---
title: "\"МУК 4.1.3130-13. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств аметоктрадина в воде, почве, огурцах, салате, луке-репке, моркови, томатах, клубнях и зеленой массе картофеля, винограде и виноградном соке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.3130-13"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-3130-13"
---

## "МУК 4.1.3130-13. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств аметоктрадина в воде, почве, огурцах, салате, луке-репке, моркови, томатах, клубнях и зеленой массе картофеля, винограде и виноградном соке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.3130-13. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств аметоктрадина в воде, почве, огурцах, салате, луке-репке, моркови, томатах, клубнях и зеленой массе картофеля, винограде и виноградном соке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 12.11.2013)


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Врио руководителя<br>
Федеральной службы<br>
по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главного государственного<br>
санитарного врача<br>
Российской Федерации<br>
**А.Ю.ПОПОВА**<br>
12 ноября 2013 года

</div>



#### <a id="p100002"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ АМЕТОКТРАДИНА В ВОДЕ,**
**ПОЧВЕ, ОГУРЦАХ, САЛАТЕ, ЛУКЕ-РЕПКЕ, МОРКОВИ, ТОМАТАХ,**
**КЛУБНЯХ И ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ КАРТОФЕЛЯ, ВИНОГРАДЕ**
**И ВИНОГРАДНОМ СОКЕ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ**
**ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100004"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="center">

**МУК 4.1.3130-13**

</div>


1. <a id="p100005"></a>Разработаны ГНУ Всероссийский НИИ защиты растений Россельхозакадемии (В.И. Долженко, И.А. Цибульская, Т.Д. Черменская, А.С. Комарова, В.В. Человечкова); ГБОУ ДПО "Российская медицинская академия последипломного образования" Минздрава России (М.С. Орлов).
2. <a id="p100006"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (Протокол от 29 октября 2013 г. N 3).
3. <a id="p100007"></a>Утверждены врио руководителя Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главного государственного санитарного врача Российской Федерации А.Ю. Поповой 12 ноября 2013 г.
4. <a id="p100008"></a>Введены впервые.

<a id="p100009"></a>Свидетельство о метрологической аттестации N 01.5.04.129/01.00043/2013.
<a id="p100010"></a>Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации аметоктрадина в воде в диапазоне концентраций 0,001 - 0,01 мг/дм3, в почве, огурцах, луке-репке, моркови, томатах, клубнях и зеленой массе картофеля, винограде и виноградном соке в диапазоне концентраций 0,01 - 0,1 мг/кг, в салате в диапазоне концентраций 0,005 - 0,05 мг/кг.
<a id="p100011"></a>Методические указания носят рекомендательный характер.
<a id="p100012"></a>Название действующего вещества по ИСО: аметоктрадин.
<a id="p100013"></a>Название действующего вещества по ИЮПАК: 6-октил-5-этил-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиримидин-7-амин.
<a id="p100014"></a>Структурная формула:

<a id="p100015"></a> ![рис. 1](https://i.bukva.ai/kuQ3YcVF/img_0.png) 

<div align="center">

<a id="p100016"></a>Эмпирическая формула: $C_{15}H_{25}N_{5}$ .

</div>

<a id="p100017"></a>Молекулярная масса: 275,39.
<a id="p100018"></a>Химически чистое вещество представляет собой кристаллический порошок бежевого цвета без запаха.
<a id="p100019"></a>Температура плавления: 198 °C.
<a id="p100020"></a>Коэффициент распределения в системе н-октанол-вода $K_{ow}$ $lgP>4,4$ (20 °C).
<a id="p100021"></a>Растворимость в воде (мг/дм3, 20 °C): 0,15.
<a id="p100022"></a>Растворимость в органических растворителях (г/дм3, 20 °C): диметилсульфоксид - 10,7, метанол - 7,2, дихлорметан - 3,0, ацетон - 1,9, этилацетат - 0,8, ацетонитрил - 0,5, толуол - 0,1, н-гептан - 0,01.
<a id="p100023"></a>Краткая токсикологическая характеристика:
<a id="p100024"></a>Острая пероральная токсичность $\text{ЛД}_{50}>2000\text{мг}/\text{кг}$ массы тела. Острая кожная токсичность $\text{ЛД}_{50}>2000\text{мг}/\text{кг}$ массы тела. Острая ингаляционная токсичность $\text{ЛК}_{50}(4\text{ч})>5,3\text{мг}/\text{л}$ . Раздражающее действие для кроликов: кожа - не раздражает; глаза - не раздражает.
<a id="p100025"></a>Сенсибилизация - не обладает.
<a id="p100026"></a>Область применения: системный высокоизбирательный фунгицид, применяется на овощах и винограде против фитофтороза, переноспороза, бремия и др.
<a id="p100027"></a>В России для аметоктрадина гигиенические нормативы не установлены.


## 1. <a id="p100028"></a>ПОГРЕШНОСТЬ ИЗМЕРЕНИЙ


<a id="p100029"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1, для соответствующих диапазонов концентраций.

<div align="center">

<a id="p100030"></a>Таблица 1

</div>


<a id="p100031"></a>Метрологические параметры


<table>
<colgroup><col width="17%"><col width="18%"><col width="19%"><col width="14%"><col width="14%"><col width="17%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100032"></a>Объект анализа</td><td><a id="p100033"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/дм3)</td><td><a id="p100034"></a>Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), $\sigma_{r},%$</td><td><a id="p100035"></a>Показатель внутрилабораторной прецизионности, $\sigma_{R\text{л},}%$</td><td><a id="p100036"></a>Показатель воспроизводимости, $\sigma_{R,}%$</td><td><a id="p100037"></a>Показатель точности <a href="#p100110">&lt;*&gt;</a> (границы относительной погрешности), $\pm \delta,%$</td></tr>
<tr><td><a id="p100038"></a>1</td><td><a id="p100039"></a>2</td><td><a id="p100040"></a>3</td><td><a id="p100041"></a>4</td><td><a id="p100042"></a>5</td><td><a id="p100043"></a>6</td></tr>
<tr><td><a id="p100044"></a>Вода</td><td><a id="p100045"></a>0,001 - 0,01</td><td><a id="p100046"></a>8</td><td><a id="p100047"></a>9</td><td><a id="p100048"></a>11</td><td><a id="p100049"></a>22</td></tr>
<tr><td><a id="p100050"></a>Почва</td><td><a id="p100051"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100052"></a>7</td><td><a id="p100053"></a>9</td><td><a id="p100054"></a>12</td><td><a id="p100055"></a>23</td></tr>
<tr><td><a id="p100056"></a>Огурцы</td><td><a id="p100057"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100058"></a>7</td><td><a id="p100059"></a>9</td><td><a id="p100060"></a>12</td><td><a id="p100061"></a>23</td></tr>
<tr><td><a id="p100062"></a>Салат</td><td><a id="p100063"></a>0,005 - 0,05</td><td><a id="p100064"></a>9</td><td><a id="p100065"></a>11</td><td><a id="p100066"></a>12</td><td><a id="p100067"></a>24</td></tr>
<tr><td><a id="p100068"></a>Лук-репка</td><td><a id="p100069"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100070"></a>9</td><td><a id="p100071"></a>11</td><td><a id="p100072"></a>12</td><td><a id="p100073"></a>24</td></tr>
<tr><td><a id="p100074"></a>Томаты</td><td><a id="p100075"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100076"></a>9</td><td><a id="p100077"></a>11</td><td><a id="p100078"></a>12</td><td><a id="p100079"></a>24</td></tr>
<tr><td><a id="p100080"></a>Морковь</td><td><a id="p100081"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100082"></a>7</td><td><a id="p100083"></a>9</td><td><a id="p100084"></a>12</td><td><a id="p100085"></a>23</td></tr>
<tr><td><a id="p100086"></a>Зеленая масса картофеля</td><td><a id="p100087"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100088"></a>9</td><td><a id="p100089"></a>11</td><td><a id="p100090"></a>12</td><td><a id="p100091"></a>24</td></tr>
<tr><td><a id="p100092"></a>Клубни картофеля</td><td><a id="p100093"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100094"></a>8</td><td><a id="p100095"></a>9</td><td><a id="p100096"></a>11</td><td><a id="p100097"></a>22</td></tr>
<tr><td><a id="p100098"></a>Виноград</td><td><a id="p100099"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100100"></a>9</td><td><a id="p100101"></a>11</td><td><a id="p100102"></a>12</td><td><a id="p100103"></a>24</td></tr>
<tr><td><a id="p100104"></a>Виноградный сок</td><td><a id="p100105"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100106"></a>7</td><td><a id="p100107"></a>9</td><td><a id="p100108"></a>12</td><td><a id="p100109"></a>23</td></tr>
<tr><td colspan="6"><a id="p100110"></a>&lt;*&gt; Соответствует расширенной неопределенности $U_{\text{отн}.}$ при коэффициенте охвата k = 2.</td></tr>
</table>


<div align="center">

<a id="p100111"></a>Таблица 2

<a id="p100112"></a>Полнота извлечения аметоктрадина, стандартное<br>
отклонение, доверительный интервал среднего<br>
результата для n = 20, P = 0,95

</div>



| <a id="p100113"></a>Анализируемый объект | <a id="p100114"></a>Предел обнаружения, мг/кг (мг/дм3) | <a id="p100115"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/дм3) | <a id="p100116"></a>Полнота извлечения, % | <a id="p100117"></a>Стандартное отклонение, S | <a id="p100118"></a>Доверительный интервал среднего результата, +/- % |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100119"></a>Вода | <a id="p100120"></a>0,001 | <a id="p100121"></a>0,001 - 0,01 | <a id="p100122"></a>91,9 | <a id="p100123"></a>1,60 | <a id="p100124"></a>0,80 |
| <a id="p100125"></a>Почва | <a id="p100126"></a>0,01 | <a id="p100127"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100128"></a>88,9 | <a id="p100129"></a>2,16 | <a id="p100130"></a>1,08 |
| <a id="p100131"></a>Огурцы | <a id="p100132"></a>0,01 | <a id="p100133"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100134"></a>78,9 | <a id="p100135"></a>2,92 | <a id="p100136"></a>1,46 |
| <a id="p100137"></a>Салат | <a id="p100138"></a>0,005 | <a id="p100139"></a>0,005 - 0,05 | <a id="p100140"></a>85,7 | <a id="p100141"></a>7,05 | <a id="p100142"></a>3,53 |
| <a id="p100143"></a>Лук-репка | <a id="p100144"></a>0,01 | <a id="p100145"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100146"></a>81,0 | <a id="p100147"></a>4,31 | <a id="p100148"></a>2,16 |
| <a id="p100149"></a>Томаты | <a id="p100150"></a>0,01 | <a id="p100151"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100152"></a>86,2 | <a id="p100153"></a>5,99 | <a id="p100154"></a>2,99 |
| <a id="p100155"></a>Морковь | <a id="p100156"></a>0,01 | <a id="p100157"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100158"></a>78,2 | <a id="p100159"></a>2,08 | <a id="p100160"></a>1,04 |
| <a id="p100161"></a>Зеленая масса картофеля | <a id="p100162"></a>0,01 | <a id="p100163"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100164"></a>89,6 | <a id="p100165"></a>3,74 | <a id="p100166"></a>1,87 |
| <a id="p100167"></a>Клубни картофеля | <a id="p100168"></a>0,01 | <a id="p100169"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100170"></a>79,2 | <a id="p100171"></a>1,86 | <a id="p100172"></a>0,93 |
| <a id="p100173"></a>Виноград | <a id="p100174"></a>0,01 | <a id="p100175"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100176"></a>90,7 | <a id="p100177"></a>4,62 | <a id="p100178"></a>2,31 |
| <a id="p100179"></a>Виноградный сок | <a id="p100180"></a>0,01 | <a id="p100181"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100182"></a>92,0 | <a id="p100183"></a>3,23 | <a id="p100184"></a>1,62 |



## 2. <a id="p100185"></a>МЕТОД ИЗМЕРЕНИЙ


<a id="p100186"></a>Методика основана на определении аметоктрадина методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового детектора после его извлечения из образцов водно-ацетоновой смесью, очистки перераспределением в системе несмешивающихся растворителей и последующей очистки на патроне для твердофазной экстракции.
<a id="p100187"></a>Идентификация аметоктрадина проводится по времени удерживания, количественное определение - методом абсолютной калибровки.
<a id="p100188"></a>Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования.


## 3. <a id="p100189"></a>СРЕДСТВА ИЗМЕРЕНИЙ, РЕАКТИВЫ, ВСПОМОГАТЕЛЬНЫЕ УСТРОЙСТВА И МАТЕРИАЛЫ



### <a id="p100190"></a>3.1. Средства измерений



| <a id="p100191"></a><a id="p100192"></a>Высокоэффективный жидкостный хроматограф с быстросканирующим ультрафиолетовым детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки<br>Весы аналитические с пределом взвешивания до 210 г и пределом допустимой погрешности 0,2 мг | <a id="p100193"></a>ГОСТ 24104-01 |
| --- | --- |
| <a id="p100194"></a>Весы технические с пределом взвешивания до 400 г и допустимой погрешностью 0,1 г | <a id="p100195"></a>ГОСТ 24104-01 |
| <a id="p100196"></a>Колбы мерные на 10, 100 и 1 000 см3 | <a id="p100197"></a>ГОСТ 23932-90 |
| <a id="p100198"></a>Микродозаторы одноканальные переменного объема от 200 до 1 000 мм3 и от 1 до 5 см3 |  |
| <a id="p100199"></a>Цилиндры мерные на 50 и 100 см3 | <a id="p100200"></a>ГОСТ 23932-90 |


<a id="p100201"></a>*Примечание.* Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.


### <a id="p100202"></a>3.2. Реактивы



| <a id="p100203"></a>Аметоктрадин с содержанием основного вещества 99,7% |  |
| --- | --- |
| <a id="p100204"></a>Ацетон, о.с.ч. | <a id="p100205"></a>ТУ 6-09-3513-86 |
| <a id="p100206"></a>Ацетонитрил, х.ч. | <a id="p100207"></a>ТУ 6-09-3534-87 |
| <a id="p100208"></a>Вода для лабораторного анализа (бидистиллированная, деионизованная) | <a id="p100209"></a>[ГОСТ Р 52501-05](https://bukva.ai/docs/gost-r-52501-2005) |
| <a id="p100210"></a>н-Гексан, х.ч. | <a id="p100211"></a>ТУ 6-09-3375-78 |
| <a id="p100212"></a>Кислота ортофосфорная, х.ч. | <a id="p100213"></a>ГОСТ 6552-80 |
| <a id="p100214"></a>Магний сернокислый семиводный, х.ч. | <a id="p100215"></a>[ГОСТ 4523-77](https://bukva.ai/docs/gost-4523-77) |
| <a id="p100216"></a>Метилен хлористый, х.ч. | <a id="p100217"></a>ТУ 2631-019-44493179-98 |
| <a id="p100218"></a>Натрия гидроксид, х.ч. | <a id="p100219"></a>ГОСТ 4328-77 |
| <a id="p100220"></a>Натрий сернокислый безводный, х.ч. | <a id="p100221"></a>[ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76) |
| <a id="p100222"></a>Натрий хлористый, ч.д.а. | <a id="p100223"></a>ГОСТ 4233-77 |
| <a id="p100224"></a>Смесь N 1: гексан-ацетон в соотношении 9:1 по объему |  |
| <a id="p100225"></a>Смесь N 2: гексан-ацетон в соотношении 4:1 по объему |  |
| <a id="p100226"></a>Смесь N 3: ацетон-вода в соотношении 3:1 по объему |  |
| <a id="p100227"></a>Подвижная фаза для ВЭЖХ: смесь ацетонитрила и 0,005 М раствора ортофосфорной кислоты в соотношении 35:65 |  |


<div align="center">

<a id="p100228"></a>*Примечание.* Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.

</div>



### <a id="p100229"></a>3.3. Вспомогательные устройства и материалы



| <a id="p100230"></a>Аналитическая колонка для неионогенных среднеполярных соединений (100 x 2,1) мм, 1,7 мкм |  |
| --- | --- |
| <a id="p100231"></a>Аппарат для встряхивания | <a id="p100232"></a>ТУ 64-1-1081-73 |
| <a id="p100233"></a>Воронки лабораторные | <a id="p100234"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100235"></a>Воронки делительные вместимостью 250 см3 | <a id="p100236"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100237"></a>Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 10, 25, 100 см3 | <a id="p100238"></a>[ГОСТ 9737-93](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93) |
| <a id="p100239"></a>Колбы плоскодонные конические вместимостью 100 см3 | <a id="p100240"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100241"></a>Патроны аминофазные ионообменные | <a id="p100242"></a>ТУ 4215-002-05451931-94 |
| <a id="p100243"></a>Пробирки полипропиленовые центрифужные с крышками объемом 50 см3 |  |
| <a id="p100244"></a>Ротационный вакуумный испаритель с мембранным насосом, обеспечивающим вакуум до 10 мбар |  |
| <a id="p100245"></a>Стаканы химические вместимостью 150 см3 | <a id="p100246"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100247"></a>Ультразвуковая ванна с рабочей частотой 35 кГц |  |
| <a id="p100248"></a>Фильтры бумажные быстрой фильтрации | <a id="p100249"></a>ТУ 6.091678-86 |
| <a id="p100250"></a>Центрифуга с максимальной рабочей частотой вращения 4 000 об./мин |  |


<div align="center">

<a id="p100251"></a>*Примечание.* Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

</div>



## 4. <a id="p100252"></a>ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ


<a id="p100253"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-2009, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.
<a id="p100254"></a>4.2. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией, соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313-03 и 2.2.5.2308-07.
<a id="p100255"></a>Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.


## 5. <a id="p100256"></a>ТРЕБОВАНИЯ К КВАЛИФИКАЦИИ ОПЕРАТОРОВ


<a id="p100257"></a>Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по [п. 13](#p100340).


## 6. <a id="p100258"></a>УСЛОВИЯ ИЗМЕРЕНИЙ


<a id="p100259"></a>При выполнении измерений выполняют следующие условия:
- <a id="p100260"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100261"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


## 7. <a id="p100262"></a>ПОДГОТОВКА К ОПРЕДЕЛЕНИЮ



### <a id="p100263"></a>7.1. Кондиционирование колонки


<a id="p100264"></a>Перед началом анализа колонку кондиционируют в потоке подвижной фазы (0,1 - 0,2 см3/мин) до стабилизации нулевой линии.


### <a id="p100265"></a>7.2. Кондиционирование патрона для твердофазной экстракции


<a id="p100266"></a>Патрон для удаления кислотных компонентов пробы (слабоосновный анионообменник с привитыми аминогруппами) промывают 2 см3 смеси N 2, затем 3 см3 смеси N 1.


### <a id="p100267"></a>7.3. Приготовление растворов


<a id="p100268"></a>7.3.1. 0,005 М раствор ортофосфорной кислоты: (0,5 +/- 0,01) г 98% ортофосфорной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1 дм3, растворяют в бидистиллированной воде и доводят объем до метки.
<a id="p100269"></a>7.3.2. Для приготовления подвижной фазы смешивают ацетонитрил с 0,005 М раствором ортофосфорной кислоты в соотношении 35:65 по объему, используя мерные цилиндры.
<a id="p100270"></a>7.3.3. 20%-й раствор натрия хлористого: в мерную колбу объемом 1 дм3 помещают 200 г натрия хлористого, растворяют в бидистиллированной воде и доводят объем до метки.
<a id="p100271"></a>7.3.4. 0,2 М раствор натрия гидроксида: 8,0 г натрия гидроксида помещают в мерную колбу объемом 1 дм3, растворяют в бидистиллированной воде и доводят объем до метки.


### <a id="p100272"></a>7.4. Приготовление основного и градуировочных растворов


<a id="p100273"></a>7.4.1. Основной раствор с концентрацией 0,5 мг/см3: точную навеску аметоктрадина (50 +/- 0,5) мг помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3, растворяют в метаноле и доводят объем до метки метанолом.

##### <a id="p100274"></a>7.4.2 Приготовление градуировочных растворов

<a id="p100275"></a>Градуировочные растворы с концентрациями аметоктрадина 0,05, 0,1, 0,2, 0,5 и 1,0 мкг/см3 готовят методом последовательного разбавления по объему, используя раствор подвижной фазы (смесь ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 35:65).
<a id="p100276"></a>7.4.2.1. Раствор N 1 с концентрацией 1,0 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 100 см3 вносят 0,2 см3 основного раствора и доводят до метки подвижной фазой.
<a id="p100277"></a>7.4.2.2. Раствор N 2 с концентрацией 0,5 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 5,0 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.

<div align="center">

<a id="p100278"></a>7.4.2.3. Раствор N 3 с концентрацией 0,2 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 2 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.

</div>

<a id="p100279"></a>7.4.2.4. Раствор N 4 с концентрацией 0,1 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 1 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100280"></a>7.4.2.5. Раствор N 5 с концентрацией 0,05 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 0,5 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100281"></a>Основной раствор можно хранить в холодильнике при температуре 0 - 4 °C в течение 1 месяца, градуировочные растворы - в течение недели.
<a id="p100282"></a>При изучении полноты определения аметоктрадина в воде, почве, огурцах, салате, луке-репке, моркови, томатах, клубнях и зеленой массе картофеля, винограде и виноградном соке используют ацетонитрильные растворы вещества, приготовленные из основного раствора методом последовательного разбавления по объему ацетонитрилом.


### <a id="p100283"></a>7.5. Построение градуировочного графика


<a id="p100284"></a>Для установления градуировочной характеристики (площадь пика - концентрация аметоктрадина в растворе) в хроматограф вводят по 10 мм3 градуировочных растворов (не менее 3 параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4 точек по диапазону измеряемых концентраций). Затем измеряют площади пиков и строят график зависимости среднего значения площади пика от концентрации аметоктрадина в градуировочном растворе.
<a id="p100285"></a>Методом наименьших квадратов рассчитывают градуировочный коэффициент (K) в уравнении линейной регрессии:

<a id="p100286"></a>C = K · S, где

<div align="center">

<a id="p100287"></a>S - площадь пика градуировочного раствора.

</div>

<a id="p100288"></a>Градуировку признают удовлетворительной, если значение коэффициента линейной корреляции оказывается не ниже 0,99.
<a id="p100289"></a>Градуировочную характеристику необходимо проверять при замене реактивов, хроматографической колонки или элементов хроматографической системы, а также при отрицательном результате контроля градуировочного коэффициента.
<a id="p100290"></a>Градуировочную зависимость признают стабильной при выполнении следующего условия:

<div align="center">

<a id="p100291"></a> $\frac{|\text{С } - \text{С}_{K}|}{C} \cdot 100 \leq \lambda_{\text{контр}.}$ , где

</div>


<a id="p100292"></a>C - аттестованное значение массовой концентрации аметоктрадина в градуировочном растворе;
<a id="p100293"></a> $\text{С}_{K}$ - результат контрольного измерения массовой концентрации аметоктрадина в градуировочном растворе;
<a id="p100294"></a> $\lambda_{\text{контр}.}$ - норматив контроля градуировочного коэффициента, % ( $\lambda_{\text{контр}.} = 10\%$ при P = 0,95).


### <a id="p100295"></a>7.6. Проверка хроматографического поведения аметоктрадина на патроне


<a id="p100296"></a>В круглодонную колбу емкостью 10 см3 отбирают 1 см3 стандартного раствора аметоктрадина с концентрацией 1 мкг/см3. Отдувают растворитель током воздуха. Остаток растворяют в 1 см3 смеси N 1 и переносят на подготовленный патрон [(п. 7.2)](#p100267). Колбу обмывают 1 см3 смеси N 1 и смыв тоже переносят на патрон. Промывают патрон 3 см3 смеси N 1, элюат отбрасывают. Затем элюируют аметоктрадин смесью N 2 со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Отбирают фракции по 2 см3, упаривают досуха, растворяют в 1 см3 подвижной фазы (ацетонитрил - 0,005 М раствор ортофосфорной кислоты, 35:65) и анализируют по [п. 9.6](#p100313).
<a id="p100297"></a>Фракции, содержащие аметоктрадин, объединяют и вновь анализируют.
<a id="p100298"></a>Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с патрона и необходимый для очистки объем элюата.
<a id="p100299"></a>*Примечание.* Проверку хроматографического поведения аметоктрадина следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии патронов и растворителей.


## 8. <a id="p100300"></a>ОТБОР ПРОБ И ХРАНЕНИЕ


<a id="p100301"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79), а также в соответствии с [ГОСТ Р 51592-2000](https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-51592-2000) "Вода. Общие требования к отбору проб"; [ГОСТ 28168-89](https://bukva.ai/docs/gost-28168-89) "Почвы. Отбор проб". Отбор проб овощей производится в соответствии с техническими условиями по [ГОСТ 1726-85](https://bukva.ai/docs/gost-1726-85) "Огурцы свежие"; ГОСТ 27166-86 "Лук репчатый свежий, заготовляемый и поставляемый"; [ГОСТ 1721-85](https://bukva.ai/docs/gost-1721-85) "Морковь столовая свежая, заготовляемая и поставляемая"; [ГОСТ 1725-85](https://bukva.ai/docs/gost-1725-85) "Томаты свежие"; [ГОСТ 7194-81](https://bukva.ai/docs/gost-7194-81) "Картофель свежий. Правила приемки и методы определения качества". Отбор проб винограда проводится в соответствии с техническими условиями по [ГОСТ 25896-83](https://bukva.ai/docs/gost-25896-83) "Виноград свежий столовый". Для длительного хранения пробы почвы подсушиваются при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы могут храниться в течение года. Перед анализом сухую почву доводят до стандартной влажности, просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм. Пробы овощей и винограда хранят до анализа в герметичной полиэтиленовой упаковке в морозильной камере при -18 °C.


## 9. <a id="p100302"></a>ПРОВЕДЕНИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ



### <a id="p100303"></a>9.1. Экстракция аметоктрадина из воды


<a id="p100304"></a>Пробу воды 100 см3 помещают в делительную воронку вместимостью 250 см3, добавляют 30 см3 хлористого метилена и интенсивно встряхивают 2 - 3 мин. После полного разделения фаз нижний органический слой отбирают, к водному добавляют 30 см3 хлористого метилена и экстракцию повторяют. Объединенные органические фракции пропускают через воронку, содержащую безводный натрий сернокислый, и собирают в круглодонную колбу вместимостью 25 см3. Растворитель упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °C. Сухой остаток растворяют в 1 см3 подвижной фазы и 10 мм3 вводят в хроматограф.


### <a id="p100305"></a>9.2. Экстракция аметоктрадина из почвы


<a id="p100306"></a>Навеску измельченной почвы 10 г помещают в полипропиленовую центрифужную пробирку вместимостью 50 см3, последовательно добавляют 5 см3 воды, 10 см3 ацетонитрила, 8 г семиводного магния сернокислого и 1 г натрия хлористого. Пробирку плотно закрывают и помещают в аппарат для встряхивания на 10 мин, затем центрифугируют в течение 10 мин при скорости 4 000 об./мин. От верхнего ацетонитрильного слоя отбирают аликвоту 5 см3, переносят в круглодонную колбу вместимостью 25 см3. Растворитель упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °C. Сухой остаток подвергают очистке по [п. 9.5](#p100311).


### <a id="p100307"></a>9.3. Экстракция аметоктрадина из огурцов, салата, лука-репки, моркови, томатов, винограда, зеленой массы и клубней картофеля


<a id="p100308"></a>Навеску измельченной культуры (5 г - зеленая масса картофеля, 10 г - огурцы, салат, лук-репка, морковь, томаты, виноград, клубни картофеля) помещают в коническую колбу вместимостью 100 см3, добавляют 30 см3 смеси N 3 и колбу помещают в ультразвуковую ванну на 10 мин. Водно-ацетоновый экстракт декантируют в круглодонную колбу вместимостью 100 см3, пропуская через бумажный фильтр быстрой фильтрации, к остатку в колбе добавляют 20 см3 смеси N 3 и повторяют экстракцию. Объединенный экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе до водного остатка, добавляют 20 см3 20%-го водного раствора натрия хлористого, доводят объем до 100 см3 0,2 М раствором натрия гидроксида и переносят в делительную воронку вместимостью 250 см3, добавляют 30 см3 хлористого метилена и интенсивно встряхивают 2 - 3 мин. После полного разделения фаз нижний органический слой отбирают, к водному добавляют 30 см3 хлористого метилена и экстракцию повторяют. Объединенные органические фракции промывают в делительной воронке 20 см3 0,2 М раствора натрия гидроксида, собирают в круглодонную колбу вместимостью 100 см3, пропуская через воронку, содержащую безводный натрий сернокислый. Растворитель упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °C. Сухой остаток подвергают очистке на патроне по [п. 9.5](#p100311).


### <a id="p100309"></a>9.4. Экстракция аметоктрадина из виноградного сока


<a id="p100310"></a>Навеску 10 г сока помещают в стакан вместимостью 150 см3, добавляют 20 см3 20%-го водного раствора натрия хлористого, доводят объем до 100 см3 0,2 М раствором натрия гидроксида и переносят в делительную воронку вместимостью 250 см3, добавляют 30 см3 хлористого метилена и интенсивно встряхивают 2 - 3 мин. После полного разделения фаз нижний органический слой отбирают, к водному добавляют 30 см3 хлористого метилена и экстракцию повторяют. Объединенные органические фракции промывают в делительной воронке 20 см3 0,2 М раствора натрия гидроксида, собирают в круглодонную колбу вместимостью 100 см3, пропуская через воронку, содержащую безводный натрий сернокислый. Растворитель упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °C. Сухой остаток подвергают очистке на патроне по [п. 9.5](#p100311).


### <a id="p100311"></a>9.5. Очистка на аминофазном ионообменном патроне


<a id="p100312"></a>Сухой остаток, полученный по [пп. 9.2](#p100305) - [9.4](#p100309), растворяют в 1 см3 смеси N 1, наносят на предварительно кондиционированный патрон [(п. 7.2)](#p100267), колбу ополаскивают 1 см3 смеси N 1 и также наносят на патрон. Патрон промывают 3 см3 смеси N 1, элюат отбрасывают. Аметоктрадин элюируют 5 см3 смеси N 2, элюат собирают, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе, остаток растворяют в подвижной фазе (0,5 см3 - почва; 1 см3 - огурцы, салат, лук-репка, морковь, томаты, клубни и зеленая масса картофеля, виноград и виноградный сок) и 10 мм3 вводят в хроматограф.


### <a id="p100313"></a>9.6. Условия хроматографирования


<a id="p100314"></a>Ультраэффективный жидкостный хроматограф с быстросканирующим ультрафиолетовым детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки. Аналитическая колонка для неионогенных среднеполярных соединений (2,1 x 100) мм, 1,7 мкм. Температура колонки (30 +/- 1) °C. Подвижная фаза: смесь ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 35:65. Скорость потока элюента: 0,2 см3/мин. Рабочая длина волны ультрафиолетового детектора 295 нм. Объем вводимой пробы 10 мм3.


## 10. <a id="p100315"></a>ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ АНАЛИЗА


<a id="p100316"></a>Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки. Содержание аметоктрадина в пробе (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

<a id="p100317"></a> $X = \frac{S_{x} \cdot K \cdot V}{P} \cdot \frac{100}{f}$ , где

<a id="p100318"></a> $S_{x}$ - площадь пика аметоктрадина на хроматограмме испытуемого образца, мм2 (AU);
<a id="p100319"></a>K - градуировочный коэффициент, найденный на стадии построения соответствующей градуировочной зависимости;

<div align="center">

<a id="p100320"></a>V - объем пробы, подготовленной для хроматографического анализа, см3;<br>
<a id="p100321"></a>P - навеска анализируемого образца, г;<br>
<a id="p100322"></a>f - полнота извлечения аметоктрадина, приведенная в [табл. 2](#p100112), %.

</div>

<a id="p100323"></a>Содержание остаточных количеств аметоктрадина в образце вычисляют как среднее из двух параллельных определений.
<a id="p100324"></a>Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор аметоктрадина с концентрацией 1,0 мкг/см3, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.


## 11. <a id="p100325"></a>ПРОВЕРКА ПРИЕМЛЕМОСТИ РЕЗУЛЬТАТОВ ПАРАЛЛЕЛЬНЫХ ОПРЕДЕЛЕНИЙ


<a id="p100326"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

<a id="p100327"></a> $\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq r$ , где (1)

<a id="p100328"></a> $X_{1}$ , $X_{2}$ - результаты параллельных определений, мг/кг;
<a id="p100329"></a>r - значение предела повторяемости $(r = 2,8\sigma_{r})$ .
<a id="p100330"></a>При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


## 12. <a id="p100331"></a>ОФОРМЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ


<a id="p100332"></a>Результат анализа представляют в виде:
<a id="p100333"></a> $(\overline{X} \pm \Delta)\text{мг}/\text{кг}$ при вероятности P = 0,95, где
<a id="p100334"></a> $\overline{X}$ - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;

<div align="center">

<a id="p100335"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

<a id="p100336"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot X}{100}$ , где

</div>


<a id="p100337"></a> $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
<a id="p100338"></a>В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100339"></a>"содержание вещества в пробе менее нижней границы определения" (например: менее 0,005 мг/кг*, где * - 0,005 мг/кг - предел обнаружения аметоктрадина в салате).


## 13. <a id="p100340"></a>КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ


<a id="p100341"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-1-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
<a id="p100342"></a>13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100343"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.

<div align="center">

<a id="p100344"></a>Величина добавки $C_{\text{д}}$ должна удовлетворять условию:

<a id="p100345"></a> $C_{\text{д}} = \Delta_{\text{л},\text{Х}} + \Delta_{\text{л},\text{Х }'}$ , где

</div>


<a id="p100346"></a> $\pm \Delta_{\text{л},\text{Х}}( \pm \Delta_{\text{л},X'})$ - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/кг; при этом:

<a id="p100347"></a> $\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta$ , где

<div align="center">

<a id="p100348"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

</div>


<a id="p100349"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot X}{100}$ , где

<a id="p100350"></a> $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
<a id="p100351"></a>Результат контроля процедуры $K_{\text{к}}$ рассчитывают по формуле:

<div align="center">

<a id="p100352"></a> $K_{\text{к}} = \text{Х }' - \text{Х } - \text{С}_{\text{д}}$ , где

</div>


<a id="p100353"></a> Х ' , X, $\text{С}_{\text{д}}$ - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100325)) содержания компонента в образце с добавкой испытуемом образце, концентрация добавки, соответственно, мг/кг.
<a id="p100354"></a>Норматив контроля K рассчитывают по формуле:

<a id="p100355"></a> $K = \sqrt{\Delta_{\text{л},\text{Х }'}^{2} + \Delta_{\text{л},\text{Х}}^{2}}$ , (2)

<a id="p100356"></a>Проводят сопоставление результата контроля процедуры $(K_{\text{к}})$ с нормативом контроля (K).
<a id="p100357"></a>Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию

<div align="center">

<a id="p100358"></a> $|K_{\text{к}}| \leq K$ , (3)

</div>


<a id="p100359"></a>процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100360"></a>При невыполнении условия (3) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (3) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры к их устранению.
<a id="p100361"></a>13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
<a id="p100362"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

<a id="p100363"></a> $\frac{2 \cdot |\text{Х}_{1} - \text{Х}_{2}| \cdot 100}{(\text{Х}_{1} + \text{Х}_{2})} \leq R$ , где (4)

<div align="center">

<a id="p100364"></a> $\text{Х}_{1}$ , $\text{Х}_{2}$ - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;<br>
<a id="p100365"></a>R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций), %.

</div>




<a id="p100366"></a>

---