют в 10 см3 ацетонитрила, тщательно обмывают стенки концентратора, наносят на подготовленную колонку, элюат собирают в концентратор. Исходную колбу обмывают 10 см3 ацетонитрила и вносят на колонку. Элюаты объединяют и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100383"></a>Сухой остаток растворяют в 5 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 20 мм3 пробы вводят в хроматограф.


#### <a id="p100384"></a>9.4 Масло подсолнечника, рапса и сои



##### <a id="p100385"></a>9.4.1 Экстракция


<a id="p100386"></a>Из пробы растительного масла отбирают в стакан навеску массой 10 г и переносят ее в делительную воронку объемом 250 см3 двумя порциями гексана объемом по 25 см3. Пентиопирад экстрагируют тремя порциями ацетонитрила объемом по 30 см3, встряхивая делительную воронку 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний ацетонитрильный слой объединяют в концентраторе объемом 250 см3 и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C. Верхний слой (гексан) отбрасывают.


##### <a id="p100387"></a>9.4.2 Очистка экстракта перераспределением в системе

несмешивающихся растворителей

<a id="p100388"></a>К маслянистому остатку, полученному по [п. 9.4.1](#p100385), добавляют 5 см3 ацетонитрила, 100 см3 0,05 М щелочного буфера (pH 9), тщательно обмывают стенки концентратора и переносят в делительную воронку объемом 250 см3. Пентиопирад экстрагируют тремя порциями хлористого метилена объемом по 30 см3, встряхивая каждый раз делительную воронку по 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке хлористый метилен собирают через слой безводного сульфата натрия в концентратор объемом 250 см3 и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100389"></a>Далее проводят очистку экстракта по [п. 9.1.2](#p100368) и [9.3.3](#p100381).
<a id="p100390"></a>Сухой остаток растворяют в 5 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 10 мм3 пробы вводят в хроматограф.


#### <a id="p100391"></a>9.5 Условия хроматографирования


<a id="p100392"></a>Хроматографическая система, включающая:
- <a id="p100393"></a>хроматограф жидкостный с диодно-матричным детектором, снабженный термостатом для колонок с диапазоном температур от 15 до 80 °C и стандартным автосамплером с дозирующим объемом от 0,1 до 100 мм3 для автоматического ввода пробы в хроматографическую систему;
- <a id="p100394"></a>компьютерное программное обеспечение, контролирующее работу всего прибора, обеспечивающее сбор и хранение всех хроматограмм в процессе проведения хроматографического анализа, обеспечивающее обработку результатов измерений, вывод и расчет хроматограмм и количественный анализ.
<a id="p100395"></a>Колонка хроматографическая стальная длиной 150 мм с внутренним диаметром 4,6 мм, зернением 3,5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами C18.
<a id="p100396"></a>Предколонка хроматографическая стальная длиной 4 мм, внутренним диаметром 4 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами C18.
<a id="p100397"></a>Температура колонки: 30 °C.
<a id="p100398"></a>Подвижная фаза: ацетонитрил - 0,1%-я муравьиная кислота в соотношении 600:350.
<a id="p100399"></a>Длина волны: 240 нм.
<a id="p100400"></a>Скорость потока элюента: 0,3 см3/мин.
<a id="p100401"></a>Чувствительность: не менее 12 mAU (миллиединиц абсорбции) на шкалу.
<a id="p100402"></a>Объем вводимой пробы: 20 мм3.
<a id="p100403"></a>Линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 2 - 20 нг.
<a id="p100404"></a>Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор пентиопирада с концентрацией 1,0 мкг/см3, соответственно разбавляют.


### 10. <a id="p100405"></a>Обработка результатов


<a id="p100406"></a>Для обработки результатов хроматографического анализа используется компьютерное программное обеспечение химического анализа, которое входит в хроматографическую систему.
<a id="p100407"></a>Альтернативная обработка результатов.
<a id="p100408"></a>Содержание пентиопирада рассчитывают по формуле без учета полноты извлечения вещества из проб:

<a id="p100409"></a> $X = \frac{S_{\text{пр}} \cdot A \cdot V}{100 \cdot S_{\text{ст}} \cdot m} P$ , где

<a id="p100410"></a>X - содержание пентиопирада в пробе, мг/кг;
<a id="p100411"></a>Sст - высота (площадь) пика стандарта, мм;
<a id="p100412"></a>Sпр - высота (площадь) пика образца, мм;
<a id="p100413"></a>A - концентрация стандартного раствора, мкг/см3;
<a id="p100414"></a>V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3;
<a id="p100415"></a>m - масса анализируемого образца, г;
<a id="p100416"></a>P - содержание пентиопирада в аналитическом стандарте, %.


### 11. <a id="p100417"></a>Проверка приемлемости результатов параллельных определений


<a id="p100418"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости:

<a id="p100419"></a> $\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{X_{1} + X_{2}} \leq r$ , где (1)

<a id="p100420"></a>X<sub>1</sub>, X<sub>2</sub> - результаты параллельных определений, мг/кг;
<a id="p100421"></a>r - значение предела повторяемости [(табл. 1)](#p100034), при этом $r = 2,8 \times \sigma_{r}$ .
<a id="p100422"></a>При невыполнении [условия (1)](#p100419) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


### 12. <a id="p100423"></a>Оформление результатов


<a id="p100424"></a>Результат анализа представляют в виде:

<a id="p100425"></a> $(\overline{X} \pm \Delta)$ , мг/кг при вероятности P = 0,95, где

<a id="p100426"></a> $\overline{X}$ - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
<a id="p100427"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

<a id="p100428"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot \overline{X}}{100}$ , где

<a id="p100429"></a> $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100034)), %.
<a id="p100430"></a>В случае, если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100431"></a>"содержание вещества в пробе менее 0,01 мг/кг". <*>

<a id="p100432"></a>

---

<a id="p100433"></a><*> 0,01 мг/кг - предел обнаружения.


### 13. <a id="p100434"></a>Контроль качества результатов измерений


<a id="p100435"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений, а также контроль стабильности градуировочной характеристики осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-02](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-2-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

#### <a id="p100436"></a>13.1 Контроль стабильности градуировочной характеристики.

<a id="p100437"></a>Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100438"></a>Контроль стабильности градуировочной характеристики для пентиопирада проводят при смене основного градуировочного раствора N 1 каждые шесть месяцев, при смене основных градуировочных растворов N 2, 3, 4, 5 и 6 - каждый месяц, а также в начале и окончании каждой серии анализов.
<a id="p100439"></a>При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее трех образцов концентраций для градуировки, содержание пентиопирада в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,1 до 1,0 мкг/см3.
<a id="p100440"></a>Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:

<a id="p100441"></a> $A = \frac{(X - C)}{C} \cdot 100 \leq 1,48$ , где

<a id="p100442"></a>X - концентрация пентиопирада контрольного измерения, мкг/см3;
<a id="p100443"></a>C - известная концентрация градуировочного раствора пентиопирада в смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3;
<a id="p100444"></a>1,48 - погрешность градуировочной характеристики, %.
<a id="p100445"></a>Если величина расхождения (A) превышает 1,48%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов пентиопирада, предусмотренных МВИ. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики определяют ее заново согласно [п. 7.3](#p100334).
<a id="p100446"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
<a id="p100447"></a>Величина добавки $C_{\partial}$ должна удовлетворять условию:

<a id="p100448"></a> $C_{\partial} = \Delta_{\text{л},X} + \Delta_{\text{л},X\prime}$ , где

<a id="p100449"></a> $\pm \Delta_{\text{л},X}( \pm \Delta_{\text{л},X\prime})$ - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно) мг/кг, при этом:

<a id="p100450"></a> $\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta$ , где

<a id="p100451"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

<a id="p100452"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot \overline{X}}{100}$ , где

<a id="p100453"></a> $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100034)), %.
<a id="p100454"></a>Результат контроля процедуры Kк рассчитывают по формуле:

<a id="p100455"></a> $\text{К}_{\text{к}} = \overline{X}\prime - \overline{X} - C_{\partial}$ , где

<a id="p100456"></a> $\overline{X}\prime$ , $\overline{X}$ , Cд - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100417)), содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце и концентрация добавки соответственно, мг/кг.
<a id="p100457"></a>Норматив контроля K рассчитывают по формуле:

<a id="p100458"></a> $\text{К } = \sqrt{\Delta_{\text{л},X\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},X}^{2}}$ 

<a id="p100459"></a>Проводят сопоставление результата контроля процедуры (Kк) с нормативом контроля (K).
<a id="p100460"></a>Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

<a id="p100461"></a>|Kк| <= K, (2)

<a id="p100462"></a>процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100463"></a>При невыполнении [условия (2)](#p100461) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении [условия (2)](#p100461) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
<a id="p100464"></a>13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
<a id="p100465"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):

<a id="p100466"></a> $\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}|}{X_{1} + X_{2}} \cdot 100 \leq R$ , где (3)

<a id="p100467"></a>X1, X2 - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
<a id="p100468"></a>R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100034)), %.





<a id="p100469"></a>Приложение 1

<a id="p100470"></a>**ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ ПЕНТИОПИРАДА ИЗ ПЛОДОВ ТОМАТОВ,**
**ТОМАТНОГО СОКА, ЯГОД ВИНОГРАДА, ВИНОГРАДНОГО СОКА,**
**СЕМЯН И МАСЛА ПОДСОЛНЕЧНИКА, РАПСА И СОИ**
**(5 ПОВТОРНОСТЕЙ ДЛЯ КАЖДОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ, P = 0,95)**


<table>
<colgroup><col width="25%"><col width="25%"><col width="25%"><col width="25%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100471"></a>Среда</td><td><a id="p100472"></a>Внесено пентиопирада, мг/кг</td><td><a id="p100473"></a>Обнаружено пентиопирада, мг/кг</td><td><a id="p100474"></a>Полнота определения, %</td></tr>
<tr><td rowspan="4"><a id="p100475"></a>Плоды томатов</td><td><a id="p100476"></a>0,05</td><td><a id="p100477"></a>0,0425 +/- 0,0009</td><td><a id="p100478"></a>85,0</td></tr>
<tr><td><a id="p100479"></a>0,10</td><td><a id="p100480"></a>0,0822 +/- 0,0018</td><td><a id="p100481"></a>82,2</td></tr>
<tr><td><a id="p100482"></a>0,20</td><td><a id="p100483"></a>0,1632 +/- 0,0041</td><td><a id="p100484"></a>81,6</td></tr>
<tr><td><a id="p100485"></a>0,50</td><td><a id="p100486"></a>0,4087 +/- 0,0121</td><td><a id="p100487"></a>81,7</td></tr>
<tr><td rowspan="4"><a id="p100488"></a>Томатный сок</td><td><a id="p100489"></a>0,05</td><td><a id="p100490"></a>0,0392 +/- 0,0010</td><td><a id="p100491"></a>78,4</td></tr>
<tr><td><a id="p100492"></a>0,10</td><td><a id="p100493"></a>0,0842 +/- 0,0010</td><td><a id="p100494"></a>84,2</td></tr>
<tr><td><a id="p100495"></a>0,20</td><td><a id="p100496"></a>0,1705 +/- 0,0040</td><td><a id="p100497"></a>85,3</td></tr>
<tr><td><a id="p100498"></a>0,50</td><td><a id="p100499"></a>0,4293 +/- 0,0108</td><td><a id="p100500"></a>85,9</td></tr>
<tr><td rowspan="4"><a id="p100501"></a>Ягоды винограда</td><td><a id="p100502"></a>0,01</td><td><a id="p100503"></a>0,0087 +/- 0,0002</td><td><a id="p100504"></a>87,2</td></tr>
<tr><td><a id="p100505"></a>0,02</td><td><a id="p100506"></a>0,0167 +/- 0,0003</td><td><a id="p100507"></a>83,3</td></tr>
<tr><td><a id="p100508"></a>0,05</td><td><a id="p100509"></a>0,0466 +/- 0,0010</td><td><a id="p100510"></a>93,2</td></tr>
<tr><td><a id="p100511"></a>0,10</td><td><a id="p100512"></a>0,0919 +/- 0,0012</td><td><a id="p100513"></a>91,9</td></tr>
<tr><td rowspan="4"><a id="p100514"></a>Виноградный сок</td><td><a id="p100515"></a>0,01</td><td><a id="p100516"></a>0,0072 +/- 0,0001</td><td><a id="p100517"></a>71,6</td></tr>
<tr><td><a id="p100518"></a>0,02</td><td><a id="p100519"></a>0,0169 +/- 0,0003</td><td><a id="p100520"></a>84,3</td></tr>
<tr><td><a id="p100521"></a>0,05</td><td><a id="p100522"></a>0,0422 +/- 0,0008</td><td><a id="p100523"></a>84,4</td></tr>
<tr><td><a id="p100524"></a>0,10</td><td><a id="p100525"></a>0,0857 +/- 0,0016</td><td><a id="p100526"></a>85,7</td></tr>
<tr><td rowspan="4"><a id="p100527"></a>Семена подсолнечника</td><td><a id="p100528"></a>0,05</td><td><a id="p100529"></a>0,0396 +/- 0,0012</td><td><a id="p100530"></a>79,3</td></tr>
<tr><td><a id="p100531"></a>0,10</td><td><a id="p100532"></a>0,0868 +/- 0,0018</td><td><a id="p100533"></a>86,8</td></tr>
<tr><td><a id="p100534"></a>0,20</td><td><a id="p100535"></a>0,1648 +/- 0,0037</td><td><a id="p100536"></a>82,4</td></tr>
<tr><td><a id="p100537"></a>0,50</td><td><a id="p100538"></a>0,4075 +/- 0,0130</td><td><a id="p100539"></a>81,5</td></tr>
<tr><td rowspan="4"><a id="p100540"></a>Масло подсолнечника</td><td><a id="p100541"></a>0,05</td><td><a id="p100542"></a>0,0439 +/- 0,0007</td><td><a id="p100543"></a>87,9</td></tr>
<tr><td><a id="p100544"></a>0,10</td><td><a id="p100545"></a>0,0827 +/- 0,0018</td><td><a id="p100546"></a>82,7</td></tr>
<tr><td><a id="p100547"></a>0,20</td><td><a id="p100548"></a>0,1758 +/- 0,0032</td><td><a id="p100549"></a>87,9</td></tr>
<tr><td><a id="p100550"></a>0,50</td><td><a id="p100551"></a>0,4335 +/- 0,0064</td><td><a id="p100552"></a>86,7</td></tr>
<tr><td rowspan="4"><a id="p100553"></a>Семена рапса</td><td><a id="p100554"></a>0,05</td><td><a id="p100555"></a>0,0431 +/- 0,0011</td><td><a id="p100556"></a>86,1</td></tr>
<tr><td><a id="p100557"></a>0,10</td><td><a id="p100558"></a>0,0839 +/- 0,0016</td><td><a id="p100559"></a>83,9</td></tr>
<tr><td><a id="p100560"></a>0,20</td><td><a id="p100561"></a>0,1776 +/- 0,0014</td><td><a id="p100562"></a>88,8</td></tr>
<tr><td><a id="p100563"></a>0,50</td><td><a id="p100564"></a>0,4475 +/- 0,0070</td><td><a id="p100565"></a>89,5</td></tr>
<tr><td rowspan="4"><a id="p100566"></a>Масло рапса</td><td><a id="p100567"></a>0,05</td><td><a id="p100568"></a>0,0425 +/- 0,0011</td><td><a id="p100569"></a>85,0</td></tr>
<tr><td><a id="p100570"></a>0,10</td><td><a id="p100571"></a>0,0876 +/- 0,0013</td><td><a id="p100572"></a>87,6</td></tr>
<tr><td><a id="p100573"></a>0,20</td><td><a id="p100574"></a>0,1588 +/- 0,0015</td><td><a id="p100575"></a>79,4</td></tr>
<tr><td><a id="p100576"></a>0,50</td><td><a id="p100577"></a>0,4083 +/- 0,0061</td><td><a id="p100578"></a>81,7</td></tr>
<tr><td rowspan="4"><a id="p100579"></a>Семена сои</td><td><a id="p100580"></a>0,05</td><td><a id="p100581"></a>0,0426 +/- 0,0011</td><td><a id="p100582"></a>85,3</td></tr>
<tr><td><a id="p100583"></a>0,10</td><td><a id="p100584"></a>0,0841 +/- 0,0014</td><td><a id="p100585"></a>84,1</td></tr>
<tr><td><a id="p100586"></a>0,20</td><td><a id="p100587"></a>0,1666 +/- 0,0033</td><td><a id="p100588"></a>83,3</td></tr>
<tr><td><a id="p100589"></a>0,50</td><td><a id="p100590"></a>0,4372 +/- 0,0080</td><td><a id="p100591"></a>87,4</td></tr>
<tr><td rowspan="4"><a id="p100592"></a>Масло сои</td><td><a id="p100593"></a>0,05</td><td><a id="p100594"></a>0,0427 +/- 0,0011</td><td><a id="p100595"></a>85,4</td></tr>
<tr><td><a id="p100596"></a>0,10</td><td><a id="p100597"></a>0,0829 +/- 0,0013</td><td><a id="p100598"></a>82,9</td></tr>
<tr><td><a id="p100599"></a>0,20</td><td><a id="p100600"></a>0,1701 +/- 0,0027</td><td><a id="p100601"></a>85,1</td></tr>
<tr><td><a id="p100602"></a>0,50</td><td><a id="p100603"></a>0,4441 +/- 0,0083</td><td><a id="p100604"></a>88,8</td></tr>
</table>




<a id="p100605"></a>

---