---
title: "\"МУК 4.1.3029-12. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств диметоморфа в корнеплодах моркови, семенах и масле подсолнечника методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.3029-12"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-3029-12"
---

## "МУК 4.1.3029-12. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств диметоморфа в корнеплодах моркови, семенах и масле подсолнечника методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.3029-12. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств диметоморфа в корнеплодах моркови, семенах и масле подсолнечника методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 03.07.2012)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 3 июля 2012 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

3 июля 2012 года


#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ДИМЕТОМОРФА**
**В КОРНЕПЛОДАХ МОРКОВИ, СЕМЕНАХ И МАСЛЕ ПОДСОЛНЕЧНИКА**
**МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОЙ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="right">

**МУК 4.1.3029-12**

<a id="p100002"></a>Дата введения:

</div>

<div align="center">

с момента утверждения

</div>


1. <a id="p100006"></a>Разработаны ФБУН "Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана" Роспотребнадзора.
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
3. <a id="p100008"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 3 июля 2012 г.
4. <a id="p100009"></a>Введены в действие с момента утверждения.
5. <a id="p100010"></a>Введены впервые.

<a id="p100011"></a>Свидетельство о метрологической аттестации N 00114.27.02.12 от 27.02.2012.
<a id="p100012"></a>Настоящие методические указания устанавливают метод капиллярной газожидкостной хроматографии для определения массовых концентраций диметоморфа в корнеплодах моркови, семенах и масле подсолнечника в диапазоне 0,01 - 0,1 мг/куб. дм (морковь и масло подсолнечника) и 0,02 - 0,2 мг/кг (семена подсолнечника).

<a id="p100013"></a>Диметоморф
<a id="p100014"></a>(E,Z)-4-[3-(4-(хлорфенил)-3-(3,4-диметоксифенил)акрилоил]морфолин (IUPAC)
<a id="p100015"></a>    C  H  ClNO
     21 22    4
<a id="p100016"></a>Мол. масса 387,9

<a id="p100017"></a> ![рис. 1](https://i.bukva.ai/d6iqSEqx/img_0.png) 

<a id="p100018"></a>    Смесь (E)- и (Z)-изомеров в соотношении 1:1.
<a id="p100019"></a>    Бесцветное  кристаллическое  вещество без запаха. Температура плавления
127  -  148  °С;  (E)-изомер 135,7 - 137,5 °С, (Z)-изомер 169,2 - 170,2 °С.
                                              -4                         -3
Давление  паров при 25 °С: (E)-изомер 9,7 · 10   мПа, (Z)-изомер 1,0 · 10
мПа.  Растворимость  в органических растворителях смеси (E)- и (Z)-изомеров
(г/куб. дм): гексан - 0,11; метанол - 39; этилацетат - 48,3; толуол - 49,5;
ацетон  -  100,  дихлорметан - 461. Растворимость в воде при 20 °С (мг/куб.
дм): 19 (pH 5), 18 (pH 7), 16 (pH 9). Коэффициент распределения н-октанол -
вода (20 °С) K   log P = 2,63 (E)-изомер; 2,73 (Z)-изомер. Гидролитически и
              ow
термически  стабилен  при  нормальных  условиях.  Устойчив  более  5  лет в
темноте.    (E)-    и    (Z)-изомеры    на   солнечном   свету   подвержены
взаимопревращению.
<a id="p100020"></a>    Краткая токсикологическая характеристика
<a id="p100021"></a>    Острая  пероральная  токсичность  (LD  )  для крыс - 3500 - 4300 мг/кг,
                                         50
мышей  - 3700 - 5000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD  ) для крыс >
                                                             50
5000  мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LC  ) для крыс > 4,2 мг/куб.
                                                 50
дм (4 ч).
<a id="p100022"></a>Область применения препарата
<a id="p100023"></a>Диметоморф - системный фунгицид для борьбы с заболеваниями, вызываемыми оомицетами, является хорошим защитным и противоспоровым средством.


## 1. <a id="p100024"></a>Метрологические характеристики


<a id="p100025"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100026"></a>Таблица 1

<a id="p100027"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ**


<a id="p100028"></a> Анализируемый   Диапазон     Показатель   Стандартное Предел   Предел
    объект     определяемых    точности    отклонение  повторя- воспроиз-
               концентраций,   (граница    повторяемо- емости   водимости
 мг/кг относительной сти $\sigma_{r}$ , % r, % R, %
                             погрешности)
 $±\delta$ , %,
                               P = 0,95

<a id="p100029"></a> Морковь       от 0,01 до    50            2,2         7        10
               0,1 вкл.

<a id="p100030"></a> Семена        от 0,02 до    50            2,9         9        13
 подсолнечника 0,2 вкл.

<a id="p100031"></a> Масло         от 0,01 до    50            2,9         9        13
 подсолнечника 0,1 вкл.


<a id="p100032"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для всего диапазона измерений (n = 20) приведены в табл. 2.

<a id="p100033"></a>Таблица 2


<table>
<colgroup><col width="19%"><col width="11%"><col width="19%"><col width="16%"><col width="16%"><col width="19%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Анализируемый объект</td><td colspan="5">Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>Предел обнаружения, мг/кг</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>Полнота извлечения вещества, %</td><td>Стандартное отклонение, %</td><td>Доверительный интервал среднего результата +/-, %</td></tr>
<tr><td>Морковь</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>91,82</td><td>2,4</td><td>1,3</td></tr>
<tr><td>Семена подсолнечника</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,2</td><td>82,83</td><td>2,9</td><td>1,6</td></tr>
<tr><td>Масло подсолнечника</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>83,87</td><td>2,7</td><td>1,5</td></tr>
</table>



## 2. <a id="p100038"></a>Метод измерений


<a id="p100039"></a>Метод основан на определении диметоморфа с использованием капиллярной газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с электронно-захватным детектором (ЭЗД) после извлечения вещества из анализируемых образцов ацетонитрилом, очистки экстрактов перераспределением в системе несмешивающихся растворителей и на колонке с флорисилом.
<a id="p100040"></a>Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.


## 3. <a id="p100041"></a>Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы



### <a id="p100042"></a>3.1. Средства измерений


<a id="p100043"></a>Газовый хроматограф "Кристалл-2000М", снабженный         Номер Госреестра
электронно-захватным детектором с пределом               14516-08
                                  -14
детектирования по линдану 3,5 · 10    г/с,
предназначенный для работы с капиллярной колонкой
<a id="p100044"></a>Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 24104-2001
<a id="p100045"></a>Весы лабораторные общего назначения с наибольшим ГОСТ 24104-2001
пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой
погрешности +/- 0,038 г
<a id="p100046"></a>Колбы мерные вместимостью 2-100-2 [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100047"></a>Меры массы ГОСТ 7328-2001
<a id="p100048"></a>Микрошприц типа SGE-Cromatek вместимостью 10 куб. мм     Номер Госреестра
                                                         39206-08
<a id="p100049"></a>Пипетки градуированные 2-го класса точности [ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91)
вместимостью 1,0; 2,0; 5,0; 10 куб. см
<a id="p100050"></a>Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
25, 50, 100 куб. см

<a id="p100051"></a>*Примечание.* Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.


### <a id="p100052"></a>3.2. Реактивы


<a id="p100053"></a>Диметоморф, аналитический стандарт с содержанием
действующего вещества (99,6 +/- 1,0)%, CAS
N 67306-03-0 (фирма "БАСФ")
<a id="p100054"></a>Азот газообразный нулевой, марка А (99,999%) в баллонах  ТУ 6-21-39-96
<a id="p100055"></a>Ацетонитрил для хроматографии, хч                        ТУ 6-09-14-2167-84
<a id="p100056"></a>Вода для лабораторного анализа (деионизованная, [ГОСТ Р 52501-2005](https://bukva.ai/docs/gost-r-52501-2005)
бидистиллированная)
<a id="p100057"></a>н-Гексан (гексан), для ВЭЖХ                              ТУ 6-09-06-657-84
<a id="p100058"></a>Изопропиловый спирт, осч                                 ТУ 6-09-07-1718-91
<a id="p100059"></a>Калий углекислый (карбонат калия, поташ), хч, [ГОСТ 4221-76](https://bukva.ai/docs/standart-gost-4221-76)
прокаленный
<a id="p100060"></a>Кальций хлористый (хлорид кальция), хч, насыщенный       ГОСТ 450-77
водный раствор
<a id="p100061"></a>Кислота серная концентрированная, хч ГОСТ 4204-77
<a id="p100062"></a>Натрий серно-кислый (сульфат натрия) безводный, хч [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76)
<a id="p100063"></a>Натрий углекислый (карбонат натрия), хч ГОСТ 83-79
<a id="p100064"></a>Флорисил, для колоночной хроматографии (60 - 100 меш.)
фирм "SERVA", "MERK" (Германия) или аналогичный
<a id="p100065"></a>Фосфор (V) оксид (фосфорный ангидрид, пентоксид          ТУ 6-09-4173-85
фосфора)
<a id="p100066"></a>Этиловый эфир уксусной кислоты (этилацетат), хч [ГОСТ 22300-76](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76)

<a id="p100067"></a>*Примечание.* Допускается использование реактивов иных производителей с более высокой квалификацией.


### <a id="p100068"></a>3.3. Вспомогательные устройства, материалы


<a id="p100069"></a>Аппарат для встряхивания типа АВУ-6с                     ТУ 64-1-2851-78
<a id="p100070"></a>Баня ультразвуковая фирмы Донау (Швейцария)
<a id="p100071"></a>Бумажные фильтры "красная лента" обеззоленные или        ТУ 2642-001-
фильтры из хроматографической бумаги Ватман 3ММ          05015242-07
<a id="p100072"></a>Воронка Бюхнера ГОСТ 9147-80
<a id="p100073"></a>Воронка делительная вместимостью 250 и 500 куб. см [ГОСТ 9737-93](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
<a id="p100074"></a>Воронки стеклянные конусные типа В-36-80 ХС и ГОСТ 25336-82
**В-56-80 ХС**
<a id="p100075"></a>Гомогенизатор
<a id="p100076"></a>Груша резиновая                                          ТУ 9398-05-0576-
                                                         9082-2003
<a id="p100077"></a>Колба Бунзена ГОСТ 25336-82
<a id="p100078"></a>Колбы конические (плоскодонные) вместимостью ГОСТ 23932-90
100, 250 - 300 куб. см
<a id="p100079"></a>Колбы круглодонные на шлифе (для упаривания) [ГОСТ 9737-93](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
вместимостью 10, 150 куб. см
<a id="p100080"></a>Колонка стеклянная для препаративной хроматографии
длиной 25 см, внутренним диаметром 10 - 12 мм
<a id="p100081"></a>Насос водоструйный вакуумный ГОСТ 25336-82
<a id="p100082"></a>Стаканы химические вместимостью 100, 250 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100083"></a>Стекловата
<a id="p100084"></a>Стеклянные палочки
<a id="p100085"></a>Ректификационная колонна с числом теоретических
тарелок не менее 30
<a id="p100086"></a>Ротационный вакуумный испаритель B-169 фирмы Buchi,
Швейцария
<a id="p100087"></a>Установка для перегонки растворителей
<a id="p100088"></a>Хроматографическая колонка капиллярная DB-1701
длиной 30 м, внутренним диаметром 0,32 мм, толщина
пленки сорбента 0,25 мкм

<a id="p100089"></a>*Примечание.* Допускается использование других вспомогательных устройств аналогичного назначения, технические характеристики которых не уступают указанным, а также материалов, обеспечивающих нормативы точности при проведении измерений.


## 4. <a id="p100090"></a>Требования безопасности


<a id="p100091"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019-2009, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.
<a id="p100092"></a>4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.
<a id="p100093"></a>4.3. При работе с газами, находящимися в баллонах под давлением до 15 МПа (150 кгс/кв. см), необходимо соблюдать "Правила устройства и безопасной эксплуатации стационарных компрессорных установок, воздухопроводов и газопроводов под давлением", ПБ 03-576-03. Запрещается открывать вентиль баллона, не установив на нем понижающий редуктор.


## 5. <a id="p100094"></a>Требования к квалификации операторов


<a id="p100095"></a>К выполнению измерений допускают специалиста, имеющего квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на газовом хроматографе, освоившего данную методику и подтвердившего экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по [п. 13](#p100200).
<a id="p100096"></a>К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией "лаборант", имеющего опыт работы в химической лаборатории.


## 6. <a id="p100097"></a>Условия измерений


<a id="p100098"></a>При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- <a id="p100099"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100100"></a>выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


## 7. <a id="p100101"></a>Подготовка к выполнению измерений


<a id="p100102"></a>Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление градуировочных растворов, растворов внесения, установление градуировочной характеристики, приготовление смесей растворителей для очистки экстрактов на колонке, подготовка колонки с флорисилом, проверка хроматографического поведения диметоморфа на ней.


### <a id="p100103"></a>7.1. Очистка органических растворителей



##### <a id="p100104"></a>7.1.1 Ацетонитрил

<a id="p100105"></a>Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на 1 куб. дм ацетонитрила - 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 куб. дм ацетонитрила - 10 г карбоната калия).
<a id="p100106"></a>7.1.2. н-Гексан
<a id="p100107"></a>Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

##### <a id="p100108"></a>7.1.3 Этилацетат


###### <a id="p100109"></a>7.1.3.1 Приготовление раствора натрия углекислого с массовой долей 5%

<a id="p100110"></a>Навеску (25 +/- 0,1) г натрия углекислого помещают в мерную колбу вместимостью 500 куб. см, растворяют в бидистиллированной воде, доводят водой до метки, перемешивают.

###### <a id="p100111"></a>7.1.3.2 Очистка растворителя

<a id="p100112"></a>Растворитель промывают последовательно 5%-м водным раствором натрия углекислого, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над прокаленным карбонатом калия и перегоняют или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 30.


### <a id="p100113"></a>7.2. Приготовление градуировочных растворов



##### <a id="p100114"></a>7.2.1 Исходный раствор диметоморфа для градуировки (концентрация 200 мкг/куб. см)

<a id="p100115"></a>В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 0,02 г диметоморфа, растворяют в 50 - 70 куб. см этилацетата, доводят до метки этим же растворителем, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение 3 месяцев.

##### <a id="p100116"></a>7.2.2 Раствор N 1 диметоморфа для градуировки (концентрация 20 мкг/куб. см)

<a id="p100117"></a>В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 10,0 куб. см исходного раствора диметоморфа для градуировки с концентрацией 200 мкг/куб. см [(п. 7.2.1)](#p100114), доводят до метки гексаном, тщательно перемешивают.
<a id="p100118"></a>Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.
<a id="p100119"></a>7.2.3. Рабочие растворы N 2 - 5 диметоморфа для градуировки (концентрация 0,2 - 2,0 мкг/куб. см)
<a id="p100120"></a>В 4 мерные колбы вместимостью 100 куб. см помещают по 1,0; 2,5; 5,0 и 10,0 куб. см раствора N 1 диметоморфа с концентрацией 20 мкг/куб. см [(п. 7.2.2)](#p100116), доводят до метки гексаном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 5 с концентрацией диметоморфа 0,2; 0,5; 1,0 и 2,0 мкг/куб. см соответственно.
<a id="p100121"></a>Растворы хранятся в холодильнике не более 14 дней.


### <a id="p100122"></a>7.3. Установление градуированной характеристики


<a id="p100123"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость суммы площадей хроматографических пиков E- и Z-изомеров (мВ · с) от концентрации диметоморфа в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки N 2 - 5.
<a id="p100124"></a>В инжектор хроматографа вводят 1 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 9.3](#p100166). Осуществляют не менее 5 параллельных измерений.
<a id="p100125"></a>Устанавливают суммы площадей пиков изомеров действующего вещества, на основании которых строят градуировочную зависимость.


### <a id="p100126"></a>7.4. Приготовление смесей гексан-этилацетат для очистки экстрактов на колонке



##### <a id="p100127"></a>7.4.1 Смесь гексан-этилацетат (объемное соотношение 9:1)

<a id="p100128"></a>В мерную колбу вместимостью 250 куб. см помещают 225 куб. см гексана и 25 куб. см этилацетата, перемешивают.

##### <a id="p100129"></a>7.4.2 Смесь гексан-этилацетат (объемное соотношение 7:3)

<a id="p100130"></a>В мерную колбу вместимостью 250 куб. см помещают 175 куб. см гексана и 75 куб. см этилацетата, перемешивают.


### <a id="p100131"></a>7.5. Приготовление растворов внесения



##### <a id="p100132"></a>7.5.1 Исходный раствор диметоморфа для внесения (концентрация 100 мкг/куб. см)

<a id="p100133"></a>В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 0,01 г диметоморфа, растворяют в 50 - 70 куб. см изопропанола, доводят до метки этим же растворителем, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение 3 месяцев.

##### <a id="p100134"></a>7.5.2 Раствор N 1 диметоморфа для внесения (концентрация 10 мкг/куб. см)

<a id="p100135"></a>В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 10,0 куб. см исходного раствора диметоморфа для внесения с концентрацией 100 мкг/куб. см [(п. 7.5.1)](#p100132), доводят до метки изопропанолом, тщательно перемешивают.
<a id="p100136"></a>Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.


### <a id="p100137"></a>7.6. Подготовка колонки с флорисилом для очистки экстрактов


<a id="p100138"></a>Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см, внутренним диаметром 10 - 12 мм уплотняют тампоном из стекловаты, выливают в колонку (при открытом кране) суспензию 4 г флорисила в 30 куб. см гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента, на который помещают слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку последовательно промывают смесями гексан-этилацетат в объемном соотношении 7:3, затем - 9:1, порциями по 30 куб. см, скорость прохождения растворителя - 1 - 2 капли в секунду. Колонка готова к работе.


### <a id="p100139"></a>7.7. Проверка хроматографического поведения диметоморфа на колонке с флорисилом


<a id="p100140"></a>В круглодонную колбу вместимостью 10 куб. см помещают 0,5 куб. см раствора N 1 диметоморфа для внесения с концентрацией 10 мкг/куб. см [(п. 7.5.2)](#p100134), упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре водяной бани не выше 35 °С. Сухой остаток растворяют в 3 куб. см смеси гексан-этилацетат (9:1 по объему), помещая на ультразвуковую баню на 40 - 60 с, и наносят на колонку, подготовленную по [п. 7.6](#p100137). Колбу обмывают дважды этой же смесью растворителей, порциями по 3 куб. см, которые также наносят на колонку. Скорость прохождения растворителя через колонку - 1 - 2 капли в секунду. Промывают колонку 30 куб. см смеси гексан-этилацетат в объемном соотношении 9:1, затем 100 куб. см смеси гексан-этилацетат в объемном соотношении 7:3, элюат отбрасывают.
<a id="p100141"></a>Затем колонку промывают 120 куб. см смеси гексан-этилацетат (1:1 по объему) со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Фракционно (по 10 куб. см) отбирают элюат, упаривают, остатки растворяют в 2 куб. см смеси гексан-этилацетат (1:1 по объему), анализируют содержание диметоморфа по [п. 9.3](#p100166).
<a id="p100142"></a>Фракции, содержащие диметоморф, объединяют и вновь анализируют.
<a id="p100143"></a>Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с колонки и необходимый для очистки объем элюента.
<a id="p100144"></a>*Примечание.* Проверку хроматографического поведения диметоморфа следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии сорбентов и растворителей.


## 8. <a id="p100145"></a>Отбор и хранение проб


<a id="p100146"></a>Отбор проб производится в соответствии с правилами, определенными ГОСТ: морковь - [ГОСТ 1721-85](https://bukva.ai/docs/gost-1721-85) "Морковь столовая свежая, заготавливаемая и поставляемая. Технические условия"; подсолнечник - [ГОСТ 10852-86](https://bukva.ai/docs/3979) "Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб", [ГОСТ 22391-89](https://bukva.ai/docs/gost-22391-89) "Подсолнечник. Требования при заготовках и поставках", [ГОСТ 12036-85](https://bukva.ai/docs/gost-12036-85) "Семена сельскохозяйственных культур. Правила приемки и методы отбора проб"; масло - [ГОСТ Р 52465-2005](https://bukva.ai/docs/prikaz-gost-r-52465-2005) "Масло подсолнечное. Технические условия", [ГОСТ Р 52062-2003](https://bukva.ai/docs/pravila-gost-r-52062-2003) "Масла растительные. Правила приемки и методы отбора проб", "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79).
<a id="p100147"></a>Отобранные пробы моркови хранят в полиэтиленовой таре в холодильнике не более недели. Для длительного хранения образцы замораживают и хранят при температуре -18 °С.
<a id="p100148"></a>Семена подсушивают в темноте до постоянного веса и хранят в тканевых мешочках в сухом, защищенном от света месте при комнатной температуре не более 6 месяцев. Для длительного хранения образцы замораживают и хранят при температуре -18 °С. Перед анализом образцы семян измельчают.
<a id="p100149"></a>Пробы масла (помещенные в стеклянные флаконы) хранят в холодильнике в темноте.


## 9. <a id="p100150"></a>Выполнение определения



### <a id="p100151"></a>9.1. Морковь и семена подсолнечника



##### <a id="p100152"></a>9.1.1 Экстракция

<a id="p100153"></a>Измельченные образцы моркови или семян подсолнечника массой 20 г помещают в коническую колбу на 250 - 300 куб. см, добавляют 70 куб. см ацетонитрила и помешают на аппарат для встряхивания на 30 мин.
<a id="p100154"></a>Пробам дают отстояться, затем надосадочную жидкость фильтруют на воронке Бюхнера с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, через двойной фильтр "красная лента". В коническую колбу с пробой вносят новую порцию ацетонитрила объемом 50 куб. см и повторно экстрагируют на аппарате для встряхивания в течение 20 мин., затем раствор фильтруют на воронке Бюхнера. Фильтр промывают ацетонитрилом, порцией 20 куб. см.
<a id="p100155"></a>Объединенный отфильтрованный экстракт переносят в делительную воронку на 250 куб. см и подвергают очистке по п. 9.1.2.

##### <a id="p100156"></a>9.1.2 Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей

<a id="p100157"></a>К ацетонитрильному экстракту, полученному по [п. 9.1.1](#p100152) и помещенному в делительную воронку на 250 куб. см, добавляют 30 куб. см гексана, интенсивно встряхивают в течение 2 - 3 мин. После полного разделения слоев верхний гексановый слой отбрасывают. Ацетонитрильный экстракт возвращают в делительную воронку и повторяют очистку с новой порцией гексана объемом 30 куб. см.
<a id="p100158"></a>Затем ацетонитрильный раствор переносят в колбу для упаривания на 150 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35 °С. Сухой остаток подвергают дополнительной очистке на колонке с флорисилом по п. 9.1.3.

##### <a id="p100159"></a>9.1.3 Очистка экстракта на колонке с флорисилом

<a id="p100160"></a>Остаток, полученный по [п. 9.1.2](#p100156), находящийся в круглодонной колбе, растворяют в 0,5 куб. см этилацетата, помещают на ультразвуковую баню на 30 с, затем добавляют 4,5 куб. см гексана, выдерживая еще 1 мин. на ультразвуковой бане. Раствор наносят на колонку, подготовленную по [п. 7.6](#p100137). Колбу обмывают дважды смесью гексан-этилацетат (9:1 по объему) порциями по 3 куб. см, которые также наносят на колонку. Скорость прохождения растворителя через колонку - 1 - 2 капли в секунду. Промывают колонку 50 куб. см гексана, 30 куб. см смеси гексан-этилацетат в объемном соотношении 9:1, затем 100 куб. см смеси гексан-этилацетат в объемном соотношении 7:3, элюат отбрасывают.
<a id="p100161"></a>Диметоморф элюируют с колонки 100 куб. см смеси гексан-этилацетат в объемном соотношении 1:1 со скоростью 1 - 2 капли в секунду, собирая элюат в круглодонную колбу вместимостью 150 куб. см, раствор упаривают досуха при температуре не выше 35 °С, остаток растворяют в 1 куб. см (пробы моркови) и 2 куб. см (пробы семян подсолнечника) смеси гексан-этилацетат (1:1 по объему) и анализируют на содержание диметоморфа по [п. 9.3](#p100166).


### <a id="p100162"></a>9.2. Масло



##### <a id="p100163"></a>9.2.1 Экстракция

<a id="p100164"></a>Образец масла массой 20 г помещают в коническую колбу вместимостью 200 - 250 куб. см, растворяют в 100 куб. см гексана, переносят в делительную воронку вместимостью 500 куб. см, добавляют 50 куб. см ацетонитрила. Воронку интенсивно встряхивают 2 мин. После полного разделения фаз нижний слой осторожно декантируют через бумажный фильтр, помещенный в конусную воронку, в химический стакан вместимостью 250 куб. см. Экстракцию повторяют новой порцией ацетонитрила объемом 30 куб. см.
<a id="p100165"></a>Растворы объединяют, переносят в делительную воронку на 250 куб. см и подвергают очистке в системе несмешивающихся растворителей и на колонке с флорисилом по [пп. 9.1.2](#p100156) и [9.1.3](#p100159), остаток после упаривания растворяют в 1 куб. см смеси гексан-этилацетат (1:1 по объему) и анализируют на содержание диметоморфа по п. 9.3.


### <a id="p100166"></a>9.3. Условия хроматографирования


<a id="p100167"></a>Газовый хроматограф, снабженный электронно-захватным детектором.
<a id="p100168"></a>Колонка капиллярная DB-1701 длиной 30 м, внутренним диаметром 0,32 мм, толщина пленки сорбента 0,25 мкм.
<a id="p100169"></a>Температура: детектора - 320 °С, испарителя - 300 °С.
<a id="p100170"></a>Температура термостата колонки программированная. Начальная температура - 130 °С, выдержка 1 мин., нагрев колонки со скоростью 25°/мин. до температуры 280 °С, выдержка 16 мин.
<a id="p100171"></a>Скорость газа 1 (азот): давление 80 кПа, 33,12 см/с, поток 1,625 куб. см/мин.
<a id="p100172"></a>Газ 2 (азот): деление потока 1:3; сброс 6,9 куб. см/мин.
<a id="p100173"></a>Хроматографируемый объем: 1 куб. мм.
<a id="p100174"></a>Ориентировочное время выхода диметоморфа:
<a id="p100175"></a>Z-изомер ~ 19 мин.
<a id="p100176"></a>E-изомер ~ 20 мин.
<a id="p100177"></a>Линейный диапазон детектирования: 0,2 - 2,0 нг.
<a id="p100178"></a>Образцы, дающие пики большие, чем градуировочный раствор с концентрацией 2,0 мкг/куб. см, разбавляют смесью гексан-этилацетат (1:1 по объему) не более чем в 50 раз.


## 10. <a id="p100179"></a>Обработка результатов анализа


<a id="p100180"></a>Содержание диметоморфа в пробе (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:

                                    C · V
<a id="p100181"></a>                                X = -----,
                                      m

<a id="p100182"></a>где:
<a id="p100183"></a>C - концентрация диметоморфа, найденная по градуировочной характеристике в соответствии с величиной суммы площадей хроматографических пиков Z- и E-изомеров, мкг/куб. см;
<a id="p100184"></a>V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
<a id="p100185"></a>m - масса анализируемого образца, г.


## 11. <a id="p100186"></a>Проверка приемлемости результатов параллельных определений


<a id="p100187"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

                         2 · |X  - X | · 100
                               1    2
<a id="p100188"></a>                         ------------------- <= r,                      (1)
                               X  + X
                                1    2

    где:
    X , X  - результаты параллельных определений, мг/кг;
     1   2
 r - значение предела повторяемости [(табл. 1)](#p100027), при этом $r = 2,8\sigma_{r}$ .
<a id="p100189"></a>При невыполнении [условия (1)](#p100188) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


## 12. <a id="p100190"></a>Оформление результатов


<a id="p100191"></a>Результат анализа представляют в виде:

<a id="p100192"></a> $(\overline{\text{Х}}±\Delta)$ при вероятности P = 0,95,

<a id="p100193"></a>    где:
    _
    X   -   среднее   арифметическое  результатов  определений,  признанных
приемлемыми, мг/кг;
 $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг.

<a id="p100194"></a> $\Delta = \frac{\delta \times X}{100} ,$ 

<a id="p100195"></a>где $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100027)), %.
<a id="p100196"></a>Если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100197"></a>"содержание диметоморфа в пробе моркови и масле подсолнечника менее - 0,01 мг/кг, семян подсолнечника - 0,02 мг/кг" <*>.

<a id="p100198"></a>

---

<a id="p100199"></a><*> 0,01, 0,02 мг/кг - пределы обнаружения диметоморфа в пробах моркови, масла и семян подсолнечника соответственно.


## 13. <a id="p100200"></a>Контроль качества результатов измерений


<a id="p100201"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".


### <a id="p100202"></a>13.1. Контроль стабильности градуировочной характеристики


<a id="p100203"></a>Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.
<a id="p100204"></a>При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее трех образцов концентраций для градуировки, содержание диметоморфа в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,2 до 2,0 мкг/куб. см.
<a id="p100205"></a>Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:

                            (X - C) х 100
<a id="p100206"></a>                        A = ------------- <= 12,0,
                                  C

<a id="p100207"></a>где:
<a id="p100208"></a>X - концентрация диметоморфа в пробе при контрольном измерении, мкг/куб. см;
<a id="p100209"></a>C - известная концентрация градуировочного раствора диметоморфа, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/куб. см;
<a id="p100210"></a>12 - погрешность градуировочной характеристики, %.
<a id="p100211"></a>Если величина расхождения (A) превышает 12%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов диметоморфа, предусмотренных МВИ. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики устанавливают ее заново согласно [п. 7.3](#p100122).
<a id="p100212"></a>Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.


### <a id="p100213"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа


<a id="p100214"></a>Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
<a id="p100215"></a>    Величина добавки C  должна удовлетворять условию:
                      д

<a id="p100216"></a> $C_{\text{д}} \geq \Delta_{\text{л},X} + \Delta_{\text{л},X\prime},$ 

<a id="p100217"></a>где:
<a id="p100218"></a> $±\Delta_{\text{л},X}(±\Delta_{\text{л},X\prime})$ - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:

<a id="p100219"></a> $\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta,$ 

<a id="p100220"></a>где $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг.

<a id="p100221"></a> $\Delta = \frac{\delta \times X}{100} ,$ 

<a id="p100222"></a>где $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности, [табл. 1](#p100027)), %.
<a id="p100223"></a>    Контрольный параметр процедуры K  рассчитывают по формуле:
                                    к

                                  _    _
<a id="p100224"></a>                             K  = X' - X - C ,
                              к             д

         _    _
    где  X',  X,  C   -  среднее  арифметическое  результатов  параллельных
                   д
определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100186)) содержания компонента в
образце    с    добавкой,    испытуемом   образце,   концентрация   добавки
соответственно, мг/кг.
<a id="p100225"></a>Норматив контроля K рассчитывают по формуле:

<a id="p100226"></a> $K = \sqrt{\Delta_{\text{л},X\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},X}^{2}} .$ 

<a id="p100227"></a>    Проводят  сопоставление результата контроля процедуры (K ) с нормативом
                                                            к
контроля (K).
<a id="p100228"></a>    Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

<a id="p100229"></a>                                |K | <= K,                              (2)
                                  к

процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100230"></a>При невыполнении [условия (2)](#p100229) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.


### <a id="p100231"></a>13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости


<a id="p100232"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):

                         2 · |X  - X | · 100
                               1    2
<a id="p100233"></a>                         ------------------- <= R,                      (3)
                              |X  + X |
                                1    2

    где:
    X , X  - результаты измерений, выполненных в условиях воспроизводимости
     1   2
(разное время, разные операторы, разные лаборатории), мг/кг;
    R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций,
[табл. 1](#p100027)), %.



<a id="p100234"></a>

---