---
title: "\"МУК 4.1.3056-13. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение массовых концентраций винилхлорида и 1,2-дихлорэтана в пробах крови методом газохроматографического анализа равновесного пара. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.3056-13"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-3056-13"
---
## "МУК 4.1.3056-13. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение массовых концентраций винилхлорида и 1,2-дихлорэтана в пробах крови методом газохроматографического анализа равновесного пара. Методические указания"
# "МУК 4.1.3056-13. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение массовых концентраций винилхлорида и 1,2-дихлорэтана в пробах крови методом газохроматографического анализа равновесного пара. Методические указания"
(утв. Роспотребнадзором 10.07.2013)
Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**
10 июля 2013 года
#### 4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
**ИЗМЕРЕНИЕ МАССОВЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ**
**ВИНИЛХЛОРИДА И 1,2-ДИХЛОРЭТАНА В ПРОБАХ КРОВИ МЕТОДОМ**
**ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОГО АНАЛИЗА РАВНОВЕСНОГО ПАРА**
**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.3056-13**
---
Свидетельство о метрологической аттестации методики N 224.0036/01.00258/2010 от 13.08.2010.
1. Назначение и область применения
Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода газохроматографического анализа равновесного пара для измерений массовых концентраций винилхлорида и 1,2-дихлорэтана в пробах крови в диапазоне от 0,07 до 5 мкг/куб. см для винилхлорида и в диапазоне от 0,05 до 2 мкг/куб. см для 1,2-дихлорэтана.
Методические указания предназначены для использования лечебными и научными учреждениями, работающими в области профпатологии и экологии человека.
Методические указания разработаны с целью обеспечения контроля содержания винилхлорида и 1,2-дихлорэтана в пробах крови у рабочих, трудящихся на производстве винилхлорида и поливинилхлорида.
Методические указания носят рекомендательный характер.
2. Характеристика веществ
Винилхлорид (хлорэтен)
$C_{2}H_{3}Cl$
Молекулярная масса 62,5
Винилхлорид - бесцветный газ со слегка сладковатым запахом. Температура кипения - 13,4 °C, температура плавления - 153,8 °C. Винилхлорид хорошо растворим в органических растворителях, мало растворим в воде, наркотик.
1,2-Дихлорэтан
$C_{2}H_{4}Cl_{2}$
Молекулярная масса 98,97
1,2-дихлорэтан - бесцветная жидкость. Температура кипения 83,5 °C, температура плавления - 35,3 °C, растворим в органических растворителях и мало растворим в воде. Является токсичным соединением.
3. Требования к показателям точности измерений
Методика измерений обеспечивает получение результатов измерений с погрешностью, не превышающей значений, приведенных в табл. 1.
Таблица 1
**ДИАПАЗОН ИЗМЕРЕНИЙ, ЗНАЧЕНИЯ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ПОВТОРЯЕМОСТИ,**
**ВНУТРИЛАБОРАТОРНОЙ ПРЕЦИЗИОННОСТИ, ПРАВИЛЬНОСТИ И ТОЧНОСТИ**
Диапазон Показатель Показатель Показатель Показатель
измерений, повторяемос- внутрилаборатор- правильности точности [<*>](#p100034)
мкг/куб. см ти (относи- ной прецизион- (границы относи- (границы
тельное ности (относи- тельной система- относительной
среднеквад- тельное средне- тической погрешности
ратическое квадратическое погрешности при при довери-
отклонение отклонение доверительной тельной
повторяемос- внутрилаборатор- вероятности вероятности
ти), $s_{r}$ , % ной прецизион- P = 0,95), P = 0,95),
ности, $sR_{\text{л}}$ , % $\pm d_{\text{с}}$ , % $\pm d_{\text{л}}$ , %
1 2 3 4 5
винилхлорид
от 0,07 10 12 9 25
до 0,5 вкл.
св. 0,5 6 11 8 23
до 1,0 вкл.
св. 1,0 4 7 6 15
до 5,0 вкл.
1,2-дихлорэтан
от 0,05 13 14 12 30
до 0,5 вкл.
св. 0,5 до 6 9 8 19
1,0 вкл.
св. 1,0 4 5 4 11
до 2,0 вкл.
<*> Соответствует расширенной неопределенности $U_{\text{отн}}$ (в относительных
единицах) при коэффициенте охвата k = 2.
Значения показателя точности используют:
- при оформлении результатов измерений, выдаваемых лабораторией;
- при оценке деятельности лаборатории на качество проведения измерений.
4. Метод измерений
Метод измерений массовых концентраций винилхлорида и 1,2-дихлорэтана основан на предварительном выделении определяемых компонентов из биологического материала путем термостатирования биопробы и последующего газохроматографического анализа парогазовой пробы.
Выполнение измерений массовых концентраций винилхлорида и 1,2-дихлорэтана проводят методом газожидкостной хроматографии с пламенно-ионизационным детектированием.
Определению не мешают хлороформ, четыреххлористый углерод.
5.
Средства измерений, реактивы, вспомогательные
7.
Требования к квалификации операторов
9.
Подготовка к выполнению измерений
**ПРИГОТОВЛЕНИЕ ГРАДУИРОВОЧНЫХ РАСТВОРОВ**
| Номер образца для градуировки | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
| Объем основного градуировочного раствора винилхлорида (с массовой концентрацией 217,6 мкг/куб. см), куб. мм | 3,2 | 23 | 50 | 100 | 230 |
| Массовая концентрация винилхлорида в образце для градуировки, мкг/куб. см | 0,07 | 0,50 | 1,09 | 2,18 | 5,00 |
| Объем основного градуировочного раствора 1,2-дихлорэтана (с массовой концентрацией 200,48 мкг/куб. см), куб. мм | 2,5 | 35 | 50 | 70 | 100 |
| Массовая концентрация 1,2-дихлорэтана в образце для градуировки, мкг/куб. см | 0,05 | 0,70 | 1,00 | 1,40 | 2,00 |
#### 9.4 Установление градуировочной характеристики
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость высоты хроматографического пика (мВ) от массовой концентрации компонента в крови (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной градуировки по 6 сериям измерений по 5 концентрациям вещества в каждой серии.
В два пенициллиновых флакона помещают по 1 куб. см градуировочного раствора, флаконы закрывают резиновой пробкой и герметизируют металлическим зажимом. Первый герметизированный флакон погружают в термостатируемую водяную баню при температуре 60 °C. По истечении 3 мин. отбирают нагретым в термостате при температуре 60 °C шприцем из флакона 2 куб. см парогазовой фазы и вводят ее в хроматографическую колонку через инжектор. Процедуру повторяют аналогично для каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях:
- температура термостата колонок - 90 °C;
- температура инжектора - 170 °C;
- температура детектора - 250 °C;
- расход газа-носителя (азота) - 30 куб. см/мин.;
- расход водорода - 30 куб. см/мин.;
- расход воздуха - 300 куб. см/мин.
На полученной хроматограмме с помощью программы проводят идентификацию определяемых компонентов по абсолютным временам удерживания и измеряют высоту пиков определяемых компонентов. По средним результатам параллельных определений серии образцов для градуировки строят градуировочную характеристику.
#### 9.5 Отбор проб
Отбор проб венозной крови в объеме не менее 5 куб. см производится в вакуумные пробирки для забора крови с голубой крышкой. Анализ крови можно проводить сразу или допускается ее хранение в морозильной камере не более 5 дней.
10. Выполнение измерений
В два пенициллиновых флакона помещают по 1 куб. см пробы крови, флаконы закрывают резиновой пробкой и герметизируют металлическим зажимом. Первый герметизированный флакон погружают в термостатируемую водяную баню при температуре 60 °C. По истечении 3 мин. отбирают нагретым в термостате при температуре 60 °C шприцем из флакона 2 куб. см парогазовой фазы, вводят ее в хроматографическую колонку через инжектор и записывают хроматограмму. Процедуру повторяют аналогично для второго образца (проводится два параллельных определения).
Анализ проводят в условиях в соответствии с [п. 9.4](#p100114). Компоненты идентифицируют по абсолютным временам удерживания.
Для количественного расчета хроматограмм применяют метод абсолютной градуировки.
11. Обработка и оформление результатов измерений
11.1. На хроматограмме с помощью программы рассчитывают высоту пика и по градуировочной характеристике определяют массовую концентрацию определяемого компонента в крови.
11.2. За результат измерений массовой концентрации определяемого компонента в пробе $(\overline{X})$ принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений $X_{1}$ и $X_{2}$ , полученных в условиях повторяемости:
$\overline{X} = \frac{X_{1} + X_{2}}{2} .$
Результаты измерений регистрируют в протоколе испытаний, который оформляют в соответствии с ГОСТ Р ИСО/МЭК 17025-2006.
Результаты измерений массовой концентрации определяемого компонента $\overline{X}$ , мкг/куб. см, представляют в виде:
$(\overline{X} \pm \Delta_{\text{л}})\text{либо}\overline{X} = U_{\text{л}},$
где:
$\overline{X}$ - результат измерений массовой концентрации определяемого компонента, полученный в соответствии с процедурами [раздела 12](#p100148);
$\Delta_{\text{л}}$ - абсолютная погрешность измерений массовой концентрации определяемого компонента, мкг/куб. см, вычисляемая по формуле:
$\Delta_{\text{л}} = 0,01 \cdot \delta_{\text{л}} \cdot \overline{X},$
где:
$\delta_{\text{л}}$ - относительная погрешность измерения массовой концентрации определяемого компонента, по [табл. 1](#p100023), %;
$U_{\text{л}}$ - расширенная неопределенность при k = 2, мкг/куб. см, вычисляемая по формуле:
$U_{\text{л}} = 0,01 \cdot U_{\text{отн}.} \cdot \overline{X},$
где:
$U_{\text{отн}.}$ - расширенная неопределенность (в относительных единицах) при k = 2 [(табл. 1)](#p100023), %.
Примечание. При необходимости (в соответствии с требованиями ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002, [разд. 5.2](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002#p100131)) для результата измерений указывается количество параллельных определений и способ установления результата измерений.
12. Внутренний контроль качества результатов измерений
Внутренний контроль качества (ВКК) результатов измерений - повторяемость, внутрилабораторная прецизионность, точность - осуществляют с целью получения оперативной информации о качестве измерений и принятия при необходимости оперативных мер по его повышению в соответствии с нормативным документом [МИ 2335-2003](https://bukva.ai/docs/mi-2335-2003) "ГСОЕИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа". Методика обеспечивает получение результатов измерений с нормативами, не превышающими значений, приведенных в табл. 3.
Таблица 3
**ДИАПАЗОН ИЗМЕРЕНИЙ, ЗНАЧЕНИЯ ПРЕДЕЛОВ ПОВТОРЯЕМОСТИ,**
**ВНУТРИЛАБОРАТОРНОЙ ПРЕЦИЗИОННОСТИ И КРИТИЧЕСКОГО ДИАПАЗОНА**
**ПРИ ДОВЕРИТЕЛЬНОЙ ВЕРОЯТНОСТИ P = 0,95**
Диапазон измерений, Предел Критический Предел
мкг/куб. см повторяемости диапазон внутрилабораторной
(относительное (относительное прецизионности
значение значение (относительное значение
допускаемого допускаемого допускаемого
расхождения расхождения расхождения для двух
для двух для четырех результатов измерений,
результатов результатов полученных в условиях
параллельных параллельных внутрилабораторной
определений), определений), прецизионности), $R_{\text{л}}$ , %
r, % $CR_{0,95}$ (4), %
винилхлорид
от 0,07 до 0,5 вкл. 28 36 33
св. 0,5 до 1,0 вкл. 17 22 30
св. 1,0 до 5,0 вкл. 11 15 19
1,2-дихлорэтан
от 0,05 до 0,5 вкл. 36 47 39
св. 0,5 до 1,0 вкл. 17 22 25
св. 1,0 до 2,0 вкл. 11 15 14
#### 12.1 Контроль стабильности градуировочной характеристики
Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят не реже одного раза в квартал или при смене партии реактивов. Средствами контроля являются вновь приготовленные образцы для градуировки (не менее 3 образцов из приведенных в [п. 9.3.2](#p100103)) с массовыми концентрациями определяемых компонентов, соответствующими нижней границе диапазона измерений, середине диапазона и верхней границе диапазона измерений.
Градуировочную характеристику считают стабильной в случае, если для каждого образца для градуировки полученное значение массовой концентрации градуировочного раствора отличается от аттестованного значения градуировочного раствора не более чем на 5%.
Если условие стабильности градуировочной характеристики не выполняется только для одного образца для градуировки, необходимо выполнить повторное измерение этого образца для исключения результата, содержащего грубую погрешность.
Если градуировочная характеристика нестабильна, выясняют причины и повторяют контроль с использованием других образцов, предусмотренных методикой. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики строят новый градуировочный график.
#### 12.2 Контроль повторяемости
Расхождение между результатами двух измерений, выполненных в соответствии с методикой одним оператором при измерении образцов одной и той же рабочей пробы, с использованием одних и тех же средств измерений и реактивов, в течение возможно минимального интервала времени, не должно превышать значение предела повторяемости r [(табл. 3)](#p100151).
Повторяемость результатов параллельных измерений признают удовлетворительной, если выполняется следующее условие:
$|X_{1} - X_{2}| \leq 0,01 \cdot r \cdot \frac{X_{1} + X_{2}}{2} ,$
где:
r - значение предела повторяемости;
$X_{1}\text{и }X_{2}$ - результаты двух параллельных определений.
Если условие не выполняется, эксперимент повторяют. При невыполнении условия необходимо дополнительно получить еще два результата параллельных определений. Если при этом расхождение $(X_{max} - X_{min})$ результатов четырех параллельных определений равно или меньше критического диапазона $CR_{0,95}$ , то в качестве окончательного результата принимают среднее арифметическое значение результатов четырех параллельных определений. Значение критического диапазона для четырех результатов параллельных определений рассчитано по формуле и приведено в [табл. 3](#p100151)
$CR_{0,95}(4) = Q(0,95;4) \cdot \sigma_{r},$
где:
$Q(0,95;4)$ - коэффициент, зависящий от числа результатов единичных определений, полученных в условиях повторяемости и доверительной вероятности 0,95: Q(0,95; 4) = 3,63;
$\sigma_{r}$ - среднеквадратическое отклонение повторяемости, % [(табл. 1)](#p100023).
Если расхождение $(X_{max} - X_{min})$ больше $CR_{0,95}$ , в качестве окончательного результата измерений может быть принята медиана четырех результатов параллельных определений. Кроме того, целесообразно выяснить причины появления неприемлемых результатов параллельных определений и устранить их.
#### 12.3 Контроль внутрилабораторной прецизионности
Расхождение между результатами измерений не должно превышать предела внутрилабораторной прецизионности $(R_{\text{л}})$ , выраженного в единицах измеряемых содержаний
$|\overline{X_{1}} - \overline{X_{2}}| \leq 0,01 \cdot R_{\text{л}} \cdot \overline{X},$
где:
$\overline{X_{1}},\overline{X_{2}}$ - результаты измерений массовой концентрации определяемого компонента, полученные в условиях внутрилабораторной прецизионности, мкг/куб. см;
$\overline{X}$ - среднее арифметическое значение результатов измерений, полученных в условиях внутрилабораторной прецизионности, мкг/куб. см;
$R_{\text{л}}$ - значение предела внутрилабораторной прецизионности, мкг/куб. см.
При невыполнении условия контрольную процедуру повторяют. При повторном невыполнении условия выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.
#### 12.4 Контроль точности с использованием образцов
для контроля (ОК)
В качестве ОК используют аттестованные смеси. Контроль погрешности осуществляют путем сравнения результата отдельно взятой контрольной процедуры $K_{\text{к}}$ с нормативом контроля K. Результат контрольной процедуры $K_{\text{к}}$ рассчитывают по формуле:
$K_{\text{к}} = \overline{X} - C,$
где:
$\overline{X}$ - массовая концентрация определяемого компонента в ОК - среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми удовлетворяет условию (2), мкг/куб. см;
C - аттестованное значение ОК (массовая концентрация определяемого компонента в аттестованной смеси), мкг/куб. см.
Норматив контроля K рассчитывают по формуле:
$K = \Delta_{\text{л}},$
где $\Delta_{\text{л}}$ - значение характеристики погрешности результатов измерений, соответствующее массовой концентрации определяемого компонента в аттестованной смеси, рассчитанное по формуле:
$\Delta_{\text{л}} = 0,01 \cdot \delta_{\text{л}} \cdot C.$
Результат контрольной процедуры признают удовлетворительным при выполнении условия:
$|K_{\text{к}}| \leq C.$
При невыполнении условия контрольную процедуру повторяют. При повторном невыполнении условия выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.
---