---
title: "\"МУК 4.1.3410-16. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств валифеналата в воде, почве, ботве и клубнях картофеля, винограде и виноградном соке и его метаболитов (IR 5839 и PCBA) в воде и почве методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.3410-16"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-3410-16"
---

## "МУК 4.1.3410-16. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств валифеналата в воде, почве, ботве и клубнях картофеля, винограде и виноградном соке и его метаболитов (IR 5839 и PCBA) в воде и почве методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием. Методические указания"

# "МУК 4.1.3410-16. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств валифеналата в воде, почве, ботве и клубнях картофеля, винограде и виноградном соке и его метаболитов (IR 5839 и PCBA) в воде и почве методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 29.12.2016)


<a id="p100001"></a>Утверждаю
Руководитель Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека,
Главный государственный санитарный врач
Российской Федерации
**А.Ю.ПОПОВА**
29 декабря 2016 года


#### <a id="p100002"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ВАЛИФЕНАЛАТА В ВОДЕ, ПОЧВЕ,**
**БОТВЕ И КЛУБНЯХ КАРТОФЕЛЯ, ВИНОГРАДЕ И ВИНОГРАДНОМ СОКЕ**
**И ЕГО МЕТАБОЛИТОВ (IR 5839 И PCBA) В ВОДЕ И ПОЧВЕ МЕТОДОМ**
**ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**
**С МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЧЕСКИМ ДЕТЕКТИРОВАНИЕМ**

<a id="p100004"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.3410-16**

1. <a id="p100005"></a>Разработаны сотрудниками ФГБНУ "Всероссийский НИИ защиты растений" и ООО "Инновационный центр защиты растений" (В.И. Долженко, И.А. Цибульская, А.С. Комарова, Т.Д. Черменская).
2. <a id="p100006"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 22 декабря 2016 г. N 2).
3. <a id="p100007"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 29 декабря 2016 г.
4. <a id="p100008"></a>Введены впервые.

<a id="p100009"></a>Свидетельство о метрологической аттестации N 01.5.04.233/01.00043/2016.

<a id="p100010"></a>Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием для определения массовой концентрации валифеналата в воде в диапазоне концентраций 0,002 - 0,02 мг/л, в почве, ботве и клубнях картофеля, винограде и виноградном соке в диапазоне концентраций 0,01 - 0,1 мг/кг и его метаболитов в воде в диапазоне концентраций 0,002 - 0,02 мг/л, в почве в диапазоне концентраций 0,01 - 0,1 мг/кг.
<a id="p100011"></a>Методические указания носят рекомендательный характер.
<a id="p100012"></a>Валифеналат
<a id="p100013"></a>N-(изопропоксикарбонил)-L-валил-(3RS)-3-(4-хлорфенил)- $\beta$ -аланинат (ИЮПАК).

<a id="p100014"></a> ![рис. 1](https://i.bukva.ai/s8td7xPp/img_0.png) 

<a id="p100015"></a>Брутто формула: C<sub>19</sub>H<sub>27</sub>ClN<sub>2</sub>O<sub>5</sub>.
<a id="p100016"></a>Молекулярная масса: 398,9.
<a id="p100017"></a>Эквимолярная смесь диастереомеров (S,S- и S,R-).
<a id="p100018"></a>Белое кристаллическое вещество без запаха.
<a id="p100019"></a>Растворимость в воде 24,1 мг/л (pH от 4,9 до 5,9), 45,5 мг/л (pH от 9,5 до 9,8). Растворимость: в ацетоне - 29,3 г/л, дихлорэтане - 14,4 г/л, этилацетате - 25,4 г/л, н-гептане - 25 мг/л, метаноле - 28,8 г/л, ксилоле - 2,31 г/л.
<a id="p100020"></a>pKa = -1,78 (25 °C).
<a id="p100021"></a>Гидролитическая стабильность: стабилен при pH 4 и 50 °C, медленно при pH 7 и 25 °C, быстро при pH 9 и 50 °C. Основной продукт гидролиза при pH 9 IR-5839. Оба метаболита стабильны к гидролизу при нормальных условиях.
<a id="p100022"></a>Валифеналат имеет очень низкую персистентность в почве и быстро образует главный метаболит IR-5839, который, в свою очередь, также быстро деградирует до 4-хлорбензойной кислоты.
<a id="p100023"></a>Валифеналат не обладает острой пероральной, дермальной и ингаляционной токсичностью, не является ирритантом.
<a id="p100024"></a>IR-5839

<a id="p100025"></a> ![рис. 2](https://i.bukva.ai/s8td7xPp/img_1.png) 

<a id="p100026"></a>Брутто формула: C18H25ClN2O5.
<a id="p100027"></a>Молекулярная масса: 385.
<a id="p100028"></a>Пероральная токсичность для крыс ЛД50 > 2 000 мг/кг. Не генотоксичен.
<a id="p100029"></a>4-хлорбензойная кислота (PCBA)

<a id="p100030"></a> ![рис. 3](https://i.bukva.ai/s8td7xPp/img_2.png) 

<a id="p100031"></a>Брутто формула: C7H5ClO2.
<a id="p100032"></a>Молекулярная масса: 156,7.
<a id="p100033"></a>pKa = 3,98 (25 °C)
<a id="p100034"></a>Пероральная токсичность для крыс ЛД50 1 170 мг/кг. Не генотоксична.
<a id="p100035"></a>Гигиенические нормативы для валифеналата и его метаболитов в России не установлены.


## 1. <a id="p100036"></a>Погрешность измерений


<a id="p100037"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100038"></a>Таблица 1

<a id="p100039"></a>Метрологические параметры для 4-хлорбензойной кислоты


<table>
<colgroup><col width="13%"><col width="13%"><col width="13%"><col width="14%"><col width="14%"><col width="16%"><col width="16%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100040"></a>Анализируемый объект</td><td><a id="p100041"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/дм3)</td><td><a id="p100042"></a>Показатель точности <a href="#p100061">&lt;*&gt;</a> (границы относительной погрешности (P = 0,95), $\pm \delta$ , %</td><td><a id="p100043"></a>Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), $\sigma_{r}$ , %</td><td><a id="p100044"></a>Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадратическое отклонение воспроизводимости), $\sigma_{R}$ , %</td><td><a id="p100045"></a>Предел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных определений), r, %</td><td><a id="p100046"></a>Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученных в разных лабораториях), R, % (P = 0,95)</td></tr>
<tr><td><a id="p100047"></a>Вода</td><td><a id="p100048"></a>0,002 - 0,02</td><td><a id="p100049"></a>25</td><td><a id="p100050"></a>10</td><td><a id="p100051"></a>13</td><td><a id="p100052"></a>28</td><td><a id="p100053"></a>36</td></tr>
<tr><td><a id="p100054"></a>Почва</td><td><a id="p100055"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100056"></a>25</td><td><a id="p100057"></a>10</td><td><a id="p100058"></a>13</td><td><a id="p100059"></a>28</td><td><a id="p100060"></a>36</td></tr>
<tr><td colspan="7"><a id="p100061"></a>&lt;*&gt; Соответствует расширенной неопределенности Uотн. (в относительных единицах) при коэффициенте охвата k = 2</td></tr>
</table>


<a id="p100062"></a>Таблица 2

<a id="p100063"></a>Метрологические параметры для IR-5839


<table>
<colgroup><col width="13%"><col width="13%"><col width="13%"><col width="14%"><col width="14%"><col width="16%"><col width="16%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100064"></a>Анализируемый объект</td><td><a id="p100065"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/дм3)</td><td><a id="p100066"></a>Показатель точности <a href="#p100085">&lt;*&gt;</a> (границы относительной погрешности (P = 0,95), $\pm \delta$ ,%</td><td><a id="p100067"></a>Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), $\sigma_{r}$ , %</td><td><a id="p100068"></a>Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадратическое отклонение воспроизводимости), $\sigma_{R}$ , %</td><td><a id="p100069"></a>Предел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных определений), r, %</td><td><a id="p100070"></a>Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученных в разных лабораториях), R, % (P = 0,95)</td></tr>
<tr><td><a id="p100071"></a>Вода</td><td><a id="p100072"></a>0,002 - 0,02</td><td><a id="p100073"></a>25</td><td><a id="p100074"></a>10</td><td><a id="p100075"></a>13</td><td><a id="p100076"></a>28</td><td><a id="p100077"></a>36</td></tr>
<tr><td><a id="p100078"></a>Почва</td><td><a id="p100079"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100080"></a>25</td><td><a id="p100081"></a>10</td><td><a id="p100082"></a>13</td><td><a id="p100083"></a>28</td><td><a id="p100084"></a>36</td></tr>
<tr><td colspan="7"><a id="p100085"></a>&lt;*&gt; Соответствует расширенной неопределенности Uотн. (в относительных единицах) при коэффициенте охвата k = 2</td></tr>
</table>


<a id="p100086"></a>Таблица 3

<a id="p100087"></a>Метрологические параметры для валифеналата


<table>
<colgroup><col width="13%"><col width="13%"><col width="13%"><col width="14%"><col width="14%"><col width="16%"><col width="16%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100088"></a>Анализируемый объект</td><td><a id="p100089"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/дм3)</td><td><a id="p100090"></a>Показатель точности <a href="#p100137">&lt;*&gt;</a> (границы относительной погрешности (P = 0,95), $\pm \delta$ , %</td><td><a id="p100091"></a>Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), $\sigma_{r}$ , %</td><td><a id="p100092"></a>Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадратическое отклонение воспроизводимости), $\sigma_{R}$ , %</td><td><a id="p100093"></a>Предел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных определений), r, %</td><td><a id="p100094"></a>Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученных в разных лабораториях), R, % (P = 0,95)</td></tr>
<tr><td><a id="p100095"></a>Вода</td><td><a id="p100096"></a>0,002 - 0,02</td><td><a id="p100097"></a>25</td><td><a id="p100098"></a>10</td><td><a id="p100099"></a>13</td><td><a id="p100100"></a>28</td><td><a id="p100101"></a>36</td></tr>
<tr><td><a id="p100102"></a>Почва</td><td><a id="p100103"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100104"></a>25</td><td><a id="p100105"></a>10</td><td><a id="p100106"></a>13</td><td><a id="p100107"></a>28</td><td><a id="p100108"></a>36</td></tr>
<tr><td><a id="p100109"></a>Ботва картофеля</td><td><a id="p100110"></a>0,01 - 1,0</td><td><a id="p100111"></a>25</td><td><a id="p100112"></a>10</td><td><a id="p100113"></a>13</td><td><a id="p100114"></a>28</td><td><a id="p100115"></a>36</td></tr>
<tr><td><a id="p100116"></a>Клубни картофеля</td><td><a id="p100117"></a>0,01 - 1,0</td><td><a id="p100118"></a>25</td><td><a id="p100119"></a>10</td><td><a id="p100120"></a>13</td><td><a id="p100121"></a>28</td><td><a id="p100122"></a>36</td></tr>
<tr><td><a id="p100123"></a>Виноград</td><td><a id="p100124"></a>0,01 - 1,0</td><td><a id="p100125"></a>25</td><td><a id="p100126"></a>10</td><td><a id="p100127"></a>13</td><td><a id="p100128"></a>28</td><td><a id="p100129"></a>36</td></tr>
<tr><td><a id="p100130"></a>Виноградный сок</td><td><a id="p100131"></a>0,01 - 1,0</td><td><a id="p100132"></a>25</td><td><a id="p100133"></a>10</td><td><a id="p100134"></a>13</td><td><a id="p100135"></a>28</td><td><a id="p100136"></a>36</td></tr>
<tr><td colspan="7"><a id="p100137"></a>&lt;*&gt; Соответствует расширенной неопределенности Uотн. (в относительных единицах) при коэффициенте охвата k = 2</td></tr>
</table>


<a id="p100138"></a>Таблица 4

<a id="p100139"></a>Полнота извлечения 4-хлорбензойной кислоты, стандартное
отклонение, доверительный интервал среднего результата
для n = 20, P = 0,95


| <a id="p100140"></a>Анализируемый объект | <a id="p100141"></a>Предел обнаружения, мг/кг (мг/дм3) | <a id="p100142"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/дм3) | <a id="p100143"></a>Полнота извлечения, % | <a id="p100144"></a>Стандартное отклонение, S | <a id="p100145"></a>Доверительный интервал среднего результата, +/- % |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100146"></a>Вода | <a id="p100147"></a>0,002 | <a id="p100148"></a>0,002 - 0,02 | <a id="p100149"></a>81,7 | <a id="p100150"></a>2,87 | <a id="p100151"></a>1,26 |
| <a id="p100152"></a>Почва | <a id="p100153"></a>0,01 | <a id="p100154"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100155"></a>83,8 | <a id="p100156"></a>7,11 | <a id="p100157"></a>3,11 |


<a id="p100158"></a>Таблица 5

<a id="p100159"></a>Полнота извлечения IR-5839, стандартное отклонение,
доверительный интервал среднего результата
для n = 20, P = 0,95


| <a id="p100160"></a>Анализируемый объект | <a id="p100161"></a>Предел обнаружения, мг/кг (мг/дм3) | <a id="p100162"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/дм3) | <a id="p100163"></a>Полнота извлечения, % | <a id="p100164"></a>Стандартное отклонение, S | <a id="p100165"></a>Доверительный интервал среднего результата, +/- % |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100166"></a>Вода | <a id="p100167"></a>0,002 | <a id="p100168"></a>0,002 - 0,02 | <a id="p100169"></a>80,6 | <a id="p100170"></a>2,97 | <a id="p100171"></a>1,30 |
| <a id="p100172"></a>Почва | <a id="p100173"></a>0,01 | <a id="p100174"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100175"></a>82,5 | <a id="p100176"></a>4,26 | <a id="p100177"></a>1,87 |


<a id="p100178"></a>Таблица 6

<a id="p100179"></a>Полнота извлечения валифеналата, стандартное отклонение,
доверительный интервал среднего результата
для n = 20, P = 0,95


| <a id="p100180"></a>Анализируемый объект | <a id="p100181"></a>Предел обнаружения, мг/кг (мг/дм3) | <a id="p100182"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/дм3) | <a id="p100183"></a>Полнота извлечения, % | <a id="p100184"></a>Стандартное отклонение, S | <a id="p100185"></a>Доверительный интервал среднего результата, +/- % |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100186"></a>Вода | <a id="p100187"></a>0,002 | <a id="p100188"></a>0,002 - 0,02 | <a id="p100189"></a>80,5 | <a id="p100190"></a>3,22 | <a id="p100191"></a>1,41 |
| <a id="p100192"></a>Почва | <a id="p100193"></a>0,01 | <a id="p100194"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100195"></a>82,5 | <a id="p100196"></a>4,26 | <a id="p100197"></a>1,87 |
| <a id="p100198"></a>Ботва картофеля | <a id="p100199"></a>0,01 | <a id="p100200"></a>0,01 - 1,0 | <a id="p100201"></a>81,8 | <a id="p100202"></a>3,47 | <a id="p100203"></a>1,52 |
| <a id="p100204"></a>Клубни картофеля | <a id="p100205"></a>0,01 | <a id="p100206"></a>0,01 - 1,0 | <a id="p100207"></a>81,7 | <a id="p100208"></a>3,72 | <a id="p100209"></a>1,63 |
| <a id="p100210"></a>Виноград | <a id="p100211"></a>0,01 | <a id="p100212"></a>0,01 - 1,0 | <a id="p100213"></a>83,2 | <a id="p100214"></a>4,68 | <a id="p100215"></a>2,05 |
| <a id="p100216"></a>Виноградный сок | <a id="p100217"></a>0,01 | <a id="p100218"></a>0,01 - 1,0 | <a id="p100219"></a>82,0 | <a id="p100220"></a>3,67 | <a id="p100221"></a>1,61 |



## 2. <a id="p100222"></a>Метод измерений


<a id="p100223"></a>Метод основан на определении валифеналата и его метаболитов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием масс-спектрометрического детектора после извлечения из образцов ацетонитрилом и очистки ацетонитрильного экстракта на патронах для твердофазной экстракции (ТФЭ).
<a id="p100224"></a>Идентификация проводится по времени удерживания, количественное определение - методом абсолютной калибровки.
<a id="p100225"></a>Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографического анализа с масс-детектированием.


## 3. <a id="p100226"></a>Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы



#### <a id="p100227"></a>3.1 Средства измерений



| <a id="p100228"></a>Хромато-масс-спектрометр, состоящий из: |  |
| --- | --- |
| <a id="p100229"></a>- высокоэффективного жидкостного хроматографа; |  |
| <a id="p100230"></a>- масс-спектрометра с тройным квадруполем |  |
| <a id="p100231"></a>Весы лабораторные аналитические, наибольший предел взвешивания 150 г, предел допустимой погрешности 5 мг |  |
| <a id="p100232"></a>Весы лабораторные аналитические, наибольший предел взвешивания 81/210 г, предел допустимой погрешности 0,1/0,3 мг |  |
| <a id="p100233"></a>Индикаторная бумага, pH 0 - 14 |  |
| <a id="p100234"></a>Колбы мерные на 10, 100 см3 | <a id="p100235"></a>ГОСТ 23932-90 |
| <a id="p100236"></a>Микродозаторы одноканальные переменного объема от 100 до 1 000 мм3 и от 1 до 5 см3 |  |
| <a id="p100237"></a>Цилиндры мерные на 50 и 100 см3 | <a id="p100238"></a>ГОСТ 23932-90 |


<a id="p100239"></a>*Примечание.* Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.


#### <a id="p100240"></a>3.2 Реактивы



| <a id="p100241"></a>Ацетонитрил, осч | <a id="p100242"></a>ТУ 2634-002-54260861-13 |
| --- | --- |
| <a id="p100243"></a>Ацетонитрил для масс-спектрометрии |  |
| <a id="p100244"></a>Вода для лабораторного анализа (бидистиллированная, деионизованная) | <a id="p100245"></a>[ГОСТ Р 52501-05](https://bukva.ai/docs/gost-r-52501-2005) |
| <a id="p100246"></a>Этилацетат, хч | <a id="p100247"></a>[ГОСТ 22300-76](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76) |
| <a id="p100248"></a>Кислота муравьиная для масс-спектрометрии |  |
| <a id="p100249"></a>Натрий сернокислый безводный, хч | <a id="p100250"></a>[ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76) |
| <a id="p100251"></a>Натрий хлористый, чда | <a id="p100252"></a>ГОСТ 4233-77 |
| <a id="p100253"></a>Валифеналат с содержанием основного вещества 99,5% |  |
| <a id="p100254"></a>IR-5839, аналитический стандарт с содержанием основного вещества 98,6% |  |
| <a id="p100255"></a>4-хлорбензойная кислота с содержанием основного вещества 99,0% |  |
| <a id="p100256"></a>Смесь N 1: ацетонитрил-вода в соотношении 1:9 по объему |  |
| <a id="p100257"></a>Смесь N 2: ацетонитрил-вода в соотношении 1:4 по объему |  |
| <a id="p100258"></a>Смесь N 3: ацетонитрил-вода в соотношении 2:1 по объему |  |
| <a id="p100259"></a>Смесь N 4: гексан-этилацетат в соотношении 9:1 по объему |  |
| <a id="p100260"></a>Смесь N 5: гексан-этилацетат в соотношении 4:1 по объему |  |
| <a id="p100261"></a>Смесь N 6: гексан-этилацетат в соотношении 1:1 по объему |  |


<a id="p100262"></a>*Примечание.* Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.


#### <a id="p100263"></a>3.3 Вспомогательные устройства и материалы



| <a id="p100264"></a>Аналитическая колонка, заполненная сорбентом C18 (100 x 2,1) мм, 2,2 мкм |  |
| --- | --- |
| <a id="p100265"></a>Вакуумный манипулятор для работы с патронами для твердофазной экстракции |  |
| <a id="p100266"></a>Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 25 см3 | <a id="p100267"></a>[ГОСТ 9737-93](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93) |
| <a id="p100268"></a>Патроны для твердофазной экстракции: N 1 - заполненные гидрофобным сорбентом с привитыми гексадецильными группами и N 2 - заполненные гидрофильным слабокислотным сорбентом с постоянной активностью, по 0,4 г | <a id="p100269"></a>ТУ 4215-002-0545-931-94 |
| <a id="p100270"></a>Пробирки полипропиленовые центрифужные с крышками объемом 50 см3 |  |
| <a id="p100271"></a>Ротационный вакуумный испаритель с мембранным насосом, обеспечивающим вакуум до 10 мбар |  |
| <a id="p100272"></a>Ультразвуковая ванна с рабочей частотой 37 кГц |  |
| <a id="p100273"></a>Устройство перемешивающее (50 - 200 колебаний в минуту) | <a id="p100274"></a>ТУ 4389-007-44330709-11 |
| <a id="p100275"></a>Центрифуга с максимальной рабочей частотой вращения 4 000 об./мин |  |


<a id="p100276"></a>*Примечание.* Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.


## 4. <a id="p100277"></a>Требования безопасности


<a id="p100278"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.
<a id="p100279"></a>4.2. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией, соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313-03 и ГН 2.2.5.2308-07.
<a id="p100280"></a>Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.


## 5. <a id="p100281"></a>Требования к квалификации операторов


<a id="p100282"></a>Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, владеющий методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по [п. 13](#p100462).


## 6. <a id="p100283"></a>Условия измерений


<a id="p100284"></a>При выполнении измерений выполняют следующие условия:
- <a id="p100285"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100286"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


## 7. <a id="p100287"></a>Подготовка к определению



#### <a id="p100288"></a>7.1 Кондиционирование колонки


<a id="p100289"></a>Перед началом анализа аналитическую колонку кондиционируют в потоке подвижной фазы (0,1 - 0,2 см3/мин) до стабилизации нулевой линии.


#### <a id="p100290"></a>7.2 Кондиционирование патронов


<a id="p100291"></a>7.2.1. Кондиционирование патрона N 1 с гидрофобным сорбентом с привитыми гексадецильными группами. Патрон промывают 2,5 см3 ацетонитрила, затем 3 см3 воды, подкисленной муравьиной кислотой до pH 2.
<a id="p100292"></a>7.2.2. Кондиционирование патрона N 2 с гидрофильным слабокислотным сорбентом с постоянной активностью. Патрон последовательно промывают 2,5 см3 смеси N 6, затем 3 см3 смеси N 4.


#### <a id="p100293"></a>7.3 Приготовление растворов


<a id="p100294"></a>7.3.1. Фаза A - 0,1%-й раствор муравьиной кислоты в ацетонитриле: 1 см3 муравьиной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1 дм3 и доводят объем до метки ацетонитрилом.
<a id="p100295"></a>7.3.2. Фаза B - 0,1%-й раствор муравьиной кислоты в воде: 1 см3 муравьиной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1 дм3 и доводят объем до метки бидистиллированной водой.
<a id="p100296"></a>7.3.3. Подвижная фаза для растворения проб: смешивают фазу A и фазу B в соотношении 1:1 по объему.


#### <a id="p100297"></a>7.4 Приготовление основных и градуировочных растворов



##### <a id="p100298"></a>7.4.1 Приготовление основных растворов валифеналата и его

метаболитов

<a id="p100299"></a>7.4.1.1. Основной раствор валифеналата с концентрацией 1,0 мг/см3: точную навеску валифеналата (50 +/- 0,5 мг) помещают в мерную колбу вместимостью 50 см3, растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки тем же растворителем.
<a id="p100300"></a>7.4.1.2. Основной раствор IR-5839 с концентрацией 1,0 мг/см3: точную навеску IR-5839 (50 +/- 0,5 мг) помещают в мерную колбу вместимостью 50 см3, растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки тем же растворителем.
<a id="p100301"></a>7.4.1.3. Основной раствор 4-хлорбензойной кислоты с концентрацией 1,0 мг/см3: точную навеску 4-хлорбензойной кислоты (50 +/- 0,5 мг) помещают в мерную колбу вместимостью 50 см3, растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки тем же растворителем.


##### <a id="p100302"></a>7.4.2 Приготовление градуировочных растворов валифеналата

и его метаболитов

<a id="p100303"></a>Градуировочные растворы с концентрациями 2, 5, 10, 50 и 100 нг/см3 готовят методом последовательного разбавления по объему, используя в качестве растворителя подвижную фазу.
<a id="p100304"></a>7.4.2.1. Раствор валифеналата N 1 с концентрацией 1,0 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 100 см3 вносят 0,1 см3 основного раствора валифеналата и доводят до метки ацетонитрилом.
<a id="p100305"></a>7.4.2.2. Раствор IR-5839 N 2 с концентрацией 1,0 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 100 см3 вносят 0,1 см3 основного раствора IR-5839 и доводят до метки ацетонитрилом.
<a id="p100306"></a>7.4.2.3. Раствор 4-хлорбензойной кислоты N 3 с концентрацией 1,0 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 100 см3 вносят 0,1 см3 основного раствора 4-хлорбензойной кислоты и доводят до метки ацетонитрилом.
<a id="p100307"></a>7.4.2.4. Раствор N 4 с концентрацией 100 нг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают по 1,0 см3 раствора N 1, N 2 и N 3 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100308"></a>7.4.2.5. Раствор N 5 с концентрацией 50 нг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают по 0,5 см3 раствора N 1, N 2 и N 3 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100309"></a>7.4.2.6. Раствор N 6 с концентрацией 10 нг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 1,0 см3 раствора N 4 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100310"></a>7.4.2.7. Раствор N 7 с концентрацией 5 нг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 0,5 см3 раствора N 4 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100311"></a>7.4.2.8. Раствор N 8 с концентрацией 2 нг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 0,2 см3 раствора N 4 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100312"></a>7.4.2.9. Раствор валифеналата N 9 с концентрацией 100 нг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 1,0 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100313"></a>7.4.2.10. Раствор валифеналата N 10 с концентрацией 50 нг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 0,5 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100314"></a>7.4.2.11. Раствор валифеналата N 11 с концентрацией 10 нг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 1,0 см3 раствора N 9 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100315"></a>7.4.2.12. Раствор валифеналата N 12 с концентрацией 5 нг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 0,5 см3 раствора N 9 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100316"></a>7.4.2.13. Раствор валифеналата N 13 с концентрацией 2 нг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 0,2 см3 раствора N 9 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100317"></a>Основной раствор можно хранить в холодильнике при температуре 0 - 4 °C в течение 7 дней, градуировочные растворы использовать в день приготовления.
<a id="p100318"></a>При изучении полноты определения валифеналата и его метаболитов используют растворы веществ, приготовленные из основного раствора методом последовательного разбавления по объему ацетонитрилом.


#### <a id="p100319"></a>7.5 Построение градуировочного графика


<a id="p100320"></a>Для каждого из градуировочных растворов регистрируют хроматограммы в условиях, указанных в [п. 9.7](#p100359), и определяют абсолютное время удерживания и площадь пиков валифеналата, IR-5839 и 4-хлорбензойной кислоты (в усл. ед.), соответствующих MRM $(399 \rightarrow 116)$ , MRM $(385 \rightarrow 144)$ , и MRM $(155 \rightarrow 111)$ соответственно. Одновременно в режиме автоматической обработки данных определяют соотношение площадей пиков для валифеналата, соответствующих MRM $(399 \rightarrow 155)$ и MRM $(399 \rightarrow 144)$ (S155/S144); для IR-5839 - MRM $(385 \rightarrow 186)$ и MRM $(385 \rightarrow 116)$ (S186/S116), для 4-хлорбензойной кислоты - MRM $(155 \rightarrow 35)$ .
<a id="p100321"></a>Для построения градуировочного графика (площадь пика - концентрация валифеналата или его метаболитов в растворе) в хроматограф вводят по 2 мм3 градуировочных растворов (не менее 5 параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4 точек по диапазону измеряемых концентраций) в условиях, указанных в [п. 9.7](#p100359). Затем измеряют площади пиков, и строят график зависимости площади пика от концентрации в градуировочном растворе.
<a id="p100322"></a>Методом наименьших квадратов рассчитывают градуировочный коэффициент (K) в уравнении линейной регрессии:

<a id="p100323"></a>C = KS, где

<a id="p100324"></a>S - площадь пика градуировочного раствора.
<a id="p100325"></a>Градуировку признают удовлетворительной, если значение коэффициента линейной корреляции оказывается не ниже 0,99.
<a id="p100326"></a>Градуировочную характеристику необходимо проверять при замене реактивов, хроматографической колонки или элементов хроматографической системы, а также при отрицательном результате контроля градуировочного коэффициента.
<a id="p100327"></a>Градуировочную зависимость признают стабильной при выполнении следующего условия:

<a id="p100328"></a> $\frac{|\text{С } - \text{С}_{K}|}{C} \cdot 100 \leq \lambda_{\text{контр}.}$ , где

<a id="p100329"></a>C - аттестованное значение массовой концентрации валифеналата или его метаболитов в градуировочном растворе;
<a id="p100330"></a>Cк - результат контрольного измерения массовой концентрации валифеналата или его метаболитов в градуировочном растворе;
<a id="p100331"></a> $\lambda_{\text{контр}.}$ - норматив контроля градуировочного коэффициента, % ( $\lambda_{\text{контр}.} = 10\%$ при P = 0,95).


#### <a id="p100332"></a>7.6 Проверка хроматографического поведения валифеналата

и его метаболитов на патроне N 1

<a id="p100333"></a>В круглодонную колбу емкостью 10 см3 отбирают по 1 см3 стандартных растворов валифеналата и его метаболитов с концентрацией 1 мкг/см3. Растворитель удаляют в вакууме. Остаток растворяют в 1 см3 ацетонитрила, добавляют 9 см3 воды, подкисленной муравьиной кислотой до pH 2, и переносят на подготовленный патрон [(п. 7.2.1)](#p100291). Промывают патрон 3 см3 смеси N 1, 3 см3 смеси N 2, элюат отбрасывают. Затем элюируют валифеналат и метаболиты смесью N 3 со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Отбирают фракции по 2 см3, упаривают досуха, растворяют в 1 см3 подвижной фазы и анализируют по [п. 9.7](#p100359).
<a id="p100334"></a>Фракции, содержащие валифеналат и метаболиты, объединяют и вновь анализируют.
<a id="p100335"></a>Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с патрона и необходимый для очистки объем элюата.


#### <a id="p100336"></a>7.7 Проверка хроматографического поведения валифеналата

и его метаболитов на патроне N 2

<a id="p100337"></a>В круглодонную колбу емкостью 10 см3 отбирают по 1 см3 стандартных растворов валифеналата и его метаболитов с концентрацией 1 мкг/см3. Растворитель удаляют в вакууме. Остаток растворяют в 1 см3 смеси N 4 и переносят на подготовленный патрон [(п. 7.2.2)](#p100292). Колбу обмывают 1 см3 смеси N 4 и смыв тоже переносят на патрон. Промывают патрон 5 см3 смеси N 5, элюат отбрасывают. Затем элюируют валифеналат и метаболиты смесью N 6 со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Отбирают фракции по 2 см3, упаривают досуха, растворяют в 1 см3 подвижной фазы и анализируют по [п. 9.7](#p100359).
<a id="p100338"></a>Фракции, содержащие валифеналат и метаболиты, объединяют и вновь анализируют.
<a id="p100339"></a>Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с патрона и необходимый для очистки объем элюата.
<a id="p100340"></a>*Примечание.* Проверку хроматографического поведения веществ на патронах для ТФЭ следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии патронов и растворителей.


## 8. <a id="p100341"></a>Отбор проб и хранение


<a id="p100342"></a>Отбор проб проводится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79), а также в соответствии с [ГОСТ Р 31861-12](https://bukva.ai/docs/gost-31861-2012) "Вода. Общие требования к отбору проб"; [ГОСТ 28168-89](https://bukva.ai/docs/gost-28168-89) "Почвы. Отбор проб"; [ГОСТ 32786-14](https://bukva.ai/docs/gost-32786-2014) "Виноград столовый свежий. Технические условия"; [ГОСТ 7194-81](https://bukva.ai/docs/gost-7194-81) "Картофель свежий. Правила приемки и методы определения качества". Отобранные пробы хранят до анализа в герметичной п/э упаковке в морозильной камере при -18 °C. Пробы картофеля перед анализом, не размораживая, измельчают на терке или в гомогенизаторе.
<a id="p100343"></a>Пробы ягод винограда хранят до анализа в герметично закрытом двойном полиэтиленовом пакете в морозильной камере при температуре -18 °C в течение 6 месяцев. Пробы виноградного сока хранят до анализа в герметичной таре в морозильной камере при температуре -18 °C в течение месяца, в холодильнике при температуре 0 - 4 °C в стеклянной таре с притертой пробкой в течение недели.
<a id="p100344"></a>Пробы воды хранят в холодильнике при температуре 0 - 4 °C в герметично закрытой стеклянной таре не более месяца.
<a id="p100345"></a>Для длительного хранения пробы почвы подсушиваются при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы могут храниться в течение года. Перед анализом сухую почву доводят до стандартной влажности, просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм.


## 9. <a id="p100346"></a>Проведение определения



#### <a id="p100347"></a>9.1 Определение валифеналата, IR-5839 и 4-хлорбензойной

кислоты в воде

<a id="p100348"></a>Из пробы воды (100 мл), подкисленной до pH 2 муравьиной кислотой, отбирают 10 мл и наносят на подготовленный патрон N 1 [(п. 7.2.1)](#p100291). Промывают патрон 3 см3 смеси N 1 и 3 см3 смеси N 2. Элюируют 6 см3 смеси N 3, элюат собирают в круглодонную колбу емкостью 25 см3 и упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре не выше 40 °C. Сухой остаток растворяют в 1 см3 подвижной фазы и анализируют по [п. 9.7](#p100359).


#### <a id="p100349"></a>9.2 Определение валифеналата, IR-5839 и 4-хлорбензойной

кислоты в почве

<a id="p100350"></a>Навеску почвы (10 г) помещают в полипропиленовую центрифужную пробирку вместимостью 50 см3, добавляют 3 см3 воды, 8 г безводного сернокислого натрия, 2 г натрия хлористого и 30 см3 ацетонитрила. Пробирку плотно закрывают, помещают в перемешивающее устройство на 10 мин, затем центрифугируют. Экстракт декантируют. Экстракцию повторяют еще раз с 20 см3 ацетонитрила. Из объединенного экстракта отбирают аликвоту, соответствующую 1 г, переносят в круглодонную колбу и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °C. Сухой остаток подвергают очистке на патроне N 1 по [п. 9.5](#p100355).


#### <a id="p100351"></a>9.3 Определение валифеналата в ботве, клубнях картофеля

и винограде

<a id="p100352"></a>Навеску растительного материала (10 г) помещают в полипропиленовую центрифужную пробирку вместимостью 50 см3, добавляют 8 г безводного сернокислого натрия, 2 г натрия хлористого и 30 см3 ацетонитрила. Пробирку плотно закрывают, помещают в перемешивающее устройство на 10 мин, затем центрифугируют. Экстракт декантируют. Экстракцию повторяют еще раз с 20 см3 ацетонитрила. Из объединенного экстракта отбирают аликвоту, соответствующую 1 г, переносят в круглодонную колбу и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °C. Сухой остаток подвергают очистке на патроне N 2 по [п. 9.6](#p100357).


#### <a id="p100353"></a>9.4 Определение валифеналата в виноградном соке


<a id="p100354"></a>Из представительной пробы сока отбирают 1 г, добавляют 8 см3 воды, 1 см3 ацетонитрила и наносят на подготовленный патрон N 1 [(п. 7.2.1)](#p100291). Промывают патрон 5 см3 смеси N 2. Элюируют валифеналат 5 см3 смеси N 3, элюат собирают в круглодонную колбу емкостью 25 см3 и упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре не выше 40 °C. Сухой остаток растворяют в 1 см3 подвижной фазы и анализируют по [п. 9.7](#p100359).


#### <a id="p100355"></a>9.5 Очистка на патроне N 1


<a id="p100356"></a>Сухой остаток, полученный по [п. 9.2](#p100349), растворяют в 1 см3 ацетонитрила, добавляют 9 см3 воды и наносят на предварительно кондиционированный патрон [(п. 7.2.1)](#p100291). Промывают патрон 3 см3 смеси N 1 и 3 см3 смеси N 2. Элюируют 6 см3 смеси N 3, элюат собирают в круглодонную колбу емкостью 25 см3 и упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре не выше 40 °C. Сухой остаток растворяют в 1 см3 подвижной фазы и анализируют по [п. 9.7](#p100359).


#### <a id="p100357"></a>9.6 Очистка на патроне N 2


<a id="p100358"></a>Сухой остаток, полученный по [п. 9.3](#p100351), растворяют в 1 см3 смеси N 4 и наносят на предварительно кондиционированный патрон [(п. 7.2.2)](#p100292). Колбу ополаскивают еще 1 см3 смеси N 4, который также наносят на патрон. Патрон промывают 6 см3 смеси N 5, элюат отбрасывают. Валифеналат элюируют 5 см3 смеси N 6, элюат собирают, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °C, остаток растворяют в 1 см3 подвижной фазы и анализируют по п. 9.7.


#### <a id="p100359"></a>9.7 Условия хроматографирования



##### <a id="p100360"></a>9.7.1 Хроматографические условия измерений содержания

валифеналата и его метаболитов

<a id="p100361"></a>Хромато-масс-спектрометр, состоящий из высокоэффективного жидкостного хроматографа и масс-спектрометра с тройным квадруполем.
<a id="p100362"></a>Аналитическая колонка, заполненная сорбентом C18 (100 x 2,1) мм, 2,2 мкм. Температура колонки (45 +/- 1) °C. Скорость потока элюента 0,3 см3/мин. Объем вводимой пробы 2 мм3.
<a id="p100363"></a>Режим элюирования для валифеналата и его метаболитов - градиентный:


| <a id="p100364"></a>Время, мин | <a id="p100365"></a>% A | <a id="p100366"></a>% B |
| --- | --- | --- |
| <a id="p100367"></a>0 | <a id="p100368"></a>30 | <a id="p100369"></a>70 |
| <a id="p100370"></a>3 | <a id="p100371"></a>90 | <a id="p100372"></a>10 |
| <a id="p100373"></a>4 | <a id="p100374"></a>90 | <a id="p100375"></a>10 |
| <a id="p100376"></a>4,1 | <a id="p100377"></a>30 | <a id="p100378"></a>70 |
| <a id="p100379"></a>5,0 | <a id="p100380"></a>30 | <a id="p100381"></a>70 |


<a id="p100382"></a>Время удерживания 4-хлорбензойной кислоты - (2,7 +/- 0,1) мин; IR-5839 - (3,0 +/- 0,1) мин; валифеналата - (3,5 +/- 0,1) мин.
<a id="p100383"></a>Режим элюирования для валифеналата - градиентный:


| <a id="p100384"></a>Время, мин | <a id="p100385"></a>% A | <a id="p100386"></a>% B |
| --- | --- | --- |
| <a id="p100387"></a>0 | <a id="p100388"></a>30 | <a id="p100389"></a>70 |
| <a id="p100390"></a>2 | <a id="p100391"></a>90 | <a id="p100392"></a>10 |
| <a id="p100393"></a>3 | <a id="p100394"></a>90 | <a id="p100395"></a>10 |
| <a id="p100396"></a>3,1 | <a id="p100397"></a>30 | <a id="p100398"></a>70 |
| <a id="p100399"></a>3,5 | <a id="p100400"></a>30 | <a id="p100401"></a>70 |


<a id="p100402"></a>Время удерживания валифеналата - (2,9 +/- 0,1) мин.


##### <a id="p100403"></a>9.7.2 Масс-спектрометрические условия измерений

валифеналата и его метаболитов


<table>
<colgroup><col width="25%"><col width="25%"><col width="25%"><col width="25%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100404"></a>Тип ионного источника</td><td colspan="3"><a id="p100405"></a>HESI (электроспрей)</td></tr>
<tr><td rowspan="5"><a id="p100406"></a>Режим сканирования</td><td colspan="3"><a id="p100407"></a>Мониторинг заданных реакций (MRM)</td></tr>
<tr><td><a id="p100408"></a>4-хлорбензойной кислоты</td><td><a id="p100409"></a>IR-5839</td><td><a id="p100410"></a>валифеналата</td></tr>
<tr><td><a id="p100411"></a>$155 \rightarrow 111$ (количественный)</td><td><a id="p100412"></a>$385 \rightarrow 144$ (количественный)</td><td><a id="p100413"></a>$399 \rightarrow 116$ (количественный)</td></tr>
<tr><td><a id="p100414"></a>$155 \rightarrow 35$ (подтверждающий)</td><td><a id="p100415"></a>$385 \rightarrow 186$ (подтверждающий)</td><td><a id="p100416"></a>$399 \rightarrow 155$ (подтверждающий)</td></tr>
<tr><td></td><td><a id="p100417"></a>$385 \rightarrow 116$ (подтверждающий)</td><td><a id="p100418"></a>$399 \rightarrow 144$ (подтверждающий)</td></tr>
<tr><td colspan="4"><a id="p100419"></a>Параметры работы ионного источника</td></tr>
<tr><td><a id="p100420"></a>Напряжение на источнике, V</td><td><a id="p100421"></a>3 500, отрицательная полярность</td><td colspan="2"><a id="p100422"></a>4 000, положительная полярность</td></tr>
<tr><td><a id="p100423"></a>Температура конуса, °C</td><td colspan="3"><a id="p100424"></a>250</td></tr>
<tr><td><a id="p100425"></a>Скорость потока газа из конуса, дм3/мин</td><td colspan="3"><a id="p100426"></a>20</td></tr>
<tr><td><a id="p100427"></a>Скорость потока распыляющего газа, дм3/мин</td><td colspan="3"><a id="p100428"></a>30</td></tr>
<tr><td><a id="p100429"></a>Температура осушающего газа, °C</td><td colspan="3"><a id="p100430"></a>200</td></tr>
<tr><td><a id="p100431"></a>Скорость штока осушающего газа, дм3/мин</td><td colspan="3"><a id="p100432"></a>30</td></tr>
</table>



## 10. <a id="p100433"></a>Обработка результатов анализа


<a id="p100434"></a>Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки. Содержание валифеналата или его метаболитов в пробе (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

<a id="p100435"></a> $X = S_{x} \cdot K \cdot \frac{V}{P}$ , где

<a id="p100436"></a>Sx - площадь пика аналита на хроматограмме испытуемого образца, (усл. ед.);
<a id="p100437"></a>K - градуировочный коэффициент, найденный на стадии построения соответствующей градуировочной зависимости;
<a id="p100438"></a>V - объем пробы, подготовленной для хроматографического анализа, см3;
<a id="p100439"></a>P - навеска анализируемого образца, г.
<a id="p100440"></a>Содержание остаточных количеств валифеналата или его метаболитов в образце вычисляют как среднее из двух параллельных определений.
<a id="p100441"></a>Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор валифеналата или его метаболитов с концентрацией 1,0 мкг/см3, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.
<a id="p100442"></a>Суммарное содержание валифеналата в воде или почве ( $X_{\Sigma Val}$ , мг/дм3 или мг/кг) вычисляют с учетом метаболитов:

<a id="p100443"></a> $X_{\Sigma Val} = X_{Val} + 1,04X_{IR - 5839} + 2,55X_{PCBA}$ , где

<a id="p100444"></a>XVal - содержание валифеналата в пробе, мг/дм3 или мг/кг;
<a id="p100445"></a>XIR-5839 - содержание IR-5839 в пробе, мг/дм3 или мг/кг;
<a id="p100446"></a>XPCBA - содержание PCBA в пробе, мг/дм3 или мг/кг.


## 11. <a id="p100447"></a>Проверка приемлемости результатов параллельных определений


<a id="p100448"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости:

<a id="p100449"></a> $\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{X_{1} + X_{2}} \leq r$ , где

<a id="p100450"></a>X<sub>1</sub>, X<sub>2</sub> - результаты параллельных определений, мг/кг;
<a id="p100451"></a>r - значение предела повторяемости $(r = 2,8\sigma_{r})$ .
<a id="p100452"></a>При невыполнении этого условия выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


## 12. <a id="p100453"></a>Оформление результатов


<a id="p100454"></a>Результат анализа представляют в виде:

<a id="p100455"></a> $(\overline{X} \pm \Delta)$ , мг/кг при вероятности P = 0,95, где

<a id="p100456"></a> $\overline{X}$ - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
<a id="p100457"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

<a id="p100458"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot X}{100}$ , где

<a id="p100459"></a> $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
<a id="p100460"></a>В случае если содержание компонента меньше нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100461"></a>"содержание вещества в пробе менее нижней границы определения" (например: менее 0,01 мг/кг, где 0,01 мг/кг - предел обнаружения валифеналата в винограде).


## 13. <a id="p100462"></a>Контроль качества результатов измерений


<a id="p100463"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-02](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-1-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
<a id="p100464"></a>13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100465"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.
<a id="p100466"></a>Величина добавки Cд должна удовлетворять условию:

<a id="p100467"></a> $C_{\partial} = \Delta_{\text{л},X} + \Delta_{\text{л},X\prime}$ , где

<a id="p100468"></a> $\pm \Delta_{\text{л},X}$ $( \pm \Delta_{\text{л},X\prime})$ - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:

<a id="p100469"></a> $\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta$ , где

<a id="p100470"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

<a id="p100471"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot X}{100}$ , где

<a id="p100472"></a> $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
<a id="p100473"></a>Результат контроля процедуры Kк рассчитывают по формуле:

<a id="p100474"></a> $K_{\text{к}} = \overline{X}\prime - \overline{X} - C_{\partial}$ , где

<a id="p100475"></a> $\overline{X}\prime$ , $\overline{X}$ , Cд - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100447)) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки соответственно, мг/кг.
<a id="p100476"></a>Норматив контроля K рассчитывают по формуле:

<a id="p100477"></a> $K = \sqrt{\Delta_{\text{л},X\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},X}^{2}}$ (1)

<a id="p100478"></a>Проводят сопоставление результата контроля процедуры (Kк) с нормативом контроля (K).
<a id="p100479"></a>Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию

<a id="p100480"></a>|Kк| <= K, (2)

<a id="p100481"></a>процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100482"></a>При невыполнении [условия (2)](#p100480) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении [условия (2)](#p100480) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры к их устранению.
<a id="p100483"></a>13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
<a id="p100484"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

<a id="p100485"></a> $\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{X_{1} + X_{2}} \leq R$ , где (3)

<a id="p100486"></a>X<sub>1</sub>, X<sub>2</sub> - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
<a id="p100487"></a>R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций), %.



<a id="p100488"></a>

---