---
title: "\"МУК 4.1.3236-14. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств циклоксидима в воде, почве, ботве и корнеплодах сахарной свеклы, клубнях картофеля, горохе, семенах подсолнечника, рапса, бобах сои и растительном масле методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.3236-14"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-3236-14"
---

## "МУК 4.1.3236-14. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств циклоксидима в воде, почве, ботве и корнеплодах сахарной свеклы, клубнях картофеля, горохе, семенах подсолнечника, рапса, бобах сои и растительном масле методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.3236-14. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств циклоксидима в воде, почве, ботве и корнеплодах сахарной свеклы, клубнях картофеля, горохе, семенах подсолнечника, рапса, бобах сои и растительном масле методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 22.12.2014)


<a id="p100001"></a>Утверждаю
Руководитель Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека,
Главный государственный санитарный врач
Российской Федерации
**А.Ю.ПОПОВА**
22 декабря 2014 года


#### <a id="p100002"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ЦИКЛОКСИДИМА В ВОДЕ, ПОЧВЕ,**
**БОТВЕ И КОРНЕПЛОДАХ САХАРНОЙ СВЕКЛЫ, КЛУБНЯХ КАРТОФЕЛЯ,**
**ГОРОХЕ, СЕМЕНАХ ПОДСОЛНЕЧНИКА, РАПСА, БОБАХ СОИ**
**И РАСТИТЕЛЬНОМ МАСЛЕ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ**
**ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100004"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.3236-14**

1. <a id="p100005"></a>Разработаны сотрудниками ГНУ Всероссийского НИИ защиты растений Россельхозакадемии (В.И. Долженко, И.А. Цибульская, С.Е. Маслаков, В.Ф. Павлова).
2. <a id="p100006"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 6 ноября 2014 г. N 2).
3. <a id="p100007"></a>Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 22 декабря 2014 г.
4. <a id="p100008"></a>Введены впервые.

<a id="p100009"></a>Свидетельство о метрологической аттестации N 01.5.04.182/01.00043/2014.
<a id="p100010"></a>Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации циклоксидима в диапазоне концентраций в воде - 0,005 - 0,05 мг/дм3, почве - 0,1 - 1,0 мг/кг, бобах сои и ботве сахарной свеклы - 0,5 - 5,0 мг/кг, семенах подсолнечника, рапса и корнеплодах сахарной свеклы - 0,2 - 2,0 мг/кг, растительном масле - 0,2 - 2,0 мг/дм3.
<a id="p100011"></a>Методические указания носят рекомендательный характер.
<a id="p100012"></a>Циклоксидим
<a id="p100013"></a>2-[1-(этоксиимино)бутил]-3-гидрокси-5-(тетрагидро-2H-тиопропан-3-ил)-2-циклогексен-1-он.
<a id="p100014"></a>Структурная формула:

<a id="p100015"></a> ![рис. 1](https://i.bukva.ai/NeLlUTdX/img_0.png) 

<a id="p100016"></a>Эмпирическая формула: C17H27NO3S.
<a id="p100017"></a>Молекулярная масса: 325,46.
<a id="p100018"></a>Белый кристаллический порошок без запаха.
<a id="p100019"></a>Температура плавления: 37,1 °C.
<a id="p100020"></a>Разлагается до кипения.
<a id="p100021"></a>Температура разложения 200 °C.
<a id="p100022"></a>Давление пара при 25 °C: 0,01 мПа.
<a id="p100023"></a>Коэффициент распределения н-октанол-вода: Kow logP = 1,36.
<a id="p100024"></a>Растворимость (в г/дм3 при 20 °C): вода - 0,053, гексан - 29, ацетон - 250, этанол - 810, этилацетат - 250.
<a id="p100025"></a>Вещество неустойчиво. Период распада в почве ДТ50 - 4 - 15 дней, полевой ДТ50 - 1 - 5 дней.
<a id="p100026"></a>Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность LD50 для крыс 3 940 мг/кг, острая дермальная токсичность LD50 для млекопитающих > 2 000 мг/кг, ингаляционная LD50 для млекопитающих > 5 мг/кг. СК50 для рыб > 220 мг/л (96 ч), для пчел (LD50 > 100 мкг/особь).
<a id="p100027"></a>Область применения препарата. Послевсходовый гербицид для применения на широколистных культурах (свекле, картофеле, масличных культурах, бобовых и других) для борьбы с одно- и многолетними травами.
<a id="p100028"></a>Гигиенические нормативы для циклоксидима в России: ПДК в воздухе рабочей зоны 0,002 мг/м3 (среднесуточная), в воде 0,01 мг/л, почве - 0,4 мг/кг. МДУ (мг/кг) - зернобобовые (в том числе горох и фасоль) - 2,0; соя (бобы, масло) - 5,0; кукуруза (зерно, масло) - 0,2; подсолнечник (семена, масло) - 1,0; капуста (кочанная, цветная) - 2,0; морковь - 0,5; виноград - 0,5; салат кочанный и листовой - 0,2; картофель - 2,0; рапс (семена) - 2,0; клубника - 0,5; свекла сахарная - 0,5.


## 1. <a id="p100029"></a>Погрешность измерений


<a id="p100030"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1, для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100031"></a>Таблица 1

<a id="p100032"></a>Метрологические параметры


<table>
<colgroup><col width="20%"><col width="15%"><col width="20%"><col width="16%"><col width="11%"><col width="19%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100033"></a>Объект анализа</td><td><a id="p100034"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td><a id="p100035"></a>Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), $\sigma_{r}$ , %</td><td><a id="p100036"></a>Показатель внутрилабораторной прецизионности, $\sigma_{R\text{л}}$ , %</td><td><a id="p100037"></a>Показатель воспроизводимости, $\sigma_{R}$ , %</td><td><a id="p100038"></a>Показатель точности <a href="#p100098">&lt;*&gt;</a> (границы относительной погрешности), $\pm \delta$ , %</td></tr>
<tr><td><a id="p100039"></a>Вода</td><td><a id="p100040"></a>0,005 - 0,05</td><td><a id="p100041"></a>8</td><td><a id="p100042"></a>9</td><td><a id="p100043"></a>11</td><td><a id="p100044"></a>22</td></tr>
<tr><td><a id="p100045"></a>Почва</td><td><a id="p100046"></a>0,1 - 1,0</td><td><a id="p100047"></a>9</td><td><a id="p100048"></a>10</td><td><a id="p100049"></a>12</td><td><a id="p100050"></a>23</td></tr>
<tr><td><a id="p100051"></a>Картофель (клубни)</td><td><a id="p100052"></a>0,2 - 2,0</td><td><a id="p100053"></a>6</td><td><a id="p100054"></a>7</td><td><a id="p100055"></a>10</td><td><a id="p100056"></a>21</td></tr>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100057"></a>Сахарная свекла (корнеплоды, ботва)</td><td><a id="p100058"></a>0,2 - 2,0</td><td><a id="p100059"></a>6</td><td><a id="p100060"></a>7</td><td><a id="p100061"></a>10</td><td><a id="p100062"></a>21</td></tr>
<tr><td><a id="p100063"></a>0,5 - 5,0</td><td><a id="p100064"></a>6</td><td><a id="p100065"></a>7</td><td><a id="p100066"></a>10</td><td><a id="p100067"></a>21</td></tr>
<tr><td><a id="p100068"></a>Подсолнечник (семена)</td><td><a id="p100069"></a>0,2 - 2,0</td><td><a id="p100070"></a>6</td><td><a id="p100071"></a>7</td><td><a id="p100072"></a>10</td><td><a id="p100073"></a>21</td></tr>
<tr><td><a id="p100074"></a>Соя (бобы)</td><td><a id="p100075"></a>0,5 - 5,0</td><td><a id="p100076"></a>6</td><td><a id="p100077"></a>7</td><td><a id="p100078"></a>10</td><td><a id="p100079"></a>21</td></tr>
<tr><td><a id="p100080"></a>Рапс (семена)</td><td><a id="p100081"></a>0,2 - 2,0</td><td><a id="p100082"></a>6</td><td><a id="p100083"></a>7</td><td><a id="p100084"></a>10</td><td><a id="p100085"></a>21</td></tr>
<tr><td><a id="p100086"></a>Растительное масло</td><td><a id="p100087"></a>0,2 - 2,0</td><td><a id="p100088"></a>6</td><td><a id="p100089"></a>7</td><td><a id="p100090"></a>10</td><td><a id="p100091"></a>21</td></tr>
<tr><td><a id="p100092"></a>Горох (семена)</td><td><a id="p100093"></a>0,2 - 2,0</td><td><a id="p100094"></a>6</td><td><a id="p100095"></a>7</td><td><a id="p100096"></a>10</td><td><a id="p100097"></a>21</td></tr>
<tr><td colspan="6"><a id="p100098"></a>&lt;*&gt; Соответствует расширенной неопределенности Uотн. при коэффициенте охвата k = 2.</td></tr>
</table>


<a id="p100099"></a>Таблица 2

<a id="p100100"></a>Полнота извлечения циклоксидима, стандартное отклонение,
доверительный интервал среднего результата
для n = 20, P = 0,95


<table>
<colgroup><col width="20%"><col width="13%"><col width="18%"><col width="11%"><col width="16%"><col width="22%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100101"></a>Анализируемый объект</td><td><a id="p100102"></a>Предел обнаружения, мг/кг</td><td><a id="p100103"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td><a id="p100104"></a>Полнота извлечения,%</td><td><a id="p100105"></a>Стандартное отклонение, S, %</td><td><a id="p100106"></a>Доверительный интервал среднего результата, +/- %</td></tr>
<tr><td><a id="p100107"></a>Вода</td><td><a id="p100108"></a>0,005</td><td><a id="p100109"></a>0,005 - 0,05</td><td><a id="p100110"></a>76,8</td><td><a id="p100111"></a>5,2</td><td><a id="p100112"></a>2,3</td></tr>
<tr><td><a id="p100113"></a>Почва</td><td><a id="p100114"></a>0,1</td><td><a id="p100115"></a>0,1 - 1,0</td><td><a id="p100116"></a>78,1</td><td><a id="p100117"></a>4,5</td><td><a id="p100118"></a>2,0</td></tr>
<tr><td><a id="p100119"></a>Картофель (клубни)</td><td><a id="p100120"></a>0,2</td><td><a id="p100121"></a>0,2 - 2,0</td><td><a id="p100122"></a>76,2</td><td><a id="p100123"></a>6,3</td><td><a id="p100124"></a>5,0</td></tr>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100125"></a>Сахарная свекла (корнеплоды, ботва)</td><td><a id="p100126"></a>0,2</td><td><a id="p100127"></a>0,2 - 2,0</td><td><a id="p100128"></a>75,3</td><td><a id="p100129"></a>5,7</td><td><a id="p100130"></a>4,6</td></tr>
<tr><td><a id="p100131"></a>0,5</td><td><a id="p100132"></a>0,5 - 5,0</td><td><a id="p100133"></a>72,0</td><td><a id="p100134"></a>8,8</td><td><a id="p100135"></a>7,0</td></tr>
<tr><td><a id="p100136"></a>Подсолнечник (семена)</td><td><a id="p100137"></a>0,2</td><td><a id="p100138"></a>0,2 - 2,0</td><td><a id="p100139"></a>81,1</td><td><a id="p100140"></a>5,5</td><td><a id="p100141"></a>4,4</td></tr>
<tr><td><a id="p100142"></a>Соя (бобы)</td><td><a id="p100143"></a>0,5</td><td><a id="p100144"></a>0,5 - 5,0</td><td><a id="p100145"></a>79,3</td><td><a id="p100146"></a>6,1</td><td><a id="p100147"></a>4,9</td></tr>
<tr><td><a id="p100148"></a>Рапс (семена)</td><td><a id="p100149"></a>0,2</td><td><a id="p100150"></a>0,2 - 2,0</td><td><a id="p100151"></a>77,4</td><td><a id="p100152"></a>6,7</td><td><a id="p100153"></a>5,4</td></tr>
<tr><td><a id="p100154"></a>Растительное масло</td><td><a id="p100155"></a>0,2</td><td><a id="p100156"></a>0,2 - 2,0</td><td><a id="p100157"></a>80,4</td><td><a id="p100158"></a>5,5</td><td><a id="p100159"></a>4,4</td></tr>
<tr><td><a id="p100160"></a>Горох (семена)</td><td><a id="p100161"></a>0,2</td><td><a id="p100162"></a>0,2 - 2,0</td><td><a id="p100163"></a>74,5</td><td><a id="p100164"></a>7,2</td><td><a id="p100165"></a>5,8</td></tr>
</table>



## 2. <a id="p100166"></a>Метод измерений


<a id="p100167"></a>Методика основана на определении циклоксидима методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового (УФ) детектора после извлечения из образцов воды, почвы, клубней картофеля, семян и масла сои, подсолнечника и рапса, ботвы и корнеплодов сахарной свеклы органическими растворителями, концентрирования и последующих очистках на патронах для твердофазной экстракции (ТФЭ) с привитыми монофункциональными полярными группами C16 и при необходимости дополнительно с гидрофильным слабокислотным сорбентом на основе силикагеля.
<a id="p100168"></a>Идентификация циклоксидима проводится по времени удерживания, количественное определение - методом абсолютной калибровки.
<a id="p100169"></a>Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования.


## 3. <a id="p100170"></a>Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы



### <a id="p100171"></a>3.1. Средства измерений



| <a id="p100172"></a>Жидкостный хроматограф с УФ-детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки |  |
| --- | --- |
| <a id="p100173"></a>Весы аналитические с пределом взвешивания до 210 г и пределом допустимой погрешности 0,2 мг | <a id="p100174"></a>ГОСТ 24104-01 |
| <a id="p100175"></a>Весы технические с пределом взвешивания до 400 г и допустимой погрешностью 0,1 г | <a id="p100176"></a>ГОСТ 24104-01 |
| <a id="p100177"></a>Колбы мерные на 10, 50, 100 и 1 000 см3 | <a id="p100178"></a>ГОСТ 23932-90 |
| <a id="p100179"></a>Пипетки градуированные объемом 1, 2, 5 и 10 см3 | <a id="p100180"></a>[ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) |
| <a id="p100181"></a>Пробирки мерные со шлифом объемом 5, 10 см3 | <a id="p100182"></a>ГОСТ 23932-90 |
| <a id="p100183"></a>Цилиндры мерные на 50 и 100 см3 | <a id="p100184"></a>ГОСТ 23932-90 |


<a id="p100185"></a>*Примечание.* Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.


### <a id="p100186"></a>3.2. Реактивы



| <a id="p100187"></a>Циклоксидим, аналитический стандарт с содержанием основного компонента 99,0% |  |
| --- | --- |
| <a id="p100188"></a>Ацетон, осч | <a id="p100189"></a>ТУ 6-09-3513-86 |
| <a id="p100190"></a>Ацетонитрил для ВЭЖХ | <a id="p100191"></a>ТУ 2634-002-04715285-12 |
| <a id="p100192"></a>Вода бидистиллированная, деионизированная | <a id="p100193"></a>[ГОСТ Р 52501-05](https://bukva.ai/docs/gost-r-52501-2005) |
| <a id="p100194"></a>Гексан, хч | <a id="p100195"></a>ТУ 2631-003-05807999-98 |
| <a id="p100196"></a>Дихлорметан, хч | <a id="p100197"></a>ТУ 6-09-2662-77 |
| <a id="p100198"></a>Изопропиловый спирт, хч | <a id="p100199"></a>ТУ 2632-015-11291058-95 |
| <a id="p100200"></a>Кислота ортофосфорная, хч, 0,005 М водный раствор | <a id="p100201"></a>ГОСТ 6552-80 |
| <a id="p100202"></a>Метиловый спирт, хч | <a id="p100203"></a>[ГОСТ 6995-77](https://bukva.ai/docs/standart-gost-6995-77) |
| <a id="p100204"></a>Натрий сернокислый безводный, хч | <a id="p100205"></a>[ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76) |
| <a id="p100206"></a>Раствор N 1 (гексан-этилацетат в соотношении 2:1) |  |
| <a id="p100207"></a>Раствор N 2 (гексан-этилацетат в соотношении 1:1) |  |
| <a id="p100208"></a>Подвижная фаза для ВЭЖХ: смесь ацетонитрил - 0,005 М раствор ортофосфорной кислоты в воде в соотношении 75:25 |  |
| <a id="p100209"></a>Этиловый эфир уксусной кислоты, чда | <a id="p100210"></a>[ГОСТ 22300-76](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76) |


<a id="p100211"></a>*Примечание.* Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки.


### <a id="p100212"></a>3.3. Вспомогательные устройства и материалы



| <a id="p100213"></a>Аналитическая колонка, заполненная сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18 (150 x 3,9) мм с зернением 5 мкм |  |
| --- | --- |
| <a id="p100214"></a>Аппарат для встряхивания проб | <a id="p100215"></a>ТУ 64-1-1081-73 |
| <a id="p100216"></a>Воронки химические конусные | <a id="p100217"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100218"></a>Воронки делительные емкостью 100 и 250 см3 | <a id="p100219"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100220"></a>Колбы плоскодонные конические вместимостью 100 см3 | <a id="p100221"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100222"></a>Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 10, 50, 100 см3 и 250 мл | <a id="p100223"></a>[ГОСТ 9737-93](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93) |
| <a id="p100224"></a>Патроны N 1 для ТФЭ с гидрофильным слабокислотным сорбентом с постоянной активностью на основе силикагеля, 0,4 г | <a id="p100225"></a>ТУ 4215-002-0545-931-94 |
| <a id="p100226"></a>Патроны N 2 для ТФЭ на основе силикагеля с привитыми монофункциональными полярными группами C16, 0,4 г | <a id="p100227"></a>ТУ 4215-002-0545-931-94 |
| <a id="p100228"></a>Предколонка для защиты аналитической колонки, заполненная сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18 (40 x 3,9) мм с зернением 5 мкм |  |
| <a id="p100229"></a>Ротационный вакуумный испаритель с мембранным насосом, обеспечивающим вакуум до 10 мбар |  |
| <a id="p100230"></a>Ультразвуковая ванна с рабочей частотой 35 кГц |  |
| <a id="p100231"></a>Фильтры бумажные обезжиренные быстрой фильтрации | <a id="p100232"></a>ТУ 6.091678-86 |
| <a id="p100233"></a>Центрифуга с максимальной рабочей частотой вращения 4 000 об./мин |  |


<a id="p100234"></a>*Примечание.* Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.


## 4. <a id="p100235"></a>Требования безопасности


<a id="p100236"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.
<a id="p100237"></a>4.2. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией, соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313-03 и ГН 2.2.5.2308-07.
<a id="p100238"></a>Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.


## 5. <a id="p100239"></a>Требования к квалификации операторов


<a id="p100240"></a>Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по [п. 13](#p100335).


## 6. <a id="p100241"></a>Условия измерений


<a id="p100242"></a>При выполнении измерений выполняют следующие условия:
- <a id="p100243"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100244"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


## 7. <a id="p100245"></a>Подготовка к определению



### <a id="p100246"></a>7.1. Кондиционирование колонки


<a id="p100247"></a>Перед началом анализа аналитическую колонку (150 x 3,9) мм кондиционируют в потоке подвижной фазы (0,5 - 1,0 см3/мин) до стабилизации нулевой линии.


### <a id="p100248"></a>7.2. Кондиционирование патронов для твердофазной экстракции


<a id="p100249"></a>7.2.1. Патрон N 1 на основе силикагеля с привитыми монофункциональными полярными группами C16 промывают 5 см3 ацетонитрила.
<a id="p100250"></a>7.2.2. Патрон N 2 с гидрофильным слабокислотным сорбентом с постоянной активностью промывают 2 см3 раствора N 1, затем 3 см3 гексана.


### <a id="p100251"></a>7.3. Подготовка растворителей и приготовление растворов


<a id="p100252"></a>7.3.1. Подготовка растворителей. Растворители, используемые для анализа, специальной подготовки не требуют. Рекомендуется проверить чистоту применяемых растворителей. При обнаружении примесей, которые могут мешать определению, растворители очищают общепринятыми методами.
<a id="p100253"></a>7.3.2. 0,005 М раствор ортофосфорной кислоты: (0,5 +/- 0,01) г 98%-й ортофосфорной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1 дм3, растворяют в бидистиллированной воде и доводят объем до метки.
<a id="p100254"></a>7.3.3. Раствор N 1 (гексан-этилацетат в соотношении 2:1). В колбу на 500 см3 помещают 200 см3 гексана и добавляют 100 см3 этилацетата.
<a id="p100255"></a>7.3.4. Раствор N 2 (гексан-этилацетат в соотношении 1:1). В колбу на 500 см3 помещают 200 см3 гексана и добавляют 200 см3 этилацетата.


### <a id="p100256"></a>7.4. Приготовление основного и градуировочных растворов


<a id="p100257"></a>7.4.1. Основной раствор с концентрацией 0,5 мг/см3. Точную навеску циклоксидима (50 +/- 0,5) мг помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3, растворяют в метаноле и доводят объем до метки метанолом.
<a id="p100258"></a>Градуировочные растворы с концентрациями циклоксидима 0,2, 0,5, 1,0, 2,0, 5,0 и 10,0 мкг/см3 готовят методом последовательного разбавления по объему.
<a id="p100259"></a>7.4.2. Раствор N 1 с концентрацией 10,0 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 100 см3 вносят 2 см3 основного раствора и доводят до метки ацетонитрилом.
<a id="p100260"></a>7.4.3. Раствор N 2 с концентрацией 5 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 5,0 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки ацетонитрилом.
<a id="p100261"></a>7.4.4. Раствор N 3 с концентрацией 2 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 2 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки ацетонитрилом.
<a id="p100262"></a>7.4.5. Раствор N 4 с концентрацией 1 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 1,0 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки ацетонитрилом.
<a id="p100263"></a>7.4.6. Раствор N 5 с концентрацией 0,5 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 1,0 см3 раствора N 2 и доводят объем до метки ацетонитрилом.
<a id="p100264"></a>7.4.7. Раствор N 6 с концентрацией 0,2 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 1,0 см3 раствора N 3 и доводят объем до метки ацетонитрилом.
<a id="p100265"></a>Основной раствор можно хранить в холодильнике при температуре 0 - 4 °C в течение месяца, градуировочные растворы - в течение недели.
<a id="p100266"></a>При определении полноты извлечения для внесения в образец следует использовать растворы циклоксидима в ацетонитриле.


### <a id="p100267"></a>7.5. Построение градуировочного графика


<a id="p100268"></a>Для установления градуировочной характеристики (площадь пика - концентрация циклоксидима в растворе) в хроматограф вводят по 20 мм3 градуировочных растворов (не менее 3 параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4 точек по диапазону измеряемых концентраций). Затем измеряют площади пиков и строят график зависимости среднего значения площади пика от концентрации циклоксидима в градуировочном растворе.
<a id="p100269"></a>Методом наименьших квадратов рассчитывают градуировочный коэффициент (K1) в уравнении линейной регрессии концентрации раствора C:

<a id="p100270"></a>**C = K1·S,**

<a id="p100271"></a>где S - площадь пика градуировочного раствора.
<a id="p100272"></a>Градуировку признают удовлетворительной, если значение коэффициента линейной корреляции оказывается не ниже 0,99.
<a id="p100273"></a>Градуировочную характеристику необходимо проверять при замене реактивов, хроматографической колонки или элементов хроматографической системы, а также при отрицательном результате контроля градуировочного коэффициента.
<a id="p100274"></a>Градуировочную зависимость признают стабильной при выполнении следующего условия:

<a id="p100275"></a> $\frac{|C - C_{\text{к}}|}{C} \cdot 100 \leq \lambda_{\text{контр}.},$ 

<a id="p100276"></a>где C - аттестованное значение массовой концентрации циклоксидима в градуировочном растворе;
<a id="p100277"></a>Cк - результат контрольного измерения массовой концентрации циклоксидима в градуировочном растворе;
<a id="p100278"></a> $\lambda_{\text{контр}.}$ - норматив контроля градуировочного коэффициента, % ( $\lambda_{\text{контр}.} = 10\%$ при P = 0,95).


### <a id="p100279"></a>7.6. Подготовка приборов и средств измерения


<a id="p100280"></a>Установка и подготовка всех приборов и средств измерения производится в соответствии с требованиями технической документации.


### <a id="p100281"></a>7.7. Проверка хроматографического поведения циклоксидима на патронах для ТФЭ


<a id="p100282"></a>7.7.1. Проверка хроматографического поведения циклоксидима на патроне N 1 для ТФЭ.
<a id="p100283"></a>На подготовленный патрон N 1 [(п. 7.2.1)](#p100249) вносят 1 см3 градуировочного раствора циклоксидима с концентрацией 10 мкг/см3. Элюируют циклоксидим ацетонитрилом со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Отбирают фракции по 2 см3 и анализируют по [п. 9.3](#p100306).
<a id="p100284"></a>Фракции, содержащие циклоксидим, объединяют и вновь анализируют. Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с патрона и необходимый для очистки объем элюата.
<a id="p100285"></a>7.7.2. Проверка хроматографического поведения циклоксидима на патроне N 2 для ТФЭ.
<a id="p100286"></a>В круглодонную колбу емкостью 10 см3 отбирают 1 см3 градуировочного раствора циклоксидима с концентрацией 10 мкг/см3. Растворитель выпаривают досуха на вакуумном ротационном испарителе при температуре бани 40 °C. Остаток растворяют в 1 см3 гексана и переносят на подготовленный патрон [(п. 7.2.2)](#p100250). Колбу обмывают 1 см3 гексана и смыв тоже переносят на патрон. Промывают патрон 3 см3 гексана, элюат отбрасывают. Затем элюируют циклоксидим раствором N 1 со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Отбирают фракции по 2 см3, упаривают досуха, растворяют в 1 см3 ацетонитрила и анализируют по [п. 9.3](#p100306).
<a id="p100287"></a>Фракции, содержащие циклоксидим, объединяют и вновь анализируют. Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с патрона и необходимый для очистки объем элюата.


## 8. <a id="p100288"></a>Отбор проб и хранение


<a id="p100289"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79), а также в соответствии с [ГОСТ Р 51592-2000](https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-51592-2000) "Вода. Общие требования к отбору проб"; [ГОСТ 28168-89](https://bukva.ai/docs/gost-28168-89) "Почвы. Отбор проб"; [ГОСТ 1722-85](https://bukva.ai/docs/gost-1722-85) "Свекла столовая свежая, заготовляемая и поставляемая"; [ГОСТ 7194-81](https://bukva.ai/docs/gost-7194-81) "Картофель свежий. Правила приемки и методы определения качества"; отбор проб семян подсолнечника, рапса и бобов сои для анализа проводят в соответствии с [ГОСТ 10852-86](https://bukva.ai/docs/3979) "Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб"; [ГОСТ 28674-90](https://bukva.ai/docs/gost-28674-90) "Горох. Требования при заготовке и поставке".
<a id="p100290"></a>Отобранные пробы хранят до анализа в герметичной полиэтиленовой упаковке в морозильной камере при -18 °C. Пробы почвы подсушиваются при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Перед анализом сухую почву доводят до стандартной влажности, просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм. Пробы картофеля и сахарной свеклы перед анализом, не размораживая, измельчают. Семена рапса, сои, подсолнечника и гороха перед анализом доводят до стандартной влажности и измельчают. Пробы воды и растительного масла хранят в холодильнике при температуре 0 - 4 °C в герметично закрытой стеклянной таре не более месяца.


## 9. <a id="p100291"></a>Проведение определения



### <a id="p100292"></a>9.1. Экстракция циклоксидима



##### <a id="p100293"></a>9.1.1 Вода


<a id="p100294"></a>В круглодонную колбу на 500 см3 помещают 200 см3 анализируемой воды. Воду выпаривают на вакуумном ротационном испарителе досуха при температуре бани 40 °C. Остаток растворяют в 5 см3 ацетонитрила и хроматографируют по [п. 9.3](#p100306).


##### <a id="p100295"></a>9.1.2 Экстракция циклоксидима из почвы, корнеплодов

сахарной свеклы, семян рапса, сои, подсолнечника,
зерна гороха

<a id="p100296"></a>Навеску почвы, измельченных проб семян масличных, корнеплодов сахарной свеклы или зерна гороха (10 +/- 0,1) г помещают в плоскодонную коническую колбу вместимостью 100 см3, добавляют 30 см3 ацетонитрила, колбу помещают в ультразвуковую ванну на 5 мин или в аппарат для встряхивания на 15 мин. Суспензию центрифугируют 10 мин при 5 000 об./мин. Экстракт фильтруют в круглодонную колбу на 250 см3 через бумажный обезжиренный фильтр быстрой фильтрации. Повторяют экстракцию еще 3 раза. Фильтр промывают 10 см3 ацетонитрила. Объединенный экстракт выпаривают досуха на вакуумном ротационном испарителе при температуре бани 40 °C. Остаток растворяют в 5 - 10 см3 ацетонитрила. Отбирают 1 см3 раствора и проводят очистку на патроне N 1 для ТФЭ [(п. 9.2.1)](#p100302).


##### <a id="p100297"></a>9.1.3 Экстракция циклоксидима из растительного масла


<a id="p100298"></a>Навеску масла (10 - 20 +/- 0,1) г помещают в делительную воронку на 100 см3 и экстрагируют 4 раза по 30 см3 ацетонитрилом. Объединенный экстракт упаривают досуха на вакуумном ротационном испарителе при температуре бани не выше 40 °C. Остаток растворяют в 10 см3 ацетонитрила. Отбирают 1 см3 раствора и проводят очистку на патроне N 1 для ТФЭ [(п. 9.2.1)](#p100302).


##### <a id="p100299"></a>9.1.4 Экстракция циклоксидима из ботвы сахарной свеклы,

клубней картофеля

<a id="p100300"></a>Навеску 10 г измельченной пробы помещают в коническую колбу емкостью 100 см3, добавляют 30 см3 раствора гексан-ацетон в соотношении 1:1 и перемешивают на аппарате для встряхивания в течение 15 мин. Суспензию центрифугируют 10 мин при 5 000 об./мин. Экстракт фильтруют в круглодонную колбу емкостью 250 см3 методом декантации через бумажный фильтр со слоем безводного сульфата натрия. Фильтр с сульфатом натрия промывают раствором гексан-ацетон три раза по 20 см3. Объединенный экстракт упаривают досуха на вакуумном ротационном испарителе при температуре бани не выше 40 °C. Остаток растворяют в 10 см3 ацетонитрила. Отбирают 1 см3 раствора и проводят очистку на патроне N 1 для ТФЭ [(п. 9.2)](#p100301).


### <a id="p100301"></a>9.2. Очистка на патронах для ТФЭ


<a id="p100302"></a>9.2.1. Очистка на патроне N 1: 1 см3 растворенного в ацетонитриле экстракта переносят на подготовленный по [п. 7.2.1](#p100249) патрон N 1. Элюируют циклоксидим 4 см3 ацетонитрила со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Элюат упаривают досуха, растворяют в 1 см3 ацетонитрила и анализируют по [п. 9.3](#p100306).
<a id="p100303"></a>В случае наличия в контрольных пробах мешающих определению примесей проводят очистку экстракта на патронах N 2 с гидрофильным слабокислотным сорбентом с постоянной активностью на основе силикагеля.
<a id="p100304"></a>9.2.2. Очистка на патроне N 2: в круглодонную колбу емкостью 10 см3 отбирают 1 см3 растворенного в ацетонитриле экстракта. Растворитель выпаривают досуха на вакуумном ротационном испарителе при температуре бани 40 °C. Остаток растворяют в 1 см3 гексана и переносят на подготовленный патрон [(п. 7.2)](#p100248). Колбу обмывают 1 см3 гексана и смыв тоже переносят на патрон. Промывают патрон 3 см3 гексана, элюат отбрасывают. Затем элюируют циклоксидим 5 см3 раствора N 1 со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Элюат упаривают досуха, растворяют в 1 см3 ацетонитрила и анализируют по [п. 9.3](#p100306).
<a id="p100305"></a>*Примечание.* Хроматографирование экстрактов ввиду нестабильности циклоксидима рекомендуется проводить сразу после приготовления. Хранение экстрактов подготовленных проб в холодильнике при температуре 0 - 4 °C не более 72 часов.


### <a id="p100306"></a>9.3. Условия хроматографирования


<a id="p100307"></a>Жидкостный хроматограф с УФ-детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки.
<a id="p100308"></a>Аналитическая колонка, заполненная сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18 (150 x 3,9) мм с зернением 5 мкм. Предколонка для защиты аналитической колонки, заполненная сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18 (40 x 3,9) мм с зернением 5 мкм.
<a id="p100309"></a>Температура колонки (30 +/- 1) °C. Подвижная фаза: ацетонитрил - 0,005 М ортофосфорная кислота в соотношении 75:25. Скорость потока элюента: 1,0 см3/мин. Рабочая длина волны УФ-детектора 260 нм. Объем вводимой пробы 20 мм3. Время удерживания циклоксидима (5,1 +/- 0,2) мин.


## 10. <a id="p100310"></a>Обработка результатов анализа


<a id="p100311"></a>Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки. Содержание циклоксидима в пробе (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

<a id="p100312"></a> $X = \frac{S_{\text{х}} \cdot K \cdot V}{P} \cdot \frac{100}{f} ,$ 

<a id="p100313"></a>где Sх - площадь пика циклоксидима на хроматограмме испытуемого образца, мм2 (AU);
<a id="p100314"></a>K - градуировочный коэффициент, найденный на стадии построения соответствующей градуировочной зависимости;
<a id="p100315"></a>V - объем пробы, подготовленной для хроматографического анализа, см3;
<a id="p100316"></a>P - навеска анализируемого образца, г;
<a id="p100317"></a>f - полнота извлечения циклоксидима, приведенная в [табл. 2](#p100100), %.
<a id="p100318"></a>Содержание остаточных количеств циклоксидима в образце вычисляют как среднее из двух параллельных определений.
<a id="p100319"></a>Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор циклоксидима с концентрацией 2,0 мкг/см3, разбавляют ацетонитрилом.


## 11. <a id="p100320"></a>Проверка приемлемости результатов параллельных определений


<a id="p100321"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости:

<a id="p100322"></a> $\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq r,$ (1)

<a id="p100323"></a>где X<sub>1</sub>, X<sub>2</sub> - результаты параллельных определений, мг/кг;
<a id="p100324"></a>r - значение предела повторяемости $(r = 2,8\sigma_{r})$ .
<a id="p100325"></a>При невыполнении [условия (1)](#p100322) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


## 12. <a id="p100326"></a>Оформление результатов


<a id="p100327"></a>Результат анализа представляют в виде:

<a id="p100328"></a> $(X \pm \Delta)\text{мг}/\text{кг}$ при вероятности P = 0,95,

<a id="p100329"></a>где X - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
<a id="p100330"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

<a id="p100331"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot X}{100} ,$ 

<a id="p100332"></a>где $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
<a id="p100333"></a>В случае, если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100334"></a>"содержание вещества в пробе "менее нижней границы определения" (например: менее 0,2 мг/кг*, где * - 0,2 мг/кг - предел обнаружения циклоксидима в зерне гороха).


## 13. <a id="p100335"></a>Контроль качества результатов измерений


<a id="p100336"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1 - 6-02](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
<a id="p100337"></a>13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100338"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.
<a id="p100339"></a>Величина добавки Cд должна удовлетворять условию:

<a id="p100340"></a> $C_{\text{д}} = \Delta_{\text{л},X} + \Delta_{\text{л},X\prime},$ 

<a id="p100341"></a>где $\pm \Delta_{\text{л},X}$ $( \pm \Delta_{\text{л},X\prime})$ - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой, соответственно), мг/кг; при этом:

<a id="p100342"></a> $\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta,$ 

<a id="p100343"></a>где $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

<a id="p100344"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot X}{100} ,$ 

<a id="p100345"></a>где $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
<a id="p100346"></a>Результат контроля процедуры Kк рассчитывают по формуле:

<a id="p100347"></a>Kк = X' - X - Cд,

<a id="p100348"></a>где X', X, Cд - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100320)) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки, соответственно, мг/кг.
<a id="p100349"></a>Норматив контроля K рассчитывают по формуле:

<a id="p100350"></a> $K = \sqrt{\Delta_{\text{л},X\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},X}^{2}} .$ (1)

<a id="p100351"></a>Проводят сопоставление результата контроля процедуры (Kк) с нормативом контроля (K).
<a id="p100352"></a>Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию

<a id="p100353"></a>|Kк| <= K, (2)

<a id="p100354"></a>процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100355"></a>При невыполнении [условия (2)](#p100353) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении [условия (2)](#p100353) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры к их устранению.
<a id="p100356"></a>13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
<a id="p100357"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

<a id="p100358"></a> $\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq R,$ (3)

<a id="p100359"></a>где X<sub>1</sub>, X<sub>2</sub> - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
<a id="p100360"></a>R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций), %.



<a id="p100361"></a>

---