---
title: "\"МУК 4.1.2914-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методика измерений остаточного содержания дифлюфеникана в воде, почве, зерне и соломе хлебных злаков методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2914-11"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2914-11"
---

## "МУК 4.1.2914-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методика измерений остаточного содержания дифлюфеникана в воде, почве, зерне и соломе хлебных злаков методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.2914-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методика измерений остаточного содержания дифлюфеникана в воде, почве, зерне и соломе хлебных злаков методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 12.07.2011)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 12 июля 2011 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

12 июля 2011 года


#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**МЕТОДИКА**
**ИЗМЕРЕНИЙ ОСТАТОЧНОГО СОДЕРЖАНИЯ ДИФЛЮФЕНИКАНА**
**В ВОДЕ, ПОЧВЕ, ЗЕРНЕ И СОЛОМЕ ХЛЕБНЫХ ЗЛАКОВ МЕТОДОМ**
**КАПИЛЛЯРНОЙ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="right">

**МУК 4.1.2914-11**

<a id="p100002"></a>Дата введения:

</div>

с момента утверждения

1. <a id="p100006"></a>Разработаны Всероссийским научно-исследовательским институтом фитопатологии.
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 02.06.2011 N 1).
3. <a id="p100008"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 12 июля 2011 г.
4. <a id="p100009"></a>Введены в действие с момента утверждения.
5. <a id="p100010"></a>Введены впервые.

<a id="p100011"></a>Введение

<a id="p100012"></a>Дифлюфеникан - контактный персистентный гербицид из класса пиридинкарбоксамидов. Механизм действия связан с подавлением биосинтеза каротиноидов. Эффективен в борьбе с прорастающими широколистными и злаковыми сорными растениями, включая виды подмаренника, вероники и фиалки, в посевах озимой пшеницы, ячменя и люпина. Применяется до всходов или сразу же после появления всходов культурных растений.
<a id="p100013"></a>Проходит регистрационные испытания в Российской Федерации в качестве гербицида в составе смесевых препаратов на посевах зерновых колосовых культур с нормой расхода до 180 г д.в./га.

1. <a id="p100014"></a>Общие положения

<a id="p100015"></a>Свидетельство о метрологической аттестации от 11.01.2011 N 01.00225/1-11.
<a id="p100016"></a>Настоящий документ устанавливает процедуру измерений массовой концентрации дифлюфеникана в воде в диапазоне 0,0001 - 0,0010 мг/куб. дм, массовой доли дифлюфеникана в почве и зерне в диапазоне 0,01 - 0,10 мг/кг, в соломе в диапазоне 0,05 - 0,50 мг/кг методом капиллярной газожидкостной хроматографии.
<a id="p100017"></a>Название вещества по ИСО: Дифлюфеникан.
<a id="p100018"></a>Название вещества по ИЮПАК: 2',4'-дифтор-2-(альфа,альфа,альфа-трифтор-м-толилокси)никотинанилид.
<a id="p100019"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100020"></a>    C  H  F N O .
     19 11 5 2 2
<a id="p100021"></a>    Мол. масса: 394,3.
<a id="p100022"></a>    Белое  кристаллическое  вещество.  Температура  плавления 159 - 161 °C.
                                       -3
Давление   паров  при  25 °C: 4,25 x 10   мПа.  Коэффициент   распределения
н-октанол/вода:   K   log P = 4,9.  Растворимость  (г/куб.  дм)  при 25 °C:
                   ow
вода  -   < 0,00005,   ацетон   и   диметилформамид -  100,   ксилол -  20,
циклогексан - 10.
<a id="p100023"></a>    Вещество  устойчиво  к  фотолизу и  гидролизу в  кислых,  нейтральных и
щелочных условиях.
<a id="p100024"></a>    В  биологически  активных   почвах  в  аэробных  условиях  дифлюфеникан
разлагается медленно (значение DT   колеблется от 86 до 282 дней).
                                 50

2. <a id="p100025"></a>Метрологические характеристики

<a id="p100026"></a>При соблюдении всех регламентированных условий и проведении анализа в точном соответствии с данной методикой значение погрешности (и ее составляющих) результатов измерений не превышает значений, приведенных в табл. 1.

<a id="p100027"></a>Таблица 1


<table>
<colgroup><col width="9%"><col width="15%"><col width="15%"><col width="14%"><col width="15%"><col width="13%"><col width="18%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый объект</td><td>Диапазон измерений содержания дифлюфеникана, мг/куб. дм, мг/кг</td><td>Показатель точности (границы относительной погрешности), +/- дельта, % при P = 0,95</td><td>Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), сигма , % r</td><td>Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадратическое отклонение воспроизводимости), сигма , % R</td><td>Предел повторяемости, r, %, P = 0,95, n = 2</td><td>Критическая разность для результатов анализа, полученных в двух лабораториях, CD , % 0,95 (n = n = 2) 1 2</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Вода</td><td>От 0,00010 до 0,0005 вкл.</td><td>80</td><td>21</td><td>32</td><td>58</td><td>78,5</td></tr>
<tr><td>Св. 0,0005 до 0,0010 вкл.</td><td>55</td><td>12</td><td>18</td><td>33</td><td>44</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Почва</td><td>От 0,010 до 0,05 вкл.</td><td>60</td><td>15</td><td>22</td><td>42</td><td>53</td></tr>
<tr><td>Св. 0,05 до 0,10 вкл.</td><td>45</td><td>9</td><td>18</td><td>25</td><td>47</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Зерно</td><td>От 0,010 до 0,05 вкл.</td><td>50</td><td>12</td><td>18</td><td>33</td><td>44</td></tr>
<tr><td>Св. 0,05 до 0,10 вкл.</td><td>30</td><td>8</td><td>12</td><td>22</td><td>29</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Солома</td><td>От 0,05 до 0,10 вкл.</td><td>50</td><td>12</td><td>18</td><td>33</td><td>44</td></tr>
<tr><td>Св. 0,10 до 0,5 вкл.</td><td>40</td><td>9</td><td>14</td><td>25</td><td>35</td></tr>
</table>


3. <a id="p100037"></a>Метод измерений

<a id="p100038"></a>Метод основан на экстракции дифлюфеникана из воды смесью гексан-этилацетат (1:1, по объему), из почвы, зерна и соломы водным ацетоном, очистке экстрактов, содержащих дифлюфеникан, от коэкстрактивных компонентов перераспределением в системе несмешивающихся растворителей, с последующим измерением содержания дифлюфеникана в очищенных экстрактах методом капиллярной газожидкостной хроматографии (ГЖХ) при программировании температуры с электронозахватным детектором (ЭЗД) и обработкой хроматограмм методом абсолютной градуировки.

<div align="center">

4. <a id="p100039"></a>Средства измерений, вспомогательные устройства,

</div>

реактивы и материалы


#### <a id="p100040"></a>4.1 Средства измерений


<a id="p100041"></a>Газовый хроматограф "Кристалл 2000М"
с ЭЗД (СКБ "Хроматэк", Россия)
(номер Госреестра N 14516-95)
<a id="p100042"></a>Весы аналитические Sartorius 6110
с наибольшим пределом взвешивания до 110 г
и пределом допустимой погрешности 0,0001 г ГОСТ 24104-2001
<a id="p100043"></a>Весы лабораторные Metler P-160 с наибольшим
пределом взвешивания до 160 г и пределом
допустимой погрешности 0,005 г ГОСТ 24104-2001
<a id="p100044"></a>Набор гирь ГОСТ 7328-2001
<a id="p100045"></a>Колбы мерные вместимостью 2-100-2; 2-1000-2 [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100046"></a>Пипетки градуированные 1-1-2-1; 1-1-2-2;
1-2-2-5; 1-2-2-10 [ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91)
<a id="p100047"></a>Пробирки градуированные с пришлифованной
пробкой П-2-5-0,1; П-2-10-0,2 [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100048"></a>Цилиндры мерные 1-25; 1-50; 1-100;

<div align="center">

1-500; 1-1000 [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)

</div>

<a id="p100049"></a>Микрошприц МШ-1Ф                                            ТУ 64-1-2850


#### <a id="p100050"></a>4.2 Реактивы


<a id="p100051"></a>Дифлюфеникан (CAS 83164-33-4) с содержанием
основного вещества не менее 99,1%,
аналитический стандарт (Байер, Германия)
<a id="p100052"></a>Ацетон, квалификации ч.д.а. ГОСТ 2603-79
<a id="p100053"></a>Вода дистиллированная или деионизированная ГОСТ 6709-79
<a id="p100054"></a>н-Гексан, квалификации х.ч.                                 ТУ 6-09-3375-78
<a id="p100055"></a>Калий углекислый, квалификации х.ч. [ГОСТ 4221-76](https://bukva.ai/docs/standart-gost-4221-76)
<a id="p100056"></a>Калия перманганат, квалификации х.ч. ГОСТ 20490-75
<a id="p100057"></a>Кальция хлорид, квалификации х.ч.                           ГОСТ 4161-77
<a id="p100058"></a>Кислота серная, квалификации х.ч. ГОСТ 4204-77
<a id="p100059"></a>Натрий углекислый, квалификации х.ч.                        ГОСТ 83-63
<a id="p100060"></a>Натрий сернокислый, безводный,
квалификации х.ч. [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76)
<a id="p100061"></a>Этиловый эфир уксусной кислоты
(этилацетат), ч [ГОСТ 22300-76](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76)


#### <a id="p100062"></a>4.3 Вспомогательные устройства, материалы


<a id="p100063"></a>Азот газообразный (баллон), квалификации ос.ч. ГОСТ 9293-74
<a id="p100064"></a>Аппарат для встряхивания проб АВУ-6с                        ТУ 64-1-2851-78
<a id="p100065"></a>Ванна ультразвуковая, модель D-50, фирма
Branson Instr. Co. (США)
<a id="p100066"></a>Дистиллятор Cyclon III, модель 4 BD (Fistreem,
Великобритания)
<a id="p100067"></a>Установка Elgastat B 114 с патроном Elgacan
B 114 для получения деионизированной воды
(Elga, Великобритания)
<a id="p100068"></a>Воронка Бюхнера ГОСТ 9147-80
<a id="p100069"></a>Воронки делительные вместимостью 100 и 250 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100070"></a>Воронки лабораторные стеклянные ГОСТ 25336-82
<a id="p100071"></a>Колба Бунзена ГОСТ 25336-82
<a id="p100072"></a>Колбы плоскодонные вместимостью 250 куб. см [ГОСТ 9737-93](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
<a id="p100073"></a>Колбы круглодонные на шлифе вместимостью
10 и 100 куб. см [ГОСТ 9737-93](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
<a id="p100074"></a>Колонка хроматографическая капиллярная
кварцевая ZB-5 (типа SE-52), длина 30 м,
внутренний диаметр 0,32 мм, толщина пленки
0,5 мкм, фирма "Phenomenex" (США),
или аналогичная
<a id="p100075"></a>Мельница лабораторная электрическая                         ТУ 46-22-236-84
<a id="p100076"></a>Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М                      ТУ 25-11-917-76
или ротационный вакуумный испаритель
B-169 фирмы Buchi (Швейцария)
<a id="p100077"></a>Стаканы химические вместимостью 100 и 500 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100078"></a>Установка для перегонки растворителей
с дефлегматором [ГОСТ 9737-93](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
                                                            (ИСО 641-75)
<a id="p100079"></a>Фильтры бумажные "красная лента"
обеззоленные                                                ТУ 6-09-2678-77
<a id="p100080"></a>Допускается применение других средств измерений, вспомогательных устройств, реактивов и материалов с техническими и метрологическими характеристиками, аналогичными приведенным в разделе 4.

5. <a id="p100081"></a>Требования безопасности

<a id="p100082"></a>5.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.007-76, 12.1.005-88.
<a id="p100083"></a>5.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ соблюдают требования противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91, и должны быть в наличии средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-90.
<a id="p100084"></a>5.3. При выполнении измерений с использованием хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.
<a id="p100085"></a>5.4. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313-03 и 2.2.5.2308-07.

<div align="center">

6. <a id="p100086"></a>Требования к квалификации операторов

</div>


<a id="p100087"></a>К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются специалисты, имеющие высшее или специальное химическое образование, опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой проведения анализа, освоившие метод анализа в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы контроля при проведении процедуры контроля погрешности анализа.

<div align="center">

7. <a id="p100088"></a>Требования к условиям измерений

</div>


<a id="p100089"></a>При выполнении измерений соблюдают следующие условия.

#### <a id="p100090"></a>7.1 Условия приготовления растворов и подготовки проб к анализу:

- <a id="p100091"></a>температура воздуха (20 +/- 5) °C;
- <a id="p100092"></a>атмосферное давление 84 - 106 кПа;
- <a id="p100093"></a>относительная влажность воздуха не более 80%.

#### <a id="p100094"></a>7.2 Условия хроматографического анализа

<a id="p100095"></a>Температура термостата испарителя 270 °C;
<a id="p100096"></a>Температура детектора 300 °C.
<a id="p100097"></a>Режим программирования температуры колонки:
- <a id="p100098"></a>начальная температура 150 °C;
- <a id="p100099"></a>изотермический режим при 150 °C - 2 мин.;
- <a id="p100100"></a>скорость подъема температуры:
<a id="p100101"></a>в диапазоне от 150 до 260 °C - 25 °C/мин.;
<a id="p100102"></a>в диапазоне от 260 до 270 °C - 5 °C/мин.;
- <a id="p100103"></a>изотермический режим при 270 °C - 6 мин.;
- <a id="p100104"></a>скорость подъема температуры:
<a id="p100105"></a>в диапазоне от 270 до 280 °C - 10 °C/мин.;
- <a id="p100106"></a>изотермический режим при 280 °C - 5 мин.
<a id="p100107"></a>Расход газов:
- <a id="p100108"></a>газа-носителя (азот) 2,4 куб. см/мин.;
- <a id="p100109"></a>поддувочного газа через детектор 25 куб. см/мин.
<a id="p100110"></a>Деление потока: 1:4.
<a id="p100111"></a>Объем вводимой пробы: 1 куб. мм.
<a id="p100112"></a>Время удерживания дифлюфеникана: (10,2 +/- 0,2) мин.
<a id="p100113"></a>Линейный диапазон детектирования: 0,002 - 0,040 нг.

<div align="center">

8. <a id="p100114"></a>Подготовка к выполнению измерений

</div>


<a id="p100115"></a>Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики.


#### <a id="p100116"></a>8.1 Очистка органических растворителей



##### <a id="p100117"></a>8.1.1 Очистка н-гексана


<a id="p100118"></a>Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до прекращения окрашивания последней в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом. Срок хранения - 1 неделя.


##### <a id="p100119"></a>8.1.2 Очистка этилацетата


<a id="p100120"></a>Этилацетат промывают последовательно 5%-м водным раствором карбоната натрия, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над безводным карбонатом калия и перегоняют. Срок хранения - 1 неделя.


##### <a id="p100121"></a>8.1.3 Очистка ацетона


<a id="p100122"></a>    Ацетон  перегоняют  над  перманганатом  калия и  поташом  (на 1 куб. дм
ацетона 10 г KMnO  и 2 г K CO ). Срок хранения - 1 неделя.
                 4        2  3


#### <a id="p100123"></a>8.2 Подготовка и кондиционирование

хроматографической колонки

<a id="p100124"></a>Капиллярную кварцевую колонку ZB-5 (типа SE-52) устанавливают в термостат хроматографа и, не подсоединяя к детектору, кондиционируют при температуре 280 °C и скорости газа-носителя 2 куб. см/мин. в течение 8 - 10 ч.


#### <a id="p100125"></a>8.3 Приготовление градуировочных растворов



##### <a id="p100126"></a>8.3.1 Исходный градуировочный раствор дифлюфеникана

с массовой концентрацией 100 мкг/куб. см

<a id="p100127"></a>В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают (0,0100 +/- 0,0001) г дифлюфеникана, растворяют в 40 куб. см этилацетата, доводят объем раствора этилацетатом до метки, тщательно перемешивают.
<a id="p100128"></a>Раствор хранят при температуре не выше минус 18 °C в течение 3 месяцев.


##### <a id="p100129"></a>8.3.2 Градуировочный раствор дифлюфеникана с массовой

концентрацией 1 мкг/куб. см (раствор N 1)

<a id="p100130"></a>В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 1,0 куб. см исходного градуировочного раствора дифлюфеникана с концентрацией 100 мкг/куб. см [(п. 8.3.1)](#p100126), разбавляют этилацетатом до метки. Этот раствор используют для приготовления градуировочных растворов N 2 - 5.
<a id="p100131"></a>Градуировочный раствор N 1 дифлюфеникана хранят при температуре не выше минус 18 °C в течение месяца.


##### <a id="p100132"></a>8.3.3 Градуировочные растворы дифлюфеникана с массовой

концентрацией 0,002 - 0,02 мкг/куб. см (растворы N 2 - 5)

<a id="p100133"></a>В 4 мерные колбы вместимостью 100 куб. см помещают 0,2; 0,4; 1,0 и 2,0 куб. см градуировочного раствора N 1 дифлюфеникана с концентрацией 1,0 мкг/куб. см [(п. 8.3.2)](#p100129), доводят объем раствора до метки смесью гексан-этилацетат (1:1, по объему), тщательно перемешивают, получают градуировочные растворы N 2 - 5 с массовой концентрацией дифлюфеникана 0,002; 0,004; 0,01 и 0,02 мкг/куб. см, соответственно.
<a id="p100134"></a>Растворы готовят непосредственно перед использованием.


#### <a id="p100135"></a>8.4 Градуировка хроматографа


<a id="p100136"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (мВ x с) от массовой концентрации дифлюфеникана в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 градуировочным растворам [(п. 8.3.3)](#p100132).
<a id="p100137"></a>В инжектор хроматографа вводят по 1 куб. мм каждого градуировочного раствора [(п. 8.3.3)](#p100132) и анализируют при условиях хроматографирования по [п. 7.2](#p100094). Осуществляют не менее 3 параллельных измерений. Расхождение между параллельными определениями не должно превышать предела повторяемости r.
<a id="p100138"></a>По полученным данным строят градуировочную характеристику.


#### <a id="p100139"></a>8.5 Контроль стабильности градуировочной характеристики


<a id="p100140"></a>Контроль стабильности градуировки проводят не реже 1 раза в три месяца, а также при смене реактивов или изменении условий анализа.
<a id="p100141"></a>Для контроля стабильности используют вновь приготовленные градуировочные растворы с массовой концентрацией исследуемого вещества в начале, середине и в конце диапазона измерений, которые анализируют в точном соответствии с методикой.
<a id="p100142"></a>Градуировочную характеристику считают стабильной, если для каждого контрольного образца выполняется условие (1):

                         |S    - S  |
                           изм    гр
<a id="p100143"></a>                         ----------- x 100 <= К  ,                      (1)
                              S                гр
                               гр

<a id="p100144"></a>    где:
<a id="p100145"></a>    S   , S   - значение площади пика дифлюфеникана в образце для контроля,
     изм   гр
измеренное и  найденное по  градуировочной  характеристике  соответственно,
усл. ед.;
<a id="p100146"></a>    К   - норматив контроля,
     гр

<a id="p100147"></a>                              К   = 0,5 x дельта,
                               гр

<a id="p100148"></a> где +/- дельта - границы относительной погрешности, % [(табл. 1)](#p100027).
<a id="p100149"></a>Если условие стабильности не выполняется только для одного образца, то повторно анализируют этот образец для исключения результата, содержащего грубую ошибку.
<a id="p100150"></a>Если градуировка нестабильна, выясняют причины нестабильности и повторяют контроль стабильности с использованием других образцов для градуировки, предусмотренных методикой. При повторном обнаружении нестабильности градуировки прибор градуируют заново.

9. <a id="p100151"></a>Отбор, подготовка и хранение проб

<a id="p100152"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (от 21.08.79 N 2051-79) и правилами, определенными [ГОСТ Р 51592-2000](https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-51592-2000) "Вода. Общие требования к отбору проб", [17.4.3.01-83](https://bukva.ai/docs/gost-17-4-3-01-83) "Почвы. Общие требования к отбору проб", [28168-89](https://bukva.ai/docs/gost-28168-89) "Почвы. Отбор проб", [13586.3-83](https://bukva.ai/docs/gost-13586-3-83) "Зерно. Правила приемки и методы отбора проб", Р [50436-92](https://bukva.ai/docs/gost-r-50436-92) "Зерновые. Отбор проб зерна", [27262-87](https://bukva.ai/docs/gost-27262-87) "Корма растительного происхождения. Методы отбора проб".
<a id="p100153"></a>Пробы воды анализируют в день отбора или замораживают и хранят в полиэтиленовой таре при температуре минус 18 °C не более 2 недель.
<a id="p100154"></a>Образцы почвы подсушивают на воздухе в темноте, помещают в герметичную полиэтиленовую тару и хранят в холодильнике при температуре 4 - 6 °C не более 4 недель. Для длительного хранения образцы почвы замораживают и хранят при температуре минус 18 °C.
<a id="p100155"></a>Пробы зерна и соломы подсушивают до стандартной влажности (в соответствии с [ГОСТ 10852-86](https://bukva.ai/docs/3979)) и хранят в бумажных или тканевых мешочках в сухом, хорошо проветриваемом шкафу, недоступном для грызунов.


#### <a id="p100156"></a>9.1 Экстракция


<a id="p100157"></a>9.1.1. Вода. В делительную воронку вместимостью 250 куб. см помещают 100 куб. см отфильтрованной воды, добавляют 30 куб. см смеси гексан-этилацетат (1:1, по объему) и воронку интенсивно встряхивают в течение 2 мин. После разделения фаз верхний органический слой отделяют и фильтруют через слой безводного сульфата натрия в круглодонную колбу. Водную фазу экстрагируют указанной выше смесью еще дважды порциями по 20 куб. см. Объединенную органическую фракцию упаривают досуха на роторном вакуумном испарителе при температуре не выше 40 °C. Сухой остаток растворяют в 5 куб. см смеси гексан-этилацетат (1:1, по объему), раствор помещают в ультразвуковую ванну на 1 мин. и анализируют на содержание дифлюфеникана по [п. 10](#p100163).
<a id="p100158"></a>9.1.2. Почва. Образец воздушно-сухой почвы массой 20 г помещают в плоскодонную колбу вместимостью 250 куб. см, добавляют 100 куб. см смеси ацетон-вода (8:2, по объему), перемешивают и колбу помещают на встряхиватель на 40 мин. Суспензию фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу Бунзена вместимостью 250 куб. см. Почву повторно экстрагируют 50 куб. см смеси ацетон-вода (8:2, по объему) в течение 30 мин. при встряхивании и фильтруют. Измеряют объем объединенного экстракта и 1/10 его часть, эквивалентную 2 г образца, переносят в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см, куда приливают 25 куб. см дистиллированной воды. Далее проводят очистку экстракта по [п. 9.2](#p100160).
<a id="p100159"></a>9.1.3. Зерно, солома. Образец размолотого зерна (10 г) или соломы (5 г) помещают в плоскодонную колбу вместимостью 250 куб. см, приливают 20 куб. см дистиллированной воды и спустя 10 мин. 80 куб. см ацетона. Суспензию перемешивают в течение 40 мин. на аппарате для встряхивания и фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу Бунзена вместимостью 250 куб. см. Осадок на фильтре промывают 50 куб. см смеси ацетон-вода (8:2, по объему). Экстракт и промывную жидкость переносят в химический стакан, перемешивают, измеряют объем раствора и 1/10 его часть, эквивалентную 1 г зерна или 0,5 г соломы, переносят в круглодонную колбу, куда приливают 25 куб. см дистиллированной воды. Далее проводят очистку экстракта по п. 9.2.


#### <a id="p100160"></a>9.2 Очистка экстракта перераспределением в системе

несмешивающихся растворителей

<a id="p100161"></a>Отобранные аликвоты экстрактов почвы, зерна и соломы, полученные по [пп. 9.1.2](#p100158) и [9.1.3](#p100159) и помещенные в круглодонные колбы, упаривают на ротационном вакуумном испарителе до водного остатка (не менее 20 куб. см) при температуре не выше 40 °C. Водный остаток переносят в делительную воронку вместимостью 100 куб. см, приливают 30 куб. см смеси гексан-этилацетат (1:1, по объему) и содержимое интенсивно встряхивают в течение 2 мин. После разделения фаз органический слой фильтруют через слой безводного сульфата натрия в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см. Операцию экстракции водной фазы повторяют еще дважды, используя по 20 куб. см смеси гексан-этилацетат (1:1, по объему). Объединенную органическую фракцию упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 40 °C. Остаток экстракта почвы растворяют в 10 куб. см, экстракта зерна в 5 куб. см, экстракта соломы в 12,5 куб. см смеси гексан-этилацетат (1:1, по объему), помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., и растворы анализируют на содержание дифлюфеникана по [п. 10](#p100163).
<a id="p100162"></a>Полнота извлечения дифлюфеникана при проведении всех операций подготовки пробы не менее 89% для образцов почвы, зерна и соломы и не менее 95% для образцов воды.

10. <a id="p100163"></a>Выполнение измерений

<a id="p100164"></a>10.1. В инжектор хроматографа вводят 1 куб. мм очищенного экстракта анализируемой пробы ([пп. 9.1](#p100156), [9.2](#p100160)), анализируют при условиях [(п. 7.2)](#p100094) и регистрируют хроматограмму. Каждый экстракт хроматографируют дважды.
<a id="p100165"></a>10.2. Для каждого образца воды, почвы, зерна и соломы повторяют операции по [пп. 9.1](#p100156), [9.2](#p100160), [10.1](#p100164).

11. <a id="p100166"></a>Обработка результатов измерений

<a id="p100167"></a>11.1. Для обработки результатов хроматографического анализа используется программа сбора и обработки хроматографической информации "Хроматэк Аналитик", версия 1.20.
<a id="p100168"></a>Альтернативная обработка результатов.
<a id="p100169"></a>По градуировочной характеристике находят значение массовой концентрации дифлюфеникана в экстрактах, C, мкг/куб. см.
<a id="p100170"></a>Массовую концентрацию дифлюфеникана X (мг/куб. дм) в образцах воды рассчитывают по формуле (2):

                                 C x V
                                      экстр
<a id="p100171"></a>                             X = ------------                           (2)
                                 0,95 x V
                                         воды

<a id="p100172"></a>    Массовую долю дифлюфеникана X (мг/кг) в образцах почвы,  зерна и соломы
рассчитывают по формуле (3):

                                  C x V
                                       экстр
<a id="p100173"></a>                              X = ----------,                           (3)
                                  0,89 x m

<a id="p100174"></a>    где:
<a id="p100175"></a>    C - значение   массовой    концентрации   дифлюфеникана  в   экстракте,
мкг/куб. см;
<a id="p100176"></a>    V      - объем   экстракта,  подготовленного  для  хроматографирования,
     экстр
куб. см;
<a id="p100177"></a>    m - масса анализируемой части образца, соответствующая доле  экстракта,
<a id="p100178"></a>использованной для очистки и последующего хроматографического  определения,
г;
<a id="p100179"></a>    V     - объем  анализируемой части  образца воды, взятой на экстракцию,
     воды
куб. см;
<a id="p100180"></a>0,89 и 0,95 - коэффициент извлечения дифлюфеникана, учитывающий все процедуры подготовки пробы.
<a id="p100181"></a>11.2. За результат измерений принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, если выполняется условие приемлемости (4):

                         2 x |X  - X | x 100
                               1    2
<a id="p100182"></a>                         ------------------- <= r,                      (4)
                              (X  + X )
                                1    2

<a id="p100183"></a>    где:
<a id="p100184"></a>    X , X  - результаты   параллельных  определений  массовой  концентрации
     1   2
(доли) дифлюфеникана, мг/куб. дм (мг/кг);
<a id="p100185"></a>r - значение предела повторяемости, % [(табл. 1)](#p100027).
<a id="p100186"></a>Если [условие (4)](#p100182) не выполняется, выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и повторяют выполнение измерений в соответствии с требованиями МВИ.

#### <a id="p100187"></a>11.3 Результат анализа в документах, предусматривающих его использование, представляют в виде:


                  _                     _
<a id="p100188"></a>                  X +/- 0,01 x дельта x Х, при P = 0,95,

<a id="p100189"></a>    где:
    _
<a id="p100190"></a>    X - среднее   арифметическое   значение   результатов  n   определений,
признанных приемлемыми по [п. 11.2](#p100181), мг/куб. дм (мг/кг);
<a id="p100191"></a>+/- дельта - границы относительной погрешности измерений, % [(табл. 1)](#p100027).
<a id="p100192"></a>В случае, если полученный результат измерений ниже нижней (выше верхней) границы диапазона измерений, то производят следующую запись в журнале:
<a id="p100193"></a>"массовая концентрация дифлюфеникана в воде менее 0,0001 мг/куб. дм (более 0,0010 мг/куб. дм)";
<a id="p100194"></a>"массовая доля дифлюфеникана в почве менее 0,01 мг/кг (более 0,10 мг/кг)";
<a id="p100195"></a>"массовая доля дифлюфеникана в зерне менее 0,01 мг/кг (более 0,10 мг/кг)";
<a id="p100196"></a>"массовая доля дифлюфеникана в соломе менее 0,05 мг/кг (более 0,50 мг/кг)".
<a id="p100197"></a>Экстракты, при хроматографировании которых получают аналитический сигнал дифлюфеникана, превышающий аналитический сигнал, получаемый при хроматографировании градуировочного раствора с массовой концентрацией 0,02 мкг/куб. см, разбавляют и анализируют в соответствии с данной методикой.

<div align="center">

12. <a id="p100198"></a>Проверка приемлемости результатов измерений,

</div>

полученных в условиях воспроизводимости


#### <a id="p100199"></a>12.1 Проверку приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости проводят:

<a id="p100200"></a>а) при возникновении спорных ситуаций между двумя лабораториями;
<a id="p100201"></a>б) при проверке совместимости результатов измерений, полученных при сличительных испытаниях (при проведении аккредитации лабораторий и инспекционного контроля).
<a id="p100202"></a>12.2. Для проведения проверки приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости каждая лаборатория использует пробы, оставленные на хранение.
<a id="p100203"></a>    12.3. Приемлемость    результатов    измерений,   полученных   в   двух
лабораториях, оценивают  сравнением разности этих результатов с критической
разностью CD     по формуле (5):
            0,95

                      2 x |C    - C   | x 100
                            ср1    ср2
<a id="p100204"></a>                      ----------------------- <= CD    ,                (5)
                           (C    + C   )           0,95
                             ср1    ср2

<a id="p100205"></a>    где:
<a id="p100206"></a>    C   , C    - средние значения массовой концентрации (доли),  полученные
     ср1   ср2
в первой и второй лабораториях, мг/куб. дм (мг/кг);
<a id="p100207"></a> CD - значение критической разности, % [(табл. 1)](#p100027).
      0,95
<a id="p100208"></a>Если критическая разность не превышена, то приемлемы оба результата измерений, проводимых двумя лабораториями, и в качестве окончательного результата используют их среднеарифметическое значение. Если критическая разность превышена, то выполняют процедуры, изложенные в ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 [(5.3.3)](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002#p100287).
<a id="p100209"></a>При разногласиях руководствуются ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 [(5.3.4)](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002#p100294).

<div align="center">

13. <a id="p100210"></a>Контроль качества результатов измерений

</div>

при реализации методики в лаборатории

<a id="p100211"></a>Контроль качества результатов измерений в лаборатории при реализации методики осуществляют по [ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002) ("Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений"), используя контроль стабильности среднеквадратического (стандартного) отклонения повторяемости по [п. 6.2.2](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002#p100341) ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 и показателя правильности по [п. 6.2.4](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002#p100518) ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002. Проверку стабильности осуществляют с применением контрольных карт Шухарта.
<a id="p100212"></a>Периодичность контроля стабильности результатов выполнения измерений регламентируют в Руководстве по качеству лаборатории.
<a id="p100213"></a>Рекомендуется устанавливать контролируемый период так, чтобы количество результатов контрольных измерений было от 20 до 30.
<a id="p100214"></a>При неудовлетворительных результатах контроля, например при превышении предела действия или регулярном превышении предела предупреждения, выясняют причины этих отклонений, в том числе проводят смену реактивов, проверяют работу оператора.

14. <a id="p100215"></a>Разработчики

<a id="p100216"></a>Разработаны Всероссийским научно-исследовательским институтом фитопатологии.



<a id="p100217"></a>

---