---
title: "\"МУК 4.1.3051-13. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств флуксапироксада в зеленой массе и клубнях картофеля, яблоках, яблочном соке, винограде и виноградном соке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.3051-13"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-3051-13"
---
## "МУК 4.1.3051-13. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств флуксапироксада в зеленой массе и клубнях картофеля, яблоках, яблочном соке, винограде и виноградном соке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"
# "МУК 4.1.3051-13. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств флуксапироксада в зеленой массе и клубнях картофеля, яблоках, яблочном соке, винограде и виноградном соке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"
(утв. Роспотребнадзором 05.07.2013)
> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**
5 июля 2013 года
#### 4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ФЛУКСАПИРОКСАДА**
**В ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ И КЛУБНЯХ КАРТОФЕЛЯ, ЯБЛОКАХ, ЯБЛОЧНОМ СОКЕ,**
**ВИНОГРАДЕ И ВИНОГРАДНОМ СОКЕ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ**
**ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**
**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.3051-13**
Дата введения:
$\frac{|C - C_{\text{к}}|}{C} \cdot 100 \leq \lambda_{\text{контр}.}$ ,
где C - аттестованное значение массовой концентрации флуксапироксада в градуировочном растворе;
$C_{\text{к}}$ - результат контрольного измерения массовой концентрации флуксапироксада в градуировочном растворе;
$\lambda_{\text{контр}.}$ - норматив контроля градуировочного коэффициента, % ( $\lambda_{\text{контр}.} = 10\%$ при P = 0,95).
### 7.6. Проверка хроматографического поведения флуксапироксада на патроне
В круглодонную колбу емкостью 10 куб. см отбирают 1 куб. см стандартного раствора флуксапироксада с концентрацией 1 мкг/куб. см. Отдувают растворитель током воздуха. Остаток растворяют в 1 куб. см гексана и переносят на подготовленный патрон. Колбу обмывают 1 куб. см гексана и смыв тоже переносят на патрон. Промывают патрон 6 куб. см смеси N 1, элюат отбрасывают. Затем элюируют флуксапироксад смесью N 2 со скоростью 1 - 2 капли в сек. Отбирают фракции по 2 куб. см, упаривают досуха, растворяют в 1 куб. см подвижной фазы (ацетонитрил - 0,005 М $H_{3}PO_{4}$ , 40:60) и анализируют по [п. 9.4](#p100143).
Фракции, содержащие флуксапироксад, объединяют и вновь анализируют.
Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с патрона и необходимый для очистки объем элюата.
Примечание: Проверку хроматографического поведения флуксапироксада следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии патронов и растворителей.
## 8. Отбор проб и хранение
Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (от 21.08.79 N 2051-79), а также отбор проб винограда производят в соответствии с [ГОСТ 25896-83](https://bukva.ai/docs/gost-25896-83) "Виноград свежий столовый. Технические условия". Пробы ягод винограда хранят до анализа в герметично закрытом двойном полиэтиленовом пакете в морозильной камере при температуре не выше -18 °C в течение 6 месяцев. Отбор проб яблок производят в соответствии с [ГОСТ 27572-87](https://bukva.ai/docs/gost-27572-87) "Яблоки свежие для промышленной переработки". Пробы виноградного и яблочного сока хранят до анализа в морозильной камере при температуре не выше -18 °C в течение месяца, в холодильнике при температуре 0 - 4 °C в стеклянной таре с притертой пробкой в течение недели.
Отбор проб картофеля производится в соответствии с [ГОСТ 26832-86](https://bukva.ai/docs/gost-26832-86) "Картофель свежий для переработки на продукты питания". Пробы клубней и ботвы картофеля для определения остатков в урожае хранят в морозильной камере при -18 °C.
## 9. Проведение определения
#### 9.1 Экстракция флуксапироксада из зеленой массы
и клубней картофеля, яблок и винограда
Навеску измельченной культуры (10 г - зеленая масса, 20 г - клубни картофеля, яблоки, виноград) помещают в коническую колбу вместимостью 100 куб. см, добавляют 40 куб. см смеси N 3 и колбу помещают в ультразвуковую ванну на 10 мин. Водно-ацетоновый экстракт декантируют в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см, пропуская через бумажный фильтр, к остатку в колбе добавляют 30 куб. см смеси N 3 и повторяют экстракцию. Объединенный экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе до водного остатка, доводят объем до 100 куб. см 20%-ым водным раствором хлорида натрия и переносят в делительную воронку вместимостью 250 куб. см, добавляют 30 куб. см хлористого метилена и интенсивно встряхивают 2 - 3 мин. После полного разделения фаз нижний органический слой отбирают, к водному добавляют 30 куб. см хлористого метилена и экстракцию повторяют. Объединенные органические фракции дважды промывают в делительной воронке 20 куб. см 0,0025 М раствора гидроксида натрия, пропускают через воронку, содержащую безводный сульфат натрия, собирают в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см и растворитель упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °C. Сухой остаток подвергают очистке на патроне по [п. 9.3](#p100141).
#### 9.2 Экстракция флуксапироксада из яблочного
и виноградного соков
Навеску 10 г сока помещают в стакан вместимостью 150 куб. см, доводят объем до 100 куб. см 20%-ым водным раствором хлорида натрия и переносят в делительную воронку вместимостью 250 куб. см, добавляют 30 куб. см хлористого метилена и интенсивно встряхивают 2 - 3 мин. После полного разделения фаз нижний органический слой отбирают, к водному добавляют 30 куб. см хлористого метилена и экстракцию повторяют. Объединенные органические фракции промывают в делительной воронке два раза по 20 куб. см 0,0025 М раствора гидроксида натрия, пропускают через воронку, содержащую безводный сульфат натрия, собирают в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см и растворитель упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °C. Сухой остаток подвергают очистке на патроне по п. 9.3.
#### 9.3 Очистка на патроне для твердофазной экстракции
Сухой остаток, полученный по [пп. 9.1](#p100137) или [9.2](#p100139), растворяют в 1 куб. см гексана, наносят на предварительно кондиционированный патрон, колбу ополаскивают 1 куб. см гексана и так же наносят на патрон. Патрон промывают 6 куб. см смеси N 1, элюат отбрасывают. Флуксапироксад элюируют 5 куб. см смеси N 2, элюат собирают, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе, остаток растворяют в 1 куб. см подвижной фазы и 10 куб. мм вводят в хроматограф.
#### 9.4 Условия хроматографирования
Ультраэффективный жидкостной хроматограф с быстросканирующим ультрафиолетовым детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки. Аналитическая колонка (2,1 x 100) мм, 1,7 мкм, заполненная сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18. Температура колонки (30 +/- 1) °C. Подвижная фаза: смесь ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 40:60. Скорость потока элюента: 0,2 куб. см/мин. Рабочая длина волны ультрафиолетового детектора 230 нм. Объем вводимой пробы 10 куб. мм.
## 10. Обработка результатов анализа
Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки. Содержание флуксапироксада в пробе (X, мг/кг) вычисляют по формуле:
$X = \frac{S_{x} \cdot K \cdot V}{P} \cdot \frac{100}{f}$ ,
где $S_{x}$ - площадь пика флуксапироксада на хроматограмме испытуемого образца, кв. мм (AU);
K - градуировочный коэффициент, найденный на стадии построения соответствующей градуировочной зависимости;
V - объем пробы, подготовленной для хроматографического анализа, куб. см;
P - навеска анализируемого образца, г;
f - полнота извлечения флуксапироксада, приведенная в табл. 2, %.
Таблица 2
**ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ ФЛУКСАПИРОКСАДА, СТАНДАРТНОЕ ОТКЛОНЕНИЕ,**
**ДОВЕРИТЕЛЬНЫЙ ИНТЕРВАЛ СРЕДНЕГО РЕЗУЛЬТАТА**
ДЛЯ n = 20, P = 0,95
| Анализируемый объект | Предел обнаружения, мг/кг (мг/куб. дм) | Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/куб. дм) | Полнота извлечения, % | Стандартное отклонение, S | Доверительный интервал среднего результата, +/- % |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| Зеленая масса | 0,01 | 0,01 - 0,1 | 91,0 | 0,89 | 0,45 |
| Клубни картофеля | 0,005 | 0,005 - 0,05 | 86,1 | 2,71 | 1,36 |
| Яблоки | 0,005 | 0,005 - 0,05 | 90,9 | 2,95 | 1,48 |
| Яблочный сок | 0,005 | 0,005 - 0,05 | 95,5 | 3,55 | 1,78 |
| Виноград | 0,005 | 0,005 - 0,05 | 96,2 | 2,97 | 1,49 |
| Виноградный сок | 0,005 | 0,005 - 0,05 | 94,4 | 3,32 | 1,66 |
Содержание остаточных количеств флуксапироксада в образце вычисляют как среднее из двух параллельных определений.
Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор флуксапироксада с концентрацией 1,0 мкг/куб. см, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.
## 11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений
За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предел повторяемости:
$\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq r,(1)$
где $X_{1}$ , $X_{2}$ - результаты параллельных определений, мг/кг;
r - значение предела повторяемости $(r = 2,8\sigma_{r})$ .
При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.
## 12. Оформление результатов
Результат анализа представляют в виде:
$(\overline{X} \pm \Delta)\text{мг}/\text{кг}$ при вероятности P = 0,95,
где $\overline{X}$ - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
$\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг;
$\Delta = \delta \cdot X100$ ,
где $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
В случае, если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
"содержание вещества в пробе "менее нижней границы определения" (например: менее 0,005 мг/кг <*>).
---
<*> 0,005 мг/кг - предел обнаружения флуксапироксада в клубнях картофеля.
## 13. Контроль качества результатов измерений
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-2-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.
Величина добавки $\text{С}_{\text{д}}$ должна удовлетворять условию:
$\text{С}_{\text{д}} = \Delta_{\text{л},X} + \Delta_{\text{л},X}\prime$ ,
где $\pm \Delta_{\text{л},X}( \pm \Delta_{\text{л},X}\prime)$ - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/кг; при этом:
$\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta$ ,
где $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг:
$\Delta = \delta \cdot X100$ ,
где $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
Результат контроля процедуры $K_{\text{к}}$ рассчитывают по формуле:
$K_{\text{к}} = \overline{X}\prime - \overline{X} - C_{\text{д}}$ ,
где $\overline{X}\prime$ , $\overline{X}$ , $C_{\text{д}}$ - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100164)) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки, соответственно, мг/кг.
Норматив контроля K рассчитывают по формуле:
$K = \sqrt{\Delta_{\text{л},X\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},X}^{2}}$ .
Проводят сопоставление результата контроля процедуры ( $K_{\text{к}}$ ) с нормативом контроля (K).
Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:
$|K_{\text{к}}| \leq K,(2)$
процедуру анализа признают удовлетворительной.
При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры к их устранению.
#### 13.3 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:
Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предел воспроизводимости (R):
$\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq R,(3)$
где $X_{1}$ , $X_{2}$ - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций), %.
---