---
title: "\"МУК 4.1.3133-13. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств циазофамида в воде, почве, ботве и клубнях картофеля, плодах томатов и томатном соке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.3133-13"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-3133-13"
---

## "МУК 4.1.3133-13. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств циазофамида в воде, почве, ботве и клубнях картофеля, плодах томатов и томатном соке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.3133-13. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств циазофамида в воде, почве, ботве и клубнях картофеля, плодах томатов и томатном соке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 12.11.2013)


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Врио руководителя<br>
Федеральной службы<br>
по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главного государственного<br>
санитарного врача<br>
Российской Федерации<br>
**А.Ю.ПОПОВА**<br>
12 ноября 2013 года

</div>



#### <a id="p100002"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ЦИАЗОФАМИДА В ВОДЕ, ПОЧВЕ,**
**БОТВЕ И КЛУБНЯХ КАРТОФЕЛЯ, ПЛОДАХ ТОМАТОВ И ТОМАТНОМ СОКЕ**
**МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100004"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="right">

**МУК 4.1.3133-13**

</div>


1. <a id="p100005"></a>Разработаны сотрудниками "ГНУ Всероссийский НИИ защиты растений Россельхозакадемии" (В.И. Долженко, И.А. Цибульская, Т.Д. Черменская, А.С. Комарова); ГБОУ ДПО "Российская медицинская академия последипломного образования" Минздрава России (М.С. Орлов).
2. <a id="p100006"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (Протокол от 29 октября 2013 г. N 3).
3. <a id="p100007"></a>Утверждены врио руководителя Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главного государственного санитарного врача Российской Федерации А.Ю. Поповой 12 ноября 2013 г.
4. <a id="p100008"></a>Введены впервые.

<a id="p100009"></a>Свидетельство о метрологической аттестации N 01.5.04.133/01.00043/2013.
<a id="p100010"></a>Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации циазофамида в воде в диапазоне концентраций 0,001 - 0,01 мг/дм3, в почве, клубнях картофеля, томатах и томатном соке - в диапазоне концентраций 0,01 - 0,1 мг/кг, в ботве картофеля - в диапазоне концентраций 0,05 - 0,5 мг/кг.
<a id="p100011"></a>Методические указания носят рекомендательный характер.
<a id="p100012"></a>Название действующего вещества по ИСО: циазофамид.
<a id="p100013"></a>Название действующего вещества по ИЮПАК: 4-хлор-2-циано-N,N-диметил-5-p-толилимидазол-1-сульфонамид.
<a id="p100014"></a>Структурная формула:

<a id="p100015"></a> ![рис. 1](https://i.bukva.ai/NeLlULzq/img_0.png) 

<div align="center">

<a id="p100016"></a>Эмпирическая формула: $\text{С}_{13}H_{13}ClN_{4}O_{2}S$ .

</div>

<a id="p100017"></a>Молекулярная масса: 324,78.
<a id="p100018"></a>Химически чистое вещество представляет собой кристаллический порошок белого цвета без запаха.
<a id="p100019"></a>Температура плавления: 153 °C.
<a id="p100020"></a>Коэффициент распределения в системе н-октанол-вода $\text{К}_{ow}lgP = 3,2$ (20 °C).
<a id="p100021"></a>Растворимость в воде (мг/дм3, 20 °C): 0,114.
<a id="p100022"></a>Растворимость в органических растворителях (г/дм3, 20 °C): ацетон - 41,9; толуол - 5,3; гексан - 0,03; октанол - 0,25.
<a id="p100023"></a>Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная - $\text{ЛД}_{50}>5000\text{мг}/\text{кг}$ массы тела. Острая токсичность: рыбы $\text{СК}_{50} = 0,56\text{мг}/\text{л}$ , дафнии $\text{ЭК}_{50} = 0,19\text{мг}/\text{л}$ .
<a id="p100024"></a>Область применения. Системный фунгицид, класса цианоимидазола, применяется против фитофтороза и других заболеваний, вызываемых грибами рода Оомицетов на картофеле, томатах, огурцах; обладает высокой эффективностью против фениламидустойчивых грибов.
<a id="p100025"></a>В России для циазофамида гигиенические нормативы не установлены.


## 1. <a id="p100026"></a>ПОГРЕШНОСТЬ ИЗМЕРЕНИЙ


<a id="p100027"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1, для соответствующих диапазонов концентраций.

<div align="center">

<a id="p100028"></a>Таблица 1

</div>


<a id="p100029"></a>Метрологические параметры


<table>
<colgroup><col width="13%"><col width="16%"><col width="19%"><col width="18%"><col width="18%"><col width="16%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100030"></a>Объект анализа</td><td><a id="p100031"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/дм3)</td><td><a id="p100032"></a>Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), $\sigma_{r},%$</td><td><a id="p100033"></a>Показатель внутрилабораторной прецизионности, $\sigma_{R\text{л}},%$</td><td><a id="p100034"></a>Показатель воспроизводимости, $\sigma_{R},%$</td><td><a id="p100035"></a>Показатель точности <a href="#p100072">&lt;*&gt;</a> (границы относительной погрешности), $\pm \delta,%$</td></tr>
<tr><td><a id="p100036"></a>Вода</td><td><a id="p100037"></a>0,001 - 0,01</td><td><a id="p100038"></a>8</td><td><a id="p100039"></a>9</td><td><a id="p100040"></a>11</td><td><a id="p100041"></a>22</td></tr>
<tr><td><a id="p100042"></a>Почва</td><td><a id="p100043"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100044"></a>9</td><td><a id="p100045"></a>11</td><td><a id="p100046"></a>12</td><td><a id="p100047"></a>24</td></tr>
<tr><td><a id="p100048"></a>Ботва картофеля</td><td><a id="p100049"></a>0,05 - 0,5</td><td><a id="p100050"></a>9</td><td><a id="p100051"></a>11</td><td><a id="p100052"></a>12</td><td><a id="p100053"></a>24</td></tr>
<tr><td><a id="p100054"></a>Клубни картофеля</td><td><a id="p100055"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100056"></a>7</td><td><a id="p100057"></a>9</td><td><a id="p100058"></a>12</td><td><a id="p100059"></a>23</td></tr>
<tr><td><a id="p100060"></a>Томаты</td><td><a id="p100061"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100062"></a>9</td><td><a id="p100063"></a>11</td><td><a id="p100064"></a>12</td><td><a id="p100065"></a>24</td></tr>
<tr><td><a id="p100066"></a>Томатный сок</td><td><a id="p100067"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100068"></a>7</td><td><a id="p100069"></a>9</td><td><a id="p100070"></a>12</td><td><a id="p100071"></a>23</td></tr>
<tr><td colspan="6"><a id="p100072"></a>&lt;*&gt; Соответствует расширенной неопределенности $U_{\text{отн}.}$ при коэффициенте охвата k = 2.</td></tr>
</table>


<div align="center">

<a id="p100073"></a>Таблица 2

<a id="p100074"></a>Полнота извлечения циазофамида, стандартное отклонение,<br>
доверительный интервал среднего результата

</div>

для n = 20, P = 0,95


| <a id="p100075"></a>Анализируемый объект | <a id="p100076"></a>Предел обнаружения, мг/кг (мг/дм3) | <a id="p100077"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/дм3) | <a id="p100078"></a>Полнота извлечения, % | <a id="p100079"></a>Стандартное отклонение, S | <a id="p100080"></a>Доверительный интервал среднего результата, $\pm \%$ |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100081"></a>Вода | <a id="p100082"></a>0,001 | <a id="p100083"></a>0,001 - 0,01 | <a id="p100084"></a>88,8 | <a id="p100085"></a>3,17 | <a id="p100086"></a>1,59 |
| <a id="p100087"></a>Почва | <a id="p100088"></a>0,01 | <a id="p100089"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100090"></a>92,4 | <a id="p100091"></a>4,18 | <a id="p100092"></a>2,09 |
| <a id="p100093"></a>Ботва картофеля | <a id="p100094"></a>0,05 | <a id="p100095"></a>0,05 - 0,5 | <a id="p100096"></a>82,6 | <a id="p100097"></a>4,30 | <a id="p100098"></a>2,15 |
| <a id="p100099"></a>Клубни картофеля | <a id="p100100"></a>0,01 | <a id="p100101"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100102"></a>82,0 | <a id="p100103"></a>2,39 | <a id="p100104"></a>1,19 |
| <a id="p100105"></a>Томаты | <a id="p100106"></a>0,01 | <a id="p100107"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100108"></a>89,4 | <a id="p100109"></a>4,09 | <a id="p100110"></a>2,05 |
| <a id="p100111"></a>Томатный сок | <a id="p100112"></a>0,01 | <a id="p100113"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100114"></a>87,4 | <a id="p100115"></a>1,77 | <a id="p100116"></a>0,89 |



## 2. <a id="p100117"></a>МЕТОД ИЗМЕРЕНИЙ


<a id="p100118"></a>Методика основана на определении циазофамида методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового детектора (УФ) после его извлечения из образцов ацетонитрилом и последующей очистке на патроне для твердофазной экстракции (ТФЭ).
<a id="p100119"></a>Идентификация циазофамида проводится по времени удерживания, количественное определение - методом абсолютной калибровки.
<a id="p100120"></a>Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования.


## 3. <a id="p100121"></a>СРЕДСТВА ИЗМЕРЕНИЙ, РЕАКТИВЫ, ВСПОМОГАТЕЛЬНЫЕ УСТРОЙСТВА И МАТЕРИАЛЫ



### <a id="p100122"></a>3.1. Средства измерений



| <a id="p100123"></a>Жидкостный хроматограф с быстросканирующим УФ-детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки |  |
| --- | --- |
| <a id="p100124"></a>Весы аналитические с пределом взвешивания до 210 г и пределом допустимой погрешности 0,2 мг | <a id="p100125"></a>ГОСТ 24104-01 |
| <a id="p100126"></a>Весы технические с пределом взвешивания до 400 г и допустимой погрешностью 0,1 г | <a id="p100127"></a>ГОСТ 24104-01 |
| <a id="p100128"></a>Колбы мерные на 10, 100 см3 | <a id="p100129"></a>ГОСТ 23932-90 |
| <a id="p100130"></a>Микродозаторы одноканальные переменного объема от 200 до 1 000 мм3 и от 1 до 5 см3 |  |
| <a id="p100131"></a>Цилиндры мерные на 50 и 100 см3 | <a id="p100132"></a>ГОСТ 23932-90 |


<a id="p100133"></a>*Примечание.* Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.


### <a id="p100134"></a>3.2. Реактивы



| <a id="p100135"></a>Ацетонитрил, х.ч. | <a id="p100136"></a>ТУ 6-09-3534-87 |
| --- | --- |
| <a id="p100137"></a>Вода для лабораторного анализа (бидистиллированная, деионизованная) | <a id="p100138"></a>[ГОСТ Р 52501-05](https://bukva.ai/docs/gost-r-52501-2005) |
| <a id="p100139"></a>н-Гексан, х.ч. | <a id="p100140"></a>ТУ 6-09-3375-78 |
| <a id="p100141"></a>Кислота ортофосфорная, х.ч. | <a id="p100142"></a>ГОСТ 6552-80 |
| <a id="p100143"></a>Магний сернокислый семиводный, х.ч. | <a id="p100144"></a>[ГОСТ 4523-77](https://bukva.ai/docs/gost-4523-77) |
| <a id="p100145"></a>Натрий сернокислый безводный, х.ч. | <a id="p100146"></a>[ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76) |
| <a id="p100147"></a>Натрий хлористый, ч.д.а. | <a id="p100148"></a>ГОСТ 4233-77 |
| <a id="p100149"></a>Смесь N 1: гексан-этилацетат в соотношении 9:1 по объему |  |
| <a id="p100150"></a>Смесь N 2: гексан-этилацетат в соотношении 2:1 по объему |  |
| <a id="p100151"></a>Подвижная фаза для ВЭЖХ: смесь ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 50:50 |  |
| <a id="p100152"></a>Циазофамид, аналитический стандарт с содержанием основного вещества 98,2% |  |
| <a id="p100153"></a>Этилацетат, х.ч. | <a id="p100154"></a>ГОСТ 1138-84 |


<a id="p100155"></a>*Примечание.* Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.


### <a id="p100156"></a>3.3. Вспомогательные устройства и материалы



| <a id="p100157"></a>Аналитическая колонка для неионогенных среднеполярных соединений (100 x 2,1) мм, 1,7 мкм |  |
| --- | --- |
| <a id="p100158"></a>Аппарат для встряхивания проб | <a id="p100159"></a>ТУ 64-1-1081-73 |
| <a id="p100160"></a>Воронки лабораторные конусные | <a id="p100161"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100162"></a>Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 25, 100 см3 | <a id="p100163"></a>[ГОСТ 9737-93](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93) |
| <a id="p100164"></a>Патроны для ТФЭ с гидрофильным слабокислотным сорбентом с постоянной активностью |  |
| <a id="p100165"></a>Пробирки полипропиленовые центрифужные с крышками объемом 50 см3 |  |
| <a id="p100166"></a>Ротационный вакуумный испаритель с мембранным насосом, обеспечивающим вакуум 10 мбар |  |
| <a id="p100167"></a>Стаканы химические вместимостью 150 см3 | <a id="p100168"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100169"></a>Фильтры бумажные быстрой фильтрации | <a id="p100170"></a>ТУ 6.091678-86 |
| <a id="p100171"></a>Центрифуга с максимальной рабочей частотой вращения 4 000 об./мин |  |


<a id="p100172"></a>*Примечание.* Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.


## 4. <a id="p100173"></a>ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ


<a id="p100174"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.
<a id="p100175"></a>4.2. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией, соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313-03 и 2.2.5.2308-07.
<a id="p100176"></a>Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.


## 5. <a id="p100177"></a>ТРЕБОВАНИЯ К КВАЛИФИКАЦИИ ОПЕРАТОРОВ


<a id="p100178"></a>Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по [п. 13](#p100256).


## 6. <a id="p100179"></a>УСЛОВИЯ ИЗМЕРЕНИЙ


<a id="p100180"></a>При выполнении измерений выполняют следующие условия:
- <a id="p100181"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100182"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


## 7. <a id="p100183"></a>ПОДГОТОВКА К ОПРЕДЕЛЕНИЮ



### <a id="p100184"></a>7.1. Кондиционирование колонки


<a id="p100185"></a>Перед началом анализа колонку кондиционируют в потоке подвижной фазы (0,1 - 0,2 см3/мин) до стабилизации нулевой линии.


### <a id="p100186"></a>7.2. Кондиционирование патрона для твердофазной экстракции


<a id="p100187"></a>Патроны для ТФЭ с гидрофильным слабокислотным сорбентом с постоянной активностью промывают 2 см3 смеси N 2, затем 3 см3 смеси N 1.


### <a id="p100188"></a>7.3. Приготовление растворов


<a id="p100189"></a>7.3.1. 0,005 М раствор ортофосфорной кислоты. (0,5 +/- 0,01) г 98%-й ортофосфорной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1 дм3, растворяют в бидистиллированной воде и доводят объем до метки.
<a id="p100190"></a>7.3.2. Для приготовления подвижной фазы смешивают ацетонитрил с 0,005 М раствором ортофосфорной кислоты в соотношении 50:50 по объему, используя мерные цилиндры.


### <a id="p100191"></a>7.4. Приготовление основного и градуировочных растворов


<a id="p100192"></a>7.4.1. Основной раствор с концентрацией 0,5мг/см3: точную навеску циазофамида (50 +/- 0,5) мг помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3, растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом.

##### <a id="p100193"></a>7.4.2 Приготовление градуировочных растворов

<a id="p100194"></a>Градуировочные растворы с концентрациями циазофамида 0,05, 0,1, 0,2, 0,5 и 1,0 мкг/см3 готовят методом последовательного разбавления по объему, используя раствор подвижной фазы (смесь ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 50:50).
<a id="p100195"></a>7.4.2.1. Раствор N 1 с концентрацией 1,0 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 100 см3 вносят 0,2 см3 основного раствора и доводят до метки подвижной фазой.
<a id="p100196"></a>7.4.2.2. Раствор N 2 с концентрацией 0,5 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 5,0 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100197"></a>7.4.2.3. Раствор N 3 с концентрацией 0,2 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 2 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100198"></a>7.4.2.4. Раствор N 4 с концентрацией 0,1 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 1 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100199"></a>7.4.2.5. Раствор N 5 с концентрацией 0,05 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 0,5 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100200"></a>Основной раствор можно хранить в холодильнике при температуре 0 - 4 °C в течение 1 месяца, градуировочные растворы - в течение 2 дней.
<a id="p100201"></a>При изучении полноты определения циазофамида в воде, почве, ботве и клубнях картофеля, томатах и томатном соке используют ацетонитрильные растворы вещества, приготовленные из основного раствора методом последовательного разбавления по объему ацетонитрилом.


### <a id="p100202"></a>7.5. Построение градуировочного графика


<a id="p100203"></a>Для установления градуировочной характеристики (площадь пика - концентрация циазофамида в растворе) в хроматограф вводят по 10 мм3 градуировочных растворов (не менее 3 параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4 точек по диапазону измеряемых концентраций). Затем измеряют площади пиков и строят график зависимости среднего значения площади пика от концентрации циазофамида в градуировочном растворе.
<a id="p100204"></a>Методом наименьших квадратов рассчитывают градуировочный коэффициент (K) в уравнении линейной регрессии:

<div align="center">

<a id="p100205"></a>C = K · S, где

</div>


<a id="p100206"></a>S - площадь пика градуировочного раствора.
<a id="p100207"></a>Градуировку признают удовлетворительной, если значение коэффициента линейной корреляции оказывается не ниже 0,99.
<a id="p100208"></a>Градуировочную характеристику необходимо проверять при замене реактивов, хроматографической колонки или элементов хроматографической системы, а также при отрицательном результате контроля градуировочного коэффициента.
<a id="p100209"></a>Градуировочную зависимость признают стабильной при выполнении следующего условия:

<a id="p100210"></a> $\frac{|C - C_{K}|}{C} \cdot 100 \leq \lambda_{\text{контр}.}$ , где

<a id="p100211"></a>C - аттестованное значение массовой концентрации циазофамида в градуировочном растворе;
<a id="p100212"></a> $C_{K}$ - результат контрольного измерения массовой концентрации циазофамида в градуировочном растворе;
<a id="p100213"></a> $\lambda_{\text{контр}.}$ - норматив контроля градуировочного коэффициента, % ( $\lambda_{\text{контр}.} = 10%$ при P = 0,95).


### <a id="p100214"></a>7.6. Проверка хроматографического поведения циазофамида на патроне для ТФЭ


<a id="p100215"></a>В круглодонную колбу емкостью 10 см3 отбирают 1 см3 стандартного раствора циазофамида с концентрацией 1 мкг/см3. Отдувают растворитель током воздуха. Остаток растворяют в 1 см3 смеси N 1 и переносят на подготовленный патрон [(п. 7.2)](#p100186). Колбу обмывают 1 см3 смеси N 1 и смыв тоже переносят на патрон. Промывают патрон 3 см3 смеси N 1, элюат отбрасывают. Затем элюируют циазофамид смесью N 2 со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Отбирают фракции по 2 см3, упаривают досуха, растворяют в 1 см3 подвижной фазы (ацетонитрил - 0,005 М ортофосфорная кислота в соотношении 50:50) и анализируют по [п. 9.4](#p100229).
<a id="p100216"></a>Фракции, содержащие циазофамид, объединяют и вновь анализируют.
<a id="p100217"></a>Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с патрона и необходимый для очистки объем элюата.
<a id="p100218"></a>*Примечание.* Проверку хроматографического поведения циазофамида на патронах следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии патронов и растворителей.


## 8. <a id="p100219"></a>ОТБОР ПРОБ И ХРАНЕНИЕ


<a id="p100220"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79), а также в соответствии с [ГОСТ Р 51592-2000](https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-51592-2000) "Вода. Общие требования к отбору проб"; [ГОСТ 28168-89](https://bukva.ai/docs/gost-28168-89) "Почвы. Отбор проб". Отбор проб картофеля производится в соответствии с [ГОСТ 7194-81](https://bukva.ai/docs/gost-7194-81) "Картофель свежий. Правила приемки и методы определения качества"; томатов - по [ГОСТ 1725-85](https://bukva.ai/docs/gost-1725-85) "Томаты свежие".
<a id="p100221"></a>Для длительного хранения пробы почвы подсушиваются при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы могут храниться в течение года. Перед анализом сухую почву доводят до стандартной влажности, просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм. Пробы овощей хранят до анализа в герметичной упаковке в морозильной камере при -18 °C. Перед анализом пробы измельчают, не размораживая.


## 9. <a id="p100222"></a>ПРОВЕДЕНИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ



#### <a id="p100223"></a>9.1 Экстракция циазофамида из воды

<a id="p100224"></a>Пробу воды 100 см3 помещают в делительную воронку вместимостью 250 см3, добавляют 30 см3 гексана и интенсивно встряхивают 2 - 3 мин. После полного разделения фаз, верхний органический слой собирают, к водному добавляют 30 см3 гексана и экстракцию повторяют. Объединенные органические фракции пропускают через воронку, содержащую безводный сульфат натрия, и собирают в круглодонную колбу вместимостью 100 см3. Растворитель упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °C. Сухой остаток растворяют в 1 см3 подвижной фазы и 10 мм3 вводят в хроматограф.

#### <a id="p100225"></a>9.2 Экстракция циазофамида из почвы, томатов, томатного сока, ботвы и клубней картофеля

<a id="p100226"></a>Навеску измельченной культуры 10 г помещают в полипропиленовую центрифужную пробирку вместимостью 50 см3, последовательно добавляют 5 см3 воды (только для почвы), 10 см3 ацетонитрила, 8 г семиводного магния сернокислого и 1 г хлористого натрия. Пробирку плотно закрывают и помещают в аппарат для встряхивания на 10 мин, затем центрифугируют в течение 10 мин при скорости 4 000 об./мин. От верхнего ацетонитрильного слоя отбирают аликвоту 5 см3, переносят в круглодонную колбу вместимостью 25 см3. Растворитель упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °C. Сухой остаток подвергают очистке по п. 9.3.

#### <a id="p100227"></a>9.3 Очистка на патроне для ТФЭ

<a id="p100228"></a>Сухой остаток, полученный по [п. 9.2](#p100225), растворяют в 1 см3 смеси N 1, наносят на предварительно кондиционированный патрон [(п. 7.2)](#p100186), колбу ополаскивают 1 см3 смеси N 1 и также наносят на патрон. Патрон промывают 3 см3 смеси N 1, элюат отбрасывают. Циазофамид элюируют 4 см3 смеси N 2, элюат собирают, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе, остаток растворяют в подвижной фазе (1 см3 - почва, томаты, томатный сок, клубни картофеля; 5 см3 - ботва картофеля) и 10 мм3 вводят в хроматограф.

#### <a id="p100229"></a>9.4 Условия хроматографирования

<a id="p100230"></a>Ультраэффективный жидкостный хроматограф с быстросканирующим ультрафиолетовым детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки. Аналитическая колонка для неионогенных среднеполярных соединений (2,1 x 100) мм, 1,7 мкм. Температура колонки (30 +/- 1) °C. Подвижная фаза: смесь ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 50:50. Скорость потока элюента: 0,2 см3/мин. Рабочая длина волны ультрафиолетового детектора 280 нм. Объем вводимой пробы 10 мм3.


## 10. <a id="p100231"></a>ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ АНАЛИЗА


<a id="p100232"></a>Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки. Содержание циазофамида в пробе (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

<div align="center">

<a id="p100233"></a> $X = \frac{S_{x} \cdot K \cdot V}{P} \cdot \frac{100}{f}$ , где

</div>


<a id="p100234"></a> $S_{x}$ - площадь пика циазофамида на хроматограмме испытуемого образца, мм2 (AU);
<a id="p100235"></a>K - градуировочный коэффициент, найденный на стадии построения соответствующей градуировочной зависимости;
<a id="p100236"></a>V - объем пробы, подготовленной для хроматографического анализа, см3;
<a id="p100237"></a>P - навеска анализируемого образца, r;
<a id="p100238"></a>f - полнота извлечения циазофамида, приведенная в [табл. 2](#p100074), %.
<a id="p100239"></a>Содержание остаточных количеств циазофамида в образце вычисляют как среднее из двух параллельных определений.
<a id="p100240"></a>Образцы, дающие пики большие чем стандартный раствор циазофамида с концентрацией 1,0 мкг/см3, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.


## 11. <a id="p100241"></a>ПРОВЕРКА ПРИЕМЛЕМОСТИ РЕЗУЛЬТАТОВ ПАРАЛЛЕЛЬНЫХ ОПРЕДЕЛЕНИЙ


<a id="p100242"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости:

<a id="p100243"></a> $\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq r$ , где (1)

<a id="p100244"></a> $X_{1}$ , $X_{2}$ - результаты параллельных определений, мг/кг;
<a id="p100245"></a>r - значение предела повторяемости $(r = 2,8\sigma_{r})$ .
<a id="p100246"></a>При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


## 12. <a id="p100247"></a>ОФОРМЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ


<div align="center">

<a id="p100248"></a>Результат анализа представляют в виде:

</div>


<a id="p100249"></a> $(\overline{X} \pm \Delta)$ мк/кг при вероятности Р = 0,95, где

<a id="p100250"></a> $\overline{X}$ - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
<a id="p100251"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

<div align="center">

<a id="p100252"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot X}{100}$ , где

</div>


<a id="p100253"></a> $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
<a id="p100254"></a>В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100255"></a>"содержание вещества в пробе менее нижней границы определения" (например: менее 0,01 мг/кг*, где * - 0,01 мг/кг - предел обнаружения циазофамида в томатах).


## 13. <a id="p100256"></a>КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ


<a id="p100257"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-1-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
<a id="p100258"></a>13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100259"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.
<a id="p100260"></a>Величина добавки $C_{\text{д}}$ должна удовлетворять условию:

<div align="center">

<a id="p100261"></a> $C_{\text{д}} = \Delta_{\text{л},X} + \Delta_{\text{л},X\prime}$ , где

</div>


<a id="p100262"></a> $\pm \Delta_{\text{л},X}$ , $( \pm \Delta_{\text{л},X\prime})$ - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/кг;
<a id="p100263"></a>при этом:

<a id="p100264"></a> $\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta$ , где

<div align="center">

<a id="p100265"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

</div>


<a id="p100266"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot X}{100}$ , где

<a id="p100267"></a> $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
<a id="p100268"></a>Результат контроля процедуры $K_{\text{к}}$ рассчитывают по формуле:

<div align="center">

<a id="p100269"></a> $K_{\text{к}} = X\prime - X - C_{\text{д}}$ , где

</div>


<a id="p100270"></a>X', X, $C_{\text{д}}$ - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100241)) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки соответственно, мг/кг.
<a id="p100271"></a>Норматив контроля K рассчитывают по формуле:

<a id="p100272"></a> $K = \sqrt{\Delta_{\text{л},X\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},X}^{2}}$ .

<a id="p100273"></a>Проводят сопоставление результата контроля процедуры $(K_{\text{к}})$ с нормативом контроля (K).
<a id="p100274"></a>Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию

<div align="center">

<a id="p100275"></a> $|K_{\text{к}}| \leq K$ , (2)

</div>


<a id="p100276"></a>процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100277"></a>При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры к их устранению.
<a id="p100278"></a>13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
<a id="p100279"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предел воспроизводимости (R):

<div align="center">

<a id="p100280"></a> $\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq R$ , где (3)

</div>


<a id="p100281"></a> $X_{1}$ , $X_{2}$ - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
<a id="p100282"></a>R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций), %.



<a id="p100283"></a>

---