---
title: "\"МУК 4.1.3405-16. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств флукарбазона натрия в семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.3405-16"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-3405-16"
---

## "МУК 4.1.3405-16. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств флукарбазона натрия в семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.3405-16. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств флукарбазона натрия в семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 29.12.2016)


<a id="p100001"></a>Утверждаю
Руководитель Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека,
Главный государственный санитарный врач
Российской Федерации
**А.Ю.ПОПОВА**
29 декабря 2016 года


#### <a id="p100002"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ФЛУКАРБАЗОНА НАТРИЯ**
**В СЕМЕНАХ И МАСЛЕ ПОДСОЛНЕЧНИКА МЕТОДОМ**
**ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100004"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.3405-16**

1. <a id="p100005"></a>Разработаны сотрудниками ФГБНУ "Всероссийский НИИ защиты растений" и ООО "Инновационный центр защиты растений" (В.И. Долженко, И.А. Цибульская, А.С. Комарова, Т.Д. Черменская, В.Ф. Павлова).
2. <a id="p100006"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 22 декабря 2016 г. N 2).
3. <a id="p100007"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 29 декабря 2016 г.
4. <a id="p100008"></a>Введены впервые.

<a id="p100009"></a>Свидетельство о метрологической аттестации N 01.5.04.234/01.00043/2016.

<a id="p100010"></a>Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации флукарбазона натрия в семенах и масле подсолнечника в диапазоне концентраций 0,5 - 5,0 мг/кг.
<a id="p100011"></a>Методические указания носят рекомендательный характер.
<a id="p100012"></a>Флукарбазон натрия
<a id="p100013"></a>4,5-дигидро-3-метокси-4-метил-5-оксо-N-(2-трифторметоксифенилсульфонил)1H-1,2,4-триазол-1карбоксамид, натриевая соль (ИЮПАК).

<a id="p100014"></a> ![рис. 1](https://i.bukva.ai/xk7efE1J/img_0.png) 

<a id="p100015"></a>Брутто формула: C<sub>12</sub>H<sub>10</sub>F<sub>3</sub>N<sub>4</sub>NaO<sub>6</sub>S.
<a id="p100016"></a>Молекулярная масса: 418,29.
<a id="p100017"></a>Бесцветный порошок без запаха. Температура плавления 200 °C (с разложением).
<a id="p100018"></a>Растворимость в органических растворителях (при 20 °C, в г/дм3): ацетонитрил - 6,4; диметилсульфоксид > 250; ацетон - 1,3; дихлорметан - 0,72; полиэтиленгликоль - 48; этилацетат - 0,14, пропанол - 0,27. Растворимость в воде при 20 °C (в г/дм3): 44 (pH 4 - 9).
<a id="p100019"></a>Коэффициент распределения в системе н-октанол-вода Kow logP = -2,85.
<a id="p100020"></a>Давление паров 1 x 10-9 мПа (при 20 °C).
<a id="p100021"></a>Период полураспада в почве: DT50 (20 °C, аэробные условия) 2,1 день.
<a id="p100022"></a>ЛД50 орально для крыс > 5 000 мг/кг. Не токсичен для пчел.
<a id="p100023"></a>Область применения: гербицид для борьбы с травянистыми и некоторыми широколистными сорняками.
<a id="p100024"></a>Механизм действия - ингибирование ацетолактатсинтеза.
<a id="p100025"></a>Гигиенические нормативы для флукарбазона натрия в России: МДУ в зерне хлебных злаков - 0,2 мг/кг, для подсолнечника не установлен.


## 1. <a id="p100026"></a>Погрешность измерений


<a id="p100027"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 1, для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100028"></a>Таблица 1

<a id="p100029"></a>Метрологические параметры


<table>
<colgroup><col width="12%"><col width="13%"><col width="14%"><col width="15%"><col width="15%"><col width="16%"><col width="16%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100030"></a>Анализируемый объект</td><td><a id="p100031"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td><a id="p100032"></a>Показатель точности <a href="#p100051">&lt;*&gt;</a> (границы относительной погрешности (P = 0,95), $\pm \delta$ , %</td><td><a id="p100033"></a>Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), $\sigma_{r}$ , %</td><td><a id="p100034"></a>Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадратическое отклонение воспроизводимости), $\sigma_{R}$ , %</td><td><a id="p100035"></a>Предел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных определений), r, %</td><td><a id="p100036"></a>Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученных в разных лабораториях), R, % (P = 0,95)</td></tr>
<tr><td><a id="p100037"></a>Семена подсолнечника</td><td><a id="p100038"></a>0,5 - 5,0</td><td><a id="p100039"></a>23</td><td><a id="p100040"></a>9</td><td><a id="p100041"></a>12</td><td><a id="p100042"></a>26</td><td><a id="p100043"></a>34</td></tr>
<tr><td><a id="p100044"></a>Масло подсолнечника</td><td><a id="p100045"></a>0,5 - 5,0</td><td><a id="p100046"></a>23</td><td><a id="p100047"></a>9</td><td><a id="p100048"></a>12</td><td><a id="p100049"></a>26</td><td><a id="p100050"></a>34</td></tr>
<tr><td colspan="7"><a id="p100051"></a>&lt;*&gt; Соответствует расширенной неопределенности Uотн. (в относительных единицах) при коэффициенте охвата k = 2</td></tr>
</table>


<a id="p100052"></a>Таблица 2

<a id="p100053"></a>Полнота извлечения флукарбазона натрия, стандартное
отклонение, доверительный интервал среднего результата
для n = 20, P = 0,95


| <a id="p100054"></a>Анализируемый объект | <a id="p100055"></a>Предел обнаружения, мг/кг (мг/дм3) | <a id="p100056"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/дм3) | <a id="p100057"></a>Полнота извлечения, % | <a id="p100058"></a>Стандартное отклонение, S | <a id="p100059"></a>Доверительный интервал среднего результата, +/- % |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100060"></a>Семена подсолнечника | <a id="p100061"></a>0,5 | <a id="p100062"></a>0,5 - 5,0 | <a id="p100063"></a>85,2 | <a id="p100064"></a>2,43 | <a id="p100065"></a>1,06 |
| <a id="p100066"></a>Масло подсолнечника | <a id="p100067"></a>0,5 | <a id="p100068"></a>0,5 - 5,0 | <a id="p100069"></a>84,6 | <a id="p100070"></a>3,12 | <a id="p100071"></a>1,37 |



## 2. <a id="p100072"></a>Метод измерений


<a id="p100073"></a>Метод основан на определении флукарбазона натрия по свободной кислоте флукарбазону методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового (УФ) детектора после извлечения из образцов раствором калия фосфорнокислого 2-замещенного, последующей очистки в системе несмешивающихся растворителей и очистке на патроне для твердофазной экстракции.
<a id="p100074"></a>Идентификация флукарбазона натрия проводится по времени удерживания, количественное определение - методом абсолютной калибровки.
<a id="p100075"></a>Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования.


## 3. <a id="p100076"></a>Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы



#### <a id="p100077"></a>3.1 Средства измерений



| <a id="p100078"></a>Жидкостный хроматограф с УФ-детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки |  |
| --- | --- |
| <a id="p100079"></a>Весы лабораторные аналитические, наибольший предел взвешивания 150 г, предел допустимой погрешности 5 мг |  |
| <a id="p100080"></a>Весы лабораторные аналитические, наибольший предел взвешивания 81/210 г, предел допустимой погрешности 0,1/0,3 мг |  |
| <a id="p100081"></a>Колбы мерные на 10,100 см3 | <a id="p100082"></a>ГОСТ 23932-90 |
| <a id="p100083"></a>Микродозаторы одноканальные переменного объема от 100 до 1 000 мм3 и от 1 до 5 см3 |  |
| Цилиндры мерные на 50 и 100 см3 | <a id="p100084"></a>ГОСТ 23932-90 |


<a id="p100085"></a>*Примечание.* Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.


#### <a id="p100086"></a>3.2 Реактивы



| <a id="p100087"></a>Ацетонитрил для ВЭЖХ | <a id="p100088"></a>ТУ 2634-002-04715285-12 |
| --- | --- |
| <a id="p100089"></a>Вода для лабораторного анализа (бидистиллированная, деионизованная) | <a id="p100090"></a>[ГОСТ Р 52501-05](https://bukva.ai/docs/gost-r-52501-2005) |
| <a id="p100091"></a>Калий фосфорнокислый 2-замещенный, 3-водный, чда | <a id="p100092"></a>[ГОСТ 2493-75](https://bukva.ai/docs/standart-gost-2493-75) |
| <a id="p100093"></a>Кислота ортофосфорная 98%, хч | <a id="p100094"></a>ГОСТ 6552-80 |
| <a id="p100095"></a>Метанол, хч | <a id="p100096"></a>[ГОСТ 6995-77](https://bukva.ai/docs/standart-gost-6995-77) |
| <a id="p100097"></a>н-Гексан, хч | <a id="p100098"></a>ТУ 6-09-3375-78 |
| <a id="p100099"></a>Натрий сернокислый безводный, чда | <a id="p100100"></a>[ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76) |
| <a id="p100101"></a>Подвижная фаза для ВЭЖХ: смесь ацетонитрила и 0,005М ортофосфорной кислоты в соотношении 30:70 |  |
| <a id="p100102"></a>Смесь N 1: хлористый метилен - метанол в соотношении 95:5 по объему |  |
| <a id="p100103"></a>Смесь N 2: хлористый метилен - метанол в соотношении 1:1 по объему |  |
| <a id="p100104"></a>Флукарбазон с содержанием основного вещества 98,8% |  |
| <a id="p100105"></a>Флукарбазон натрия с содержанием основного вещества 95,5% |  |
| <a id="p100106"></a>Хлористый метилен, хч | <a id="p100107"></a>ТУ 6-09-3716-80 |


<a id="p100108"></a>*Примечание.* Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.


#### <a id="p100109"></a>3.3 Вспомогательные устройства и материалы



| <a id="p100110"></a>Аналитическая колонка, заполненная сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18, (100 x 2,1) мм, 1,7 мкм |  |
| --- | --- |
| <a id="p100111"></a>Вакуумный манипулятор для работы с патронами для твердофазной экстракции |  |
| <a id="p100112"></a>Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 25, 50 и 100 см3 | <a id="p100113"></a>[ГОСТ 9737-93](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93) |
| <a id="p100114"></a>Патроны для твердофазной экстракции, заполненные гидрофильным слабокислым сорбентом с постоянной активностью, на основе силикагеля, по 0,4 г | <a id="p100115"></a>ТУ 4215-002-0545-931-94 |
| <a id="p100116"></a>Пробирки полипропиленовые центрифужные с крышками объемом 50 см3 |  |
| <a id="p100117"></a>Ротационный вакуумный испаритель с мембранным насосом, обеспечивающим вакуум до 10 мбар |  |
| <a id="p100118"></a>Ультразвуковая ванна с рабочей частотой 37 кГц |  |
| <a id="p100119"></a>Универсальная индикаторная бумага pH 0 - 14 |  |
| <a id="p100120"></a>Устройство перемешивающее (50 - 200 колебаний в минуту) | <a id="p100121"></a>ТУ 4389-007-44330709-11 |
| <a id="p100122"></a>Центрифуга со скоростью вращения 4 000 об./мин |  |


<a id="p100123"></a>*Примечание.* Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.


## 4. <a id="p100124"></a>Требования безопасности


<a id="p100125"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.
<a id="p100126"></a>4.2. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией, соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313-03 и ГН 2.2.5.2308-07.
<a id="p100127"></a>Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-15.
<a id="p100128"></a>4.3. При работе с газами, находящимися в баллонах под давлением до 15 МПа (150 кгс/см2), необходимо соблюдать Федеральные нормы и правила в области промышленной безопасности "Правила промышленной безопасности опасных производственных объектов, на которых используется оборудование, работающее под избыточным давлением" (утв. Приказом Ростехнадзора от 25.03.2014 N 116). Запрещается открывать вентиль баллона, не установив на нем понижающий редуктор.


## 5. <a id="p100129"></a>Требования к квалификации операторов


<a id="p100130"></a>Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы на жидкостном хроматографе, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по [п. 13](#p100216).


## 6. <a id="p100131"></a>Условия измерений


<a id="p100132"></a>При выполнении измерений выполняют следующие условия:
- <a id="p100133"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100134"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


## 7. <a id="p100135"></a>Подготовка к определению



#### <a id="p100136"></a>7.1 Кондиционирование колонки и патрона для твердофазной

экстракции


##### <a id="p100137"></a>7.1.1 Кондиционирование колонки


<a id="p100138"></a>Перед началом анализа аналитическую колонку кондиционируют в потоке подвижной фазы (0,1 - 0,2 см3/мин) до стабилизации нулевой линии.


##### <a id="p100139"></a>7.1.2 Кондиционирование патрона для твердофазной экстракции


<a id="p100140"></a>Патрон для твердофазной экстракции последовательно промывают 2 см3 метанола, затем 4 см3 хлористого метилена.


#### <a id="p100141"></a>7.2 Приготовление растворов


<a id="p100142"></a>7.2.1. 0,005 М раствор ортофосфорной кислоты: (0,5 +/- 0,01) г 98%-й ортофосфорной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1 дм3, растворяют в бидистиллированной воде и доводят объем до метки.
<a id="p100143"></a>7.2.2. Для приготовления подвижной фазы смешивают ацетонитрил с 0,005 М раствором ортофосфорной кислоты в соотношении 30:70 по объему, используя мерные цилиндры.
<a id="p100144"></a>7.2.3. 0,1 М раствор калия фосфорнокислого 2-замещенного: 22,8 г калия фосфорнокислого 2-замещенного, 3-водного помещают в мерную колбу объемом 1 дм3, растворяют в бидистиллированной воде и доводят объем до метки.
<a id="p100145"></a>7.2.4. 2 М раствор ортофосфорной кислоты: 224 г 98%-й ортофосфорной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1 дм3, растворяют в бидистиллированной воде и доводят объем до метки.


#### <a id="p100146"></a>7.3 Приготовление основного и градуировочных растворов



##### <a id="p100147"></a>7.3.1 Основной раствор флукарбазона для градуировки

(соответствует концентрации флукарбазона натрия 1,0 мг/см3)

<a id="p100148"></a>В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают точную навеску флукарбазона 94,7 мг, растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом.
<a id="p100149"></a>Основной раствор можно хранить в холодильнике при температуре 0 - 4 °C в течение месяца.


##### <a id="p100150"></a>7.3.2 Приготовление градуировочных растворов


<a id="p100151"></a>Градуировочные растворы, соответствующие концентрациями флукарбазона натрия 0,25; 0,5; 1,0; 2,5 и 5,0 мкг/см3, готовят методом последовательного разбавления по объему, используя подвижную фазу.
<a id="p100152"></a>7.3.2.1. Раствор N 1 флукарбазона, соответствующий концентрации флукарбазона натрия 5,0 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 100 см3 вносят 0,5 см3 основного раствора и доводят до метки подвижной фазой.
<a id="p100153"></a>7.3.2.2. Раствор N 2 флукарбазона, соответствующий концентрации флукарбазона натрия 2,5 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 5 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100154"></a>7.3.2.3. Раствор N 3 флукарбазона, соответствующий концентрации флукарбазона натрия 1,0 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 2 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100155"></a>7.3.2.4. Раствор N 4 флукарбазона, соответствующий концентрации флукарбазона натрия 0,5 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 1 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100156"></a>7.3.2.5. Раствор N 5 флукарбазона, соответствующий концентрации флукарбазона натрия 0,25 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 0,5 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100157"></a>Градуировочные растворы можно хранить в холодильнике при температуре 0 - 4 °C в течение двух недель.


##### <a id="p100158"></a>7.3.3 Приготовление растворов внесения


<a id="p100159"></a>7.3.3.1. Исходный раствор флукарбазона натрия для внесения с концентрацией 100 мкг/см3: точную навеску флукарбазона натрия 10,5 мг (содержание действующего вещества 95,5%) помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3, растворяют в воде и доводят объем до метки водой.
<a id="p100160"></a>7.3.3.2. Раствор N 1 флукарбазона натрия для внесения с концентрацией 10,0 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 100 см3 вносят 10 см3 исходного раствора флукарбазона натрия для внесения и доводят до метки водой.
<a id="p100161"></a>Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения флукарбазона.
<a id="p100162"></a>Растворы внесения можно хранить в холодильнике при температуре 0 - 4 °C в течение двух недель.


#### <a id="p100163"></a>7.4 Построение градуировочного графика


<a id="p100164"></a>Для установления градуировочной характеристики (площадь пика флукарбазона - концентрация флукарбазона натрия в растворе) в хроматограф вводят по 10 мм3 градуировочных растворов (не менее 3 параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4 точек по диапазону измеряемых концентраций). Затем измеряют площади пиков и строят график зависимости среднего значения площади пика от концентрации флукарбазона натрия в градуировочном растворе.
<a id="p100165"></a>Методом наименьших квадратов рассчитывают градуировочный коэффициент (K) в уравнении линейной регрессии:

<a id="p100166"></a>C = KS, где

<a id="p100167"></a>S - площадь пика градуировочного раствора.
<a id="p100168"></a>Градуировку признают удовлетворительной, если значение коэффициента линейной корреляции оказывается не ниже 0,99.
<a id="p100169"></a>Градуировочную характеристику необходимо проверять при замене реактивов, хроматографической колонки или элементов хроматографической системы, а также при отрицательном результате контроля градуировочного коэффициента.
<a id="p100170"></a>Градуировочную зависимость признают стабильной при выполнении следующего условия:

<a id="p100171"></a> $\frac{|\text{С } - \text{С}_{K}|}{C} \cdot 100 \leq \lambda_{\text{контр}.}$ , где

<a id="p100172"></a>C - аттестованное значение массовой концентрации флукарбазона натрия в градуировочном растворе;
<a id="p100173"></a>CK - результат контрольного измерения массовой концентрации флукарбазона натрия в градуировочном растворе;
<a id="p100174"></a> $\lambda_{\text{контр}.}$ - норматив контроля градуировочного коэффициента, %. ( $\lambda_{\text{контр}.} = 10\%$ при P = 0,95).


#### <a id="p100175"></a>7.5 Проверка хроматографического поведения флукарбазона

на патроне для твердофазной экстракции

<a id="p100176"></a>В круглодонную колбу емкостью 10 см3 отбирают 1 см3 стандартного раствора флукарбазона N 3. Отдувают растворитель током воздуха. Остаток растворяют в 1 см3 хлористого метилена и переносят на подготовленный патрон. Колбу дважды порциями по 1 см3 обмывают хлористым метиленом и смывы тоже вносят на патроны. Промывают патроны 6 см3 смеси N 1, элюат отбрасывают. Затем элюируют флукарбазон 8 см3 смеси N 2 со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Отбирают фракции по 2 см3, упаривают досуха, растворяют в 1 см3 подвижной фазы и анализируют по [п. 9.4](#p100189).
<a id="p100177"></a>Фракции, содержащие флукарбазон, объединяют и вновь анализируют. Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с патрона и необходимый для очистки объем элюата.
<a id="p100178"></a>*Примечание.* Проверку хроматографического поведения веществ на патронах для ТФЭ следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии патронов и растворителей.


## 8. <a id="p100179"></a>Отбор проб и хранение


<a id="p100180"></a>Отбор проб проводится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79), а также отбор проб семян подсолнечника для анализа проводят в соответствии с [ГОСТ 0852-86](https://bukva.ai/docs/3979) "Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб".
<a id="p100181"></a>Семена хранят при комнатной температуре в полотняных мешочках, перед анализом доводят до стандартной влажности и измельчают. Растительное масло хранят в холодильнике при температуре (0 - 4) °C в герметично закрытой стеклянной таре в течение 6 месяцев.


## 9. <a id="p100182"></a>Проведение определения



#### <a id="p100183"></a>9.1 Определение флукарбазона натрия в семенах подсолнечника


<a id="p100184"></a>Навеску измельченных семян 10 г помещают в коническую плоскодонную колбу, добавляют 50 см3 0,1 М раствора калия фосфорнокислого 2-замещенного и экстрагируют в ультразвуковой ванне 10 мин. Растворитель декантируют и экстракцию повторяют еще с 50 см3 0,1 М раствора калия фосфорнокислого 2-замещенного. Объединенный экстракт фильтруют через вату, подкисляют 2 М раствором фосфорной кислотой до pH 3, переносят в делительную воронку и дважды порциями по 30 см3 экстрагируют хлористым метиленом. Объединенный органический экстракт пропускают через слой безводного сульфата натрия, собирают в круглодонную колбу и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °C. Сухой остаток подвергают очистке по [п. 9.3](#p100187).


#### <a id="p100185"></a>9.2 Определение флукарбазона натрия в масле подсолнечника


<a id="p100186"></a>К навеске масла 10 г добавляют 50 см3 гексана, переносят в делительную воронку и дважды порциями по 20 см3 экстрагируют 0,1 М раствором калия фосфорнокислого 2-замещенного. Объединенный водный экстракт промывают 20 см3 гексана, подкисляют 2 М раствором фосфорной кислотой до pH 3 и дважды порциями по 30 см3 экстрагируют хлористым метиленом. Объединенный органический экстракт пропускают через слой безводного сульфата натрия, собирают в круглодонную колбу и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °C. Сухой остаток подвергают очистке по п. 9.3.


#### <a id="p100187"></a>9.3 Очистка на патроне для твердофазной экстракции


<a id="p100188"></a>Остаток в колбе, полученный при упаривании экстрактов ([п. 9.1](#p100183) - [9.2](#p100185)), количественно переносят тремя 1 см3 порциями хлористого метилена на подготовленный патрон [(п. 7.1.2)](#p100139). Промывают патроны 6 см3 смеси N 1. Флукарбазон элюируют 5 см3 смеси N 2. Элюат переносят в круглодонную колбу емкостью 25 см3 и упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре не выше 40 °C. Сухой остаток растворяют в 1 см3 подвижной фазы и анализируют на содержание флукарбазона натрия по п. 9.4.


#### <a id="p100189"></a>9.4 Условия хроматографирования


<a id="p100190"></a>Ультраэффективный жидкостный хроматограф с УФ-детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки. Аналитическая колонка, заполненная сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18, (100 x 2,1) мм, 1,7 мкм. Температура колонки (30 +/- 1) °C. Подвижная фаза: ацетонитрил и 0,005 М ортофосфорная кислота в соотношении 30:70. Скорость потока элюента: 0,2 см3/мин. Рабочая длина волны УФ-детектора 220 нм. Объем вводимой пробы 10 мм3.


## 10. <a id="p100191"></a>Обработка результатов анализа


<a id="p100192"></a>Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки. Содержание флукарбазона натрия в пробе (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

<a id="p100193"></a> $X = S_{x} \cdot K \cdot \frac{V}{P}$ , где

<a id="p100194"></a>Sx - площадь пика флукарбазона на хроматограмме испытуемого образца, (AU);
<a id="p100195"></a>K - градуировочный коэффициент, найденный на стадии построения соответствующей градуировочной зависимости;
<a id="p100196"></a>V - объем пробы, подготовленной для хроматографического анализа, см3;
<a id="p100197"></a>P - навеска анализируемого образца, г.
<a id="p100198"></a>Содержание остаточных количеств флукарбазона натрия в образце вычисляют как среднее из двух параллельных определений.
<a id="p100199"></a>Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор флукарбазона натрия с концентрацией 5,0 мкг/см3, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.
<a id="p100200"></a>*Примечание.* Расчет содержания вещества в пробах может быть проведен с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую систему.


## 11. <a id="p100201"></a>Проверка приемлемости результатов параллельных определений


<a id="p100202"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости:

<a id="p100203"></a> $\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{X_{1} + X_{2}} \leq r$ , где

<a id="p100204"></a>X<sub>1</sub>, X<sub>2</sub> - результаты параллельных определений, мг/кг;
<a id="p100205"></a>r - значение предела повторяемости $(r = 2,8\sigma_{r})$ .
<a id="p100206"></a>При невыполнении условия выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


## 12. <a id="p100207"></a>Оформление результатов


<a id="p100208"></a>Результат анализа представляют в виде:

<a id="p100209"></a> $(\overline{X} \pm \Delta)$ , мг/кг при вероятности P = 0,95, где

<a id="p100210"></a> $\overline{X}$ - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
<a id="p100211"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

<a id="p100212"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot \overline{X}}{100}$ , где

<a id="p100213"></a> $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
<a id="p100214"></a>В случае если содержание компонента меньше нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100215"></a>"содержание вещества в пробе "менее нижней границы определения" (например: менее 0,5 мг/кг, где 0,5 мг/кг - предел обнаружения флукарбазона натрия в семенах подсолнечника).


## 13. <a id="p100216"></a>Контроль качества результатов измерений


<a id="p100217"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-02](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-1-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
<a id="p100218"></a>13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100219"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.
<a id="p100220"></a>Величина добавки $C_{\partial}$ должна удовлетворять условию:

<a id="p100221"></a> $C_{\partial} = \Delta_{\text{л},X} + \Delta_{\text{л},X\prime}$ , где

<a id="p100222"></a> $\pm \Delta_{\text{л},X}$ $( \pm \Delta_{\text{л},X\prime})$ - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:

<a id="p100223"></a> $\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta$ , где

<a id="p100224"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

<a id="p100225"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot \overline{X}}{100}$ , где

<a id="p100226"></a> $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
<a id="p100227"></a>Результат контроля процедуры Kк рассчитывают по формуле:

<a id="p100228"></a> $K_{\text{к}} = \overline{X}\prime - \overline{X} - C_{\partial}$ , где

<a id="p100229"></a> $\overline{X}\prime$ , $\overline{X}$ , $C_{\partial}$ - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100201)) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки соответственно, мг/кг.
<a id="p100230"></a>Норматив контроля K рассчитывают по формуле:

<a id="p100231"></a> $K = \sqrt{\Delta_{\text{л},X\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},X}^{2}}$ (1)

<a id="p100232"></a>Проводят сопоставление результата контроля процедуры (Kк) с нормативом контроля (K).
<a id="p100233"></a>Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию

<a id="p100234"></a>|Kк| <= K, (2)

<a id="p100235"></a>процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100236"></a>При невыполнении [условия (2)](#p100234) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении [условия (2)](#p100234) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры к их устранению.
<a id="p100237"></a>13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
<a id="p100238"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предел воспроизводимости (R):

<a id="p100239"></a> $\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{X_{1} + X_{2}} \leq R$ , где (3)

<a id="p100240"></a>X<sub>1</sub>, X<sub>2</sub> - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
<a id="p100241"></a>R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций), %.



<a id="p100242"></a>

---