---
title: "\"МУК 4.1.3099-13. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств пентиопирада в воде, почве, яблоках и яблочном соке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.3099-13"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-3099-13"
---

## "МУК 4.1.3099-13. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств пентиопирада в воде, почве, яблоках и яблочном соке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.3099-13. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств пентиопирада в воде, почве, яблоках и яблочном соке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 08.08.2013)

> [!IMPORTANT]
> Документ [введен](#p100002) в действие с 8 августа 2013 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**<br>
8 августа 2013 года

</div>



#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕНТИОПИРАДА В ВОДЕ,**
**ПОЧВЕ, ЯБЛОКАХ И ЯБЛОЧНОМ СОКЕ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ**
**ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.3099-13**

<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения:<br>
с момента утверждения

</div>


1. <a id="p100006"></a>Разработаны Российским государственным аграрным университетом МСХА им. К.А. Тимирязева, Учебно-научным консультационным центром "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов" Минсельхоза России.
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 30 мая 2013 г. N 1).
3. <a id="p100008"></a>Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 8 августа 2013 г.
4. <a id="p100009"></a>Введены в действие с момента утверждения.
5. <a id="p100010"></a>Введены впервые.

<a id="p100011"></a>Свидетельство о метрологической аттестации от 24.04.2012 N 0117.24.04.12
<a id="p100012"></a>Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации пентиопирада в воде в диапазоне 0,005 - 0,05 мг/куб. дм и в почве в диапазоне 0,01 - 0,1 мг/кг, а также уровня его остаточных количеств в яблоках и яблочном соке в диапазоне 0,01 - 0,1 мг/кг.
<a id="p100013"></a>Методические указания носят рекомендательный характер.
<a id="p100014"></a>Пентиопирад.
<a id="p100015"></a>(RS)-N-[2-(1,3-диметилбутил)-3-тиенил]-1-метил-3-(трифторметил)-1H-пиразол-4-карбоксамид.

<div align="center">

<a id="p100016"></a>Структурная формула:

</div>


<a id="p100017"></a> ![рис. 1](https://i.bukva.ai/NeLlUrAe/img_0.png) 

<a id="p100018"></a>Эмпирическая формула: $C_{16}H_{20}F_{3}N_{3}OS$ .
<a id="p100019"></a>Молекулярная масса: 359,4.
<a id="p100020"></a>Агрегатное состояние: порошок.
<a id="p100021"></a>Цвет, запах: белый, без запаха.
<a id="p100022"></a>Давление паров: $6,43\text{х }10^{- 6}\text{Па}$ (25 °C).
<a id="p100023"></a>Коэффициент распределения октанол-вода:
<a id="p100024"></a> $logK_{ow} = 4,36$ (pH 4); $logK_{ow} = 4,62$ (pH 7); $logK_{ow} = 4,54$ (pH 10).
<a id="p100025"></a>Температура плавления: 108,7 °C.
<a id="p100026"></a>Растворимость в воде (мг/куб. дм, при 20°C): 7,53.
<a id="p100027"></a>Растворимость в органических растворителях (г/куб. дм, 20 °C): ацетон - 557; н-гексан - 0,75; гептан - 0,74; дихлорметан - 531; ксилол - 42,7; толуол - 67,0; метанол - 402; этанол - 234,5; этил-ацетат - 349.
<a id="p100028"></a>Стабилен в водных растворах при pH 3 - 10 и температуре 20 °C в низких концентрациях (менее 1 мг/куб. дм).


### <a id="p100029"></a>Краткая токсикологическая характеристика


<a id="p100030"></a>Пентиопирад относится к мало опасным по острой оральной ( $\text{ЛД}_{50}$ для крыс более 2000 мг/кг) и дермальной токсичности ( $\text{ЛД}_{50}$ для крыс более 2000 мг/кг), но к умеренно опасным веществам по ингаляционной токсичности ( $\text{ЛД}_{50}$ для крыс (4 ч) более 5669 мг/куб. м). Не раздражает кожу и слизистую оболочку глаз. Не является мутагеном.


### <a id="p100031"></a>Область применения


<a id="p100032"></a>Пентиопирад - системный фунгицид, ингибирует процесс дыхания грибов путем связывания с митохондриальным дыхательным комплексом II, останавливает прорастание спор, ингибирует рост мицелия и обладает сильным антиспоруляционным действием.
<a id="p100033"></a>Пентиопирад используется для борьбы с паршой и мучнистой росой на яблонях с нормой расхода 0,375 - 1,125 л/га.
<a id="p100034"></a>В России гигиенические нормативы не установлены.


### 1. <a id="p100035"></a>Погрешность измерений


<a id="p100036"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1, для соответствующих диапазонов концентраций.

<div align="right">

<a id="p100037"></a>Таблица 1

</div>


<div align="center">

<a id="p100038"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ДЛЯ ПЕНТИОПИРАДА**

</div>



<table>
<colgroup><col width="16%"><col width="22%"><col width="17%"><col width="9%"><col width="9%"><col width="10%"><col width="17%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100039"></a>Анализируемый объект</td><td><a id="p100040"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/куб. дм)</td><td><a id="p100041"></a>Показатель точности (граница относительной погрешности), $\pm \delta$ , %, при P = 0,95</td><td><a id="p100042"></a>Стандартное отклонение повторяемости, $\sigma_{r}$ , %</td><td><a id="p100043"></a>Предел повторяемости, r, %</td><td><a id="p100044"></a>Предел воспроизводимости, R, %</td><td><a id="p100045"></a>Норматив оперативного контроля точности, К, мг/кг (мг/куб. дм) (P = 0,95, m = 2)</td></tr>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100046"></a>Вода</td><td><a id="p100047"></a>0,005 - 0,01 вкл.</td><td><a id="p100048"></a>40</td><td><a id="p100049"></a>2,59</td><td><a id="p100050"></a>7,20</td><td><a id="p100051"></a>10,08</td><td><a id="p100052"></a>0,47 х X <a href="#p100080">&lt;*&gt;</a></td></tr>
<tr><td><a id="p100053"></a>0,01 - 0,05 вкл.</td><td><a id="p100054"></a>30</td><td><a id="p100055"></a>0,69</td><td><a id="p100056"></a>1,93</td><td><a id="p100057"></a>2,70</td><td><a id="p100058"></a>0,36 х X <a href="#p100080">&lt;*&gt;</a></td></tr>
<tr><td><a id="p100059"></a>Почва</td><td><a id="p100060"></a>0,01 - 0,1 вкл.</td><td><a id="p100061"></a>50</td><td><a id="p100062"></a>2,88</td><td><a id="p100063"></a>8,01</td><td><a id="p100064"></a>11,21</td><td><a id="p100065"></a>0,59 х X <a href="#p100080">&lt;*&gt;</a></td></tr>
<tr><td><a id="p100066"></a>Яблоки</td><td><a id="p100067"></a>0,01 - 0,1 вкл.</td><td><a id="p100068"></a>50</td><td><a id="p100069"></a>2,03</td><td><a id="p100070"></a>5,64</td><td><a id="p100071"></a>7,90</td><td><a id="p100072"></a>0,59 х X <a href="#p100080">&lt;*&gt;</a></td></tr>
<tr><td><a id="p100073"></a>Яблочный сок</td><td><a id="p100074"></a>0,01 - 0,1 вкл.</td><td><a id="p100075"></a>50</td><td><a id="p100076"></a>3,42</td><td><a id="p100077"></a>9,51</td><td><a id="p100078"></a>13,31</td><td><a id="p100079"></a>0,59 х X <a href="#p100080">&lt;*&gt;</a></td></tr>
<tr><td colspan="7"><a id="p100080"></a>--------------------------------<br>&lt;*&gt; X - среднее значение массовой концентрации пентиопирада в пробе (мг/куб. дм, мг/кг).</td></tr>
</table>


<a id="p100081"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в табл. 2

<div align="right">

<a id="p100082"></a>Таблица 2

</div>


<div align="center">

<a id="p100083"></a>**ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВА, СТАНДАРТНОЕ ОТКЛОНЕНИЕ,**<br>
**ДОВЕРИТЕЛЬНЫЙ ИНТЕРВАЛ СРЕДНЕГО РЕЗУЛЬТАТА ДЛЯ ПЕНТИОПИРАДА**

</div>



<table>
<colgroup><col width="16%"><col width="15%"><col width="17%"><col width="16%"><col width="16%"><col width="20%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100084"></a>Анализируемый объект</td><td colspan="5"><a id="p100085"></a>Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td><a id="p100086"></a>Предел обнаружения, мг/кг (мг/куб. дм)</td><td><a id="p100087"></a>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td><a id="p100088"></a>Полнота извлечения вещества, %</td><td><a id="p100089"></a>Стандартное отклонение, S, %</td><td><a id="p100090"></a>Доверительный интервал среднего результата, +/-, %</td></tr>
<tr><td><a id="p100091"></a>Вода</td><td><a id="p100092"></a>0,005</td><td><a id="p100093"></a>0,005 - 0,05</td><td><a id="p100094"></a>95,98</td><td><a id="p100095"></a>1,67</td><td><a id="p100096"></a>0,75</td></tr>
<tr><td><a id="p100097"></a>Почва</td><td><a id="p100098"></a>0,01</td><td><a id="p100099"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100100"></a>84,55</td><td><a id="p100101"></a>3,63</td><td><a id="p100102"></a>1,44</td></tr>
<tr><td><a id="p100103"></a>Яблоки</td><td><a id="p100104"></a>0,01</td><td><a id="p100105"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100106"></a>89,32</td><td><a id="p100107"></a>3,04</td><td><a id="p100108"></a>1,27</td></tr>
<tr><td><a id="p100109"></a>Яблочный сок</td><td><a id="p100110"></a>0,01</td><td><a id="p100111"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100112"></a>91,34</td><td><a id="p100113"></a>2,90</td><td><a id="p100114"></a>1,24</td></tr>
</table>



### 2. <a id="p100115"></a>Метод измерений


<div align="center">

<a id="p100116"></a>Метод основан на определении пентиопирада с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового детектора после его экстракции из образцов органическим растворителем и очистки экстракта на концентрирующих патронах N 1 и 2.<br>
<a id="p100117"></a>Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.<br>
<a id="p100118"></a>В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором состава подвижной фазы и выбором колонок различной полярности.

</div>



### 3. <a id="p100119"></a>Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы



#### <a id="p100120"></a>3.1. Средства измерений



| <a id="p100121"></a>Весы аналитические класса точности - специальный (I) с наибольшим пределом взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г | <a id="p100122"></a>ГОСТ Р 53228-2008 |
| --- | --- |
| <a id="p100123"></a>Весы лабораторные общего назначения класса точности - средний (III) с наибольшим пределом взвешивания до 600 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,038 г | <a id="p100124"></a>ГОСТ Р 53228-2008 |
| <a id="p100125"></a>Колбы мерные на 10, 25, 50, 100, 500 и 1000 куб. см | <a id="p100126"></a>[ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |
| <a id="p100127"></a>Микрошприц объемом 100 куб. мм со шкалой деления 0,001 куб. см и погрешностью менее 1% от номинального объема |  |
| <a id="p100128"></a>Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 куб. см | <a id="p100129"></a>[ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) |
| <a id="p100130"></a>pH-метр/милливольтметр с диапазоном измерения 0 - 14 pH; +/- 1999 мВ |  |
| <a id="p100131"></a>Хроматографическая система, включающая:<br>- хроматограф жидкостный, снабженный термостатом для колонок с диапазоном температур от 15 до 80 °C, с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью не ниже 0,005 единиц адсорбции на шкалу;<br>- компьютерное программное обеспечение, контролирующее работу всего прибора, обеспечивающее сбор и хранение всех хроматограмм в процессе проведения хроматографического анализа, обеспечивающее обработку результатов измерений, вывод и расчет хроматограмм и количественный анализ |  |
| <a id="p100132"></a>Цилиндры мерные на 10, 25 и 50 куб. см | <a id="p100133"></a>[ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |


<a id="p100134"></a>*Примечание.* Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.


#### <a id="p100135"></a>3.2. Реактивы



| <a id="p100136"></a>Пентиопирад, CAS 183675-82-3, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 99,9 % |  |
| --- | --- |
| <a id="p100137"></a>Ацетон, ос.ч. | <a id="p100138"></a>ТУ 6-09-3513-86 |
| <a id="p100139"></a>Ацетонитрил, ос.ч., УФ-200 нм | <a id="p100140"></a>ТУ 6-09-2167-84 |
| <a id="p100141"></a>Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72 и (или) бидистиллированная (вода дистиллированная, перегнанная повторно в стеклянной емкости) |  |
| <a id="p100142"></a>Гелий, очищенный | <a id="p100143"></a>ТУ-51-940-80 |
| <a id="p100144"></a>n-Гексан, х.ч. | <a id="p100145"></a>ТУ 6-09-3818-89 |
| <a id="p100146"></a>Калий марганцовокислый, ч.д.а. | <a id="p100147"></a>ГОСТ 20490-75 |
| <a id="p100148"></a>Кальций хлористый, ч. | <a id="p100149"></a>ТУ 6-09-4711-81 |
| <a id="p100150"></a>Кислота муравьиная, ч.д.а. | <a id="p100151"></a>[ГОСТ 5848-73](https://bukva.ai/docs/gost-5848-73) |
| <a id="p100152"></a>Кислота соляная, х.ч. | <a id="p100153"></a>ГОСТ 3118-77 |
| <a id="p100154"></a>Концентрирующие патроны для твердофазной экстракции с гидрофобным сорбентом с размером частиц 63 - 200 мкм с привитыми октильными (C8) группами (объем - 1 куб. см, масса сорбента - 0,6 г) (патрон N 1) | <a id="p100155"></a>ТУ 4215-002-05451931-94 |
| <a id="p100156"></a>Концентрирующие патроны для твердофазной экстракции со слабоосновным сорбентом с размером частиц 63 - 200 мкм с привитыми аминогруппами (объем - 1 куб. см, масса сорбента -0,6 г) (патрон N 2) | <a id="p100157"></a>ТУ 4215-002-05451931-94 |
| <a id="p100158"></a>Метилен хлористый, х.ч. | <a id="p100159"></a>ТУ 6-09-2662-77 |
| <a id="p100160"></a>Натрий сернокислый, безводный, х.ч. | <a id="p100161"></a>[ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76) |
| <a id="p100162"></a>Натрий хлористый, х.ч. | <a id="p100163"></a>ГОСТ 4233-77 |


<a id="p100164"></a>*Примечание.* Допускается использование реактивов с аналогичными или лучшими характеристиками.


#### <a id="p100165"></a>3.3. Вспомогательные устройства и материалы



<table>
<colgroup><col width="64%"><col width="36%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100166"></a>Алонж прямой с отводом для вакуума (АО-14/23) для работы с концентрирующими патронами</td><td><a id="p100167"></a>ГОСТ 25336-82</td></tr>
<tr><td><a id="p100168"></a>Аппарат для встряхивания проб с возвратно-поступательным направлением колебаний, с максимальной загрузкой 10 кг, с амплитудой колебаний 30 мм и скоростью от 10 до 300 колебаний в минуту</td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100169"></a>Банки полипропиленовые с крышками для экстракции вместимостью 250 куб. см</td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100170"></a>Ванна ультразвуковая с потребляемой мощностью 140 Вт, рабочей частотой 50 Гц, рабочим объемом 4,5 куб. дм</td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100171"></a>Вата медицинская гигроскопическая хлопковая нестерильная</td><td><a id="p100172"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-5556-81">ГОСТ 5556-81</a></td></tr>
<tr><td><a id="p100173"></a>Воронки делительные на 250 куб. см</td><td><a id="p100174"></a>ГОСТ 25336-82</td></tr>
<tr><td><a id="p100175"></a>Воронки лабораторные стеклянные</td><td><a id="p100176"></a>ГОСТ 25336-82</td></tr>
<tr><td><a id="p100177"></a>Испаритель ротационный вакуумный с ручным подъемником, с диагональным конденсором и объемом испарительной колбы от 50 до 3000 куб. см, с изменяемой скоростью вращения штока испарителя от 5 до 240 об./мин., с водяной баней с антикоррозионным покрытием объемом 5 куб. дм и с диапазоном температур от 20 до 100 °C</td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100178"></a>Колбы конические плоскодонные на 100, 250 и 1000 куб. см</td><td><a id="p100179"></a>ГОСТ 25336-82</td></tr>
<tr><td><a id="p100180"></a>Колбы круглодонные со шлифом (концентраторы) на 100, 250 куб. см и 4000 куб. см ТС</td><td><a id="p100181"></a>ТУ 92-891.029-91</td></tr>
<tr><td><a id="p100182"></a>Колонка хроматографическая стальная, длиной 250 мм, с внутренним диаметром 4,6 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами C18</td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100183"></a>Насос диафрагменный, химически стойкий на 100%, с мощностью электропривода 245 Вт, предельным вакуумом 100 мбар/абс, с избыточным давлением 1 бар и скоростью откачки 34 куб. дм/мин.</td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100184"></a>Предколонка хроматографическая стальная, длиной 20,0 мм, внутренним диаметром 3,9 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами C8</td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100185"></a>Сито лабораторное с полотном из латуни или нержавеющей стали с размером ячеек 1 мм</td><td><a id="p100186"></a>ГОСТ 3826-82 и ГОСТ 6613-86</td></tr>
<tr><td><a id="p100187"></a>Стаканы стеклянные, термостойкие объемом 50 - 500 куб. см</td><td><a id="p100188"></a>ГОСТ 25336-82</td></tr>
<tr><td><a id="p100189"></a>Установка для перегонки растворителей с круглодонной колбой объемом 4000 куб. см и приемной конической колбой объемом 1000 куб. см</td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100190"></a>Фильтры обеззоленные нейтральные, быстро фильтрующие, диаметром 11 см, зольность одного фильтра 0,00072 г</td><td><a id="p100191"></a>ТУ-6-09-1678-86</td></tr>
<tr><td><a id="p100192"></a>Фильтры для очистки растворителей, диаметром 20 мм с отверстиями пор 20 мкм</td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100193"></a>Центрифуга лабораторная, настольная с максимальным рабочим числом оборотов 4000 об./мин., с рабочим объемом ротора 200 куб. см х 4 ячейки, выбираемый временной диапазон работы от 0 до 100 минут и с набором полипропиленовых банок емкостью 200 куб. см</td><td></td></tr>
<tr><td colspan="2"><a id="p100194"></a><a id="p100195"></a>Шприц инъекционный однократного применения объемом 10 куб. см<br>ГОСТ 24861-91 (ИСО 7886-84)</td></tr>
<tr><td></td><td><a id="p100196"></a>Примечание. Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.</td></tr>
</table>



### 4. <a id="p100197"></a>Требования безопасности


<a id="p100198"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-2009, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.
<a id="p100199"></a>4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-90 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.


### 5. <a id="p100200"></a>Требования к квалификации операторов


<div align="center">

<a id="p100201"></a>К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются специалисты, имеющие высшее или специальное химическое образование, опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой проведения анализа, освоившие метод анализа в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы контроля при проведении процедуры контроля погрешности анализа.

</div>



### 6. <a id="p100202"></a>Условия измерений


<a id="p100203"></a>При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- <a id="p100204"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C, относительной влажности не более 80% и нормальном атмосферном давлении;
- <a id="p100205"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


### 7. <a id="p100206"></a>Подготовка к выполнению определений


<div align="center">

<a id="p100207"></a>Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка концентрирующих патронов N 1 и 2 для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на концентрирующих патронах N 1 и 2, установление градуировочной характеристики.

</div>



#### <a id="p100208"></a>7.1. Подготовка органических растворителей



##### <a id="p100209"></a>7.1.1 Очистка ацетонитрила

<a id="p100210"></a>Ацетонитрил, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/куб. дм. Выдерживают его над осушителем в течение 5 - 6 ч. Затем ацетонитрил сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см аппарата для перегонки растворителей. Ацетонитрил перегоняют при температуре 81,5 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 81,5 °C, отбрасывают.

##### <a id="p100211"></a>7.1.2 Очистка ацетона

<a id="p100212"></a>Ацетон, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/куб. дм. Выдерживают его над осушителем в течение 5 - 6 ч. Затем ацетон сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см аппарата для перегонки растворителей, прибавляют туда марганцовокислый калий из расчета 100 мг/куб. дм. Ацетон перегоняют при температуре 56,2 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 56,2 °C, отбрасывают.

##### <a id="p100213"></a>7.1.3 Приготовление бидистиллированной воды

<a id="p100214"></a>Дистиллированную воду помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к ней марганцовокислый калий из расчета 1 г/куб. дм и кипятят в течение 6 ч.
<a id="p100215"></a>Собирают фракции, отогнанные при температуре 100,0 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 100,0 °C, отбрасывают.

##### <a id="p100216"></a>7.1.4 Очистка хлористого метилена

<a id="p100217"></a>Хлористый метилен промывают равным объемом 5%-го раствора натрия углекислого (безводного), осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/куб. дм. Выдерживают его над осушителем в течение 12 - 24 ч. Затем хлористый метилен сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см аппарата для перегонки растворителей. Хлористый метилен перегоняют при температуре 40,0 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 40,0 °C, отбрасывают.


#### <a id="p100218"></a>7.2. Приготовление растворов для проведения анализа



##### <a id="p100219"></a>7.2.1 Приготовление рабочих растворов

<a id="p100220"></a>7.2.1.1. Приготовление 0,1%-го водного раствора муравьиной кислоты. В мерную колбу объемом 1000 куб. см помещают 500 куб. см очищенной воды, прибавляют 1,0 куб. см муравьиной кислоты, перемешивают и доводят водой объем в колбе до метки.
<a id="p100221"></a>7.2.1.2. Приготовление 0,1 н раствора соляной кислоты. Пипеткой отбирают 8,2 куб. см концентрированной соляной кислоты и осторожно переносят в мерную колбу на 1000 куб. см, куда предварительно наливают около 500 куб. см очищенной воды. Затем раствор перемешивают и после охлаждения доводят водой объем в колбе до метки (при приготовлении раствора соблюдать осторожность и работать под тягой).

##### <a id="p100222"></a>7.2.2 Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ

<a id="p100223"></a>Для приготовления подвижной фазы используют свежеперегнанный ацетонитрил и 0,1%-й водный раствор муравьиной кислоты.
<a id="p100224"></a>В плоскодонную колбу объемом 1000 куб. см помещают 600 куб. см ацетонитрила и 350 куб. см 0,1%-го водного раствора муравьиной кислоты. Смесь тщательно перемешивают, пропускают через нее газообразный гелий со скоростью 20 куб. см/мин. в течение 5 мин., после чего помещают в ультразвуковую ванну для удаления растворенных газов на 1 мин.

##### <a id="p100225"></a>7.2.3 Приготовление градуировочных растворов

<a id="p100226"></a>7.2.3.1. Стандартный раствор N 1 с концентрацией пентиопирада 1,0 мг/куб. см. Взвешивают 50 мг пентиопирада в мерной колбе объемом 50 куб. см. Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом. Полученный стандартный раствор N 1 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 1 хранится в холодильнике в течение 6 месяцев.
<a id="p100227"></a>7.2.3.2. Стандартный раствор N 2 с концентрацией пентиопирада 10,0 мкг/куб. см. Из стандартного раствора N 1 отбирают пипеткой 1 куб. см, помешают в мерную колбу объемом 100 куб. см и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор N 2 используется для приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 2 хранится в холодильнике не более 30 суток.
<a id="p100228"></a>7.2.3.3. Стандартный раствор N 3 с концентрацией пентиопирада 1,0 мкг/куб. см. Из стандартного раствора N 2 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 при перемешивании. Стандартный раствор N 3 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике не более 30 суток.
<a id="p100229"></a>7.2.3.4. Стандартный раствор N 4 с концентрацией пентиопирада 0,5 мкг/куб. см. Из стандартного раствора N 3 отбирают пипеткой 5 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 при перемешивании. Стандартный раствор N 4 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике не более 30 суток.
<a id="p100230"></a>7.2.3.5. Стандартный раствор N 5 с концентрацией пентиопирада 0,2 мкг/куб. см. Из стандартного раствора N 2 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 50 куб. см и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 при перемешивании. Стандартный раствор N 5 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике не более 30 суток.
<a id="p100231"></a>7.2.3.6. Стандартный раствор N 6 с концентрацией пентиопирада 0,1 мкг/куб. см. Из стандартного раствора N 2 отбирают пипеткой 1 куб. см, помешают в мерную колбу объемом 100 куб. см и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 при перемешивании. Стандартный раствор N 6 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике не более 30 суток.
<a id="p100232"></a>7.2.3.7. Стандартные растворы пентиопирада с концентрацией 2,0; 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/куб. см для внесения в образцы. Методом последовательного разведения ацетонитрилом стандартного раствора N 2 готовят растворы, содержащие по 2,0; 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/куб. см пентиопирада, и используют эти растворы для внесения в контрольные образцы.


#### <a id="p100233"></a>7.3. Установление градуировочной характеристики


<a id="p100234"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади (высоты) пика от концентрации пентиопирада в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по четырем растворам для градуировки с концентрацией 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/куб. см.
<a id="p100235"></a>В инжектор хроматографа вводят по 20 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 9.5](#p100295). Осуществляют не менее 5 параллельных измерений.


#### <a id="p100236"></a>7.4. Подготовка концентрирующего патрона N 2 для очистки экстрактов и проверка хроматографического поведения пентиопирада на нем



##### <a id="p100237"></a>7.4.1 Подготовка концентрирующего патрона N 2 для очистки экстракта

<a id="p100238"></a>Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 куб. см/мин. (1 - 2 кап./с).
<a id="p100239"></a>Патрон N 2 устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц объемом не менее 10 куб. см (используют как емкость для элюентов).
<a id="p100240"></a>Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 5 куб. см ацетона, 5 куб. см смеси гексана с ацетоном в соотношении 4:1. Элюаты отбрасывают.
<a id="p100241"></a>Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.

##### <a id="p100242"></a>7.4.2 Проверка хроматографического поведения пентиопирада на концентрирующем патроне N 2

<a id="p100243"></a>Из стандартного раствора пентиопирада в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/куб. см, отбирают 1 куб. см, помещают в концентратор объемом 100 куб. см и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C. Сухой остаток растворяют в 2 куб. см ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 8 куб. см гексана, перемешивают и вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор объемом 100 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C, сухой остаток растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.
<a id="p100244"></a>Исходный концентратор обмывают последовательно двумя порциями по 10 куб. см смеси гексана с ацетоном в соотношении 4:1. Элюат после прохождения каждой порции элюентов собирают в отдельные концентраторы объемом по 100 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C, сухой остаток растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.
<a id="p100245"></a>Определяют фракции, содержащие пентиопирад, полноту смывания с патрона и необходимый объем элюента.
<a id="p100246"></a>Изучение поведения пентиопирада на концентрирующих патронах N 2 проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии патронов.


#### <a id="p100247"></a>7.5. Подготовка концентрирующего патрона N 1 для очистки экстрактов и проверка хроматографического поведения пентиопирада на нем



##### <a id="p100248"></a>7.5.1 Подготовка концентрирующего патрона N 1 для очистки экстракта

<a id="p100249"></a>Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 куб. см/мин. (1 - 2 кап./с).
<a id="p100250"></a>Патрон N 1 устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц объемом не менее 10 куб. см (используют как емкость для элюентов).
<a id="p100251"></a>Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 5 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 2:1 и 10 куб. см воды. Элюаты отбрасывают.
<a id="p100252"></a>Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.

##### <a id="p100253"></a>7.5.2 Проверка хроматографического поведения пентиопирада на концентрирующем патроне N 1

<a id="p100254"></a>Из стандартного раствора пентиопирада в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/куб. см, отбирают 1 куб. см, помещают в концентратор объемом 100 куб. см и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C. Сухой остаток растворяют в 1 куб. см ацетонитрила, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 9 куб. см воды, перемешивают и вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор объемом 100 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C, сухой остаток растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.
<a id="p100255"></a>Исходный концентратор обмывают последовательно 10 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:4, 10 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:2 и двумя порциями по 10 куб. см смеси ацетонитрила с 0,1%-м водным раствором муравьиной кислоты в соотношении 60:35. Элюат после прохождения каждой порции элюентов собирают в отдельные концентраторы объемом по 100 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C, сухой остаток растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.
<a id="p100256"></a>Определяют фракции, содержащие пентиопирад, полноту смывания с патрона и необходимый объем элюента.
<a id="p100257"></a>Изучение поведения пентиопирада на концентрирующих патронах N 1 проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии патронов.


#### <a id="p100258"></a>7.6. Подготовка и кондиционирование колонки для жидкостной хроматографии


<a id="p100259"></a>Хроматографическую колонку с предколонкой устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при температуре 30 °C и скорости потока подвижной фазы 1 куб. см/мин. 3 - 4 ч.


### 8. <a id="p100260"></a>Отбор проб и хранение


<a id="p100261"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", N 2051-79 от 21.08.79, а также в соответствии с [ГОСТ Р 51592-2000](https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-51592-2000) "Вода. Общие требования к отбору проб", [ГОСТ 17.4.3.01-83](https://bukva.ai/docs/gost-17-4-3-01-83) "Почвы. Общие требования к отбору проб", [ГОСТ 28168-89](https://bukva.ai/docs/gost-28168-89) "Почвы. Отбор проб", [ГОСТ 27572-87](https://bukva.ai/docs/gost-27572-87) "Яблоки свежие для промышленной переработки. Технические условия", ГОСТ 656-79 "Соки плодовые и ягодные натуральные".
<a id="p100262"></a>Пробы воды хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре 4 °C не более 10 суток.
<a id="p100263"></a>Для длительного хранения проб почвы почву подсушивают при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы могут храниться в темной таре в течение года. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм.
<a id="p100264"></a>Пробы яблок хранят в холодильнике в полиэтиленовых пакетах при температуре от 0 до 4°C не более суток. Для длительного хранения пробы замораживают и хранят в морозильной камере при температуре -18 °C до 2 лет. Перед анализом яблоки размораживают и измельчают на терке.
<a id="p100265"></a>Пробы яблочного сока хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре 4 °C не более 5 суток.


### 9. <a id="p100266"></a>Подготовка проб и выполнение измерений



#### <a id="p100267"></a>9.1. Вода



##### <a id="p100268"></a>9.1.1 Экстракция

<a id="p100269"></a>Пробу воды объемом 100 куб. см помещают в делительную воронку объемом 250 куб. см, прибавляют туда 10 г хлористого натрия. Пентиопирад экстрагируют тремя порциями хлористого метилена объемом по 30 куб. см, встряхивая каждый раз делительную воронку 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний слой (хлористый метилен) объединяют в концентраторе объемом 250 куб. см, собирая его через слой безводного сульфата натрия. Экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100270"></a>Сухой остаток растворяют в 5 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.


#### <a id="p100271"></a>9.2. Почва



##### <a id="p100272"></a>9.2.1 Экстракция

<a id="p100273"></a>Пробу почвы весом 20 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции и центрифугирования объемом 200 куб. см, прибавляют 10 куб. см дистиллированной воды, 50 куб. см ацетонитрила и помещают на 5 мин. в ультразвуковую ванну, а затем на 5 мин. на аппарат для встряхивания проб. Затем пробу центрифугируют в течение 4 мин. на скорости 4000 оборотов в минуту. Супернатант фильтруют через фильтр средней плотности в коническую колбу объемом 250 куб. см с 10 г сухого хлористого натрия. Экстракцию повторяют еще два раза, используя по 50 куб. см ацетонитрила и помещая каждый раз на 5 мин. в ультразвуковую ванну, а затем на 5 мин. на аппарат для встряхивания проб. Пробы центрифугируют, экстракты фильтруют и объединяют в конической колбе объемом 250 куб. см с 10 г сухого хлористого натрия, перемешивают и выдерживают при комнатной температуре 10 мин.
<a id="p100274"></a>Объединенный экстракт из колбы переносят в делительную воронку объемом 250 куб. см (не растворившуюся соль оставляют в колбе), оставляют до полного разделения слоев и нижний (водный) слой отбрасывают. Верхний ацетонитрильный слой собирают через слой безводного сульфата натрия в концентратор объемом 250 куб. см и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100275"></a>Далее проводят очистку экстракта на концентрирующих патронах N 1 и 2.

##### <a id="p100276"></a>9.2.2 Очистка экстракта на концентрирующих патронах N 2

<a id="p100277"></a>Сухой остаток, полученный по [п. 9.2.1](#p100272), растворяют в 2 куб. см ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют туда 8 куб. см гексана, перемешивают и вносят на заранее подготовленный патрон. Элюат собирают в концентратор объемом 100 куб. см. Исходный концентратор обмывают 10 куб. см смеси гексана с ацетоном в соотношении 4:1 и вносят на патрон, элюат объединяют с предыдущим. Объединенный элюат упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.

##### <a id="p100278"></a>9.2.3 Очистка экстракта на концентрирующих патронах N 1

<a id="p100279"></a>Сухой остаток, полученный по [п. 9.2.2](#p100276), растворяют в 1 куб. см ацетонитрила, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 9 куб. см воды, перемешивают и вносят на патрон. Элюат отбрасывают. Исходный концентратор обмывают последовательно 10 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:4 и 10 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:2 и последовательно вносят на патрон, элюаты отбрасывают.
<a id="p100280"></a>Пентиопирад элюируют 10 куб. см смеси ацетонитрила с 0,1%-м водным раствором муравьиной кислоты в соотношении 60:35. Элюат собирают в концентратор объемом 100 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100281"></a>Сухой остаток растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.


#### <a id="p100282"></a>9.3. Яблоки



##### <a id="p100283"></a>9.3.1 Экстракция

<a id="p100284"></a>Образец измельченных яблок массой 20 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции объемом 250 куб. см, прибавляют туда 10 куб. см 0,1 н соляной кислоты, 50 куб. см ацетонитрила и помещают на 5 мин. на аппарат для встряхивания проб. Ацетонитрильный экстракт фильтруют в коническую колбу объемом 250 куб. см с 10 г сухого хлористого натрия. Экстракцию повторяют еще два раза, используя по 50 куб. см ацетонитрила и помещая каждый раз на 5 мин. на аппарат для встряхивания проб. Экстракты фильтруют и объединяют в конической колбе объемом 250 куб. см с 10 г сухого хлористого натрия, перемешивают и выдерживают при комнатной температуре 10 мин.
<a id="p100285"></a>Объединенный экстракт из колбы переносят в делительную воронку объемом 250 куб. см (нерастворившуюся соль оставляют в колбе), оставляют до полного разделения слоев и нижний (водный) слой отбрасывают. Верхний ацетонитрильный слой собирают через слой безводного сульфата натрия в концентратор объемом 250 куб. см и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100286"></a>Далее проводят очистку экстракта по [п. 9.2.2](#p100276). Очистка экстракта на концентрирующих патронах N 2 и по [п. 9.2.3](#p100278). Очистка экстракта на концентрирующих патронах N 1.
<a id="p100287"></a>После очистки элюат упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100288"></a>Сухой остаток растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.


#### <a id="p100289"></a>9.4. Яблочный сок



##### <a id="p100290"></a>9.4.1 Экстракция

<a id="p100291"></a>Образец яблочного сока массой 20 г помещают в делительную воронку объемом 250 куб. см, прибавляют туда 10 мл 0,1 н соляной кислоты, 20 куб. см насыщенного раствора хлористого натрия, 30 куб. см ацетонитрила и интенсивно встряхивают воронку 2 мин. После полного разделения фаз нижний (водный) слой переносят в плоскодонную колбу объемом 100 куб. см, а верхний ацетонитрильный экстракт собирают в концентратор объемом 250 куб. см через слой безводного сульфата натрия. Водный слой возвращают в делительную воронку и повторяют экстракцию еще два раза, используя каждый раз по 30 куб. см ацетонитрила и встряхивая делительную воронку по 2 мин. Ацетонитрильные экстракты собирают в концентратор объемом 250 куб. см, пропуская их через слой безводного сульфата натрия. Объединенный экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100292"></a>Далее проводят очистку экстракта по [п. 9.2.2](#p100276). Очистка экстракта на концентрирующих патронах N 2 и по [п. 9.2.3](#p100278). Очистка экстракта на концентрирующих патронах N 1.
<a id="p100293"></a>После очистки элюат упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100294"></a>Сухой остаток растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.


#### <a id="p100295"></a>9.5. Условия хроматографирования


<a id="p100296"></a>Хроматографическая система, включающая:
- <a id="p100297"></a>хроматограф жидкостный, снабженный термостатом для колонок с диапазоном температур от 15 до 80 °C, с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью не ниже 0,005 единиц адсорбции на шкалу;
- <a id="p100298"></a>компьютерное программное обеспечение, контролирующее работу всего прибора, обеспечивающее сбор и хранение всех хроматограмм в процессе проведения хроматографического анализа, обеспечивающее обработку результатов измерений, вывод и расчет хроматограмм и количественный анализ.
<a id="p100299"></a>Колонка хроматографическая стальная, длиной 250 мм, с внутренним диаметром 4,6 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами C18.
<a id="p100300"></a>Предколонка хроматографическая стальная, длиной 20,0 мм, внутренним диаметром 3,9 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами C8.
<a id="p100301"></a>Температура колонки: 30 °C.
<a id="p100302"></a>Подвижная фаза: ацетонитрил - 0,1%-й водный раствор муравьиной кислоты в соотношении 650:350.
<a id="p100303"></a>Длина волны: 240 нм.
<a id="p100304"></a>Время удерживания пентиопирада: 10,014 мин. +/- 3%.
<a id="p100305"></a>Объем вводимой пробы: 20 куб. мм.

<div align="center">

<a id="p100306"></a>Линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 2 - 20 нг.

</div>



### 10. <a id="p100307"></a>Обработка результатов


<div align="center">

<a id="p100308"></a>Содержание пентиопирада рассчитывают по формуле:

</div>


<a id="p100309"></a> $X = \frac{S_{\text{пр}}\text{х }A\text{х }V}{100\text{х }S_{\text{ст}}\text{х }m} \text{х Р},$ 

<a id="p100310"></a>где X - содержание пентиопирада в пробе, мг/кг или мг/куб. дм;
<a id="p100311"></a> $S_{\text{ст}}$ - высота (площадь) пика стандарта, мм;
<a id="p100312"></a> $S_{\text{пр}}$ - высота (площадь) пика образца, мм;
<a id="p100313"></a>A - концентрация стандартного раствора, мкг/куб. см;
<a id="p100314"></a>V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
<a id="p100315"></a>m - масса анализируемого образца, г (куб. см);
<a id="p100316"></a>P - содержание пентиопирада в аналитическом стандарте, %.


### 11. <a id="p100317"></a>Проверка приемлемости результатов параллельных определений


<a id="p100318"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

<div align="center">

<a id="p100319"></a> $\frac{2\text{х }|X_{1} - X_{2}|\text{х }100}{(X_{1} + X_{2})} \leq r,(1)$ 

</div>


<a id="p100320"></a>где $X_{1}$ , $X_{2}$ - результаты параллельных определений, мг/кг;
<a id="p100321"></a>r - значение предела повторяемости [(табл. 1)](#p100038), при этом $r = 2,8\sigma_{r}$ .
<a id="p100322"></a>При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


### 12. <a id="p100323"></a>Оформление результатов


<a id="p100324"></a>Результат анализа представляют в виде:

<div align="center">

<a id="p100325"></a> $(\overline{X} \pm \Delta)\text{мг}/\text{кг}$ при вероятности P = 0,95,

</div>


<a id="p100326"></a>где $\overline{X}$ - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;

<div align="center">

<a id="p100327"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг

</div>


<a id="p100328"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot \overline{X}}{100} ,$ 

<a id="p100329"></a>где $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100038)), %.
<a id="p100330"></a>В случае, если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100331"></a>"содержание вещества в пробе менее 0,01 мг/кг (или мг/куб. дм)" <*>.

<a id="p100332"></a>

---

<a id="p100333"></a><*> 0,01 мг/кг (или мг/куб. дм) - предел обнаружения.


### 13. <a id="p100334"></a>Контроль качества результатов измерений


<a id="p100335"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений, а также контроль стабильности градуировочной характеристики осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-2-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

#### <a id="p100336"></a>13.1 Контроль стабильности градуировочной характеристики.

<a id="p100337"></a>Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100338"></a>Контроль стабильности градуировочной характеристики для пентиопирада проводят при смене основного градуировочного раствора N 1 каждые 6 месяцев, при смене основных градуировочных растворов N 2, 3, 4, 5 и 6 - каждый месяц, а также в начале и по окончании каждой серии анализов.
<a id="p100339"></a>При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее трех образцов концентраций для градуировки, содержание пентиопирада в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,1 до 1,0 мкг/куб. см.
<a id="p100340"></a>Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:

<a id="p100341"></a> $A = \frac{(X - C)\text{х }100}{C} \leq 3,22,$ 

<a id="p100342"></a>где X - концентрация пентиопирада контрольного измерения, мкг/куб. см;
<a id="p100343"></a>С - известная концентрация градуировочного раствора пентиопирада в смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/куб. см;
<a id="p100344"></a>3,22 - погрешность градуировочной характеристики, %.
<a id="p100345"></a>Если величина расхождения (A) превышает 3,22%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов пентиопирада, предусмотренных МВИ. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики определяют ее заново согласно [п. 7.3](#p100233).
<a id="p100346"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.

<div align="center">

<a id="p100347"></a>Величина добавки $C_{\partial}$ должна удовлетворять условию:

</div>


<a id="p100348"></a> $C_{\partial} = \Delta_{\text{л},X} + \Delta_{\text{л},X'},$ 

<a id="p100349"></a>где $\pm \Delta_{\text{л},X}( \pm \Delta_{\text{л},X'})$ - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой, соответственно), мг/кг, при этом:

<a id="p100350"></a> $\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta,$ 

<a id="p100351"></a>где $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

<a id="p100352"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot \overline{X}}{100} ,$ 

<a id="p100353"></a>где $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100038)), %.

<div align="center">

<a id="p100354"></a>Результат контроля процедуры $K_{k}$ рассчитывают по формуле:

</div>


<a id="p100355"></a> $K_{k} = \overline{X}' - \overline{X} - C_{\partial},$ 

<a id="p100356"></a>где $\overline{X}'$ , $\overline{X}$ , $C_{\partial}$ - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100317)) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце и концентрация добавки, соответственно, мг/кг.

<div align="center">

<a id="p100357"></a>Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

</div>


<a id="p100358"></a> $K = \sqrt{\Delta_{\text{л},X'}^{2} + \Delta_{\text{л},X}^{2}} .$ 

<a id="p100359"></a>Проводят сопоставление результата контроля процедуры $(K_{k})$ с нормативом контроля (К).

<div align="center">

<a id="p100360"></a>Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

</div>


<a id="p100361"></a> $|K_{k}| \leq K,(2)$ 

<a id="p100362"></a>процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100363"></a>При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
<a id="p100364"></a>13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
<a id="p100365"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):

<a id="p100366"></a> $\frac{2\text{х }|X_{1} - X_{2}|\text{х }100}{(X_{1} + X_{2})} \leq R,(3)$ 

<a id="p100367"></a>где $X_{1}$ , $X_{2}$ - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
<a id="p100368"></a>R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100038)), %.





<a id="p100369"></a>Приложение

<a id="p100370"></a>**ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ ПЕНТИОПИРАДА ИЗ ВОДЫ, ПОЧВЫ, ЯБЛОК**
**И ЯБЛОЧНОГО СОКА (5 ПОВТОРНОСТЕЙ ДЛЯ КАЖДОЙ**

<div align="right">

**КОНЦЕНТРАЦИИ, P = 0,95)**

</div>



<table>
<colgroup><col width="13%"><col width="29%"><col width="36%"><col width="22%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100371"></a>Среда</td><td><a id="p100372"></a>Внесено пентиопирада, мг/кг (мг/куб. дм)</td><td><a id="p100373"></a>Обнаружено пентиопирада, мг/кг (мг/куб. дм)</td><td><a id="p100374"></a>Полнота определения, %</td></tr>
<tr><td rowspan="4"><a id="p100375"></a>Вода</td><td><a id="p100376"></a>0,005</td><td><a id="p100377"></a>0,00475 +/- 0,0001</td><td><a id="p100378"></a>95,0</td></tr>
<tr><td><a id="p100379"></a>0,01</td><td><a id="p100380"></a>0,00956 +/- 0,0003</td><td><a id="p100381"></a>95,6</td></tr>
<tr><td><a id="p100382"></a>0,02</td><td><a id="p100383"></a>0,01928 +/- 0,0002</td><td><a id="p100384"></a>96,4</td></tr>
<tr><td><a id="p100385"></a>0,05</td><td><a id="p100386"></a>0,0485 +/- 0,0003</td><td><a id="p100387"></a>96,9</td></tr>
<tr><td rowspan="4"><a id="p100388"></a>Почва</td><td><a id="p100389"></a>0,01</td><td><a id="p100390"></a>0,0083 +/- 0,0002</td><td><a id="p100391"></a>82,6</td></tr>
<tr><td><a id="p100392"></a>0,02</td><td><a id="p100393"></a>0,0165 +/- 0,0006</td><td><a id="p100394"></a>82,6</td></tr>
<tr><td><a id="p100395"></a>0,05</td><td><a id="p100396"></a>0,0431 +/- 0,0018</td><td><a id="p100397"></a>86,2</td></tr>
<tr><td><a id="p100398"></a>0,10</td><td><a id="p100399"></a>0,0875 +/- 0,0033</td><td><a id="p100400"></a>87,5</td></tr>
<tr><td rowspan="4"><a id="p100401"></a>Яблоки</td><td><a id="p100402"></a>0,01</td><td><a id="p100403"></a>0,0088 +/- 0,0002</td><td><a id="p100404"></a>88,4</td></tr>
<tr><td><a id="p100405"></a>0, 02</td><td><a id="p100406"></a>0,0180 +/- 0,0005</td><td><a id="p100407"></a>89,8</td></tr>
<tr><td><a id="p100408"></a>0,05</td><td><a id="p100409"></a>0,0452 +/- 0,0009</td><td><a id="p100410"></a>90,4</td></tr>
<tr><td><a id="p100411"></a>0,10</td><td><a id="p100412"></a>0,0887 +/- 0,0020</td><td><a id="p100413"></a>88,7</td></tr>
<tr><td rowspan="4"><a id="p100414"></a>Яблочный сок</td><td><a id="p100415"></a>0,01</td><td><a id="p100416"></a>0,0093 +/- 0,0002</td><td><a id="p100417"></a>92,8</td></tr>
<tr><td><a id="p100418"></a>0,02</td><td><a id="p100419"></a>0,0178 +/- 0,0007</td><td><a id="p100420"></a>89,2</td></tr>
<tr><td><a id="p100421"></a>0,05</td><td><a id="p100422"></a>0,0458 +/- 0,0020</td><td><a id="p100423"></a>91,6</td></tr>
<tr><td><a id="p100424"></a>0,10</td><td><a id="p100425"></a>0,0918 +/- 0,0030</td><td><a id="p100426"></a>91,8</td></tr>
</table>




<a id="p100427"></a>

---