---
title: "\"МУК 4.1.2907-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств прогексадиона-кальция в воде, почве, плодах и соке яблок методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2907-11"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2907-11"
---

## "МУК 4.1.2907-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств прогексадиона-кальция в воде, почве, плодах и соке яблок методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.2907-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств прогексадиона-кальция в воде, почве, плодах и соке яблок методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 12.07.2011)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 12 июля 2011 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

12 июля 2011 года


#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ**
**ПРОГЕКСАДИОНА-КАЛЬЦИЯ В ВОДЕ, ПОЧВЕ, ПЛОДАХ И СОКЕ ЯБЛОК**
**МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.2907-11**

<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения:

</div>

с момента утверждения

1. <a id="p100006"></a>Разработаны сотрудниками ГНУ Всероссийского НИИ защиты растений Россельхозакадемии.
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 02.06.2011 N 1).
3. <a id="p100008"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 12 июля 2011 г.
4. <a id="p100009"></a>Введены в действие с момента утверждения.
5. <a id="p100010"></a>Введены впервые.

<a id="p100011"></a>Настоящий документ устанавливает методику определения остаточных количеств прогексадиона-кальция в воде в диапазоне концентраций 0,001 - 0,01 мг/куб. дм, в почве, в плодах и соке яблок в диапазоне концентраций 0,01 - 0,1 мг/кг.
<a id="p100012"></a>Действующее вещество: прогексадион-кальций.
<a id="p100013"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100014"></a>Кальция 3-оксидо-5-оксо-4-пропионилциклогекса-3-енкарбоксилат (IUPAC).
<a id="p100015"></a>Молекулярная масса: 250,3.
<a id="p100016"></a>    Брутто формула: C  H  CaO .
                     10 10   5
<a id="p100017"></a>    Химически  чистое  вещество  представляет  собой  мелкодисперсный белый
порошок без запаха.
<a id="p100018"></a>    Температура плавления: > 360 °C.
                            -2
<a id="p100019"></a>    Давление пара: 1,33 x 10   мРа (20 °C).
<a id="p100020"></a>    Коэффициент распределения в системе н-октанол-вода: K   log P = -2,90.
                                                         ow
<a id="p100021"></a>    Растворимость в воде (мг/куб. дм, 20 °C): 174.
<a id="p100022"></a>    Растворимость в органических растворителях (мг/куб. дм, 20 °C): метанол
- 1,11; ацетон - 0,038.
<a id="p100023"></a>    Стабилен  в  водных  растворах  (DT    составляет  5  дней при pH 5,0 и
                                       50
температуре  20  °C и 83 дня при pH 9,0). Устойчив к нагреванию до 200 °C и
воздействию солнечного света; pKa 5,15.
<a id="p100024"></a>    Краткая  токсикологическая  характеристика: острая оральная токсичность
для  крыс и мышей > 5000 мг/кг.  При  подкожном введении крысам LD   > 2000
                                                                  50
мг/кг.  Оказывает  слабое  раздражающее действие на глаза, но не раздражает
кожу  (кролики). Ингаляционная токсичность для крыс LC   составляет 4,21 мг
                                                      50
на 1 л воздуха.
<a id="p100025"></a>Область применения: регулятор роста растений. Используется в качестве средства от полегания мелкозерновых злаков. Также может быть использован как замедлитель роста дерна, земляных орехов и цветов или для ингибирования удлинения новых побегов фруктовых деревьев.
<a id="p100026"></a>В России для прогексадиона-кальция гигиенические нормативы не установлены.


## 1. <a id="p100027"></a>Метрологическая характеристика метода


<a id="p100028"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1, для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100029"></a>Таблица 1

<a id="p100030"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ**


<table>
<colgroup><col width="12%"><col width="19%"><col width="24%"><col width="15%"><col width="11%"><col width="19%"></colgroup>
<tr><td>Объект анализа</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/куб. дм)</td><td>Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), сигма , % r</td><td>Показатель внутрилабораторной прецизионности, сигма , % Rл</td><td>Показатель воспроизводимости, сигма , R %</td><td>Показатель точности &lt;*&gt; (границы относительной погрешности), +/- дельта, %</td></tr>
<tr><td>Вода</td><td>0,001 - 0,010</td><td>5</td><td>6</td><td>7</td><td>15</td></tr>
<tr><td>Почва</td><td>0,01 - 0,10</td><td>6</td><td>8</td><td>9</td><td>18</td></tr>
<tr><td>Яблоки</td><td>0,01 - 0,10</td><td>5</td><td>12</td><td>15</td><td>25</td></tr>
<tr><td>Яблочный сок</td><td>0,01 - 0,10</td><td>5</td><td>7</td><td>8</td><td>16</td></tr>
<tr><td colspan="6">&lt;*&gt; Соответствует расширенной неопределенности U при коэффициенте отн. охвата k = 2.</td></tr>
</table>



## 2. <a id="p100037"></a>Метод измерения


<a id="p100038"></a>Методика основана на определении прогексадиона-кальция по свободной кислоте прогексадиону методом ВЭЖХ с использованием УФ-детектора после его твердофазной экстракции из воды или жидкостной экстракции из твердых образцов и яблочного сока с последующей очисткой экстрактов на концентрирующих патронах, заполненных силикагелем.
<a id="p100039"></a>Идентификация прогексадиона проводится по времени удерживания, количественное определение - методом абсолютной калибровки.
<a id="p100040"></a>Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования.


## 3. <a id="p100041"></a>Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы



### <a id="p100042"></a>3.1. Средства измерений


<a id="p100043"></a>Жидкостный хроматограф "ACQUITY"
фирмы "Waters" с быстросканирующим
УФ-детектором, снабженный дегазатором,
автоматическим пробоотборником
и термостатом колонки
<a id="p100044"></a>Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 24104-2001
<a id="p100045"></a>Весы технические ВЛКТ-500 ГОСТ 24104-2001
<a id="p100046"></a>Колбы мерные на 10, 100 и 1000 куб. см ГОСТ 23932-90
<a id="p100047"></a>Микродозаторы Ленпипет переменного объема
от 200 до 1000 куб. мм и от 1 до 5 куб. см,
вид климатического исполнения УХЛЧ.2 [ГОСТ 50444](https://bukva.ai/docs/standart-1552)
<a id="p100048"></a>Пипетки градуированные объемом 1, 2, 5
и 10 куб. см [ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91)
<a id="p100049"></a>Цилиндры мерные на 50 и 100 куб. см ГОСТ 23932-90
<a id="p100050"></a>Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.


### <a id="p100051"></a>3.2. Реактивы


<a id="p100052"></a>Ацетонитрил для ВЭЖХ, "В-230НМ" или х.ч.            ТУ 6-09-3534-87
<a id="p100053"></a>Вода дистиллированная ГОСТ 6709-72
<a id="p100054"></a>Гексан, х.ч.                                        ТУ 2631-003-05807999-98
<a id="p100055"></a>Дихлорметан, х.ч.                                   ТУ 6-09-2662-77
<a id="p100056"></a>Метанол, х.ч. [ГОСТ 6995-77](https://bukva.ai/docs/standart-gost-6995-77)
<a id="p100057"></a>Метилен хлористый, х.ч.                             ТУ 2631-019-44493179-98
                                                    с изм. 1, 2, 3
<a id="p100058"></a>Натрий сернокислый безводный, ч.,
свежепрокаленный [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76)
<a id="p100059"></a>Прогексадион с содержанием основного
вещества 99,6% (Reg. N 217602, Batch L73-10)
<a id="p100060"></a>Серная кислота, ос.ч. [ГОСТ 14262-78](https://bukva.ai/docs/standart-gost-14262-78)
<a id="p100061"></a>Трифторуксусная кислота, ч.                         ТУ 6-09-3877-80
<a id="p100062"></a>Допускается использование реактивов квалификации не ниже указанной.


### <a id="p100063"></a>3.3. Вспомогательные устройства и материалы


<a id="p100064"></a>Аналитическая колонка ACQUITY UPLC BEH
C18 (100 x 2,1) мм, 1,7 мкм (Waters)
<a id="p100065"></a>Бидистиллятор
<a id="p100066"></a>Вакуумный манипулятор для работы
с патронами для твердофазной экстракции
(Waters, кат. N WAT 200677)
<a id="p100067"></a>Воронки лабораторные В-75-110 ГОСТ 25336-82
<a id="p100068"></a>Воронки делительные объемом 250 и 500 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100069"></a>Воронка Бюхнера                                     ГОСТ 0147
<a id="p100070"></a>Гомогенизатор                                       МРТУ 42-1505-5-63
<a id="p100071"></a>Колбы плоскодонные на шлифах КШ 250 29/32 ТС ГОСТ 25336-82
<a id="p100072"></a>Колбы-концентраторы емкостью 100 и 250 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100073"></a>Насос водоструйный                                  ГОСТ 10696-75
<a id="p100074"></a>Патроны Диапак С16 (Биохиммак) 0,4 г
<a id="p100075"></a>Патроны, заполненные силикагелем 60
(0,040 - 0,063 мм) (Merck, Германия) 0,5 г
<a id="p100076"></a>Ротационный вакуумный испаритель фирмы
BUCHI, мод. R 205
<a id="p100077"></a>Стаканы химические объемом 100, 200 и 500 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100078"></a>Ультразвуковая баня "Сапфир"
<a id="p100079"></a>Фильтры бумажные "красная лента"                    ТУ 6.091678-86
<a id="p100080"></a>Допускается использование другого вспомогательного оборудования с техническими характеристиками не хуже указанных.


## 4. <a id="p100081"></a>Требования безопасности


<a id="p100082"></a>4.1. При проведении работы необходимо соблюдать требования техники безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами (ГОСТ 12.1.005, 12.1.007). Организация обучения работников безопасности труда по ГОСТ 12.0.004.
<a id="p100083"></a>При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа и работе с электроустановками соблюдать правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкциями по эксплуатации приборов.
<a id="p100084"></a>4.2. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией, соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны".


## 5. <a id="p100085"></a>Требования к квалификации операторов


<a id="p100086"></a>Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по [п. 13](#p100173).


## 6. <a id="p100087"></a>Условия измерений


<a id="p100088"></a>При выполнении измерений выполняют следующие условия:
- <a id="p100089"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100090"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


## 7. <a id="p100091"></a>Подготовка к определению



### <a id="p100092"></a>7.1. Кондиционирование колонки


<a id="p100093"></a>Перед началом анализа колонку (Acquity BEH C18) кондиционируют в потоке подвижной фазы (0,1 - 0,2 куб. см/мин.) до стабилизации нулевой линии.


### <a id="p100094"></a>7.2. Приготовление растворов


<a id="p100095"></a>7.2.1. Приготовление 0,05%-го раствора трифторуксусной кислоты: в мерную колбу вместимостью 1 куб. дм помещают 200 куб. см воды для ВЭЖХ, прибавляют 0,5 куб. см трифторуксусной кислоты и доводят объем до метки водой для ВЭЖХ.
<a id="p100096"></a>7.2.2. Приготовление подвижной фазы: в мерную колбу вместимостью 1 куб. дм помещают 250 куб. см ацетонитрила и доводят объем до метки раствором 0,05% трифторуксусной кислоты.
<a id="p100097"></a>7.2.3. Приготовление 1 М раствора серной кислоты: в мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 900 куб. см воды, прибавляют 56,5 куб. см концентрированной серной кислоты, осторожно перемешивают и доводят объем до метки водой.


#### <a id="p100098"></a>7.3 Приготовление основного и градуировочных растворов


<a id="p100099"></a>7.3.1. Основной раствор с концентрацией 0,1 мг/куб. см: точную навеску прогексадиона (10 +/- 0,1) мг помещают в мерную колбу вместимостью 100 куб. см, растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки тем же растворителем.
<a id="p100100"></a>Градуировочные растворы с концентрациями 0,1, 0,2, 0,5, 0,75 и 1,0 мкг/куб. см готовят методом последовательного разбавления по объему, используя раствор подвижной фазы.
<a id="p100101"></a>7.3.2. Раствор N 1 с концентрацией 1,0 мкг/куб. см: в мерную колбу вместимостью 100 куб. см вносят 1 куб. см основного раствора и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100102"></a>7.3.3. Раствор N 2 с концентрацией 0,75 мкг/куб. см: в мерную колбу вместимостью 10 куб. см вносят 7,5 куб. см раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100103"></a>7.3.4. Раствор N 3 с концентрацией 0,5 мкг/куб. см: в мерную колбу вместимостью 10 куб. см помещают 5,0 куб. см раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100104"></a>7.3.5. Раствор N 4 с концентрацией 0,2 мкг/куб. см: в мерную колбу вместимостью 10 куб. см помещают 2,0 куб. см раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100105"></a>7.3.6. Раствор N 5 с концентрацией 0,1 мкг/куб. см: в мерную колбу вместимостью 10 куб. см помещают 1,0 куб. см раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
<a id="p100106"></a>Основной раствор можно хранить в холодильнике при температуре 0 - 4 °C в течение 1 недели, градуировочные растворы - в течение суток.
<a id="p100107"></a>При изучении полноты определения для внесения в матрицу используют ацетонитрильные растворы прогексадиона с концентрациями 1,0 и 10,0 мкг/куб. см, которые готовят из основного стандартного раствора [(п. 7.3.1)](#p100099) с концентрацией 0,1 мг/куб. см методом последовательного разбавления ацетонитрилом.


### <a id="p100108"></a>7.2. Приготовление элюента для твердофазной экстракции


<a id="p100109"></a>В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 1 куб. см трифторуксусной кислоты и доводят объем до метки метанолом.


### <a id="p100110"></a>7.3. Построение градуировочного графика


<a id="p100111"></a>Для установления градуировочной характеристики (площадь пика - концентрация прогексадиона в растворе) в хроматограф вводят по 10 куб. мм градуировочных растворов (не менее 3 параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4 точек по диапазону измеряемых концентраций). Затем измеряют площади пиков и строят график зависимости среднего значения площади пика от концентрации прогексадиона в градуировочном растворе.
<a id="p100112"></a>Методом наименьших квадратов рассчитывают градуировочный коэффициент (K) в уравнении линейной регрессии:

<a id="p100113"></a>**C = KS,**

<a id="p100114"></a>где S - площадь пика градуировочного раствора.
<a id="p100115"></a>Градуировку признают удовлетворительной, если значение коэффициента линейной корреляции оказывается не ниже 0,99.
<a id="p100116"></a>Градуировочную характеристику необходимо проверять при замене реактивов, хроматографической колонки или элементов хроматографической системы, а также при отрицательном результате контроля градуировочного коэффициента.
<a id="p100117"></a>Градуировочную зависимость признают стабильной при выполнении следующего условия:

                      |C - C |
                            к
<a id="p100118"></a>                      -------- x 100 <= лямбда      ,
                         C                    контр.

    где:
    C  -  аттестованное  значение  массовой   концентрации прогексадиона  в
градуировочном растворе;
    C   -  результат   контрольного    измерения    массовой   концентрации
     к
прогексадиона в градуировочном растворе;
    лямбда        -  норматив  контроля   градуировочного  коэффициента,  %
          контр.
(лямбда       = 10% при P = 0,95).
       контр.


### <a id="p100119"></a>7.4. Подготовка патронов для твердофазной экстракции


<a id="p100120"></a>7.4.1. Подготовка патронов Диапак С16. Непосредственно перед употреблением через патрон последовательно пропускают по 2 куб. см ацетонитрила и воды.
<a id="p100121"></a>7.4.2. Подготовка патронов, заполненных силикагелем. Непосредственно перед употреблением через патрон пропускают 2,5 куб. см дихлорметана.


## 8. <a id="p100122"></a>Отбор проб и хранение


<a id="p100123"></a>Отбор проб производится в соответствии с ГОСТ 29168-89 "Почвы. Отбор проб", [ГОСТ Р 51592-2000](https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-51592-2000) "Вода. Общие требования к отбору проб". Для длительного хранения пробы почвы подсушивают при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы могут храниться в течение года. Перед анализом сухую почву доводят до стандартной влажности, просеивают через сито с отверстиями 1 мм.
<a id="p100124"></a>Отбор проб яблок производится в соответствии с [ГОСТ 27572-87](https://bukva.ai/docs/gost-27572-87) "Яблоки свежие для промышленной переработки". Пробы яблок хранят в морозильной камере при температуре не выше -18 °C в течение 10 месяцев. Перед анализом пробы яблок гомогенизируют. Пробы яблочного сока хранят до анализа в морозильной камере при температуре не выше -18 °C в течение месяца, в холодильнике при температуре 0 - 4 °C в герметичной упаковке в течение недели.


## 9. <a id="p100125"></a>Проведение определения



### <a id="p100126"></a>9.1. Определение прогексадиона в воде


<a id="p100127"></a>К 50 куб. см воды прибавляют 25 куб. мм трифторуксусной кислоты и пропускают через патрон Диапак С16. Фильтрат отбрасывают. Прогексадион элюируют 3 куб. см ацетонитрила. Элюат упаривают досуха на вакуумном ротационном испарителе при температуре бани не выше 40 °C. Сухой остаток растворяют в 0,5 куб. см подвижной фазы. Вводят в хроматограф 10 куб. мм полученного раствора.


### <a id="p100128"></a>9.2. Определение прогексадиона в яблочном соке


<a id="p100129"></a>К (20 +/- 0,1) г сока прибавляют 10 куб. мм трифторуксусной кислоты и 30 куб. см воды. Полученный раствор фильтруют на воронке Бюхнера через бумажный фильтр ("красная лента"). Фильтрат помещают в делительную воронку на 250 куб. см и промывают дважды порциями по 25 куб. см гексана, встряхивая воронку каждый раз в течение 1 - 2 мин. Верхний органический слой отбрасывают. Прогексадион экстрагируют тремя порциями по 25 куб. см дихлорметана, встряхивая воронку каждый раз по 2 мин. и собирая нижний органический слой. Объединенный экстракт фильтруют через слой безводного натрия сернокислого в колбу-концентратор и упаривают до объема 2 куб. см на вакуумном ротационном испарителе при температуре водяной бани не выше 40 °C. Остаток количественно переносят в откондиционированный патрон, заполненный силикагелем. Фильтрат отбрасывают. Патрон промывают 2 куб. см смеси метанол-метилен хлористый в соотношении 50:50. Прогексадион элюируют 2 куб. см 1%-го раствора трифторуксусной кислоты в метаноле, приготовленного по [п. 7.4](#p100119). Элюат упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 2 куб. см подвижной фазы и 10 куб. мм полученного раствора вводят в хроматограф.


### <a id="p100130"></a>9.3. Определение прогексадиона в почве и плодах яблок


<a id="p100131"></a>В коническую колбу вместимостью 250 куб. см помещают (10 +/- 0,1) г образца и экстрагируют 50 куб. см смеси метанола с 1 М серной кислотой в соотношении 9:1 в ультразвуковой бане в течение 15 мин. Массу фильтруют на воронке Бюхнера через бумажный фильтр "красная лента". Экстракцию повторяют. Объединенный экстракт упаривают на вакуумном ротационном испарителе при температуре водяной бани не выше 40 °C до полного удаления метанола. Объем водного остатка доводят до 50 куб. см. Дальнейшую обработку проводят по [п. 9.2](#p100128), начиная с процедуры промывки пробы в делительной воронке двумя порциями гексана по 25 куб. см. Сухой остаток, полученный на последней стадии, растворяют в 1 куб. см подвижной фазы и 10 куб. мм полученного раствора вводят в хроматограф.


### <a id="p100132"></a>9.4. Условия хроматографирования


<a id="p100133"></a>Ультраэффективный жидкостный хроматограф "ACQUITY" фирмы Waters с быстросканирующим УФ-детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки. Аналитическая колонка ACQUITY UPLC BEH C18 (2,1 x 100) мм, 1,7 мкм (Waters). Температура колонки (30 +/- 1) °C. Подвижная фаза: смесь ацетонитрила и 0,05% трифторуксусной кислоты в соотношении 25:75. Скорость потока элюента: 0,2 куб. см/мин. Рабочая длина волны УФ-детектора 270 нм. Объем вводимой пробы 10 куб. мм.
<a id="p100134"></a>Время удерживания прогексадиона (4,4 +/- 0,1) мин.
<a id="p100135"></a>Линейный диапазон детектирования сохраняется в интервале концентраций 0,1 - 1,0 мкг/куб. см.


## 10. <a id="p100136"></a>Обработка результатов анализа


<a id="p100137"></a>Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки. Содержание прогексадиона-кальция в воде (мг/куб. дм), почве, плодах и соке яблок X (мг/кг) вычисляют по формуле:

                             S  x K x V
                              х           100
<a id="p100138"></a>                         X = ---------- x --- x F,
                                  P        f

<a id="p100139"></a>    где:
<a id="p100140"></a>    S  - площадь пика прогексадиона на хроматограмме  испытуемого  образца,
     х
(AU x с);
<a id="p100141"></a>    K  -  градуировочный   коэффициент,   найденный  на  стадии  построения
соответствующей градуировочной зависимости;
<a id="p100142"></a>    V  -  объем  пробы,  подготовленной  для  хроматографического  анализа,
куб. см;
<a id="p100143"></a>    P - навеска (объем воды) анализируемого образца, г (куб. см);
<a id="p100144"></a> f - полнота извлечения прогексадиона, приведенная в [табл. 2](#p100147), %;
<a id="p100145"></a>    F - фактор  пересчета  содержания  прогексадиона  в его кальциевую соль
(250,3 / 212,2 = 1,1795).

<a id="p100146"></a>Таблица 2

<div align="center">

<a id="p100147"></a>**ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ ПРОГЕКСАДИОНА, СТАНДАРТНОЕ ОТКЛОНЕНИЕ,**<br>
**ДОВЕРИТЕЛЬНЫЙ ИНТЕРВАЛ СРЕДНЕГО РЕЗУЛЬТАТА**

</div>

ДЛЯ n = 20, P = 0,95


| Анализируемый объект | Предел обнаружения, мг/кг, мг/куб. дм | Диапазон определяемых концентраций, мг/кг | Среднее значение определения, % | Стандартное отклонение, S | Доверительный интервал среднего результата, +/- % |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| Вода | 0,001 | 0,001 - 0,01 | 89,9 | 4,61 | 2,17 |
| Почва | 0,01 | 0,01 - 0,1 | 93,6 | 7,85 | 3,69 |
| Плоды яблок | 0,01 | 0,01 - 0,1 | 88,95 | 9,03 | 4,24 |
| Сок яблок | 0,01 | 0,01 - 0,1 | 91,6 | 6,73 | 3,16 |


<a id="p100153"></a>Содержание остаточных количеств прогексадиона-кальция в образце вычисляют как среднее из двух параллельных определений.
<a id="p100154"></a>Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор прогексадиона с концентрацией 1,0 мкг/куб. см, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.


## 11. <a id="p100155"></a>Проверка приемлемости результатов параллельных определений


<a id="p100156"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

                        2 x |X  - X | x 100
                              1    2
<a id="p100157"></a>                        ------------------- <= r,
                             (X  + X )
                               1    2

<a id="p100158"></a>    где:
<a id="p100159"></a>    X , X  - результаты параллельных определений, мг/кг (мг/куб. дм);
     1   2
<a id="p100160"></a>    r - значение предела повторяемости (r = 2,8 сигма ).
                                                     r
<a id="p100161"></a> При невыполнении [условия (1)](#p100157) выясняют причины превышения предела
повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


## 12. <a id="p100162"></a>Оформление результатов


<a id="p100163"></a>    Результат анализа представляют в виде:

<a id="p100164"></a>                 (X +/- ДЕЛЬТА) при вероятности P = 0,95,

<a id="p100165"></a>    где:
<a id="p100166"></a>    X  -  среднее  арифметическое   результатов   определений,   признанных
приемлемыми, мг/кг (мг/куб. дм);
<a id="p100167"></a>    ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг (мг/куб. дм):

                                    дельта x X
<a id="p100168"></a>                           ДЕЛЬТА = ----------,
                                       100

<a id="p100169"></a>    где  дельта - граница  относительной  погрешности  методики (показатель
точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
<a id="p100170"></a>    В  случае  если  содержание  компонента  менее нижней границы диапазона
определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100171"></a>    содержание   вещества   в  пробе  "менее  нижней  границы  определения"
(например:  содержание  прогексадиона-кальция  в  пробе  воды  менее  0,001
мг/куб. дм, почве, плодах и соке яблок - 0,01 мг/кг <*>).
    --------------------------------
<a id="p100172"></a>    <*>  0,001  мг/куб.  дм   и   0,01  мг/кг    -    предел    обнаружения
прогексадиона-кальция в воде и почве, плодах, соке яблок, соответственно.


## 13. <a id="p100173"></a>Контроль качества результатов измерений


<a id="p100174"></a>    Оперативный   контроль   погрешности   и   воспроизводимости  измерений
осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность
(правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

#### <a id="p100175"></a>13.1 Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением

измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

#### <a id="p100176"></a>13.2 Плановый   внутрилабораторный  оперативный  контроль  процедуры

выполнения анализа проводится с применением метода добавок.
<a id="p100177"></a>    Величина добавки C  должна удовлетворять условию:
                      д

<a id="p100178"></a>                        C  = ДЕЛЬТА    + ДЕЛЬТА    ,
                         д         л,X         л,X'

<a id="p100179"></a>    где   +/- ДЕЛЬТА    (+/- ДЕЛЬТА    )   -   характеристика   погрешности
                    л,X            л,X'
(абсолютная погрешность)  результатов анализа,  соответствующая  содержанию
компонента в испытуемом образце  (расчетному значению содержания компонента
в образце с добавкой, соответственно), мг/кг (мг/куб. дм); при этом:

<a id="p100180"></a>                        ДЕЛЬТА  = +/- 0,84 ДЕЛЬТА,
                              л

<a id="p100181"></a>    где ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг (мг/куб. дм):

                                    дельта x X
<a id="p100182"></a>                           ДЕЛЬТА = ----------,
                                       100

<a id="p100183"></a>    где  дельта - граница  относительной  погрешности  методики (показатель
точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
<a id="p100184"></a>    Результат контроля процедуры K  рассчитывают по формуле:
                                  к

<a id="p100185"></a>                             K  = X' - X - C ,
                              к             д

<a id="p100186"></a>    где  X',  X,  C   -  среднее  арифметическое  результатов  параллельных
                   д
определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100155)) содержания компонента в
образце   с    добавкой,   испытуемом   образце,   концентрация    добавки,
соответственно, мг/кг (мг/куб. дм).
<a id="p100187"></a>    Норматив контроля K рассчитывают по формуле:

                             _____________________
                            /     2            2
<a id="p100188"></a>                      K = \/ДЕЛЬТА     + ДЕЛЬТА   .                     (1)
                                  л,X'         л,X

<a id="p100189"></a>    Проводят  сопоставление результата контроля процедуры (K ) с нормативом
                                                            к
контроля (K).
<a id="p100190"></a>    Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

<a id="p100191"></a>                                |K | <= K,                              (2)
                                  к

процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100192"></a> При невыполнении [условия (2)](#p100191) процедуру контроля повторяют. При
повторном   невыполнении   условия   (2)  выясняют  причины,  приводящие  к
неудовлетворительным результатам, и принимают меры к их устранению.

#### <a id="p100193"></a>13.3 Проверка   приемлемости  результатов  измерений,  полученных  в

условиях воспроизводимости.
<a id="p100194"></a>    Расхождение  между  результатами  измерений,  выполненных в двух разных
лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

                        2 x |X  - X | x 100
                              1    2
<a id="p100195"></a>                        ------------------- <= R,                       (3)
                             (X  - X )
                               1    2

<a id="p100196"></a>    где:
<a id="p100197"></a>    X  и X   - результаты  измерений  в  двух  разных  лабораториях,  мг/кг
     1    2
(мг/ куб. дм);
<a id="p100198"></a>    R  -  предел    воспроизводимости    (в   соответствии   с   диапазоном

<div align="center">

концентраций), %.

</div>



## 14. <a id="p100199"></a>Разработчики


<a id="p100200"></a>ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений Россельхозакадемии, Санкт-Петербург.

<a id="p100201"></a>Методика прошла метрологическую экспертизу (Свидетельство об аттестации N 01.5.04.694) и внесена в Федеральный реестр МВИ (ФР.1.31.2011.09109).



<a id="p100202"></a>

---