МУК 4.1.3050-13. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств абамектина в зеленой массе, семенах и масле сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания
(утв. Роспотребнадзором 05.07.2013)
Примечание
Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 № 299).
Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
Г. Г. Онищенко
5 июля 2013 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ АБАМЕКТИНА В ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ, СЕМЕНАХ И МАСЛЕ СОИ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
с момента утверждения
1. Разработаны сотрудниками ГНУ Всероссийский НИИ защиты растений Россельхозакадемии.
2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 30 мая 2013 г. № 1).
3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 5 июля 2013 г.
Свидетельство о метрологической аттестации № 01.5.04.125/01.00043/2013.
Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации абамектина в зеленой массе, семенах и масле сои в диапазоне концентраций 0,005 — 0,05 мг/кг.
Методические указания носят рекомендательный характер.
Смесь 5-O-деметилавермектина A (авермектин B ) и 1a 1a 5-O-деметил-25-де(1-метилпропил)-25-(1-метилэтил)авермектина A
1a
(авермектин B ) в соотношении 4:1 (С.А.). 1b
Авермектин B C H O , мол. масса 873,1 1a 48 72 14
Авермектин B C H O , мол. масса 859,1 1b 47 70 14
Белый кристаллический порошок без запаха.
Температура плавления: 161,2 — 169,4 °С (с разложением). -3
Давление пара при 25 °С: < 3,7 х 10 мПа. Коэффициент распределения н-октанол-вода: K log P = 4,4 (pH 7,2,
ow
комнатная t °С).
Растворимость (в г/куб. дм при 20 °С): вода — 0,00121, гексан 0,11, метанол — 13, толуол — 23, октанол — 83, ацетон — 72, этилацетат — 160, дихлорметан — 470.
Вещество стабильно при нормальных условиях, не гидролизуется в водных растворах при pH 5 — 9.
В биологически активных почвах абамектин прочно связывается и затем быстро разлагается почвенными микроорганизмами.
Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность LD для крыс и мышей 10,0 и 13,6 мг/кг, острая дермальная
50
токсичность LD для кроликов > 2000 мг/кг. Абамектин слабо раздражает 50
слизистую оболочку глаз и не оказывает раздражающего действия на кожу кролика. LD для рыб 3 - 10 мкг/л (96 ч). Инсектицид нетоксичен для диких
50
животных, земляных червей и водорослей, токсичен для пчел при прямом контакте (LD 0,017 - 0,54 мкг/особь), но становится практически не
50
опасным для них через несколько часов после применения.
Область применения препарата. Абамектин — инсекто-акарицид широкого спектра действия, эффективно уничтожает членистоногих, включая клещей и насекомых, на хлопчатнике, сое, овощных и декоративных культурах, семечковых плодовых, картофеле и табаке в течение вегетационного периода.
Гигиенические нормативы для абамектина в России: ОДУ в воде водоемов — 0,001 мг/куб. дм, ОБУВ в воздухе рабочей зоны — 0,05 мг/куб. м, ОДК в почве — 0,01 мг/кг, МДУ в огурцах — 0,01 мг/кг; плодовых (семечковых), томатах, перцах, баклажанах, винограде — 0,003 мг/кг.
1. Погрешность измерений
При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1, для соответствующих диапазонов концентраций.
Объект Диапазон Показатель Показатель Показатель Показатель анализа определяемых повторяемости внутрилабо- воспроиз- точности <*> концентраций, (относительное раторной водимости, (границы мг/кг среднеквадра- прецизион- \sigma_{R} , % относительной тическое ности, погрешности), отклонение \sigma_{R\text{л}} , % ±\delta , % повторяемости) \sigma_{r} , %
Зеленая 0,005 — 0,05 8 9 13 25 масса
Семена 0,005 - 0,05 8 9 13 25 Масло 0,005 - 0,05 8 9 13 25
<*> Соответствует расширенной неопределенности U при коэффициенте отн. охвата k = 2.
ДЛЯ n = 20, P = 0,95
| Анализируемый объект, мг/кг | Предел обнаружения, мг/кг | Диапазон определяемых концентраций, мг/кг | Среднее значение полноты извлечения, % | Стандартное отклонение, S, % | Доверительный интервал среднего результата, +/- % |
|---|---|---|---|---|---|
| Зеленая масса | 0,005 | 0,005 — 0,05 | 84,4 | 4,66 | 2,33 |
| Семена | 0,005 | 0,005 — 0,05 | 87,5 | 3,85 | 1,93 |
| Масло | 0,005 | 0,005 — 0,05 | 86,1 | 7,76 | 3,88 |
2. Метод измерений
Методика основана на определении абамектина методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового детектора после его извлечения из образцов ацетонитрилом, очистке экстракта промывкой гексаном и последовательной очистке твердофазной экстракцией.
Идентификация абамектина проводится по времени удерживания, количественное определение — методом абсолютной калибровки.
Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования.
3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы
3.1. Средства измерений
Жидкостный хроматограф с быстросканирующим ультрафиолетовым детектором, снабженным дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки.
Весы аналитические с пределом взвешивания до 210 г и пределом допустимой погрешности 0,2 мг, ГОСТ 24104-2001.
Весы технические с пределом взвешивания до 400 г и допустимой погрешностью 0,1 г, ГОСТ 24104-2001.
Колбы мерные на 10, 100 и 1000 куб. см, ГОСТ 23932-90.
Микродозаторы одноканальные переменного объема от 200 до 1000 куб. мм и от 1 до 5 куб. см.
Цилиндры мерные на 50 и 100 куб. см, ГОСТ 23932-90.
Примечание: Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.
3.2. Реактивы
Абамектин, аналитический стандарт с содержанием основного компонента 95,0%.
Ацетонитрил, химически чистый, ТУ 6-09-3534-87.
Вода для лабораторного анализа (бидистиллированная, деионизованная), ГОСТ Р 52501-2005.
н-Гексан, химически чистый, ТУ 6-09-3375-78.
Кислота ортофосфорная, химически чистая, ГОСТ 6552-80.
Кислота уксусная, ледяная, ГОСТ 61-69.
Магний сернокислый безводный, химически чистый, ГОСТ 4523-67.
Метанол, химически чистый, ГОСТ 6995-77.
Натрий уксуснокислый, чистый, ГОСТ 199-68.
Натрий сернокислый безводный, химически чистый, ГОСТ 4166-76.
Подвижная фаза для ВЭЖХ: смесь ацетонитрила и 0,005 М H PO в 3 4
соотношении 58:42.
Смесь № 1: ацетонитрил — вода в соотношении 1:1 по объему.
Смесь № 2: метанол — ацетонитрил в соотношении 1:4 по объему.
Смесь № 3: гексан — этилацетат в соотношении 4:1 по объему.
Смесь № 4: этилацетат — метанол в соотношении 9:1 по объему.
Этилацетат, химически чистый, ГОСТ 1138-84.
Примечание: Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.
3.3. Вспомогательные устройства и материалы
Аналитическая колонка, заполненная сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами С18 (100 х 2,1) мм, 1,7 мкм.
Аппарат для встряхивания проб, ТУ 64-1-1081-73
Воронки делительные вместимостью 250 куб. см, ГОСТ 25336-82.
Воронки химические конусные, ГОСТ 25336-82.
Колбы плоскодонные конические вместимостью 100 куб. см, ГОСТ 25336-82.
Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 10 и 100 куб. см, ГОСТ 9737-93.
Патроны концентрирующие для твердофазной экстракции, 0,4 г гидрофобного сорбента с привитыми гексадецильными группами (патрон № 1), ТУ 4215-002-05451931-94.
Патроны концентрирующие для твердофазной экстракции, 0,4 г слабоосновного анионообменника с привитыми аминогруппами (патрон № 2), ТУ 4215-002-05451931-94.
Пробирки полипропиленовые центрифужные с крышками объемом 50 куб. см.
Ротационный вакуумный испаритель с мембранным насосом, обеспечивающим вакуум до 10 мбар.
Ультразвуковая ванна с рабочей частотой 35 кГц.
Фильтры бумажные средней плотности, ТУ 6.091678-86.
Центрифуга с максимальной рабочей частотой вращения 4000 об./мин.
Примечание: Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.
4. Требования безопасности
4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-2009, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.
4.2. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией, соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313-03 и ГН 2.2.5.2308-07.
Организация обучения работников безопасности труда — по ГОСТ 12.0.004-90.
5. Требования к квалификации операторов
Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 13.
6. Условия измерений
При выполнении измерений выполняют следующие условия:
процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С и относительной влажности не более 80%;
выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
7. Подготовка к определению
7.1. Кондиционирование колонки
Перед началом анализа колонку кондиционируют в потоке подвижной фазы (0,1 — 0,2 куб. см/мин.) до стабилизации нулевой линии.
7.2. Приготовление растворов
7.2.1. 0,005 М раствор ортофосфорной кислоты: (0,5 +/- 0,01) г 98% ортофосфорной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1 куб. дм, растворяют в бидистиллированной воде и доводят объем до метки.
7.2.2. Для приготовления подвижной фазы смешивают ацетонитрил с 0,005 М раствором ортофосфорной кислоты в соотношении 58:42 по объему, используя мерные цилиндры.
7.3. Приготовление основного и градуировочных растворов
7.3.1. Основной раствор с концентрацией 0,5 мг/куб. см: точную навеску абамектина (50 +/- 0,5) мг помещают в мерную колбу вместимостью 100 куб. см, растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом.
Градуировочные растворы с концентрациями абамектина 0,04, 0,08, 0,2, 0,5, 1,0 мкг/куб. см готовят методом последовательного разбавления по объему, используя раствор подвижной фазы (смесь ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 58:42).
7.3.2. Раствор № 1 с концентрацией 1,0 мкг/куб. см: в мерную колбу вместимостью 100 куб. см вносят 0,2 куб. см основного раствора и доводят до метки подвижной фазой.
7.3.3. Раствор № 2 с концентрацией 0,5 мкг/куб. см: в мерную колбу вместимостью 10 куб. см помещают 5,0 куб. см раствора № 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
7.3.4. Раствор № 3 с концентрацией 0,2 мкг/куб. см: в мерную колбу вместимостью 10 куб. см помещают 2 куб. см раствора № 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
7.3.5. Раствор № 4 с концентрацией 0,08 мкг/куб. см: в мерную колбу вместимостью 10 куб. см помещают 0,8 куб. см раствора № 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
7.3.6. Раствор № 5 с концентрацией 0,04 мкг/куб. см: в мерную колбу вместимостью 10 куб. см помещают 0,4 куб. см раствора № 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
Основной раствор можно хранить в холодильнике при температуре 0 — 4 °С в течение 3 месяцев, градуировочные растворы — в течение недели.
При изучении полноты извлечения абамектина в зеленой массе, семенах и масле сои используют ацетонитрильные растворы вещества, приготовленные из основного раствора методом последовательного разбавления по объему ацетонитрилом.
7.4. Построение градуировочного графика
Для построения градуировочного графика (площадь пика — концентрация абамектина в растворе) в хроматограф вводят по 10 куб. мм градуировочных растворов (не менее 3 параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4 точек по диапазону измеряемых концентраций). Затем измеряют площади пиков и строят график зависимости среднего значения площади пика от концентрации абамектина в градуировочном растворе.
Методом наименьших квадратов рассчитывают градуировочный коэффициент (K) в уравнении линейной регрессии:
где S — площадь пика градуировочного раствора.
Градуировку признают удовлетворительной, если значение коэффициента линейной корреляции оказывается не ниже 0,99.
Градуировочную характеристику необходимо проверять при замене реактивов, хроматографической колонки или элементов хроматографической системы, а также при отрицательном результате контроля градуировочного коэффициента.
Градуировочную зависимость признают стабильной при выполнении следующего условия:
\frac{|C - C_{K}|}{C} \cdot 100 \leq \lambda_{\text{контр}.},
где: C — аттестованное значение массовой концентрации абамектина в градуировочном растворе; C — результат контрольного измерения массовой концентрации абамектина K в градуировочном растворе; \lambda_{\text{контр}.} — норматив контроля градуировочного коэффициента, % ( \lambda_{\text{контр}.} = 10% при P = 0,95).
7.5. Подготовка патронов № 1 и № 2 для очистки экстрактов
7.5.1 Подготовка патрона для твердофазной экстракции № 1
Патрон № 1 с привитыми гексадецильными группами промывают последовательно 2 куб. см смеси № 2 и 3 куб. см смеси № 1, после чего патрон готов к работе.
7.5.2 Подготовка патрона для твердофазной экстракции № 2
Патрон № 2 с привитыми аминогруппами промывают последовательно 2 куб. см смеси № 4 и 3 куб. см смеси № 3, после чего патрон готов к работе.
7.6. Проверка хроматографического поведения абамектина на патронах № 1 и № 2
7.6.1 Проверка хроматографического поведения абамектина на патроне
N 1. В круглодонную колбу емкостью 10 куб. см отбирают 1 куб. см стандартного раствора абамектина с концентрацией 1 мкг/куб. см. Отдувают растворитель током воздуха. Остаток растворяют в 2 куб. см смеси N 1 и переносят на подготовленный патрон. Колбу обмывают 2 куб. см смеси N 1 и смыв тоже переносят на патрон. Промывают патрон 5 куб. см смеси N 1, элюат
отбрасывают. Затем элюируют абамектин смесью № 2 со скоростью 1 — 2 капли в
сек. Отбирают фракции по 2 куб. см, упаривают досуха, растворяют в 1 куб.
*см* подвижной фазы (ацетонитрил - 0,005 М H PO , 58:42) и анализируют по
3 4
Фракции, содержащие абамектин, объединяют и вновь анализируют.
Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с патрона и необходимый для очистки объем элюата.
7.6.2 Проверка хроматографического поведения абамектина на патроне
N 2. В круглодонную колбу емкостью 10 куб. см отбирают 1 куб. см стандартного раствора абамектина с концентрацией 1 мкг/куб. см. Отдувают растворитель током воздуха. Остаток растворяют в 1 куб. см смеси N 3 и переносят на подготовленный патрон. Колбу обмывают 1 куб. см смеси N 3 и смыв тоже переносят на патрон. Промывают патрон 8 куб. см смеси N 3, элюат
отбрасывают. Затем элюируют абамектин смесью № 4 со скоростью 1 — 2 капли в
сек. Отбирают фракции по 2 куб. см, упаривают досуха, растворяют в 1 куб.
*см* подвижной фазы (ацетонитрил - 0,005 М H PO , 58:42) и анализируют по
3 4
Фракции, содержащие абамектин, объединяют и вновь анализируют.
Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с патрона и необходимый для очистки объем элюата.
Примечание: Проверку хроматографического поведения абамектина следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии патронов и растворителей.
8. Отбор проб и хранение
Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» (N 2051-79 от 21.08.79), а также в соответствии с ГОСТ 10852-86 «Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб».
Для длительного хранения зерно сои подсушивают при комнатной температуре в отсутствие света. Сухие образцы могут храниться в течение года. Перед анализом пробы зерна доводят до стандартной влажности и измельчают. Пробы масла хранят в холодильнике при 0 — 4 °С в закрытой стеклянной таре не более 2 месяцев.
9. Проведение определения
9.1. Экстракция абамектина
9.1.1 Экстракция абамектина из семян сои
Навеску измельченных семян (20 г) помещают в полипропиленовую центрифужную пробирку вместимостью 50 куб. см и последовательно добавляют 20 куб. см ацетонитрила, 4 г магния сернокислого, 1 г натрия уксуснокислого и 0,1 куб. см ледяной уксусной кислоты. Пробирку плотно закрывают, встряхивают на аппарате для встряхивания в течение 10 мин. и центрифугируют при скорости 4000 об./мин. в течение 10 мин. Верхний ацетонитрильный слой декантируют, фильтруют через бумажный фильтр. К остатку в пробирке добавляют 15 куб. см ацетонитрила и проводят повторную экстракцию. Объединенные ацетонитрильные экстракты очищают по п. 9.2.
9.1.2 Экстракция абамектина из масла сои
Навеску масла (20 г) помещают в плоскодонную коническую колбу вместимостью 100 куб. см, добавляют 20 куб. см ацетонитрила и колбу помещают в ультразвуковую ванну на 10 мин. Затем ацетонитрильный слой осторожно декантируют, к остатку добавляют 15 куб. см ацетонитрила и экстракцию повторяют. Объединенные ацетонитрильные экстракты очищают по п. 9.2.
9.1.3 Экстракция абамектина из зеленой массы сои
Навеску измельченной зеленой массы (10 г) помещают в плоскодонную коническую колбу вместимостью 100 куб. см, добавляют 50 куб. см ацетонитрила и колбу помещают в ультразвуковую ванну на 10 мин. Затем ацетонитрильный слой осторожно декантируют, пропускают через слой сернокислого натрия, к остатку в колбе добавляют 30 куб. см ацетонитрила и экстракцию повторяют. Объединенные ацетонитрильные экстракты очищают по п. 9.2.
9.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей
К ацетонитрильному экстракту, полученному по п. 9.1 и помещенному в делительную воронку на 250 куб. см, добавляют 15 куб. см гексана и интенсивно встряхивают в течение 2 — 3 мин. После полного разделения слоев верхний гексановый слой отбрасывают. Ацетонитрильный экстракт возвращают в делительную воронку и повторяют операцию очистки с новой порцией гексана объемом 15 куб. см.
Затем ацетонитрильный экстракт переносят в колбу для упаривания на 100 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °С. Дальнейшую очистку сухого остатка проводят последовательно на патронах № 1 и № 2 по п. 9.3.1 и п. 9.3.2 соответственно.
9.3. Очистка экстракта на концентрирующих патронах для твердофазной экстракции
9.3.1 Очистка на патроне № 1
Остаток в колбе, полученный при упаривании экстрактов п. 9.2, растворяют в 2 куб. см смеси № 1 (ацетонитрил-вода, 1:1) и переносят на подготовленный патрон. Колбу обмывают еще 2 куб. см смеси № 1 и смыв тоже переносят на патрон. Промывают патрон 5 куб. см той же смеси № 1, элюат отбрасывают. Абамектин элюируют 5 куб. см смеси № 2 (метанол-ацетонитрил, 1:4). Элюат количественно переносят в круглодонную колбу вместимостью 10 куб. см и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °С. Дальнейшую очистку сухого остатка проводят на патроне № 2 по п. 9.3.2.
9.3.2 Очистка на патроне № 2
Остаток в колбе, полученный по п. 9.3.1, растворяют в 1 куб. см смеси № 3 (гексан-этилацетат, 4:1) и переносят на подготовленный патрон. Колбу обмывают еще 1 куб. см смеси № 3 и смыв тоже переносят на патрон. Промывают патрон 8 куб. см той же смеси № 3, элюат отбрасывают. Абамектин элюируют 3 куб. см смеси № 4 (этилацетат-метанол, 9:1). Элюат количественно переносят в круглодонную колбу вместимостью 10 куб. см и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °С. Сухой остаток растворяют в 1 куб. см подвижной фазы (смесь ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 58:42) и анализируют на содержание абамектина по п. 9.4.
9.4. Условия хроматографирования
Ультраэффективный жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки. Аналитическая колонка, заполненная сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами С18 (100 х 2,1) мм, 1,7 мкм. Температура колонки (30 +/- 1) °С. Подвижная фаза: смесь ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 58:42. Скорость потока элюента 0,2 куб. см/мин. Рабочая длина волны ультрафиолетового детектора 245 нм. Объем дозируемой в хроматограф пробы 10 куб. мм.
10. Обработка результатов анализа
Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки. Содержание абамектина в пробе (X, мг/кг) вычисляют по формуле:
S · K · V
x 100
где:
S - площадь пика абамектина на хроматограмме испытуемого образца, кв.
x
мм (AU); K — градуировочный коэффициент, найденный на стадии построения соответствующей градуировочной зависимости; V — объем пробы, подготовленной для хроматографического анализа, куб. см; P — навеска анализируемого образца, г; f — полнота извлечения абамектина, приведенная в табл. 2, %.
Содержание остаточных количеств абамектина в образце вычисляют как среднее из двух параллельных определений.
Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор абамектина с концентрацией 1,0 мкг/куб. см, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.
11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений
За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):
2 · |X - X | · 100
1 2
------------------- <= r, (1)
(X + X )
1 2
где:
X , X - результаты параллельных определений, мг/кг;
1 2
r — значение предела повторяемости (r = 2,8\sigma_{r}) .
При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.
12. Оформление результатов
Результат анализа представляют в виде:
(\overline{X} \pm \Delta)\text{мг}/\text{кг при вероятности }P = 0,95,
где: \overline{X} — среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг; \Delta — граница абсолютной погрешности, мг/кг:
\delta — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
В случае, если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
«содержание вещества в пробе „менее нижней границы определения“ (например: менее 0,005 мг/кг <>, где <> — 0,005 мг/кг — предел обнаружения абамектина в сое).»
13. Контроль качества результатов измерений
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».
13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.
Величина добавки C должна удовлетворять условию: д
C_{\text{д}} = \Delta_{\text{л},X} + \Delta_{\text{л},X\prime},
где ±\Delta_{\text{л},X} (±\Delta_{\text{л},X\prime}) — характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/кг; при этом:
\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta,
где \Delta — граница абсолютной погрешности, мг/кг:
\delta — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
Результат контроля процедуры K рассчитывают по формуле: к
K = X' - X - C , к д где X', X, C - среднее арифметическое результатов параллельных
д
определений (признанных приемлемыми по п. 11) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки соответственно, мг/кг.
Норматив контроля K рассчитывают по формуле:
K = \sqrt{\Delta_{\text{л},X\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},X}^{2}} .
Проводят сопоставление результата контроля процедуры (K ) с нормативом к контроля (K).
Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:
процедуру анализа признают удовлетворительной.
При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры к их устранению.
13.3 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:
Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):
2 · |X - X | · 100
1 2
------------------- <= R, (3)
(X + X )
1 2
где:
X , X - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
1 2
R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном
концентраций), %.