--- title: "\"МУК 4.1.3040-12 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение массовой концентрации бенз(а)пирена в крови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\"" number: "МУК 4.1.3040-12" status: действует canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-3040-12" --- ## "МУК 4.1.3040-12 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение массовой концентрации бенз(а)пирена в крови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания" # "МУК 4.1.3040-12 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение массовой концентрации бенз(а)пирена в крови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания" (утв. Роспотребнадзором 07.09.2012) > [!IMPORTANT] > Документ [введен](#p100008) в действие с 7 сентября 2012 года.
Утверждаю
Руководитель Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека,
Главный государственный санитарный
врач Российской Федерации
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**
7 сентября 2012 г.
Дата введения: с момента утверждения #### 4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ **ИЗМЕРЕНИЕ МАССОВОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ БЕНЗ(А)ПИРЕНА В КРОВИ** **МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ** **МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ** **МУК 4.1.3040-12** 1. Разработаны Федеральным бюджетным учреждением науки Федеральный научный центр медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения" Роспотребнадзора (Т.С.Уланова, Н.В.Зайцева, Е.В.Стенно, Г.А.Вейхман, М.А.Баканина, Ю.В.Шардакова, Т.Д.Карнажицкая, А.В.Кислицина). 2. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 7 сентября 2012 г. 3. Введены в действие с момента утверждения. 4. Введены впервые. ### 1. Область применения и общие положения Свидетельство об аттестации от 30.11.2010 N 223.1.0332/01.00258/2010. 1.1. Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации бенз(а)пирена в крови в диапазоне 0,02-2,00 мкг/дм3. 1.2. Методические указания предназначены для использования органами и организациями Роспотребнадзора, а также иными организациями, деятельность которых связана с вопросами гигиены окружающей среды. #### 1.3 Бенз(а)пирен ![1. Область применения и общие положения](https://i.bukva.ai/AhyFPTlE/img_0.png) Молекулярная масса - 252,32. Бенз(а)пирен (3,4-бензпирен) - светло-желтые кристаллы, температура плавления 175-180,5 °С, температура кипения 456 °С, плотность 1,351-1,282 г/см3. Растворим в ацетонитриле, этаноле, метаноле, гексане, метиленхлориде и других органических растворителях [[1]](#p100155). Растворимость бенз(а)пирена в пресной воде 0,11 мкг/дм3, в соленой воде - 0,13 мкг/дм3 [[2]](#p100156). Присутствует в атмосферном воздухе, природной воде, растениях, копченых продуктах как загрязнитель. Краткая токсикологическая характеристика Бенз(а)пирен - вещество 1-го класса опасности. Обладает мутагенным, канцерогенным, эмбриотоксическим и тератогенным эффектами [[3]](#p100157). ### 2. Погрешность измерений Погрешность измерений, соответствует характеристикам, приведенным в табл. 1. Таблица 1
Диапазон измерений, значения показателей точности,
повторяемости, внутрилабораторной прецизионности,
воспроизводимости
Диапазон измерений, мкг/дм3Показатели прецизионности (относительные значения), %Показатель точности (границы
стандартное отклонение повторяемости, сигма rстандартное отклонение внутрилабораторной прецизионности, сигма Rлстандартное отклонение воспроизводимости, сигма Rотносительной погрешности при Р = 0,95), +/- дельта <*>, %
от 0,02 до 2,00 вкл.591224
<*> Соответствует расширенной относительной неопределенности при коэффициенте охвата k = 2.
### 3. Метод измерений Измерение концентрации бенз(а)пирена в крови основан на экстракции бенз(а)пирена из биопробы ацетонитрилом в присутствии высаливателей, очистке экстракта на сорбенте $C_{18}$ и анализе очищенного экстракта на жидкостном хроматографе с использованием флуориметрического детектора. Определению не мешают ароматические углеводороды, фенол, стирол, полиядерные ароматические углеводороды. Диапазон измерений массовой концентрации бенз(а)пирена в крови - 0,02-2,00 мкг/дм3. Средняя полнота извлечения свободного бенз(а)пирена из крови составляет 62%. ### 4. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы #### 4.1. Средства измерений Жидкостный хроматограф, оснащенный термостатом колонок, градиентным насосом, Номер в Государственном устройством для дегазации элюента, реестре средств измерений флуориметрическим детектором 16193-06 Весы лабораторные ВЛР-200 аналитические ГОСТ Р 53228-2008 Гири Г2-210 ГОСТ 7328-2001 Колбы мерные вместимостью 25, 100 см3 [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) Цилиндры лабораторные вместимостью 1 дм3 [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) Пипетки градуированные вместимостью 1, 5 см3 [ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) Микрошприцы МШ-10 ТУ 2.833.106-2000 или дозаторы жидкости механические с погрешностью +/- 0,1 мм3; 0,005-0,05 см3; 0,1-1,0 см3; 1,0-5,0 см3 со сменными одноразовыми наконечниками, модель
**BIOHIT PROLINE**
*Примечание.* Допускается использование средств измерения иных производителей с аналогичными или лучшими характеристиками. #### 4.2. Реактивы Стандартный образец состава раствора бенз(а)пирена в ацетонитриле (аттестованное значение 100 мкг/см3), ГСО 7515 Ацетонитрил для жидкостной хроматографии, осч ТУ 6-09-14-2167-84 Вода дистиллированная ГОСТ 6709-72 Экстракционные наборы VetexQ, содержащие смесь для экстракции (состав: магния сульфат, натрия хлорид, натрия цитрат, динатриевая соль лимонной кислоты) и смесь для очистки экстракта (состав: магния сульфат, сорбент С18) (InterLab кат. N IL-5056) Кислота серная, осч [ГОСТ 14262-78](https://bukva.ai/docs/standart-gost-14262-78)
Калий двухромовокислый, чда ГОСТ 4220-75
Раствор гепарина в ампулах (5000 ед. в 1 см3) ФС 42-1327-99 *Примечание.* Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией. #### 4.3. Вспомогательные устройства, материалы Колонка металлическая Zorbax Eclipse XDB С18 4,6 x 150 мм зернением 5 микрон Предколонка Zorbax Eclipse XDB С18 с зернением 5 микрон 4,6 х 12,5 мм Центрифуга ЦЛМН-Р10-01-"Элекон" ТУ 9443-001-245.23530-97 Сушильный шкаф ШСС-80 ТУ 16.531.743-83 Устройство очистки воды "MilliPore" Стакан термостойкий вместимостью 2 дм3 ГОСТ 25336-82 Пробирки типа Falcon полипропиленовые (РР) вместимостью 15 см3 конические с градуировкой с завинчивающейся крышкой Вакуумные пробирки для забора крови с литий-гепарином вместимостью 6 см3 Шприц медицинский одноразовый типа "Луер" вместимостью 1 см3 [ГОСТ Р ИСО 7886-1-2009](https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-iso-7886-1-2009) Фильтры капроновые с диаметром пор
не более 5 мкм
Стеклянные виалы объемом 1,5 см3 с крышкой *Примечание.* Допускается применение оборудования и материалов иных производителей с аналогичными или лучшими техническими характеристиками. ### 5. Требования безопасности и охраны окружающей среды 5.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности по ГОСТ 12.1.007-76 и 12.1.005-88. 5.2. При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают меры безопасности, указанные в руководстве по правилам эксплуатации прибора, правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-2009, противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и имеют средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83, обучение и инструктаж по безопасности труда проводится в соответствии с ГОСТ 12.0.004-90. #### 5.3 Помещение должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией. 5.4. При работе с биологическими средами необходимо соблюдать правила в соответствии с требованиями СП 1.3.2322-08 "Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней". 5.5. При выполнении измерений на приборе соблюдают правила, указанные в руководстве по правилам эксплуатации жидкостного хроматографа. ### 6. Требования к квалификации операторов К выполнению измерений допускаются лица, имеющие квалификацию не ниже инженера-химика с опытом работы на жидкостном хроматографе, освоившие метод анализа и получившие удовлетворительные результаты оперативного контроля процедуры выполнения измерений. ### 7. Условия измерений #### 7.1 Подготовку и проведение измерений проводят при следующих условиях: - температура воздуха $(20 \pm 5)$ °С, влажность не более 80%;
- атмосферное давление (630-800) мм рт. ст.
7.2. Выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендуемых технической документацией прибора. ### 8. Подготовка к выполнению измерений Перед выполнением измерений проводят следующие работы: подготовка посуды, приготовление растворов, подготовка хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики. #### 8.1. Подготовка посуды Используемую стеклянную посуду замачивают на 1 ч. в хромовой смеси, промывают проточной водопроводной водой, ополаскивают дистиллированной водой, высушивают в сушильном шкафу при температуре 105 °С, ополаскивают ацетонитрилом. #### 8.2. Приготовление растворов 8.2.1. Элюент для хроматографии. Смесь ацетонитрила с дистиллированной водой в соотношении 60:40% (объемная доля). Состав элюента задают на двух каналах насоса. 8.2.2. Хромовая смесь. В термостойкий стакан вместимостью 2 дм3 насыпают 50 г калия двухромовокислого, осторожно приливают по палочке частями, тщательно перемешивая, 1 дм3 концентрированной серной кислоты. 8.2.3. Исходный раствор бенз(а)пирена N 1, концентрации 1 мкг/см3. В мерную колбу вместимостью 100 см3 вносят 1,0 см3 ГСО с массовой концентрацией бенз(а)пирена 100 мкг/см3 и доводят ацетонитрилом до метки. Срок хранения раствора 60 дней при хранении в темном месте при температуре 4-6 °С. 8.2.4. Раствор бенз{а)пирена N 2, концентрация 0,005 мкг/см3. В мерную колбу вместимостью 100 см3 вносят 0,5 см3 раствора бенз(а)пирена N 1 и доводят ацетонитрилом до метки. Используют свежеприготовленный раствор. 8.2.5. Раствор для идентификации бенз(а)пирена, концентрация 0,0005 мкг/см3. В мерную колбу вместимостью 25 см3 вносят 2,5 см3 раствора бенз(а)пирена N 2 и доводят содержимое колбы ацетонитрилом до метки. Используют свежеприготовленный раствор. #### 8.3. Подготовка хроматографической колонки 8.3.1. Колонку устанавливают в хроматограф и подают элюент со скоростью 1,5 см3/мин. до установления равновесия колонки, которое определяют по стабильности нулевой линии детектора. 8.3.2. Проводят холостую разгонку с установлением ступеней градиента: от 0 до 2,5 мин. - 60% ацетонитрила, от 2,5 до 12 мин. - повышение до 90% ацетонитрила, от 12 до 20 мин. - повышение до 100% ацетонитрила, от 20 до 22,5 мин. - 100% ацетонитрила, от 22,5 до 23 мин. - снижение до 60% ацетонитрила, от 23 до 28 мин. - 60% ацетонитрила. #### 8.4. Установление градуировочной характеристики 8.4.1. Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика на хроматограмме (единицы оптической плотности, е.о.п.) от массовой концентрации бенз(а)пирена (мкг/дм3), устанавливают на градуировочных растворах бенз(а)пирена в ацетонитриле методом абсолютной градуировки. Градуировочную характеристику устанавливают по результатам измерений 6 серий по 5 концентрациям вещества в каждой серии. 8.4.2. Градуировочные растворы готовят в мерных колбах вместимостью 25 см3. В каждую пробирку вносят растворы бенз(а)пирена для градуировки N 1 и 2 в соответствии с табл. 2, доводят до метки ацетонитрилом и перемешивают. Таблица 2 Градуировочные растворы бенз(а)пирена в ацетонитриле | Номер раствора | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | | --- | --- | --- | --- | --- | --- | | Объем раствора N 1 (С = 1 мкг/см3), мм3 | - | - | - | 15 | 30 | | Объем раствора N 2 (С = 0,005 мкг/см3), мм3 | 60 | 122 | 500 | - | - | | Массовая концентрация бенз(а)пирена в ацетонитриле, мкг/дм3 | 0,012 | 0,024 | 0,10 | 0,6 | 1,2 | | Массовая концентрация бенз(а)пирена в крови (с учетом степени экстракции), мкг/дм3 | 0,02 | 0,04 | 0,166 | 1,0 | 2,0 | 8.4.3. Полученные растворы фильтруют через капроновый фильтр, используя медицинский шприц "Луер", в стеклянную виалу и анализируют 20 мм3 на жидкостном хроматографе в условиях;
- колонка 4,6 x 150 мм, заполненная сорбентом Zorbax Eclipse XDB $C_{18}$ ;
- градиент: 2,5 мин. подача подвижной фазы (60% ацетонитрила и 40% воды), увеличение ацетонитрила с 60 до 90% от 2,5 до 12 мин., увеличение ацетонитрила с 90 до 100% от 12 до 20 мин., подача 100% ацетонитрила от 20 до 22,5 мин., снижение ацетонитрила до 60% в течение 0,5 мин., подача 60% ацетонитрила до уравновешивания колонки (5 мин.); - скорость движения элюента 1,5 см3/мин. ; - температура термостата колонки 28 °С; - флуориметрический детектор: длина волны возбуждения 265 нм; длина волны эмиссии 412 нм; - время удерживания бенз(а)пирена: (12,5 +/- 0,05) мин.
Градуировочный коэффициент рассчитывают по формуле:
$K = \frac{\sum_{i = 1}^{n} C_{i}/S_{i}}{n}$ , где: $C_{i}$ - массовая концентрация бенз(а)пирена в градуировочном растворе, мкг/дм3; $S_{i}$ - среднее значение двух измерений площади пика бенз(а)пирена i-й концентрации, усл. ед.;
n - количество градуировочных смесей (n = 5).
##### 8.4.4 Контроль стабильности градуировочной характеристики. Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят 1 раз в квартал в анализируемой серии измерений. Образцами для контроля стабильности являются градуировочные растворы, выбранные таким образом, чтобы массовая концентрация бенз(а)пирена соответствовала нижней, верхней границам и середине диапазона построения градуировочной характеристики. Градуировка признается стабильной при выполнении условия: $|X - C| \leq 0,10 \cdot C$ , где: С - заданная массовая концентрация бенз(а)пирена в градуировочном растворе, мкг/дм3; X - результат измерения массовой концентрации бенз(а)пирена в градуировочном растворе, мкг/дм3. При невыполнении условия стабильности градуировочной характеристики эксперимент повторяют с другим градуировочным раствором. При повторном невыполнении условия стабильности градуировочной характеристики выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики. #### 8.5. Отбор проб Отбирают венозную кровь объемом не менее 2 см3 в вакуумную пробирку для забора крови. Срок хранения проб в холодильнике 6 ч. ### 9. Выполнение измерений Выполняют два параллельных измерения образца крови. В коническую пробирку с завинчивающейся крышкой вместимостью 15 см3 переносят 1 см3 пробы крови, прибавляют 1 см3 ацетонитрила, интенсивно встряхивают 1 мин., добавляют в качестве высаливателя 0,25 г смеси солей для экстракции из набора VetexQ, встряхивают интенсивно в течение 1 мин., центрифугируют 10 мин. со скоростью 2 тыс. об./мин. В пробирку содержащую 0,1 г смеси для очистки из набора VetexQ (сорбент $C_{18}$ ), переносят 0,8 см3 верхнего слоя, встряхивают 1 мин., центрифугируют 10 мин. со скоростью 2 тыс. об./мин. и отбирают верхний слой. Полученный экстракт фильтруют через капроновый фильтр, используя медицинский шприц "Луер", в стеклянную виалу и анализируют 20 мм3 на жидкостном хроматографе в условиях, указанных в [п. 8.4.3](#p100075). Идентификацию бенз(а)пирена проводят путем сравнения времен удерживания хроматографических пиков в анализируемой пробе и стандартном растворе. ### 10. Обработка (вычисление) результатов измерений #### 10.1 Массовую концентрацию бенз(а)пирена в пробах крови (мкг/дм3) вычисляют по формуле: $X = S_{i} \cdot K \cdot 1,65$ , где: X - массовая концентрация бенз(а)пирена в анализируемой пробе, мкг/дм3;
$S_{i}$ - площадь пика бенз(а)пирена на хроматограмме, усл. ед.;
K - градуировочный коэффициент;
1,65 - коэффициент, учитывающий степень экстракции бенз(а)пирена из крови, равную 62%. Рассчитывается как отношение площадей пиков бенз(а)пирена до и после экстракции из крови. 10.2. За результат измерения $\overline{X}$ принимают среднее арифметическое значение двух результатов измерений, полученных в условиях повторяемости $X_{1}$ , $X_{2}$ (параллельных определений), для которых выполняется условие: $|X_{1} - X_{2}| \leq 0,01 \cdot r \cdot \frac{X_{1} + X_{2}}{2}$ , где: (1) r - предел повторяемости. Значения предела повторяемости приведены в [табл. 3](#p100115). При невыполнении условия (1) получают дополнительно еще два результата измерений. За результат измерений принимают среднее арифметическое четырех результатов измерений, полученных в условиях повторяемости, для которых выполняется условие: $|X_{max,4} - X_{min,4}| \leq 0,01 \cdot CR_{0,95}(4) \cdot \frac{X_{1} + X_{2} + X_{3} + X_{4}}{4}$ , где: (2) $CR_{0,95}(4)$ - критический диапазон. $CR_{0,95}(4) = 18\%$ . При невыполнении условия (2) в качестве окончательного результата измерений принимают медиану четырех результатов измерений, полученных в условиях повторяемости (параллельных определений). Дополнительно выявляют и устраняют причины, приводящие к невыполнению условия [(1)](#p100108). Таблица 3 Пределы повторяемости, внутрилабораторной прецизионности, воспроизводимости при вероятности Р = 0,95
Диапазон измерений,Пределы (относительные значения), %
мкг/дм3повторяемости (допускаемое расхождение между двумя результатами параллельных определений), rвнутрилабораторной прецизионности (допускаемое расхождение между двумя результатами измерений, полученными в условиях внутрилабораторной прецизионности), Rлвоспроизводимости (допускаемое расхождение между двумя результатами измерений, полученными в разных лабораториях), R
от 0,02 до 2 вкл.142534
10.3. Расхождение между результатами измерений, полученными в двух лабораториях, не должно превышать предел воспроизводимости:
$|\overline{X_{1}} - \overline{X_{2}}| \leq 0,01 \cdot R \cdot \frac{\overline{X_{1}} + \overline{X_{2}}}{2}$ , где: (3)
$\overline{X_{1}}$ и $\overline{X_{2}}$ , - результаты измерений массовой концентрации бенз(а)пирена, полученные в разных лабораториях - средние арифметические двух результатов измерений, полученных в условиях повторяемости, для которых выполняется условие [(1)](#p100108), мкг/дм3. При выполнении условия (3) приемлемы оба результата измерений, и в качестве окончательного может быть использовано их среднее арифметическое значение. Значения предела воспроизводимости приведены в [табл. 3](#p100115). ### 11. Оформление результатов измерений Результат измерений в документах, предусматривающих его использование, может быть представлен в виде: $(\overline{X} \pm \Delta)\text{мкг}/\text{дм}^{3}$ , Р = 0,95, где: $\Delta$ - характеристика погрешности, мкг/дм3, при Р = 0,95, значение $\Delta$ рассчитывают по формуле: $\Delta = \frac{\delta \cdot \overline{X}}{100}$ Значение $\delta$ приведено в [табл. 1](#p100023). ### 12. Процедуры обеспечения достоверности измерений Обеспечение достоверности измерений в пределах лаборатории организуют и проводят путем проведения оперативного контроля процедуры измерений и контроля стабильности результатов измерений в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-6](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002) и [РМГ 76-2004](https://bukva.ai/docs/rmg-76-2004) ГСИ. Периодичность получения результатов контрольных процедур и формы их регистрации приводят в документах лаборатории, устанавливающих порядок и содержание работ по организации методов контроля стабильности результатов измерений в пределах лаборатории. #### 12.1. Алгоритм оперативного контроля процедуры измерений с использованием метода добавок Оперативный контроль процедуры измерений с использованием метода добавок проводят путем сравнения результата отдельно взятой контрольной процедуры $\text{К}_{\text{к}}$ с нормативом контроля К. Результат контрольной процедуры $(\text{К}_{\text{к}},\text{мкг}/\text{дм}^{3})$ рассчитывают по формуле:
$\text{К}_{\text{к}} = |\overline{X\prime} - \overline{X} - C_{\text{д}}|$ , где:
$\overline{X\prime}$ - результат измерений массовой концентрации бенз(а)пирена в пробе с известной добавкой - среднее арифметическое двух результатов измерений, полученных в условиях повторяемости, расхождение между которыми удовлетворяет условию [(1)](#p100108), мкг/дм3; $\overline{X}$ - результат измерений массовой концентрации бенз(а)пирена в исходной пробе - среднее арифметическое двух результатов измерений, полученных в условиях повторяемости, расхождение между которыми удовлетворяет условию [(1)](#p100108), мкг/дм3;
$C_{\text{д}}$ - величина введенной добавки, мкг/дм3.
Норматив контроля К рассчитывают по формуле: $\text{К } = \sqrt{\Delta_{\text{л},X\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},X}^{2}}$ , где: $\Delta_{\text{л},X}$ , $\Delta_{\text{л},X\prime}$ - значения характеристики погрешности результатов измерений, установленные в лаборатории при реализации методики измерений, соответствующие массовой концентрации бенз(а)пирена в пробе с известной добавкой и в исходной пробе соответственно, мкг/дм3. *Примечание.* Допустимо характеристику погрешности результатов измерений при внедрении методики измерений в лаборатории устанавливать на основе выражения: $\Delta_{\text{л}} = 0,84 \cdot \Delta$ с последующим уточнением по мере накопления информации в процессе контроля стабильности результатов измерений. Процедуру измерений признают удовлетворительной при выполнении условия:
$\text{К}_{\text{к}} \leq \text{К}$ (4)
При невыполнении условия (4) контрольную процедуру повторяют. При повторном невыполнении условия (4) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению. #### 12.2. Алгоритм проведения контрольной процедуры при контроле внутрилабораторной прецизионности Контрольные процедуры при контроле промежуточной прецизионности получают с использованием рабочих проб крови. При реализации контрольной процедуры получают два результата контрольных измерений (первичного $\overline{X_{1}}$ и повторного $\overline{X_{2}}$ ) массовой концентрации бенз(а)пирена в условиях внутрилабораторной прецизионности. Результат контрольной процедуры признают удовлетворительным при выполнении следующего условия:
$|\overline{X_{1}} - \overline{X_{2}}| \leq 0,01 \cdot R_{\text{л}} \cdot \frac{\overline{X_{1}} + \overline{X_{2}}}{2}$ (5)
Значение предела внутрилабораторной прецизионности ( $R_{\text{л}}$ , %) не превышает 25%. ### 13. Разработчики Уланова Т.С., Зайцева Н.В., Карнажицкая Т.Д., Кислицина А.В. (ФБУН "Федеральный научный центр медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения" Роспотребнадзора). Приложение 1 (справочное) Библиография 1. Химическая энциклопедия/Под ред. И.Л.Кнунянц. М.; "Советская энциклопедия", 1988. Т. 1. 2. Майстренко В.Н., Клюев Н.А. Эколого-аналитический мониторинг стойких органических загрязнителей. М.: Бином. Лаборатория знаний, 2004. 323 с. 3. Лазарев Н.В. Вредные вещества в промышленности: Органические вещества. Л.: Химия, 1976. Т. 1. 590 с. ## Приложение 2 (справочное) В настоящих методических указаниях использованы ссылки на следующие документы. [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) "Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Технические условия".
ГОСТ 4220-75 "Реактивы. Калий двухромовокислый. Технические условия".
ГОСТ 6709-72 "Вода дистиллированная. Технические условия".
ГОСТ 7328-2001 "Гири. Общие технические условия".
[ГОСТ Р ИСО 7886-1-2009](https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-iso-7886-1-2009) "Шприцы инъекционные однократного применения стерильные".
[ГОСТ 14262-78](https://bukva.ai/docs/standart-gost-14262-78) "Кислота серная. Технические условия".
ГОСТ 25336-82 "Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры".
[ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) "Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования".
ГОСТ Р 53228-2008 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания".
ГОСТ 12.0.004-90 "Система стандартов безопасности труда. Организация обучения безопасности труда".
ГОСТ 12.1.004-91 "ССБТ. Пожарная безопасность. Общие требования".
ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны".
ГОСТ 12.1.007-76 "ССБТ. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности".
ГОСТ 12.4.009-83 "ССБТ. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание".
ГОСТ 12.1.019-2009 "ССБТ. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты".
СП 1.3.2322-08 "Санитарно-эпидемиологические правила "Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней".
[ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
[РМГ 76-2004](https://bukva.ai/docs/rmg-76-2004) ГСИ "Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа".
ТУ 2.833.106-00 "Микрошприцы МШ-10".
ТУ 9443-001-245.23530-97 "Центрифуга ЦЛМН-Р10-01-"Элекон".
ТУ 16.531.743-83 "Сушильный шкаф ШСС-80".
ТУ 6-09-14-2167-84 "Ацетонитрил".
ФС 42-1327-99 "Гепарин". *Примечание.* При использовании настоящих методических указаний целесообразно проверить действие ссылочных стандартов на территории Российской Федерации по соответствующему указателю стандартов, составленному на 1 января текущего года, и по соответствующим информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный документ заменен (изменен), то при пользовании настоящими методическими указаниями следует руководствоваться замененным (измененным) стандартом. Если ссылочный документ отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.
---