МУК 4.1.2976-12. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение массовой концентрации 2,7-бис-[2-(диэтиламино)этокси]-9Н-флуорен-9-она дигидрохлорида (амиксин, тилорон, тилаксин) в воздухе рабочей зоны методом спектрофотометрии. Методические указания

(утв. Роспотребнадзором 21.02.2012)

21 февраля 2012 года

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ИЗМЕРЕНИЕ МАССОВОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ 2,7-БИС-[2-(ДИЭТИЛАМИНО)ЭТОКСИ]-9Н-ФЛУОРЕН-9-ОНА ДИГИДРОХЛОРИДА (АМИКСИН, ТИЛОРОН, ТИЛАКСИН) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ СПЕКТРОФОТОМЕТРИИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

с момента утверждения

1. Методические указания разработаны Учреждением Российской академии медицинских наук «Научно-исследовательский институт медицины труда» РАМН.

2. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 21 февраля 2012 г.

3. Введены в действие с 21 февраля 2012 г.

4. Введены впервые.

Введение

Сборник методических указаний «Измерение концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны» (выпуск 53) разработан с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) и является обязательным при осуществлении санитарного надзора (контроля).

Включенные в данный сборник методические указания по контролю вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.016-79 «Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных веществ» (с изм. 1), ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ. «Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны» с изм. 1, ГОСТ Р 8.563-09 «Государственная система обеспечения единства измерений. Методики (методы) измерений», ГОСТ Р ИСО 5725-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

Методики выполнены с использованием современных методов исследования, метрологически аттестованы и дают возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и ниже их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в гигиенических нормативах ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны» и ГН 2.2.5.2308-07 «Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны» и дополнениях к ним.

Методические указания по измерению массовых концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны предназначены для лабораторий центров гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также научно-исследовательских институтов и других заинтересованных организаций.

1. Общие положения

Настоящие методические указания устанавливают метод количественного химического анализа воздуха рабочей зоны для определения в нем амиксина в диапазоне массовых концентраций 0,2 — 1,2 мг/куб. м методом спектрофотометрии. Погрешности измерений соответствуют характеристикам, приведенным в табл. 1.

Таблица 1

МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ МЕТОДИКИ ВЫПОЛНЕНИЯ ИЗМЕРЕНИЙ

Методика аттестована в соответствии с требованиями ГОСТ Р 8.563-09 и ГОСТ Р ИСО 5725-2002. Свидетельство о государственной метрологической аттестации выдано ФГУП Всероссийским научно-исследовательским институтом метрологической службы Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии (N 01.00225/205-23-11 от 25.04.2011).

2. Характеристика вещества

2.1 Структурная формула (не приводится).

2.2 Эмпирическая формула: C H № O x 2HCl.

                            25 34 2 3

2.3 Молекулярная масса: 483,5.

2.4 Регистрационный номер CAS: 27591-69-1.

2.5 Физико-химические свойства.

Амиксин — мелкокристаллический порошок оранжевого цвета, без запаха, гигроскопичен, с температурой плавления 233 — 235 °C. Легко растворим в воде, растворим в спирте этиловом 96%-м и метиловом спирте, практически нерастворим в гексане.

Агрегатное состояние в воздухе — аэрозоль.

2.6 Токсикологическая характеристика.

Амиксин — низкомолекулярный индуктор интерферона, относящийся к классу флуоренов, противовирусное и иммуномодулирующее средство, умеренно опасное вещество при введении в желудок, малотоксичен при введении в брюшную полость, оказывает умеренное местное раздражающее действие на слизистые оболочки и кожу, обладает способностью проникать через кожные покровы и функциональной кумулятивной активностью.

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) амиксина в воздухе рабочей зоны 0,4 мг/куб. м.

3. Метрологические характеристики МВИ

При соблюдении всех регламентных условий и проведении анализа в точном соответствии с прописью методика обеспечивает выполнение измерений массовых концентраций амиксина с метрологическими характеристиками, не превышающими значений, представленных в табл. 1 (при доверительной вероятности P = 0,95).

4. Метод измерений

Измерения массовых концентраций амиксина выполняют методом спектрофотометрии.

Метод определения основан на способности растворов амиксина в спирте этиловом 96%-м поглощать УФ-излучение.

Нижний предел измерения содержания амиксина в анализируемом объеме пробы — 10 мкг.

Нижний предел измерения массовой концентрации амиксина в воздухе — 0,2 мг/куб. м (при отборе 50 куб. дм воздуха).

Метод специфичен в условиях производства таблеток амиксина. Определению не мешают: крахмал картофельный, целлюлоза микрокристаллическая, поливинилпирролидон низкомолекулярный, кальция стеарат, натрия карбоксиметилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, титана диоксид, полисорбат 80 (твин 80), которые в качестве вспомогательных веществ входят в состав таблетной массы и оболочки препарата «Амиксин».

5. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы.

5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы

Спектрофотометр Specord M-40, Carl Zeiss, -1

диапазон измерений (54000 - 11000) см  ,
воспроизводимость волновых чисел +/- 1,5%          N 9457-84 в

                                               Государственном реестре
                                               средств измерений

Весы лабораторные ВЛА-200 ГОСТ Р 53228-2008

Аспирационное устройство, ПУ-4Э ЗАО «ХИМКО» ТУ 4215-000 — 11696625-2003 № 14531-03 в Государственном реестре средств измерений

Фильтродержатели                                   ТУ 95.72.05-77
Фильтры АФА-ВП-10                                  ТУ 95-743-80

Колбы мерные 2-50-2, 2-100-2 ГОСТ 1770-74

Пипетки вместимостью 1-1-2-1, 1-1-2-5, 1-1-2-10, 1-1-2-25 ГОСТ 29227-91

Пробирки мерные с пришлифованными пробками, П-2-10-0,1ХС ГОСТ 1770-74

Бюксы стеклянные СВ 19/19, СВ 24/10 ГОСТ 25336-82

Фильтры бумажные обеззоленные «белая лента», диаметр 5,5 см ТУ 6-09-1678-77

Палочки стеклянные ГОСТ 25336-82

Воронки химические, В-30-50 ХС ГОСТ 25336-82

Секундомер                                         ГОСТ 5072-79
Дистиллятор                                        ТУ 61-1-721-79

5.2. Реактивы

Амиксин с содержанием основного вещества

Спирт этиловый 96%-й ГОСТ Р 51723-01

Допускается применение иных средств измерений, вспомогательных устройств, реактивов и материалов с техническими и метрологическими характеристиками и квалификацией не хуже приведенных в данном разделе.

6. Требования безопасности

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами, по ГОСТ 12.1.007-76 и 12.1.005-88 (с изм. 1).

6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ должны соблюдаться требования противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91. Должны быть в наличии средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-90. Необходимо провести обучение работающих правилам безопасности труда согласно ГОСТ 12.0.004-90.

6.3. При выполнении измерений с использованием спектрофотометра соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-09 и инструкцией по эксплуатации прибора.

6.4. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313-03 и 2.2.5.2308-07.

7. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются лица, имеющие высшее или специальное химическое образование, опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой спектрофотометрического анализа, освоившие метод анализа в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы контроля при проведении процедур контроля погрешности анализа.

8. Условия измерений

8.1. Процессы приготовления растворов и подготовку проб к анализу проводят в стандартных условиях при температуре воздуха (20 +/- 5) °C, атмосферном давлении 84 — 106 кПа и относительной влажности воздуха не более 80%.

8.2. Выполнение измерений на спектрофотометре проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовку спектрофотометра, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

9.1. Приготовление растворов

9.1.1 Основной стандартный раствор амиксина.

Основной стандартный раствор амиксина с массовой концентрацией 1000 мкг/куб. см готовят растворением (0,1000 +/- 0,0001) г амиксина в спирте этиловом 96%-м в мерной колбе вместимостью 100 куб. см. Раствор устойчив в течение месяца при хранении в холодильнике.

9.1.2 Рабочий стандартный раствор амиксина № 1.

Рабочий стандартный раствор амиксина № 1 с массовой концентрацией 200 мкг/куб. см готовят разбавлением 10 куб. см основного стандартного раствора спиртом этиловым 96%-м в мерной колбе вместимостью 50 куб. см. Раствор устойчив в течение двух недель при хранении в холодильнике.

9.1.3 Рабочий стандартный раствор амиксина № 2.

Рабочий стандартный раствор амиксина № 2 с массовой концентрацией 100 мкг/куб. см готовят разбавлением 25 куб. см рабочего стандартного раствора № 1 спиртом этиловым 96%-м в мерной колбе вместимостью 50 куб. см. Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.

9.2. Подготовка прибора

Подготовку спектрофотометра проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.

9.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость оптической плотности раствора от массы амиксина, устанавливают по шести сериям растворов из пяти параллельных определений в каждой серии согласно табл. 2.

Таблица 2

РАСТВОРЫ ДЛЯ УСТАНОВЛЕНИЯ ГРАДУИРОВОЧНОЙ ХАРАКТЕРИСТИКИ ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ АМИКСИНА

Градуировочные растворы устойчивы в течение суток.

На фильтры АФА-ВП-10, помещенные в химические бюксы, пипеткой вместимостью 1 куб. см наносят стандартные растворы амиксина № 1 и 2 в соответствии с табл. 2. Фильтры подсушивают на воздухе, приливают по 5 куб. см спирта этилового 96%-го и оставляют на 15 мин., периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр тщательно отжимают, растворы сливают в мерные пробирки с пришлифованными пробками вместимостью 10 куб. см. Фильтры повторно обрабатывают 5 куб. см спирта этилового 96%-го, оставляют на 15 мин., периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества, затем тщательно отжимают и удаляют. Растворы объединяют и доводят объем спиртом этиловым 96%-м до 10 куб. см.

Оптическую плотность получаемых градуировочных растворов измеряют в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм при длине волны 271 нм по отношению к раствору сравнения, не содержащему определяемого вещества (табл. 2, раствор № 1).

Строят градуировочную характеристику: на ось абсцисс наносят содержания амиксина в градуировочных растворах (мкг), на ось ординат — соответствующие им значения оптической плотности градуировочных растворов.

9.4. Контроль стабильности градуировочной характеристики

Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят не реже 1 раза в квартал, а также при смене реактивов и изменении условий анализа (после ремонта и поверки прибора). Один раз в год градуировочную характеристику устанавливают заново.

Для контроля стабильности используют вновь приготовленные градуировочные растворы с массовой концентрацией амиксина в начале, середине и в конце диапазона измерений и анализируют в точном соответствии с прописью методики.

Градуировочную характеристику считают стабильной, если для каждого контрольного образца выполняется условие:

                      |D    - D  | x 100
                        изм    гр
                      ------------------ <= K  ,                        (1)
                              D              гр

                           гр

где:

D , D — значение оптической плотности образца для контроля,

 изм    гр

измеренное и найденное по градуировочной характеристике соответственно;

    K   - норматив контроля, K   = 0,5 x дельта,
     гр                       гр

где +/- дельта — границы относительной погрешности, % (табл. 1).

Если условие стабильности не выполняется только для одного образца, то выполняют повторное измерение этого образца с целью исключения результата, содержащего грубую ошибку.

Если градуировочная характеристика нестабильна, выясняют причины нестабильности и повторяют контроль стабильности с использованием других образцов для установления градуировочной характеристики, предусмотренных методикой. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики ее устанавливают заново.

9.5. Отбор проб воздуха

Отбор проб следует проводить с учетом требований ГОСТ 12.1.005-88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны» (с изм. 1) и Р 2.2.2006-05 (прилож. 9, обязательное) «Общие методические требования к организации и проведению контроля содержания вредных веществ в воздухе рабочей зоны», п. 2. Контроль соответствия максимальным ПДК.

Одновременно отбирают две параллельные пробы.

Воздух с объемным расходом 5,0 куб. дм/мин аспирируют через фильтры АФА-ВП-10, помещенные в фильтродержатели, которые установлены в два параллельных канала аспирационного устройства.

Для измерения 1/2 ОБУВ следует отобрать 50 куб. дм воздуха в течение 10 мин. Пробы можно хранить в бюксах с пришлифованными крышками в течение трех суток в холодильнике.

10. Выполнение измерения

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический бюкс вместимостью 25 куб. см, приливают 5 куб. см спирта этилового 96%-го и оставляют на 15 мин., периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр тщательно отжимают, раствор сливают в другой бюкс. Фильтр повторно обрабатывают 5 куб. см того же растворителя, оставляют на 15 мин., периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества, затем тщательно отжимают и удаляют. Оба раствора последовательно фильтруют на химической воронке через бумажный фильтр «белая лента» в мерную пробирку с пришлифованной пробкой вместимостью 10 куб. см и далее доводят спиртом этиловым 96%-м до 10 куб. см.

Оптическую плотность получаемых анализируемых растворов измеряют в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм при длине волны 271 нм по отношению к раствору сравнения, используя чистый фильтр АФА-ВП-10. Раствор сравнения необходимо предварительно профильтровать через фильтр «белая лента».

Количественное определение содержания амиксина проводят по предварительно построенной градуировочной характеристике.

Примечание: фильтрование растворов анализируемых проб проводится для удаления нерастворимых в спирте этиловом 96%-м вспомогательных веществ, входящих в состав таблеток амиксина: крахмал картофельный, целлюлоза микрокристаллическая, кальция стеарат, натрия карбоксиметилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, титана диоксид, полисорбат 80 (твин 80).

11. Вычисление результатов измерений

Массовую концентрацию амиксина С, мг/куб. м, в воздухе рабочей зоны вычисляют по формуле:

                                a

C = ---, (2) V 20

где:

a — содержание амиксина, найденное в анализируемом объеме раствора по градуировочной характеристике, мкг;

V — объем воздуха, отобранный для анализа (куб. дм) и приведенный к 20 стандартным условиям (Прилож. 1).

За результат измерений принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, если выполняется условие приемлемости:

                       2 x |C  - C | x 100
                             1    2

------------------- <= r, (3) (C + C )

                           1    2

где:

    C ,  C   -  результаты  параллельных  определений массовой концентрации
     1    2

амиксина в воздухе рабочей зоны, мг/куб. м;

r — значение предела повторяемости, % (табл. 1).

Если условие (3) не выполняется, выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и повторяют выполнение измерений в соответствии с требованиями методики измерений.

12. Оформление результатов анализа

Результат количественного химического анализа представляют в виде:

              _                     _

_

C — среднее арифметическое значение результатов n определений, признанных приемлемыми по п. 11, мг/куб. м;

+/- дельта — границы относительной погрешности измерений, % (табл. 1).

В случае, если полученный результат измерений ниже нижней (выше верхней) границы диапазона измерений, то производят следующую запись в журнале: «массовая концентрация амиксина менее 0,2 мг/куб. м (более 1,2 мг/куб. м)».

13. Контроль результатов измерений

13.1. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости

Проверку приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости проводят:

а) при возникновении спорных ситуаций между двумя лабораториями;

б) при проверке совместимости результатов измерений, полученных при сличительных испытаниях (при проведении аккредитации лабораторий и инспекционного контроля).

Для проведения проверки приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости каждая лаборатория использует пробы, оставленные на хранение.

    Приемлемость  результатов  измерений,  полученных  в двух лабораториях,
оценивают  сравнением  разности  этих  результатов  с критической разностью
CD     по формуле:

0,95

                  2 x (C    - C   | x 100
                        ср1    ср2
                  ----------------------- <= CD    ,                    (4)
                       (C    + C   )           0,95
                         ср1    ср2

    C   ,   C      -   средние  значения  массовой  концентрации  амиксина,
     ср1     ср2

полученные в первой и второй лабораториях, мг/куб. м.

CD — значение критической разности, % (табл. 1). 0,95

Если критическая разность не превышена, то приемлемы оба результата измерений, проводимых двумя лабораториями, и в качестве окончательного результата используют их среднеарифметическое значение. Если критическая разность превышена, то выполняют процедуры, изложенные в ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 (5.3.3).

13.2. Контроль качества результатов измерений при реализации методики в лаборатории

Контроль качества результатов измерений в лаборатории при реализации методики осуществляют по ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002, используя контроль стабильности среднеквадратического (стандартного) отклонения повторяемости по п. 6.2.2 ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 и показателя правильности по п. 6.2.4 ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002. Проверку стабильности осуществляют с применением контрольных карт Шухарта.

Периодичность контроля стабильности результатов выполнения измерений регламентируют в руководстве по качеству лаборатории.

Рекомендуется устанавливать контролируемый период так, чтобы количество результатов контрольных измерений было от 20 до 30.

При неудовлетворительных результатах контроля, например при превышении предела действия или регулярном превышении предела предупреждения, выясняют причины этих отклонений, в том числе проводят смену реактивов, проверяют работу оператора.

14. Нормы затрат времени на анализ

Для проведения серии анализов из 6 проб требуется 2 ч 30 мин. (без учета времени отбора пробы).

Методические указания разработаны ОАО «Всероссийский научный центр по безопасности биологически активных веществ» («ВНЦ БАВ»).

Приложение 1

ПРИВЕДЕНИЕ ОБЪЕМА ВОЗДУХА К СТАНДАРТНЫМ УСЛОВИЯМ

Приведение объема воздуха к стандартным условиям при температуре 293 K (20 °C) и атмосферном давлении 101,33 кПа (760 мм рт. ст.):

                             V  x 293 x P
                              1

                         V   = ------------------,
                          20   (273 + t) x 101,33

где:

V — объем воздуха, отобранный для анализа, куб. дм; 1

P — барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);

Для  удобства  расчета V    следует пользоваться таблицей коэффициентов

                        20

(Прилож. 2). Для приведения воздуха к стандартным условиям надо умножить V на соответствующий коэффициент. 1

Приложение 2

КОЭФФИЦИЕНТЫ ДЛЯ ПРИВЕДЕНИЯ ОБЪЕМА ВОЗДУХА К СТАНДАРТНЫМ УСЛОВИЯМ

Приложение 3

УКАЗАТЕЛЬ ОСНОВНЫХ СИНОНИМОВ, ТЕХНИЧЕСКИХ, ТОРГОВЫХ И ФИРМЕННЫХ НАЗВАНИЙ ВЕЩЕСТВ

Акриловая кислота