---
title: "\"МУК 4.1.2994-12. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств МЦПА в семенах и масле льна масличного методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2994-12"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2994-12"
---

## "МУК 4.1.2994-12. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств МЦПА в семенах и масле льна масличного методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.2994-12. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств МЦПА в семенах и масле льна масличного методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 19.03.2012)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 19 марта 2012 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

19 марта 2012 года


#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ МЦПА В СЕМЕНАХ И МАСЛЕ ЛЬНА**
**МАСЛИЧНОГО МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОЙ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="right">

**МУК 4.1.2994-12**

</div>


<a id="p100002"></a>Дата введения:
с момента утверждения

<a id="p100006"></a>Свидетельство об аттестации МВИ от 25.11.2011 N 0106.25.11.11.
<a id="p100007"></a>Настоящие методические указания устанавливают метод капиллярной газожидкостной хроматографии для определения остаточных количеств МЦПА в семенах и масле льна масличного в диапазоне 0,02 - 0,2 мг/кг.

<div align="center">

<a id="p100008"></a>**МЦПА**

</div>

<a id="p100009"></a>4-хлор-2-метилфеноксиуксусная кислота

<a id="p100010"></a> ![рис. 1](https://i.bukva.ai/e3SBMXGv/img_0.png) 

<a id="p100011"></a>    C H ClO
     9 9   3
<a id="p100012"></a>    Молекулярная масса 200,6.
<a id="p100013"></a>    Бесцветное  кристаллическое вещество без запаха или со слабым фенольным
запахом.  Температура  плавления:  119,0  - 120,5 °C. Давление паров: 2,3 x
  -2
10    мПа  (20  °C); 0,4 мПа (32 °C). Плотность 1,41 (23,5 °C). Коэффициент
распределения октанол/вода: K   log P = 2,75 (pH 1); 0,59 (pH 5); -0,71 (pH
                             ow
7).  Растворимость  в  воде  (мг/куб.  дм, 25 °C): 395 (pH 1); 26,2 (pH 5);
273,9  (pH  7);  320,1  (pH  9). Растворимость в органических растворителях
(г/куб.  дм,  25 °C): диэтиловый эфир - 770, метанол - 775,6, дихлорметан -
69,2,  толуол  -  26,5,  ксилол  -  49, гептан - 5, н-октанол - 218,3. Соли
щелочных  металлов  и диметиламинная соль хорошо растворимы в воде. Кислота
химически  очень  устойчива.  Фотохимическая  стабильность: DT   - 24,5 дня
                                                              50
(25 °C). Константа кислотности рКа - 3,07.
<a id="p100014"></a>    Краткая токсикологическая характеристика
<a id="p100015"></a>    Острая  пероральная  токсичность  (LD  )  для  крыс - 700 - 1160 мг/кг;
                                         50
острая  дермальная  токсичность  (LD  )  Для  крыс  -  > 4000 мг/кг; острая
                                    50
ингаляционная  токсичность  (LC  )  для крыс - > 6,36 мг/куб. дм воздуха (4
                               50
ч).

<div align="center">

<a id="p100016"></a>Область применения препарата

</div>

<a id="p100017"></a>МЦПА - гербицид, применяемый для борьбы с сорными растениями в посевах пшеницы, ржи, ячменя, овса, проса, сорго, риса, гороха, картофеля, клевера, луговых травах, сенокосных угодьях и пастбищах.


## 1. <a id="p100018"></a>Погрешность измерений


<a id="p100019"></a>При соблюдении всех регламентируемых условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерения при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100020"></a>Таблица 1

<a id="p100021"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ**


<a id="p100022"></a> Анализируе- Диапазон определяемых   Показатель   Стандарт- Предел Предел
 мый объект   концентраций, мг/кг     точности    ное от-   повто- воспро-
                                      (граница    клонение  ряемо- изводи-
                                    относительной повторяе- сти,   мости,
                                    погрешности), мости,    r, %   R, %
 $±\delta$ , %, $\sigma_{r}$ , %
                                      P = 0,95

<a id="p100023"></a> Семена льна более 0,02 до 0,2 вкл. 50            2,8       8      11

<div align="right">

<a id="p100024"></a> Масло льна  более 0,02 до 0,2 вкл. 50            3,1       9      13

</div>



<a id="p100025"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для всего диапазона измерений (n = 20) приведены в табл. 2.

<a id="p100026"></a>Таблица 2


<table>
<colgroup><col width="19%"><col width="11%"><col width="19%"><col width="16%"><col width="15%"><col width="20%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Анализируемый объект</td><td colspan="5">Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>Предел обнаружения, мг/кг</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>Среднее значение извлечения, %</td><td>Стандартное отклонение S, %</td><td>Доверительный интервал среднего результата, +/-, %</td></tr>
<tr><td>Семена льна</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,2</td><td>82,02</td><td>2,3</td><td>1,2</td></tr>
<tr><td>Масло льна</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,2</td><td>82,44</td><td>2,6</td><td>1,4</td></tr>
</table>



## 2. <a id="p100030"></a>Метод измерений


<a id="p100031"></a>Методика основана на определении МЦПА с помощью капиллярной газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с электронно-захватным детектором (ЭЗД) после экстракции из анализируемых проб семян и масла льна смесью ацетонитрил - вода - соляная кислота, очистки экстрактов перераспределением в системе несмешивающихся растворителей. Газохроматографическому измерению предшествует стадия дериватизации вещества в бутиловый эфир.
<a id="p100032"></a>Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.


## 3. <a id="p100033"></a>Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы



### <a id="p100034"></a>3.1. Средства измерений


<a id="p100035"></a>Газовый хроматограф "Кристалл-2000М", снабженный
электронно-захватным детектором с пределом
                                -14
детектирования по линдану 5 x 10    г/с,                 Номер в Госреестре
предназначенный для работы с капиллярной колонкой        СИ 14516-08
<a id="p100036"></a>Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 24104-01
<a id="p100037"></a>Весы лабораторные общего назначения, с наибольшим
пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой
погрешности +/- 0,005 г ГОСТ 24104-01
<a id="p100038"></a>Колбы мерные 2-го класса точности вместимостью 25,
100, 200 и 1000 куб. см [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100039"></a>Меры массы ГОСТ 7328-01
<a id="p100040"></a>Микрошприц SGE-Cromatec вместимостью 10 куб. мм          Номер в Госреестре
                                                         СИ 39206-08

<div align="center">

<a id="p100041"></a>Пипетки градуированные 2-го класса точности

</div>

вместимостью 1,0; 2,0; 5,0 и 10 куб. см [ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91)
<a id="p100042"></a>Цилиндры мерные 2-го класса точности
вместимостью 50, 100, 250 и 500 куб. см [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)

<a id="p100043"></a>*Примечание.* Допускается использование средств измерения иных производителей с аналогичными или лучшими характеристиками.


### <a id="p100044"></a>3.2. Реактивы


<a id="p100045"></a>МЦПА кислота, аналитический стандарт с
содержанием действующего вещества 99,3%,
аттестованное значение погрешности +/- 0,7%
(НПК "Блок-1")                                     ГСО 7652-99
<a id="p100046"></a>Азот, осч (99,999%), из баллона ГОСТ 9293-74
<a id="p100047"></a>Ацетон, хч                                         ГОСТ 2603-71
<a id="p100048"></a>Вода дистиллированная ГОСТ 6709-72
<a id="p100049"></a>Метилен хлористый (дихлорметан), хч [ГОСТ 12794-84](https://bukva.ai/docs/standart-gost-12794-80)
<a id="p100050"></a>Калий марганцово-кислый (перманганат калия) ГОСТ 20490-75
<a id="p100051"></a>Калий углекислый (калия карбонат, поташ)
безводный [ГОСТ 4221-76](https://bukva.ai/docs/standart-gost-4221-76)
<a id="p100052"></a>Кислота соляная (концентрированная), хч ГОСТ 3118-77
<a id="p100053"></a>Кислота серная (концентрированная), хч ГОСТ 4204-77
<a id="p100054"></a>Метиламин гидрохлорид, ч                           ТУ 6-09-3755-74
<a id="p100055"></a>Натрий двууглекислый (бикарбонат,
гидрокарбонат), хч [ГОСТ 2156-76](https://bukva.ai/docs/932)
<a id="p100056"></a>Натрий серно-кислый (сульфат) безводный, хч [ГОСТ 4166-78](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76)
<a id="p100057"></a>Натрий хлористый (хлорид), хч ГОСТ 4233-77
<a id="p100058"></a>Натрий углекислый (карбонат натрия), хч ГОСТ 83-79
<a id="p100059"></a>н-Гексан, хч                                       ТУ 2631-003-0580799-98
<a id="p100060"></a>н-Бутиловый спирт (н-бутанол, бутанол-1), хч [ГОСТ 6006-78](https://bukva.ai/docs/gost-6006-78)
<a id="p100061"></a>Фосфор (V) оксид (фосфорный ангидрид, пентоксид
фосфора)                                           ТУ 6-09-4173-85

<a id="p100062"></a>Примечание. Возможно использование реактивов более высокой квалификации, которые не требуют выполнения [п. 7.1](#p100104) (очистка).


### <a id="p100063"></a>3.3. Вспомогательные устройства, материалы


<a id="p100064"></a>Аппарат для встряхивания типа АВУ-6с               ТУ 64-1-2851-78
<a id="p100065"></a>Баня водяная                                       ТУ 46-22-603-75
<a id="p100066"></a>Баня ультразвуковая
<a id="p100067"></a>Бумага индикаторная универсальная pH 0 - 12        ТУ 6-09-1181-89
<a id="p100068"></a>Бумажные фильтры "красная лента" обеззоленные
или фильтры из хроматографической бумаги Ватман
**3ММ                                                ТУ 2642-001-05015242-07**
<a id="p100069"></a>Воронка Бюхнера ГОСТ 9147-80
<a id="p100070"></a>Воронки делительные вместимостью 250, 500 и
1000 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100071"></a>Воронки конусные диаметром 40 - 45 мм ГОСТ 25336-82
<a id="p100072"></a>Груша резиновая                                    ТУ 9398-005-0576-9082-03
<a id="p100073"></a>Колба Бунзена ГОСТ 25336-82
<a id="p100074"></a>Колбы конические плоскодонные вместимостью
250 - 300 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100075"></a>Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 50,
100, 250 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100076"></a>Лед
<a id="p100077"></a>Мешалка магнитная
<a id="p100078"></a>Насос водоструйный вакуумный ГОСТ 25336-82
<a id="p100079"></a>Пробирка со шлифом вместимостью 5 и 10 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100080"></a>Ректификационная колонна с числом теоретических
тарелок не менее 30
<a id="p100081"></a>Ротационный вакуумный испаритель
<a id="p100082"></a>Стаканы химические с носиком вместимостью
200 - 250, 400 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100083"></a>Склянка из темного стекла
<a id="p100084"></a>Стекловата
<a id="p100085"></a>Стеклянные палочки
<a id="p100086"></a>Термостат лабораторный суховоздушный с
диапазоном рабочих температур до 100 °C
<a id="p100087"></a>Установка для перегонки растворителей
<a id="p100088"></a>Холодильник водяной обратный
<a id="p100089"></a>Хроматографическая колонка капиллярная HP-5ms
длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм,
толщина пленки сорбента 0,25 мкм

<a id="p100090"></a>*Примечание.* Допускается использование других вспомогательных средств измерений и устройств аналогичного назначения, технические характеристики которых не уступают указанным, а также материалов, обеспечивающих нормативы точности при проведении измерений.


## 4. <a id="p100091"></a>Требования безопасности


<a id="p100092"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019-2009, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.
<a id="p100093"></a>4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313-03 и 2.2.5.2308-07. Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.
<a id="p100094"></a>4.3. При работе с газами, находящимися в баллонах под давлением до 15 МПа (150 кгс/кв. см), необходимо соблюдать "Правила устройства и безопасной эксплуатации стационарных компрессорных установок, воздухопроводов и газопроводов под давлением", ПБ-03-576-03. Запрещается открывать вентиль баллона, не установив на нем понижающий редуктор.


## 5. <a id="p100095"></a>Требования к квалификации операторов


<a id="p100096"></a>К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на газовом хроматографе, освоивших данную методику и подтвердивших экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности по [п. 13](#p100189).
<a id="p100097"></a>К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией "лаборант", имеющего опыт работы в химической лаборатории.


## 6. <a id="p100098"></a>Условия измерений


<a id="p100099"></a>При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- <a id="p100100"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100101"></a>выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


## 7. <a id="p100102"></a>Подготовка к выполнению измерений


<a id="p100103"></a>Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление растворов, градуировочных растворов и раствора внесения, установление градуировочной характеристики.


### <a id="p100104"></a>7.1. Очистка органических растворителей



##### <a id="p100105"></a>7.1.1 Ацетон

<a id="p100106"></a>Ацетон перегоняют над небольшим количеством перманганата калия и безводным карбонатом калия или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 30.

##### <a id="p100107"></a>7.1.2 Ацетонитрил

<a id="p100108"></a>Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на 1 куб. дм ацетонитрила - 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 ч, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 куб. дм ацетонитрила - 10 г карбоната калия).

##### <a id="p100109"></a>7.1.3 Гексан и дихлорметан

<a id="p100110"></a>Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над карбонатом калия.


### <a id="p100111"></a>7.2. Приготовление раствора бикарбоната натрия с массовой долей 5% (5%-й раствор)


<a id="p100112"></a>В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 50 г бикарбоната натрия и растворяют в 500 - 600 куб. см дистиллированной воды, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.


### <a id="p100113"></a>7.3. Приготовление раствора серной кислоты в н-бутаноле с массовой долей 2% (2%-й раствор)


<a id="p100114"></a>В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 50 - 60 куб. см н-бутанола, осторожно вносят 2 куб. см концентрированной серной кислоты, доводят н-бутанолом до метки, перемешивают. Бутилирующую смесь хранят под тягой в течение месяца.


### <a id="p100115"></a>7.4. Приготовление смесей ацетонитрил - вода - соляная кислота для экстракции


<a id="p100116"></a>7.4.1. Смесь ацетонитрил - вода - соляная кислота (объемное соотношение 160:30:10). В мерную колбу вместимостью 200 куб. см помещают 30 куб. см дистиллированной воды и 10 куб. см концентрированной соляной кислоты, доводят до метки ацетонитрилом, перемешивают.
<a id="p100117"></a>7.4.2. Смесь ацетонитрил - вода - соляная кислота (объемное соотношение 189:10:1). В мерную колбу вместимостью 200 куб. см помещают 10 куб. см дистиллированной воды и 1 куб. см концентрированной соляной кислоты, доводят до метки ацетонитрилом, перемешивают.


### <a id="p100118"></a>7.5. Приготовление растворов для градуировки и внесения


<a id="p100119"></a>7.5.1. Исходный раствор МЦПА (концентрация 100 мкг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 0,0100 г МЦПА, доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают.
<a id="p100120"></a>Раствор хранится в холодильнике при 4 - 6 °C в течение 3 месяцев.
<a id="p100121"></a>7.5.2. Раствор N 1 МЦПА для внесения (концентрация 10 мкг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 10 куб. см исходного раствора МЦПА с концентрацией 100 мг/куб. см [(п. 7.5.1)](#p100119), разбавляют ацетоном до метки.
<a id="p100122"></a>Градуировочный раствор N 1 хранят в холодильнике при температуре 4 - 6 °C в течение месяца. Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом "внесено-найдено", а также контроля качества результатов измерений методом добавок.
<a id="p100123"></a>7.5.3. Исходный раствор бутилового эфира МЦПА для градуировки (концентрация МЦПА 10,0 мкг/куб. см). В круглодонную колбу вместимостью 50 куб. см помещают 5 куб. см исходного раствора МЦПА с концентрацией 100 мкг/куб. см [(п. 7.5.1)](#p100119), отдувают растворитель потоком теплого воздуха (помещая колбу на слабо подогретую водяную баню). В колбу с сухим остатком вносят 2 куб. см 2%-го раствора серной кислоты в н-бутаноле, плотно закрывают пробкой, укрепляемой фиксатором. Помещают в термостат, нагретый до 100 °C, выдерживают 1 ч. Далее колбу охлаждают до комнатной температуры, вносят 10 куб. см гексана и 20 - 25 куб. см дистиллированной воды. Смесь интенсивно встряхивают. После полного разделения фаз верхнюю гексановую фракцию отделяют, отбирая с помощью пипетки 2,5 куб. см и перенося в мерную колбу вместимостью 25 куб. см, доводят гексаном до метки, перемешивают. Исходный раствор бутилового эфира МЦПА с концентрацией МЦПА 10,0 мкг/куб. см хранится в холодильнике не более 10 дней.
<a id="p100124"></a>Растворы N 2 - 5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора бутилового эфира МЦПА.
<a id="p100125"></a>7.5.4. Рабочие растворы N 2 - 5 бутилового эфира МЦПА для градуировки (концентрация МЦПА 0,1 - 1,0 мкг/куб. см). В 4 мерные колбы вместимостью 100 куб. см помещают по 1; 2; 5 и 10 куб. см исходного раствора бутилового эфира МЦПА с концентрацией МЦПА 10 мкг/куб. см [(п. 7.5.3)](#p100123), доводят до метки гексаном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 5 с концентрацией МЦПА 0,1; 0,2; 0,5 и 1,0 мкг/куб. см соответственно.
<a id="p100126"></a>Растворы хранятся в холодильнике в течение 10 дней.


### <a id="p100127"></a>7.6. Установление градуировочной характеристики


<a id="p100128"></a>Градуировочную характеристику, выражающую линейную (с угловым коэффициентом) зависимость площади пика (мВ x с) от концентрации МЦПА в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки.
<a id="p100129"></a>В испаритель хроматографа вводят по 2 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 9.4](#p100153). Осуществляют не менее 3 параллельных измерений. Устанавливают площади пиков (мВ x с) бутилового эфира МЦПА.


## 8. <a id="p100130"></a>Отбор и хранение проб


<a id="p100131"></a>Отбор проб проводят в соответствии с требованиями: лен - [ГОСТ 10582-86](https://bukva.ai/docs/3979) "Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб", [ГОСТ 10582-76](https://bukva.ai/docs/gost-10582-76-gosstandart-sssr) "Семена льна масличного. Промышленное сырье. Технические условия", [ГОСТ 29142-91](https://bukva.ai/docs/gost-29142-91) "Семена масличных культур. Отбор проб"; масло - [ГОСТ Р 52062-2003](https://bukva.ai/docs/pravila-gost-r-52062-2003) "Масло растительное. Правила приемки и методы отбора проб", [ГОСТ 5791-81](https://bukva.ai/docs/gost-5791-81) "Масло льняное техническое. Технические условия" и Унифицированных [правил](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов (от 21.08.1979 N 2051-79).
<a id="p100132"></a>Семена подсушивают в темноте до постоянного веса и хранят в тканевых мешочках в сухом, защищенном от света месте при комнатной температуре не более 6 месяцев. Для длительного хранения образцы замораживают и хранят при температуре -18 °C. Перед анализом образцы семян измельчают.
<a id="p100133"></a>Пробы масла (помещенные в стеклянные флаконы) хранят в холодильнике в темноте.


## 9. <a id="p100134"></a>Выполнение определения



### <a id="p100135"></a>9.1. Семена льна



##### <a id="p100136"></a>9.1.1 Экстракция

<a id="p100137"></a>Пробу семян льна массой 25 г помещают в коническую колбу на 250 - 300 куб. см, добавляют 60 куб. см смеси ацетонитрил - вода - соляная кислота (160:30:10, по объему) и помещают на аппарат для встряхивания на 30 мин.
<a id="p100138"></a>Пробам дают отстояться, затем надосадочную жидкость фильтруют на воронке Бюхнера с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, через двойной фильтр "красная лента". В коническую колбу с пробой вносят новую порцию смеси ацетонитрил - вода - соляная кислота (160:30:10, по объему) объемом 30 куб. см и повторно экстрагируют на аппарате для встряхивания в течение 15 мин., затем раствор фильтруют на воронке Бюхнера. Фильтр дважды промывают смесью ацетонитрил - вода - соляная кислота (160:30:10, по объему) порциями по 10 куб. см.
<a id="p100139"></a>Объединенный отфильтрованный экстракт переносят в круглодонную колбу на 250 куб. см, упаривают до водного остатка (~ 15 - 20 куб. см) на ротационном испарителе при температуре водяной бани не выше 35 °C. Водный экстракт переносят в делительную воронку на 250 куб. см, добавляют 90 - 100 куб. см воды, предварительно ополоснув ею колбу, в которой находится остаток, и подвергают очистке по п. 9.1.2.

##### <a id="p100140"></a>9.1.2 Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей

<a id="p100141"></a>К экстракту, полученному по [пп. 9.1.1](#p100136) и [9.2.1](#p100147), добавляют 40 куб. см дихлорметана, встряхивают воронку в течение 2 мин. и после полного разделения слоев нижний органический слой собирают в химический стакан на 200 - 250 куб. см. Процедуру переэкстракции повторяют дважды дихлорметаном порциями по 30 куб. см, после водный слой отбрасывают.
<a id="p100142"></a>Объединенный дихлорметановый экстракт переносят в делительную воронку на 250 куб. см, добавляют 40 куб. см 5%-го водного раствора бикарбоната натрия, встряхивают воронку в течение 2 мин. и после полного разделения слоев верхний водный слой отделяют, собирая в химический стакан на 400 куб. см. Нижний дихлорметановый слой возвращают в делительную воронку, процедуру переэкстракции повторяют дважды 5%-м водным раствором бикарбоната натрия порциями по 40 куб. см, после дихлорметан отбрасывают.
<a id="p100143"></a>Объединенный водный экстракт переносят в делительную воронку на 250 куб. см, добавляют 30 куб. см гексана, интенсивно встряхивают в течение 2 мин. После разделения фаз верхний гексановый слой отбрасывают. Водный слой возвращают в воронку и повторяют процедуру очистки, используя новую порцию гексана (30 куб. см).
<a id="p100144"></a>Водную фазу подкисляют концентрированной соляной кислотой до pH = 2, контролируя его значения по индикаторной бумаге (Осторожно, вспенивание!), и возвращают в делительную воронку на 250 куб. см, добавляют 40 куб. см дихлорметана, встряхивают в течение 2 мин. (Осторожно, необходимо дегазировать смесь, периодически открывая кран воронки в процессе встряхивания!). После полного разделения слоев нижний органический слой фильтруют через слой безводного сульфата натрия, помещенный на бумажном фильтре в конусной воронке, в круглодонную колбу на 250 куб. см. Повторяют экстракцию дважды, используя по 40 куб. см дихлорметана.
<a id="p100145"></a>Объединенную органическую фракцию упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35 °C. Сухой остаток подвергают дериватизации по [п. 9.3](#p100150).


### <a id="p100146"></a>9.2. Масло льна



##### <a id="p100147"></a>9.2.1 Экстракция

<a id="p100148"></a>Образец масла массой 25 г помещают в коническую колбу вместимостью 250 - 300 куб. см, растворяют в 50 куб. см гексана, переносят в делительную воронку вместимостью 500 куб. см, добавляют 40 куб. см смеси ацетонитрил - вода - соляная кислота (189:10:1, по объему). Воронку интенсивно встряхивают 2 мин. После полного разделения фаз нижний слой осторожно декантируют через бумажный фильтр, помещенный в конусную воронку, в химический стакан вместимостью 250 куб. см. Экстракцию повторяют дважды смесью ацетонитрил - вода - соляная кислота (189:10:1, по объему), порциями по 30 куб. см.
<a id="p100149"></a>Объединенный экстракт переносят в круглодонную колбу на 250 куб. см, упаривают до водного остатка (~ 15 - 20 куб. см) на ротационном испарителе при температуре водяной бани не выше 35 °C. Водный экстракт переносят в делительную воронку на 250 куб. см, добавляют 90 - 100 куб. см воды, предварительно ополоснув ею колбу, в которой находится остаток, и подвергают очистке по [п. 9.1.2](#p100140).


### <a id="p100150"></a>9.3. Дериватизация


<a id="p100151"></a>В колбу с сухим остатком вносят 2 куб. см 2%-го раствора серной кислоты в н-бутаноле, плотно закрывают пробкой, укрепляемой фиксатором. Помещают в термостат, нагретый до 100 °C, выдерживают 1 ч. Далее колбу охлаждают до комнатной температуры, вносят 5 куб. см гексана и 15 - 20 куб. см дистиллированной воды. Смесь интенсивно встряхивают и выдерживают до полного разделения фаз. С помощью пипетки отбирают верхний гексановый слой, переносят в пробирку с пришлифованной пробкой вместимостью 5 - 10 куб. см, анализируют в условиях хроматографирования по [п. 9.4](#p100153).
<a id="p100152"></a>Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию МЦПА в хроматографируемом растворе.


### <a id="p100153"></a>9.4. Условия хроматографирования


<a id="p100154"></a>Хроматограф газовый с электронно-захватным детектором.
<a id="p100155"></a>Колонка капиллярная HP-5ms длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм, толщина пленки сорбента 0,25 мкм.
<a id="p100156"></a>    Температура детектора: 320 °C,
<a id="p100157"></a>                спарителя: 230 °C.
<a id="p100158"></a>Температура термостата колонки программированная. Начальная температура - 150 °C, выдержка 1 мин., нагрев колонки со скоростью 10 °/мин. до температуры 200 °C, выдержка 2 мин., затем нагрев колонки со скоростью 40 °/мин. до 280 °C, выдержка 4 мин.
<a id="p100159"></a>Газ 1 (азот): давление 125,0 кПа, 34,101 см/с, поток 1,2 куб. см/мин.
<a id="p100160"></a>Газ 2 (азот): деление потока 1:3; сброс 3,6 куб. см/мин.
<a id="p100161"></a>Хроматографируемый объем - 2 куб. мм.
<a id="p100162"></a>Ориентировочное время удерживания бутилового эфира МЦПА - 8,2 мин.
<a id="p100163"></a>Линейный диапазон детектирования: 0,2 - 2,0 нг.


## 10. <a id="p100164"></a>Обработка результатов анализа


<a id="p100165"></a>Содержание МЦПА в пробе (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:

                                    A x V
<a id="p100166"></a>                                X = -----,
                                      m

<a id="p100167"></a>где:
<a id="p100168"></a>X - содержание МЦПА в пробе, мг/кг;
<a id="p100169"></a>A - концентрация МЦПА, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика бутилового эфира МЦПА, мкг/куб. см;
<a id="p100170"></a>V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
<a id="p100171"></a>m - масса анализируемого образца, г.


## 11. <a id="p100172"></a>Проверка приемлемости результатов параллельных определений


<a id="p100173"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости:

                         2 x |X  - X | x 100
                               1    2
<a id="p100174"></a>                         ------------------- <= r,                      (1)
                              (X  + X )
                                1    2

    где:
    X , X  - результаты параллельных определений, мг/кг;
     1   2
 r - значение предела повторяемости [(табл. 1)](#p100021), при этом $r = 2,8\sigma_{r}$ .
<a id="p100175"></a>При невыполнении условия выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


## 12. <a id="p100176"></a>Оформление результатов


<a id="p100177"></a>Результат анализа представляют в виде:

<a id="p100178"></a> $(\overline{X} \pm \Delta)\text{мг}/\text{кг}$ при вероятности P = 0,95,

<a id="p100179"></a>где:
<a id="p100180"></a> $\overline{X}$ - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
<a id="p100181"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

<a id="p100182"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot X}{100} ,$ 

<a id="p100183"></a>где:
<a id="p100184"></a> $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100021)), %.
<a id="p100185"></a>Если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100186"></a>"содержание МЦПА в пробе семян и масла льна менее 0,02 мг/кг" <*>.

<a id="p100187"></a>

---

<a id="p100188"></a><*> 0,02 мг/кг - предел обнаружения МЦПА в пробах семян и масла льна соответственно.


## 13. <a id="p100189"></a>Контроль качества результатов измерений


<a id="p100190"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-(1-6)-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

#### <a id="p100191"></a>13.1 Контроль стабильности градуировочной характеристики.

<a id="p100192"></a>Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.
<a id="p100193"></a>При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее трех образцов концентраций для градуировки, содержание МЦПА в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,1 до 1,0 мкг/куб. см.
<a id="p100194"></a>Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:

                              (X - C) x 100
<a id="p100195"></a>                          A = ------------- <= 5,
                                    C

<a id="p100196"></a>где:
<a id="p100197"></a>X - концентрация МЦПА в пробе при контрольном измерении, мкг/куб. см;
<a id="p100198"></a>C - известная концентрация градуировочного раствора МЦПА, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/куб. см;
<a id="p100199"></a>5 - погрешность градуировочной характеристики, %.
<a id="p100200"></a>Если величина расхождения (A) превышает 5%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов тиабендазола, предусмотренных МВИ. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики устанавливают ее заново согласно [п. 7.6](#p100127).
<a id="p100201"></a>Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100202"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
<a id="p100203"></a>    Величина добавки C  должна удовлетворять условию:
                      д

<a id="p100204"></a> $C_{\text{д}} = \Delta_{\text{л},X} + \Delta_{\text{л},X\prime},$ 

<a id="p100205"></a>где:
<a id="p100206"></a> $\pm \Delta_{\text{л},X}( \pm \Delta_{\text{л},X\prime})$ - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:

<a id="p100207"></a> $\Delta_{\text{л}} = \mp 0,84\Delta,$ 

<a id="p100208"></a>где:

<div align="center">

<a id="p100209"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

</div>


<a id="p100210"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot X}{100} ,$ 

<a id="p100211"></a>где:
<a id="p100212"></a> $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100021)), %.
<a id="p100213"></a>    Результат контроля процедуры К  рассчитывают по формуле:
                                  к

                                  _    _
<a id="p100214"></a>                             К  = X' - X - C ,
                              к             д

    где:
    _   _
    X', X, C  - среднее арифметическое результатов параллельных определений
            д
(признанных приемлемыми по [п. 11](#p100172)) содержания компонента в образце с
добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки соответственно, мг/кг.

<div align="center">

<a id="p100215"></a>Норматив контроля К рассчитывают по формуле

</div>


<a id="p100216"></a> $\text{К } = \sqrt{\Delta_{\text{л},X\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},X}^{2}} .$ 

<a id="p100217"></a>    Проводят  сопоставление результата контроля процедуры (К ) с нормативом
                                                            к
контроля (К).
<a id="p100218"></a>    Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

<a id="p100219"></a>                                |К | <= К,                              (2)
                                  к

процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100220"></a>При невыполнении [условия (2)](#p100219) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
<a id="p100221"></a>13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
<a id="p100222"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R)

                         2 x |X  - X | x 100
                               1    2
<a id="p100223"></a>                         ------------------- <= R,                      (3)
                              (X  - X )
                                1    2

    где:
    X , X  - результаты измерений, выполненных в условиях воспроизводимости
     1   2
(разное время, разные операторы, разные лаборатории), мг/кг;
    R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций,

<div align="center">

[табл. 1](#p100021)), %.

</div>



## 14. <a id="p100224"></a>Разработчики


<a id="p100225"></a>ФБУН "Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана" Роспотребнадзора.



<a id="p100226"></a>

---