---
title: "\"МУК 4.1.3129-13. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств додина в воде, почве, плодовых семечковых и косточковых и их соках методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.3129-13"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-3129-13"
---

## "МУК 4.1.3129-13. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств додина в воде, почве, плодовых семечковых и косточковых и их соках методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.3129-13. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств додина в воде, почве, плодовых семечковых и косточковых и их соках методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 12.11.2013)


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Вр.и.о. руководителя<br>
Федеральной службы<br>
по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главного государственного<br>
санитарного врача<br>
Российской Федерации<br>
**А.Ю.ПОПОВА**<br>
12 ноября 2013 года

</div>



#### <a id="p100002"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ДОДИНА В ВОДЕ, ПОЧВЕ,**
**ПЛОДОВЫХ СЕМЕЧКОВЫХ И КОСТОЧКОВЫХ И ИХ СОКАХ МЕТОДОМ**
**КАПИЛЛЯРНОЙ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100004"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.3129-13**

1. <a id="p100005"></a>Разработаны сотрудниками ГНУ "Всероссийский НИИ защиты растений" Россельхозакадемии (В.И. Долженко, И.А. Цибульская, С.Е. Маслаков, В.Ф. Павлова).
2. <a id="p100006"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (Протокол от 29 октября 2013 г. N 3).
3. <a id="p100007"></a>Утверждены вр.и.о. руководителя Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главного государственного санитарного врача Российской Федерации А.Ю. Поповой 12 ноября 2013 г.
4. <a id="p100008"></a>Введены впервые.

<a id="p100009"></a>Свидетельство об аттестации N 01.5.04.132/01.00043/2013.
<a id="p100010"></a>Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода капиллярной газожидкостной хроматографии для определения массовой концентрации додина в диапазоне концентраций в воде - 0,0025 - 0,025 мг/дм3, почве, плодовых семечковых и косточковых культурах - 0,1 - 1,0 мг/кг и плодовых соках - 0,05 - 0,5 мг/дм3.
<a id="p100011"></a>Методические указания носят рекомендательный характер.
<a id="p100012"></a>Название действующего вещества по ИСО: додин.
<a id="p100013"></a>Название действующего вещества по ИЮПАК: 1-Додецилгуанидинацетат.

<div align="center">

<a id="p100014"></a>Структурная формула:

</div>


<a id="p100015"></a> ![рис. 1](https://i.bukva.ai/2dCuLejr/img_0.png) 

<a id="p100016"></a>Эмпирическая формула: $\text{С}_{15}H_{33}N_{3}O_{2}$ .
<a id="p100017"></a>Молекулярная масса: 287,2.
<a id="p100018"></a>Белый кристаллический порошок без запаха.
<a id="p100019"></a>Температура плавления: 136 °C.
<a id="p100020"></a>Давление пара при 25 °C: $5,49 \times 10^{- 3}\text{мПа}$ .
<a id="p100021"></a>Коэффициент распределения н-октанол-вода: $K_{ow}logP = 1,25$ .
<a id="p100022"></a>Растворимость (в г/дм3 при 20 °C): вода - 0,93, гептан - 0,018, ксилол - 0,004, ацетон - 0,048, этанол - 57, хорошо растворим в минеральных кислотах, горячей воде.
<a id="p100023"></a>Вещество стабильно при нормальных условиях, не гидролизуется в водных растворах при pH 5 - 9. Стабилен в нейтральных, умеренно щелочных и кислых средах. Период распада в почве $\text{ДТ}_{50}$ - 4 - 15 дней.
<a id="p100024"></a>Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность $LD_{50}$ для крыс 850 мг/кг, острая дермальная токсичность $LD_{50}$ для млекопитающих > 5000 мг/кг, ингаляционная $LD_{50}$ для млекопитающих > 0,45 мг/кг. Раздражает слизистые. $\text{С}K_{50}$ для рыб 0,57 мг/л (96 ч). Умеренно токсичен для пчел ( $LD_{50}$ > 100 мкг/особь).
<a id="p100025"></a>Область применения препарата. Применяется для борьбы с паршой яблони и груши (1,3 - 2,6 кг/га, опрыскивание в период вегетации).
<a id="p100026"></a>Гигиенические нормативы для додина в России: ПДК в воде 0,005 мг/л. МДУ в плодовых семечковых 0,6 мг/кг, в плодовых косточковых - не установлен.

<div align="center">

1. <a id="p100027"></a>Погрешность измерений

</div>


<a id="p100028"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1, для соответствующих диапазонов концентраций.

<div align="right">

<a id="p100029"></a>Таблица 1

</div>


<div align="center">

<a id="p100030"></a>Метрологические параметры

</div>



<table>
<colgroup><col width="16%"><col width="20%"><col width="21%"><col width="14%"><col width="12%"><col width="18%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100031"></a>Объект анализа</td><td><a id="p100032"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td><a id="p100033"></a>Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости) $\sigma_{r}$ , %</td><td><a id="p100034"></a>Показатель внутрилабораторной прецизионности $\sigma_{R_{\text{л}}}$ , %</td><td><a id="p100035"></a>Показатель воспроизводимости $\sigma_{R}$ , %</td><td><a id="p100036"></a>Показатель точности <a href="#p100067">&lt;*&gt;</a> (границы относительной погрешности) $\pm \delta$ , %</td></tr>
<tr><td><a id="p100037"></a>Вода</td><td><a id="p100038"></a>0,0025 - 0,025</td><td><a id="p100039"></a>8</td><td><a id="p100040"></a>9</td><td><a id="p100041"></a>11</td><td><a id="p100042"></a>22</td></tr>
<tr><td><a id="p100043"></a>Почва</td><td><a id="p100044"></a>0,1 - 1,0</td><td><a id="p100045"></a>7</td><td><a id="p100046"></a>9</td><td><a id="p100047"></a>12</td><td><a id="p100048"></a>23</td></tr>
<tr><td><a id="p100049"></a>Плодовые семечковые</td><td><a id="p100050"></a>0,1 - 1,0</td><td><a id="p100051"></a>7</td><td><a id="p100052"></a>9</td><td><a id="p100053"></a>12</td><td><a id="p100054"></a>23</td></tr>
<tr><td><a id="p100055"></a>Плодовые косточковые</td><td><a id="p100056"></a>0,1 - 1,0</td><td><a id="p100057"></a>7</td><td><a id="p100058"></a>9</td><td><a id="p100059"></a>12</td><td><a id="p100060"></a>23</td></tr>
<tr><td><a id="p100061"></a>Плодовые соки</td><td><a id="p100062"></a>0,05 - 0,5</td><td><a id="p100063"></a>9</td><td><a id="p100064"></a>11</td><td><a id="p100065"></a>12</td><td><a id="p100066"></a>24</td></tr>
<tr><td colspan="6"><a id="p100067"></a>&lt;*&gt; Соответствует расширенной неопределенности $U_{\text{отн}.}$ при коэффициенте охвата k = 2.</td></tr>
</table>


<div align="right">

<a id="p100068"></a>Таблица 2

</div>


<div align="center">

<a id="p100069"></a>Полнота извлечения додина, стандартное отклонение,<br>
доверительный интервал среднего результата<br>
для n = 20, P = 0,95

</div>



| <a id="p100070"></a>Анализируемый объект, мг/кг | <a id="p100071"></a>Предел обнаружения, мг/кг | <a id="p100072"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг | <a id="p100073"></a>Полнота извлечения, % | <a id="p100074"></a>Стандартное отклонение S, % | <a id="p100075"></a>Доверительный интервал среднего результата, +/- % |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100076"></a>Вода | <a id="p100077"></a>0,0025 | <a id="p100078"></a>0,0025 - 0,025 | <a id="p100079"></a>76,8 | <a id="p100080"></a>5,2 | <a id="p100081"></a>2,3 |
| <a id="p100082"></a>Почва | <a id="p100083"></a>0,1 | <a id="p100084"></a>0,1 - 1,0 | <a id="p100085"></a>78,1 | <a id="p100086"></a>4,5 | <a id="p100087"></a>2,0 |
| <a id="p100088"></a>Плодовые семечковые | <a id="p100089"></a>0,1 | <a id="p100090"></a>0,1 - 1,0 | <a id="p100091"></a>81,0 | <a id="p100092"></a>4,9 | <a id="p100093"></a>2,1 |
| <a id="p100094"></a>Плодовые косточковые | <a id="p100095"></a>0,1 | <a id="p100096"></a>0,1 - 1,0 | <a id="p100097"></a>82,1 | <a id="p100098"></a>4,2 | <a id="p100099"></a>2,0 |
| <a id="p100100"></a>Плодовые соки | <a id="p100101"></a>0,05 | <a id="p100102"></a>0,05 - 0,5 | <a id="p100103"></a>76,3 | <a id="p100104"></a>6,1 | <a id="p100105"></a>2,7 |


<div align="center">

2. <a id="p100106"></a>Метод измерений

</div>


<a id="p100107"></a>Методика основана на определении додина методом капиллярной газожидкостной хроматографии с использованием термоионного детектора после его извлечения из образцов метанолом и очистке экстрактов перераспределением в системе двух несмешивающихся жидкостей и дериватизации ацетилацетоном.
<a id="p100108"></a>Идентификация додина проводится по времени удерживания, количественное определение - методом абсолютной калибровки.
<a id="p100109"></a>Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования.

<div align="center">

3. <a id="p100110"></a>Средства измерений, реактивы,<br>
вспомогательные устройства и материалы

</div>



#### <a id="p100111"></a>3.1 Средства измерений



| <a id="p100112"></a>Газовый хроматограф с термоионным детектором и кварцевой капиллярной колонкой длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм с толщиной слоя полярной неподвижной фазы 0,25 мкм |  |
| --- | --- |
| <a id="p100113"></a>Весы аналитические с пределом взвешивания до 210 г и пределом допустимой погрешности 0,2 мг | <a id="p100114"></a>ГОСТ 24104-01 |
| <a id="p100115"></a>Весы технические с пределом взвешивания до 400 г и допустимой погрешностью 0,1 г | <a id="p100116"></a>ГОСТ 24104-01 |
| <a id="p100117"></a>Колбы мерные на 10, 50, 100 и 1000 см3 | <a id="p100118"></a>ГОСТ 23932-90 |
| <a id="p100119"></a>Микрошприц объемом 10 мм3 | <a id="p100120"></a>ТУ 2-833-106 |
| <a id="p100121"></a>Пипетки градуированные объемом 1, 2, 5 и 10 см3 | <a id="p100122"></a>[ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) |
| <a id="p100123"></a>Пробирки мерные со шлифом объемом 5,0 см3 | <a id="p100124"></a>ГОСТ 23932-90 |
| <a id="p100125"></a>Цилиндры мерные на 50 и 100 см3 | <a id="p100126"></a>ГОСТ 23932-90 |


<a id="p100127"></a>*Примечание.* Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.


#### <a id="p100128"></a>3.2 Реактивы



| <a id="p100129"></a>Азот газообразный, в.ч. | <a id="p100130"></a>ТУ 301-07-25-89 |
| --- | --- |
| <a id="p100131"></a>Ацетилацетон, ч.д.а. | <a id="p100132"></a>[ГОСТ 10259-78](https://bukva.ai/docs/standart-gost-10259-78) |
| <a id="p100133"></a>Дихлорметан, х.ч. | <a id="p100134"></a>ТУ 6-09-2662-77 |
| <a id="p100135"></a>Додин, аналитический стандарт 99,0% |  |
| <a id="p100136"></a>Вода для лабораторного анализа (бидистиллированная, деионизованная) | <a id="p100137"></a>[ГОСТ Р 52501-05](https://bukva.ai/docs/gost-r-52501-2005) |
| <a id="p100138"></a>Калия гидроксид, ч.д.а. | <a id="p100139"></a>[ГОСТ 24363-80](https://bukva.ai/docs/gost-24363-80) |
| <a id="p100140"></a>Метанол, х.ч. | <a id="p100141"></a>[ГОСТ 6995-77](https://bukva.ai/docs/standart-gost-6995-77) |
| <a id="p100142"></a>Натрий хлористый, х.ч. | <a id="p100143"></a>ГОСТ 4233-77 |
| <a id="p100144"></a>Раствор 0,5 н гидроксида калия в воде |  |
| <a id="p100145"></a>Раствор 0,05 н гидроксида калия в растворе (метанол:вода = 90:10) |  |
| <a id="p100146"></a>Раствор 1%-й соляной кислоты в метаноле |  |
| <a id="p100147"></a>Раствор 25%-го хлористого натрия в воде |  |
| <a id="p100148"></a>Соляная кислота, х.ч. | <a id="p100149"></a>ГОСТ 3118-77 |
| <a id="p100150"></a>Спирт этиловый ректификат (этанол) | <a id="p100151"></a>[ГОСТ 17299-78](https://bukva.ai/docs/gost-17299-78) |


<a id="p100152"></a>*Примечание.* Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки.


#### <a id="p100153"></a>3.3 Вспомогательные устройства и материалы



| <a id="p100154"></a>Аппарат для встряхивания проб | <a id="p100155"></a>ТУ 64-1-1081-73 |
| --- | --- |
| <a id="p100156"></a>Воронки делительные, вместимостью 250 см3 | <a id="p100157"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100158"></a>Воронки химические конусные | <a id="p100159"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100160"></a>Воронки делительные емкостью 100 и 250 см3 | <a id="p100161"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100162"></a>Дефлегматоры | <a id="p100163"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100164"></a>Колбы плоскодонные конические вместимостью 100 см3 | <a id="p100165"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100166"></a>Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 10, 100 см3 и 250 мл | <a id="p100167"></a>[ГОСТ 9737-93](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93) |
| <a id="p100168"></a>Ротационный вакуумный испаритель с мембранным насосом, обеспечивающим вакуум до 10 мбар |  |
| <a id="p100169"></a>Ультразвуковая ванна с рабочей частотой 35 кГц |  |
| <a id="p100170"></a>Фильтры бумажные, медленной фильтрации | <a id="p100171"></a>ТУ 6.091678-86 |


<a id="p100172"></a>*Примечание.* Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

<div align="center">

4. <a id="p100173"></a>Требования безопасности

</div>


<a id="p100174"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.
<a id="p100175"></a>4.2. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией, соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленные ГН 2.2.5.1313-03 и 2.2.5.2308-07.
<a id="p100176"></a>Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.
<a id="p100177"></a>4.3. При работе с газами, находящимися в баллонах под давлением до 15 мПа (150 кгс/см2), необходимо соблюдать "Правила устройства и безопасной эксплуатации стационарных компрессорных установок, воздуховодов и газопроводов под давлением" ПБ 03-576-03. Запрещается открывать вентиль баллона, не установив на нем понижающий редуктор.

<div align="center">

5. <a id="p100178"></a>Требования к квалификации операторов

<a id="p100179"></a>Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом капиллярной газожидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по [п. 13](#p100257).

</div>


6. <a id="p100180"></a>Условия измерений

<a id="p100181"></a>При выполнении измерений выполняют следующие условия:
- <a id="p100182"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100183"></a>выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

<div align="center">

7. <a id="p100184"></a>Подготовка к определению

</div>



#### <a id="p100185"></a>7.1 Кондиционирование колонки


<a id="p100186"></a>Перед началом анализа кварцевую капиллярную колонку кондиционируют в токе азота при температуре термостата колонки 280 °C не менее 30 мин.


#### <a id="p100187"></a>7.2 Подготовка растворителей и приготовление растворов


<a id="p100188"></a>7.2.1. Подготовка растворителей. Растворители, используемые для анализа, специальной подготовки не требуют. Рекомендуется проверить чистоту применяемых растворителей. Для этого 100 см3 растворителя испаряют при помощи вакуумного ротационного испарителя при температуре 40 °C до объема 1 см3 и хроматографируют. При обнаружении примесей, которые могут мешать определению, растворители очищают общепринятыми методами.
<a id="p100189"></a>7.2.2. Раствор 0,5 н гидроксида калия. В мерную колбу на 1 дм3 помещают 28 г гидроокиси калия, растворяют в 100 - 200 см3 дистиллированной воды и доводят до метки водой.
<a id="p100190"></a>7.2.3. Раствор 0,05 н гидроксида калия в смеси метанол-вода 90:10. В мерную колбу на 1 дм3 помещают 100 см3 раствора 0,5 н гидроксида калия и доводят до метки метанолом.
<a id="p100191"></a>7.2.4. Раствор 25%-й хлористого натрия в воде. 350 г хлористого натрия растворяют в 1 дм3 дистиллированной воды.

<div align="center">

<a id="p100192"></a>7.2.5. Раствор 1%-й соляной кислоты в метаноле. В мерную колбу на 1 дм3 помещают 30 см3 концентрированной соляной кислоты и доводят до метки метанолом.

</div>



#### <a id="p100193"></a>7.3 Приготовление основного и градуировочных растворов


<a id="p100194"></a>7.3.1. Основной раствор с концентрацией 0,5 мг/см3: точную навеску додина (50 +/- 0,5) мг помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3, растворяют в метаноле и доводят объем до метки метанолом.
<a id="p100195"></a>Градуировочные растворы с концентрациями додина 1,0; 2,0; 5,0 и 10,0 мкг/см3 готовят методом последовательного разбавления по объему.
<a id="p100196"></a>7.3.2. Раствор N 1 с концентрацией 10,0 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 100 см3 вносят 2 см3 основного раствора и доводят до метки метанолом.
<a id="p100197"></a>7.3.3. Раствор N 2 с концентрацией 5 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 5,0 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки метанолом.
<a id="p100198"></a>7.3.4. Раствор N 3 с концентрацией 2 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 2 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки метанолом.
<a id="p100199"></a>7.3.5. Раствор N 4 с концентрацией 1 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 1,0 см3 раствора N 1 и доводят объем до метки метанолом.
<a id="p100200"></a>Основной раствор можно хранить в холодильнике при температуре 0 - 4 °C в течение 3 месяцев, градуировочные растворы - в течение месяца.


#### <a id="p100201"></a>7.4 Построение градуировочного графика


<div align="center">

<a id="p100202"></a>Для построения градуировочного графика (площадь пика - концентрация додина в растворе) по 1 см3 градуировочных растворов додина помещают в пробирку на 10 см3 и упаривают досуха на вакуумном ротационном испарителе при температуре бани 40 °C. Сухой остаток растворяют в 4 см3 0,05 н раствора гидроксида калия в смеси (метанол-вода, 90:10) и дериватизируют по [п. 9.3](#p100228). В хроматограф вводят по 1 мм3 дериватизированных градуировочных растворов (не менее 3 параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4 точек по диапазону измеряемых концентраций). Затем измеряют площади пиков и строят график зависимости среднего значения площади пика от концентрации додина в градуировочном растворе.<br>
<a id="p100203"></a>Методом наименьших квадратов рассчитывают градуировочные коэффициенты ( $K_{0}$ , $K_{1}$ ) в уравнении линейной регрессии концентрации раствора C:

</div>


<a id="p100204"></a> $C = K_{1} \times S + K_{0},$ 

<a id="p100205"></a>где S - площадь пика градуировочного раствора.
<a id="p100206"></a>Градуировку признают удовлетворительной, если значение коэффициента линейной корреляции оказывается не ниже 0,99.
<a id="p100207"></a>Градуировочную характеристику необходимо проверять при замене реактивов, хроматографической колонки или элементов хроматографической системы, а также при отрицательном результате контроля градуировочного коэффициента.

<div align="center">

<a id="p100208"></a>Градуировочную зависимость признают стабильной при выполнении следующего условия:

</div>


<a id="p100209"></a> ![формула](https://i.bukva.ai/2dCuLejr/img_1.png) 

<a id="p100210"></a>где C - аттестованное значение массовой концентрации додина в градуировочном растворе;
<a id="p100211"></a> $C_{\text{К}}$ - результат контрольного измерения массовой концентрации додина в градуировочном растворе;
<a id="p100212"></a> $\lambda_{\text{контр}.}$ - норматив контроля градуировочного коэффициента, % ( $\lambda_{\text{контр}.} = 10\%$ при P = 0,95).


#### <a id="p100213"></a>7.5 Подготовка приборов и средств измерения


<a id="p100214"></a>Установка и подготовка всех приборов и средств измерения производится в соответствии с требованиями технической документации.

<div align="center">

8. <a id="p100215"></a>Отбор проб и хранение

</div>


<a id="p100216"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.1979), а также в соответствии с [ГОСТ Р 51592-2000](https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-51592-2000) "Вода. Общие требования к отбору проб"; [ГОСТ 28168-89](https://bukva.ai/docs/gost-28168-89) "Почвы. Отбор проб"; [ГОСТ 27572-87](https://bukva.ai/docs/gost-27572-87) "Яблоки свежие для промышленной переработки"; [ГОСТ 21714-76](https://bukva.ai/docs/gost-21714-76) "Груши свежие ранних сроков созревания, ТУ"; [ГОСТ 21713-76](https://bukva.ai/docs/gost-21713-76) "Груши свежие поздних сортов созревания. ТУ"; [ГОСТ 21921-76](https://bukva.ai/docs/gost-21921-76) "Вишня свежая. ТУ"; [ГОСТ 21920-76](https://bukva.ai/docs/gost-21920-76) "Слива и алыча крупноплодная свежие. ТУ"; [ГОСТ 21832-76](https://bukva.ai/docs/standart-gost-21832-76) "Абрикосы свежие. ТУ".
<a id="p100217"></a>Для длительного хранения пробы почвы подсушиваются при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы могут храниться в течение года. Перед анализом сухую почву доводят до стандартной влажности, просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм. Пробы фруктов хранят до анализа в герметичной п/э упаковке в морозильной камере при -18 °C. Перед анализом фрукты, не размораживая, измельчают на терке или в гомогенизаторе.

<div align="center">

9. <a id="p100218"></a>Проведение определения

</div>



#### <a id="p100219"></a>9.1 Экстракция додина



##### <a id="p100220"></a>9.1.1 Вода. Концентрирование

<a id="p100221"></a>В круглодонную колбу на 1000 см3 помещают 400 см3 анализируемой воды. Воду выпаривают на вакуумном ротационном испарителе до объема 8 - 10 см3 при температуре бани 40 °C.

##### <a id="p100222"></a>9.1.2 Экстракция додина из почвы, плодовых семечковых и косточковых

<a id="p100223"></a>Навеску почвы, фруктов (10 - 20 г) помещают в плоскодонную коническую колбу вместимостью 100 см3, добавляют 60 см3 0,05 н раствора гидроксида калия в смеси (метанол-вода, 90:10), колбу помещают в ультразвуковую ванну на 10 мин или встряхивают на электромеханическом встряхивателе в течение 30 мин. Экстракт фильтруют в делительную воронку на 250 см3 через бумажный фильтр. Повторяют экстракцию 60 см3 1%-го раствора соляной кислоты в метаноле. Фильтр промывают 20 см3 метанола. Объединенный экстракт выпаривают до объема ~ 10 см3 на вакуумном ротационном испарителе при температуре бани 40 °C.

##### <a id="p100224"></a>9.1.3 Экстракция додина из плодовых соков

<a id="p100225"></a>В делительную воронку на 250 см3 помещают 40 см3 анализируемого сока и экстрагируют 4 раза по 30 см3 метиленхлоридом, добавляя перед каждой экстракцией в плодовый сок по 5 см3 этилового спирта для предотвращения образования эмульсии и улучшения экстракции. Объединенный экстракт упаривают досуха на вакуумном ротационном испарителе при температуре бани не выше 40 °C. Сухой остаток растворяют в 4 см3 0,05 н раствора гидроксида калия в смеси (метанол-вода, 90:10) и дериватизируют по [п. 9.3](#p100228).


#### <a id="p100226"></a>9.2 Очистка экстракта перераспределением

<div align="center">

в системе несмешивающихся растворителей

</div>


<a id="p100227"></a>К экстрактам, полученным по [пп. 9.1.1](#p100220) и [9.1.2](#p100222), добавляют 25 см3 25%-го раствора хлористого натрия и переносят в делительную воронку на 100 см3. Трижды экстрагируют метиленхлоридом по 30 см3, каждый раз интенсивно встряхивая в течение 2 - 3 мин. В случае образования стойкой эмульсии добавляют в водный раствор 2 - 3 см3 этанола. Фракции метиленхлорида объединяют, отгоняют на вакуумном ротационном испарителе при температуре бани 30 - 40 °C до объема 2 - 3 см3. Пипеткой переносят экстракт в пробирку на 10 см3. Колбу ополаскивают двумя порциями по 3 см3 метиленхлорида, который объединяют с экстрактом. Экстракт упаривают досуха на вакуумном ротационном испарителе при температуре бани 40 °C. Сухой остаток растворяют в 4 см3 0,05 н раствора гидроксида калия в смеси (метанол-вода, 90:10) и дериватизируют по п. 9.3.


#### <a id="p100228"></a>9.3 Дериватизация додина


<a id="p100229"></a>В пробирку с раствором для дериватизации ([пп. 7.4](#p100201), [9.1.3](#p100224), [9.2](#p100226)) добавляют 0,2 см3 ацетилацетона. Устанавливают дефлегматор и помещают на водяную баню с температурой 80 °C, нагревают в течение 4 ч, упаривают досуха на вакуумном ротационном испарителе при температуре бани 40 °C. Остаток в пробирке растворяют в 2 - 4 см3 и анализируют на содержание додина по п. 9.4.


#### <a id="p100230"></a>9.4 Условия хроматографирования


<a id="p100231"></a>Газовый хроматограф с термоионным детектором (ТИД). Капиллярная кварцевая колонка длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм с толщиной слоя полярной неподвижной фазы 0,25 мкм. Температура колонки: программирование от 100 °C (0,5 мин) до 260 °C со скоростью 20 °C/мин. Температура испарителя 250 °C. Температура детектора 290 °C. Расход газов: газа-носителя (азот) - 0,6 мин - 1 см3/мин без разделения потока, затем 12 см3/мин; водорода и воздуха к ТИД - 20 и 200 см3/мин соответственно; дополнительного газа (азот) к ТИД - 10 см3/мин. Объем вводимой пробы: 1 - 2 мм3.

<div align="center">

10. <a id="p100232"></a>Обработка результатов анализа

<a id="p100233"></a>Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки. Содержание додина в пробе (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

</div>


<a id="p100234"></a> ![формула](https://i.bukva.ai/2dCuLejr/img_2.png) 

<a id="p100235"></a>где $S_{x}$ - площадь пика додина на хроматограмме испытуемого образца, мм2 (AU);
<a id="p100236"></a>K - градуировочный коэффициент, найденный на стадии построения соответствующей градуировочной зависимости;
<a id="p100237"></a>V - объем пробы, подготовленной для хроматографического анализа, см3;
<a id="p100238"></a>P - навеска анализируемого образца, г;
<a id="p100239"></a>f - полнота извлечения додина, приведенная в [табл. 2](#p100069), %.
<a id="p100240"></a>Содержание остаточных количеств додина в образце вычисляют как среднее из двух параллельных определений.

<div align="center">

<a id="p100241"></a>Образцы, дающие пики, большие, чем стандартный раствор додина с концентрацией 1,0 мкг/см3, разбавляют метанолом.

</div>


11. <a id="p100242"></a>Проверка приемлемости результатов
параллельных определений

<a id="p100243"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предел повторяемости:

<a id="p100244"></a> $\frac{2 \cdot X_{1} - X_{2} \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \_\_\_\_ \leq r,$ 

<div align="center">

<a id="p100245"></a>где $X_{1}$ , $X_{2}$ - результаты параллельных определений, мг/кг;<br>
<a id="p100246"></a>r - значение предела повторяемости $(r = 2,8\sigma_{r})$ .<br>
<a id="p100247"></a>При невыполнении [условия (1)](#p100273) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

</div>


12. <a id="p100248"></a>Оформление результатов

<a id="p100249"></a>Результат анализа представляют в виде:
<a id="p100250"></a> $(X \pm \Delta)\text{мг}/\text{кг}$ при вероятности P = 0,95,
<a id="p100251"></a>где ![формула](https://i.bukva.ai/2dCuLejr/img_3.png) - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;

<div align="center">

<a id="p100252"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

</div>


<a id="p100253"></a> ![формула](https://i.bukva.ai/2dCuLejr/img_4.png) 

<a id="p100254"></a>где $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
<a id="p100255"></a>В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100256"></a>"содержание вещества в пробе "менее нижней границы определения" (например: менее 0,1 мг/кг*, где * - 0,1 мг/кг - предел обнаружения додина в яблоках).

<div align="center">

13. <a id="p100257"></a>Контроль качества результатов измерений

</div>


<a id="p100258"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-02](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
<a id="p100259"></a>13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100260"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.

<div align="center">

<a id="p100261"></a>Величина добавки $C_{\text{д}}$ должна удовлетворять условию:

</div>


<a id="p100262"></a> $C_{\text{д}} = \Delta_{\text{л},X} + \Delta_{\text{л},X\prime},$ 

<a id="p100263"></a>где $\pm \Delta_{\text{л},X}$ $( \pm \Delta_{\text{л},X\prime})$ - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/кг;
<a id="p100264"></a>при этом:

<a id="p100265"></a> $\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta,$ 

<div align="center">

<a id="p100266"></a>где $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

</div>


<a id="p100267"></a> ![формула](https://i.bukva.ai/2dCuLejr/img_5.png) 

<a id="p100268"></a>где $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
<a id="p100269"></a>Результат контроля процедуры $K_{\text{к}}$ рассчитывают по формуле:

<a id="p100270"></a> $K_{\text{к}} = X\prime - X - C_{\text{д}},$ 

<div align="center">

<a id="p100271"></a>где X', X, $C_{\text{д}}$ - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100242)) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки соответственно, мг/кг.<br>
<a id="p100272"></a>Норматив контроля K рассчитывают по формуле:

</div>


<a id="p100273"></a> $K \sqrt{= \Delta_{\text{л},X\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},X}^{2}.}$ (1)

<a id="p100274"></a>Проводят сопоставление результата контроля процедуры $(K_{\text{к}})$ с нормативом контроля (K).
<a id="p100275"></a>Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию

<div align="center">

<a id="p100276"></a> $K_{\text{к}} \leq K,$ (2)

</div>


<a id="p100277"></a>процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100278"></a>При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры к их устранению.

#### <a id="p100279"></a>13.3 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости

<a id="p100280"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предел воспроизводимости (R):

<div align="center">

<a id="p100281"></a> ![рис. 7](https://i.bukva.ai/2dCuLejr/img_6.png) (3)

</div>


<a id="p100282"></a>где $X_{1}$ , $X_{2}$ - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
<a id="p100283"></a>R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций), %.



<a id="p100284"></a>

---